Name: Lage-stress Route leren met behulp van de Lashley III Maze in Muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-05-22T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 14 s
Description: Leer route-leren en geheugenonderzoek met de Lashley III doolhof bij muizen. Deze stressvrije methode helpt wetenschappers cognitieve veroudering en stamverschillen analyseren.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De Lashley III doolhof gebruikt voor deze experimenten werd gebouwd door Tim Bowmaster, Paul Corman, Barry Dutrow, Ryan Jabco, en Tim Treaster van de Pennsylvania State University Physics Department Machine Shop. De auteurs willen graag aan mevrouw Shoba Belegundu, mevrouw Tara Chrzanowski, en mevrouw Alexandra Lewis bedanken voor de hulp bij het uitvoeren van de experimenten die in de figuren 2-4. De heer Walter Jackson waardevolle feedback in de voorbereiding van dit protocol. Dit werk werd ondersteund door de financiering van het National Institute of Mental Health (MH064756 en MH077978 naar AMA). De inhoud is uitsluitend de verantwoordelijkheid van de auteurs en niet noodzakelijkerwijs het officiële standpunt van het National Institute of Mental Health en de National Institutes of Health.

1. Bereiding: <ol><li> De Lashley III doolhof is gemaakt van plexiglas en is weergegeven in figuur 1. De start box, doolhof armen, en het doel box zijn modulair, zodat voor het reinigen en aanpasbaarheid van het doolhof. De wanden van de start box, doolhof armen, en het doel box zijn gemaakt van zwart plexiglas om visuele signalen te elimineren van buiten en binnen het doolhof. Doolhof armen zijn 45 cm lang, 7 cm hoog en 5 cm breed. Deuren die leiden tot opeenvolgende armen van het doolhof zijn 4 cm x 4 cm en bevinden zich 11 cm van de buitenste muren van het doolhof. Het doel doos is 19,5 cm lang x 7 cm hoog x 5 cm breed. De start box is 8 cm x 9,5 cm x 7 cm. Afzonderlijke duidelijk plexiglas stukken worden geplaatst op de top van de start box, doolhof, en het doel doos om visualisatie van elke muis laten als het vordert door het doolhof terwijl het voorkomen muizen ontsnappen. Het doolhof rust op een basis gemaakt van rood plexiglas, dat is groot genoeg om de drie stukken van het doolhof en een pseudo-kooi, dat is van hetzelfde formaat als standaard van het dier kooi te houden. </li><li> Tot pseudo-home kooien voor te bereiden voor de eerste doolhof proef, verse strooisel van dezelfde soort als die in de dieren 'home kooien wordt toegevoegd aan de individuele kooi bodems met deuren (2 cm x 2 cm) gesneden in de zijkanten. Plaats draad toppen op deze kooi bodems en individueel nummer ze, een voor elk dier in een test cohort. Deze kooien zullen dienen als individuele pseudo-home kooien voor elk dier voor de duur van het testen termijn. Omdat we onderzoek naar de rol van stress en / of angst-gerelateerd gedrag in het leren en het geheugen maken wij gebruik van pseudo-home kooien individueel te voorkomen dat woningen muizen in hun eigen kooien. Echter, als deze factoren niet van primair belang, kunnen dieren afzonderlijk worden gehuisvest in kooien thuis gemodificeerd met deuren en deze kooien kunnen dienen als het huis kooien voor een succesvolle doolhof navigeren. </li></ol> 2. Testen: <ol><li> Elke dag worden dieren naar het gedrag testkamer een minimum van een uur voor het testen, zodat ze wennen aan de testomgeving. </li><li> Dertig minuten voor het testen starttijd, voedsel en water wordt verwijderd uit alle kooien huis. Houd het voedsel en water in het gedrag testen kamer, maar buiten het bereik van de muizen. Voedsel en water is meestal verwijderd 30 min na de overgang van de lichte fase naar de donkere fase, na het voeden piek heeft plaatsgevonden. Dit zorgt ervoor dat de dieren zijn meestal voedsel-en water-verzadigd voorafgaand aan de test, maar het testen tijdens deze periode biedt een kleine extra motiverende kracht om het doolhof te navigeren, ook al is er geen openlijke voedsel of water te belonen na voltooiing van de taak. </li><li> Na de 30 minuten pretest termijn is verstreken, het reinigen van de doolhof met 70% ethanol. Laat de deur vanaf het begin doos in het doolhof armen gesloten. De deuren aan beide uiteinden van het doel box zijn open gelaten. </li><li> Plaats de pseudo-kooi die overeenkomt met de eerste dier aan het einde van het doel box. </li><li> Draag de eerste muis naar de doolhof, cupping het in je hand. Zet de muis in het begin doos en plaats de deksel. </li><li> Wanneer in de positie om het doolhof te observeren zonder belemmering, de start box deur open en direct beginnen drie stopwatches. </li><li> Wanneer alle vier de poten van de muis hebben de start box links, sluit de start box deur en stop de eerste timer. </li><li> Opnemen met de hand het pad van de muis reist als het navigeren van de doolhof. Een muis komt een nieuwe zone of een arm van het doolhof wanneer alle vier poten hebben gekruist in dat gebied (zie Fig. 1). </li><li> Wanneer alle vier de poten het doel box in te voeren, sluit de deur die tussen het labyrint en het doel doos en stop de tweede stopwatch. </li><li> Wanneer de muis volledig is de pseudo-kooi ingevoerd, sluit de deur tussen de doelstelling box en de kooi. Stop de derde stopwatch. </li><li> Noteer de tijden van de drie stopwatches. Tel het aantal fouten de muis heeft gemaakt. Een fout wordt gedefinieerd als een toegang tot een doodlopende cul-de-sac zone (bijvoorbeeld, gaande van arm naar L zone K;. Afb. 1) of op reis terug door een reeds reisde arm van het doolhof (bijv., gaande van arm aan arm F C; Fig 1).. Terwijl we scoren muis prestaties als het zich voordoet, is het mogelijk om videoband of op andere wijze opnemen doolhof onderzoeken om voor de volgende scoren toe, hetzij op het oog of door geautomatiseerde software. Experimentator beoordelingsvrijheid te worden gebruikt om een ​​geschikte methode te kiezen. </li><li> Laat het dier in de pseudo-home kooi voor 1 minuut alvorens terug te keren naar haar kooi. </li><li> Herhaal de stappen 2,3 tot 2,12 voor alle muizen in de testen van cohort. </li><li> Wanneer de laatste muis in het cohort is teruggekeerd naar haar kooi, start de 30 minuten timer. Aan het eind van deze 30 minuten periode, terug te keren voedsel en water om alle muizen in de cohort en keer dan terug de dieren naar de kolonie kamer. </li><li> Herhaal deze procedure op opeenvolgende nachten, met een trial testen per dag per dier, totdat alle muizen in de cohort hebben bereikt een bepaalde leer criteria of tot een vooraf bepaald nomber van de test-onderzoeken heeft plaatsgevonden. Een muis is geclassificeerd als geleerd het doolhof wanneer het kan de taak uit te voeren met 0 of 1 fout (en) op twee opeenvolgende proeven. Muizen worden getest in dezelfde volgorde op de opeenvolgende proeven. </li></ol> 3. Representatieve resultaten: Dagen om te leren (te bereiken criterium) kan worden geanalyseerd en vergeleken tussen verschillende groepen in een bepaalde studie (afb. 2A en 3A). Bovendien kan een leren-index (leer-ratio), die doolhof acquisitie kenmerkt, worden geëvalueerd in de eerste vier dagen van de testperiode (figuren 2B en 3B). Het leren index is de verhouding van het aantal juiste pad segmenten reisde naar het totale aantal padsegmenten reisde voor elke proef. De gemiddelde leren index moet ongeveer 0,5 zijn voor proef 1, wanneer de muizen eerst worden blootgesteld aan het doolhof en het navigeren door het toeval. Het leren index stijgt en benaderingen een tussen de proeven 2 en 4 te geven dat het leren plaatsvindt. In figuur 2, jonge (2 mo) en ouder (24 ma) mannelijke C57Bl/6NCr muizen werden getraind op de Lashley doolhof voor maximaal 15 trials. De jonge muizen leerden het doolhof in 7.2 (± 1.5) d. Daarentegen, de vergrijzing van de dieren nam 11,7 (± 2,1) d criterium te bereiken. Er was een sterke trend voor de veroudering C57Bl/6NCr muizen langer duren om het doolhof ([t (23) = 1,59, p = 0.056] te leren, een eenzijdige t-test, a priori hypothese die dag om te leren is langer bij veroudering muizen). Wanneer het leren index wordt berekend, beide leeftijdsgroepen tonen een gestage toename van het leren-index van de proeven 2 tot en met 4 (significant hoofdeffect van de tijd P &lt;0.001). Er waren echter geen statistisch significante verschillen in het leren index tussen jonge C57 muizen en oude C57 muizen (belangrijkste effect van de leeftijd P = 0,58). Figuur 3 representatief is voor studies naar het effect van de achtergrond druk op het leergedrag. Gegevens van de jonge mannelijke C57Bl/6NCr getoond in Fig. 2 worden nu vergeleken met gegevens uit jonge Crl: CD-1 (ICR) BR muizen [CD-1, 4-5 mo]. CD-1 muizen leerde de Lashley III doolhof in 4.5 (± 1.4) d, maar er was geen significant verschil tussen de stammen in de dagen om te leren (Fig. 3A, [t (18) = 1.328, P = 0.20]; twee -tailed t-test). Bij onderzoek van het leren-index laat zien dat, hoewel alle dieren waren het navigeren in de doolhof van de eerste proef door het toeval, CD-1 muizen leerden de taak sneller (belangrijkste effect van de stam P &lt;0.001). Dit wordt geïllustreerd door de statistisch significante stijging van de index in het leren proeven 2 tot en met 4 in CD-1 muizen in vergelijking met C57Bl/6NCr muizen. Interessant, als CD-1 muizen verder te worden opgeleid in het doolhof voorbij het punt van het bereiken van criteria, ze vertonen gedrag wijzen op overtraining (afb. 4), die wordt besproken in meer detail beschreven. <img src="/files/ftp_upload/1786/1786fig1.jpg" alt="Figuur 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 1"> Figuur 1:. De Lashley III doolhof De doodlopende cul-de-sac zones van het doolhof zijn rood gekleurd in dit schema alleen voor illustratieve doeleinden. De basis en de armen van de huidige doolhof zijn vaste kleuren (inzet). Het doolhof is getekend op schaal (afmetingen in tekst). <img src="/files/ftp_upload/1786/1786fig2.jpg" alt="Figuur 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 2"> Figuur 2: Lashley III doolhof prestaties in 2 en 24 maanden oude mannelijke muizen C57Bl/6NCr De Lashley III doolhof werd gebruikt om te beoordelen route leren van jonge (2 mo) en ouder (24 ma) mannelijke C57Bl/6NCr muizen.. De gemeten parameters waren (een) dag criterium, het aantal dagen dat nodig is voor een muis naar het doolhof lopen voor twee opeenvolgende nachten met 0 fouten of een fout, en (b) leren index, het aantal correcte vier-poot arm entries gemaakt ten opzichte van het totaal aantal inschrijvingen arm gemaakt op dag 1-4 van Lashley III doolhof testen. Aantallen dieren per groep werden n = 10 voor 2 maanden oud en n = 15 voor 24 maanden oude muizen. <img src="/files/ftp_upload/1786/1786fig3.jpg" alt="Figuur 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 3"> Figuur 3: Lashley III doolhof prestaties in jonge mannelijke C57Bl/6NCr en CD-1 muizen De Lashley III doolhof werd gebruikt om de route te beoordelen leren in twee maanden oude C57Bl/6NCr en 4-5 maanden oude CD-1 muizen.. De gemeten parameters waren (een) dag criterium, het aantal dagen dat nodig is voor een muis naar het doolhof lopen voor twee opeenvolgende nachten met 0 fouten of een fout, en (b) leren index, het aantal correcte vier-poot arm entries gemaakt ten opzichte van het totaal aantal inschrijvingen arm gemaakt op dag 1-4 van Lashley III doolhof testen. Aantallen dieren per groep werden n = 10 voor C57Bl/6NCr en n = 10 voor CD-1 muizen. Statistische betekenissen: * P &lt;0,05, ** P &lt;0,01 versus C57Bl/6NCr muizen. <img src="/files/ftp_upload/1786/1786fig4.jpg" alt="Figuur 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 4"> Figuur 4: Lashley III doolhof prestaties in 4-5 maanden oude mannelijke CD-1 muizen De Lashley III doolhof.werd gebruikt om te beoordelen route leren in tien 4-5 maanden oude mannelijke CD-1 muizen op 15 opeenvolgende dagen. De gemeten parameters waren (a) aantal gemaakte fouten per dag, met een fout gedefinieerd als een vier-poot binnenkomst in een doodlopende cul-de-sac zone of het reizen een reeds reisde arm van het doolhof, en (b) de tijd doorgebracht in de doolhof per dag. De dag waarop criterium werd bereikt wordt aangegeven met een rode pijl.

<ol><li>Blizard, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Return+to+home+cage%27+as+a+reward+for+maze+learning+in+young+and+old+genetically+heterogeneous+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Med%22%5BJournal%5D)">Return to home cage' as a reward for maze learning in young and old genetically heterogeneous mice.</a> Comparative Med. 56, 196-201 (2006).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCrawley%2C+JN+%22What%27s+wrong+with+my+mouse%3F%3A+Behavioral+phenotyping+of+transgenic+and+knockout+mice%22">What's wrong with my mouse?: Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice</a>. , 2nd ed, John Wiley & Sons, Inc. Hoboken. (2007).</li>
<li>Blizard, D. A., Klein, L. C., Cohen, R., McClearn, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mouse-friendly+cognitive+task+suitable+for+use+in+aging+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Genet%22%5BJournal%5D)">A novel mouse-friendly cognitive task suitable for use in aging studies.</a> Behav. Genet. 33, 181-189 (2003).</li>
<li>Warren, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Appetitive+learning+by+old+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Aging+Res%22%5BJournal%5D)">Appetitive learning by old mice.</a> Exp. Aging Res. 12, 99-105 (1986).</li>
<li>Lashley, K. Brain mechanisms and intelligence: A quantitative study of injuries to the brain. , University of Chicago Press. Chicago. (1929).</li>
<li>Barnes, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Memory+deficits+associated+with+senescence%3A+A+neurophysiological+and+behavioral+study+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+Psych%22%5BJournal%5D)">Memory deficits associated with senescence: A neurophysiological and behavioral study in the rat.</a> J. Comp. Physiol. Psych. 93, 74-104 (1979).</li>
<li>Matzel, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Individual+differences+in+the+expression+of+a+general+learning+ability+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Individual differences in the expression of a general learning ability in mice.</a> J. Neurosci. 23, 6423-6433 (2003).</li>
<li>Brandeis, R., Brandys, Y., Yehuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+Morris+water+maze+in+the+study+of+memory+and+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The use of the Morris water maze in the study of memory and learning.</a> Int. J. Neurosci. 48, 29-69 (1989).</li>
<li>Hepler, D. J., Wenk, G. L., Cribbs, B. L., Olton, D. S., Coyle, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Memory+impairments+following+basal+forebrain+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Memory impairments following basal forebrain lesions.</a> Brain Res. 346, 8-14 (1985).</li>
<li>Sci, B. ehavB. rain 2, 313-313 (1979).</li>
</ol>

Alle gedrag protocollen werden goedgekeurd door de Pennsylvania State University Institutional Animal Care en gebruik Comite. Er zijn geen financiële informatie te melden.

De meest gebruikte knaagdieren gedragstesten om te leren en geheugen te beoordelen zijn de Morris water maze en varianten van vreesconditionering 2. Deze tests vertrouwen op visuele of auditieve signalen om te leren en aversieve stimuli (bijvoorbeeld water, footshock) voor dieren te motiveren om de taken te voltooien 3. Bij veroudering knaagdieren, zoals bij veroudering mensen, zintuiglijke modaliteiten verloop van tijd afnemen. Verschillende achtergrond stammen van muizen verliezen hun gehoor of d...

<table><tbody><tr><td>Lashley III doolhof</td><td>PSU Physics Machine Shop</td><td>N/A</td><td> Doolhof moet op maat worden gebouwd, niet commercieel verkrijgbaar</td></tr></tbody></table>

lage-stress route leren met behulp van de lashley iii maze in muizen

Low-stress Route Learning Using the Lashley III Maze in Mice

Veel gedrag testen ontwikkeld om leren en geheugen bij knaagdieren te evalueren, met name muizen, vertrouwen op visuele cues, voedsel en / of water ontbering, of andere aversieve stimuli om taak overname te motiveren. Als dieren leeftijd, zintuiglijke modaliteiten verslechteren. Bijvoorbeeld, het ontwikkelen van vele stammen van muizen horen tekorten of cataract. Veranderingen in de sensorische systemen die nodig zijn om muizen te begeleiden tijdens taak overname aanwezig potentieel verwart bij het interpreteren van veranderingen in het leren van veroudering dieren. Bovendien is het gebruik van aversieve stimuli om dieren te motiveren om taken te leren is potentieel verstorende bij het vergelijken van muizen met differentiële gevoeligheid voor stress. Het minimaliseren van dit soort verstorende factoren, hebben we een aangepaste versie van de Lashley III doolhof. Dit doolhof is gebaseerd op de route leren, waarbij muizen leren om een ​​doolhof navigeren via herhaalde blootstelling onder lage belasting omstandigheden, bijv. donkere fase, geen eten / water ontbering, totdat ze navigeren een pad vanaf de start locatie naar een pseudo-home kooi met 0 of een fout (en) op twee opeenvolgende proeven. We classificeren dit als een low-stress-gedrag-test, omdat het niet afhankelijk van aversieve stimuli om de verkenning van het doolhof en het leren van de taak te stimuleren. Het apparaat bestaat uit een modulair start box, een vier-armige doolhof lichaam, en een doel box. Aan het eind van het doel box is een pseudo-kooi die bedden vergelijkbaar met die gevonden in het huis van het dier kooi en is specifiek voor elk dier voor de duur van de doolhof testen bevat. Het is al eerder aangetoond dat deze pseudo-kooi voldoende te belonen aan muizen geeft motiveren om te leren het doolhof navigeren<sup&gt; 1</sup&gt;. Hier presenteren we de visualisatie van de Lashley III doolhof procedure in het kader van de evaluatie van leeftijd-gerelateerde verschillen in leren en geheugen in muizen, samen met een vergelijking van leergedrag in twee verschillende achtergrond stammen van muizen. We hopen dat andere onderzoekers geïnteresseerd zijn in de beoordeling van de gevolgen van de vergrijzing of stress kwetsbaarheid bij muizen zal dit doolhof een aantrekkelijk alternatief voor gedragstesten dat meer stress leertaken en / of visuele aanwijzingen te betrekken overwegen.

De Lashley III doolhof is een route-learning taak die niet afhankelijk is van aversieve stimuli of visuele cues. Het is dus een zeer aantrekkelijke optie voor het evalueren van leren en geheugen, vooral in ouder worden muizen of anderszins waar stress is een overweging.

Lage-stress Route leren met behulp van de Lashley III Maze in Muizen

Veel gedragstesten die zijn ontworpen om leren en geheugen bij knaagdieren, in het bijzonder muizen, te beoordelen, vertrouwen op visuele signalen, voedsel- en/of waterdeprivatie, of andere ...

In het Lash-drieluikdoolhof leerden muizen door een reeks armen te navigeren om een pseudo-thuiskoppijomgeving te bereiken. Bij herhaalde pogingen worden de muizen aan het begin van een trial in de Starbucks geplaatst, die door een deur van het doolhof is gescheiden. Zodra de deur wordt geopend, betreden de muizen de armen van het doolhof en krijgen ze de vrijheid om het pad dat de muis neemt te verkennen.Het doolhof wordt geregistreerd, inclusief keren in doodlopende foutzones. Bij binnenkomst in de gouden kooi wordt een andere deur gesloten om herintreding in het doolhof te voorkomen en de muis naar de pseudo-thuiskooi te leiden. Na afronding van de doolhofproef wordt de prestatie in het doolhof vergeleken tussen leeftijdsgroepen of stammen om de rol in leren en geheugen te evalueren.Hoi, ik ben Amanda Bressler. Ik werk in het laboratorium van Anne Andrews hier aan de Pennsylvania State University. Ik ga u vandaag laten zien hoe u het Lashley-driemaze gebruikt.We gebruiken dit doolhof in ons laboratorium voornamelijk om genetisch gemodificeerde muizen tijdens het verouderingsproces te bestuderen. Laten we beginnen. Laten we eerst kijken hoe het Lashley three maze eruitziet.Het startvak, de armen en het gouden vak van het doolhof zijn modulair om reiniging en aanpassingen van het doolhof mogelijk te maken. De wanden van het startvak, het doolhof, de armen en het gouden vak zijn allemaal vervaardigd uit zwart plexiglas om visuele aanwijzingen van buiten en binnen het doolhof uit te sluiten. De armen van het doolhof zijn 45 centimeter lang, zeven centimeter hoog en vijf centimeter breed.De openingen die leiden naar opeenvolgende armen van de mace zijn vier centimeter bij vier centimeter en bevinden zich 11 centimeter van de buitenmuren van de mace; de gouden doos is 19,5 centimeter lang, zeven centimeter hoog en vijf centimeter breed. De startdoos is acht centimeter bij 9,5 centimeter bij zeven centimeter. Losse stukken transparant plexiglas worden bovenop de Starbucks-doolhof en de gouden doos geplaatst om visualisatie van elke muis mogelijk te maken terwijl deze door het doolhof beweegt.Terwijl het voorkomen dat muizen uit het doolhof ontsnappen, rust op een basis van rood plexiglas die groot genoeg is om de drie delen van het doolhof te bevatten, plus een pseudo-thuiskooi die dezelfde afmetingen heeft als de standaard thuiskooi van het dier. Om de pseudo-thuiskooien vóór de eerste MACE-test voor te bereiden, voegt u vers strooisel toe aan individuele kooi-bodems met uitgesneden openingen in de zijkanten, plaatst u gaasdeksels op de kooibodems en nummert u deze individueel, één voor elk dier in een testcohort. Deze kooien dienen als individuele pseudo-thuiskooien voor elk dier gedurende de gehele testperiode.Nu het doolhof is voorbereid, bekijken we hoe de gedragstests worden uitgevoerd, minstens één uur vooraf. Verplaats de dieren vóór de test naar de ruimte voor gedragstests, zodat ze kunnen acclimatiseren aan de testomgeving. Verwijder 30 minuten voor aanvang van de test het voer en water uit alle thuiskooien.Houd het voedsel en water in de ruimte voor gedragstests, maar buiten het bereik van de muizen. Het experiment wordt doorgaans zo getimed dat het voedsel en water 30 minuten na de overgang van de lichtfase naar de donkerfase, wanneer de piek in de voedselinname plaatsvindt, worden verwijderd. Dit zorgt ervoor dat de dieren voor doeleinden van deze demonstratie grotendeels verzadigd zijn met voedsel en water voorafgaand aan de test.In deze video tonen we deze procedure onder helder licht. De test wordt gewoonlijk uitgevoerd tijdens de donkere fase van de licht-donkercyclus. Wanneer de pretestperiode van 30 minuten is verstreken, reinigt u het doolhof met 70% ethanol.Laat de deur die van de Starbucks naar het doolhof leidt open. Armen gesloten. De deuren aan beide uiteinden van de gouden box moeten open blijven.Plaats nu de pseudo-thuiskooi die bij het eerste dier hoort. Vervoer de eerste muis aan het einde van de gouden box naar het doolhof door deze in de hand te cupsen.Plaats de muis in de Starbucks en vervang het deksel. Wanneer u zich in een positie bevindt om het doolhof zonder belemmering te observeren, open dan de deur van de startbox en start onmiddellijk drie stopwatchs. Zodra alle vier de poten van de muis de startbox hebben verlaten, sluit u de deur van de startbox en stopt u handmatig de eerste timer.Registreer het traject. De muis beweegt terwijl hij door het doolhof navigeert. Op een scoreblad wordt genoteerd wanneer een muis een nieuwe zone of arm van het doolhof betreedt zodra alle vier de poten dat gebied zijn binnengegaan.Zodra alle vier de poten het doelvak zijn binnengegaan, sluit dan de deur tussen het doolhof en het doelvak en stop de tweede stopwatch. Wanneer de muis volledig in de pseudo-thuiskooi is gegaan, sluit dan de deur tussen het doelvak en de kooi. Stop de derde stopwatch.Noteer de tijden van de drie stopwatches en tel het aantal fouten dat de muis heeft gemaakt. Een fout wordt gedefinieerd als het betreden van een doodlopende zone of het terugreizen door een arm van het doolhof die al is afgelegd. Laat het dier één minuut in de pseudo-thuiskooi voordat u het terugplaatst in de thuiskooi.Nadat alle muizen in de cohort zijn getest, wacht u 30 minuten en geeft u vervolgens alle muizen weer voedsel en water. Plaats de dieren tot slot terug in hun colonykamer. Herhaal deze procedure op opeenvolgende nachten met één trial per testdag per dier, totdat alle muizen in de cohort aan een gedefinieerd leeringscriterium hebben voldaan of totdat een vooraf vastgesteld aantal testtrials is voltooid.Een muis wordt geclassificeerd als hebbend het doolhof geleerd wanneer deze de taak met nul tot één fout kan uitvoeren over twee opeenvolgende pogingen. Muizen worden in dezelfde volgorde getest bij opeenvolgende pogingen. Nu tonen we enkele representatieve gedragsresultaten.Hier zien we gegevens van jonge mannelijke C 57 black six- en CR-muizen van twee maanden oud en verouderde muizen van 24 maanden oud, die gedurende maximaal 15 trials op het Lashley-doolhof werden getraind. In figuur 2 A leerden de jonge muizen het doolhof in gemiddeld 7,6 dagen. In contrast hiermee deden de verouderde dieren 11,7 dagen over om het criterium te bereiken.Er was een sterke trend dat oudere C 57, black six NCR R muizen er langer over deden om het doolhof te leren. De leerindex is de ratio van correcte arm-ingangen ten opzichte van het totale aantal afgelegde padsegmenten in één enkele trial, waarbij de leerindex is berekend in figuur twee B. Beide leeftijdsgroepen hebben een ratio van ongeveer 0,50 voor de eerste trial. Zowel jonge als oudere muizen vertonen een gestage toename van de leerindex van trial twee tot en met vier, maar er waren geen significante verschillen tussen de twee groepen. Getoond.Hier zijn gegevens uit studies die het effect van de achtergrondstam op het leergedrag onderzoeken. Jonge mannelijke C 57, black six NCR en controle CD one muizen van vier tot vijf maanden werden vergeleken. De C 57 black six muizen zijn dezelfde muizen als de jonge cohort in figuur twee.In figuur drie leren CD1-muizen de Lashley three maze in 4,5 dagen. Er was geen significant verschil tussen de stammen in het aantal dagen dat nodig was om de criteria te bereiken. Bijzonder is dat onderzoek naar de leerindex in figuur drie B aantoont dat, hoewel alle dieren de maze tijdens de eerste trial op basis van toeval navigeerden, de CD1-muizen de taak sneller leerden.Dit wordt geïllustreerd door de statistisch significante toename van de leerindex in de tweede tot vierde trial bij CD one-muizen in vergelijking met C 57 BL six- en CR-muizen. Interessant is dat wanneer CD one-muizen in het doolhof worden getraind voorbij het punt waarop het criterium is bereikt, zij gedrag vertonen dat duidt op overtraining. In figuur 4 A is een toename te zien in het aantal gemaakte fouten na dag vijf. Dag vijf was de dag waarop de CD one-muizen het criterium bereikten.De CD one-muizen brachten na het aanleren van de taak ook meer tijd door in de MACE, wat te zien is in figuur vier B. Hiermee hebben we laten zien hoe het Lashley three-doolhof gebruikt kan worden om leren en geheugen bij muizen te meten. Bij het implementeren van dit experiment in uw eigen laboratorium kan het nodig zijn om eerst vooronderzoek te doen, aangezien verschillende muizenstammen de MA's met verschillende snelheden aanleren en onderhevig kunnen zijn aan overtraining. Bedankt voor het kijken en veel succes met uw toekomstige experimenten.

low-stress-route-learning-using-the-lashley-iii-maze-in-mice

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

This video shows how to use the Barnes Maze with a mouse. The Barnes Maze testing procedure is used by researchers to assess spatial learning and memory in laboratory animals following repeated trials.

Barnes Maze: A Method For Assessing Spacial Learning and Memory in Lab Animals

De droge land Barnes doolhof wordt veel gebruikt om ruimtenavigatie vermogen te meten in reactie op licht aversieve stimuli. Over opeenvolgende dagen, de prestaties (bijvoorbeeld latency te ontsnappen kooi lokaliseren) van controlepersonen verbetert, indicatief voor normale leren en geheugen. Verschillen tussen ratten en muizen noodzakelijk apparatuur en methodiek veranderingen die hier worden beschreven.

Barnes Maze Teststrategieën met de kleine en grote knaagdieren modellen

Het doel van dit protocol is om ruimtelijke cognitie bij knaagdieren te onderzoeken. Het double-H waterlabyrint is een nieuwe test, die bijzonder nuttig is om de verschillende componenten van leren, consolidatie en geheugen, evenals de interactie van geheugensystemen, te verduidelijken.

De Double-H Maze: een robuuste Behavioral Test voor leren en geheugen in Knaagdieren

De Open-veld Tower Maze (OFTM) is een doolhof gemaakt om de gedrags-en neurale mechanismen van ruimtelijke leren (bv, plaats- of de reactie-learning) bij ratten te bestuderen. Dit labyrint is vooral nuttig voor onderzoekers die willen een niet-stressvolle doolhof paradigma om ruimtelijke leren onderzoeken hun onderzoek.

Plaats en Response Leren in de Open-veld Toren Maze

Dit protocol beschrijft een gedrags assay, op basis van de test van de doolhof Barnes, om te bestuderen hoe instinctieve defensieve acties worden gewijzigd door de kennis van de ruimtelijke omgeving.

Een gedrags Assay voor het onderzoeken van de rol van ruimtelijk geheugen tijdens instinctieve verdediging in muizen

Dit protocol meet ruimtelijke leren en geheugen met behulp van de Barnes doolhof. Een roman jonkvrouw-in-nood-paradigma wordt gebruikt ter beoordeling van motorische activiteit en prosociaal gedrag in muizen.

Analyseren van ruimtelijke leren en prosociaal gedrag in muizen met behulp van de Barnes doolhof en Damsel-in-nood paradigma 's

De Y-doolhof barrière taak is een gedragstest die motivatie onderzoekt om inspanning te besteden voor beloning. Hier bespreken we het testen van meerdere goed gevalideerde chronische stressoren, waaronder chronische corticosteron en sociale nederlaag stress met dit gedrag, evenals de nieuwe chronische niet-discriminerende sociale nederlaag stress (CNSDS), die effectief is bij vrouwen.

Chronische stress verschuivingen inspanning-gerelateerde keuze gedrag in een Y-Maze Barrier Taak in muizen

Het huidige protocol beschrijft een herconfigureerbaar doolhof, een uniek systeem voor het testen van ruimtelijke navigatie en gedragsfenotypen bij knaagdieren. Het aanpassingsvermogen van dit doolhofsysteem maakt het mogelijk om verschillende experimenten in één fysieke omgeving uit te voeren. Het gemak van structurele herschikking genereert betrouwbare en reproduceerbare experimentele resultaten.

Gebruik van een herconfigureerbaar doolhofsysteem om de reproduceerbaarheid van ruimtelijke navigatietests bij knaagdieren te verbeteren

Dit artikel presenteert een protocol dat een niet-invasieve en geautomatiseerde beoordeling van fijne motorische prestaties mogelijk maakt, evenals adaptief en associatief motorisch leren bij uitdagingen, met behulp van een apparaat genaamd de Erasmusladder. De moeilijkheidsgraad van de taak kan worden getitreerd om motorische stoornissen te detecteren, variërend van grote tot subtiele gradaties.

Monitoring van fijn en associatief motorisch leren bij muizen met behulp van de Erasmusladder

De meeste gedragsexperimenten voor knaagdieren zijn oorspronkelijk bedacht voor ratten. Vanwege de gedragsverschillen tussen ratten en muizen zijn soms aanpassingen nodig voor muizen. We presenteren een methode om het ruimtelijk werkgeheugen bij muizen te testen, waardoor de stress tijdens de werkgeheugentaak wordt geminimaliseerd.

Een appetijtieve ruimtelijke werkgeheugentaak voor muizen in een semi-geautomatiseerd 8-armig radiaal doolhof, waardoor angstige geheugenassociatie in het doolhof wordt verminderd

Leer route-leren en geheugenonderzoek met de Lashley III doolhof bij muizen. Deze stressvrije methode helpt wetenschappers cognitieve veroudering en stamverschillen analyseren.

Lage-stress Route leren met behulp van de Lashley III Maze in Muizen

Meer video's verkennen