29 september 2009
Het beoefenen van de fijne naald aspiratie biopsie (FNAB) door stagiairs is relatief uitdagend, vanwege het ontbreken van een gemakkelijk beschikbaar, passend laesie. De voorbereiding van een AV-fantoom laesie voor de uitoefening van FNAB procedure en de mastering vaardigheid is relatief eenvoudig.
Om een fantoomlaesie te bereiden, knip een stuk karton van zes bij zes inch uit om als basisplaat te dienen. Bedek de basisplaat met een kitlaag van een halve inch dik. Snijd vervolgens een stuk banaan van twee en een halve inch lang en druk dit voorzichtig in de kit.
De banaan dient als de kern van de fantoomlaesie. Bedek de kern volledig met kit zonder luchtbellen in te sluiten. Dek de kern af met een stuk vershoudfolie en vorm dit tot een gladde heuvel. Laat de kitmontage uitharden op een warme plek totdat de kit stevig is en volledig is uitgehard.
Verwijder de plastic folie om de vaardigheid bij FNA te oefenen door een monster uit de kern van de banaan te halen en om de bereiding van uitstrijkjes te oefenen. Ik ben Dr. Vino van de divisie Cytopathologie van de afdeling Pathologie aan het Medical College of Wisconsin. En ik ben Dr. George Varszegi, een fellow Cytopathologie op dezelfde afdeling.
Vandaag demonstreren we een procedure om een fantoomlaesie te bereiden voor het oefenen van de vaardigheid bij het uitvoeren van een FNAV-procedure, door gebruik te maken van eenvoudig beschikbare en simpele hulpmiddelen en materialen. We gebruiken deze techniek doorgaans om fellows in de cytopathologie en arts-assistenten pathologie kennis te laten maken met de procedure voor fijnnaaldaspiratiebiopsie. Later in hun opleiding zullen de fellows en arts-assistenten hun vaardigheden verder verfijnen door fijnnaaldaspiraties uit te voeren bij klinisch palpeerbare laesies onder supervisie van docenten.
Laten we beginnen. Bereid de fantoomlaesie één of twee dagen voor de geplande FNAB-oefensessie voor. Zorg dat de volgende zaken klaarliggen op de werkbank: een stuk karton, een kitspuit, een ongepelde banaan en vershoudfolie.
De eerste stap bij het voorbereiden van een fantoomlaesie is het uitsnijden van een stuk karton van zes bij zes inch om als basisplaat te dienen. Snijd vervolgens een segment banaan van ongeveer twee inch lang, dat zal dienen als de kern van de fantoomlaesie. Nadat de kern van de fantoomlaesie gereed is, gebruikt u een kitpistool om een kitlaag van ongeveer een halve inch dik op de basisplaat aan te brengen.
Druk de kern van de fantoomlaesie lichtjes in de natte kit. Voeg nu meer kit toe over de kern van de fantoomlaesie om deze volledig in te bedden. Draag handschoenen en zorg ervoor dat er geen luchtbellen in de kit worden ingesloten.
Smeer de kit met de hand over de kern van de fantoomlaesie om er zeker van te zijn dat deze volledig is omsloten. Dek de hoop nu af met een stuk vershoudfolie van zestien bij zestien centimeter en vorm de hoop tot een gladde convexe vorm. Plaats de kithoop op een warme plek om te uitharden gedurende zes tot acht uur langer dan de uithardingstijd die wordt aanbevolen voor uw specifieke merk kit.
De kit hardt uit bij blootstelling aan lucht. U kunt de hoop bij kamertemperatuur boven 60 graden Fahrenheit laten staan of incuberen bij 37 °C om de uitharding te versnellen. Na uitharding is de kit stevig en kunt u de plastic folie eenvoudig verwijderen.
De FNA-fantoomlaesie is nu klaar voor gebruik om de FNA-procedure te oefenen. Nu u de fantoomlaesie heeft voorbereid en deze is uitgehard, kunt u deze gebruiken om de FNAB-procedure te oefenen. Hier maken we gebruik van de weefselestractor met functionele klep, maar u kunt in essentie elk FNA-systeem gebruiken.
De THFB bestaat uit een naald om het monster te penetreren, een naaldhouder voor het opvangen van het geaspireerde materiaal, een spuit om de druk in het apparaat te regelen en een ventiel om de naaldhouder met de spuit te verbinden en te ontkoppelen. Begin met het voorbereiden van de FNA-assemblage waarbij het ventiel dat de naaldhouder met de spuit verbindt, gesloten is. Trek nu de zuiger van de spuit naar buiten om een vacuüm in de spuitcilinder te creëren.
Steek vervolgens de naaldpunt in de laesie. Open het ventiel om de naaldhouder te verbinden met het vacuüm in de spuitcilinder. Het vacuüm zuigt materiaal uit de laesie in de naald en in de naaldhouder.
Beweeg de naald heen en weer in de laesie om een representatief monster van cellulaire componenten te aspireren. Bemonster verschillende gebieden van de laesie door de naald in verschillende richtingen in de laesie in te brengen terwijl het vacuüm gehandhaafd blijft. Wanneer de bemonstering is voltooid, draait u aan het ventiel om het vacuüm in de spuitcilinder te verbreken en opent u het ventiel om de druk gelijk te maken met de externe omstandigheden.
Draai vervolgens aan het ventiel om de verbinding met de buitenkant en de cilinder van de spuit te verbreken. Verwijder de naald uit de laesie terwijl het ventiel gesloten is. Door het ventiel gesloten te houden, blijft er een lichte onderdruk in het uiteinde van de naaldhouder, wat voorkomt dat het monster door capillaire werking terugvloeit in de laesie.
Vergelijkbaar met het pipetteerfenomeen bevindt uw weefselmonster zich nu veilig in de naaldhouder. Zodra u de naald uit de houder heeft gehaald, brengt u de geaspireerde inhoud aan op de glazen objectglas om een direct uitstrijkpreparaat te maken. Wanneer u een druppel aspiraat op het objectglas heeft aangebracht, kunt u dit uitspreiden met verschillende methoden, afhankelijk van de aard van het aspiraat; gewoonlijk spreiden wij het monster uit tussen twee objectglazen met de methode die hier wordt getoond.
Indien een monster is verdund met bloed, laat het overtollige bloed dan weglopen door de objectglas te kantelen voordat u het tweede objectglas erop plaatst. Als het aspiraat voornamelijk een suspensie is zonder microfragmenten, zoals bij lymfoproliferatieve laesies, kan het worden uitgestreken met de ribbelmethode, waarbij de rand van één objectglas wordt gebruikt om een reeks ribbelachtige uitstrijkjes op een ander objectglas te maken, of kan de spreidmethode worden gebruikt waarbij één objectglas wordt gebruikt om een filmpje op een tweede objectglas aan te brengen. Zodra u de uitstrijkjes heeft voorbereid, kunt u deze op verschillende manieren verwerken en fixeren.
Voor verschillende kleuringsmethoden is de beste aanpak om alle uitstrijkjes snel binnen één tot twee minuten aan de lucht te laten drogen. Het drogen van dikkere en nattere uitstrijkjes kan worden versneld door de objectglazen zijwaarts in de lucht te bewegen of bij voorkeur met een haardroger of een draagbare, op batterijen werkende ventilator. Wees voorzichtig bij het gebruik van een ventilator om aerosolisatie te voorkomen, vooral bij laesies waarvan wordt verwacht dat ze geïnfecteerd zijn; zodra de uitstrijkjes zijn gedroogd, kunnen ze op passende wijze voor uw experimenten worden gekleurd.
Hier demonstreren we de kleuring van een aan de lucht gedroogde uitstrijkje met D quick stain, een van de Romanowski-kleuringen voor timing. Volg de instructies van de fabrikant. We stellen vast dat drogen aan de lucht de helderheid van de kleuring aanzienlijk verbetert, zoals getoond in dit voorbeeld van Pap-gekleurde uitstrijkjes.
Analyse van deze initiële kleuringen zal bepalen welke aanvullende tests u eventueel wilt uitvoeren, zoals electieve elektronenmicroscopie van het celblok, microbiologische kweken of andere onderzoeken. Een succesvolle voltooiing van de fantoomlaesie maakt een juiste aspiratie van laesiemateriaal mogelijk, in dit geval pasteuze plantaardige materie van banaan. Dit materiaal kan op de glazen objectglazen worden uitgestreken om het uitstrijken en kleuren te oefenen.
We hebben zojuist laten zien hoe u een fantoomlaesie bereidt om de vaardigheid in FNAB te oefenen. Tijdens het uitvoeren van dit experiment is het belangrijk om te onthouden dat u de fantoomlaesie ten minste 36 uur vóór de vaardigheidstest moet bereiden, omdat kitgel tijd nodig heeft om te stollen. Een ander belangrijk punt is het toepassen en loslaten van het vacuüm in de juiste volgorde om een optimale hoeveelheid aspiraatmateriaal te verkrijgen tijdens de FNAV-procedure.
Dat was alles. Bedankt voor het kijken en veel succes met het oefenen. En nogmaals hartelijk dank.
Dit artikel bespreekt de bereiding van een fantoomlaesie voor het oefenen van fijnnaaldaspiratiebiopsieën (FNAB), wat essentieel is voor trainees. De beschreven methode is eenvoudig en maakt gebruik van gemakkelijk verkrijgbare materialen.
Deze methode biedt een kosteneffectief, reproduceerbaar fantoommodel voor training in fijne naald aspiratiebiopsie (FNAB), waarmee een kritiek gat in de preklinische vaardigheidsontwikkeling voor pathologie-opleidingsplaatsen wordt gedicht. Door herhaalde oefening van weefselaspiratie, uitstrijkvoorbereiding en kleuringsworkflows mogelijk te maken, ondersteunt het de vroege competentieopbouw in de diagnostische cytopathologie. Het model verbetert de trainingsgereedheid vóór blootstelling aan klinische laesies, waardoor variabiliteit in de prestaties van cursisten wordt verminderd en gestandaardiseerde vaardigheidsbeoordeling tussen instellingen wordt ondersteund.
De methode wordt geïntegreerd in de vroege discovery-workflow door personeel te trainen in technieken voor het nemen van laesiesamples voorafgaand aan de interactie met preklinische ziektestudies, waardoor een betrouwbare monstername voor downstream-analyse wordt gewaarborgd.