Name: Lipide bolletjes-gemedieerde affiniteitschromatografie met behulp van Magnetic Activated Cell Sorting (LIMACS): een nieuwe methode om eiwit-lipide Interactie Analyze (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-26T16:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 33 s
Description: Leer LIMACS voor eiwit-lipide interactie analyse met behulp van magnetische cel sortering en Annexin V-geconjugeerde magnetische kralen. Deze methode maakt zuivering van lipide-bindende eiwitten in een membraanachtige omgeving mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dit werk werd ondersteund door de NIH beurzen R01NS046835 en R01AG034389, en de March of Dimes subsidie ​​6FY08-322. Een speciaal woord van dank is gewijd aan mevrouw Eleanor Brown (Miltenyi Biotec, Auburn, CA), die enorm geholpen met haar inzicht in de MACS techniek. Miltenyi heeft royaal mits het materiaal wordt gebruikt voor de demonstratie van de experimenten zonder kosten. Ik ben ook dankbaar dat dr. Guanghu Wang (Medical College of Georgia / Georgia Health Sciences University, Augusta, GA) die de gegenereerde PKCζ uiten cellijnen. Ondersteuning door het Instituut voor Moleculaire Geneeskunde van het Medical College of Georgia / Georgia Health Sciences University (onder leiding van Dr Lin Mei) is ook erkend.

1. Introductie De lipide bolletjes-gemedieerde affiniteitschromatografie met behulp van magnetische-geactiveerde cel sortering (LIMACS) techniek werd ontwikkeld in ons laboratorium te isoleren ceramide-geassocieerde eiwitcomplexen 1-3. Oorspronkelijk werden de lipide vesicles gemaakt van ceramide en fosfatidylserine, waardoor voor het MACS met behulp van magnetische deeltjes-geconjugeerd Annexine V (zeer affiene om fosfatidylserine) om de blaasjes en de bijbehorende eiwitten te isoleren. We hebben de LIMACS techniek voor de in vitro reconstitutie van een ceramide-geassocieerd polariteit complex en de isolatie van ceramide-bindende eiwitten uit cellysaten 3. LIMACS kan worden gewijzigd met behulp van andere interactiepartners voor de isolatie van de blaasjes (bijvoorbeeld glycolipide-specifeke lectinen of lipide antilichamen). 2. Experimentele procedures Voorbereiding van lipide vesicles en aPKCBinding Assays <ol><li> Lipide blaasjes worden verkregen uit gedroogde mengsels van equimolaire hoeveelheden van fosfatidilserine (105 pg) en de C16-ceramide (85 ug) volgende gewijzigde procedures voor grote liposoom voorbereiding 1,4-7. </li><li> De lipide mengsels zijn vervolgens geresuspendeerd en gesoniceerd gedurende 1 uur in 100 ul blaasje buffer die bestaat uit 50 mM Tris / HCl (pH 7,5) en 150 mM NaCl. </li><li> Na het toevoegen van 300 pi van blaasje buffer aangevuld met 0,1 mM MnCl 2, worden de monsters gecentrifugeerd bij 12.000 μ g gedurende 20 min bij 4 ° C. </li><li> De pellet (grote lipide blaasjes) wordt opnieuw gesuspendeerd in 100 ul van blaasje buffer en geïncubeerd met een nmol van Vybrant CM-dii gedurende 1 uur bij 37 ° C om de blaasjes fractie na scheiding MACS te visualiseren. Vybrant CM-dii is een rode fluorescente kleurstof die specifiek te nemen in lipide membranen. </li><li> Een detergent-vrije cellysaat wordt bereid door sonicatie / homogenisering van de cellen in 300 ul van hypotone buffer (10 mM Tris / HCl (pH 7,0) met protease-inhibitoren en fosfatase), gevolgd door het verwijderen van membraneuze puin door middel van centrifugeren. Een centrifugatie stap bij 100.000 xg gedurende 1 uur moet worden toegevoegd om verontreiniging van het cellysaat met endogene membranen die fosfatidylserine te voorkomen. </li><li> De gewist lysaat wordt toegevoegd aan de lipide bolletjes ophanging, en het mengsel wordt gedurende 2 uur bij 4 ° C. </li><li> Het reactiemengsel wordt aangevuld met 20 ul van 20x Annexine V bindingsbuffer en 50 ul van een oplossing met magnetische korrels geconjugeerd aan Annexine V gevolgd door incubatie gedurende 1 uur bij 4 ° C. </li><li> MACS is uitgevoerd volgens de fabrikant (Miltenyi Biotec, Inc) protocol. De aanwezigheid en hoeveelheid van lipide vesicles wordt bepaald door het toezicht op de Vybrant CM-dii fluorescentie in de flow-through en elutie fracties met behulp van een microplaat fluorescentie lezer. </li><li> De lineaire correlatie tussen de hoeveelheid van vesiculaire vet-en fluorescentie-intensiteit van vesikel-gebonden Vybrant CM-dii is geverifieerd door kwantitatieve high-performance thin-layer chromatografie (HPTLC) van de lipide mengsel toegepast op Annexine V-gebaseerde Macs. </li><li> De specificiteit van de binding reactie van aPKC of andere eiwitten aan het ceramide / fosfatidylserine blaasjes wordt gecontroleerd door een antilichaam concurrentie test met behulp van 1 ug van het anti-PKCζ konijn polyklonaal antilichaam aan de cel lysaat gedurende 1 uur incuberen bij 4 ° C voorafgaand aan de incubatie met de lipide blaasjes. </li><li> Het eiwit binding aan ceramide / fosfatidylserine blaasjes in de MACS eluaat wordt geanalyseerd door SDS-PAGE en immunoblotting. </li></ol> In vitro lipide-eiwit polariteit complex <ol><li> De in vitro reconstitutie van een lipide-eiwit polariteit complex is uitgevoerd volgens de LIMACS procedure zoals beschreven in de vorige paragraaf. In het kort, phosphatidylserine (420 pg) en de C16-ceramide (107 ug) wordt gedroogd van organische oplosmiddelen. </li><li> De gedroogde lipiden zijn geresuspendeerd onder sonicatie in 500 pi van vesicle buffer (50 mM Tris / HCl, pH 7,5, 150 mM NaCl). </li><li> Vijf ul van 10 mM MnCl2, 1 ui Vybrant CM-dii, en 500 ng van PKCζ (menselijke recombinant) wordt toegevoegd en het reactiemengsel geïncubeerd undergentle agitatie gedurende 60 min bij 4 ° C. </li><li> Vybrant CM-dii-lood fosfatidylserine / ceramide blaasjes worden teruggewonnen door middel van centrifugatie bij 12.000 xg gedurende 60 min bij 4 ° C. </li><li> De pellet (roze) is geresuspendeerd in 100 ul Tris-buffer en aangevuld met γS-GTP (100 uM), het BBP (1 mm), GST-Par6 (100 ng), of GST-Cdc42 (500 ng) en verder geïncubeerd gedurende 3 h bij 4 ° C (een andere combinatie van recombinante eiwitten van belang kan hier worden gebruikt). </li><li> Annexine V-buffer (5 ul van een 20x voorraad-oplossing) en Annexine V-geconjugeerde magnetische korrels (50 ul) toegevoegd en het reactiemengsel geïncubeerd onder zacht schudden voor nog eens 30 min bij 4 ° C. </li><li> Annexine V-MACS is uitgevoerd volgens het protocol van de leverancier zoals eerder beschreven. </li> De elutie fractie (1 ml) is aangevuld met 10 ug van pure ovalbumine als neerslag hulp. Het eiwit wordt geconcentreerd door Wessel-Flugge neerslag en geanalyseerd door SDS-PAGE/immunoblotting zoals eerder beschreven 8. <li> De hoeveelheid geëlueerd lipide vesicles wordt gekwantificeerd door de detectie van Vybrant CM-dii (roze) in de organische (chloroform / methanol) fase van het Wessel Flugge neerslag reactie. De hoeveelheid van de geanalyseerde eiwit is genormaliseerd op gelijke hoeveelheden van lipide blaasjes. </li></ol> 3. Resultaten LIMACS zuivering van PKCζ-EGFP en de ceramide bindingsdomein C20ζ-EGFP Een detergent-vrije lysaat van MDCK cellen die volledige lengte PKCζ C-terminaal gekoppeld aan groen fluorescerend eiwit (FLζ-EGFP) of een ceramide bindend domein in het C-terminus van PKCζ (C20ζ-EGFP) werd geïncubeerd met phosphatidylserine / ceramide blaasjes als beschreven in de experimentele procedures. Na elutie van de MACS kolom, werd geanalyseerd met behulp van eiwit immunoblotting en antistoffen tegen PKCζ en EGFP voor de detectie van het eiwit geëlueerd 2. <img src="/files/ftp_upload/2657/2657fig1.jpg" alt="Figuur 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 1"> Figuur 1. LIMACS van EGFP-gelabeld PKCζ en de C-terminale fragment C20ζ met fosfatidylserine / ceramide blaasjes. Detergent-vrije lysaten van MDCK cellen die EGFP (als een niet-bindend control), volledige lengte PKCζ-EGFP, of de ceramide binding, C-terminale fragment C20ζ-EGFP werden geïncubeerd met phosphatidylserine / ceramide blaasjes, zoals beschreven in de experimentele procedures sectie . Na het gebruik van LIMACS, werd eiwit geëlueerd met SDS sample buffer en geanalyseerd door SDS-PAGE en immunoblotting. Het linker paneel toont aan dat EGFP niet binden aan de blaasjes behouden met de Annexine V-linked magnetische korrels. De middelste en rechter paneel toont aan dat de volledige lengte PKCζ-EGFP en C20ζ-EGFP werden behouden door binding aan ceramide.

<ol><li>Wang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+binding+to+ceramide+activates+protein+kinase+Czeta+before+the+formation+of+a+pro-apoptotic+complex+with+PAR-4+in+differentiating+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Direct binding to ceramide activates protein kinase Czeta before the formation of a pro-apoptotic complex with PAR-4 in differentiating stem cells.</a> J Biol Chem. 280, 26415-26424 (2005).</li>
<li>Wang, G., Krishnamurthy, K., Umapathy, N. S., Verin, A. D., Bieberich, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+carboxyl-terminal+domain+of+atypical+protein+kinase+Czeta+binds+to+ceramide+and+regulates+junction+formation+in+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">The carboxyl-terminal domain of atypical protein kinase Czeta binds to ceramide and regulates junction formation in epithelial cells.</a> J Biol Chem. 284, 14469-14475 (2008).</li>
<li>Chalfant, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((De+novo+ceramide+regulates+the+alternative+splicing+of+caspase+9+and+Bcl-x+in+A549+lung+adenocarcinoma+cells.+Dependence+on+protein+phosphatase-1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">De novo ceramide regulates the alternative splicing of caspase 9 and Bcl-x in A549 lung adenocarcinoma cells. Dependence on protein phosphatase-1.</a> J Biol Chem. 277, 12587-12595 (2002).</li>
<li>Simon, C. G., Holloway, P. W., Gear, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exchange+of+C%2816%29-ceramide+between+phospholipid+vesicles%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Exchange of C(16)-ceramide between phospholipid vesicles.</a> Biochemistry. 38, 14676-14682 (1999).</li>
<li>Goni, F. M., Contreras, F. X., Montes, L. R., Sot, J., Alonso, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biophysics+%28and+sociology%29+of+ceramides%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Soc+Symp%22%5BJournal%5D)">Biophysics (and sociology) of ceramides.</a> Biochem Soc Symp. , 177-188 (2005).</li>
<li>Kumagai, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CERT+mediates+intermembrane+transfer+of+various+molecular+species+of+ceramides%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">CERT mediates intermembrane transfer of various molecular species of ceramides.</a> J Biol Chem. 280, 6488-6495 (2005).</li>
<li>Wessel, D., Flugge, U. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+the+quantitative+recovery+of+protein+in+dilute+solution+in+the+presence+of+detergents+and+lipids%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Biochem%22%5BJournal%5D)">A method for the quantitative recovery of protein in dilute solution in the presence of detergents and lipids.</a> Anal Biochem. 138, 141-143 (1984).</li>
</ol>

Voor het testen van de specifieke interactie tussen een lipide en zijn bindend eiwit wordt belemmerd door inbedding van lipiden in het celmembraan. De celmembraan bestaat uit een mengsel van verschillende vetten en eiwitten en het is georganiseerd in lipide microdomeinen of vlotten. Daarom kan de co-zuivering van microdomeinen en eiwitten niet duidelijk onderscheiden of een eiwit direct bindt aan een lipide of slechts verrijkt met een microdomain structuur. Andere methoden met behulp van bepaalde lipiden gecoate op oppe...

Annexine V-geconjugeerde magnetische kralen en MACS micro-en minicolumns werden verstrekt door Miltenyi Biotec, Inc (Auburn, CA). Alle lipiden waren van de hoogste zuiverheid en verkregen van Avanti Polar Lipids (Alabaster, AL).

lipide bolletjes-gemedieerde affiniteitschromatografie met behulp van magnetic activated cell sorting (limacs): een nieuwe methode om eiwit-lipide interactie analyze

Lipid Vesicle-mediated Affinity Chromatography using Magnetic Activated Cell Sorting (LIMACS): a Novel Method to Analyze Protein-lipid Interaction

De analyse van lipide-eiwit interacties is moeilijk omdat lipiden zijn ingebed in celmembranen en daarom ontoegankelijk voor de meeste zuivering procedures. Als alternatief kunnen lipiden worden gecoat op vlakke oppervlakken zoals gebruikt voor het lipide ELISA en Plasmon resonantie spectroscopie. Echter, coating lipiden vormen geen microdomain structuren, die belangrijk kan zijn voor de lipide bindende eigenschappen. Verder zijn deze methoden niet toe dat voor de zuivering van grotere hoeveelheden eiwitten te binden aan hun doel lipiden. Om deze beperkingen van het testen van lipide-eiwit interacties en het lipide-bindende eiwitten te zuiveren ontwikkelden we een nieuwe methode genoemd lipide bolletjes-gemedieerde affiniteitschromatografie met behulp van magnetische-geactiveerde cel sortering (LIMACS). Bij deze methode zijn lipide blaasjes bereid met het doel lipiden en fosfatidylserine als anker voor de lipide Annexine V MACS. Fosfatidylserine is een alomtegenwoordige celmembraan fosfolipide dat een hoge affiniteit voor het eiwit annexine V. Met behulp van magnetische korrels geconjugeerd aan Annexine V de fosfatidylserine-bevattende lipide vesicles zal binden aan de magnetische korrels laat zien. Als de lipide vesicles worden geïncubeerd met een cellysaat het eiwit binding aan het doel lipide zal ook gebonden aan de kralen en kan mede worden gezuiverd met behulp van MACS. Deze methode kan ook gebruikt worden om te testen of recombinante eiwitten reconstrueren een eiwit complex binding aan het doel lipide. We hebben gebruik gemaakt van deze methode om de interactie van atypische PKC (aPKC) show met de sfingolipide ceramide en om samen te zuiveren prostaat apoptose respons 4 (PAR-4), een eiwit binding aan ceramide-geassocieerde aPKC. We hebben ook gebruik gemaakt van deze methode voor de reconstructie van een ceramide-geassocieerd complex van recombinant aPKC met de celpolariteit-gerelateerde eiwitten Par6 en Cdc42. Omdat lipide vesicles kunnen worden bereid met een verscheidenheid van sphingo-of fosfolipiden, LIMACS biedt een veelzijdige test voor lipide-eiwit interacties in een lipide omgeving die sterk lijkt op die van de celmembraan. Extra lipide-eiwit-complexen kunnen worden geïdentificeerd met behulp van proteomics analyse van de lipiden bindend eiwit co-gezuiverd met het lipide blaasjes.

Om de interactie van een proteïne test met haar doel lipide gebruikten we MACS en Annexine V-geconjugeerde magnetische kralen en lipide vesicles gesynthetiseerd uit het doel lipiden en Annexine V-bindend fosfatidylserine. Eiwitten gebonden aan de doelgroep lipide zijn co-gezuiverd en geanalyseerd na elutie van de kralen.

Lipide bolletjes-gemedieerde affiniteitschromatografie met behulp van Magnetic Activated Cell Sorting (LIMACS): een nieuwe methode om eiwit-lipide Interactie Analyze

De analyse van de interactie tussen lipiden en eiwitten is moeilijk omdat lipiden zijn ingebed in celmembranen en daarom onbereikbaar zijn voor de meeste zuiveringsprocedures...

Dit experiment is ontworpen om lipidbindende eiwitten te identificeren en de interactie tussen lipiden en eiwitten te analyseren in een gedefinieerde membraanomgeving van lipidvesikels. Eiwitten uit celhomogenaat worden geïncubeerd met vers bereide lipidvesikels van fosfatidylserine en ceramide. Het reactiemengsel wordt vervolgens aangevuld met magnetic beads geconjugeerd aan Annexin V om de eiwitten die geassocieerd zijn met de lipidvesikels aan de magnetic beads te verankeren. Vervolgens worden de eiwit-lipidvesikels gezuiverd middels magnetisch geactiveerde cellsortering.Om de resultaten van het gebonden lipide-eiwit te identificeren, wordt SDS-PAGE Western blotting gebruikt om de lyx-zuivering van endogene en recombinante atypische PKC en een specifiek ceramide-bindend domein tot expressie gebracht in MDCK-cellen aan te tonen. Het belangrijkste voordeel van deze nieuwe techniek ten opzichte van bestaande methoden zoals ELISA of plasmonresonantiespectroscopie, zoals oppervlaktebinding, is dat de lipide-eiwitinteractie wordt bereikt in een membraanachtige omgeving en dat de bindende eiwitten kunnen worden gezuiverd en geanalyseerd. De implicaties van deze techniek strekken zich u

lipid-vesicle-mediated-affinity-chromatography-using-magnetic

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

De cel permeabele crosslinker DSP [dithiobis-(succinimidyl propionaat)] stabiliseert van voorbijgaande aard en labiele...

Isolatie van labiele Multi-eiwit-complexen door In vivo Gecontroleerde Cellulaire Cross-Linking and Immuno-magnetische affiniteitschromatografie

Dit protocol zal de extractie en analyse van vrije en geësterde bioactieve vetzuren uit cellen demonstreren. Vetzuren worden nauwkeurig gekwantificeerd met behulp van stabiele isotoopverdunning, chirale vloeistofchromatografie, electronenvangst-atmosferische chemische ionisatie-meervoudige reactiebewaking massaspectrometrie (SID-LC-ECAPCI-MRM/MS).

Cellulaire vetextractie voor gerichte stabiele isotopen Verdunning vloeistofchromatografie-massaspectrometrie Analyse

In this video, we demonstrate the interaction between proteins and artificial phospholipid vesicles using quantitative flow cytometry. The binding of fluorescently-labeled proteins to fluorescently-labeled phospholipid vesicles increases the mean fluorescence intensity, and this increase is detected by a flow cytometer.

Quantitative Flow Cytometry to Study Labeled Protein-Phospholipid Vesicle Interactions

SILAC immunoprecipitatie experimenten vormen een krachtig middel voor het ontdekken van nieuwe eiwit: eiwit interacties. Doordat de nauwkeurige relatieve kwantificering van eiwitgehalte in zowel controle monsters, waar interacties gemakkelijk kan worden onderscheiden van experimenteel verontreinigingen en lage affiniteit interacties bewaard door het gebruik van minder stringente buffer omstandigheden.

Identificatie van eiwit interacties Partners in zoogdiercellen behulp SILAC-immunoprecipitaties Kwantitatieve Proteomics

Het gepresenteerde protocol beschrijft de analyse van membraaneiwitgemedieerde transport op het niveau van enkelvoudige transporteurs met behulp van porie-overspande, oplosmiddelvrije lipide dubbellagen. Dit wordt bereikt door de creatie van in grote aantallen geproduceerde nanopore-arraychips, gecombineerd met zeer parallelle dataverwerving en analyse, waardoor de toekomstige vestiging van membraaneiwiteffectorscreenings mogelijk wordt.

Membraan transportprocessen geanalyseerd door een Highly Parallel Nanopore Chip System aan Single Protein Resolution

Hier beschrijven we protocollen bij zoogdiercellen door solid-state frezen verstoren bij een cryogene temperatuur, produceren een cel uittreksel uit de resulterende cel poeder, en te isoleren eiwitcomplexen van rente door affiniteitsinvangmiddel upon-antilichaam gekoppeld micron-schaal paramagnetische kralen.

Eiwitcomplex Affiniteit Capture uit Cryomilled zoogdiercellen

Vetdruppels belangrijke organellen voor de replicatie van verschillende pathogenen, waaronder het hepatitis C virus (HCV). We beschrijven een methode om lipidedruppeltjes voor de kwantitatieve massaspectrometrie van geassocieerde eiwitten te isoleren; kan worden gebruikt onder verschillende omstandigheden, zoals virusinfectie, omgevingsstress of geneesmiddelbehandeling.

Lipide Druppeltje Isolatie kwantitatieve massaspectrometrie Analyse

Hier presenteren we een protocol voor een verterings techniek op membraan voor de bereiding van monsters voor massaspectrometrie. Deze techniek vergemakkelijkt de gemakkelijke analyse van eiwit-eiwit interacties.

Evaluatie van eiwit-eiwit interacties met behulp van een on-membraan Vergistings techniek

Thermoforese op microschaal verkrijgt snel bindingsconstanten tegen lage materiaalkosten. Gelabelde of labelvrije thermoforese op microschaal is in de handel verkrijgbaar; labelvrije thermoforese is echter niet in staat tot de diversiteit aan interactiemetingen die kunnen worden uitgevoerd met behulp van fluorescerende labels. Wij bieden een protocol voor gelabelde thermoforesemetingen.

Gebruik van thermoforese op microschaal om eiwit-lipide-interacties te meten

We beschrijven een methode voor het gebruik van cyclodextrine om de uitwisseling tussen lipiden van het plasmamembraan met exogene lipiden te bemiddelen. Deze techniek kan worden gecombineerd met experimenten die transmembraaneiwitten bestuderen, die zich anders gedragen in lipidevlotachtige omgevingen dan in niet-vlotachtige omgevingen.

Lipidenuitwisselingstest in levende cellen

We presenteren een kosteneffectieve methode voor het beoordelen van liposomale membraanpermeabiliteit met een superieure gevoeligheid en resolutie ten opzichte van conventionele technieken. Met behulp van een nieuwe ingekapselde ligandsubstitutiereactie detecteert deze techniek fosfolipase A 2-geïnduceerde veranderingen in modelmembranen. Deze toegankelijke benadering kan eenvoudig worden geïntegreerd met standaardanalyses en verbetert de resolutie voor het bestuderen van membraanbiofysica en...

Een liposoommembraanpermeabiliteitstest voor het onderzoeken van de effecten van fosfatidylinositolfosfaatgroepen op de membraneutrope werking van gif PLA2

Leer LIMACS voor eiwit-lipide interactie analyse met behulp van magnetische cel sortering en Annexin V-geconjugeerde magnetische kralen. Deze methode maakt zuivering van lipide-bindende eiwitten in een membraanachtige omgeving mogelijk.

Lipide bolletjes-gemedieerde affiniteitschromatografie met behulp van Magnetic Activated Cell Sorting (LIMACS): een nieuwe methode om eiwit-lipide Interactie Analyze (Video) | JoVE Journal

Lipide bolletjes-gemedieerde affiniteitschromatografie met behulp van Magnetic Activated Cell Sorting (LIMACS): een nieuwe methode om eiwit-lipide Interactie Analyze

Meer video's verkennen