5 januari 2012
Gravende, nesten en hamsteren zijn soorten die typisch activiteiten die muizen gemakkelijk uit te voeren in het laboratorium. Dit artikel beschrijft hoe ze kunnen gemakkelijk en goedkoop worden beoordeeld. Deze protocollen zijn extreem gevoelig voor muizenstam, hersenletsel en ziekten. Bovendien vormen zij "milieuverrijking" voor de muizen, en belichamen de "Verfijning" aspect van de "3 V's" 18.
Het doel van deze procedure is om soortspecifieke gedragingen bij muizen te karakteriseren. Ten eerste wordt het graafgedrag bestudeerd door een buis met materiaal te vullen en te meten hoeveel hiervan door het dier wordt verwijderd. Nestmateriaal wordt in de kooi geplaatst en de volledigheid van het nest wordt gekwantificeerd als maatstaf voor het nestelgedrag.
Hamstergedrag wordt onderzocht door een muis in een kooi te plaatsen met toegang tot een tunnel gevuld met voedselpellets, waarbij wordt gemeten hoeveel het dier uit de tunnel haalt. De resultaten van deze reeks tests laten zien of de muizen hun dagelijkse activiteiten uitvoeren. Normaal gesproken kunnen de implicaties van deze techniek worden uitgebreid naar de zoektocht naar behandelingen voor dementie, omdat functioneel vergelijkbare gedragingen bij zowel de muis als bij de mens zijn aangetast.
Typische gedragingen bij de muis kunnen zelfs worden vergeleken met de dagelijkse activiteiten van mensen. De eerste effecten van de ziekte van Alzheimer zijn het belemmeren van de uitvoering van normale dagelijkse activiteiten, zoals het maken van het ontbijt, het strikken van de veters, het plannen van een maaltijd of het doen van boodschappen. Bij onze modelmuizen voor Alzheimer stellen we vast dat de soortspecifieke gedragingen sterk worden geremd.
Hier hebben we een direct model, een nagenoeg homogoloog model tussen de activiteiten van het dagelijks leven zoals gezien bij patiënten met Alzheimer thuis en in de kliniek, en de inhibitie van species. Typische behaviors in de muis. Constructeer een holte van plastic buis, 68 millimeter in diameter en 20 centimeter in lengte. Sluit één uiteinde af met een plug gemaakt van 12 millimeter MDF.
Boor vervolgens twee gaten op één centimeter van het open uiteinde van de graafbuis onder een hoek van 90 graden. Plaats in elk gat een machinebout van vijf centimeter lang en draai deze stevig vast. De buis moet nu ongeveer drie centimeter boven de vloer zweven.
Vul aan één uiteinde de graafbuis met 200 gram voedselpellets en plaats deze gedurende de nacht in de thuiskooi voor habituatie. Indien de muizen in groepen worden gehuisvest, zal de habituatie sneller en grondiger verlopen vanwege het effect van sociale facilitatie. Desalniettemin moeten er nog steeds baselinetesten worden uitgevoerd op individueel gehuisveste muizen.
Vervolgens kunnen ook niet-voedingsmiddelen worden gebruikt om het graafgedrag te meten. Enkele voorbeelden hiervan zijn kleiballetjes, erwtenkiezels en zand. Nadat de dieren gewend zijn geraakt, plaatst u rond 16:00 uur een volledige graafset in de testkooi om een nulmeting uit te voeren.
Het wordt aanbevolen om twee nulmetingen uit te voeren met een tussenpoos van 48 uur. Twee uur later wordt het gewicht van het materiaal dat in de gang is achtergebleven gemeten door de inhoud in een getareerd bakje te legen.
Plaats het niet-geleende materiaal terug in de buis en zet deze de volgende ochtend terug in de thuiskooi. Verwijder de buis en weeg al het resterende materiaal voor analyse. Herhaal deze procedure ten minste 48 uur na de laatste nulmeting.
C 57 black six-muizen graven gewoonlijk ongeveer 70 gram weg in de eerste twee uur en bijna 200 gram gedurende de nacht. Muizen met hippocampale laesies graven vaak minder dan vijf gram weg. Pion-ziekte remt het graafgedrag, net als lipopolysaccharide.
Graafgedrag kan pionziekte detecteren op 10 tot 12 weken na injectie van een homogenaat van een zieke hersenen, terwijl klinische tekenen pas na 22 weken verschijnen. Graafgedrag is sensitief gebleken voor verschillen tussen stammen en voor de knockout van kaliumionkanaalsubunits. Om nestgedrag te meten, worden individuele kooien ingericht en wordt de bodem bedekt met een laag strooisel van 0,5 centimeter.
Plaats een vierkant van vijf centimeter samengeperste watten, genaamd een nest, in elke kooi. Plaats ongeveer één uur voor de donkerfase één muis in elke nestkooi en beoordeel de resultaten de volgende ochtend.
Weeg de hoeveelheid ongescheurd nestmateriaal en beoordeel het nest op een schaal van vijf punten. Een score van één wordt gegeven wanneer het nestmateriaal grotendeels ongemoeid is gelaten, en een vijf wordt toegekend aan een bijna perfect nest waarbij meer dan 90% van het nestmateriaal is verscheurd. Zowel mannetjes als vrouwtjes bouwen nesten, aangezien het doel hiervan thermoregulatie is, naast de associatie met reproductie.
De nestscores voor mannelijke en vrouwelijke C 57 black six muizen liggen in dezelfde reeks. Hoewel we geen gecontroleerde vergelijking hebben uitgevoerd in een enkele groep, scoren de meeste C 57 black six muizen een vier tot vijf voor nestbouw. Echter, wanneer de hippocampus wordt geleseerd, ligt de mediaan score rond de twee.
Een score van drie zal waarschijnlijk niet worden overschreden. Om verzamelgedrag te meten, bereidt u de kist die als thuisbasis dient voor door er een waterfles in te plaatsen en een gat in de zijkant te boren waar de verzamelbuis zal worden bevestigd. Maak een verzamelbuis door een stuk gaas van 45 centimeter rond een buis met een diameter van 40 millimeter te rollen.
Zet het vast met Allen-clips of draadwindingen. Schuif het vervolgens op een stuk zwarte buis van 40 millimeter met een lengte van 10 centimeter. Verbind daarna de verzamelbuis met de eerder klaargemaakte doos en blokkeer het proximale uiteinde met een verwijderbare houten plug.
Bereid de thuisbox voor met een kartonnen tunnel en vervuilde bodembedekking uit de thuiskooi. Zorg ervoor dat de toegang tot de voorraadbuis wordt geblokkeerd. Plaats de muis vroeg op de dag in de box voor latere habituatie, verwijder de voorraadbuis en vul het distale uiteinde met een mengsel van grote en kleine voedselpellets, voor een totaal van 100 gram.
Vlak voor het begin van de donkerfase. Verwijder de houten plug zodat de muis de volgende ochtend toegang heeft tot de verzamelbuis. Ook hier is de timing niet kritisch.
Verzamel en weeg de voedselpellets die zijn verzameld in de thuishokdoos. Gebruik hiervoor vrouwelijke C 57 black six muizen. De mediane gehoarde hoeveelheid zal ongeveer 50 tot 70 grams zijn.
Laesies in de hippocampus onderdrukken verzamelgedrag sterk, terwijl laesies in de prefrontale cortex slechts een zwak effect hebben. Na het bekijken van deze video zou u een goed begrip moeten hebben van hoe soortspecifieke gedragingen in de massa beoordeeld kunnen worden.
Dit artikel beschrijft methoden om soortspecifiek gedrag bij muizen te beoordelen, waaronder graven, nestelen en verzamelen. Dit gedrag is gevoelig voor diverse factoren, zoals de muizenstam en hersenlaesies, en dient als een vorm van omgevingsverrijking.
Kwantitatieve beoordeling van graafgedrag, nestbouw en hamstergedrag bij muizen biedt een translationeel relevante maatstaf voor vroege functionele achteruitgang in neurodegeneratieve ziektemodellen. Deze gedragstests stellen preklinische teams in staat om analogen van activiteiten van het dagelijks leven te evalueren, wat het voorspellende vertrouwen in target-engagement en ziekte-modificerend potentieel ondersteunt. De integratie van dergelijke eindpunten in workflows in de ontdekkingsfase verbetert de triage van het portfolio en vermindert de risico's bij beslissingen over verdere ontwikkeling voor Alzheimer en aanverwante indicaties.
Deze gedragsassays bevinden zich in het continuüm van vroege ontdekking tot preklinisch onderzoek en vormen een brug tussen targetvalidatie en translationeel onderzoek voor portfolio's gericht op neurodegeneratieve ziekten.