1. Algemeen protocol voor veilig centrifuge-gebruik
2. Aanvullende voorzorgsmaatregelen bij het hanteren van gevaarlijke chemicaliën of besmettelijke materialen
3. Noodsituaties en hun veiligheidsmaatregelen
Een noodsituatie kan zich voordoen als de rotor defect raakt of als er een lekkage in de centrifuge optreedt als gevolg van breuk van een buis of onjuist gebruik. In dergelijke situaties moeten de volgende stappen worden ondernomen.
4. Onderhoud van de centrifuge
OPMERKING: De behuizing van de centrifuge is meestal gemaakt van metalen die kunnen corroderen in aanwezigheid van vocht, chemicaliën of sterke reinigingsmiddelen. Voor goed onderhoud van de centrifuge is het aan te raden om de instructies van de fabrikant voor reiniging en onderhoud zorgvuldig op te volgen. Behalve dat, zijn er enkele algemene maatregelen voor onderhoud waarmee rekening moet worden gehouden, zoals hieronder.
Bron: Robert M. Rioux & Suprita Jharimune, Pennsylvania State University, University Park, PA
De zwaartekracht van de aarde is in staat om heterogene…
1. Algemeen protocol voor veilig centrifuge-gebruik
2. Aanvullende voorzorgsmaatregelen bij het hanteren van gevaarlijke chemicaliën of besmettelijke materialen
3. Noodsituaties en hun veiligheidsmaatregelen
Een noodsituatie kan zich voordoen als de rotor defect raakt of als er een lekkage in de centrifuge optreedt als gevolg van breuk van een buis of onjuist gebruik. In dergelijke situaties moeten de volgende stappen worden ondernomen.
4. Onderhoud van de centrifuge
OPMERKING: De behuizing van de centrifuge is meestal gemaakt van metalen die kunnen corroderen in aanwezigheid van vocht, chemicaliën of sterke reinigingsmiddelen. Voor goed onderhoud van de centrifuge is het aan te raden om de instructies van de fabrikant voor reiniging en onderhoud zorgvuldig op te volgen. Behalve dat, zijn er enkele algemene maatregelen voor onderhoud waarmee rekening moet worden gehouden, zoals hieronder.
Centrifugeren is een van de krachtigste hulpmiddelen die in laboratoria worden gebruikt voor het scheiden van heterogene mengsels, maar het kan gevaarlijk zijn en daarom moeten veiligheidsmaatregelen worden toegepast.?
Een centrifuge draait snel monsters om heterogene materialen te scheiden, wat extreme centrifugale krachten op de monsters en het instrument veroorzaakt. Vanwege de hoge snelheid waarmee een centrifuge werkt, kan het ernstig letsel bij de gebruiker veroorzaken als het verkeerd wordt gehanteerd. Daarom moet er speciale zorg worden genomen bij het gebruik van een centrifuge om morsen en schade aan het apparaat te voorkomen.?
Deze video zal het mechanisme van een centrifuge illustreren en hoe je er veilig mee kunt werken en het onderhoud ervan kunt uitvoeren.
Voordat we ingaan op de details van de veiligheidsmaatregelen, laten we snel de basisprincipes van centrifugatie bekijken. Centrifuges bevatten een rotor die op een ashuis is geplaatst. Op een enkele as kunnen meestal rotors van verschillende grootte worden gemonteerd om verschillende monsterflessen, buizen of zakken te bergen. Een motor draait de rotor met een bepaald aantal RPM of omwentelingen per minuut. Dit brengt op zijn beurt de centrifugale kracht over op het heterogene mengsel, gericht weg van de rotatieas, wat deeltjes met verschillende dichtheden scheidt.
Verschillende soorten centrifuges werken op verschillende RPM's. Lage-snelheidscentrifuges draaien met minder dan 10.000 RPM, hoge-snelheid tot 21.000 en ultracentrifuges tot 30.000 en hoger. Elk type heeft verschillende rotors die ermee compatibel zijn. Na de draai wordt de rotor meestal afgeremd. In elke centrifuge vervormt hoge snelheid de rotor.
Bij normaal gebruik zal het terugkeren naar zijn vorige grootte. Als de kracht van het draaien echter de maximale kracht die de rotor aankan overschrijdt, kan deze permanent vervormd raken. Dit kan leiden tot scheuren, wat op zijn beurt tot ernstige storingen kan leiden. Centrifuge-storingen kunnen aan de andere kant leiden tot het lekken van monsters, wat gevaarlijk kan zijn als er gevaarlijke materialen bij betrokken zijn en dient voorzichtig te worden behandeld. Nu laten we u zien hoe u monsters voorbereidt en veilig gebruikt in de centrifuge.
Selecteer eerst geschikte centrifugebuizen die compatibel zijn met de rotatiesnelheden die u wilt gebruiken. Bekijk de documentatie om de limieten van de buis te achterhalen. Buizen moeten intact zijn en vrij van scheuren. Vul ze tot maximaal 3/4 om morsen te voorkomen. Zorg er vervolgens voor dat de buizen uitgebalanceerd zijn en sluit ze goed af.
Neem speciale voorzorgsmaatregelen bij het centrifugeren van gevaarlijke chemische of biologische monsters. Draag geschikte beschermende uitrusting en bereid monsters voor in een geschikte werkomgeving, zoals een afzuigkap of laminaire stromingskast. Zie de video's van JoVE over afzuigkappen voor meer informatie over deze veiligheidsfuncties.
Gebruik indien nodig een secundaire beveiliging voor gevaarlijke materialen, zoals een glazen of plastic inzetstuk. Verzegelde veiligheidsbuizen die een gesloten omgeving bieden, kunnen ook worden gebruikt. Iedereen moet worden getraind voordat hij een centrifuge of rotor gebruikt.
Selecteer een rotor die geschikt is voor de centrifuge. Controleer of de rotor en de afdekking schoon en droog zijn en geen scheuren of misvormingen hebben. Zorg er extra voor dat de O-ringen op de rotor of afdekking niet versleten zijn. Controleer ook de centrifuge-as om te zien of deze gebogen is of andere misvormingen heeft. Plaats vervolgens de rotor op de as en zorg ervoor dat deze correct zit. Plaats monsters in de rotor en zorg ervoor dat de buizen goed in de rotor passen.
Plaats altijd uitgebalanceerde buizen tegenover elkaar. Bedek de rotor en zorg ervoor dat de afdichting goed is. Sluit het deksel van de centrifuge en start uw programma. Zie nogmaals de vorige centrifuge-video van JoVE voor meer informatie over het uitvoeren van een centrifugeprogramma.
Blijf bij de centrifuge totdat deze zijn maximale snelheid heeft bereikt. Maak uzelf vertrouwd met de locatie van de aan/uit-knop. Schakel de stroom uit als er ongebruikelijke geluiden of trillingen optreden om de centrifuge onmiddellijk te stoppen. Evacueer vervolgens het directe gebied totdat de rotor is gestopt. Zodra deze is gestopt, controleert u de monsters op lekkage en de rotor op eventuele afwijkingen of onbalans. Als er geen problemen zijn geweest, wacht u tot de centrifuge zijn programma heeft voltooid en volledig is gestopt.
Wacht nog een half uur als er aerosolvormende chemicaliën aanwezig zijn. Anders mag u
de centrifuge onmiddellijk openen. Verwijder de monsters en breng ze terug naar een gespecialiseerd gebied voor opening indien nodig. In geval van morsen, reinig de centrifuge onmiddellijk. Gebruik geschikte PPE voor elk aanwezig gevaar en verwijder verontreinigd materiaal volgens de richtlijnen. Gebruik geen schurende borsteldraden om te reinigen, omdat deze de rotor kunnen beschadigen. Waarschuwt noodpersoneel en probeer de centrifuge niet schoon te maken als er levensbedreigende gevaren zijn gemorst.?
Decontaminatie van de rotor met 10% bleekmiddel voor alle biologische monsters die in de centrifuge zijn gebruikt, ongeacht of er is gemorst of niet. Laat het bleekmiddel 30 minuten staan en spoel vervolgens met 70% ethanol en laat het drogen. Verwijder en inspecteer de rotor ten slotte op eventuele schade en noteer uw gebruik in het logboek.
Je hebt zojuist JoVE's Introductie in centrifuge-gebruik bekeken. Je zou nu moeten begrijpen hoe je je monsters moet voorbereiden en hoe je het instrument kunt bedienen en onderhouden.
Bedankt voor het bekijken.
View the full transcript and gain access to JoVE Science Education videos
Q1: What is the basic mechanism of how a centrifuge separates mixtures?
A centrifuge rapidly spins a rotor containing samples, generating centrifugal force directed away from the axis of rotation. This force causes particles with different densities to separate, with heavier particles moving toward the bottom of the tube. The separation speed depends on particle size and density, making centrifugation much faster than gravity-based sedimentation.
Q2: How should centrifuge tubes be prepared before use?
Select tubes compatible with your centrifuge's maximum RPM and verify limits in the documentation. Inspect tubes for cracks or damage and ensure they are intact. Fill each tube to no more than three-quarters full to prevent spills, then balance tubes and cap them tightly before placing them in the rotor.
Q3: What precautions are necessary when centrifuging hazardous materials?
Wear appropriate personal protective equipment and prepare samples in a fume hood or laminar flow cabinet. Use secondary containment such as glass or plastic inserts for hazardous chemicals or biological samples. Sealed safety tubes provide an additional contained environment. Always ensure proper use of personal protective equipment when handling potentially dangerous materials.
Q4: What rotor inspection steps should be completed before centrifugation?
Verify the rotor is appropriate for your centrifuge and check that it and its cover are clean, dry, and free of cracks or deformities. Inspect O-rings for wear and examine the centrifuge spindle for bending or damage. Ensure the rotor is correctly seated on the spindle and that sample tubes fit snugly without gaps.
Q5: What should you do if unusual sounds or vibrations occur during centrifugation?
Immediately turn off the power button to stop the centrifuge. Evacuate the immediate area and allow the rotor to stop completely before approaching. Inspect samples for spillage and the rotor for abnormalities or imbalances. Do not attempt to restart until the cause is identified and resolved.
Q6: How should a centrifuge be decontaminated after use with biological samples?
Decontaminate the rotor with 10% bleach regardless of whether a spill occurred. Allow the bleach to stand for 30 minutes, then rinse with 70% ethanol and air dry completely. After decontamination, remove and inspect the rotor for damage and document your use in the logbook.
Q7: What is the proper procedure for cleaning up a centrifuge spill?
Clean the centrifuge immediately using appropriate personal protective equipment for any hazards present. Dispose of contaminated materials according to guidelines. Do not use abrasive brush wires, as they damage the rotor. For life-threatening hazards, alert emergency personnel and do not attempt cleanup yourself.
Hoofdstukken in deze video
0:04
Overview
0:59
Basics of Centrifugation
2:55
Preparing samples for the centrifuge
4:01
Using and maintaining the centrifuge
6:46
Summary