Name: Een eenvoudige manier om Ethanol Gevoeligheid meten in Flies (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-02-19T17:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 15 s
Description: Leer een eenvoudige methode om ethanolgevoeligheid te meten bij Drosophila door het verlies van het rechtvaardigingsreflex te observeren. Deze techniek helpt onderzoekers alcoholgevoeligheid en tolerantie te kwantificeren.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Wij danken Aylin Rodan voor de kritische lezing van het manuscript, en leden van het lab voor nuttige discussie. Dit onderzoek wordt ondersteund door de NIH, R01AA019526.

1. Het creëren van de blootstelling kamer <ol><li> Snijd een flesje plug in half met behulp van een scheermesje. U kunt ook katoenen ballen. </li><li> Duw de stekker half flesje, of de katoenen bal, naar de bodem van een levensmiddel flesje om een ​​glad oppervlak dat vliegen niet vast komen te zitten binnen te maken </li><li> Als het maken van meervoudige belichting kamers, zorg ervoor dat de flacon plug en voedsel nemen hetzelfde volume in elke kamer. Een markering op de zijkant van de flacon kan vergemakkelijken. </li></ol> 2. Het ontmaskeren van de vliegen <ol><li> Verzamel 8 vliegen van het ene geslacht, leeftijd 1-5 dagen, de dag voor de blootstelling in de reguliere voeding flacons zonder gist. </li><li> Label ze in code, zodanig dat de experimentator is blind voor de werkelijke genotype / stam. </li><li> Breng de acht vliegt in de belichting kamers door te tikken. Niet verdoven. </li><li> Voeg een kleine hoeveelheid voedsel kleurstof, bijvoorbeeld zuur blauw 9, tot 200 bewijs ethanol te maken goed zichtbaar. </li><li> Smeer de bodem van een flesje of de stekker of watje, met 0,5 ml ethanol. </li><li> Steek de stekker in ethanol de belichting flacon. Zorg ervoor dat de alcohol wordt geconfronteerd in de flacon, en niet naar de wand van de flacon. </li><li> Start een timer te tellen. </li></ol> 3. Record ethanol geïnduceerde intoxicatie <ol><li> Elke minuut nadat de timer is gestart, tikt u de belichting kamer op de bank om de vliegen schrikken en hen te observeren gedurende tien seconden. </li><li> Noteer het nummer van stationaire vliegt voor elke minuut. Vliegen zijn stationaire als ze niet kunnen krijgen van hun rug, blijven op een locatie, of snel hun vleugels trillen in de gehele tien seconden observatie-periode. Deze laatste vliegen worden beschouwd als stationair, omdat de overgrote meerderheid van deze vliegen zijn stationair tussen de perioden van snelle vleugel beweging. Vliegen zijn niet stationair als ze kunnen krijgen van hun rug en lopen en / of de flacon muur. </li><li> Een blootstelling proces is voltooid wanneer vier of meer vliegen worden opgenomen als stationair. </li><li> Gooi vliegt en laat de blootstelling kamer lucht uit voor later hergebruik. </li></ol> 4. Bepaal de tijd om 50% sedatie De tijd om 50% sedatie (ST50) is de tijd na de start van de ethanol blootstelling toen vier van de acht vliegen stil blijven staan. Dit wordt als volgt bepaald: Ofwel: de eerste meting minuten wanneer precies vier vliegen stilstaan. Of: indien minder dan vier vliegen (Y1) zijn stationair op een tijdstip (minuut X), en meer dan vier (Y2) bij de volgende meting tijdstip (minuut X +1), dan lineair interpoleren de ST50 volgens de formule: ST50 = (4 - Y1) / (Y2 - Y1) + X 5. Herhaaldelijke blootstelling aan tolerantie te bepalen Het ontmaskeren van de vliegen <ol><li> Bepaal de ST50 (wt) voor de wild-type controle stam gebruikt in uw experiment. </li><li> Expose de experimentele groepen vliegt op ethanol zoals hierboven beschreven. </li><li> Meten hun ST50 (1), maar verder bloot te leggen totdat u bij de tijd 2x ST50 (WT). </li><li> Terug overdracht de vliegen in een lege flacon voedsel, en houd deze gedurende 4 uur. </li><li> Opnieuw bloot te leggen de vliegen, en bepaal de ST50 (2) van de blootstelling 2. </li></ol> Bepaal tolerantie Bereken tolerantie in% als (ST50 (2) / ST50 (1) - 1) x100. 6. Representatieve resultaten: Hier ziet, zijn enkele representatieve resultaten die we behaald met 6-8 flacons van vliegen per genotype en de dosis. Als uw standaardfout is aanzienlijk groter, dan is een systematisch probleem is waarschijnlijk opgetreden. Zorg ervoor dat de ethanol gezichten in de belichting kamers, en dat de kamers zijn hetzelfde volume. <img src="/files/ftp_upload/2541/2541fig1.jpg" alt="Figuur 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 1"> Figuur 1. Dosis-respons curve van wild type vliegt blootgesteld aan toenemende percentages van ethanol. Acht flesjes van vliegen werden blootgesteld per dosis en geslacht. Mannelijke en vrouwelijke vliegt tonen dezelfde ST50 bij elke dosis (p&gt; 0.22, 2-weg ANOVA), terwijl de ST50 over doses vermindert aanzienlijk met toenemende ethanol dosis (p &lt;0,001). Merk op dat vliegt van overvolle flessen kunnen aanzienlijk kleiner zijn dan die van gezonde flessen, en dit verschil in grootte kan de ST50 beïnvloeden. Seed elke fles met 15-20 vrouwtjes leggen voor 1-2 dagen om een ​​optimale larvale dichtheid per fles te krijgen. <img src="/files/ftp_upload/2541/2541fig2.jpg" alt="Figuur 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 2"> Figuur 2. Blootstellen vliegt om ofwel 90%, of 100% ethanol reproduceert de eerder beschreven ethanol-weerstand wordt veroorzaakt door de witte rabbit1 mutation2 (p &lt;0,001, 2-weg ANOVA). <img src="/files/ftp_upload/2541/2541fig3.jpg" alt="Figuur 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 3"> Figuur 3. Herhaal de blootstelling aan 100% ethanol, verdeeld door een 4 uur durende herstel interval, veroorzaakt een aanzienlijke toename van ST50 na de tweede opname (p &lt;0,001, gepaarde t-Test). Merk op dat de vliegen werden blootgesteld voor 24 minuten tijdens de eerste blootstelling (komt overeen met twee keer hun na ve ST50). Blootstelling gedurende een kortere tijd (12 minuten) niet leiden tot een significante toename van ST50 na hernieuwde blootstelling (gegevens niet getoond).

<ol><li>Bainton, R. J., Tsai, L. T. -Y., Singh, C. S., Moore, M. S. Curr. Biol. 10, 187-194 (2000).</li>
<li>Rothenfluh, A., Threlkeld, R. J., Bainton, R. J., Tsai, L. T. -Y. Cell. 127, 199-211 (2006).</li>
<li>Devineni, A. V., Heberlein, U. Curr. Biol. 19, 2126-2132 (2009).</li>
<li>Scholz, H., Ramond, J., Singh, C. S., Heberlein, U. Neuron. 28, 261-271 (2000).</li>
<li>Allen, M. J., Godenschwege, T. A., Tanouye, M. A., Phelan, P. Semin. Cell Dev. Biol. 17, 31-41 (2006).</li>
<li>Feany, M. B., Bender, W. W. Nature. 404, 394-398 (2000).</li>
</ol>

In deze presentatie hebben we aangegeven een eenvoudige manier om ethanol-geïnduceerde intoxicatie te bepalen op basis van eerdere testen beschreven door Bainton et al.. 2000 1, en ​​Rothenfluh et al.. 2006 2. Omdat alcohol-geïnduceerde sedatie is gecorreleerd met het drinken van alcohol voorkeur 3, deze test is relevant voor de studie van stoornissen door alcoholgebruik. De beschreven test is gebaseerd op de schrik-geïnduceerde negatieve geotaxis, en hoe een blootstelling aan alcohol interfereert met deze aangeboren reactie. Voordat u de risico&#39;s, zorg ervoor dat al je vliegt vertonen een normale reactie op zo&#39;n een schrikreactie, dus na tikken beneden de vliegen in het voedsel flacon, ze allemaal moeten doorstromen van de bodem binnen een 10 seconden observatietijd. Voorbeelden van vliegen met de vermindering van negatieve geotaxis zijn bang-gevoelige beslag mutanten 5, en de motoriek-deficiënte vliegt veroorzaakt door degeneratie van dopamine neuronen 6. Hoewel de beschreven test is relatief eenvoudig, twee variabelen verdienen de meeste aandacht aan reproduceerbare resultaten te verzekeren. Ten eerste moeten alle risico flacons hetzelfde volume. Dit omvat ervoor te zorgen dat de onderkant van de flacon hetzelfde volume van voedsel + flacon plug / watje, evenals het plaatsen van de ethanol-bevattende stekker op dezelfde afstand voor elke flacon bevat. Een volledig lege flacon kan gebruikt worden voor deze test, maar het leidt tot langere ST50 waarden, het verminderen van de doorvoer van de test. Deze test is ook geschikt om de hoeveelheid tolerantie vliegen vast te stellen na herhaalde blootstelling aan ethanol te ontwikkelen. Een aantal variabelen moet worden overwogen bij het doen van herhaalde blootstelling. Eerst wordt de inter-exposure interval hier beschreven als 4 uur. Deze variabele kan worden gewijzigd, maar we raden het niet lager zijn dan twee uur, tot klaring van ethanol te garanderen vanaf de eerste blootstelling. Zie Scholz et al.. 2000 4 voor de kinetiek van ethanol ontwikkeling van tolerantie en verval. De tweede variabele te onderzoeken, is de duur van de eerste blootstelling. Dit heeft uiteraard dezelfde te zijn voor de controle en de experimentele vliegen. Dit kan echter niet leiden tot het dezelfde hoeveelheid ethanol geleverd aan deze beide vliegen stammen. Gesedeerd vliegt absorberen meer ethanol dan actieve vliegt twee, dus een stam die kalmeert kunnen de eerder ontvangen een hogere dosis dan een later-sederende stam, en dus de ontwikkeling van meer tolerantie ten gevolge van een hogere initiële dosis. We sterk voorzichtig de lezer bij het vergelijken van tolerantie ontwikkeling van stammen die verschillen in de initiële ST50 (1) te tonen. De test hebben we hier beschrijven is een nuttig instrument in gemakkelijk en reproduceerbaar bepalen vliegt gedragsmatige reacties op alcohol.

<table><tbody><tr><td>Expositiebuisjes</td><td>www.flystuff.com</td><td>32-116</td><td></td></tr><tr><td>Doppen</td><td>www.flystuff.com</td><td>49-102</td><td></td></tr><tr><td>Acid Blue 9</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>861146</td><td></td></tr></tbody></table>

een eenvoudige manier om ethanol gevoeligheid meten in flies

A Simple Way to Measure Ethanol Sensitivity in Flies

Lage doseringen ethanol veroorzaken vliegt te worden hyperactief, terwijl hoge doses sederende. De gevoeligheid voor ethanol-geïnduceerde sedatie van een bepaalde vlieg stam is gecorreleerd met ethanol die stam en voorkeur, en daarom sedatie is een zeer relevant maatregel om de genetica van alcohol reacties en drinken te bestuderen. Demonstreren we een eenvoudige manier om vliegen bloot te stellen aan ethanol en meet de bedwelmende effecten. De test beschrijven we kunnen bepalen acute gevoeligheid, evenals ethanol tolerantie geïnduceerd door herhaalde blootstelling. Het vereist geen een technisch betrokken setup, en kan daardoor worden toegepast in een laboratorium met basic fly cultuur tools.

Een eenvoudige test om de sederende effecten van ethanol te meten op<em&gt; Drosophila</em&gt; Vliegen, op basis van het verlies van de oprichtreflex reflex, is beschreven.

Een eenvoudige manier om Ethanol Gevoeligheid meten in Flies

Lage doses ethanol zorgen ervoor dat vliegen hyperactief worden, terwijl hoge doses een sederend effect hebben. De gevoeligheid voor ethanol-geïnduceerde sedatie van een bepaalde vliegenstam ...

Hoi, ik ben Thomas Maples uit het laboratorium van Dr. Adrian Rothen flu van de afdeling Psychiatrie aan het UT Southwestern Medical Center in Dallas. Vandaag zal ik een eenvoudige procedure demonstreren om de gevoeligheid van vliegen voor sedatie door ethanol te bepalen. Deze assay is gebaseerd op het verlies van de rechtingsreflex en het loopvermogen van vliegen na blootstelling aan ethanol.Deze meting kan worden gebruikt om verschillen in alcoholgevoeligheid tussen verschillende drosophila-stammen en mutanten vast te stellen. We kunnen deze assay ook gebruiken om tolerantie bij vliegen op te wekken, waarbij tolerantie een verminderde respons op alcohol is na herhaalde blootstelling. Laten we beginnen.Voor dit experiment heeft u de volgende vials nodig. Gebruik acht fruitvliegen die u één of twee dagen vooraf heeft verzameld. De blootstellingen kunnen worden uitgevoerd met zowel mannetjes als vrouwtjes.Elk flacon moet echter slechts één geslacht bevatten. Een leeg voedingsflacon zonder vliegen, een scheermesje, twee flaconpluggen gemaakt van een katoenachtig materiaal. Als u dit soort pluggen niet heeft, kunt u ook wattenbolletjes gebruiken, een 1000 µL micropipet met tips, 200 proof ethanol waarin kleurstof voor voedingsmiddelen is opgelost (verkrijgbaar bij elke supermarkt) en een timer.De eerste stap is het maken van een blootstellingskamer waarin we de vliegen blootstellen aan ethanol en hun mobiliteit monitoren. Om deze kamer te maken, snijdt u eerst een vialplug doormidden met een scheermesje. Duw vervolgens een van de helften naar de bodem van een vial, zodat het voeder wordt afgedekt.Dit creëert een vlak, niet-plakkerig oppervlak waar de vliegen op kunnen lopen. Als u een wattenbol gebruikt, druk deze dan glad aan en probeer deze zo min mogelijk pluizig te maken, zodat de vliegen niet verstrikt raken in de katoenvezels. Als u meerdere kamers maakt, zorg er dan voor dat het voeder en de vial-stop in elke kamer evenveel ruimte innemen.Dit zorgt ervoor dat de vliegen in elke kamer worden blootgesteld aan ethanol in hetzelfde volume. Met wat oefening is het eenvoudig om drie vials met vliegen parallel bloot te stellen. Zodra de blootstellingskamers zijn gemaakt, kunnen we de vliegen nu blootstellen aan ethanol.Breng eerst een flacon met acht vliegen over naar een blootstellingskamer en sluit de kamer af met de dop van de flacon waarin de vliegen oorspronkelijk zaten. Pipetteer vervolgens 500 µL gekleurde ethanol van de gekozen concentratie op één uiteinde van een wattenachtige flacondop. Vervang daarna de dop van de blootstellingskamer door de met ethanol gecoate dop, waarbij het met ethanol gecoate uiteinde in de kamer wordt geplaatst.Start direct na het toevoegen van de met ethanol gecoate plug aan de blootstellingskamer een timer. De kleurstof in de ethanol helpt te waarborgen dat de ethanolzijde naar de blootstellingskamer is gericht en niet naar de wand van het flacon. Dit is vooral belangrijk wanneer u watjes gebruikt in plaats van buzz-pluggen, omdat elke zijde van een watje naar het flacon gericht kan zijn.In deze blootstelling gebruiken we 100% alcohol, die nu diffundeert in de blootstellingskamer waar de vliegen het via de lucht inademen. Elke minuut na het toevoegen van de met ethanol gecoate plug aan de blootstellingskamer tellen we hoeveel vliegen stationair zijn geworden, wat betekent dat ze niet meer in staat zijn om zichzelf om te draaien en te lopen. Hoe langer de vliegen mobiel blijven, hoe resistenter ze zijn bij elk interval van één minuut.Schrik de vliegen af door tegen de kamer op de werkbank te tikken om er zeker van te zijn dat alle vliegen die kunnen bewegen, dit ook doen. Observeer de vliegen gedurende 10 seconden na het tikken om hen de tijd te geven om te beginnen met bewegen of zichzelf om te draaien voor elk interval van één minuut. Noteer hoeveel van de acht vliegen stationair zijn aan het begin van het experiment.De meeste vliegen zullen na een schrikreactie snel tegen de wand van het flacon omhoog lopen. Na ongeveer zes minuten blootstelling aan 100% ethanol beginnen ze zich traag en soms onregelmatig te bewegen tegen de tijd dat er 12 minuten zijn verstreken. De meeste vliegen zullen stationair zijn, niet in staat om te lopen of zichzelf om te draaien wanneer ze op hun rug liggen.Alleen vliegen die in staat zijn om zichzelf recht te zetten en te lopen, moeten worden geteld als mobiel. Vliegen die enkel hun poten of vleugels op hun plek bewegen, moeten worden geteld als stationair. Vliegen die gedurende de gehele observatieperiode op hun rug blijven liggen, moeten eveneens als stationair worden geteld, omdat hun onvermogen om zichzelf recht te zetten een teken is van intoxicatie. Vliegen die gedurende de gehele observatietijd van tien seconden krachtig met hun vleugels trillen, moeten evenzo als stationair worden geteld, zelfs als ze van plek veranderen. De overgrote meerderheid van deze vliegen is stationair tussen perioden van snelle vleugelbeweging.Samenvattend zijn vliegen die in staat zijn om zichzelf om te draaien en te lopen mobiel; vliegen die niet kunnen omrollen, hun poten en vleugels ter plaatse bewegen, of hun vleugels snel laten trillen, zijn stationair. Wanneer we deze regels toepassen, zien we dat meer wild-type vliegen stationair worden naarmate de minuten van blootstelling aan ethanol-dampen toenemen. De waarde die deze assay gebruikt om de ethanolgevoeligheid te kwantificeren, is de mediane sedatietijd of MST.We definiëren MST als het aantal minuten ethanolblootstelling dat nodig is om vier van de acht vliegen in de blootstellingskamer stationair te laten worden. Deze waarde is eenvoudig te bepalen als er precies vier vliegen stationair zijn tijdens een specifieke observatieperiode. Als er bijvoorbeeld precies vier vliegen stationair zijn na 11 minuten blootstelling, dan is 11 de MST.Als er na 11 minuten blootstelling precies vier vliegen stationair zijn en dit na 12 minuten nog steeds het geval is, neem dan de eerste waarde aan, aangezien dit het tijdstip is waarop de vliegen voor het eerst hun ST bereiken. Als er in een specifieke observatieperiode niet precies vier vliegen stationair zijn, is het noodzakelijk om het tijdstip waarop vier vliegen stationair werden lineair te interpoleren. Als het aantal stationaire vliegen bijvoorbeeld tussen 9 en 10 minuten blootstelling verspringt van drie naar vijf, kan grafisch worden bepaald dat de MST 9,5 is. De volgende gegevens, die met deze assay zijn verzameld, tonen aan dat dit experimentele ontwerp een nauwkeurige methode is om de ethanolgevoeligheid te meten.In de volgende experimenten werd een N van zes tot acht vials gebruikt, wat is aangegeven in de balken. De MST van mannelijke wild-type vliegen die zijn blootgesteld aan 100% Ethanol is ongeveer 11 minuten met een lage standaardfout. De dagelijkse variabiliteit is gering en meestal niet statistisch significant, maar we raden nog steeds aan om uw experimentele groepen en controles parallel op dezelfde dag te meten.Let ook op dat de vliegen die op dag A en dag B zijn blootgesteld niet dezelfde individuen zijn. Dit zijn broers en zussen die dezelfde genetische stam vertegenwoordigen; mannelijke en vrouwelijke vliegen die zijn blootgesteld aan 100% Ethanol vertonen geen verschil in MST. Toch raden wij aan om één geslacht aan te houden.Wanneer we mannelijke en vrouwelijke vliegen blootstellen aan toenemende doses ethanol, verkrijgen we een mooie dosis-responscurve die een statistisch significante afname van de MST laat zien als functie van de verhoogde ethanolconcentratie. Deze assay reproduceert ook eerder gepubliceerde fenotypen die zijn gemeten met een complexere opstelling voor ethanolverdamping; vliegen met de right rabbit one-mutatie vertoonden een significante toename van de MST. Deze toename werd waargenomen bij zowel 100% als 90% ethanol.Met deze assay kunnen we ethanoltolerantie bij vliegen induceren en meten. Tolerantie wordt gedefinieerd als een afname van de respons op alcohol, na een voorafgaande blootstelling aan alcohol om tolerantie op te wekken. Stel een flacon vliegen bloot aan ethanol gedurende ongeveer twee keer hun MST.We stellen deze mannelijke Berlin wild-type vliegen bijvoorbeeld 24 minuten lang bloot aan 100% ethanol. Tik na de blootstelling de acht vliegen voorzichtig terug in hun voedingsbuisje, waar u ze vier uur lang laat herstellen. Noteer de oorspronkelijke MST van de vliegen op hun buisje na vier uur herstel, stel precies dezelfde vliegen opnieuw bloot aan dezelfde dosis ethanol en noteer hun tweede MST.Zoals u op deze grafiek kunt zien, is de MST van de tweede blootstelling aan ethanol significant hoger dan de MST van de eerste blootstelling, wat aangeeft dat de vliegen tolerantie hebben ontwikkeld voor de sederende effecten van ethanol. Een maat voor tolerantie wordt berekend door de tweede MST van een bepaalde vials vliegen te delen door de eerste MST van dezelfde vliegen en er vervolgens één van af te trekken; de waarde wordt uitgedrukt als percentage tolerantie, wat in ons geval ongeveer 50% is. Bedankt voor het kijken en veel succes met uw experiment.

a-simple-way-to-measure-ethanol-sensitivity-in-flies

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Drosophila heeft zich ontpopt als een belangrijk modelsysteem voor het ontleden van de cellulaire en moleculaire onderbouwing van gedragsreacties op alcohol. Hier presenteren we een protocol voor het verzamelen van alcohol gevoelige gegevens in een circadiane context die gemakkelijk kan worden toegepast op andere experimenten en is goed geschikt voor gegradueerdenonderzoek.

De flybar: Toedienen Alcohol te Flies

Eenvoudige tests voor het meten van ethanolgevoeligheid en snelle tolerantie bij Drosophila vergemakkelijken het gebruik van dit modelorganisme voor het onderzoeken van deze belangrijke ethanol-gerelateerde gedragingen. Hier wordt een relatief eenvoudige, schaalbare test beschreven voor het meten van ethanolgevoeligheid en snelle tolerantie bij vliegen.

Een goedkope, Scalable Behavioral Test voor het meten Ethanol Sedatie Gevoeligheid en Rapid Tolerantie in<em&gt; Drosophila</em

C. elegans is een nuttig model voor het bestuderen van de effecten van ethanol op het gedrag. We presenteren een gedragstest die de effecten van ethanol op de bewegingssnelheid van kruipende wormen kwantificeert; zowel de initiële gevoeligheid als de ontwikkeling van acute functionele tolerantie voor ethanol kunnen met deze test worden gemeten.

Een test voor het meten van de effecten van ethanol de voortbeweging Snelheid<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

We beschrijven een protocol voor het induceren van belonen en nonrewarding ervaringen in fruitvliegjes (Drosophila melanogaster) met behulp van vrijwillige ethanol consumptie als maat voor veranderingen in de beloning staten.

Een eenvoudige manier om Veranderingen Meet in Reward-zoekend gedrag Met behulp<em&gt; Drosophila melanogaster</em

De CApillary FEeder (CAFE) test is een eenvoudige, budgetvriendelijke en zeer betrouwbare methode voor het onderzoeken van mechanismen die ten grondslag liggen aan voedselinname. Gebruikt met het zeer veelzijdige genetische modelorganisme Drosophila melanogaster, biedt het een krachtig middel om nieuwe inzichten te verkrijgen in de regulerende mechanismen van voedselinname.

De capillaire Feeder test meet voedselinname bij<em&gt; Drosophila melanogaster</em

De huidige methoden om de alcoholgevoeligheid in Drosophila te meten zijn ontworpen om groepen vliegen te testen. We presenteren een eenvoudige, goedkope, hoge doorvoer test voor de beoordeling van alcohol sedatie gevoeligheid in grote aantallen enkele vliegen. De methode vereist geen gespecialiseerde gereedschappen en kan worden uitgevoerd in elk laboratorium met behulp van gemeenschappelijke materialen.

High-Throughput Methode voor het meten van alcohol sedatie tijd van individuele Drosophila melanogaster

De Flypub test meet het gedrag dat de fruitvlieg Drosophila melanogaster toont onder invloed van ethanol. De test kan gemakkelijk worden beheerst door onderzoekers op alle niveaus en toegepast op verschillende verdampte stimuli, het vergemakkelijken van drugsmisbruik en verslavingsstudies.

Flypub om ethanol geïnduceerde gedragsstoornissen en sensibilisatie te bestuderen

De Vermicelli en Capellini Handling Tests van de voorpoot behendigheid profiteren van de natuurlijke neiging van knaagdieren om voedsel items met behulp van bekwame voorpootje en cijfers bewegingen te manipuleren. Dieren zijn gefilmd bij het behandelen van korte strengen van ongekookte droge pasta. Slow motion afspelen van video zorgt voor de kwantificering van voorpootje aanpassingen.

De Vermicelli en Capellini Handling Tests: Eenvoudige kwantitatieve metingen van behendige voorpootje functie in ratten en muizen

Muizen en ratten, als gevolg van hun aangeboren voorzichtigheid, worden in eerste instantie langzaam aan het eten van een nieuw voedingsmiddel, met name in een nieuwe plaats. Dit hyponeophagia kan gemakkelijk worden gemeten in het laboratorium, hoewel proefdieren zijn veel minder angstig zijn dan hun wilde...

Hyponeophagia: Een maat voor angst in de muis

Een methode om het tijdsverloop van ethanol concentratie in de hersenen van ratten te bepalen tijdens operant ethanol zelftoediening beschreven. Gaschromatografie met vlamionisatiedetectie wordt gebruikt om ethanol te kwantificeren in het dialysaat monsters, omdat het de gevoeligheid vereist voor kleine volumes die worden gegenereerd.

Microdialyse van alcohol tijdens de operante ethanol zelftoediening en ethanol bepaling door gaschromatografie

Leer een eenvoudige methode om ethanolgevoeligheid te meten bij Drosophila door het verlies van het rechtvaardigingsreflex te observeren. Deze techniek helpt onderzoekers alcoholgevoeligheid en tolerantie te kwantificeren.

Een eenvoudige manier om Ethanol Gevoeligheid meten in Flies

Meer video's verkennen