Compound Administration III

Soms vereisen verschillende experimentele benaderingen het gebruik van minder vaak gebruikte routes voor het toedienen van stoffen bij knaagdieren. Intradermaal, intranasaal en intracraniaal zijn drie van deze alternatieve routes die biomedische onderzoekers vandaag de dag in laboratoria gebruiken.
Zoals de naam al doet vermoeden, brengt intradermaal stoffen aan in de buitenste lagen van de dermis. Intranasaal betekent het plaatsen van de oplossing in de neusgaten van het dier. Intracraniaal houdt in dat de naald direct in de hersenen van het knaagdier wordt gestoken.
Gespecialiseerde training is essentieel om deze procedures met succes uit te voeren. Hier zullen we eerst de overwegingen voor elk van deze methoden illustreren, en vervolgens zullen we de technieken demonstreren die u helpen de procedures te leren, terwijl u de veiligheid van het dier en het succes van het experiment waarborgt.
Laten we beginnen met een discussie over wanneer deze routes worden gebruikt en wat u moet overwegen voordat u begint met het uitvoeren van deze gespecialiseerde toedieningstechnieken.
Intradermale injecties worden gebruikt om een artikel in de ruimte tussen de epidermis en de dermis af te geven.
Deze route wordt meestal gereserveerd voor de beoordeling van ontstekingen, diagnostische tests van de huidbloedstroom of allergene reacties op een antigeen.
Net als bij andere routes, moet de intradermale oplossing ook worden bereid volgens de steriele techniek. En het moet fysiologisch worden gebufferd tot een neutrale pH om weefselnecrose op de injectieplaats te voorkomen.
Een hub-less systeem met een 25-27-gauge naald wordt vaak gebruikt voor deze injectie, of volgens institutionele richtlijnen.
Dit systeem helpt bij het behoud van het volume van toediening, dat in het bereik van 50-100 microliters per injectieplaats ligt, of volgens institutionele richtlijnen. Injecteren van overtollig kan resulteren in necrose of ongewenste lekkage van de verbinding door druk.
De intranasale route wordt vaak gekozen voor lokale toediening van vaccins of ontsmettende spray, evenals voor systemische en centrale zenuwstelselstelsel of CZS-toediening.
Het slijmvlies dat de neusholte bekleedt, heeft een rijke toevoer van bloedvaten en zenuwen die snelle systemische absorptie en directe targeting naar het CZS mogelijk maken.
Dit is een niet-invasieve methode die minimale training en vaardigheid vereist, en eenvoudige apparatuur - een gekalibreerd micropipet en enkele wegwerptips.
De toedieningsvolumes voor ratten mogen niet meer dan 50 microliters bedragen. En voor muizen is het maximale totale volume minder dan 20 microliters.
Hoewel anesthesie niet vereist is voor deze procedure, heeft het enkele voordelen boven intranasale toediening bij bij bewustzijn zijnde dieren 1) het vergemakkelijkt de juiste plaatsing van de verbinding bij de neusgaten, waardoor nauwkeurige dosering wordt gegarandeerd 2) elimineert de mogelijkheid dat het dier de doseringsapparatuur bijt 3) zorgt ervoor dat er geen verwondingen zijn aan de nasale weefsels, ogen of gezichtshuid van het dier als gevolg van hoofdschok, en 4) het dier is minder geneigd om te snuiven en de verbinding uit de neusgaten te spuiten na toediening.
Intracraniale injecties bij volwassen muizen en ratten maken gebruik van stereotactische apparatuur, die wordt beschreven in een video in de verzameling 'Essentials of Neuroscience'. De apparatuur zorgt voor de juiste positionering en de juiste diepte van injectie.
Hier zullen we ons concentreren op intracraniale toediening bij neonatale muizen en ratten, bij wie de schedel dun genoeg is om direct doorheen te injecteren, en mogelijk te kwetsbaar om het stereotactische apparaat te ondersteunen.
De primaire doelen van deze techniek zijn om CZS-farmacologische agentia direct in het CZS te brengen en de effecten te vermijden die via een systemische route worden aangetroffen.
Injectiecoördinaten moeten worden gevalideerd voor de doelstructuur, soort, leeftijd en lichaamsgrootte, en moeten overeenkomen met het goedgekeurde protocol of de stereotactische/neonatale atlasmethode die door het laboratorium wordt gebruikt.
Met deze achtergrondinformatie in gedachten, laten we ons verdiepen in de procedures van deze injectiemethoden.
Eerst komt de intradermale toedieningstechniek. Deze procedure moet worden uitgevoerd bij geanesthetiseerde dieren.
Bekijk een andere video in deze verzameling om de procedures voor anesthesie-inductie en -onderhoud te begrijpen.
Zodra het dier is geanesthetiseerd, scheer het injectieplaatsje met een elektrische scheerapparaat of een ontharingscreme. Verwijder met een met water bevochtigde gaaswond grondig het achtergebleven haar van de plaats.
Breng vervolgens met een ander gaaspad een topische antisepticum oplossing aan op het geschoren gebied.
Stabiliseer voor de toediening eerst de huid op de injectieplaats door deze tussen uw duim en wijsvinger uit te rekken.
Gebruik een voor het soort geschikte naald en het kleinst mogelijke intradermale volume.
Plaats nu de naaldbevel omhoog op de huid en steek deze voorzichtig in net voorbij de bevel zodat de opening tussen de epidermis en de dermis lagen ligt.
Injecteer vervolgens langzaam en merk op dat het een blaasje in de huid creëert. Als de naald te diep is ingebracht, wordt er geen blaasje gevormd.
Pauzeer na het injecteren om de huid te laten strekken en aanpassen, en trek vervolgens de naald langzaam terug. Trek op geen enkel moment terug aan de plunjer, omdat u anders weefsel zou opzuigen en trauma op de injectieplaats veroorzaken.
Veeg of dep ook niet op de injectieplaats, omdat dit kan leiden tot lekkage van de geïnjecteerde stof. Wanneer u meerdere injecties uitvoert, zorg er dan voor dat u ze voldoende uit elkaar plaatst, zodat de blaasjes elkaar niet overlappen.
Laten we vervolgens de intranasale toedieningsprocedure leren bij bewuste en geanesthetiseerde dieren.
Voor wakkere dieren, houd ze vast door de huid bij de nek vast te grijpen en houd het dier vervolgens in een verticale positie met zijn hoofd geïmmobiliseerd.
Pas op dat u de borst niet beperkt, omdat dit de mogelijkheid van het dier om voldoende diepe ademhalingen te nemen om de vloeistof