Name: Dwars Aorta Vernauwing in Muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-04-21T18:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 25 s
Description: Leer de transversale aortaconstrictie (TAC) in muizen om drukoverbelasting-geïnduceerde cardiale hypertrofie en hartfalen te bestuderen. Deze chirurgische methode maakt onderzoek naar cardiovasculaire ziekteprogressie mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

XHTW is een WM Keck Foundation Distinguished Scholar Young in Medisch Onderzoek, en wordt ook ondersteund door NIH / NHLBI beurzen R01-R01-HL089598 en R01HL091947, en spierdystrofie Vereniging verlenen # 69238. RJvO is de ontvanger van de 2008-2010 American Physiological Society Postdoctoraal Fellowship in Fysiologische Genomics. Dit werk is ook gedeeltelijk ondersteund door de Stichting Leducq Alliantie voor CaMKII Signalering in het Hart.

Deel 1: Voorbereiding van Operating Field <ol><li> De operationele veld wordt gedesinfecteerd met 75% isopropyl alcohol. </li><li> Zorg ervoor dat het verwarmingselement is ingeschakeld en op de juiste temperatuur. Een aanbevolen systeem is een Gaymar circulerende waterpomp aangesloten op een therapie pad dat wordt gehandhaafd op 37 ° C ± 1 ° C. Het is belangrijk om een ​​normale lichaamstemperatuur te handhaven tijdens de operatie om te voorkomen dat een snelle daling van de hartfrequentie. </li><li> Chirurgische instrumenten worden gesteriliseerd in een hete kraal sterilisator voor de operatie. Voor deze procedure hebt u de volgende chirurgische instrumenten: botte schaar, natuurlijk gebogen tang X 2, fijne 45 ° gebogen tang X 2, schuin lente schaar, borst oprolmechanisme en naaldhouder. </li><li> Katoen applicators dient te liggen op de hand in geval van bloeden. </li></ol> Deel 2: Voorbereiding en intubatie van Muizen <ol><li> Muizen worden verdoofd in een inductie kamer met 2% isofluraan gemengd met 0,5 -1,0 l / min 100% O 2. </li><li> Tondeuses worden gebruikt om de vacht te scheren van de hals tot midden borsthoogte. </li><li> De muis is geplaatst in een liggende positie boven een verwarmingselement om de lichaamstemperatuur te handhaven. </li><li> Een rubberen band is geplaatst over de voorzijde van de dier de tanden om de nek uit te breiden. Met behulp van gebogen tang in de ene hand, is de tong voorzichtig gemanipuleerd om de zijkant. Met de andere hand, is endotracheale intubatie uitgevoerd met behulp van PE 90 buizen. De endotracheale tube wordt vervolgens aangesloten op een Harvard-volume gefietst knaagdieren ventilator fietsen op 125-150 ademhalingen / minuut en een ademvolume van 0.1-0,3 ml. Tijdens de chirurgische ingreep, wordt verdoving gehandhaafd op 1,5-2% isofluraan met 0,5 tot 1,0 L / min 100% O 2. Juiste niveau van de anesthesie wordt geverifieerd door druk uit te oefenen op de muis nagelbed (teen-snuifje reflex). </li><li> Het chirurgische veld wordt gedesinfecteerd met betadine-oplossing, gevolgd door 70% alcohol. Deze procedure wordt drie keer herhaald. </li><li> Om te voorkomen dat besmetting van het chirurgische veld tijdens de operatie, wordt een steriel laken geplaatst over de muis waardoor alleen de werking veld blootgesteld. </li><li> Een set van steriele handschoenen wordt gebruikt voor elke individuele muis. </li></ol> Deel 3: Ligatie van de Transverse Aorta <ol><li> Gedeeltelijke thoracotomie naar de tweede rib wordt uitgevoerd onder een chirurgische microscoop en het borstbeen ingetrokken met behulp van een kist oprolmechanisme. </li><li> Fijne punt 45 ° gebogen pincet worden gebruikt om de thymus en vetweefsel voorzichtig los van de aortaboog. </li><li> Na identificatie van de dwarse aorta, is een klein stukje van een 6,0 zijden hechtdraad geplaatst tussen de onbenoemde en linker halsslagaders (figuur 1). </li><li> Twee losse knopen zijn gebonden rond de dwars-aorta en een klein stukje van een 27 ½ meter stompe naald wordt parallel geplaatst om de dwarse aorta. De eerste knoop is snel gebonden tegen de naald, gevolgd door de tweede en de naald direct verwijderd worden om een ​​vernauwing van 0,4 mm in diameter opbrengst. In sham controle muizen, de gehele procedure is identiek behalve voor de ligatie van de aorta. </li><li> De borst oprolmechanisme verwijderd en de uitstroom van de ventilator afgeknepen gedurende 2 seconden opnieuw opblazen van de longen. </li><li> De ribbenkast is gesloten met een 6,0 prolene hechtdraad met een onderbroken hechtdraad patroon. </li><li> De huid wordt gesloten met behulp van een 6,0 prolene hechtdraad met een doorlopende hechting patroon. </li></ol> Deel 4: Post-operatieve herstel <ol><li> Voor post-operatieve analgesie, is de muis geïnjecteerd met buprenorfine (0,1 mg / kg) intraperitoneaal. Als er tekenen van uitdroging na de operatie, is een steriele zoutoplossing gegeven intraperitoneaal. </li><li> Anesthesie wordt geleidelijk verlaagd tot de stand uit en de endotracheale tube verwijderd wanneer tekenen van spontane ademhaling optreden. </li><li> De muis wordt verplaatst naar de buikligging en liet om te herstellen van een verwarmingselement. </li></ol> Deel 5: Bevestiging van de succesvolle Ligatie van de Transverse Aorta <ol><li> Een week na TAC, de muis is opnieuw verdoofd om de mate van druk overbelasting veroorzaakt door ligatie van de dwarse aorta te bepalen. Zoals hierboven beschreven, wordt verdoving gehandhaafd op 1,5-2% isofluraan met 0,5 tot 1,0 L / min 100% O 2 en de lichaamstemperatuur gehandhaafd op 37 ° C ± 1 ° C. </li><li> Een 20 MHz Doppler sonde wordt geplaatst op de linker-en rechterkant van de nek op een hoek van 45 ° te stromen snelheden op te sporen. Een computer-based Doppler signaal processor (Indus Instruments, Houston, TX) werd gebruikt om te laten zien en op te slaan Doppler-signalen. 5 </li><li> Afhankelijk van de mate van druk overbelasting die nodig is voor de experimentele protocol, worden alleen muizen met een rechter carotis (RC) / linker halsslagader (LC) stroom verhouding binnen een bepaald bereik opgenomen voor verdere analyse. Bijvoorbeeld, een matige mate van druk overbelasting leidt tot een verhouding van 5-8, terwijl een strakkere vernauwing resulteert in een zware druk overbelasting leidt to een ratio van 8-10 (figuur 5.3a). Een sham dier (uitgevoerd maar niet afgebonden), echter, zal naar verwachting een verhouding van ~ 1 (figuur 5.3B) hebben. </li></ol> 6: representatieve resultaten De typische chirurgische overleving na TAC in wild-type muizen is ongeveer 80-90%. Succesvolle chirurgische ligatie van de aorta dwars zal leiden tot een Doppler stroomsnelheid verhouding tussen de rechter en linker halsslagader (RC / LC) van 5-10 (Figuur 1). In vergelijking met sham bediende muizen (Figuur 2A), zijn muizen met de druk overbelasting zal naar verwachting hypertrofie van het hart te ontwikkelen binnen 1-2 weken, en cardiale dilatatie na 6-8 week, afhankelijk van de dichtheid van de vernauwing (figuur 2B). Sterfte tijdens de eerste maanden na de TAC is meestal laag (&lt;20%) in wild-type muizen, hoewel genetisch gemodificeerde muizen kunnen vertonen verschillende overleving. 6,7 <img src="/files/ftp_upload/1729/1729fig1tmb.jpg" alt="Figuur 1" border="0" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 1"> Figuur 1. Bevestiging van Transversale Aorta Ligatie met behulp van Doppler snelheidsmeting. Vertegenwoordiger Dopplersnelheid signalen van het recht (RC) en linker carotis (LC) slagaders zes dagen na de TAC. Deze opnamen tonen een succesvolle ligatie met een RC / LC stroom verhouding van ~ 6.8. Gelieve <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1729/1729fig1.jpg">Klik hier</a> voor een grotere versie van figuur 1 te zien. <img src="/files/ftp_upload/1729/1729fig2.jpg" alt="Figuur 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 2"> Figuur 2. Vertegenwoordiger hele hart Images Na TAC. Een. Sham bediende wild-type muis hart. B. Wild-type muizen hart 16 weken post-TAC. Elke lijn = 1mm.

<ol><li>Rockman, H. A., Ross, R. S., Harris, A. N., Knowlton, K. U., Steinhelper, M. E., Field, L. J., Ross, J. Jr, Chein, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88, 8277-8281 (1991).</li>
<li>Heineke, J., Molkentin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+cardiac+hypertrophy+by+intracellular+signaling+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Mol.+Cell.+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of cardiac hypertrophy by intracellular signaling pathways.</a> Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 7, 589-600 (2006).</li>
<li>Hartley, C. J., Reddy, A. K., Madala, S., Michael, L. H., Entman, M. L., Taffett, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doppler+estimation+of+reduced+coronary+flow+reserve+in+mice+with+pressure+overload+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy.</a> Ultrasound Med. Biol. 34, 892-901 (2008).</li>
<li>Reddy, A. K., Taffett, G. E., Li, Y. -H., Lim, S. -W., Pham, T. T., Pocius, J. S., Entman, M. L., Michael, L. H., Hartley, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doppler+signal+processing+for+use+in+mice%3A+applications%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Doppler signal processing for use in mice: applications.</a> IEEE Trans. Biomed. Eng. 52, 1771-1783 (2005).</li>
<li>Li, Y. -H., Reddy, A. K., Ochoa, L. N., Pham, T. T., Hartley, C. J., Micheal, L. H., Entman, M. L., Taffett, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+age+on+peripheral+vascular+response+to+transverse+aortic+banding+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Effect of age on peripheral vascular response to transverse aortic banding in mice.</a> J. Gerontol. 58A, 895-899 (2003).</li>
<li>Bourajjaj, M., Armand, A. S., Martins, daC. osta, Weijts, P. A., Nagel, B. V. ander, Heeneman, R., Wehrens, S., Windt, X. H. D. e, J, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NFATc2+is+a+necessary+mediator+of+calcineurin-dependent+cardiac+hypertrophy+and+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">NFATc2 is a necessary mediator of calcineurin-dependent cardiac hypertrophy and heart failure.</a> J. Biol. Chem. 28, 22295-22303 (2008).</li>
<li>Oort, R. J. van, Respress, J. L., Li, N., Reynolds, C., Almeida, A. C. D. e, Skapura, D. G., Windt, L. J. D. e, Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+development+of+pressure+overload+induced+cardiac+hypertrophy+and+dysfunction+in+an+RyR2-R176Q+knockin+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Accelerated development of pressure overload induced cardiac hypertrophy and dysfunction in an RyR2-R176Q knockin mouse model.</a> Hypertension. 55, (2010).</li>
<li>Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+cardiac+surgery%3A+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiol Genomics. 16, 349-360 (2004).</li>
</ol>

TAC, die de menselijke aortastenose nabootst, is een veel gebruikte methode om cardiale hypertrofie en hartfalen veroorzaken bij muizen. Alternatieve locaties voor aorta vernauwing onder meer de stijgende en abdominale aorta. Opgaande aorta vernauwing zorgt voor een extreme en snellere overbelasting van de linker ventrikel (LV). In tegenstelling, abdominale aorta vernauwing laat onverlet een groter deel van de circulatie als een middel om mogelijke schadevergoeding. 8 Daarom, TAC vaak de voorkeur omdat het mo...

<table><tbody><tr><td>Gaymar T/pomp</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Model TP-500</td><td>Circulerende waterpomp</td></tr><tr><td>Temp. therapiepads</td><td>Harvard Apparatus</td><td>60-3414</td><td></td></tr><tr><td>Hete kraalsterilisator</td><td>Fine Science Tools</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>Botte scharen</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5980</td><td></td></tr><tr><td>Gehoekte veerscharen</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5668</td><td></td></tr><tr><td>Thoraxretractor</td><td>Fine Science Tools</td><td>17002-02</td><td></td></tr><tr><td>Grove gebogen pincetten</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5138</td><td></td></tr><tr><td>Dumont fijne pincetten met hoek van 45&amp;#x00B0;</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-25</td><td></td></tr><tr><td>Naaldhouder</td><td>Fine Science Tools</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>Elektrische scheermachine</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td>Voor het scheren van muizenhaar</td></tr><tr><td>PE 90 slang</td><td>BD Biosciences</td><td>427420</td><td>Voor intubatie</td></tr><tr><td>MiniVent (ventilator)</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Type 845</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Fisher Scientific</td><td>19-027132</td><td>Kan worden aangeschaft bij een medische groothandel</td></tr><tr><td>Steriele handschoenen</td><td>Mckesson</td><td>20-1565</td><td></td></tr><tr><td>Stereomicroscoop</td><td>Unico</td><td>ZM186</td><td></td></tr><tr><td>6-0 zijden hechtdraad</td><td>Fine Science Tools</td><td>18020-60</td><td></td></tr><tr><td>27 &amp;frac12; gauge naald</td><td>BD Biosciences</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>6-0 prolene hechtdraad</td><td>Mckesson</td><td>3286</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfine</td><td>Institutional Animal Facility</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

dwars aorta vernauwing in muizen

Transverse Aortic Constriction in Mice

Dwars aorta vernauwing (TAC) in de muis is een veelgebruikte experimenteel model voor druk overbelasting-geïnduceerde cardiale hypertrofie en hartfalen.<sup&gt; 1</sup&gt; TAC leidt in eerste instantie tot gecompenseerd hypertrofie van het hart, die vaak wordt geassocieerd met een tijdelijke verhoging van de cardiale contractiliteit. Na verloop van tijd, echter, de reactie op de chronische hemodynamische overbelasting wordt onaangepast, wat resulteert in cardiale dilatatie en hartfalen.<sup&gt; 2</sup&gt; De muizen TAC-model werd voor het eerst gevalideerd door Rockman<em&gt; Et al.</em&gt;.<sup&gt; 1</sup&gt;, En heeft sindsdien op grote schaal gebruikt als een waardevol hulpmiddel om menselijke hart-en vaatziekten na te bootsen en toe te lichten fundamentele signalering processen die betrokken zijn bij de cardiale hypertrofische reactie en hartfalen ontwikkeling. In vergelijking met andere experimentele modellen van hartfalen, zoals de volledige occlusie van de linker anterior aflopend (LAD) coronair, TAC biedt een meer reproduceerbaar model van cardiale hypertrofie en een meer geleidelijke tijdsverloop in de ontwikkeling van hartfalen. We beschrijven hier een stap-voor-stap procedure om chirurgische TAC uit te voeren bij muizen. Voor het bepalen van het niveau van de druk overbelasting door de aorta ligatie, is een hoge frequentie Doppler sonde gebruikt om de verhouding tussen bloed stroomsnelheden in de rechter en linker halsslagaders meten.<sup&gt; 3, 4</sup&gt; Met chirurgische overleving van 80-90%, dwars aorta strepen is een effectieve techniek voor het induceren van linker ventrikel hypertrofie en hartfalen in muizen.

Dwars aorta vernauwing (TAC) in de muis is een veel gebruikte experimenteel model om de mechanismen die ten grondslag liggen cardiale hypertrofie en hartfalen ontwikkeling te bestuderen. Hier beschrijven we de procedures aan vernauwen de aorta naar een reproduceerbare mate van cardiale hypertrofie in muizen te creëren.

Dwars Aorta Vernauwing in Muizen

Transversale aortacontrictie (TAC) bij de muis is een veelgebruikt experimenteel model voor door drukoverbelasting geïnduceerde cardiale hypertrofie en hart...

Deze procedure begint met het anesthetiseren van een muis, het voorbereiden van het dier voor een aseptische operatie en het plaatsen van de muis in rugligging op een warmtematte. Endotracheale intubatie wordt uitgevoerd met PE 90-slangen, die vervolgens worden aangesloten op een knaagdierventilator. Vervolgens wordt een partiële thoracotomie tot aan de tweede rib uitgevoerd en wordt het sternum geretracteerd.De aorta transversa wordt geïdentificeerd en vervolgens afgebonden tussen de arteria brachiocephalica en de linker arteria carotis. De borstkas wordt gesloten, gevolgd door de huid met een doorlopende hechting. Ten slotte wordt de endotracheale tube verwijderd en krijgt de muis de gelegenheid om te herstellen.Hallo, ik ben Angela Dal Meda van het laboratorium van Dr. Zander Wars van de afdeling Moleculaire Fysiologie en Biofysica aan het Baylor College of Medicine. Vandaag laten we u de procedure zien voor transversale aortacrestrictie bij muizen. Wij gebruiken deze procedure in ons laboratorium om de mechanismen te bestuderen die ten grond liggen aan de ontwikkeling van cardiale hypertrofie en hartfalen.Laten we beginnen. Desinfecteer vóór aanvang van de transversale aortacontrictie (TAC-chirurgie) het operatieveld met 75% isopropylalcohol. Zet het warmtekussen aan en stel dit in op de juiste temperatuur.Het systeem dat wij aanbevelen is een circulerende waterpomp voor gamers, verbonden met een warmthetherapiepad dat op 37 plus of min één graad Celsius wordt gehouden. Steriliseer het chirurgisch instrumentarium in een hot bead sterilisator vóór de operatie. Voor de chirurgische ingreep aan de taxen zijn de volgende chirurgische instrumenten nodig.Een stomp schaartje, twee grove gebogen pincetten of pincetten met een hoek van 45 graden, een gehoekt veerschaartje, een thoraxspreider en een naaldvoerder. Wattenstaafjes moeten ook bij de hand zijn in geval van bloedingen. Nu het operatieveld is voorbereid, kunnen we overgaan tot de intubatie van de muis.Ter voorbereiding op de intubatie wordt de muis geanestheseerd in een inductiekamer en wordt de vacht van de neklijn tot het midden van de borst geschoren met een haartrimmer. Plaats de muis in rugligging op het warmtekussen. Het is belangrijk om tijdens de operatie de normale lichaamstemperatuur te handhaven om een snelle daling van de hartslag en mogelijk plotseling overlijden te voorkomen.Oefen druk uit op het nagelbed van de muis om te bevestigen dat de muis volledig is geanestheseerd. Plaats een elastiek over de voortanden van het dier om de nek te strekken. Manipuleer de tong voorzichtig naar de zijkant met de ene hand, terwijl u in de andere hand gebogen pincetten vasthoudt. Voer PE 90-buisjes in de trachea in.Sluit vervolgens de endotracheale tube aan op een Harvard volume-gecontroleerde ventilator voor knaagdieren. De ventilator moet worden ingesteld op 125 tot 150 ademhalingen per minuut en een tidal volume van 0,1 tot 0,3 milliliters, afhankelijk van het lichaamsgewicht van de muis. Desinfecteer de huid binnen het chirurgische veld met Betadine-oplossing, gevolgd door 70% alcohol. Herhaal deze procedure drie keer om contaminatie van het chirurgische veld tijdens de operatie te voorkomen. Plaats een steriel afdekdoek over de muis, waarbij alleen het operatieveld vrij blijft.We zijn nu klaar om de ligatie van de aorta transversalis uit te voeren tijdens deze chirurgische procedure. De anesthesie wordt in stand gehouden met 1,5 tot 2% isofluoraan met 0,5 tot één liter per minuut 100% zuurstof. Verifieer het juiste anesthesieniveau door druk uit te oefenen op het nagelbed van de muis.Om de afwezigheid van de tokenreflex te bevestigen. Begin de operatie door een partiële thoracotomie uit te voeren. Snijd het sternum open, beginnend bij het craniale uiteinde tot aan het niveau van de tweede rib.Trek met behulp van een chirurgische microscoop het borstbeen open met een borstretractor. Gebruik vervolgens fijne, in een hoek van 45 graden gebogen pincetten om de thymus en het vetweefsel voorzichtig van de aortaboog te scheiden. Nadat de transversale aorta is geïdentificeerd, wordt een klein stukje 6.0 zijden hechtdraad tussen de arteria brachiocephalica en de linker arteria carotis geplaatst.Knoop twee losse knopen rond de transversale aorta en plaats een klein stukje van een botte naald van 27,5 gauge parallel aan de transversale aorta. Trek de eerste knoop snel aan tegen de naald, gevolgd door de tweede knoop, en verwijder vervolgens onmiddellijk de naald om een vernauwing van 0,4 millimeter in diameter te verkrijgen.Zodra de aorta transversalis is afgebonden, wordt de thoraxspreider verwijderd en wordt de uitstroom van de ventilator gedurende twee seconden dichtgeknepen. Om de longen voorzichtig opnieuw op te blazen, wordt de borstkas gesloten met een 6.0 proline-hechtdraad in een onderbroken hechtpatroon. Ten slotte wordt de huid gesloten met een 6.0 proline-hechtdraad in een continu hechtpatroon.Voor postoperatieve analgesie. Injecteer de muis intraperitoneaal met buprenorfine. Indien er na de operatie tekenen van dehydratie zijn, wordt 0,3 tot 1 milliliter steriele zoutoplossing intraperitoneaal toegediend.Zet de anesthesie geleidelijk uit. Wanneer er tekenen van spontane ademhaling optreden, wordt de endotracheale tube verwijderd, waarna de muis in buikligging wordt geplaatst om te herstellen op een warmtemat. Eén week na de transversale aortaconstrictie wordt de muis opnieuw geanestheseerd om de mate van drukoverbelasting te bepalen die is geïnduceerd door de ligatie van de transversale aorta.Anesthesie en lichaamstemperatuur worden gehandhaafd zoals eerder beschreven. Plaats een 20 megahertz Doppler-sonde aan de linker- en rechterzijde van de nek onder een hoek van 45 graden. Om de stroomsnelheden in de arteria carotis te detecteren, gebruiken we een computergestuurde Doppler-signaalprocessor om de Doppler-signalen weer te geven en op te slaan.Afhankelijk van de vereiste mate van drukoverbelasting voor het experimentele protocol, worden alleen muizen met een stroomsnelheidsverhouding tussen de rechter arteria carotis (RC) en de linker arteria carotis (LC) binnen een bepaald bereik meegenomen voor verdere analyse. Bijvoorbeeld, een matige mate van drukoverbelasting leidt tot een verhouding van vijf tot acht, terwijl een nauwere constrictie die resulteert in ernstige drukoverbelasting leidt tot een verhouding van acht tot 10. Van een sham-dier wordt echter verwacht dat de verhouding ongeveer één is.De typische chirurgische overleving na TAC bij wild-type muizen is ongeveer 80 tot 90% succesvol. Chirurgische ligatie van de aorta transversa zal leiden tot een doppler-stroomsnelheidsratio tussen de rechter en linker halsslagader, of RC over lc, van vijf tot 10 vergeleken met sham-geopereerde muizen. Van muizen met drukoverbelasting wordt verwacht dat zij binnen één tot twee weken cardiale hypertrofie ontwikkelen en na zes tot acht weken cardiale dilatatie, afhankelijk van de strakheid van de constrictie.We hebben zojuist laten zien hoe u transversale aortaconstrictie bij muizen uitvoert, waarbij het essentieel is om de normale lichaamstemperatuur te handhaven en bloedverlies te minimaliseren bij het uitvoeren van deze procedure. Dat is alles. Bedankt voor het kijken en veel succes met uw experimenten.

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

In this video, we demonstrate an experimental protocol for minimally invasive transverse aortic constriction in mice to examine pressure overload-induced heart failure.

Transverse Aortic Arch Banding in Mouse Model: A Minimally Invasive Technique in Mice for Induction of High Pressure in the Left Ventricle

Het doel van dit protocol is om niet-invasief beoordelen cardiale structurele en functionele veranderingen in een muismodel van hart-en vaatziekten door dwarse aorta vernauwing, met behulp van B- en M-mode echocardiografie en kleur / pulse wave Doppler imaging.

Beoordeling van Cardiac morfologische en functionele veranderingen in muismodel van Transversale Aorta Vernauwing door Echocardiografie Imaging

Een rattenmodel van abdominale aortaconstrictie dat cardiale hypertrofie en remodellering induceert, wordt beschreven. Een efficiënte, zeer reproduceerbare en minimaal invasieve methode wordt gebruikt om een eenvoudige maar nuttige platform te bieden voor onderzoek naar myocardiale hypertrofie en disfunctie.

Een model van remodellering Door vernauwing van de abdominale aorta bij ratten

Minimaal invasieve dwarse aorta vernauwing (MTAC) behoudt de essentie van de reguliere dwarse aorta vernauwing (TAC), terwijl het elimineren van het gebruik van een ventilator met tracheale intubatie. Het blijkt een zeer wenselijke werkwijze voor high-throughput studies linker ventrikel overbelasting, met name translationele studies.

Minimaal Invasieve Transversale Aorta Vernauwing in Muizen

Het doel van dit protocol is te beschrijven stap voor stap de techniek van minimaal invasieve dwarse aorta vernauwing (TAC) in muizen. Door eliminatie van intubatie en ventilatie die verplicht is voor de gebruikte standaardprocedure zijn, minimaal invasieve TAC vereenvoudigt de operatieve procedure en vermindert de stam het dier op te zetten.

Techniek van minimaal invasieve dwarse aorta vernauwing in muizen voor inductie van links ventriculaire hypertrofie

Hier presenteren we een protocol van Transverse aorta vernauwing (TAC) via een laterale Thoracotomie. Deze techniek is een minimaal invasieve, gesloten borst chirurgische ingreep gericht om overbelasting van de druk en hartfalen in muizen met behulp van TAC laboratorium standaardinstellingen te simuleren.

Een gesloten-borst-Model voor het opwekken van transversale aorta vernauwing in muizen

Dit protocol presenteert een verbeterde methode om voorbijgaande myocardhypertrofie met absorbeerbare hechting te verkrijgen, waarbij de afname van linkerventrikelhypertrofie wordt gesimuleerd na het verwijderen van drukoverbelasting. Het kan waardevol zijn voor de studies naar myocardhypertrofische conditionering.

Operatie transversale aortavernauwing met absorbeerbare hechting om voorbijgaande myocardhypertrofie te verkrijgen

Het huidige protocol beschrijft een aangepaste en vereenvoudigde techniek met een minimaal invasieve transversale aortavernauwing (TAC) procedure met behulp van een zelfgemaakt retractor. Deze procedure kan worden uitgevoerd zonder een ventilator of microscoop en introduceert drukoverbelasting, wat uiteindelijk leidt tot harthypertrofie of hartfalen.

Een aangepaste techniek voor transversale aortavernauwing bij muizen

De muis heterotope harttransplantatie model is bewezen door vele onderzoekers een belangrijke methode voor het bestuderen van de mechanismen van de afwijzing en immuunrespons worden. Echter, de betrokken technieken zijn nog steeds uitdagend. Door het wijzigen van standaard technieken die we hebben succes gehad met meer dan 1000 transplantaties.

Heterotope harttransplantatie in Muizen

De muis dunne darm transplantatie model is erkend als een belangrijk instrument om mechanismes van de afstoting en het scherm nieuwe immunosuppressieve geneesmiddelen te bestuderen. Echter, is dit model beperkt tot gebruik omdat de betrokken technieken is een zeer technisch uitdaging. Nu introduceren wij de gewijzigde techniek.

Dunne darm transplantatie in Muizen

Leer de transversale aortaconstrictie (TAC) in muizen om drukoverbelasting-geïnduceerde cardiale hypertrofie en hartfalen te bestuderen. Deze chirurgische methode maakt onderzoek naar cardiovasculaire ziekteprogressie mogelijk.

Dwars Aorta Vernauwing in Muizen

Meer video's verkennen