Alle hier beschreven dierproeven moeten worden uitgevoerd in overeenstemming met institutionele richtlijnen voor dierenetiek en goedgekeurd door IACUC. Alle procedures moeten de principes van de 3R's—Vervanging, Reductie en Verfijning—volgen en moeten worden uitgevoerd door getraind personeel.
1. Injectie in de voetzool

Figuur 1. Injectie in de voetzool bij muizen en ratten.
Belangrijke termen en definities
Injecties in de voetzool moeten wetenschappelijk worden gerechtvaardigd, aangezien ze een gewichtdragend oppervlak betreffen en de mobiliteit kunnen beïnvloeden. Alternatief, worden enkelinjecties in het tarsale gebied vaak geprefereerd omdat ze de popliteale lymfeklieren targeten terwijl pijn wordt geminimaliseerd en mobiliteit wordt behouden in vergelijking met voetzoolinjecties. Ondanks de controverse, is het gebruik van de voetzool als injectieplaats nog steeds vereist voor sommige onderzoeken. Het is aangetoond dat wanneer geïnjecteerd via de voetzool, de antilichaamrespons bij sommige muizenstammen significant sterker was dan wanneer geïnjecteerd in de enkel. Alle dieren moeten nauwlettend worden gecontroleerd op tekenen van pijn, voedselconsumptieniveau en normale beweging. Zelfverminking van de voet kan optreden tot het punt dat de voet wordt vernietigd. Dit is een teken van chronische pijn. Elk dier dat zelfverminking vertoont, moet onmiddellijk aan de aandacht van het veterinaire personeel worden gebracht.
Voetzoolmetingen moeten dagelijks worden uitgevoerd zodra duidelijke zwelling is opgetreden. Er moeten eindpunten zijn volgens de IACUC-richtlijnen. Over het algemeen moet het dier worden geëuthanaseerd wanneer de lesie of tumor de ambulatorische capaciteit van het dier of het bereiken van voedsel en water verstoort. Het maximale volume dat in een voetzool kan worden geïnjecteerd is 50 µL. Een naald van 29-30 gauge wordt aanbevolen voor de injectie.
Vragen die dit video helpt beantwoorden
De toediening van verbindingen aan dieren kan een aanzienlijk effect hebben op zowel het welzijn van het dier als het resultaat van de experimentele gegevens en de wetenschappelijke waarde. De juiste wijze van toediening is essentieel voor het succes van het experiment. Er moeten veel factoren worden overwogen om de beste route te bepalen, inclusief het wetenschappelijke doel van het onderzoek, de pH van de substantie, het vereiste doseringsvolume, de viscositeit van de substantie en het welzijn van de dieren. Technische expertise is ook een vereiste voor alle injectiemethoden.
Bron: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universiteit van Notre Dame, IN
Er zijn veel veelgebruikte routes voor toedieni…
Alle hier beschreven dierproeven moeten worden uitgevoerd in overeenstemming met institutionele richtlijnen voor dierenetiek en goedgekeurd door IACUC. Alle procedures moeten de principes van de 3R's—Vervanging, Reductie en Verfijning—volgen en moeten worden uitgevoerd door getraind personeel.
1. Injectie in de voetzool

Figuur 1. Injectie in de voetzool bij muizen en ratten.
Belangrijke termen en definities
Injecties in de voetzool moeten wetenschappelijk worden gerechtvaardigd, aangezien ze een gewichtdragend oppervlak betreffen en de mobiliteit kunnen beïnvloeden. Alternatief, worden enkelinjecties in het tarsale gebied vaak geprefereerd omdat ze de popliteale lymfeklieren targeten terwijl pijn wordt geminimaliseerd en mobiliteit wordt behouden in vergelijking met voetzoolinjecties. Ondanks de controverse, is het gebruik van de voetzool als injectieplaats nog steeds vereist voor sommige onderzoeken. Het is aangetoond dat wanneer geïnjecteerd via de voetzool, de antilichaamrespons bij sommige muizenstammen significant sterker was dan wanneer geïnjecteerd in de enkel. Alle dieren moeten nauwlettend worden gecontroleerd op tekenen van pijn, voedselconsumptieniveau en normale beweging. Zelfverminking van de voet kan optreden tot het punt dat de voet wordt vernietigd. Dit is een teken van chronische pijn. Elk dier dat zelfverminking vertoont, moet onmiddellijk aan de aandacht van het veterinaire personeel worden gebracht.
Voetzoolmetingen moeten dagelijks worden uitgevoerd zodra duidelijke zwelling is opgetreden. Er moeten eindpunten zijn volgens de IACUC-richtlijnen. Over het algemeen moet het dier worden geëuthanaseerd wanneer de lesie of tumor de ambulatorische capaciteit van het dier of het bereiken van voedsel en water verstoort. Het maximale volume dat in een voetzool kan worden geïnjecteerd is 50 µL. Een naald van 29-30 gauge wordt aanbevolen voor de injectie.
Vragen die dit video helpt beantwoorden
De toediening van verbindingen aan dieren kan een aanzienlijk effect hebben op zowel het welzijn van het dier als het resultaat van de experimentele gegevens en de wetenschappelijke waarde. De juiste wijze van toediening is essentieel voor het succes van het experiment. Er moeten veel factoren worden overwogen om de beste route te bepalen, inclusief het wetenschappelijke doel van het onderzoek, de pH van de substantie, het vereiste doseringsvolume, de viscositeit van de substantie en het welzijn van de dieren. Technische expertise is ook een vereiste voor alle injectiemethoden.
Footpad is een van de gespecialiseerde injectiemethoden die biomedisch onderzoekers gebruiken voor experimenten die de toediening van verbindingen via deze atypische routes vereisen.
Een footpad-injectie omvat subcutane toediening van de verbinding in de achterpoot van het dier. Deze video zal de overwegingen, procedures en toepassingen van deze speciale injectietechniek illustreren.
Footpad-injectie wordt gebruikt in bepaalde studies, vooral diegene die betrekking hebben op ontsteking en tumorgroei. Merk op dat injecties alleen op één poot mogen worden uitgevoerd en nooit bilateraal.
Alternatief worden ook wel hock-injecties toegediend in de tarsale regio, die vaak worden voorgetrokken, omdat ze de popliteale lymfeklieren targeten terwijl ze pijn minimaliseren en mobiliteit behouden in vergelijking met footpad-injecties.
Footpad-injectie wordt geassocieerd met verhoogde ongemak, omdat het een gewichtdragend oppervlak betreft en kan invloed hebben op normale ambulatie.
Footpad-metingen moeten dagelijks worden gedaan zodra duidelijke zwelling optreedt.
Daarom moet deze techniek alleen worden uitgevoerd wanneer wetenschappelijk gerechtvaardigd en wanneer alternatieve benaderingen niet geschikt zijn voor de experimentele doelstellingen.
Een naald van 27 gauge of kleine gauge wordt aanbevolen voor de injectie, en het aanbevolen maximumvolume is 50 microliter of zoals gespecificeerd in IACUC-goedgekeurde institutionele richtlijnen.
Na elke injectie moeten alle dieren nauwlettend worden gecontroleerd op tekenen van pijn, voedselconsumptieniveau en normale ambulatie.
Humane eindpunten moeten worden vastgesteld om ervoor te zorgen dat dieren worden geëuthanaseerd voordat mobiliteit significant wordt belemmerd of toegang tot voedsel en water wordt beperkt.
Laten we deze injectieprocedure bij muizen en ratten leren. Bevestig de juiste naald en vul de spuit met het juiste volume. Deze procedure kan worden uitgevoerd bij bij bewustzijn zijnde dieren.
Plaats het dier in een beperkingsbuis met één achterpoot geïsoleerd en verlengd door de huid boven de knieschijf vast te grijpen.
Veeg de poot af met water of alcohol om puin te verwijderen voor de injectie.
Om de bloedvaten die over de lengte van de poot lopen te vermijden, bevindt de injectiemarkering zich in het centrum, maar iets buiten de middellijn, dichter bij de tenen.
Plaats de naald met de snijrand omhoog op de injectieplaats en richt deze richting de hiel.
Injecteer de verbinding langzaam en gestaag om snelle uitzetting van de voetweefsels te voorkomen. Dit zal ervoor zorgen dat de voetkussen zwelt terwijl het geïnjecteerde materiaal de subcutane ruimte vult.
In de poot van een klein dier kan de zwelling van de injectie zich uitstrekken tot de hiel, terwijl bij een groter dier deze meer gelokaliseerd zal zijn.
Na de injectie, observeer de dieren dagelijks, en als er aanhoudende zwelling aanwezig is of als er laesies of tumoren zijn als resultaat van het experimentele protocol, dan voer, met behulp van een calliper, de voetkussennameting uit.
Dit instrument meet de dikte van de voet in millimeters en helpt bij de kwantificering van zwelling.
Laten we nu een paar voorbeeldexperimenten bespreken die footpad-injecties gebruiken.
Onderzoekers gebruiken vaak footpad-injectie om ontstekingsreacties te analyseren. In dit experiment isoleerd onderzoekers perifere bloedmononucleaire cellen uit menselijke bloedmonsters, mengden ze deze met verschillende testantigenen en injecteerden de oplossingen in de voetkussen van een dier.
Ten slotte, maten ze de voetdikte om de zwelingsreactie te kwantificeren vanwege verschillende antigenen.
Je hebt zojuist de laatste aflevering van JoVE bekeken over de gebruikelijke en gespecialiseerde toedieningstechnieken van verbindingen.
Om samen te vatten, in het eerste deel bespraken we de meest gebruikelijke parenterale routes. In het tweede hoofdstuk bespraken we de enterale en topische procedures. Het derde deel behandelde de eerste set atypische procedures, zoals intradermale, intranasale en intracraniale toediening bij neonaten.
Ten slotte, bespraken we hier een extra atypische route die biomedisch onderzoekers in laboratoria gebruiken voor specifieke doeleinden.
Na het bekijken van deze serie, zou je een veel beter begrip moeten hebben van verschillende toedieningstechnieken, en zou je ook de algemene en specifieke overwegingen moeten kennen die verband houden met deze protocollen voor toediening van verbindingen.
Wanneer wetenschappelijk gepast, moeten niet-dierlijke methoden, inclusief op cellen gebaseerde modellen, organoïden, organ-on-chip platforms en andere in vitro-tests, worden gebruikt om het gebruik van dieren in studies met toediening van verbindingen te verminderen of te vervangen.
View the full transcript and gain access to JoVE Science Education videos
Chapters in this video
0:00
Overview
0:44
Considerations for the Specialized Injections
2:16
Footpad Injection
3:42
Application
4:16
Summary
Videos from this collection: