Name: Uitgebreide and Rendabele laboratorium controle van HIV / AIDS: een Afrikaanse Role Model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-10-31T17:00:00.000+00:00
Duration: 23 min 56 s
Description: Leer hoe flowcytometrie wordt ingezet voor HIV-monitoring in Zuid-Afrika door middel van CD4- en CD45-assays. Deze methode verbetert diagnostische efficiëntie in laboratoria met beperkte middelen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Speciale dank gaat uit naar de National Health Laboratory Service (NHLs) van de Republiek Zuid-Afrika voor de nationale organisatie van de hiv-gerelateerde stroom diagnostische diensten (http: \ \ www.nhls.ac.za en http://www.plgcd4 . netto). Featured De studies werden uitgevoerd bij de afdeling Hematologie en Moleculaire Geneeskunde, Witwatersrand Universiteit (Johannesburg, Zuid-Afrika, ondersteund door hoofd van de afdeling, prof. Wendy Stevens). De auteurs hebben kreeg geen steun toekennen voor deze publicatie van commerciële bedrijven of financiers. Geformuleerde meningen zijn die van de auteurs zonder dat die de opvattingen van de instellingen van de Universiteit van de Witwatersrand of de Zuid-Afrikaanse NHLs.

<ol><li>UNAIDS Report on the global HIV/AIDS epidemic. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.unaids.org/en/ KnowledgeCentre/HIVData/GlobalReport/2008/2008_Global_report.asp">http://www.unaids.org/en/ KnowledgeCentre/HIVData/GlobalReport/2008/2008_Global_report.asp</a> (2008).</li>
<li>World Health Organization Rapid advice: Antiretroviral therapy for HIV infection in adults and adolescents. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.who.int/hiv/pub/arv/rapid_advice_art.pdf">http://www.who.int/hiv/pub/arv/rapid_advice_art.pdf</a> (2009).</li>
<li>Mugyenyi, P. DART Trial Team. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Routine+versus+clinically+driven+laboratory+monitoring+of+HIV+antiretroviral+therapy+in+Africa+%28DART%29%3A+a+randomized+non-inferiority+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Routine versus clinically driven laboratory monitoring of HIV antiretroviral therapy in Africa (DART): a randomized non-inferiority trial.</a> Lancet. 375, 123-131 (2009).</li>
<li>Donnell, D., Kiarie, J., Thomas, K., Baeten, J., Lingappa, J., Cohen, C., Celum, C. ART and risk of heterosexual HIV-1 transmission in HIV-1 serodiscordant African couples: A Multinational Prospective Study. 17th Conference on Retroviruses and Opportunistic Infections, , (2010).</li>
<li>Montaner, J., Wood, E., Kerr, T., Yip, B., Lima, V., Shannon, K., Harrigan, R., Hogg, R. Association of Expanded HAART Coverage with a Decrease in New HIV Diagnoses, Particularly among Injection Drug Users in British Columbia, Canada. 17th Conference on Retroviruses and Opportunistic Infections, , (2010).</li>
<li>Petti, C. A., Polage, C. R., Quinn, T. C., Ronald, A. R., Sande, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+medicine+in+Africa%3A+a+barrier+to+effective+health+care%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Laboratory medicine in Africa: a barrier to effective health care.</a> Clin Infect Dis. 42, 377-382 (2006).</li>
<li>Brown, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+health%3A+Great+expectations%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ%22%5BJournal%5D)">Global health: Great expectations.</a> BMJ. 334, 874-876 (2007).</li>
<li>Crisp, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turning+the+World+Upside+Down%5BTitle%5D)+AND+%22Royal+Society+of+Medicine+Press%22%5BJournal%5D)">Turning the World Upside Down.</a> Royal Society of Medicine Press. , (2009).</li>
<li>Hecht, R., Bollinger, L., Stover, J., McGreevey, W., Muhib, F., Madavo, C. E., de Ferranti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+choices+in+financing+the+response+to+the+global+HIV%2FAIDS+pandemic%5BTitle%5D)+AND+%22Health+Aff%22%5BJournal%5D)">Critical choices in financing the response to the global HIV/AIDS pandemic.</a> Health Aff. 28, 1591-1605 (2009).</li>
<li>Lawrie, D., Coetzee, L. M., Glencross, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+continuous+quality+control+incorporating+sample-to+sample+assessment+of+optical+alignment%2C+fluorescence+sensitivity+and+volumetric+operation+fo+flow+cytometers%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">A model for continuous quality control incorporating sample-to sample assessment of optical alignment, fluorescence sensitivity and volumetric operation fo flow cytometers.</a> Cytometry B Clin Cytom. 78, 201-208 (2010).</li>
<li>Loken, M. R., Brosnan, J. M., Bach, B. A., Ault, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+optimal+lymphocyte+gates+for+immunophenotyping+by+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry%22%5BJournal%5D)">Establishing optimal lymphocyte gates for immunophenotyping by flow cytometry.</a> Cytometry. 11, 453-459 (1990).</li>
<li>Glencross, D., Scott, L. E., Jani, I. V., Barnett, D., Janossy, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD45-assisted+PanLeucogating+for+accurate%2C+cost-effective+dual-platform+CD4%2B+T-cell+enumeration%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry%22%5BJournal%5D)">CD45-assisted PanLeucogating for accurate, cost-effective dual-platform CD4+ T-cell enumeration.</a> Cytometry. 50, 69-77 (2002).</li>
<li>Glencross, D. K., Janossy, G., Coetzee, L. M., Lawrie, D., Aggett, H. M., Scott, L. E., Sanne, I., McIntyre, J. A., Stevens, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+affordable+PanLeucogated+CD4%2B+testing+with+proactive+internal+and+external+quality+assessment%3A+in+support+of+the+South+African+national+comprehensive+care%2C+treatment+and+management+programme+for+HIV+and+AIDS%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">Large-scale affordable PanLeucogated CD4+ testing with proactive internal and external quality assessment: in support of the South African national comprehensive care, treatment and management programme for HIV and AIDS.</a> Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S40-S51 (2008).</li>
<li>Dalgleish, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CD4+%28T4%29+antigen+is+an+essential+component+of+the+receptor+for+the+AIDS+retrovirus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The CD4 (T4) antigen is an essential component of the receptor for the AIDS retrovirus.</a> Nature. 312, 763-767 (1984).</li>
<li>Liu, Z., Cumberland, W. G., Hultin, L. E., Prince, H. E., Detels, R., Giorgi, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevated+CD38+antigen+expression+on+CD8%2B+T+cells+is+a+stronger+marker+for+the+risk+of+chronic+HIV+disease+progression+to+AIDS+and+death+in+the+Multicenter+AIDS+Cohort+Study+than+CD4%2B+cell+count%5BTitle%5D)+AND+%22J+Acquir+Immune+Defic+Syndr+Hum+Retrovirol%22%5BJournal%5D)">Elevated CD38 antigen expression on CD8+ T cells is a stronger marker for the risk of chronic HIV disease progression to AIDS and death in the Multicenter AIDS Cohort Study than CD4+ cell count.</a> J Acquir Immune Defic Syndr Hum Retrovirol. 16, 83-92 (1997).</li>
<li>Glencross, D. K., Janossy, G., Coetzee, L. M., Lawrie, D., Scott, L. E., Sanne, I., McIntyre, J. A., Stevens, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD8%2FCD38+activation+yields+important+clinical+information+of+effective+antiretroviral+therapy%3A+findings+from+the+first+year+of+the+CIPRA-SA+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">CD8/CD38 activation yields important clinical information of effective antiretroviral therapy: findings from the first year of the CIPRA-SA cohort.</a> Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S131-S140 (2008).</li>
<li>Coetzee, L. M., Tay, S. S., Lawrie, D., Janossy, G., Glencross, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+research+tool+to+routine+test%3A+CD38+monitoring+in+HIV+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">From research tool to routine test: CD38 monitoring in HIV patients.</a> Cytometry B Clin Cytom. 76, 375-384 (2009).</li>
<li>Larsen, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fragile+environments+of+inexpensive+CD4%2B+T-cell+enumeration+in+the+least+developed+countries%3A+strategies+for+accessible+support%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">The fragile environments of inexpensive CD4+ T-cell enumeration in the least developed countries: strategies for accessible support.</a> Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S107-S116 (2008).</li>
<li>Glencross, D. K., Coetzee, L. M., Lawrie, D., Sanne, I., McIntyre, J. A., Janossy, G., Stevens, W. Longitudinal monitoring of CD38 activation can obviate costly viral load testing in 60% of patients on ART. 11th IUSTI World Congress, , (2009).</li>
<li>Bergeron, M., Lustyik, G., Phaneuf, S., Ding, T., Nicholson, J. K., Janossy, G., Shapiro, H., Barnett, D., Mandy, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stability+of+currently+used+cytometers+facilitates+the+identification+of+pipetting+errors+and+their+volumetric+operation%3A+%22time%22+can+tell+all%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">Stability of currently used cytometers facilitates the identification of pipetting errors and their volumetric operation: "time" can tell all.</a> Cytometry B Clin Cytom. 52, 37-39 (2003).</li>
<li>Coulter, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCoulter%2C+B+%22Flow+Cytometer+Alignment+Verification+Package+insert+of+Flow-CheckTM+Fluorospheres.+Volume+PN+4276179-LA%22">Flow Cytometer Alignment Verification Package insert of Flow-CheckTM Fluorospheres. Volume PN 4276179-LA</a>. , Beckman Coulter USA. Galway. (2008).</li>
<li>Coulter, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCoulter%2C+B+%22Flow-SetTM+Fluorospheres+%28Flow+Cytometer+Standardization+Fluorospheres%29.+Package+insert+of+Flow-SetTM+Fluorospheres.+Volume+PN+6607007%22">Flow-SetTM Fluorospheres (Flow Cytometer Standardization Fluorospheres). Package insert of Flow-SetTM Fluorospheres. Volume PN 6607007</a>. , Beckman Coulter USA. Galway. (2007).</li>
<li>Coulter, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCoulter%2C+B+%22Immuno-TrolTM+Cells.+Package+insert+of+Immuno-TrolTM+Cells.+Volume+PN+6607077%22">Immuno-TrolTM Cells. Package insert of Immuno-TrolTM Cells. Volume PN 6607077</a>. , Beckman Coulter USA. Galway. (2007).</li>
<li>Beckman Coulter Hematology IQAP program. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.beckmancoulter.com/wsrportal/wsr/support/quality-assurance-programs/interlaboratory-quality-assurance-program-iqap/index.htm">https://www.beckmancoulter.com/wsrportal/wsr/support/quality-assurance-programs/interlaboratory-quality-assurance-program-iqap/index.htm</a> (2009).</li>
<li>UKNEQAS. United Kingdom National External Quality Assessment Service. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.ukneqas.org.uk">http://www.ukneqas.org.uk</a> (2009).</li>
<li>Glencross, D. K., Aggett, H. M., Stevens, W. S., Mandy, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((African+regional+external+quality+assessment+for+CD4+T-cell+enumeration%3A+development%2C+outcomes%2C+and+performance+of+laboratories%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">African regional external quality assessment for CD4 T-cell enumeration: development, outcomes, and performance of laboratories.</a> Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S69-S79 (2008).</li>
<li>Tilling, R., Kinloch, S., Goh, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parallel+decline+of+CD8%2B%2FCD38%2B%2B+T+cells+and+viraemia+in+response+to+quadruple+highly+active+antiretroviral+therapy+in+primary+HIV+infection%5BTitle%5D)+AND+%22AIDS%22%5BJournal%5D)">Parallel decline of CD8+/CD38++ T cells and viraemia in response to quadruple highly active antiretroviral therapy in primary HIV infection.</a> AIDS. 16, 589-596 (2002).</li>
<li>Coulter, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCoulter%2C+B+%22FLOWCARETM+PLG+CD4+Reagent+%28CD45-FITC%2FCD4-PE%29.+Package+insert+of+FLOWCARETM+PLG+CD4+Reagent%22">FLOWCARETM PLG CD4 Reagent (CD45-FITC/CD4-PE). Package insert of FLOWCARETM PLG CD4 Reagent</a>. , Beckman Coulter USA. Galway. (2004).</li>
<li>Coulter, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCoulter%2C+B+%22Flow-CountTM+Fluorospheres.+PN+7507992-M%22">Flow-CountTM Fluorospheres. PN 7507992-M</a>. , Beckman Coulter USA. Galway. (2007).</li>
<li>Scott, L. E., Glencross, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+reproducibility+of+single+analysis%2C+single+platform+CD4+cell+counts+in+a+high+volume%2C+low+resource+laboratory+setting+using+sequential+bead+count+rates%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">Monitoring reproducibility of single analysis, single platform CD4 cell counts in a high volume, low resource laboratory setting using sequential bead count rates.</a> Cytometry B Clin Cytom. 67, 31-32 (2005).</li>
<li>Storie, I., Sawle, A., Goodfellow, K., Whitby, L., Granger, V., Reilly, J. T., Barnett, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow+rate+calibration%3A+a+new+approach+for+performing+absolute+cell+counts%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">Flow rate calibration: a new approach for performing absolute cell counts.</a> Cytometry B Clin Cytom. 55, 1-7 (2003).</li>
<li>Coetzee, L., Lawrie, D., Stevens, W., Glencross, D. K. Evaluation of pipetting methodology to assess precision and accuracy of single platform PLG/CD4 enumeration. 2nd SA-AIDS Congress, Durban, South Africa, , (2006).</li>
<li>NHLS Training Manual, PLG/CD4 Workshop. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.plgcd4.net/">http://www.plgcd4.net/</a> (2008).</li>
<li>Borowitz, M. J., Guenther, K. L., Shults, K. E., Stelzer, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunophenotyping+of+acute+leukemia+by+flow+cytometric+analysis.+Use+of+CD45+and+right-angle+light+scatter+to+gate+on+leukemic+blasts+in+three-color+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Pathol%22%5BJournal%5D)">Immunophenotyping of acute leukemia by flow cytometric analysis. Use of CD45 and right-angle light scatter to gate on leukemic blasts in three-color analysis.</a> Am J Clin Pathol. 100, 534-540 (1993).</li>
<li>Mokone, G. N., Lawrie, D., Coetzee, L., Glencross, D. K. Interpretation of CD45 patterns in the PanLeucoGating CD4 test can be used for diagnosis of white cell abnormalities. Poster presentation. , (2007).</li>
<li>Lawrie, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+wide-spread+clinical+uses+of+PanLeucoGating+technology+in+the+HIV+diagnosis+oriented+immunohaematology+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22PhD+Thesis%2C+in+preparation%22%5BJournal%5D)">The wide-spread clinical uses of PanLeucoGating technology in the HIV diagnosis oriented immunohaematology laboratory.</a> PhD Thesis, in preparation. , (2010).</li>
<li>Badri, M., Lawn, S. D., Wood, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utility+of+CD4+cell+counts+for+early+prediction+of+virological+failure+during+antiretroviral+therapy+in+a+resource-limited+setting%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Utility of CD4 cell counts for early prediction of virological failure during antiretroviral therapy in a resource-limited setting.</a> BMC Infect Dis. 8, 89(2008).</li>
<li>Peter, T., Badrichani, A., Wu, E., Freeman, R., Ncube, B., Ariki, F., Daily, J., Shimada, Y., Murtagh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+in+implementing+CD4+testing+in+resource-limited+settings%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">Challenges in implementing CD4 testing in resource-limited settings.</a> Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S123-S130 (2008).</li>
<li>Denny, T. N., Gelman, R., Bergeron, M., Landay, A., Lam, L., Louzao, R., Mandy, F. F., Schmitz, J., Spira, T., Wilkening, C., Glencross, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+North+American+multilaboratory+study+of+CD4+counts+using+flow+cytometric+panLeukogating+%28PLG%29%3A+a+NIAID-DAIDS+Immunology+Quality+Assessment+Program+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">A North American multilaboratory study of CD4 counts using flow cytometric panLeukogating (PLG): a NIAID-DAIDS Immunology Quality Assessment Program Study.</a> Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S52-S64 (2008).</li>
<li>Janossy, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+changing+pattern+of+%22smart%22+flow+cytometry+%28S-FC%29+to+assist+the+cost-effective+diagnosis+of+HIV%2C+tuberculosis%2C+and+leukemias+in+resource-restricted+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+J%22%5BJournal%5D)">The changing pattern of "smart" flow cytometry (S-FC) to assist the cost-effective diagnosis of HIV, tuberculosis, and leukemias in resource-restricted conditions.</a> Biotechnol J. 3, 32-42 (2008).</li>
</ol>

De internationale patent rechten voor CD4 hier beschreven methode is in handen van de Zuid-Afrikaanse NHLs en momenteel onder licentie aan BCI, Miami, Fl, USA.

In de afgelopen jaren het goede doel-gedreven en het verlenen van toegewezen programma&#39;s hebben bijgedragen aan de totstandkoming van een aantal uitstekende klinische praktijken in de bron beperkte gebieden van de wereld met een hoge HIV-last. De ART-programma&#39;s zijn succesvol geweest in het verminderen van de sterfte en worden nu geïnitieerd op hogere CD4-tellingen 2,3. Er zijn al aanwijzingen dat deze nieuwe maatregelen zal de verspreiding van HIV-infectie 4,5 dalen, ondanks het ontbreken van een HIV-specifieke vaccin. In onze video-document dat we bij het monitoren van patiënten op de ART, kunnen deze technieken beter worden gericht en meer kosten-effectief dan die waargenomen bij de dagelijkse praktijk uitgevoerd in West-laboratoria (Lijst 1). Zo&#39;n een Afro-geleide aanpak misschien wel essentieel voor de modernisering van de laboratoria te ondersteunen op een moment dat HIV-infectie, die behandeld worden met ART, wordt steeds meer een chronische ziekte. Zo&#39;n controle van de ART vereist nauwkeurige CD4 tellen en viral-load gerelateerde technologie, een meer veeleisende taak dan om gewoon het uitvoeren van een CD4-telling voor het plaatsen van patiënten in willekeurige groepen om een beslissing te helpen over het starten van ART 16. Met behulp van deze diagnostiek, dat wil zeggen het gebruik van de CD8/CD38 test, is het mogelijk het verminderen van de VL-gerelateerde kosten van toezicht bij&gt; 60% van de patiënten op de ART 16,19. Het is ook belangrijk om te benadrukken dat het de CD8/CD38-test 16,17, en niet het aantal CD4-cellen 37, die waarschijnlijk op te halen vroege tekenen van VL rebounds en / of het gebrek aan therapietrouw bij het ​​nemen van de medicatie. Een essentieel element van een gecoördineerde rendabele centrale dienst is de beschikbaarheid van een grootschalige nationale of regionale netwerk wordt ondersteund door experts en academische adviseurs die bekend zijn met de technische en medische aspecten van de operatie. Dit wordt aangetoond door de activiteiten van de Zuid-Afrikaanse NHLs netwerk en de CD4-PLG.net opleidingsprogramma&#39;s 33, 36 die aanmoediging, het onderwijs en de kwaliteit van de beoordeling voor de kleinere centra en deze kan ook &#39;point-of-care&#39; diensten. Belangrijk is dat de activiteiten in Midden-en point-of-care laboratoria zijn complementair. Terwijl de eerste is de dubbele rol van het verstrekken van een kosten-effectieve grootschalige dienstverlenende werking en als basis / bijscholing van de perifere laboratoria 33,38, de laatste draagt ​​bij aan de verspreiding van ART controleren door het aantrekken van HIV + patiënten die in aanmerking komen voor ART van een grotere basis, inbegrip van de plattelandsgebieden klinieken. Hier enige voorzichtigheid is nodig, omdat point-of-care diagnostiek kan veel duurder en niet automatisch garanties voor nauwkeurigheid 38. Het is daarom verstandig om de two-tier systeem te behouden en om de coördinatie tussen de twee lagen zonder dat een arm af te nemen. Tot slot, op het gebied van de diagnostische controle van de klinische behandeling van infectieziekten een noodzakelijke kostenbesparing kan worden bereikt door apt diensten die goedkoper en beter gecoördineerde moderne technologie te gebruiken met een aanzienlijk verbeterde kwaliteit van 13,39. Goed georganiseerde nationale (en regionale) diagnostische diensten bepalingen moeten beter worden ondersteund 6-8 door het vermijden van een scenario toen vrijwel alle subsidies wordt verspild aan dure en / of onbeproefd methoden zodra deze worden geïmporteerd uit rijke landen, zonder een zorgvuldige pre- preventieve constructieve toetsing. Ook moet een meer flexibele vormgeving van klinisch therapeutisch onderzoek met de volledige betrokkenheid van de lokale artsen en medisch personeel leiden tot de vermindering van onnodig frequente en / of over-ambitieuze laboratoriumonderzoek 3. Dit beleid zou meer kans om een ​​vollediger gebruik van de beschikbare accurate diagnose resulteert in een gecoördineerde klinische / laboratorium beoordeling van patiënten over kunst. Deze slimme diagnose kunnen ook een pionier voor de resource-arme landen 8 op het gebied van tuberculose en leukemie met behulp van een bestaand bekende flowcytometrische platform 40.

uitgebreide &amp; rendabele laboratorium controle van hiv / aids: een afrikaanse role model

Comprehensive &amp; Cost Effective Laboratory Monitoring of HIV/AIDS: an African Role Model

We presenteren de video over helpen anti-retrovirale therapie (ART) door een laboratorium apt-service - wat neerkomt op een Zuid-Afrikaanse rolmodel voor economisch op grote schaal diagnostische testen. In de lage-inkomenslanden goedkoop ART heeft getransformeerd de vooruitzichten voor de overleving van HIV-seropositieve patiënten, maar er zijn twijfels of er behoefte is aan het laboratorium monitoring van ART, en wat kost - in situaties waarbij de algemene kwaliteit van pathologie diensten kan nog steeds zeer laag. Het juiste antwoord is om vast te stellen economisch gezond diensten met een betere coördinatie en strengere interne kwaliteitsbeoordeling dan gezien wordt in de westerse landen. Deze video, gefotografeerd op locatie in de National Health Laboratory Services (NHLs-SA) aan de Witwatersrand Universiteit in Johannesburg, Zuid-Afrika, biedt een dergelijke gecoördineerde regeling uitbreiding van de originele twee-kleuren CD4-CD45 PanLeucoGating strategie (PLG). Dus de zes modules van de video presentatie onthullen de eenvoud van een 4-kleuren flowcytometrische assay voor hematologische, immunologische en virologie-gerelateerde testen te combineren in een enkele buis. Deze video modules zijn: (i) de set-up van de instrumenten, (ii) monster preparaten, (iii) het testen van absolute tellingen en bewaken van de kwaliteit voor elk monster door bead-count-rate, (iv) de heamatological CD45 test voor witte bloedcellen tellingen en differentiëlen; (v) van de CD4-tellingen, en (vi) de activering van CD8 + T-cellen gemeten door CD38 weer te geven, een viral load gerelateerde parameter. De potentiële kostenbesparingen zijn opmerkelijk. Deze regeling is een goed voorbeeld voor de haalbaarheid van het uitvoeren van&gt; 800-1000 testen per dag met een strengere kwaliteitscontrole dan die welke in het westen van laboratoria, en ook met een overdracht van technologie naar andere laboratoria binnen een NHLs-SA-netwerk. Deskundige adviseurs, laboratorium managers en beleidsmakers die drager zijn van de plicht van het nemen van beslissingen over de invoering van moderne medische technologie zijn vaak niet in een positie om de laatste technische details zoals uitgevoerd in de grote regionale laboratoria met enorme lasten van de werklast te zien. Vandaar dat deze video toont details van deze nieuwe ontwikkelingen.

Anti-retrovirale therapie van HIV / aids te behandelen wordt bewaakt in Zuid-Afrika op grote schaal. Flowcytometrie is gecombineerd voor hematologie (CD45), immunologie (CD4) en virale-load verbonden CD38 test. Opgenomen in NHLs-SA laboratoria, Johannesburg, deze moderne methoden zijn kostenefficiënt met een verhoogde lokale interne kwaliteitszorg, die als rolmodellen voor de resource-beperkte diagnostiek.

Uitgebreide &amp; Rendabele laboratorium controle van HIV / AIDS: een Afrikaanse Role Model

Wij presenteren de video over het ondersteunen van antiretrovirale therapie (ART) door middel van een geschikte laboratoriumdienst - een Zuid-Afrikaans rolmodel voor economische ...

Het monoklonale antilichaam dat in deze assays wordt gebruikt, wordt aangeduid als CD four. Dit is het basisreagens om ERT-lymfocyten aan te tonen. Hiermee wordt het aantal CD four-positieve lymfocyten in het bloed gemeten, die geleidelijk worden vernietigd door HIV.Zo is het aantal CD4-cellen gerelateerd aan de immunodeficiëntie van de patiënt. Een ander reagens, CD45, wordt gebruikt om alle witte bloedcellen te tellen, wat tevens een nuttige routineanalyse is. Een aanvullende test op de zogenaamde activatiemarkers verlaagt de kosten van virale load-analyses, die zeer hoog kunnen zijn.Deze studies zijn uitgevoerd aan de Whit Waters Rand University Johannesburg in Zuid-Afrika onder begeleiding van professor Deborah Glen Cross en professor Wendy Stevens. Het doel van deze film is tweeledig. In het eerste deel ziet u hoe een goed uitgerust laboratorium een assay uitvoert voor CD4, CD45 en virale load.Dit is verdeeld over zes modules. Deze technische stappen worden vervolgens geïmplementeerd in 70 laboratoria in heel Zuid-Afrika. In het tweede deel wordt de relatie besproken tussen een groot centraal laboratorium dat dagelijks duizenden tests uitvoert en de meer perifere laboratoria die zich dicht bij de zorgplaats van de patiënten bevinden.De discussie richt zich hier op hoe de ondersteuning bij de behandeling van meer hiv-geïnfecteerde patiënten met antiretrovirale geneesmiddelen kan worden gefaciliteerd. Mijn naam is Neil Ney. Ik ben werkzaam als sec.Ik ben een flowcytometrie-technoloog. Ik werk in het General Hospital in Johannesburg, Zuid-Afrika. Dit is de flowcyclus.Hier maken we gebruik van flowcytometrie. De Beckman-apparatuur voert de afvoer uit. In essentie werkt de bibliotheek in een ritme van afvalverwerking.Er zijn taken die we dagelijks uitvoeren, zoals het runnen van de cel telling- en flowcytometrie-instrumentcontroles. Er zijn zaken die we wekelijks doen, zoals het archiveren van de resultaten. Er is ook werk dat we maandelijks doen, zoals het onderhoud.Wanneer de reinigingscyclus is voltooid, initialiseren we het apparaat. We drukken op de startknop. We draaien twee landstrips, twee blade-buizen, of u kunt twee principe- en twee gedestilleerde waterbuizen draaien.Nadat alle reinigingswerkzaamheden zijn voltooid, wordt er als eerste een vloercontrole uitgevoerd om de laseruitlijning te controleren en de spanning te monitoren, zodat kan worden vastgesteld of de spanning constant blijft. Als de vloercontrole in de ochtend mislukt, moet deze opnieuw worden uitgevoerd. Indien het probleem aanhoudt, moet er contact worden opgenomen met main FA emissions om de machine te laten nakijken.omdat er mogelijk iets mis is met de laseruitlijning of de voltages. We voeren elke ochtend immuno-assays uit, zowel de normale als de hoge concentratie. Deze kunnen gedurende ten minste de achtursdienst worden uitgevoerd.We voeren nu de high immuno cho uit. Ik ga controleren of onze celconcentraties binnen de bereiken vallen. Mijn naam is Denise Dory.Ik ben de laboratoriummanager van het stads laboratorium in het ziekenhuis van Johannesburg. In die hoedanigheid vervul ik een nationale rol. Ik ben betrokken geweest bij het opzetten van kwaliteitsborgingsprocedures om de nauwkeurigheid en reproduceerbaarheid van de CD4-telling te waarborgen, niet alleen in ons eigen laboratorium, maar op nationale basis in Zuid-Afrika.De bereiding van ping CD4-monsters is zeer eenvoudig. We gebruiken twee monoklonale antilichamen van verschillende kleuren, CD4 en CD45. Deze worden normaal gesproken voorgemengd geleverd in één bruin flesje dat beide antilichamen bevat.Om te beginnen brengen we 10 µL van het CD 45 CD vier-antilichaam aan in de bodem van een schone buis. Vervolgens is de volgende stap het toevoegen van het bloed. Voor deze methode gebruiken we 100 µL bloed.Het moet nauwkeurig worden voorbereid. Vervolgens worden het bloed en het antilichaam met elkaar gemengd. De laatste fase van deze voorbereiding bestaat uit het toevoegen van eising-reagens.En zoals u kunt zien, zodra u het lysereagens toevoegt, verandert het bloed van een ondoorzichtige oplossing in een gehemolyseerde oplossing, waarbij u daadwerkelijk door de buis heen kunt kijken. Dit is een zeer eenvoudige methode die handmatig kan worden uitgevoerd, maar als u grote hoeveelheden monsters verwerkt, zoals de meeste laboratoria doen, zou u een geautomatiseerd systeem zoals dit gebruiken, dat de pipetteerhandelingen voor u uitvoert. De voorbereiding hoeft echter niet noodzakelijkerwijs via een geautomatiseerd systeem te gebeuren als u de bead-count rate gebruikt, omdat de beads die we toevoegen ons vertellen of iemand het monster correct heeft geprepareerd.De laatste stap voordat we dit monster op een analyzer plaatsen, is het toevoegen van honderd microliters van de beads, die in een buisje zoals dit worden geleverd. Het monster is vervolgens klaar om op de flowcytometer te worden geladen. Mijn naam is sit MoFA, ik ben de kwaliteitsfunctionaris van dit flowcytometrielaboratorium en ik ben gepassioneerd door flowcytometrie.We hebben hier zeer mooie apparaten, de Epic Excels, die zeer stabiel zijn. Eigenlijk voegen we onze beads toe, die ons ook de stabiliteit van de instrumenten tonen. Dus hoe monitoren we onze flow count rate?Een lage telrate draait volledig om het team. Recentelijk zijn we gestart met de geautomatiseerde voorbereiding van onze instrumenten en monsters, maar de monitoring van de stroomsnelheid blijft de relevante QC-controle. Onze flowcount vertoont deze rechte lijn, die aantoont hoe perfect de flowcount-rate is, maar deze blijven overeind.Er zijn nog steeds enkele uitschieters; deze kunnen worden veroorzaakt door pipetteerfouten, maar als we de mogelijkheid van pipetteerfouten uitsluiten, kunnen we controleren of ons instrument correct functioneert. Vervolgens kunnen we de technici vragen om ons instrument te komen repareren, zodat het weer inzetbaar is. Dit is Zo ly van Beckman Ter. Hij is onze technicus.Ik kom langs zodra er een probleem is, en daarnaast kom ik elke zes maanden voor het onderhoud, aangezien onze monsters via de instrumenten worden geanalyseerd. Als QA-functionaris is het mijn taak om constant dit scherm te controleren, dat onze flow-count rate bewaakt. Zo zie ik direct wanneer er een uitschieter is.Ik zie dat er een uitschieter is. Er zijn op dit moment eigenlijk vijf instrumenten in bedrijf omdat onze werkdruk ongelooflijk hoog is en deze twee hier laten simpelweg zien dat het niet de verkregen monsters zijn. Het is slechts de controle die we aan het einde van elke carrousel uitvoeren, maar we zien nog steeds enkele uitschieters.Neem bijvoorbeeld deze op dit instrument, de Epic Excel four. Deze moet absoluut onmiddellijk worden gerepareerd voordat de resultaten van dat hele carrousel worden verzonden en moet na het resetten onmiddellijk worden ingereden vóór de validatie. Ter samenvatting: we hebben vastgesteld dat onze machines optimaal functioneren.We hebben de reproduceerbaarheid van het tellen van de beads gecontroleerd om er zeker van te zijn dat de CD4-tellingen die volgen nauwkeurig zullen zijn. We hebben gecontroleerd of de lasers op onze instrumenten correct zijn uitgelijnd en we hebben de nauwkeurigheid van de tellingen gecontroleerd door twee niveaus van controles uit te voeren. Dit monster, zonder inhoud, de CD4 en CD45, en ik moet beschrijven waarom CD45 zo belangrijk is in onze analyse.CD 45 is een celmarker die alle witte bloedcellen in een monster markeert. In deze context is dit belangrijk omdat het ons in staat stelt het witte celgetal dat we verkrijgen via CD 45 te vergelijken met het witte celgetal van een analyzer voor volledig bloedbeeld. Als u naar deze voorbeelden kijkt, ziet u een printout van een volledig bloedbeeld van een LH seven 50 Beckman Coter-analyzer; we kunnen zien dat we op de flowcytometer met behulp van CD 45, waarbij we de totale witte cellen kleuren, een wit celgetal van 7.1 hebben.We hebben een zeer vergelijkbare CD-gewichtcel telling van 7,175. We zouden een waarde accepteren waarbij het verschil in gewichtcelkegels minder dan 5% is. Een ander toegevoegd voordeel van de inclusie van CD 45 is de differentiële kleuring van CD 45 op witte cellen. Op de flowcytometer kunnen we drie parameters gebruiken, namelijk side scatter, forward scatter en CD 45.Als we naar dit histogram kijken, zijn de lymfocyten duidelijk gedefinieerd. Ze vertonen doorgaans de sterkste kleuring met CD 45 en hebben de laagste complexiteit; het zijn de eenvoudigste cellen met de hoogste CD 45-expressie. De volgende groep cellen zijn onze monocyten.Onze monocyten hebben een iets lagere CD 45-expressie, maar ze zijn complexer dan de lymfocyten. De volgende grote groep cellen, die in een normaal monster de grootste celgroep zou vormen, zijn onze granulaire cellen. Deze populaties zijn de meest voorkomende bloedcellen die in het perifere bloed worden aangetroffen.Het voordeel van het gebruik van CD 45-kleuring op een flowcytometer is dat we een CD4-telling, een absolute telling van de witte bloedcellen en een geautomatiseerde differentiële telling op de flowcytometer kunnen uitvoeren. De CD 45-kleuring stelt ons in staat om differentiële tellingen over langere perioden uit te voeren.We kunnen dit tot 48 uur bewaren als we CD 45-expressie gebruiken. De differentiële tellingen die met deze methode worden uitgevoerd, zijn minder objectief dan bij andere methoden.Neem bijvoorbeeld de gouden standaard van een handmatige differentiële telling, waarmee we leukemische populaties kunnen identificeren; dit vormt ook de basis voor de pan-leukocytaire CD, die hier op het scherm wordt getoond. Het voordeel van CD 45-expressie op witte bloedcellen is tot nu toe nog niet volledig benut in het hematologielaboratorium. Er is een verscheidenheid aan verschillende analyzers voor het volledig bloedbeeld die verschillende technieken gebruiken om differentiële tellingen van witte bloedcellen te verkrijgen.Het gebruik van CD 45 op een flowcytometer zou een uitstekende manier zijn om de differentiële tellingen tussen verschillende hematologie-analyzers te standaardiseren, omdat het één methode zou zijn waaraan alle andere hematologie-analyzers vergeleken kunnen worden. Hallo, mijn naam is Dr. Linda Sier.Ik ben actief betrokken bij HIV-onderzoek waarbij zowel CD4- als CD8-testen worden uitgevoerd. T-lymfocyten kunnen worden onderverdeeld in CD4-positieve cellen en CD8-positieve cellen, waarbij CD4-positieve cellen worden gebruikt om HIV te monitoren bij patiënten onder behandeling. Het probleem met CD4 is echter dat het niet uitsluitend op lymfocyten wordt tot expressie gebracht, maar ook door andere cellen wordt tot expressie gebracht.In het PLG-protocol kijken we naar drie verschillende aspecten om effectief onderscheid te maken tussen monocyten en lymfocyten. Ten eerste gebruiken we complexiteit of granulariteit; hierbij is te zien dat lymfocyten en monocyten voor dat doel van elkaar kunnen worden gescheiden. We maken daarnaast gebruik van CD 45 C, waarmee de lymfocytenpopulatie van de monocytenpopulatie kan worden onderscheiden.De CD4-expressie is sterk op de lymfocyten en intermediair op de monocyten wanneer deze samen met de complexiteit worden geanalyseerd. Het is vrij eenvoudig om onderscheid te maken tussen de CD4-sterke lymfocyten en de CD4-zwakke monocyten; ik laat u een voorbeeld zien van een normaal patiëntmonster waarin u de lymfocyten en de monocyten kunt zien; deze patiënt had een CD4-aantal van meer dan 700. Als we kijken naar een patiënt met een CD4-aantal van 53, ziet u dat, ondanks het lage CD4-aantal, het onderscheid tussen de positieve lymfocyten en de CD4-positieve monocyten nog steeds zeer duidelijk is.Met de PLG-methode zijn wij in staat om dagelijks een groot aantal analyses uit te voeren. In ons laboratorium verwerken we momenteel ongeveer duizend monsters per dag, wat neerkomt op 5 000 monsters per week. Twee weken van ons werk is ongeveer gelijk aan wat er in een heel jaar wordt gedaan.In een Londons ziekenhuis In Zuid-Afrika hebben we 70 NNRS-laboratoria en over een periode van een jaar voeren deze laboratoria ongeveer 1,98 miljoen CD4-testen per jaar uit. Hoi, ik ben Kni. Ik heb nu mijn theepauze, maar als ik klaar ben, zal ik u vertellen over CD38 en virale load.In essentie weten we allemaal dat flowcytometers cellen kunnen tellen, maar ze kunnen ook oppervlaktemoleculen tellen, oftewel moleculen op het celoppervlak. Dit gebeurt door de fluorescentie-intensiteit te meten. Onder standaardomstandigheden, zoals eerder vermeld, gebruiken we CD4 en CD45 via de zogenaamde PLG-methode.We gaan een stap verder door twee tests in één buis te plaatsen. Noem de CD 4 45 PLG testmethode. We gaan dit combineren met een tweekleurige test voor een activatiemarker of een andere parameter die aan de virale load gekoppeld is, namelijk CD 38.De Amerikanen maken gebruik van vierkleurige immunofluorescentie. Zij gebruiken CD4, CD45, CD8 en CD3. Wij gebruiken CD4, CD45, CD8 en we vervangen CD3 door het gebruik van CD38.Ten eerste is het belangrijk om op te merken dat er een baseline CD 38 moet worden bepaald voor een patiënt, aangezien de baseline CD 38 dient als controle voor die specifieke patiënt, en dat is wanneer de virale load hoog is, nietwaar? Ja. Dat is wanneer een patiënt binnenkomt met een hoge virale load en een laag CD 4-getal. Dat is aan het begin, vóór de therapie.We moeten ook letten op CD 38-blips, waarbij er sprake is van een toename in CD 38. Dit is duidelijk bij deze patiënt, waar een plotselinge stijging in de CD 38 MFI te zien is en als u kijkt, is er ook een corresponderende toename in de virale load. Is het mogelijk dat de patiënt op dat moment de medicatie niet innam?Op dit moment is het inderdaad mogelijk dat de patiënt is gestopt met de therapie, aangezien de waarden weer terugkeren naar normaal. Waarom zijn we dan zo tevreden over deze test? Ten eerste combineert deze twee testmethoden in één buis.Ten tweede is het kosteneffectief doordat we een CD 45 witte bloedceltelling, een CD 4-telling en een activatiemarker verkrijgen. Het wordt gebruikt op de instrumenten die momenteel in onze laboratoria aanwezig zijn, waardoor er geen nieuwe instrumenten nodig zijn en personeel gemakkelijk kan worden ingewerkt in het gaten en het voorbereiden van deze monsters. De kosten voor virale load zullen ook dalen, omdat er momenteel bij elk bezoek van een patiënt voor een CD 4-telling ook virale load-tests worden uitgevoerd.Maar als we CD 38 monitoren en vaststellen dat er een toename is in de 38 MFI, kunnen we pas op dat moment de patiëntenmonsters ter viral load-test verzenden. Wat betreft de prestaties van ons Zuid-Afrikaanse nationale programma, het NHLE CD four-programma dat gebruikmaakt van PLG, bieden wij veel ondersteuning aan onze laboratoria. We hebben een centrale faciliteit; deze centrale faciliteit coördineert alle gestandaardiseerde procedures en alle kwaliteitscontroles die zijn gedecentraliseerd naar de afgelegen laboratoria.Zij voeren hun systeem uit en rapporteren via EQA vanuit Afrika terug naar het centrale laboratorium via de ondersteuningsdiensten. Daarnaast wordt er gebruikgemaakt van aanvullende en doorlopende trainingsinitiatieven en ondersteuningsdiensten. Ons programma als groep presteert aanzienlijk beter dan andere nationale programma's, met een verbetering van meer dan 50% in precisie, niet alleen binnen de laboratoria, maar ook tussen de laboratoria.Dat betekent dat CD4-waarden van een laboratorium in Berley zeer vergelijkbaar zullen zijn met die van een laboratorium in Durban, bijvoorbeeld, door gebruik te maken van ons gestandaardiseerde oppervlak. U neemt dat concept en decentraliseert het naar de zorg aan het bed. Ten tweede betekent dit dat de zorg aan het bed zal worden gefaciliteerd via één coördinerende eenheid.Het was duidelijk dat deze inspanningen, getoond door deze toegewijde mensen, conceptuele vooruitgang zijn en niet slechts het resultaat van één specifieke flowcytometer die deze resultaten kan produceren. Dezelfde concepten kunnen worden toegepast bij andere instrumenten, zoals machines van Ton Dickinson of Partec, of machines vervaardigd door Accur of elke andere firma. In feite laten recente ontwikkelingen uit andere landen, bijvoorbeeld India, zien dat zij hun eigen flowcytometrie-industrie zouden moeten starten, die gebruik zou maken van dezelfde technologie.Het enige belangrijke aspect hier was de uitzonderlijke coördinatie. De mensen die denken dat CD4-tellingen de enige doelen zijn, dwalen nu, omdat we hier te maken hadden met uitgebreide bloedceltellingen, absolute aantallen en uitgebreide differentiaties van de bloedceltellingen. We hielden ons bezig met CD4 en we analyseerden ook activatiemarkers, waardoor de assays goedkoper zijn dan vergelijkbare assays voor de virale load zouden zijn.Desalniettemin is dit geen competitie tussen deze activatiemarkers en de virale lasten, maar een complementaire opzet die kosten bespaart op de assays voor virale last. Dit zijn wetenschappelijk gevalideerde onderzoeken, en clinici dienen deze assays in te zetten wanneer de therapietrouw van de patiënt in twijfel wordt getrokken, wanneer de effectiviteit van het geneesmiddel ter discussie staat of wanneer een therapiewijziging noodzakelijk is omdat de patiënt resistentie begint te ontwikkelen. De essentiële conclusie is de huidige goede kwaliteitsborging, wat ons brengt bij het laatste punt: het is veel effectiever om beschikking te hebben over uitstekende centrale laboratoria die flowcytometrie en kwaliteitsborging kunnen bieden en de perifere laboratoria kunnen beoordelen, waardoor deze perifere laboratoria in staat zijn om meer mensen op te nemen in de antiretrovirale therapieregimes.Daarom zien we hier een nieuwe ontwikkeling vanuit de Afrikaanse bodem. Hartelijk dank voor uw aandacht.

comprehensive-cost-effective-laboratory-monitoring-hivaids-an-african

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Kwantificeren niveaus van HIV-1 RNA in het plasma en de volgorde single HIV-1 genoom van individuen met een viral load onder de detectielimiet (50-75 kopieën / ml) is moeilijk. Hier beschrijven we hoe te winnen en te kwantificeren plasma virale RNA met behulp van een real-time PCR-test die een betrouwbare maatregelen HIV-1 RNA beneden tot 0,3 kopieën / ml en hoe virale genomen versterken door enkele genoom, van monsters met een zeer lage viral load.

Versterken en kwantificeren van HIV-1 RNA in HIV-geïnfecteerde personen met een viral load onder de limiet van de Opsporing van Standard Clinical Assays

Een opsomming CD4 methode de α-test wordt beschreven waarbij gebruik geheel speeksel snelle en accurate CD4-tellingen. De α-test kost centen en elimineert de behoefte aan technische opleidingen, dure reagentia zoals monoklonale antilichamen, instrumentatie, koeling, het vervoer van monsters, maar ook het verzamelen en behandelen van bloed.

De α-test: Rapid Celvrije CD4 Enumeration met hele Speeksel

Drug resistentie testen voor HIV-1 geïnfecteerde individuen falende antiretrovirale therapie (ART) kan toekomstige therapieën begeleiden en verbeteren behandelingsresultaten. Het optimaliseren van de individuele en de bevolking gezondheidsresultaten in hoge HIV-prevalentie, maar met beperkte middelen zal uiteindelijk vereisen betaalbaar en toegankelijk resistentie genotypering en interpretatie methoden.

Een betaalbare HIV-1 drug-resistentie Monitoring Methode voor het met beperkte middelen

Hier beschrijven we cellulaire cytotoxiciteit en ronde infectiviteitsassays die zorgen voor een snelle en nauwkeurige screening van verbindingen om hun cellulaire cytotoxiciteit (CC50) bepalen en IC 50-waarden tegen WT en resistente HIV-1.

Snelle screening van HIV reverse transcriptase en integrase-remmers

HIV-1-pathogenese wordt bepaald door zowel virale kenmerken als genetische factoren van de gastheer. Hier beschrijven we een robuuste methode die reproduceerbare metingen mogelijk maakt om de impact van de gag gensequentieverschil op de in vitro replicatiecapaciteit van het virus te beoordelen.

Een restrictie-enzym Based Klonen Methode om de Beoordelen<em&gt; In vitro</em&gt; Replicatie Capaciteit van HIV-1 Subtype C Gag-MJ4 Chimeric Virussen

Er is een protocol gegeven voor het ontwikkelen van een real-time recombinase polymerase-amplificatietest om de initiële concentratie van DNA-monsters te kwantificeren met behulp van een thermische cycler of een microscoop en een stage-heater. Ook beschreven is de ontwikkeling van een interne positieve controle. Scripts zijn gegeven voor het verwerken van ruwe real-time fluorescentiegegevens.

Ontwikkeling van een kwantitatieve Recombinase Polymerase Amplificatie test met een interne positieve controle

Menselijk dubbele infectie is moeilijk te repliceren in vitro. Echter, menselijke malariaparasieten kunnen gemakkelijk worden gekweekt in vitro, net als vers geïsoleerde humane perifere bloedmononucleaire cellen die natuurlijk besmet zijn met HIV. Dit biedt een uitstekend model voor het bestuderen van vroege immuunresponsen op malariaparasieten in de context van HIV-co-infectie.

Een<em&gt; In Vitro</em&gt; Model voor het meten van immuunrespons op Malaria in de context van HIV Co-infectie

Full-length individuele proviraal sequencing (FLIPS) een efficiënte en hoog-productie methode voorziet in de versterking en sequentiebepaling van één, in de buurt van full-length (intact en defecte) HIV-1 proviruses en zorgt voor de bepaling van hun potentieel replicatie-competentie. FLIPS overwint beperkingen van eerdere tests ontworpen om de volgorde van het latente reservoir van HIV-1.

Versterking van in de buurt van Full-length HIV-1 Proviruses voor Next-Generation Sequencing

We hebben een protocol ontwikkeld voor de generatie en evaluatie van een gehumaniseerd en menselijk immunodeficiëntievirus besmet NOG muismodel op basis van stamceltransplantatie, intravaginale blootstelling aan het menselijke immunodeficiëntievirus en druppeldigitale PCR RNA Kwantificering.

Gehumaniseerde NOG Muizen voor intravaginale HIV Blootstelling en behandeling van HIV-infectie

Hier presenteren we een protocol waarin afzonderlijke cellen worden gecontroleerd op acute gebeurtenissen en productieve HIV-1-infectie op een nanofluïdisch apparaat. Beeldvormingsgegevens definiëren virus-host receptorinteracties en signaalroutedynamiek. Dit is de eerste methode voor nanofluïdische longitudinale eencellige cultuur en beeldvorming met hoge doorvoer om signaalkinetiek en moleculaire interacties te bestuderen.

Eencellige karakterisering van calciuminstroom en HIV-1-infectie met behulp van een Multiparameter Optofluidic Platform

Leer hoe flowcytometrie wordt ingezet voor HIV-monitoring in Zuid-Afrika door middel van CD4- en CD45-assays. Deze methode verbetert diagnostische efficiëntie in laboratoria met beperkte middelen.

Uitgebreide & Rendabele laboratorium controle van HIV / AIDS: een Afrikaanse Role Model

Meer video's verkennen