Method Article

Niet-invasieve 3D-visualisatie met Sub-micron resolutie met behulp van synchrotronstraling-X-ray-tomografie

DOI:

10.3791/737

May 27th, 2008

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

We gebruikten synchrotron X-ray tomografie bij de European Synchrotron Radiation Facility (ESRF) naar niet-invasieve 3D tomografie datasets te produceren met een pixel-resolutie van 0.7μm. Met behulp van volume rendering software, dit maakt de reconstructie van de interne structuren in hun natuurlijke staat, zonder de artefacten die door histologische coupes.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Er is weinig bekend over de interne organisatie van een groot aantal micro-arthropoden met het lichaam maten hieronder 1 mm. De redenen daarvoor zijn de geringe omvang en de harde cuticula waardoor het moeilijk te gebruiken protocollen van de klassieke histologie. Daarnaast, histologische coupes vernietigt het monster en kan dus niet worden gebruikt voor uniek materiaal. Vandaar dat een niet-destructieve methode is wenselijk dat het mogelijk maakt om in kleine voorbeelden te bekijken zonder de noodzaak van snijden.

We gebruikten synchrotron X-ray tomografie bij de European Synchrotron Radiation Facility (ESRF) in Grenoble (Frankrijk) naar niet-invasieve 3D tomografie datasets te produceren met een pixel-resolutie van 0.7μm. Met behulp van volume rendering software, dit laat ons toe om de interne organisatie in zijn natuurlijke staat te reconstrueren zonder dat de artefacten die door histologische coupes. Deze datum kan worden gebruikt voor de kwantitatieve morfologie, monumenten of voor de visualisatie van geanimeerde filmpjes om de structuur van verborgen lichaamsdelen te begrijpen en aan te vullen orgaansystemen of weefsels te volgen via de monsters.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dieren die gebruikt worden in deze studie

Exemplaren van de parthenogenetische oribatid mijt Archegozetes longisetosus (Acari, Oribatida) werden genomen van ons laboratorium cultuur. De cultuur groeit op een gips / houtskool mix (09:01) in plastic potjes, in constante donker bij 20-23 ° C met ongeveer 90% van de luchtvochtigheid.

Monstervoorbereiding

  1. Monsters werden genomen uit de cultuur, gereinigd met een fijn penseel en geplaatst in een 6:03:01 mengsel van 80% ethanol, 35% formaldehyde en 100% azijnzuur gedurende 24 uur.
  2. Daarna exemplaren werden gedehydrateerd in een ethanolreeks van 70%,....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

In deze presentatie hebben we ons gericht op de 3D-visualisatie van de interne anatomie van een chelicerate micro-geleedpotigen. Het synchrotron X-ray metingen laten een pixel-resolutie van beneden naar 0.3μm, afhankelijk van de grootte van de steekproef. Hier hebben we laten zien data met 0.7μm pixel-resolutie. In het algemeen kan synchrotron X-ray tomografie nuttig zijn voor het analyseren van kleine biologische materialen (of weefsels) met een lage X-ray demping. De pixel resolutie bereikt bijna die van conventionele lichtmicroscopie. De.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wij danken Paavo Bergmann, Michael Laumann, en Sebastian Schmelzle voor hun hulp bij het ESRF. Dit werk werd ondersteund door de European Synchrotron Radiation Facility project SC-2127 via de toewijzing van de balk tijd.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Betz, O., Wegst, U., Weide, D., Heethoff, M., Helfen, L., Lee, W. -K., Cloetens, P. Imaging applications of synchrotron X-ray phase-contrast microtomography in biological morphology and biomaterial science. I. General aspects of the technique and its advantages in the analysis of millimetre-sized arthropod structure. J. Microscopy....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Synchrotron X ray Tomography3D VisualizationSub micron ResolutionMicro arthropod AnatomyNon invasive ImagingVolume RenderingFiji Studio MaxVirtual Cutting PlaneOrbited Mite AnatomyDigestive System Visualization

Related Articles