Name: Met behulp van Bioluminescent Imaging naar Synergie Onderzoek Between Streptococcus pneumoniae En influenza A-virus bij jonge muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-14T11:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 47 s
Description: Leer bioluminescentiebeeldvorming voor infectieonderzoek bij jonge muizen. Deze methode volgt de verspreiding van Streptococcus pneumoniae na co-infectie met influenza A-virus in het ademhalingsstelsel.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs willen erkennen het technische advies van David Briles (Universiteit van Alabama in Birmingham, AL, USA). We willen graag Yvette Chen, de Animal Welfare Officer van de Universiteit van Melbourne, en David Taylor, de Animal Facility Manager, bedanken voor nuttige suggesties en discussies over dierenwelzijn en ethiek en de ontwikkeling van criteria voor steunverlening en humane eindpunten voor de beschreven experimenten In dit manuscript. Odilia Wijburg en Patrick Reading worden ondersteund door een NHMRC RD Wright Fellowship, is Kirsty Short ondersteund door een GSK Postgraduate ondersteuning te verlenen en een Puzey Scholarship.

<ol><li>Brundage, J. F., Shanks, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deaths+from+bacterial+pneumonia+during+1918-19+influenza+pandemic%5BTitle%5D)+AND+%22Emerg+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Deaths from bacterial pneumonia during 1918-19 influenza pandemic.</a> Emerg Infect Dis. 14, 1193-1199 (2008).</li>
<li>Petersdorf, R. G., Fusco, J. J., Harter, D. H., Albrink, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+infections+complicating+Asian+influenza%5BTitle%5D)+AND+%22AMA+Arch+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Pulmonary infections complicating Asian influenza.</a> AMA Arch Intern Med. 103, 262-272 (1959).</li>
<li>Diavatopoulos, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+A+virus+facilitates+Streptococcus+pneumoniae+transmission+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Faseb+J%22%5BJournal%5D)">Influenza A virus facilitates Streptococcus pneumoniae transmission and disease.</a> Faseb J. , (2010).</li>
<li>Orihuela, C. J., Gao, G., Francis, K. P., Yu, J., Tuomanen, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-specific+contributions+of+pneumococcal+virulence+factors+to+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Tissue-specific contributions of pneumococcal virulence factors to pathogenesis.</a> J Infect Dis. 190, 1661-1669 (2004).</li>
<li>Kadurugamuwa, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+monitoring+of+pneumococcal+meningitis+and+evaluation+of+treatment+efficacy+in+an+experimental+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Noninvasive monitoring of pneumococcal meningitis and evaluation of treatment efficacy in an experimental mouse model.</a> Mol Imaging. 4, 137-142 (2005).</li>
<li>Smith, M. W., Schmidt, J. E., Rehg, J. E., Orihuela, C. J., McCullers, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+pro-+and+anti-inflammatory+molecules+in+a+mouse+model+of+pneumococcal+pneumonia+after+influenza%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Induction of pro- and anti-inflammatory molecules in a mouse model of pneumococcal pneumonia after influenza.</a> Comp Med. 57, 82-89 (2007).</li>
<li>Owen, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal-associated+lymphoid+tissue+and+olfactory+epithelium+as+portals+of+entry+for+Burkholderia+pseudomallei+in+murine+melioidosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Nasal-associated lymphoid tissue and olfactory epithelium as portals of entry for Burkholderia pseudomallei in murine melioidosis.</a> J Infect Dis. 199, 1761-1770 (2009).</li>
<li>Luker, G. D., Leib, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Luciferase+real-time+bioluminescence+imaging+for+the+study+of+viral+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Luciferase real-time bioluminescence imaging for the study of viral pathogenesis.</a> Methods Mol Biol. 292, 285-296 (2005).</li>
<li>Hutchens, M., Luker, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+bioluminescence+imaging+to+the+study+of+infectious+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Applications of bioluminescence imaging to the study of infectious diseases.</a> Cell Microbiol. 9, 2315-2322 (2007).</li>
</ol>

De productie van deze video-artikel werd gesponsord door Remklauw Life Sciences.

In vivo beeldvorming met de IVIS machine is een unieke methode die de real-time visualisatie van de microbiële pathogenese 4, 6-9 maakt. Hier laten we de toepassing van deze technologie het begrijpen van de synergie tussen S. pneumoniae en influenza virus bij jonge muizen. Als gevolg van de niet-invasieve karakter van deze techniek, zijn we in staat geweest om de progressie van de infectie in elke individuele muis over tijd te volgen. Dit heeft ons in staat om de kinetiek van pneumokokken transmissie document onder de co-gehuisvest jonge muizen 3. De niet-invasieve karakter van deze techniek stelt onderzoekers in staat om te gebruiken minder dieren per experiment en daarmee verminderen van dieren gebruik. Het is ook mogelijk om de IVIS machine te gebruiken om de verspreiding van de infectie te visualiseren om voorheen onbekende sites van infectie in het lichaam, als websites niet gemakkelijk bemonsterd door dissectie (zoals het middenoor). Voor het begin van de imaging experimenten hebben we bevestigd dat kolonisatie niveaus van de lichtgevende EF3030 stam waren vergelijkbaar met kolonisatie niveau van de moedermaatschappij EF3030 stam door te bepalen levensvatbaar tellen in weefsel homogenaten. Daarnaast hebben we eerste bevestigde dat besmetting met het influenzavirus resulteerde in een verhoogde belasting van bioluminescente EF3030 in de nasofarynx van gekoloniseerde dieren, zoals blijkt met de ouder EF3030 stam (resultaten niet getoond). Terwijl de IVIS technologie is eenvoudig te bedienen en genereert reproduceerbaar en gemakkelijk om gegevens te begrijpen, moeten experimenten zorgvuldig worden ontworpen dat de gevoeligheid en het nut van de technologie is gemaximaliseerd. Bijvoorbeeld, is de gevoeligheid van de camera IVIS beïnvloed door de diepte en de ondoorzichtigheid van het weefsel 8, die in onze ervaring, verhoogt de detectiegrens voor bioluminescente signalen afkomstig van de longen. Daarnaast, donkere vacht en gepigmenteerde huid vermindert de lichttransmissie met maar liefst 10-voudige (in vergelijking met haarloze muizen) 8. Bij de ontwikkeling van deze methode, hebben wij dit protocol geoptimaliseerd voor gebruik met 5 tot 14 dagen oud C57BL / 6 muizen en hebben sindsdien aangetoond dat IVIS kan worden gebruikt om de kolonisatie van 20 dagen oud C57BL / 6 muizen te detecteren met lichtgevende S. pneumoniae EF3030. Kan echter signaaldetectie worden verhoogd wanneer deze experimenten worden uitgevoerd in naakt of BALB / c muizen. Toch is de IVIS camera vertegenwoordigt een nieuwe benadering te monitoren, te karakteriseren en uiteindelijk de in vivo ontwikkeling van pneumokokkeninfecties te begrijpen na influenza A-virus infectie.

met behulp van bioluminescent imaging naar synergie onderzoek between streptococcus pneumoniae en influenza a-virus bij jonge muizen

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Tijdens de 1918 influenza virus-pandemie, waarvan ongeveer 50 miljoen mensen wereldwijd gedood, het merendeel van de dodelijke slachtoffers waren niet het gevolg van besmetting met influenza virus alleen. In plaats daarvan worden de meeste mensen denken te hebben bezweken aan een secundaire bacteriële infectie, voornamelijk veroorzaakt door de bacterie Streptococcus pneumoniae (de pneumococcus). De synergetische relatie tussen infecties veroorzaakt door het influenza virus en de pneumokokken is vervolgens waargenomen tijdens de 1957 Asian influenza-virus-pandemie, evenals tijdens de seizoensgebonden uitbraken van het virus (beoordeeld in 1, 2). We beschrijven hier een protocol dat wordt gebruikt om het mechanisme (s) die betrokken kan zijn bij een verhoogde morbiditeit als gevolg van samenlopende influenza A-virus en S. te onderzoeken pneumoniae infectie. We hebben een baby muis model om betrouwbaar en reproduceerbaar tonen de effecten van het influenza virus infectie van muizen gekoloniseerd met S. pneumoniae. Met behulp van dit protocol, hebben we de eerste inzicht in de kinetiek van pneumokokken transmissie tussen co-gehuisvest, neonatale muizen met behulp van in vivo beeldvorming 3.

Een gelijktijdige infectie met influenza A-virus is een van de factoren betrokken bij de inductie van invasieve pneumokokkeninfecties bij asymptomatische<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Wagen. Hier beschrijven we een gemengde infectie methode met behulp van jonge muizen om de synergie tussen deze twee respiratoire pathogenen te onderzoeken.

Met behulp van Bioluminescent Imaging naar Synergie Onderzoek Between Streptococcus pneumoniae En influenza A-virus bij jonge muizen

Tijdens de influenza-pandemie van 1918, waarbij wereldwijd ongeveer 50 miljoen mensen omkwamen, was de meerderheid van de sterfgevalen niet het gevolg van ...

<a class="grey_button" href="/video/3352">Chinees</a>

using-bioluminescent-imaging-to-investigate-synergism-between

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Methoden voor bioluminescentie beeldvorming van bacteriële infecties bij levende dieren beschreven. Ziekteverwekkers worden aangepast om luciferase te drukken waardoor optisch het gehele lichaam van infecties in levende dieren. Diermodellen kunnen besmet zijn met luciferase uitdrukken pathogenen en de daaruit voortvloeiende beloop van de ziekte gevisualiseerd in real-time door bioluminescentie imaging.

Met behulp van Luciferase naar Afbeelding bacteriële infecties in Muizen

Source: de Vries, C. R., et al., A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection. J. Vis. Exp. (2020).This video demonstrates a bioluminescent imaging technique to monitor bacterial infection progression in a live mouse model. Pathogenic bacteria engineered with the luxABCDE reporter system emit light at the infection site, allowing visualization of metabolically active bacteria. By imaging the mouse over time, researchers can non-invasively track infection...

Bioluminescence Imaging of Bacterial Infections in Mice

Source: Seman, B. G., et al. A Neonatal Imaging Model of Gram-Negative Bacterial Sepsis. J. Vis. Exp. (2020)The video demonstrates a neonatal mouse model for studying systemic infection using encapsulated bioluminescent bacteria. Neonatal pups are injected with high- or low-dose bacterial suspensions and returned to their mother for postnatal care. The encapsulated bacteria evade early immune detection, spread systemically, and are visualized over time using luminescence imaging. This model...

Modeling Infection in Neonatal Mice Using Encapsulated Bioluminescent Bacteria

Source: Valentine, M. E., et al., Generation of In-Frame Gene Deletion Mutants in Pseudomonas aeruginosa and Testing for Virulence Attenuation in a Simple Mouse Model of Infection. J. Vis. Exp. (2020)This video demonstrates the use of a bioluminescence-based imaging approach to monitor bacterial infection in a live mouse model. Sequential bioluminescent and X-ray imaging enables real-time visualization and anatomical localization of infection spread throughout the host.

Real-Time Imaging of Bacterial Infection in a Mouse Model Using Bioluminescence

Source: Lenhard, A. et al. A Mouse Model for the Transition of Streptococcus pneumoniae from Colonizer to Pathogen upon Viral Co-Infection Recapitulates Age-Exacerbated Illness. J. Vis. Exp. (2022)This video demonstrates a mouse co-infection model in which the influenza virus triggers the transition of Streptococcus pneumoniae from a colonizer to a pathogen. It outlines the steps involved in bacterial colonization, viral infection, and disease progression.

A Mouse Model to Study the Pathogenic Transition of Streptococcus pneumoniae Following Viral Co-Infection

This video demonstrates a method to track viral infections in mouse models using a recombinant luciferase and fluorescence protein-expressing bi-reporter Influenza A virus. This method enables both in vivo and ex vivo studies, enabling researchers to gain insights into viral dynamics and the effects of interventions.

A Luciferase-Fluorescent Reporter Influenza Virus to Track Viral Infections

Streptococcus pneumoniae is de toonaangevende ziekteverwekker waardoor ernstige community-acquired pneumonie en verantwoordelijk voor meer dan 2 miljoen doden wereldwijd. De invloed van bacteriële factoren betrokken bij fitness of virulentie kan worden gevolgd in real-time in een acute muis longontsteking of bacteriëmie model met behulp van bioluminescentie bacteriën.

Na in Real Time de impact van Pneumokokken virulentiefactoren in een acute longontsteking Muis Model Met behulp van Bioluminescent Bacteriën

In deze studie presenteren we een protocol voor het uitvoeren van twee-foton intravital beeldvorming en cel interactie analyse in de lymfkliertest tracheale mucosa na infectie met influenzavirus. Dit protocol is relevant voor onderzoekers bestuderen immuun cel dynamiek tijdens infecties van de luchtwegen.

Imaging-cel interactie in tracheale Mucosa tijdens Influenza virusinfectie met behulp van twee-foton Intravital microscopie

Influenza A virussen (IAVs) zijn besmettelijke respiratoire pathogenen die jaarlijkse epidemieën en occasionele pandemie veroorzaken. Hier beschrijven we een protocol voor het opsporen van virale infecties in vivo met behulp van een roman recombinant plaats en fluorescentie-uitdrukken van bi-reporter iav (birflu). Deze aanpak biedt onderzoekers een uitstekend hulpmiddel om IAV in vivo te bestuderen.

Een Luciferase-fluorescerende reporter influenza virus voor Live beeldvorming en kwantificering van virale infectie

Infectie van neonatale muizen met bioluminescente E. coli O1:K1:H7 resulteert in een septische infectie met significante longontsteking en longpathologie. Hier beschrijven we procedures om neonatale sepsis te modelleren en verder te bestuderen met behulp van longitudinale intravitale beeldvorming parallel met de opsomsoming van systemische bacteriële lasten, ontstekingsprofilering en longsentopathologie.

Een neonatale beeldvorming model van gram-negatieve bacteriële sepsis

Dit artikel beschrijft een nieuw muismodel voor de overgang van pneumokokken van een asymptomatische kolonisator naar een ziekteverwekkende ziekteverwekker tijdens virale infectie. Dit model kan gemakkelijk worden aangepast om polymicrobiële en gastheer-pathogeen interacties te bestuderen tijdens de verschillende fasen van ziekteprogressie en tussen verschillende gastheren.

Een muismodel voor de overgang van Streptococcus pneumoniae van kolonisator naar pathogeen bij virale co-infectie vat leeftijdsverergerde ziekte samen

Leer bioluminescentiebeeldvorming voor infectieonderzoek bij jonge muizen. Deze methode volgt de verspreiding van Streptococcus pneumoniae na co-infectie met influenza A-virus in het ademhalingsstelsel.

Met behulp van Bioluminescent Imaging naar Synergie Onderzoek Between Streptococcus pneumoniae En influenza A-virus bij jonge muizen (Video) | JoVE Journal

Met behulp van Bioluminescent Imaging naar Synergie Onderzoek Between Streptococcus pneumoniae En influenza A-virus bij jonge muizen

Meer video's verkennen