Name: Immunocytochemie: menselijke neurale stamcellen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-08-24T00:00:00.000+00:00
Duration: 19 min 41 s
Description: Leer immunocytochemie voor menselijke neurale voorlopercellen met geoptimaliseerde antilichaamprotocollen. Deze methode maximaliseert kleuringsefficiëntie en reduceert antilichaamverbruik in neurobiologisch onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs willen dr. Philip H. Schwartz van de National Human Resource Neural Stamcel erkennen bij de Children&#39;s Hospital, Orange County Instituut voor het verstrekken van hNSPC culturen en dr. Gary Bassell aan de Emory University voor een eerste instructie in de parafilm vlekken techniek.

Dag 1: Voorbereiding van de Duitse dekglaasjes en zaaien Cellen Let op: Duitse dekglaasjes worden vaak voorkeur voor het kweken van primaire neurale stamcellen en neuronen. We gebruiken de volgende schoonmaak protocol om celadhesie en de verspreiding te verbeteren. Positie coverslips in een klein rek dat vloeibare toegang tot beide zijden van het dekglaasje zal toestaan. De eerste, incubeer dekglaasjes in 1% Liquinox gedurende 10 minuten, gevolgd door drie wasbeurten met gedemineraliseerd water. Zorg dat er geen zeepbellen blijven. Vervolgens glijdt incuberen in 1 M HCl gedurende 30 minuten, gevolgd door drie wasbeurten met gedemineraliseerd water. Droog coverslips bij 65 ° C gedurende de nacht. Overdracht coverslips naar een glazen schaal en autoclaaf te steriliseren. <ol><li> In een weefselkweek kap, plaats steriele dekglaasjes in een passende afmetingen goed plaat. </li><li> Coat coverslips met laminin voor celadhesie. Incubeer coverslips in 10 ug / ml poly D-Lysine (PDL) in steriel water gedurende 5 minuten bij kamertemperatuur. Verwijder de PDL en incubeer dekglaasjes in 20 ug / ml laminine in EMEM gedurende 4 uur of &#39;s nachts, in een 37 ° C weefselkweek incubator. <ol><li> Opmerking: Raadpleeg de passage menselijke neurale stamcellen artikel ( <a href="/index/Details.stp?ID=263">https://www.jove.com/index/Details.stp?ID=263</a> ) en de Counting menselijke neurale stamcellen artikel ( <a href="/index/Details.stp?ID=262">https://www.jove.com / index / Details.stp? ID = 262</a> ) om te leren hoe te mengen en te tellen hNSPCs. </li></ol></li><li> Spoel laminine-beklede dekglaasjes met PBS en zaad cellen in elke dekglaasje-bevattende goed op een bepaalde dichtheid (we gebruiken vaak een eerste plating dichtheid van 100,000-300,000 cellen / ml voor cellen die we plating voor immunokleuring). </li><li> Laat de plaat in 37 ° C mogelijk weefselkweek incubator en cellen zich te houden aan dekglaasjes (meestal een minimum van 4 uur is vereist). </li></ol> Dag 2: Fixing, Permeabilizing, blokkeren, en de toevoeging van primaire antilichaam aan cellen Let op: We gebruiken de volgende 4% paraformaldehyde fixeermiddel naar cel morfologie behouden. Het recept bestaat uit een pH-overgang om de paraformaldehyde te gaan in de oplossing. We verkiezen deze methode in plaats van het gebruik van warmte om paraformaldehyde te ontbinden omdat hogere temperaturen kan leiden tot het genereren van mierenzuur, dat achtergrondkleuring kan toenemen bij het gebruik van fluorescentie. Sommige componenten van het fixatief helpen bij het ​​cytoskelet structuur (MgCl 2 en EGTA) te behouden, terwijl anderen te helpen om de algemene morfologie (sucrose) te handhaven. 4% Paraformaldehyde Fixatief voor Cellen <table style="border-collapse: collapse; border: medium none" border="1" cellspacing="0" cellpadding="0"><tbody><tr><td> Reagentia en stappen: </td><td> Bedrag voor 100 ml fixatief: </td></tr><tr><td> MilliQ water </td><td> 75 ml </td></tr><tr><td> Paraformaldehyd (wegen in de zuurkast) </td><td> 4 g </td></tr><tr><td> 10N NaOH, roer en voeg druppelsgewijs tot oplossing wist </td><td> als dat nodig </td></tr><tr><td> 10X PBS </td><td> 10 ml </td></tr><tr><td> 1M MgCl 2 </td><td> 0,5 ml </td></tr><tr><td> 0,5 M EGTA </td><td> 2 ml </td></tr><tr><td> Sucrose </td><td> 4 g </td></tr><tr><td> 6N HCl Titreer tot pH 7,4 </td><td> als dat nodig </td></tr><tr><td> MilliQ water </td><td> brengen tot 100 ml </td></tr><tr><td colspan="2"> Bewaren bij 4 ° C gedurende maximaal 1 week. Warm tot 37 ° C voor gebruik </td></tr></tbody></table><ol><li> Op de bank, verwijdert u de media en voeg voorverwarmd fixeermiddel. Incubeer gedurende 5-15 minuten (afhankelijk van het antigeen te detecteren, gebruiken we meestal 10 minuten). Voer deze en de volgende stappen uit bij kamertemperatuur. </li><li> Gooi het fixeermiddel in een geschikt recipiënt, zoals veel instellingen hanteren paraformaldehyde als gevaarlijk afval. Was de cellen drie keer met PBS, 5 minuten per keer. Bij het verwijderen van oplossingen van de cellen, wees voorzichtig dat de zuigkracht niet uitdroogt de cellen. Ook, altijd de volgende oplossing bij de hand om de cellen toe te voegen voordat u de oplossing die jassen, zodat ze cellen niet verlaten om te drogen. </li><li> Als het antigeen van belang is in de cel, moet de cel membraan doorlaatbaar worden gemaakt om het invoeren van het antilichaam mogelijk te maken. Om permeabilize cellen, gebruik dan een verse 0,3% Triton X-100-oplossing in PBS. Pipet langzaam omdat Triton is viskeus, en zorg ervoor dat het wasmiddel volledig is opgelost in PBS voor het toevoegen aan cellen. Permeabilize cellen voor 5 minuten, gevolgd door het wassen van de cellen drie keer met PBS, 5 minuten per keer. </li><li> De cellen moeten worden behandeld met een blokkerende stof voor niet-specifieke binding van het antilichaam te voorkomen. We maken gebruik van bovine serum albumine (BSA) als een blokkerend middel. De blokkering oplossing is gemaakt door het oplossen van 5% BSA in PBS (op een rocker of een rotator omdat het tijd kost om op te lossen), dan filteren van de solution met een 0,45 pm spuitfilter. Blok cellen in 5% BSA / PBS-oplossing gedurende 1 uur bij kamertemperatuur. </li></ol> Verdun het primaire antilichaam (dat is hopelijk specifiek voor het eiwit van belang) voor een vooraf bepaalde concentratie in 1% BSA / PBS (bereid door verdunning van 5% BSA / PBS). Plaats verdunde primaire antilichaam (30 ul per 25 mm dekglaasje, 20 ul per 18 mm dekglaasje, 15 ul per 12 mm dekglaasje) op een glasplaat bedekt met Parafilm. Pak de dekglaasje met vaste cellen, omkeren zodanig dat de cellen naar beneden gezicht, en leg het over de antistof-oplossing, zodat de cellen in contact komen met het antilichaam. Plaats een tweede parafilm strip over de gehele constructie. Incubeer bij 4 ° C gedurende de nacht. Dag 3: wassen, tweede antilichaam Incubatie, Nuclear Stain en montage <ol><li> Verwijder voorzichtig de bovenste parafilm strip en pak het dekglaasje, keer het, en plaats het terug in de plaat met PBS in elk goed voor gewassen, zodat de cellen naar boven. </li><li> Was de cellen drie keer met PBS, 5 minuten per keer. </li><li> Kies een secundair antilichaam dat het primaire antilichaam zal detecteren, bijvoorbeeld als het primaire antilichaam werd gemaakt in een konijn, het secundaire antilichaam moeten erkennen konijn IgG. Zorg ervoor dat ook overeenkomen met het antilichaam isotype (IgG, IgM, etc). Bij gebruik van meerdere primaire antilichamen, zorg ervoor dat ze van verschillende soorten of isotypen, en van plan op te sporen met verschillende markers aan de secundaire antilichamen. Bijvoorbeeld, je zou een anti-konijn secundaire gekoppeld aan een rode fluorofoor te gebruiken met een anti-muis secundaire gekoppeld aan een groene fluorofoor. Incubeer cellen in het secundaire antilichaam-oplossing verdund tot een geschikte concentratie in 1% BSA gedurende 2 uur in het donker bij kamertemperatuur, met gebruikmaking van dezelfde techniek als voor primaire (stappen niet weergegeven in de video). Het volume van de secundaire antilichaam nodig is voor de incubatie kan iets groter zijn dan die voor de primaire antilichaam als de secundaire wordt opgeslagen als een glycerol-oplossing (40 ul per 25 mm dekglaasje, 30 ul per 18 mm dekglaasje, 25 ul per 12 mm dekglaasje) . <ul><li> Opmerking: Als u gebruik maakt van fluorescerende moleculen aan het secundaire antilichaam te visualiseren, het monster moet worden beschermd tegen licht nadat het secundaire antilichaam is toegevoegd. Incubeer in het donker, of in een folie bedekt bord. </li></ul></li><li> Verwijder voorzichtig de dekglaasjes van de parafilm zoals beschreven voor het primaire antilichaam. Was cellen twee keer met PBS, 5 minuten per keer, gevolgd door een 1 minuut incubatie in 2 ug / ml Hoechst nucleaire vlek verdund in PBS (als er een nucleaire tegenkleuring heeft de voorkeur). Als het Hoechst vlek oud is en het signaal te zwak is, kunt u de verhoging van de incubatietijd en / of de concentratie. Na incubatie met Hoechst, was een keer met PBS gedurende 5 minuten. </li><li> De dekglaasjes moet worden gemonteerd op een dia met een montage van media voor visualisatie op een microscoop. In gevallen waarin een fluorescerend molecuul wordt gebruikt voor visualisatie van het secundaire antilichaam, moet de montage media bevatten agenten te minimaliseren fotobleken. We maken gebruik van Vectashield als een montage van media voor fluorescentie. Plaats een passende omvang daling van Vectashield op een microscoopglaasje (12 ul per 25 mm dekglaasje, 6 pl per 18 mm dekglaasje, 3 ul per 12 mm dekglaasje). </li><li> Voorzichtig pak de dekglaasje en spoel de achterzijde met gedemineraliseerd water om zouten (van de PBS) te verwijderen. Dep het overtollige water op een kimwipe of een papieren handdoek, en lag op de daling van Vectashield met cellen naar beneden. Plaats het dekglaasje op een hoek en laat langzaam af te dalen naar luchtbellen te voorkomen. Label de dia met de datum en een monster informatie. </li><li> Laat dia&#39;s met dekglaasjes te drogen (in het donker), dan zuig overtollige Vectashield van over de hele dekglaasje rand. De dekglaasje randen kunnen nu worden afgesloten met nagellak, indien gewenst (met name handig als dekglaasjes zal worden bekeken op een omgekeerde microscoop). We meestal slaan onze dia&#39;s in een -20 ° C vriezer. </li></ol>

<ol><li>Flanagan, L. A., Chou, J., Falet, H., Neujahr, R., Hartwig, J. H., Stossel, T. P., Filamin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Filamin+A%2C+the+Arp2%2F3+complex%2C+and+the+morphology+and+function+of+cortical+actin+filaments+in+human+melanoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Filamin A, the Arp2/3 complex, and the morphology and function of cortical actin filaments in human melanoma cells.</a> J. Cell Biol. 155, 511-518 (2001).</li>
<li>Flanagan, L. A., Rebaza, L. M., Derzic, S., Schwartz, P. H., Monuki, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+human+neural+precursor+cells+by+laminin+and+integrins%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Res%22%5BJournal%5D)">Regulation of human neural precursor cells by laminin and integrins.</a> J. Neurosci. Res. 83, 845-856 (2006).</li>
<li>Flanagan, L. A., Ziaeian, B., Palmer, T., Schwartz, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunocytochemical+analysis+of+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22In+Human+Stem+Cell+Manual%3A+A+Laboratory+Guide%22%5BJournal%5D)">Immunocytochemical analysis of stem cells.</a> In Human Stem Cell Manual: A Laboratory Guide. Loring, J. F., Wesselschmidt, R. W., Schwartz, P. H. , Elsevier/Cell Press. (2007).</li>
<li>Marchenko, S., Flanagan, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Passaging+Human+Neural+Stem+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Passaging Human Neural Stem Cells.</a> Journal of Visualized Experiments. 7, (2007).</li>
<li>Marchenko, S., Flanagan, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Counting+Human+Neural+Stem+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Counting Human Neural Stem Cells.</a> Journal of Visualized Experiments. 7, (2007).</li>
</ol>

Dit protocol beschrijft een procedure voor immunokleuring hNSPCs dat het volume van antilichamen nodig minimaliseert en geeft betrouwbare cel vlekken. De procedure zoals beschreven is het beste voor intracellulaire antigenen, maar kan worden aangepast aan het celoppervlak moleculen vlek of vlekken van het cytoskelet te verbeteren.

<table><tbody><tr><td>Duitse glas (Deutsche Spiegelglas) dekglasjes</td><td>Instrument</td><td>Carolina Biological</td><td>WW-63-3029</td><td>dekglasjes van 12,15,18, 22, 25 mm beschikbaar</td></tr><tr><td>Liquinox fosfaatvrij detergent</td><td>Reagens</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z273279</td><td>zeer viskeus</td></tr><tr><td>Poly-D-lysine hydrobromide</td><td>Reagens</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7280</td><td></td></tr><tr><td>Laminine, natuurlijk muis</td><td>Reagens</td><td>Invitrogen</td><td>23017-015</td><td></td></tr><tr><td>EMEM (1X)</td><td>Reagens</td><td>Mediatech, Inc.</td><td>MT-10-010-CV</td><td>Gedistribueerd door Fisher onder het aangegeven catalogusnummer</td></tr><tr><td>24-well plaat</td><td>Instrument</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-772-1</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Reagens</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP151-500</td><td>zeer viskeus</td></tr><tr><td>Paraformaldehyde</td><td>Reagens</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6148</td><td>potentieel carcinogeen, wees voorzichtig bij gebruik in poeder- en oplossingsvorm</td></tr><tr><td>Bovien Serum Albumine, IgG-vrij</td><td>Reagens</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>001-000-161</td><td></td></tr><tr><td>H&amp;#8211;chst 33342</td><td>Reagens</td><td>Invitrogen</td><td>H-1399</td><td></td></tr><tr><td>Vectashield</td><td>Reagens</td><td>Vector Laboratories</td><td>H-1000</td><td>viskeus</td></tr></tbody></table>

immunocytochemie: menselijke neurale stamcellen

Immunocytochemistry: Human Neural Stem Cells

Immunocytochemie is een zeer krachtige en vrij eenvoudige methode voor het bepalen van de aanwezigheid, subcellulaire lokalisatie, en relatieve rijkdom van een antigeen van belang, meestal een eiwit, in gekweekte cellen. Dit protocol biedt een makkelijk te volgen reeks van stappen die in staat zal stellen onderzoekers aan primaire en secundaire antilichamen te besparen, terwijl het krijgen van hoge kwaliteit, reproduceerbare kwalitatieve en kwantitatieve gegevens uit hun vlekken. Er zijn twee aspecten van dit protocol die helpen om het volume van antilichaam nodig voor kleuring behouden. Voor een, zijn de cellen gekweekt op kleine, ronde dekglaasjes die zijn geplaatst in putjes van een weefselkweek plaat. Na fixatie, kunnen de cellen op de dekglaasjes verwijderd worden uit de putjes van de plaat. Voor antilichaam kleuring, is het dekglaasje met cellen omgekeerd op een kleine daling van antilichamen oplossing op parafilm en is bedekt met een tweede stuk van Parafilm om uitdroging te voorkomen. Met behulp van deze methode is slechts ~ 25 ui van antilichaam-oplossing die nodig is voor elke dekglaasje (of monster), te worden gemerkt. Dit protocol beschrijft immunokleuring van menselijke neurale stamcellen / precursor cellen (hNSPCs), maar kan worden gebruikt voor vele andere celtypes.

Immunocytochemie is een krachtige methode om de aanwezigheid, subcellulaire lokalisatie, en relatieve rijkdom van een antigeen van belang in gekweekte cellen te bepalen. Dit protocol biedt een makkelijk te volgen serie van stappen die in staat zal stellen een om antistoffen te behouden en het meeste uit je vlekken krijgen.

Immunocytochemie: menselijke neurale stamcellen

Immunocytochemie is een zeer krachtige en relatief eenvoudige methode om de aanwezigheid, subcellulaire lokalisatie en relatieve abundantie van ... vast te stellen.

Hallo, ik ben Steve. Ik werk in het lab van Dr. Flanagan in het Department of Pathology aan UC, Irvine. En vandaag ga ik je laten zien hoe je immunochemie kunt doen van humane neurale precursorcellen.Dit protocol omvat het plaatsen van cellen op met laminine gecoate dekglasjes en het blokkeren en incuberen van cellen in primaire antilichamen gedurende een nacht, en vervolgens het doen van meerdere wasbeurten en het aanbrengen van secundair antilichaam bij kamertemperatuur. En tenslotte, het monteren van de dekglasjes op microscoopvlakken. Laten we beginnen.Dus eerst ga ik drie steriele Duitse glazen dekglasjes plaatsen die 12 millimeter breed zijn in een 24-wellsplaat om ze te coaten met laminaat. Dus nu heb ik mijn dekglasjes in de plaat, en eerst ga ik een oplossing van PDL poly-lysine toevoegen, en ik ga de dekglasjes vijf minuten in PDL incuberen bij kamertemperatuur. Dus nu aan het einde van vijf minuten ga ik PDL verwijderen en laminine aanbrengen, en ik ga de dekglasjes minimaal vier uur of beter nog een nacht in laminaat incuberen.Dus ik heb de plaat een nacht in laminaat geïncubeerd, en nu ga ik de dekglasjes spoelen met PBS en humane neurale precursorcellen plateren die i

immunocytochemistry-human-neural-stem-cells

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Opschorting immunocytochemische kleuring van menselijke pluripotente stamcellen (hPSCs) voor het celoppervlak markers (SSEA-3/SSEA-4) werd bereikt op basis van het gebruik van een zelfgemaakte Cytospin apparaat tot een monolaag van cellen voor observatie en kwantificering te creëren.

Immunocytochemische analyse van menselijke pluripotente stamcellen met behulp van een Self-Made Cytospin Apparatuur

Deze video protocol laat zien hoe om te discrimineren en te goeder trouw neurale stamcellen te sommen in een gemengde populatie van neurale voorloper cellen met behulp van de neurale kolonievormende cell assay.

Neurale-Colony Forming Cell-test: Een test om Bona Fide neurale stamcellen van Neural Progenitor Cellen Discrimineer

This video demonstrates the procedure for staining newly proliferated neural stem cells in brain tissue sections using EdU incorporation, followed by immunofluorescence to visualize specific proteins, enhancing the understanding of cell dynamics and proliferation.

Immunofluorescence Staining for Visualizing Proliferated Neural Stem Cells in Mouse Brain Sections

Source: Becker-Kojić, Z. A., et. al., GM-Free Generation of Blood-Derived Neuronal Cells. J. Vis. Exp. (2021)The video demonstrates a protocol for preparing neural cells derived from reprogrammed peripheral blood cells for fluorescence microscopy, showcasing distinct cell types and developmental stages through immunofluorescence imaging.

Immunofluorescence Microscopy of Neural Cells Differentiated from Peripheral Blood-Derived Cells 

Neurale stamcellen geoogst uit de volwassen hersenen worden steeds gebruikt in toepassingen, variërend van het fundamenteel onderzoek van de ontwikkeling van het zenuwstelsel aan het verkennen van potentiële klinische toepassingen in de regeneratieve geneeskunde. Dit maakt strenge controle op de isolatie en kweekomstandigheden gebruikt om deze cellen cruciaal voor experimentele resultaten goed groeien.

Groeiende neurale stamcellen uit Conventionele en Niet-conventionele Regio&#39;s van de Adult knaagdierhersenen

We bieden een gedetailleerde beschrijving van een protocol voor flowcytometrische analyse van oppervlakte-antigenen en/of intracellulaire antigenen in neurale celtypen. Kritische aspecten van experimentele planning, stap-voor-stap methodologische procedures en fundamentele principes van flowcytometrie worden uitgelegd om neurobiologen in staat te stellen deze krachtige technologie te benutten.

Flowcytometrie Protocollen voor Surface en intracellulaire Antigen Analyses van Neural Cell Types

Een werkwijze werd ontwikkeld om direct voort humane neurale stamcellen van hematopoïetische progenitorcellen verrijkte uit perifere bloedcellen.

Direct Inductie van Human neurale stamcellen uit perifeer bloed hematopoïetische voorlopercellen

Neurale stamcellen (NSC) verwijzen naar cellen die kunnen zichzelf vernieuwen en differentiëren in de drie neurale geslachten. We beschrijven hier een protocol NSC frequentie te bepalen in een bepaalde celpopulatie via neurosfeer vorming en differentiatie onder klonale omstandigheden.

Opsomming van neurale stamcellen Met behulp van klonen Testen

Dit protocol demonstreert methodologieën voor een muismodel van open-schedel traumatisch hersenletsel en transplantatie van gekweekte menselijke geïnduceerde pluripotente stamcel-afgeleide cellen in de wond site. Gedrags-en histologische tests van uitkomsten van deze procedures worden ook in het kort beschreven.

Gecontroleerde corticale impact model van muis hersenletsel met therapeutische transplantatie van menselijk geïnduceerde pluripotente stamcel-afgeleide neurale cellen

Hier gepresenteerd is een protocol voor het genereren van een eencellige cultuur van menselijke embryonale stamcellen en hun daaropvolgende differentiatie in neurale voorlopercellen. Het protocol is eenvoudig, robuust, schaalbaar en geschikt voor geneesmiddelen screening en toepassingen voor regeneratieve geneeskunde.

Efficiënte Neurale differentiatie met behulp van eencellige cultuur van menselijke embryonale stamcellen

Dit protocol beschrijft strategieën voor het identificeren en verrijken van de celtoestand in neurale stamcelculturen van primaire volwassen muizen door middel van autofluorescentiebeeldvorming met behulp van i) een confocale microscoop, ii) een fluorescerend geactiveerde celsorteerder om intensiteitsbeeldvorming uit te voeren, of iii) een multifotonenmicroscoop om fluorescentiebeeldvorming uit te voeren.

Classificatie van neurale stamcelactiveringstoestand in vitro met behulp van autofluorescentie

Leer immunocytochemie voor menselijke neurale voorlopercellen met geoptimaliseerde antilichaamprotocollen. Deze methode maximaliseert kleuringsefficiëntie en reduceert antilichaamverbruik in neurobiologisch onderzoek.

Immunocytochemie: menselijke neurale stamcellen

Meer video's verkennen