Verwijdering van vertaktte en cyclische verbindingen door ureadotatie voor U^k'₃₇ Paleothermometrie

1. Installatie en voorbereiding van materialen

1. Verkrijg een totaal lipidenextract (TLE) met behulp van een oplosmiddelextractiemethode (Sonicatie, Soxhlet of Accelerated Solvent Extraction (ASE)).
2. Koop de volgende materialen bij elke chemische retailer: gecombusteerde borosilicaat glazen pipetten en bulben; zuiver water; hexaan; Dichloormethaan (DCM); methanol; ureum.
   1. De reagentia moeten puur en vrij van koolwaterstoffen zijn. Als alternatief kan puur water in een laboratorium worden gemaakt met behulp van een waterzuiveringssysteem.
3. Verkrijg 4-mL borosilicaat glazen vials met PTFE-voering op de doppen.

2. Methoden

1. Maak een mengsel van 2:1 DCM:Hexaan (v:v).
   1. Meng in een Erlenmeyer kolf 200 mL DCM en 100 mL hexaan.
2. Maak een mengsel van ureum in methanol (100 mg/mL).
   1. Pour 300 mL methanol in een Erlenmeyer kolf.
   2. Voeg 300 mg ureum toe.
   3. Roer op een automatische roerplaat tot het ureum volledig is opgelost.
3. Begin met het droge monster in een 4-mL viaal.
4. Suspendeer het monster in 1,5 mL van een 2:1 mengsel van DCM:Hexaan (v:v).
   1. Als het monster niet volledig oplost, soniceer gedurende 5 min.
5. Voeg aan deze mengsel 1,5 mL ureum in methanol toe.
   1. Na deze toevoeging, let op het vormen van een witte neerslag. Dit geeft aan dat er ureumkristallen worden gevormd.
6. Droog de kristallen voorzichtig onder stikstof, met behulp van zachte warmte. Zorg ervoor dat alle oplosmiddel is verdampt voordat u doorgaat naar de volgende stap.
7. Spoel de kristallen 3x met ongeveer 1 mL hexaan. Verwijder het hexaan tussen elke spoeling met behulp van een glazen pipet om het over te brengen in een viaal gelabeld als "niet-additief."
8. Los de kristallen op in 2 mL zuiver water. Schud om volledige oplossing te garanderen.
9. Extraheer de waterige fase met hexaan door 1 mL toe te voegen en voorzichtig 5 s te schudden.
10. Laat het hexaan en water volledig scheiden voordat u ongeveer 75% van het hexaan verwijdert met behulp van een glazen pipet en overbrengt naar een viaal gelabeld als "additief."
11. Herhaal stap 2.10 twee keer.
12. Gooi het water en ureumoplossing in een geschikte afvalcontainer weg.