Name: In Utero Intraventriculaire injectie en elektroporatie van de E16 Rat embryos (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 19 min 4 s
Description: Leer intrauterine injectie en elektroporatie bij E16 rattenembryo's voor genetische manipulatie in de ontwikkelingsneurowetenschap. Deze methode maakt gerichte genexpressie en functionele studies mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

in utero intraventriculaire injectie en elektroporatie van de e16 rat embryo&#39;s

In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E16 Rat Embryos

In-utero in-vivo injectie en elektroporatie van de embryonale rat neocortex is een krachtig hulpmiddel voor het manipuleren van individuele voorouders langs de wanden van de laterale ventrikel. Deze techniek wordt nu op grote schaal gebruikt om de processen die betrokken zijn bij corticogenesis door over-uitdrukken of neerhalen genen en het observeren van de effecten op de cellulaire proliferatie, migratie en differentiatie te bestuderen. In vergelijking met traditionele knock-out strategieën, in-utero elektroporatie biedt een snelle manier om een ​​populatie van cellen te manipuleren tijdens een bepaalde temporele venster. In deze video protocol, schetsen we de experimentele methode voor het bereiden van ratten voor een operatie, waardoor de baarmoeder hoornen door laporatomy, het injecteren van DNA in de laterale ventrikels van het zich ontwikkelende embryo, electroporating DNA in de voorouders langs de laterale wand, en de zorg voor dieren, post- operatie. Ons laboratorium maakt gebruik van dit protocol voor de operaties op E15-E21 ratten, maar het wordt meestal uitgevoerd op E16 zoals in deze video.

In Utero Intraventriculaire injectie en elektroporatie van de E16 Rat embryo&#39;s

In-utero in-vivo injectie en electroporatie van de embryonale neocortex van de rat biedt een krachtig instrument voor de manipulatie van individuele progenitorcellen ...

Hallo, mijn naam is William Ti. Ik kom van het Arnold Creek Stein Lab. Vandaag gaan ik en anderen u de intra-uteriene injectie van E 16 rattenembryo's tonen. Hallo, mijn naam is Laura Elias.Vandaag zal ik u laten zien hoe u de microinjectiepijpetten voorbereidt en vult voor de intraventriculaire injecties en elektroporatie die we vandaag gaan uitvoeren. Ook zal ik u laten zien hoe u de intraventriculaire injecties en elektroporatie uitvoert in rattenembryo's van E 16. In utero injecties en elektroporatie bij de rat zijn bijzonder nuttig, omdat de rat een systeem is waarin genetische manipulaties niet eenvoudig kunnen worden uitgevoerd.Oké, er is een aantal chirurgische instrumenten die we voor deze procedure gebruiken. We gebruiken een freer, een paar Addison-pincetten — één paar met kartels en een ander paar met een klein tandje aan het uiteinde. We gebruiken een paar hemostaten.Dit is een schaar, en vervolgens gebruiken we deze twee nietmachines. Dit is de grotere, die we gebruiken voor ratten. Dit is de kleinere, die we gebruiken voor muizen, welke een nietes van maat 7 gebruikt, en deze gebruikt een nietes van maat 9; ze zijn beide voorzien van een veer.Voor sommige hulpmiddele

in-utero-intraventricular-injection-electroporation-e16-rat

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

In Utero Intraventriculaire injectie en elektroporatie van de E15 muizenembryo&#39;s

In utero elektroporatie is een waardevolle methode voor het transfecteren neuronale stamcellen in vivo. Afhankelijk van de plaatsing van de elektroden en de ontwikkeling meetpunt van elektroporatie, kunnen bepaalde subsets van corticale cellen worden gericht. Gerichte cellen kunnen vervolgens worden geanalyseerd in vivo of in vitro voor de effecten van genetische manipulatie.

In utero Elektroporatie gevolgd door primaire neuronale Cultuur voor het bestuderen van Gene Functie in subset van de corticale neuronen

In utero elektroporatie zorgt voor een snelle genafgifte in een ruimtelijk-temporeel en gecontroleerde wijze in de zich ontwikkelende centrale zenuwstelsel (CZS). Hier beschrijven we een groot aanpassingsvermogen in utero electroporatie protocol dat gebruikt kan worden om expressie constructen te leveren in meerdere embryonale CNS domeinen, waaronder de telencephalon, diencephalon en netvlies.

Efficiënte gen delivery in meerdere CNS Gebieden Het gebruik van In Utero Elektroporatie

Deze studie beschrijft de ontwikkeling van...

In vitro Elektroporatie van de Tweede Rhombic Lip van Midgestation muizenembryo&#39;s

Regelen van de groei van somatische stamcellen is een belangrijke factor die de studie en het gebruik in therapie. Hier beschrijven we een systeem tijdelijk controle neurale stamcellen expansie en volwassen, die kunnen worden gebruikt om het aantal neuronen gegenereerd in muizenhersenen verhogen.

Uitbreiding van embryonale en adulte neurale stamcellen door<em&gt; In Utero</em&gt; Electroporation of Viral stereotactische injectie

Bron: Koza, P., et al. Generation of Transgenic Rats using a Lentiviral Vector Approach. J. Vis. Exp. (2020)Deze video demonstreert de via micro-injectie ondersteunde aflevering van lentivirale vectoren in bevruchte rattenembryo's om stabiele integratie van het transgen te bereiken voor de generatie van transgene ratten.

Lentivirale vector-gebaseerde transductie van bevruchte rattenembryo's

This video demonstrates the delivery of plasmid DNA into cerebellar neuronal cells of murine embryos using in utero electroporation. This method is useful to gain understanding of in vivo function of genes in normal brain development and the changes in gene expression of neuron cells during tumor progression.

In Utero Electroporation Based Gene Delivery: A Technique to Inject Plasmid DNA into Embryonic Cerebellar Cells of Murine Embryos

Genen kunnen worden gemanipuleerd tijdens de ontwikkeling van de cortex of de hippocampus van de rat via in utero elektroporatie (IUE) op E16, om snelle en doelgerichte wijzigingen in neuronale connectiviteit mogelijk te maken voor latere studies van gedrag of neuropathologie bij volwassen dieren. Postnatale in vivo beeldvorming voor controle IUE succes uitgevoerd door bioluminescentie activerende co-getransfecteerd luciferase.

Generatie Topisch transgene Rats door<em&gt; In de baarmoeder</em&gt; Elektroporatie en<em&gt; In vivo</em&gt; Bioluminescence Screening

Dit protocol beschrijft in detail hoe specifiek te transfecteren verschillende regio's in het centrale zenuwstelsel van C57BL/6 via in utero elektroporatie. Inbegrepen in dit protocol zijn gedetailleerde instructies voor transfecties van regio's die zich ontwikkelen tot de cortex, hippocampus, thalamus, hypothalamus, laterale septumkern en striatum.

Cortex-, Hippocampus-, Thalamus-, Hypothalamus-, Laterale Septal Nucleus- en Striatum-specifieke<em&gt; In Utero</em&gt; Elektroporatie in de C57BL / 6 muis

Nodulair heterotopia van de Periventricular (PNH) is de meest voorkomende vorm van misvorming van corticale ontwikkeling (MCD) in volwassenheid maar haar genetische basis blijft onbekend in meest sporadische gevallen. Onlangs hebben we een strategie nieuwe kandidaat om genen te identificeren voor MCDs en direct bevestigen hun oorzakelijke rol in vivo.

Een nieuwe strategie combinatie matrix-CGH, geheel-exome Sequencing en In Utero Electroporation bij knaagdieren ter identificatie van de oorzakelijke genen voor hersenen misvormingen

Leer intrauterine injectie en elektroporatie bij E16 rattenembryo's voor genetische manipulatie in de ontwikkelingsneurowetenschap. Deze methode maakt gerichte genexpressie en functionele studies mogelijk.

In Utero Intraventriculaire injectie en elektroporatie van de E16 Rat embryo's

Meer video's verkennen