Compound Administration III

Alle hier beschreven dierproeven moeten worden uitgevoerd in overeenstemming met institutionele richtlijnen voor dierenetiek en goedgekeurd door IACUC. Alle procedures moeten volgen aan de principes van de 3R's - Vervanging, Reductie en Verfijning - en moeten worden uitgevoerd door getraind personeel.

1. Intradermale toediening

1. De meeste intradermale injecties zijn op water gebaseerde verbindingen. De oplossingen moeten fysiologisch worden gebufferd om een neutrale pH te hebben, om weefselnecrose op de injectieplaats te voorkomen.
2. Het spoorformaat varieert van 25-27 gauge, de kleinst mogelijke.
3. Het dosisbereik per injectieplaats is 50-100 µL. Het injecteren van overmatige volumes kan resulteren in necrose op de injectieplaats of lekkage van de verbinding uit de plaats als gevolg van druk.
4. Voor een nauwkeurige plaatsing van de naald in de intradermale ruimte, is het noodzakelijk om zowel muizen als ratten te anesthetiseren. Inhalatieanesthesie zorgt voor een snelle inductie en herstel; injectable anesthesie heeft echter het voordeel dat het voldoende tijd biedt voor voorbereiding van het gebied en het uitvoeren van de injectie.
5. Verwijder het haar op de injectieplaats door een ontharingscrème te gebruiken of door het gebied te scheren.
6. Verwijder grondig alle resten van ontharingscrème of haardeeltjes.
7. Breng een topisch antisepticum aan, zoals een jodiumoplossing, chloorhexidine-oplossing of alcohol.
8. Toedieningsprocedures
   1. Span de huid strak tussen de duim en wijsvinger. Dit zorgt voor stabiliteit van de huid bij het positioneren van de naald.
   2. Plaats de naald met de snijrand omhoog op de huid.
   3. Breng de naald voorzichtig in de huid tussen de epidermis en dermis in. Breng de naald net voorbij de snijrand naar binnen.
   4. Injecteer de substantie langzaam. Injectie van de verbinding zal een blaasje, of kleine blaar, in de huid creëren.
   5. Pauzeer na de injectie om de huid te laten strekken en aanpassen voordat de naald wordt teruggetrokken.
9. Voorzorgsmaatregelen
   1. Het terugtrekken van de plunjer is niet nodig.
   2. Als de naald in de onderhuidse ruimte wordt ingebracht, wordt er geen blaasje gevormd. Te diep injecteren resulteert in een onderhuidse injectie.
   3. Vermijd het doppen of afvegen van het gebied, omdat dit kan veroorzaken dat de verbinding uit de injectieplaats lekt.
   4. Bij het uitvoeren van meerdere injecties, verdeel deze zodat de blaasjes elkaar niet overlappen.

Figuur 1. Intradermale injectie bij muizen.

2. Intranasale toediening

1. Uitrusting
   1. Gebruik een micropipetteringseenheid pipet die kan worden gekalibreerd om een nauwkeurig volume te leveren.
   2. Gebruik wegwerp pipettentips om kruisbesmetting te voorkomen. TB-spuiten, stompe naalden en flexibele slangen kunnen ook worden gebruikt voor dosering.
   3. Totale injectievolumes voor ratten mogen niet meer dan 50 µL bedragen. Voor muizen is het maximale totale volume minder dan 20 µL.
2. Toediening bij bij bewustzijn zijnde dieren
   1. Manuele beperking bij bij bewustzijn zijnde dieren vereist dat het hoofd relatief onbeweeglijk is, zodat de pipettip of stompe naald dicht genoeg bij de neusgaten kan worden geplaatst om de verbinding te leveren, maar niet zo dicht dat de nasaalweefsel wordt geprikt of gescheurd.
   2. Beperk het dier en houd het in een verticale positie.
   3. Plaats een kleine druppel van een vloeibare verbinding bij de neusopening. Het dier zou de druppel moeten inademen.
   4. Breng een extra volume toe, afwisselend neusgaten totdat het hele volume is gegeven.
   5. Bij het toedienen van grotere volumes is het belangrijk om de borst niet te beperken tijdens de beperking. Borstcompressie belemmert het vermogen van het dier om voldoende diepe ademhalingen te nemen om de vloeistof in de bronchiën en longen te trekken.

Figuur 2. Intranasale toediening bij bij bewustzijn zijnde muizen.

3. Toediening bij onbewuste dieren
   1. Anesthetiseer het dier met behulp van het juiste protocol voor deze procedure, omdat inhalatieanesthesie nauwkeurige timing vereist en mogelijk tijdens de levering moet worden aangepast. Het gebruik van inhalatieanesthetica zorgt voor een geïmmobiliseerd dier tijdens de nadering en levering van de verbinding. Dit elimineert de mogelijkheid dat het dier in de doseringsapparatuur bijt, het verlies van de verbinding door het schokken van het hoofd en letsel aan het neusweefsel, ogen of gezichtshuid van het dier. Het dier is ook minder geneigd om te snuiven en de verbinding uit de neusgaten te spuiten bij toediening.
   2. Plaats het dier in de rugligging. De houding van het hoofd beïnvloedt de plaatsing van de oplossing in de neusgaten. Er is aangetoond dat de ideale positie voor CNS-levering is met het dier in rugligging; dit zorgt voor een betere absorptie.
   3. Breng de helft van de verbinding direct in één zijde van de neusopening aan, gelijktijdig met inademing. Draai vervolgens het dier om.
   4. Zoals hierboven, breng de andere helft van het volume in de andere neusopening aan.