$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
De mogelijkheid om individuele onderzoeksdieren te identificeren is een essentieel aspect van wetenschappelijk recordbehoud en gegevensverzameling. Onderscheid tussen dieren zorgt ervoor dat het juiste onderwerp wordt gebruikt voor de beoogde experimentele procedure.
Ten eerste moeten dieren correct worden toegewezen aan hun respectievelijke kooien, en mannelijke en vrouwelijke knaagdieren moeten gescheiden worden ondergebracht.
Om dit te ondersteunen, moeten kookaarten duidelijk identificatiedetails documenteren, inclusief dier-ID, geslacht, stam en protocolinformatie, in overeenstemming met institutioneel goedgekeurde IACUC-richtlijnen.
Om nauwkeurige identificatie mogelijk te maken, worden verschillende methoden gebruikt, waaronder tatoeëren van de staart van volwassen knaagdieren, tenen van neonaten en volwassen tenen, subcutane microchip-plaatsingstechniek die gewoonlijk wordt uitgevoerd bij volwassen ratten, en tijdelijke identificatie met behulp van niet-toxische kleurstoffen.
Voordat we dieper ingaan op protocollen voor deze methoden, laten we de belangrijkste overwegingen, voordelen en nadelen van elk van deze technieken bekijken.
Tatoeëren van de staart is gunstig in veel onderzoeksprotocollen, zoals experimenten met MRI-beeldvorming of experimenten waarbij dieren genetisch vatbaar zijn voor huidaandoeningen, inclusief ulceratieve dermatitis.
Een ander voordeel van staarttatoeages is dat ze gemakkelijk kunnen worden gevisualiseerd zonder het dier handmatig te moeten vasthouden.
Bepaalde experimentele protocollen vereisen genotypering van neonaten al vanaf dag één, wat het essentieel maakt dat deze pups permanent worden geïdentificeerd. Het gebruik van tenen tatoeëren maakt het mogelijk om dergelijke dieren te identificeren totdat ze groot genoeg zijn voor oormerken of oorpunchen.
Hoewel voordelig, vereist het getraind personeel, geschikte apparatuur en technische vaardigheid, terwijl weefselbeschadiging en dierdiscomfort tot een minimum worden beperkt.
De volgende permanente identificatiemethode is microchippen. Hoewel het implanteren van microchips een relatief eenvoudig proces is, zijn er verschillende factoren die hun bruikbaarheid beperken.
Microchips zijn duur en zijn daarom niet ideaal voor het identificeren van grote aantallen dieren. Ook kunnen microchips niet worden gebruikt in experimenten met MRI.
Echter, als er een groep waardevolle dieren is, zoals fokdieren met unieke genetica die permanent moeten worden geïdentificeerd, kunnen microchips worden gebruikt.
De laatste methode is tijdelijke identificatie met niet-toxische markers. De niet-toxische markers zijn gemaakt voor het kleuren van het haar van onderzoeksdieren.
Deze methode is ideaal voor kortetermijnstudies die vereisen dat dieren slechts enkele uren of dagen worden geïdentificeerd, hoewel de kleurstoffen enkele weken zichtbaar kunnen blijven.
Sommige onderzoekers gebruiken deze markers in combinatie met andere identificatiemethoden om specifieke dieren in een groep gemakkelijk te spotten, om manipulatie te minimaliseren.
Laten we beginnen met de staarttatoeageprocedure. Hier zullen we de procedure demonstreren op volwassen muizen, maar hetzelfde kan worden toegepast op gespeende en volwassen ratten.
Om eventuele angst of stress voor de dieren te minimaliseren, moet staarttatoeëren in de procedureruimte worden uitgevoerd.
Voor het aanbrengen van de tatoeage, moet de muis worden vastgehouden. Om de stress te verminderen, kan dit worden uitgevoerd op een verdoofd dier in overeenstemming met de institutionele richtlijnen.
Vervolgens wordt de staart schoongemaakt met een kleine hoeveelheid verdunde weefselreiniger op een wattenstaafje. Deze stap is belangrijk om eventuele ophoping van schilfers en vuil te verwijderen die het tatoeageproces kunnen belemmeren.
Vervolgens wordt weefselolië op de staarthuid aangebracht met een andere wattenstaaf. Dit minimaliseert weefselschade door de huid te verzachten en smering voor de tatoenaald te bieden.
Bovendien lost de olie vuil op dat niet door het reinigingsproces is verwijderd en voorkomt het inktkleuring op de niet-getatoeëerde huid. Nu ben je klaar om de tatoeage aan te brengen.
Terwijl de machine is uitgeschakeld, dompelt u het uiteinde van de tatoenaald, dat een lancet of hypodermische naald is, in het pigment.
Activeer vervolgens de pistool met behulp van het voetpedaal, plaats het tatoeagegereedschap op de staart en breng het uiteinde van de naald naar de tatoeageplek.
Benader de huid met de naald in een hoek van 90 graden en dring diep genoeg door in de dermis zodat pigment permanent wordt afgezet. Een verandering in het geluid van de geactiveerde naald kan helpen om de diepte te onderscheiden.
Maak korte gelijkmatige streken in één richting, waarbij cijfers en letters worden gevormd. Probeer minimale bogen en hoeken te gebruiken bij het aanbrengen van de tatoeage.
Om extra pigment toe te voegen, dompelt u het uiteinde van de naald in het kleurstof reservoir voor elke één-twee tekens voor muizen en elke één teken voor ratten.
Dep het voltooide tatoeage met een papieren handdoek om overtollig pigment te verwijderen.
De aanwezigheid van bloed op de tatoeage of de papieren handdoek geeft aan dat de tatoeage te diep is gemaakt en daarom waarschijnlijk niet permanent zal zijn.
Versterk dunne tekens met extra pigment door de naald parallel te plaatsen, niet op, de reeds afgezet pigment.
Reiniging van het tatoeagemateriaal grondig na elk gebruik, en een nieuwe of gesteriliseerde naald en een verse voorraad inkt moeten worden gebruikt tussen de kooien om ziekteoverdracht te voorkomen.
Om tenen tatoeages toe te passen op neonaten en volwassenen, zullen we de procedure bij muizen demonstreren, maar dezelfde stappen zijn van toepassing op ratten.
Deze procedure moet worden uitgevoerd in overeenstemming met institutioneel goedgekeurde protocollen en door getraind personeel.
De neonaten worden op hun tenen getatoeëerd omdat de staartwervels niet zijn verstevigd en de lengte van de staart te