Name: Creatie van Omkeerbare Cholestatische Rat Model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-21T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 39 s
Description: Leer hoe u een omkeerbaar cholestatisch ratmodel maakt met microchirurgische technieken en isofluraananesthesie. Deze methode ondersteunt onderzoek naar leverfunctie en galwegpathologie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. Rat gal anatomie De gemiddelde galwegen diameter en lengte was 1 mm en 29 mm, respectievelijk. De gemiddelde afstand tussen de pylorus en de twaalfvingerige darm papil was 28 mm. Er zijn twee belangrijke pancreas kabelgoten die open in de galwegen - het voorste kanaal opent op de linkerkant en de achterste kanaal opent op de rechterkant. In aanvulling op deze grote kanalen, een aantal kleine kanalen dat alle drie de delen van de pancreas drain direct te openen aan de galwegen. 6 2. Techniek Alle dierlijke experimenten werden uitgevoerd in overeenstemming met de National Institutes of Health richtlijnen voor ethisch onderzoek en werden goedgekeurd door Research van de instelling Comite en Animal Care Comite. Mannelijke Sprague-Dawley ratten van 8 weken werden gebruikt voor deze demonstratie. De ratten werden verkregen van Charles River Laboratories in Wilmington, MA en allen waren meer dan 300 gram. Ratten hadden toegang tot standaard-laboratorium-dieet en werden samen ondergebracht in standaard laboratorium omstandigheden. Ratten werden in eerste instantie verdoofd met isofluorane en hielden onder verdoving tijdens een operatie met isofluorane via een masker. Een middellijn incisie van 2 cm werd gemaakt vanaf de xiphisternum. Zodra de fascia werd geopend, de lever lobben waren craniaal ingetrokken met oprolmechanisme een Sen, en de twaalfvingerige darm werd ingetrokken caudaal met behulp van Q-tips. De galgang werd geïdentificeerd als een buisvormige structuur het invoeren van de twaalfvingerige darm. De galgang werd geplaatst onder spanning en gedeeltelijk opengesneden. Een steriele 5 cm lang polyethyleen buis met een binnendiameter van 0,6 mm en een buitendiameter van 0,9 mm werd gebruikt. Het ene uiteinde van deze buis was warmte verzegeld en het andere uiteinde werd voorzichtig schuin. De schuine einde was vervolgens doorgegeven aan de galwegen. Dit werd bevestigd in plaats met behulp van 8-0 nylon hechtingen zowel proximaal en distaal van de opening in de galgang. De resterende buis samen met de verzegelde einde was geplaatst in de buikholte. De operatieve site werd geïrrigeerd met een fysiologische zoutoplossing. De buik werd vervolgens afgesloten in 2 lagen, met 4-0 polyglactine hechtdraad. De linea alba werd afgesloten met continue hechtingen en de onderbroken dermale hechtingen werden geplaatst. Huidlijm werd vervolgens toegepast op de huid. De ratten werden toegelaten om te herstellen onder standaard laboratorium condities met dagelijkse lichaamsgewicht controle om een ​​goede hydratatie te waarborgen. Voor de cholestase hersteloperatie, de ratten werden verdoofd met behulp van isofluorane zoals eerder beschreven. De buik werd geopend over de vorige incisie site. De buis werd geïdentificeerd en die uit de buikholte. Omental verklevingen rondom de buis worden bevrijd met behulp van stompe en scherpe dissectie. Een site in de twaalfvingerige darm werd geïdentificeerd voor comfortabele positionering van de duodenostomy buis. Een tas snaar hechting, 2-3 mm in diameter, werd vervolgens geplaatst met behulp van 8-0 Nylon. De twaalfvingerige darm werd toen geopend binnen deze tas snaar hechtdraad. De verzegelde eind van de buis werd vervolgens teruggebracht tot de juiste lengte. Vrij verkeer van gal was gewaarborgd. Dit einde van de buis werd vervolgens geplaatst in de twaalfvingerige darm en de beurs snaar hechting werd aangescherpt. De buik werd geïrrigeerd en gesloten in lagen. In een eerdere studie, waarin choledochoduodenostomy werd uitgevoerd met behulp van een andere techniek, werden de ratten overleefden 12 weken en de ratten waren gezond in die periode. Ook deze studie bevestigt de omkering van biochemische en histologische veranderingen na choledochoduodenostomy bij ratten blootgesteld aan obstructie van de galwegen voor een periode van 2 weken. 7

<ol><li>Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+nutritional+status+associated+with+obstructive+jaundice+and+biliary+drainage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Nutr%22%5BJournal%5D)">Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats.</a> Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).</li>
<li>Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-mediated+sinusoidal+endothelial+cell+injury+after+extensive+hepatectomy+in+cholestatic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats.</a> Hepatology. 25, 636-641 (1997).</li>
<li>Abe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kupffer+cell-derived+interleukin+10+is+responsible+for+impaired+bacterial+clearance+in+bile+duct-ligated+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice.</a> Hepatology. 40, 414-423 (2004).</li>
<li>Saiki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preoperative+internal+biliary+drainage+is+superior+to+external+biliary+drainage+in+liver+regeneration+and+function+after+hepatectomy+in+obstructive+jaundiced+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats.</a> Ann Surg. 230, 655-662 (1999).</li>
<li>Subhas, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+methylprednisolone+on+warm+ischemia-reperfusion+injury+in+a+cholestatic+rat+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver.</a> Am J Surg. 199, 377-380 (2010).</li>
<li>Kara, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+anatomical+study+on+the+rat+pancreas+and+its+ducts+with+emphasis+on+the+surgical+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Anat%22%5BJournal%5D)">The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach.</a> Ann Anat. 187, 105-112 (2005).</li>
<li>Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choledochoduodenostomy+in+the+rat+with+obstructive+jaundice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice.</a> J Surg Res. 23, 321-331 (1977).</li>
</ol>

Cholestase leidt tot een groot aantal veranderingen in het gastro-intestinale systeem. Er zijn studies gedaan naar de veranderingen in het immuunsysteem en voedingstoestand. 1-3 Cholestase kan invloed hebben op de resultaten van de lever operaties. Studies zijn uitgevoerd om de uitkomsten van de lever operaties in de aanwezigheid van cholestase te verbeteren. 4-5 Met verbeteringen in de geneeskunde en het onderzoek, zal verder onderzoek worden gedaan op cholestase. Daarom is het noodzakelijk om een...

creatie van omkeerbare cholestatische rat model

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Cholestase is een klinische aandoening die vaak voorkomen door zowel chirurgen en gastro-enterologen. Cholestase kan leiden tot verschillende fysiologische veranderingen en invloed hebben op de voedingstoestand en chirurgische resultaten. Studie van de pathofysiologische veranderingen in de lever en andere organen van belang is. Verschillende studies hebben gedaan in cholestatische rat modellen. We gebruikten een reversibele cholestatische rat model in onze recente studie naar de rol van methylprednisolon in de ischemie-reperfusie schade. Verschillende technieken voor het creëren van een omkeerbare cholestatische model zijn beschreven. Oprichting van een reversibele cholestatische rat model kan een uitdaging zijn in het licht van de kleinere afmetingen en de unieke hepatopancreatobiliary anatomie bij ratten. Deze video artikel demonstreert de creatie van een reversibele cholestatische model. Dit model kan gebruikt worden in verschillende studies, zoals te kijken naar de veranderingen in de voedings-, fysiologische, pathologische, histologische en immunologische veranderingen in het maagdarmkanaal. Dit model kan ook gebruikt worden om de effecten van cholestase en verschillende therapeutische interventies op grote lever operaties te zien.

Cholestase is een klinische aandoening die vaak voorkomen door zowel chirurgen en gastro-enterologen. Oprichting van een reversibele cholestatische rat model kan een uitdaging zijn in het licht van de kleinere afmetingen en de unieke hepatopancreatobiliary anatomie bij ratten. Deze video artikel demonstreert de creatie van een reversibele cholestatische model.

Creatie van Omkeerbare Cholestatische Rat Model

Cholestase is een klinische aandoening die veelvuldig wordt aangetroffen door zowel chirurgen als gastro-enterologen. Cholestase kan diverse fysiologische veranderingen veroorzaken en ...

Creatie van een reversibel cholestatisch ratmodel. Hallo iedereen. Ik ben Goulash, assistent heelkunde van het Providence Hospital and Medical Centers in Southfield, Michigan.Vandaag zal ik de creatie van een omkeerbaar cholestatisch ratmodel demonstreren. De rat wordt geanestheseerd met isofluraan in een kamer en later met een masker. Tijdens de procedure wordt een polyester buisje gebruikt met een buitendiameter van 0,9 millimeter en een binnendiameter van 0,6 millimeter, waarbij het ene uiteinde open is en het andere uiteinde is afgedicht. De gebruikte instrumenten omvatten een standaard rattenpak, microschirurgische instrumenten, oogheelkundige pincetten, wattenstaafjes en 8-0 nylon hechtdraad. De procedure wordt uitgevoerd met een operatiemicroscoop.Het kan alternatief worden uitgevoerd met behulp van chirurgische lussen. Hier wordt een stevig afdekdoek aangebracht. Deze procedure wordt uitgevoerd onder volledige steriele omstandigheden.Operatieve stappen: er wordt een incisie van twee centimeter geplaatst in de middellijn, beginnend vanaf het sternum. Het subcutane weefsel en de fascia worden met een schaar openedgesneden. Het peritoneum wordt hier openedgesneden, waardoor de lever zichtbaar wordt.Zorg voor hemostase met behulp van een handmatige cauterisator. Dit is de mediane en de linker lob van de lever. Galweganatomie bij ratten. Dit is een schema van de galweganatomie van de rat.De rattenlever is onderverdeeld in de rechter, mediane, linker en chordale lobben. Dit is de maag en dit is de galgang. Hier is te zien dat een aanzienlijk deel van de galgang niet geassocieerd is met de poortader en de leverarterie.Dit is het gedeelte van de gallgang dat wordt gebruikt voor het haken en het opwekken van cholestase. De leverkwabben worden weggetrokken met een retractor en een wattenstaafje wordt gebruikt om het gebied naar beneden te trekken. De gallgang wordt vervolgens met een microsurgisch instrument vlakbij de opening gehaakt.Dit is dezelfde stap van het afbinden van de galgang, die wordt gedemonstreerd in een ander ratmodel. En opnieuw, dit is dezelfde stap van het afbinden van de galgang, die is opgenomen van buitenaf de operatiemicroscoop. Creatie van cholestase: een polysub-hechtingsdraad wordt vervolgens onder de galgang doorgehaald en de galgang wordt onder tractie geplaatst.Dit is de galgang onder tractie. Dit is een ingezoomd beeld. De galgang wordt hier opengesneden.Het uiteinde van de poly-tube wordt vervolgens in deze galgang geschoven. We maken gebruik van een microsurgisch tube-voedingsinstrument om ons bij dit proces te helpen. Er moet ervoor gezorgd worden dat de tube voorzichtig wordt ingeschoven.Vervolgens wordt er een opening gemaakt in de proximale galgang. Een nylon hechtdraad van 8 wordt daarna door deze opening gehaald. De ATO-hechting wordt vervolgens vastgezet met drie platte knopen om de tube op zijn plaats te houden.Er wordt een tweede opening gemaakt onder de Blac, proximaal van de eerste hechting. Een andere ATO-hechting wordt gebruikt om de buis proximaal te fixeren. Vervolgens wordt er een opening gemaakt in het distale deel van de galgang, waar een ATO-hechting doorheen wordt gehaald.Dit wordt aanvankelijk gebruikt om de galgang af te binden. Deze hechting wordt vervolgens om de tube gewikkeld en vastgeknoopt, waardoor de tube stevig wordt verankerd. De hechting wordt hier doorgeknipt, waarna de tractiehechting wordt uitgetrokken.Hier zoomen we opnieuw uit. De buis wordt vervolgens teruggeplaatst in de peritoneale holte en zodanig gepositioneerd dat deze comfortabel ligt. De buikholte wordt vervolgens gewassen met 2 ml normale zoutoplossing.Vervolgens wordt de vloeistof afgevoerd met een gaasje van twee bij twee. Er wordt een laatste controle uitgevoerd om de correcte, comfortabele ligging van de tube te bevestigen en voor hemostase bij de sluiting van de buik. De fascia wordt gesloten met een continue hechting van 5-0 polyactine.De huid wordt vervolgens gesloten met onderbroken dermale hechtingen. Cholestase wordt opgeheven door de polyestere kubus in het odum cholestasis te plaatsen. De omkeering van cholestase wordt hier in dezelfde setting bij de rat gedemonstreerd. De huid en de fascia worden met een schaar opengesneden.De lever wordt weggetrokken en het duodenum wordt naar voren getrokken. Met wattenstaafjes bepalen we een plek in het duodenum waar de polyesterbuis comfortabel kan rusten. Vervolgens plaatsen we hechtingspunten met nylon 8 rond de locatie die is geselecteerd voor het plaatsen van de buis.We zorgen ervoor dat er bij elke hechting serumspierbeten worden genomen. De NEP poly-tube wordt vervolgens uit de peritoneale holte getrokken. In gevallen waarin de tube gedurende een langere periode is blijven zitten, kan er aanzienlijke verkleving rond de tube aanwezig zijn, die voorzichtig moet worden losgemaakt.De tube wordt vervolgens met een schaar doorgeknipt boven een wattenstaafje om de galafvoer op te vangen. In gevallen waarin de tube gedurende een langere periode is blijven zitten, zien we een aanzienlijke hoeveelheid gal uitstromen. Wanneer de tube is opengeknipt, wordt de dura in het centrum van de pulse string-hechting met een schaar opengeknipt, waarbij wordt gegarandeerd dat de gehele dikte van de dura is doorgeknipt.De tube wordt vervolgens in de nu geduwd en we zorgen ervoor dat deze comfortabel ligt en in de juiste richting is uitgelijnd. De hechting na het plaatsen van de draad wordt vervolgens aangetrokken met drie chirurgische knopen om de tube in de dynam te verankeren. De wond wordt vervolgens geïrrigeerd om het gal te verwijderen dat tijdens de procedure zou zijn gelekt, en de ADOS wordt vervolgens gesloten om ervoor te zorgen dat de tube comfortabel ligt en er een goede hemostase is vóór sluiting.Demonstratie van galafvoer; hier trekken we, puur ter illustratie, de tube uit de Jordan om aan te tonen dat er een vrije afvoer van gal uit de tube is. Toepassing van dit model, toepassing van dit model. Dit model kan worden gebruikt bij het bestuderen van fysiologische, pathologische en histologische veranderingen in het galwegstelsel en het maagdarmstelsel geassocieerd met cholestase. Dit model kan worden gebruikt om de effecten van cholestase op leverchirurgie te bestuderen en kan ook worden ingezet om veranderingen in de nutritionele status geassocieerd met cholestase te bestuderen.

creation-of-reversible-cholestatic-rat-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Verstoring van de galstroom resulteert in ernstige inflammatoire cholestatische leverbeschadiging met een karakteristieke tijdsafhankelijke sequentie van morfologische veranderingen. Hier presenteren we een protocol voor de chirurgische ligatie van de gemeenschappelijke galgang bij muizen die het mogelijk maakt om een sterke fibrotische respons te induceren na 21 tot 28 dagen.

Bile-duct Ligatie in Muizen: Inductie van Inflammatoire leverschade en Fibrosis door Obstructive Cholestase

Snelle lever hypertrofie associëren lever partitie en Portal vein afbinding gebruiken voor een Staged hepatectomy inducerende (ALPPS) voorgesteld voor resectie van borderline resectable lever tumoren. Dit model kan verhelderen mechanismen die betrokken zijn in snelle hypertrofie en kunt testen van drugs die bevorderen of blokkeren van de versnelling van de regeneratie.

Rat Model van de lever partitie koppelen en Portal Vein afbinding voor geënsceneerde Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Hier beschrijven we een gemeenschappelijke methode om chronische lever schade in muizen door het eten van een dieet van choline-deficiënte en ethionine-aangevuld (CDE). We tonen gezondheidsmonitoring, lever perfusie, isolatie en behoud. Een tijdsverloop van zes weken kan informeren over de lever schade, pathohistology, fibrose, inflammatoire, en lever progenitor cel reacties.

De lymfkliertest Choline-deficiënte, Ethionine-aangevuld (COB) dieet Model van chronische lever schade

Hier presenteren we gedeeltelijke gal duct afbinding als een chirurgische model van lever schade en regeneratie van knaagdieren.

Gedeeltelijke gal Duct afbinding in de muis: een gecontroleerde Model van gelokaliseerde obstructieve cholestase

Hier beschrijven we een gedetailleerd protocol voor invasieve meting van hemodynamische parameters, met inbegrip van portal druk, splanchnic doorbloeding en systemische hemodynamica teneinde het karakteriseren van de portal hypertensieve syndroom bij ratten.

Invasieve hemodynamische karakterisering van de Portal-hypertensieve syndroom bij Cirrhotic ratten

De acute leverfalen diermodel ontwikkeld in de huidige studie presenteert een haalbaar alternatief voor de studie van mogelijke therapieën. Het huidige model maakt gebruik van het gecombineerde effect van fysieke en drug-geïnduceerde leverschade en biedt een geschikte tijdvenster om het potentieel van nieuwe therapieën te bestuderen.

Generatie van een rat model van acuut leverfalen door het combineren van 70% partiële Hepatectomie en Acetaminophen

Dit protocol beschrijft een gemeenschappelijke en haalbare methode voor het induceren van acute leverschade (ALI) via CCl4 blootstelling via een orogastrische buis. CCl4 blootstelling induceert ALI door de vorming van reactieve zuurstofsoorten tijdens de biotransformatie in de lever. Deze methode wordt gebruikt om de pathofysiologie van ALI te analyseren en verschillende hepatoprotectieve strategieën te onderzoeken.

Acute leverschade bij ratten veroorzaken via Carbon Tetrachloride (CCl4)Blootstelling via een Orogastrische buis

Diermodellen voor ernstige acute pancreatitis maken de studie van pathofysiologische veranderingen in de beginfase mogelijk, waardoor de observatie van de evolutie van ontstekingsgebeurtenissen wordt vergemakkelijkt. Hier bieden we een protocol voor de inductie van ernstige acute gal pancreatitis door retrograde infusie van natrium taurocholaat in het pancreaskanaal van verdoofde C57BL / 6-muizen.

Natrium taurocholaat geïnduceerde ernstige acute pancreatitis bij C57BL/6 muizen

Chronische pancreatitis (CP) is een ziekte die wordt gekenmerkt door ontsteking en fibrose van de alvleesklier, vaak geassocieerd met hardnekkige buikpijn. Dit artikel richt zich op het verfijnen van de techniek om een muismodel van CP te genereren via galweginfusie met 2,4,6 -trinitrobenzeensulfonzuur (TNBS).

Een muismodel voor chronische pancreatitis via galweg TNBS-infusie

Een muismodel van ernstige acute pancreatitis wordt hierin beschreven. De hier gepresenteerde procedure is zeer snel, eenvoudig en toegankelijk, waardoor de studie van de moleculaire mechanismen en verschillende therapeutische interventies bij acute pancreatitis op een handige manier mogelijk is.

Vaststelling van een muis ernstig acuut pancreatitismodel met behulp van retrograde injectie van natrium taurocholaat in het biliopancreatische kanaal

We hebben een muismodel van chronische leverfibrose opgesteld, dat een geschikt diermodel biedt voor de virus-geïnduceerde leverfibrose mechanistische studie van galatresie (BA) en een platform voor toekomstige BA-behandelingen.

Een muismodel van chronische leverfibrose voor de studie van galatresie

Leer hoe u een omkeerbaar cholestatisch ratmodel maakt met microchirurgische technieken en isofluraananesthesie. Deze methode ondersteunt onderzoek naar leverfunctie en galwegpathologie.

Creatie van Omkeerbare Cholestatische Rat Model

Meer video's verkennen