Name: Micro-injectie van Medaka embryos voor gebruik als een model organisme Genetische (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-22T17:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 25 s
Description: Leer micro-injectie van Medaka-embryo's voor genetisch onderzoek in ontwikkelingsbiologie. Deze methode maakt manipulatie van genexpressie op ééncellig niveau mogelijk voor functionele studies.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dit werk werd ondersteund door een subsidie ​​van de MRC.

1. Paring en het verzamelen van eieren <ol><li> Vrouwelijke en mannelijke medaka kan gemakkelijk worden onderscheiden door de grootte en de vorm van de anale en rugvinnen. De anale vinnen van de mannetjes zijn groter en parallellogram-vormige vergeleken met die van de vrouwtjes. De vrouwelijke anaalvin is kleiner en driehoekige. Het mannetje rugvin heeft een duidelijk zichtbaar diepe inkeping tussen de laatste twee stralen. </li><li> Medaka leggen tot 40 eitjes elke dag en medaka wijfjes dragen de eieren geclusterd op hun buik door gehechtheid filamenten voor enkele uren voordat ze worden ontdaan van in fabrieken in de tank. </li><li> Vrouwtjes kunnen worden gevangen in een net en hield binnen zachtjes aan beide kanten met een hand. Eieren kunnen vervolgens voorzichtig worden geplaagd door de buik met de wijsvinger van de andere hand. Het vrouwtje kan vervolgens worden teruggegeven aan de tank. Eieren moeten worden overgedragen aan een 6 cm petrischaal gevuld met embryo media door botte tang of een vinger. </li><li> Medaka paren zelden te vechten als ze worden bewaard in een klein doosje paring. Daarom kunnen ze worden bewaard in een kleine tank met water stromen, zodat ze kunnen worden gevoed en eieren kunnen worden afgehaald bij het hetzelfde paar elke dag een paar maanden. </li><li> Het is belangrijk dat vrouwelijke vissen niet moet worden gehouden zonder mannetjes, omdat eisprong elke dag in medaka vrouwen. Anders kan vrouwtjes niet leveren eieren en zich onwel gaan voelen. </li></ol> 2. Reinigen van embryo's <ol><li> Transfer unclustered eieren met een glazen pipet met schuurpapier (P2000 korrel, waterdicht) geplaatst in het deksel van een 9cm petrischaal. Verwijder overtollig medium, maar zorgen voor een voldoende volume blijft om uitdroging te voorkomen van embryo's. </li><li> Zachtjes roll embryo's op schuurpapier met behulp van de wijsvinger, het toepassen van minimale druk en houden de vinger parallel aan het oppervlak van het zand papier voor ongeveer 45-60 seconden tot enkele van de buitenkant van het chorion haren te verwijderen. Niet rollen meer dan 5-7 embryo's in een keer deze voorzorg zal het risico van verpletterende embryo's onder elkaar te minimaliseren. </li><li> Overdracht schoongemaakt embryo's om een ​​nieuwe schotel van embryo medium. </li></ol> 3. Het maken van agarose platen voor het houden van embryo's tijdens de micro-injectie Embryo's worden gehouden in bakken tijdens de injectie gemaakt met een plexiglas schimmel in 1,5% agarose (figuur 1). De concentratie van agarose is het belangrijk om goed te houden embryo's. <ol><li> Maak eerst een frame van agarose aan het plexiglas mal te houden. Giet 1,5% agarose in water met een 0,5 cm diepte in een 9cm petrischaal en wacht tot het volledig stolt. Knip een deel van de agarose alleen maar groter is dan de grootte van de mal. </li><li> Giet 1,5% agarose om de snede gebied te vullen en de mal, zodat geen luchtbellen gevangen zitten en wachten tot agarose stolt plaats. Dit agarose plaat kan worden opgeslagen in de koelkast te versnellen solidifaction. </li><li> Verwijder de mal om troggen te creëren om de eieren te houden. Voeg genoeg embryo medium om de mal, dek af en op te slaan onder te dompelen bij 4 ° C totdat het nodig is. <img src="/files/ftp_upload/1937/1937fig1.jpg" alt="Figuur 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 1"> Figuur 1. Schema van op maat gemaakte mal gebruikt om de goten te bereiden in agarose platen voor de micro-injectie. </li></ol> 4. Micro-injectie van medaka embryo's In medaka, zijn DNA, RNA, morpholino oligonucleotiden en tracer kleurstoffen gemicroinjecteerd door het chorion in het cytoplasma van de 1 tot 64-cellig stadium embryo in plaats van de dooier als in de zebravis. Omdat het cytoplasma is kleiner en minder zichtbaar in medaka, de praktijk door het injecteren van kleurstoffen zoals rhodamine-dextran wordt aanbevolen om deze vaardigheid te ontwikkelen. Toevoeging van fenol rood als een tracer is ook aangemoedigd om de bevestiging van injecties toe te staan. Als het chorion omliggende medaka embryo's is taai, is een kort, krachtig en breed injectienaald vereist (figuur 2). Bereid deze sterke breed injectienaald uit een filament-bevattende glazen capillair. <ol><li> Bereid oplossing voor injectie met fenol rood als een tracer en plaats hem in de naald van de achterzijde met een Eppendorf microloader. Sluit de naald om de luchtpomp injector. </li><li> De eieren moeten worden verzameld en unclustered zo snel mogelijk na de bevruchting te injecteren in de een-cellig stadium. Meer embryo's kan worden geïnjecteerd door ze op te slaan op ijs (niet meer dan 30 minuten) om de celdeling te stoppen. <img src="/files/ftp_upload/1937/1937fig2.jpg" alt="Figuur 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 2"> Figuur 2. Vergelijking van de zebravis medaka en naalden. Let op de punt van de naald MF (boven) is korter en breder dus ook sterker voor aanprikken van de stoere chorion omliggende medaka embryo's. </li><li> Overdracht eieren in het agarose bord en lijn ze in de troggen met een tang. Net voor injectie moet vijf eieren worden afgewisseld, zodat de celmembraan van de een-cel cytoplasma kan worden getroffen door ee naald loodrecht. Het cytoplasma van de een-cel kan worden gevonden door te zoeken naar een gebied zonder kleine oliedruppels die tegengesteld is aan de zijkant van het ei met dichtste oliedruppeltjes. De geïdentificeerde gebied kan worden bevestigd aan het cytoplasma worden door het bekijken van de zijkant. </li><li> Plaats de naald dicht bij de eieren. Open de punt van de naald door zachtjes aanraken van de punt van de naald naar de chorion of het gebruik van microforceps (figuur 3). Een kleine hoeveelheid van de stof injectie moet worden gezien naar buiten stromen. </li><li> Prik door het chorion aan de punt van de naald binnenkant van de chorion plaats. Stel de holding druk van de injector relatief hoog zijn, om ervoor te zorgen er geen reflux optreedt als gevolg van de hoge druk op lekke band door de taaie chorion (instellingen van de 80-100hPA voor het houden van druk-en 500-700 hPa voor injectie druk). </li><li> Steek de punt van de naald in het cytoplasma door scherp porren zijn membraan. Steek de punt van de naald in de dooier. In tegenstelling tot de zebravis, zal materiaal geïnjecteerd in de dooier niet worden overgedragen in het cytoplasma. Ingespoten vloeistoffen hebben een duidelijke grens bij injectie in de dooier terwijl de grens is vaag als in het cytoplasma (Figuur 4). Af en toe kan de naald verstopt raken door agarose / puin. Tang kan worden gebruikt om aan te raken / opnieuw afbrekingen aan het einde van de naald en verwijder de blokkade. Als de naald breekt op enig moment tijdens de injectie, zal borrelen te zien in het embryo medium en de stof die u injecteert verloren zullen gaan. Injecties moeten worden systematisch uitgevoerd van boven naar beneden langs de agarose-kanalen en van links naar rechts over de mal. </li><li> Geïnjecteerde embryo's moet worden overgebracht naar een schone schotel met embryo medium en ontwikkeld op de juiste temperatuur. <img src="/files/ftp_upload/1937/1937fig3.jpg" alt="Figuur 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 3"> Figuur 3. Overtreden van de naald voor de injectie. 1: Beweeg punt van de naald dicht bij de chorion van embryo; 2: Raak het chorion en beweeg de naald heen en weer voorzichtig om tip te breken; 3: Wanneer een kleine hoeveelheid van de injectie stofstromen uit het uiteinde van de naald dit bevestigt breuk van de tip. </li></ol> 5. Representatieve resultaten <img src="/files/ftp_upload/1937/1937fig4.jpg" alt="Figuur 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 4"> Figuur 4. Vertegenwoordiger beelden van de geïnjecteerde medaka embryo's. Paneel A toont een representatief beeld van de juiste injectie van rhodamine-dextran in het cytoplasma van een een-cellig stadium medaka embryo. Panel B geeft een representatief beeld van de verkeerde injectie van rhodamine-dextran in de dooierzak van een een-cellig stadium medaka embryo. Panelen C en D tonen de embryo's uit panelen A en B respectievelijk ongeveer 30 uur na de injectie. EM: embryo, anterior naar boven in panelen C en D en bekijk dorsale is. Let op het lichaam van het embryo in paneel D is niet rood als de kleurstof was niet correct geïnjecteerd in de dooierzak. Pijlen in B en D geven aan rhodamine-dextran geïnjecteerd ten onrechte in de dooierzak let op de verschillende cirkelvormige grens. Stippellijnen in A-en B-schets van cytoplasma van een-cel te geven, uitzicht is lateraal.

<ol><li>Furutani-Seiki, M., Sasado, T., Morinaga, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+genome-wide+screen+for+mutations+affecting+organogenesis+in+Medaka%2C+Oryzias+latipes%5BTitle%5D)+AND+%22Mech+Dev%22%5BJournal%5D)">A systematic genome-wide screen for mutations affecting organogenesis in Medaka, Oryzias latipes.</a> Mech Dev. 121, 647-658 (2004).</li>
<li>Furutani-Seiki, M., Wittbrodt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medaka+and+zebrafish%2C+an+evolutionary+twin+study%5BTitle%5D)+AND+%22Mech.+Dev%22%5BJournal%5D)">Medaka and zebrafish, an evolutionary twin study.</a> Mech. Dev. 121, 629-6237 (2004).</li>
</ol>

In deze video tonen we een methode voor cel tracer, mRNA, DNA of anti-sense oligonucleotide injectie in een-cellig stadium medaka embryo&#39;s. Deze techniek heeft ons in staat gesteld de verschillende ontwikkelings-processen te bestuderen in-vivo in real-time. Dit proces en de daaropvolgende gedetailleerde analyse biedt de potentie heeft om aanzienlijk te verbeteren ons begrip van gewervelde organogenese en de onderliggende celbiologie. Deze kennis kan van belang zijn voor, en de opbrengst therapeutische toepassingen in de regeneratieve geneeskunde.

<table><tbody><tr><td>4&quot; fijnmazig net</td><td>Gereedschap</td><td>J K Aquatics Ltd.</td><td>MD001</td><td>Gebruikt voor het vangen van vissen tijdens het oogsten van eieren.</td></tr><tr><td>Embryo medium</td><td>Reagens</td><td>Zelfgemaakt</td><td></td><td>200ml 50X stamoplossing, 1ml 1% methyleenblauw in H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O/10 liter RO-water (50X stamoplossing: NaCl 14.7g, KCl 0.6g, CaCl&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; 2H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O 2.4g, MgSO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt; 7H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O 4.0g/1 liter RO-water.</td></tr><tr><td>Fijn waterbestendig schuurpapier - korrelgrootte p2000</td><td>Gereedschap</td><td>Hermes Abrasives Ltd.</td><td></td><td>Zeer fijne korrelgrootte voor het rollen/reinigen van embryo's met chorionen.</td></tr><tr><td>Borosilicaatglazen capillairen</td><td>Gereedschap</td><td>Harvard Apparatus</td><td>GC100-10F</td><td>Voor het maken van microinjectienaalden.</td></tr><tr><td>Micropipet-puller</td><td>Apparatuur</td><td>Narishige International</td><td>Model PP-830</td><td>Voor het maken van microinjectienaalden.</td></tr><tr><td>Eppendorf microloader</td><td>Gereedschap</td><td>Eppendorf</td><td>5242956.003</td><td>Voor het vullen van microinjectienaalden.</td></tr><tr><td>Microinjector-apparaat</td><td>Apparatuur</td><td>Eppendorf</td><td></td><td>Model 5242.</td></tr><tr><td>Micromanipulator</td><td>Apparatuur</td><td>Narishige International</td><td></td><td>Model MN151.</td></tr><tr><td>Agarose injectieplaat</td><td>Gereedschap</td><td>Zelfgemaakt</td><td></td><td>Voor het fixeren van embryo's tijdens injectie.</td></tr></tbody></table>

micro-injectie van medaka embryo&#39;s voor gebruik als een model organisme genetische

Microinjection of Medaka Embryos for use as a Model Genetic Organism

In deze video, tonen we de techniek van micro-injectie in een-cellig stadium medaka embryo&#39;s. Medaka is een klein ei-leggen zoetwatervis dat zowel genetische en embryologische analyses maakt en is een van de gewervelde model organismen waarvan het genoom-brede fenotype aangedreven mutant schermen werden uitgevoerd 1, net als in zebravis en de muis. Divergentie van de functionele overlap van gerelateerde genen tussen medaka en zebravis maakt identificatie van nieuwe fenotypen die niet identificeerbaar zijn in een enkele soort twee, dus medaka en zebravissen zijn complementair voor genetische dissectie van gewervelde genoom functies. Om te profiteren van medaka vis die als embryo doorzichtig en ontwikkelen extern, micro-injectie is een essentiële techniek om cel-tracers injecteren voor het labelen van cellen, mRNA&#39;s of anti-sense oligonucleotiden voor de over-expressie en kloppen-down genen van belang, en de DNA&#39;s voor het maken van transgene lijnen.

Medaka en zebravissen zijn complementair voor genetische dissectie van gewervelde genoom functies. Dit protocol worden de belangrijkste punten voor een succesvolle micro-injectie in medaka embryo&#39;s, een belangrijke techniek voor de embryologische en genetische analyse met behulp van medaka en zebravis in een laboratorium.

Micro-injectie van Medaka embryo&#39;s voor gebruik als een model organisme Genetische

In deze video demonstreren we de techniek van micro-injectie in medaka-embryo's in het eencellige stadium. De medaka is een kleine, eierenleggende zoetwatervis die ...

Het algemene doel van deze procedure is om de functie van een gen of eiwit te bepalen door de normale expressiepatronen van het betreffende gen of eiwit te verstoren. Dit wordt bereikt door eerst de aros-mal en de injectienaalden te maken. De tweede stap van de procedure is het verzamelen van mid-embryo's in het eencellige stadium.De derde stap van de procedure is het positioneren van embryo's in het eencellige stadium in de juiste positie voor injectie. De laatste stap van de procedure is het injecteren van celmarkers, mRNA's of antisense-oligonucleotiden in de embryo's in het eencellige stadium. Uiteindelijk kunnen resultaten worden verkregen via microscopische observatie die morfologische, fysiologische of moleculaire veranderingen laten zien die geassocieerd zijn met het eiwit dat door de geïnjecteerde stof is beïnvloed.Hallo, ik ben Sean Brazinski uit het laboratorium van Dr. Makoto Fuki van de afdeling Biologie en Biochemie aan de University of Bath. Ik maak deel uit van het Seki-lab. Vandaag laten we u een procedure zien voor de micro-injectie van Meca-embryo's met celtrackers, mRNA's en antisense-oligonucleotiden.Wij gebruiken deze procedure in ons laboratorium om de functie van het gen van belang in vivo op enkelcelniveau te bestuderen. Laten we beginnen. In tegenstelling tot zebravis kunnen mannelijke en vrouwelijke maka's eenvoudig worden onderscheiden aan hun dimorfe vinnen.De vinnen van het vrouwtje hebben een ronde vorm met een gladde rand. Zowel de anale vin als de rugvin van het mannetje zijn groter dan die van het vrouwtje, en de rugvin heeft een diepe inkeping tussen de laatste twee vinstralen. Huisvest een paarkoppel meca in een paaibak met of zonder waterstroom.Deze P kan tot twee maanden in een aquarium met stromend water worden gehouden. Bij dagelijkse injectie legt de meka tot 40 eieren per dag, die via hechtingsdraden bij de buik clusteren. Gebruik een net om een vrouwtje uit het aquarium te vangen en houd de vis met één hand vast om deze in het net te fixeren. Scheid de eieren voorzichtig met een wijsvinger.Plaats het vrouwtje terug in het aquarium. Gebruik een pincet of een wijsvinger om de eitjes over te brengen naar een Petri-schaal van zes centimeter gevuld met embryo-medium. Gebruik onder een dissectiemicroscoop twee pincetten om de aanhechtingsfilamenten door te knippen en de eitjes te scheiden.Pak de embryo's op met een pastapipet om ze te scheiden van feces en algen en breng maximaal 40 eitjes over naar een schaal met vers embryo-medium. Plaats de eitjes op ijs als er onmiddellijk wordt gemicro-injecteerd. Alternatief kan de snelheid van de ontwikkeling naar latere stadia worden beïnvloed door variaties in de incubatietemperatuur.Een plexiglasvorm is vereist voor het maken van agaroseplaten om embryo's tijdens de injectie vast te houden. Raadpleeg het geschreven gedeelte van dit protocol voor details. Giet 0,5 centimeter 1,5% agarose in water in een petrischaal van negen centimeter.Wanneer de aase is gestold, snijdt u een gebied uit dat iets kleiner is dan de mal, zodat de mal niet naar de bodem zakt. Vul het uitgesneden gebied aan met meer 1,5% aase en plaats de plexiglas mal eroverheen. Voorkom dat er luchtbellen ontstaan wanneer de Aris is gestold.Laat de mal over het algemeen los om troggen te creëren. Bedek de Aris met embryo-medium. Dek de schaal af en bewaar deze bij vier graden Celsius tot gebruik.Bereid een stevige, brede injectienaald voor uit een filament met een glazen capillair. Gebruik een microlader om de injectienaald te vullen met de injectieoplossing, inclusief fenolrood als tracer, en sluit de naald aan op een injectiestand met luchtpomp. Plaats dit naast een dissectiemicroscoop.Breng eitjes in het juiste stadium over naar de arose-injectieplaat. Embryo's kunnen tot 30 minuten op ijs worden bewaard om de ontwikkeling te stopzetten terwijl de injectie onder de stereomicroscoop wordt uitgevoerd. Gebruik een pincet om zeven tot 10 eitjes in elk reservoir uit te lijnen.Draai de eieren zodat de injectienaald de eieren loodrecht raakt. De ene cel van het embryo bevindt zich tegenover de inkeping van de oliedruppels. Daarom moet de oliedruppel naar links zijn georiënteerd, zodat de ene cel zich aan de rechterkant bevindt voor injectie.Bij meca worden nucleïnezuren en tracerkleurstoffen via het chorion in het cytoplasma van het embryo geïnjecteerd in plaats van in de dooier. Verplaats, zoals bij zebravissen, de naald dicht bij de eitjes. Raak met de punt van de naald het chorion aan of gebruik micropincetten om de naaldpunt open te breken, zodat er een kleine hoeveelheid van de injectieoplossing uit het uiteinde stroomt.Breek de naald opnieuw af in geval van verstopping, punctureer het Corian en beweeg de punt van de injectienaald net binnen de binnenlaag om de kans op reflux in de naald te verkleinen. Stel de houdingsdruk van de injector scherp in op ongeveer 80 tot 100 hectare Pascal. Doorboor het membraan en breng de naald aan in het cytoplasma.Injecteer het embryo. Bekijk het embryo van opzij om te bevestigen dat het geïnjecteerde materiaal gelijkmatig in het cytoplasma is verdeeld. Vloeistoffen die correct in het cytoplasma zijn geïnjecteerd, hebben een wazige grens; materiaal dat te diep in de dooier is geïnjecteerd, heeft een duidelijke grens en zal niet naar het cytoplasma worden overgedragen.Breng de geïnjecteerde embryo's over naar een schone schaal met embryo-medium en laat ze zich naar behoefte ontwikkelen in een incubator op de juiste temperatuur. Paneel A toont een representatieve afbeelding van een correcte injectie van rumine dextran in het cytoplasma van een Meca-embryo in het ééncelstadium. Paneel B toont een representatieve afbeelding van een incorrecte injectie van rumine dextran in de dooierzak van een Meca-embryo in het ééncelstadium. De stippellijnen geven de omtrek van het cytoplasma van één cel aan.Panel C en D tonen respectievelijk de embryo's uit panel A en B ongeveer 30 uur na injectie. Let op dat het lichaam van het embryo in panel D niet rood is, omdat de kleurstof onjuist in de dooierzak is geïnjecteerd. We hebben u zojuist laten zien hoe u nucleïnezuren of tracers micro-injecteert in het eencellige stadium van de donkerdere embryo's.Bij het uitvoeren van deze procedure is het belangrijk om embryo's in het juiste stadium te hebben voor een succesvolle injectie. Dat was alles. Bedankt voor het kijken en veel succes met uw experimenten.

microinjection-of-medaka-embryos-for-use-as-a-model-genetic-organism

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Micro-injectie is een gevestigde en effectieve methode voor het introduceren van vreemde stoffen in bevruchte zebravis embryo's. Hier tonen we een robuuste micro-injectie techniek voor het uitvoeren van mRNA overexpressie en morfolino oligonucleotide-gen knock-down studies in de zebravis.

Micro-injectie van mRNA en morfolino antisense oligonucleotiden in zebravis embryo&#39;s.

Deze video laat zien hoe morfolino of mRNA kan worden geïnjecteerd in zebravis embryo's in het een-cellig stadium te verlagen of te verhogen van het niveau van specifieke gen-producten tijdens de verdere ontwikkeling.

Micro-injectie van de zebravis embryo&#39;s Gene functie analyseren

Door de harde chorion en zachte embryo's, manipulatie van embryo's medaka is meer betrokken dan in de zebravis. Deze video laat stap-voor-stap procedures voor hoe medaka embryo's te manipuleren, waaronder dechorionation, montage in agarose voor de beeldvorming en de cel transplantatie voor de productie van hersenspinsels. Deze procedures zijn essentieel voor medaka en zebravis gebruik in een laboratorium ten volle te profiteren van hun complementaire eigenschappen te nemen voor de genetische...

Dechorionation van Medaka Embryo&#39;s en Cell Transplantation voor de generatie van chimaeren

Deze video beschrijft een techniek van Embryo microinjection om verbindingen in Zebrafish dooierzak te leveren.

Embryo Microinjection: Een techniek om een verbinding in de Zebrafish Yolk te leveren

Microinjectie is een veelgebruikte techniek gebruikt om DNA constructen mRNA, morfolino antisense oligonucleotiden of andere behandelingen te leveren in eieren, embryo's en cellen van verschillende soorten.

High Throughput micro-injecties van Sea Urchin Zygotes

Methoden die morphant embryo's zijn essentieel voor ontwikkelingsstoornissen mechanismen en gen-regulatorische netwerken te bestuderen. De zee ster Patiria miniata is een opkomende modelsysteem voor deze studies. Hier presenteren we een protocol voor het verkrijgen van gameten, producerende culturen van embryo's, en snelle micro-injectie van zygoten van deze soort.

Een methode voor micro-injectie van Patiria Minata Zygotes

De mediterrane fruitvlieg (Ceratitis capitata) (Diptera: Tephritidae) is een wereldwijde plaag in de landbouw. Een dieper begrip van zijn biologie is cruciaal voor het beheersen van fruitvliegpopulaties en daarmee het verminderen van de economische impact. Micro-injectie van embryo's is een fundamenteel hulpmiddel dat zowel transformatie van de kiemlijn als reverse genetica studies in deze soort mogelijk maakt.

Levering van nucleïnezuren door middel van Embryo micro-injectie in de Worldwide Landbouw Pest Insect,<em&gt; Middellandse-Zeevlieg</em

Kleine laboratoriumvissen zijn populaire modellen geworden voor botonderzoek naar de mechanismen die ten grondslag liggen aan menselijke botaandoeningen en voor het screenen van botmodulerende geneesmiddelen. In dit rapport beschrijven we een protocol om het effect van alendronaat op botcellen bij medaka-larven met osteoporose-laesies te beoordelen.

Drug Treatment en<em&gt; In Vivo</em&gt; Imaging van Osteoblast osteoclasten Interacties in een Medaka Fish Osteoporosis Model

Een eenvoudige en efficiënte microinjection protocol voor het bewerken van het gen in channel catfish embryo's met behulp van de CRISPR/Cas9-systeem wordt gepresenteerd. In dit protocol, begeleiden RNAs en Cas9 eiwit in de dooier van één-cel embryo's waren microinjected. Dit protocol is gevalideerd door kloppen uit twee channel catfish immuun-gerelateerde genen.

Microinjection van CRISPR/Cas9 eiwit in Channel Catfish, Ictalurus punctatus, embryo's voor Gene Editing

Dit artikel beschrijft twee snelle en efficiënte methoden voor het verzamelen van sperma van het kleine modelvis medaka (Oryzias latipes), evenals een protocol voor het betrouwbaar beoordelen van de spermakwaliteit met behulp van computerondersteunde spermaanalyse (CASA).

Spermaverzameling en computerondersteunde spermaanalyse in het Teleost-model Japanse Medaka (Oryzias latipes)

Leer micro-injectie van Medaka-embryo's voor genetisch onderzoek in ontwikkelingsbiologie. Deze methode maakt manipulatie van genexpressie op ééncellig niveau mogelijk voor functionele studies.

Micro-injectie van Medaka embryo's voor gebruik als een model organisme Genetische

Meer video's verkennen