Name: In Utero Intraventriculaire injectie en elektroporatie van de E15 muizenembryos (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 26 min 17 s
Description: Leer intrauteriene injecties en elektroporatie bij E15 muizenembryo's voor genetische manipulatie van ontwikkelende neurale weefsels. Deze methode maakt gerichte introductie van plasmide-DNA in de laterale ventrikel mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs hebben niets te melden.

in utero intraventriculaire injectie en elektroporatie van de e15 muizenembryo&#39;s

In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E15 Mouse Embryos

In-utero in-vivo injectie en elektroporatie van de embryonale muis neocortex is een krachtig hulpmiddel voor het manipuleren van individuele voorouders langs de wanden van de laterale ventrikel. Deze techniek wordt nu op grote schaal gebruikt om de processen die betrokken zijn bij corticogenesis door over-uitdrukken of neerhalen genen en het observeren van de effecten op de cellulaire proliferatie, migratie en differentiatie te bestuderen. In vergelijking met traditionele knock-out strategieën, in-utero elektroporatie biedt een snelle manier om een ​​populatie van cellen te manipuleren tijdens een bepaalde temporele venster. In deze video protocol schetsen we de experimentele methode voor het bereiden van muizen voor een operatie, waardoor de baarmoeder hoornen door laporatomy, het injecteren van DNA in de laterale ventrikels van het zich ontwikkelende embryo, electroporating DNA in de voorouders langs de laterale wand, en de zorg voor de dieren na de ingreep . Ons laboratorium maakt gebruik van dit protocol voor de operaties op E13-E16 muizen, is het echter meestal uitgevoerd op E15, zoals te zien in deze video.

In Utero Intraventriculaire injectie en elektroporatie van de E15 muizenembryo&#39;s

In-utero in-vivo injectie en electroporatie van de embryonale neocortex van de muis biedt een krachtig instrument voor de manipulatie van individuele progenitorcellen ...

Hoi, ik ben William Tis van het Krete Lab. Vandaag ga ik samen met anderen intrauterine injecties bij embryonen van muizen op dag E 15 demonstreren. Hoi, mijn naam is Laura Elias.Vandaag laat ik u zien hoe u de micro-injectiepijpjes voorbereidt en vult voor de intraventriculaire injecties en electroporatie die we zullen uitvoeren. Mijn naam is David Castaneda en vandaag zal ik assisteren bij in vivo in utero injecties van muisembryo's. We zullen plasmid-DNA injecteren in het laterale ventrikel van ontwikkelende muisembryo's.We richten ons op de CE-cortex van deze embryo's om expressie te verkrijgen van verschillende moleculen door gliacellen en cellen die later in de ontwikkeling neuronen zullen worden. Bij het uitvoeren van deze intra-uteriene injecties zijn er een paar belangrijke instrumenten die u moet gebruiken en die ik u nu zal laten zien. We gebruiken een fixer en een paar fijne pincetten.Eén, één paar dat gekarteld is, en een ander paar met een klein tandje aan het uiteinde. We gebruiken een paar hemostaten. Dit is een schaar.Vervolgens gebruiken we deze twee nietmachines. Dit is de grotere, die we voor ratten gebruiken. Dit is de kleinere, die we voor muizen gebruiken.Er

in-utero-intraventricular-injection-electroporation-e15-mouse

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

In Utero Intraventriculaire injectie en elektroporatie van de E16 Rat embryo&#39;s

In utero overleven chirurgie bij muizen laat de moleculaire manipulatie van genexpressie tijdens de ontwikkeling. Hier beschrijven we het gebruik van hoge-frequentie ultrasonografie om de injectie van retrovirale vectoren gids in de muis hersenen op embryonale dag (E) 9.5.

Ultrasound-Guided micro-injectie in de muis voorhersenen In Utero At E9.5

In utero elektroporatie zorgt voor een snelle genafgifte in een ruimtelijk-temporeel en gecontroleerde wijze in de zich ontwikkelende centrale zenuwstelsel (CZS). Hier beschrijven we een groot aanpassingsvermogen in utero electroporatie protocol dat gebruikt kan worden om expressie constructen te leveren in meerdere embryonale CNS domeinen, waaronder de telencephalon, diencephalon en netvlies.

Efficiënte gen delivery in meerdere CNS Gebieden Het gebruik van In Utero Elektroporatie

Een genoverdracht methode in de zich ontwikkelende hersenen van muizen wordt beschreven door middel van een unieke chirurgische methode en de speciale vorm van de elektroden. Deze unieke techniek maakt het mogelijk transfectie van plasmide DNA tijdelijk en ruimtelijk, die veel neurowetenschappers zullen helpen bij het bestuderen van ontwikkeling van de hersenen.

Muis In Utero Elektroporatie: Gecontroleerde spatiotemporele Gene Transfectie

Regelen van de groei van somatische stamcellen is een belangrijke factor die de studie en het gebruik in therapie. Hier beschrijven we een systeem tijdelijk controle neurale stamcellen expansie en volwassen, die kunnen worden gebruikt om het aantal neuronen gegenereerd in muizenhersenen verhogen.

Uitbreiding van embryonale en adulte neurale stamcellen door<em&gt; In Utero</em&gt; Electroporation of Viral stereotactische injectie

This video demonstrates the delivery of plasmid DNA into cerebellar neuronal cells of murine embryos using in utero electroporation. This method is useful to gain understanding of in vivo function of genes in normal brain development and the changes in gene expression of neuron cells during tumor progression.

In Utero Electroporation Based Gene Delivery: A Technique to Inject Plasmid DNA into Embryonic Cerebellar Cells of Murine Embryos

Ondanks de functionele en medische belang van de...

Genetische Manipulatie van de muis Ontwikkelen Hypothalamus via<em&gt; In utero</em&gt; Elektroporatie

Dit protocol beschrijft in detail hoe specifiek te transfecteren verschillende regio's in het centrale zenuwstelsel van C57BL/6 via in utero elektroporatie. Inbegrepen in dit protocol zijn gedetailleerde instructies voor transfecties van regio's die zich ontwikkelen tot de cortex, hippocampus, thalamus, hypothalamus, laterale septumkern en striatum.

Cortex-, Hippocampus-, Thalamus-, Hypothalamus-, Laterale Septal Nucleus- en Striatum-specifieke<em&gt; In Utero</em&gt; Elektroporatie in de C57BL / 6 muis

Dubbel in utero elektroporatie maakt het richten van celpopulaties die ruimtelijk en tijdelijk gescheiden. Deze techniek is nuttig om interacties tussen die celpopulaties te visualiseren met behulp van fluorescerende eiwitten in normale omstandigheden, maar ook na functionele experimenten om genen van belang te verstoren.

Dubbel in utero-elektroporatie om tijdelijk en ruimtelijk gescheiden celpopulaties te targeten

In dit protocol beschrijven we hoe de vruchtwaterholte van de muis op E7.5 kan worden geïnjecteerd met lentivirus, wat leidt tot uniforme transductie van de gehele neurale plaat, met minimale schadelijke effecten op overleving of embryonale ontwikkeling.

Murine Neural Plate Targeting door In Utero Nano-Injection (NEPTUNE) op Embryonale Dag 7.5

Leer intrauteriene injecties en elektroporatie bij E15 muizenembryo's voor genetische manipulatie van ontwikkelende neurale weefsels. Deze methode maakt gerichte introductie van plasmide-DNA in de laterale ventrikel mogelijk.

In Utero Intraventriculaire injectie en elektroporatie van de E15 muizenembryo's

Meer video's verkennen