Name: Microgolf-geassisteerde Een-pot Synthese van N-Succinimidyl-4- 18 F fluorobenzoate ( 18 F SFB) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-06-28T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 33 s
Description: Leer de een-pot microgolf-geassisteerde synthese van [18F]SFB voor PET-beeldvorming. Deze methode elimineert tussenstappen en levert hoge opbrengst en zuiverheid voor biomoleculaire radiolabeling.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Deze studie werd ondersteund door het Amerikaanse ministerie van Energie (DE-FG02-09ER09-08 en DE-PS02-09ER09-18), de Jonsson Comprehensive Cancer Center aan de UCLA, en de Industrie-Universiteit Cooperative Research Program (UC Discovery Grant, bio07 -10.665). Wij danken dr. Nagichettiar Satyamurthy en staven aan de UCLA Biomedical Cyclotron Facility voor het verstrekken van de F-18 radio-isotoop en vele inzichtelijke discussies. Wij danken Drs. Michael Collins, Greg Leblanc, Joseph Lambert, en Keller Barnhardt van CEM voor hun technisch advies en ondersteuning. Wij danken Dirk Williams, Darin Williams, Drs. Joseph Hong Dun Lin, en Michael van Dam voor het ontwerpen en machinale onderdelen naar de CEM magnetron reactor te wijzigen en voor de SPE zuivering modules.

1. Eerste voorbereidingen <ol><li> Een V-flacon (5-mL) RV1 (met roerstaaf) wordt gebruikt als de belangrijkste reactievat voor het uitvoeren van magnetron synthese. Deze is aangesloten op een PEEK-adapter met zeven inlaat / uitlaatpoorten verbindt en geplaatst in de magnetron holte (zie figuur 2). RV2 verbonden is met SPE cartridge (I) aan de ruwe verzamelen [18 F] SFB. RV3 verbonden is met SPE cartridge (II) voor het verzamelen van de laatste [18 F] SFB oplossing. Het kan worden geplaatst in een warm water bad (40 ° C) om de bijbehorende oplossing te concentreren voordat het reconstitueren in PBS buffer, met name voor de downstream radiolabeling van biomoleculen. </li><li> Setup voor het verzamelen van ruwe olie [18 F] SFB: Vul MeCN / H 2 O [6 ml; 1:4 (v: v)]-oplossing, 5% waterige AcOH (8 ml), MeCN (2 ml) voor het reservoir A, B en C, respectievelijk. Activeert dan een SPE cartridge (I) (polystyreen, Merck LiCholut NL) met ethanol (10 ml), gevolgd door 5% waterige AcOH (10 ml) wassen. </li><li> Setup voor het verzamelen van gezuiverd [18 F] SFB: Voorbereiden reservoir D en E gevuld met 10 ml H 2 O en 3 ml diethylether respectievelijk. De tweede SPE cartridge (II) (polystyreen, Merck LiCholut EN) wordt geactiveerd door dezelfde procedure hierboven vermeld. </li><li> Start de HPLC (elutiebuffer: MeCN / H 2 O, 1:1 (v / v) met 0,2% TFA; debiet: 3 ml / min) voor pre-conditioning de HPLC-kolom [een reverse-fase semi-prep kolom (Luna, 5 micrometer C18 (2) 100 A, 250 x 10 mm), Phenomenex, Torrance, CA, USA]. </li></ol> 2. Bereiding van gedroogde [dwz niet-carrier-toegevoegd (NCA)] [18 F] fluoride <ol><li> [18 F] fluoride-oplossing in [18 O] H 2 O (100 ul) werd toegevoegd aan een mengsel van Kryptofix 222 (20 mg), 1M waterige K 2 CO 3 (26 pi) en MeCN (0,8 ml) in een Eppendorf buis. De gehele oplossing wordt dan goed gemengd alvorens naar de RV1 via de inlaat lijn 1. De [18 F] fluoride oplossing kan ook worden doorgegeven door middel van een anionenuitwisselende cartridge (bijv. QMA-licht Sep-Pak van Waters) om de fluoride-18 val en vervolgens geëlueerd met een mengsel van K 2 CO 3 en Kryptofix in MeCN. </li><li> Voer de Drogen volgorde (20W, 3 min) onder de Microwave bestrijdingsprogramma resterende water te verwijderen in RV1 [onder vacuüm]. Na de afkoeling als systeem lager is dan 50 ° C, extra MeCN (1,0 ml) werd geïntroduceerd in de reactor en de reeks wordt een keer herhaald. </li></ol> 3. Synthese van ethyl 4 - [18 F] fluorobenzoate <ol><li> Om een DMSO oplossing (0,4 ml) met ethyl 4 - (N, N, N-trimethylammonium) benzoaat triflaat (1,5 mg) werd toegevoegd aan RV1 via de inlaat lijn 2. </li><li> Voer de Labeling volgorde (50W, 1 min) onder de Microwave controleprogramma onder roeren, vat koelen en alle kleppen gesloten voor ethyl-4 veroorloven - [18 F] fluorobenzoate ([18F] 2). </li></ol> 4. Synthese van kalium 4 - [18 F] fluorobenzoate <ol><li> Om een ​​DMSO oplossing (0,5 ml) bevat KOtBu (13 mg) werd toegevoegd aan RV1 via de inlaat lijn 3. </li><li> Uit te voeren DEPROTECT programma (40 W, 1 min) onder de Microwave controleprogramma onder roeren, vat koelen en alle kleppen gesloten om de vier veroorloven - [18 F] fluorobenzoate zout ([18F] 3). </li></ol> 5. Synthese van ruwe [18 F] SFB <ol><li> Om een ​​acetonitril-oplossing (2,5 ml) bevat TSTU (30 mg) werd toegevoegd aan RV1 via de inlaat lijn 6. TSTU is vocht-en licht-gevoelig. Het moet in hoeveelheden verdeeld in kleine flacon en opgeslagen bij 4 ° C in een gesloten container onder aluminiumfolie. </li><li> Koppeling uit te voeren volgorde (30W, 2 min) onder de Microwave controleprogramma onder roeren, vat koelen en alle kleppen gesloten om de ruwe [18 F] SFB veroorloven. </li></ol> 6. De voorbereiding van de SPE-gezuiverde [18 F] SFB <ol><li> 5% waterige AcOH (1,0 ml) werd toegevoegd aan RV1 via de inlaat lijn 7 aan het reactiemengsel te neutraliseren. De oplossing werd dan overgebracht naar flacon B met 8 ml van 5% waterige AcOH (figuur 2). </li><li> Passeer de verdunde reactiemengsel door SPE cartridge (I) op te vangen ruwe [18 F] SFB het gebruik van stikstof (10 psi). </li><li> WASH SPE cartridge (I) met een mengsel van MeCN en H 2 O [10 mL, 1:4 (v: v)] uit het reservoir A. </li><li> [18 F] SFB werd geëlueerd uit in RV2 met MeCN (2 ml) uit het reservoir C. </li></ol> 7. Zuivering van ruwe [18 F] SFB met Radio-HPLC <ol><li> Verdunnen ofwel ruwe [18 F] SFB of SPE-gezuiverde [18 F] SFB met H 2 O (2 ml) in RV2 en het mengsel in het HPLC-loop (5 ml) over te dragen. De oplossing werd geïnjecteerd in radio-HPLC [MeCN / H 2 O, 1:1 (v / v) met 0,2% TFA; debiet: 3 ml / min]. </li><li> Verzamel de fractie die gezuiverde [18 F] SFB (retentie time: 8-10 minuten) in de flacon D (voorgevuld met 10 ml H 2 O) (figuur 2). Cruciale stap: Als je dit correct uitgevoerd, de fractie volume hier verzameld moet 4-5 ml zijn. </li><li> Passeer de verdunde reactiemengsel door SPE cartridge (II) op te vangen gezuiverde [18 F] SFB het gebruik van stikstof (10 psi). Droog de cartridge met een stroom van stikstof voor 2-3 minuten. </li><li> [18 F] SFB werd geëlueerd uit in RV3 met diethylether (3 ml) uit het reservoir E.. </li><li> Damp het oplosmiddel in RV3 droog met een zachte stroom van stikstof gas (10 psi) met behulp van een waterbad (40 ° C). De laatste gedroogde [18 F] SFB kan worden gereconstitueerd in PBS buffer voor de downstream toepassing. </li></ol> 8. Representatieve resultaten: We ontwikkelden een vereenvoudigde, snelle, een-pot-methode voor het synthetiseren [18 F] SFB met behulp van een verwijdering van de bescherming strategie onder watervrije omstandigheden en verwarmen in de magnetron tijdens elke radiochemische / chemische transformatie. Figuur 1 geeft de details van onze radiosynthesis. De identiteit van het eindproduct werd bevestigd door de vergelijking van HPLC retentietijd met een niet-radioactieve SFB referentie. Het gezuiverde [18 F] SFB werd ook geanalyseerd door middel van radio-en TLC-HPLC om de radiochemische en chemische zuiverheid te bepalen. De RCY van [18 F] SFB was 35 ± 5% binnen 60 minuten na HPLC zuivering (n&gt; 30), met een hoge radiochemische zuiverheid (&gt; 99%) en een goede chemische zuiverheid (zie de UV-spoor in de HPLC-profiel, figuur 3 ). De specifieke activiteit was ca. 67 tot 330 GBq / mmol (+1,8 tot 9,0 Ci / mmol), afhankelijk van de start radioactiviteit. <img src="/files/ftp_upload/2755/2755fig1.jpg" alt="Figuur 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 1"> Figuur 1. Microgolf-geassisteerde een-pot radiosynthesis van [18 F] SFB. Ten eerste, de radiofluorination van ethyl 4 - was (N, N, N-trimethylammonium) benzoaat triflaat (1) uitgevoerd onder verwarmen in de magnetron (50 W, 1 min) in de aanwezigheid van [K ⊃ 2.2.2] [18 F] F - complex in dimethylsulfoxide (DMSO) aan ethyl-4 veroorloven - [18 F] fluorobenzoate ([18F] 2). Zonder zuivering, was een DMSO oplossing van kalium-tert-butoxide (t BuOK) toegevoegd en het reactievat werd magnetron bestraald (40 W, 1 min) om de watervrije ontscherming te voltooien. De uiteindelijke conversie van [18 F] 3 in [18 F] SFB werd bereikt met behulp van O-(N-succinimidyl) - N, N, N ', N'-tetramethyluronium tetrafluorboraat (TSTU) activering. TSTU in acetonitril werd toegevoegd aan het reactiemengsel dat de 4 - [18 F] fluorobenzoate ([18F] 3) zout; deze laatste stap leverde synthetische ruwe olie [18 F] SFB na verhitting (30 W, 2 min). <img src="/files/ftp_upload/2755/2755fig2.jpg" alt="Figuur 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 2"> Figuur 2. Het schema van de installatie voor de microgolf-geassisteerde een-pot [18 F] SFB synthese. <img src="/files/ftp_upload/2755/2755fig3.jpg" alt="Figuur 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 3"> Figuur 3. Radio-HPL chromatogrammen van de definitieve [18 F] SFB. Top: UV-signaal bij 254 nm, onder: radioactieve signaal; inzet: UV-signaal bij 254 nm (x 33.3). <img src="/files/ftp_upload/2755/2755table1.jpg" alt="Tabel 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Tabel 1"> . Tabel 1 Overzicht van [18 F] SFB radiosyntheses gemeld in de literatuur met behulp van alkyl 4 - (trimethylammonium) benzoaat triflaat als voorlopers.

Deze methode is ingediend voor de Amerikaanse octrooiaanvraag.

Deze vereenvoudigde drie-stappen-, een-pot radiosynthesis van de 18 F-acylering reagens [18 F] SFB is ontwikkeld op basis van niet-waterige chemie. Dit proces heeft een uitstekende reproduceerbaarheid en betrouwbaar kon gebruikt worden voor de productie van [18 F] SFB in geautomatiseerde radiochemie modules, als gevolg van twee belangrijke wijzigingen beschreven als volgende: 1. Wij gebruiken een verwijdering van de bescherming / verzeping stap in watervrije KOtBu / DMSO-systeem aan de g...

<table border="1"><tbody><tr><td> Naam van het serum </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogus nummer </td><td> Commentaar (optioneel) </td></tr><tr><td> azijnzuur in waterige oplossing (5%, v / v) </td><td> Visser </td><td> A38-500 </td><td> Opgesteld in ons lab </td></tr><tr><td> Acetonitril </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 75-05-8 </td><td></td></tr><tr><td> Diethylether </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 14775 </td><td></td></tr><tr><td> Dimethylsulfoxide (DMSO) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 472301 </td><td></td></tr><tr><td> Ethyl-4 - (N, N, N-trimethylammonium) benzoaat triflaat </td><td> Opgesteld in lab </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 4,7,13,16,21,24-Hexaoxa-1 ,10-diazabicyclo [8.8.8] hexacosane (K222) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 29,111-0 </td><td></td></tr><tr><td> O - (N-succinimidyl) - N, N, N &#39;, N&#39;-tetramethyluronium tetrafluorboraat (TSTU) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 105832-38-0 </td><td></td></tr><tr><td> Kaliumcarbonaat in waterige oplossing (1M) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 209619 </td><td> Opgesteld in ons lab </td></tr><tr><td> Kalium-tert-butoxide </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 156671 </td><td></td></tr></tbody></table>

microgolf-geassisteerde een-pot synthese van n-succinimidyl-4-[ 18 f] fluorobenzoate ([ 18 f] sfb)

Microwave-assisted One-pot Synthesis of N-succinimidyl-4-[18F]fluorobenzoate ([18F]SFB)

Biomoleculen, waaronder peptiden, 1-9 eiwitten, 10,11 en antilichamen en hun fragmenten ontworpen, zijn 12 tot 14 steeds belangrijker omdat zowel potentiële therapeutische en moleculaire beeldvorming agenten. Met name bij het ​​voorzien van positron-emitterende radio-isotopen (bijvoorbeeld Cu-64, Ga-68 of F-18), kunnen ze worden gebruikt als probes voor gerichte beeldvorming van vele fysiologische en pathologische processen. 15-18 daarom grote inspanningen heeft gewijd aan de synthese en de exploratie van 18 F-label biomoleculen. Hoewel er elegante voorbeelden van de directe achttien F-etikettering van peptiden, 19-22 de harde reactie-omstandigheden (dat wil zeggen, organisch oplosmiddel, extreme pH, hoge temperatuur) in verband met directe radiofluorination zijn meestal onverenigbaar zijn met fragiele eiwit monsters. Tot op heden dan ook de opname van radioactief gelabelde prothetische groepen in biomoleculen blijft de methode van keuze. 23,24 N-succinimidyl-4-[18 F] fluorobenzoate ([18F] SFB), 25-37 een Bolton-Hunter soort reagens, dat reageert met de primaire aminogroepen van biomoleculen, is een zeer veelzijdig prothese-groep voor de 18 F-labeling van een breed spectrum van biologische entiteiten, in termen van haar duidelijk in vivo stabiliteit en een hoge radiolabeling opbrengst. Na labeling met [18 F] SFB, de daaruit voortvloeiende [18 F] fluorobenzoylated biomoleculen kunnen worden onderzocht als potentiële PET tracers voor in vivo beeldvormend onderzoek. 1 De meeste [18 F] SFB radiosyntheses beschreven in de huidige literatuur vereisen twee of zelfs drie reactoren en meerdere zuiveringen door met behulp van vaste fase extractie (SPE) of hoge-prestatie vloeistofchromatografie (HPLC). Een dergelijke langdurige processen belemmeren de routine productie en wijdverspreide toepassingen in de radiolabeling van biomoleculen. Hoewel verscheidene module-assisted [18 F] SFB syntheses zijn gemeld, 29-32, 41-42 ze zijn vooral gebaseerd op ingewikkelde en langdurige procedures met behulp van dure commercieel verkrijgbare radiochemie boxes (tabel 1). Daarom is verdere vereenvoudiging van de radiosynthesis van [18 F] SFB met behulp van een low-cost setup zou bijzonder voordelig zijn voor de aanpassing aan een geautomatiseerd proces. Hierin wij dat het jaarverslag een beknopte bereiding van [18 F] SFB, gebaseerd op een vereenvoudigde een-pot microgolf-geassisteerde synthese (Figuur 1). Onze aanpak vereist geen zuivering tussen de stappen of een waterige reagentia. Daarnaast, microgolfbestraling, die is gebruikt bij de synthese van de verschillende PET-tracers, kan 38 tot 41 geeft een hogere RCYs en een betere selectiviteit dan de overeenkomstige thermische reacties of zij vergelijkbare rendementen in kortere reactietijden. 38 Het belangrijkste is, wanneer de etikettering biomoleculen , zou de tijd die bespaard worden doorgeschakeld naar de volgende bioconjugation of PET beeldvorming stap 28,43 De nieuwigheid van onze verbeterde [18 F] SFB synthese is tweeledig: (1). watervrij de ontscherming strategie vereist geen zuivering van tussenproduct (s) tussen elke stap en (2) de microgolf-geassisteerde radiochemische transformaties kan de snelle, betrouwbare productie van [18 F] SFB.

Een gemakkelijke, een-pot-synthese van N-succinimidyl-4-[<sup&gt; 18</sup&gt; F] fluorobenzoate ([<sup&gt; 18</sup&gt; F] SFB) is ontwikkeld op basis van een niet-waterig, drie-stappen-radiochemische proces. Met behulp van verwarmen in de magnetron, kan de gehele procedure worden afgerond in minder dan 30 minuten, of 60 min met verdere zuivering door preparatieve HPLC. Het verval-gecorrigeerde radiochemische opbrengsten (RCYs) waren 35-5% (n&gt; 30).

Microgolf-geassisteerde Een-pot Synthese van N-Succinimidyl-4-[ 18 F] fluorobenzoate ([ 18 F] SFB)

Biomoleculen, waaronder peptiden,1-9 eiwitten,10,11 en antilichamen en hun gemodificeerde fragmenten,12-14 winnen aan belang als zowel potentiële ...

Deze procedure demonstreert een nieuwe microwave-geassisteerde one-pot synthese van F 18 SFB, gebaseerd op een radiochemisch proces in drie stappen met een watervrije D-protectiestap. Het proces begint met de radiofluorering van ethyl 4-NNN-trimethylammoniumbenzoaattriflaat onder microwave-verhitting in aanwezigheid van gedroogd fluoride en DMSO om ethyl 4-F 18-fluorbenzoaat te verkrijgen. In de volgende stap zorgt de toevoeging van een DMSO-oplossing van kaliumtertbutoxide, gevolgd door microwave-bestraling, voor een volledige watervrije D-protectie, wat resulteert in kalium 4-F 18-fluorbenzoaat.De uiteindelijke omzetting naar ruw F 18 SFB wordt bereikt middels TSTU-activering. TSTU in acetonitril wordt toegevoegd aan het reactiemengsel dat de vier F 18 flu, benzoaat, zout bevat, waarna het mengsel wordt verhit. De laatste stap van de procedure is het zuiveren van het ruwe F 18 SFP via vaste-fase-extractie en hogedrukvloeistofchromatografie.Uiteindelijk kunnen resultaten worden behaald die aantonen dat een nieuwe, vereenvoudigde en snelle one-pot F 18 SFB-synthese kan worden gerealiseerd via anhydre D-protectie en magnetronverhitting. Individueel nieuw voor de SFB-synthese. Mijn worsteling was dat het een complexe reactieopstelling vereiste en talrijke zuiverings- en droogstappen vanwege het gebruik van een EQU-oplossing door mijn postdoc dr.Wij demonstreren een procedure voor ons. Richt voorafgaand aan de start van dit protocol de apparatuur in voor microwave-ondersteunde one-pot F 18 SFP-synthese, zoals beschreven in het schriftelijke protocol. Zodra de apparatuur is ingericht, start de HPLC om de HPLC-kolom voor te conditioneren.Verdun de F 18 fluoride-oplossing in oh 18 water met een mengsel van crypto fix 2 22 1 molair waterig kaliumcarbonaat en acetonitril, en breng dit vervolgens over naar RV één. Voer de droogsequentie uit via het magnetronbesturingsprogramma om resterend water in RV één te verwijderen na het afkoelen. Wanneer de systeemtemperatuur onder 50 °C ligt, voegt u nog één milliliter acetonitril toe aan de reactor en herhaalt u de sequentie nogmaals om Ethel vier 18 F FLUA-benzoaat te synthetiseren.Voeg eerst de A-D-M-S-O-oplossing met Ethel four NNN trimethyl ammonium benzoate tri toe aan RV one via inlaatlijn twee. Voer vervolgens de labelingssequentie uit onder het magnetroncontroleprogramma met koeling van het roervat en alle afsluiters gesloten. Synthetiseer daarna potassium for F 18 fluoro benzoate door 0,5 milliliters DMSO-oplossing met potassium turt oxide toe te voegen aan RV one via inlaatlijn drie.Voer het D-beschermingsprogramma uit onder het magnetronbesturingsprogramma met koeling van het roervat en alle kleppen gesloten. Synthetiseer tot slot het ruwe F 18 SFB door een acetonitrillopolutie met TSTU via inlaatlijn zes aan RV één toe te voegen. Voer de koppelingsreeks uit onder het magnetronbesturingsprogramma met koeling van het roervat en alle kleppen gesloten om het ruwe F 18 SFB-product te verkrijgen.Begin de bereiding van SPE-gezuiverd F 18 SFB door één milliliter 5% waterig azijnzuur via inlaatlijn zeven aan RV één toe te voegen om het reactiemengsel te neutraliseren. Breng de oplossing vervolgens over in flacon B die acht milliliter 5% waterig azijnzuur bevat. Leid het verdunde reactiemengsel onder stikstof bij 10 pounds per square inch door een SPE-cartridge om ruw F 18 SFP op te vangen.Zodra de vloeistof is doorgelopen, wordt de SPE-cartridge gewassen met een mengsel van acetonitril en water uit reservoir A, waarna het F 18 SFB wordt geëlueerd in RV twee. Met behulp van 2 mL acetonitril uit reservoir C wordt het SPE-gezuiverde F 18 SFB in RV twee verdund met 2 mL water, waarna het mengsel wordt overgebracht naar de 5 mL HPLC-loop.Injecteer de oplossing in de radio-HPLC. De fractie die de gezuiverde F 18 SFB bevat, zou moeten verschijnen bij een retentietijd van ongeveer acht tot 10 minuten. Verzamel het monster in flacon D, die vooraf is gevuld met 10 milliliters water.Het is van cruciaal belang dat het hier verzamelde fractievolume vier tot vijf milliliter bedraagt. Leid het verdunde reactiemengsel uit flacon D door een tweede SPE-cartridge om het gezuiverde F 18 SFB op te vangen met stikstof bij 10 pounds per square inch. Nadat het mengsel is gepasseerd, wordt de cartridge gedurende twee tot drie minuten gedroogd met een stroom stikstof.Elueer het gezuiverde F 18 SFB in RV drie met behulp van drie milliliters ether uit reservoir E. Verdampt tot slot het oplosmiddel in RV drie tot droogte met een zachte stroom nitrogengas met behulp van een waterbad dat is verwarmd tot 40 °C. Het uiteindelijke gedroogde F 18 SFB kan worden gereconstitueerd in PBS-buffer voor de verdere toepassing.De identiteit van het uiteindelijke F 18 SFB-product werd bevestigd door vergelijking van de HPLC-retentietijd met een niet-radioactieve SFB-referentie. Het gezuiverde F 18 SFB werd daarnaast geanalyseerd via radio-TLC en HPLC om de radiochemische en chemische zuiverheid te bepalen. De radiochemische opbrengst van F 18 SFP was 35 plus minus 5% binnen 60 minuten na HPLC-zuivering, met een hoge radiochemische zuiverheid en een goede chemische zuiverheid.De specifieke activiteit bedroeg 1,8 tot negen curie per micromol, afhankelijk van de initiële radioactiviteit. Vergeet niet dat het werken met straling en radioactieve materialen uiterst gevaarlijk kan zijn en dat er tijdens het uitvoeren van deze procedure constant voorzorgsmaatregelen moeten worden genomen, zoals het gebruik van afscherming, persoonlijke dosimeters en op afstand bedienbare instrumenten.

microwave-assisted-one-pot-synthesis-n-succinimidyl-4

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

We demonstreren de semi-geautomatiseerde radiochemische synthese van [ 18 F] 3F4AP en kwaliteitscontroles.

Geautomatiseerde Radiochemische Synthese van [<sup&gt; 18</sup&gt; F] 3F4AP: Een nieuwe PET Tracer voor het imiteren van demyeliniserende ziekten

Schaalvergroting synthese van hoogefficiënte thermisch geactiveerd vertraagde fluorescentie vervuilers wordt beschreven in het voorgestelde artikel.

Scale-up chemische synthese van thermisch-geactiveerde vertraagde fluorescentie Emitters gebaseerd op de kern van de Dibenzothiophene-S, S-Dioxide

Beschrijven we een protocol voor preklinische in vivo volgen van kanker uitzaaiingen. Het is gebaseerd op een verslaggever van de radionuclide-fluorescentie combineren de natrium jodide symporter, ontdekt door niet-invasieve [18F] Zilvertetrafluorboraat-PET, en een fluorescente proteïne voor gestroomlijnde ex vivo bevestiging. De methode is toepasbaar voor preklinische in vivo cel bijhouden dan tumor biologie.

Radionuclide-fluorescentie Reporter Gene Imaging als u wilt bijhouden van de Tumor progressie in knaagdier Tumor modellen

Positron-emissie tomografie (PET) imaging sites die bij meerdere vroege proeven van het klinisch onderzoek betrokken zijn moet robuust en veelzijdig radiotracer productie mogelijkheden. Met behulp van de radiotracer [18F] Clofarabine als voorbeeld illustreren we hoe te automatiseren de synthese van een radiotracer met behulp van een flexibele, cassette gebaseerde radiosynthesizer en valideren van de synthese voor klinisch gebruik.

Automatisering van een Positron-emissie tomografie (PET) Radiotracer synthese Protocol voor klinische productie

Dit protocol demonstreert het gebruik van de auto-CHO software voor hiërarchische en programmeerbare One-pot synthese van oligosacchariden. Het beschrijft ook de algemene procedure voor RRV-bepalings experimenten en eenpotglycosylatie van SSEA-4.

Hiërarchische en programmeerbare One-pot oligosaccharide synthese

De synthese van fluor-18 (18F) gelabelde radiofarmaceutica voor positron emissie tomografie vereist meestal maanden ervaring. Wanneer de siliconen-fluoride acceptor (SiFA) in een radio Tracer wordt verwerkt, is een eenvoudig 18F-labeling protocol mogelijk dat onafhankelijk is van kostbare apparatuur en voorbereidende training, terwijl de precursor hoeveelheid die nodig is en mildere reactie condities worden verminderd.

18 F-labeling van Radiotracers Functionaliseerde met een Siliciumfluoride acceptor (SiFA) voor positron emissie tomografie

Deze methode beschrijft het gebruik van een nieuwe high-throughput methodologie, gebaseerd op druppelchemische reacties, voor de snelle en economische optimalisatie van radiofarmaceutica met nanomole hoeveelheden reagentia.

Optimalisatie van radiochemische reacties met behulp van droplet arrays

Hier beschrijven we de radiosynthese van 1-(2-[18F]Fluoroethyl)-L-tryptofaan, een positronemissietomografiebeeldvormingsmiddel voor het bestuderen van tryptofaanmetabolisme, met behulp van een eenpotstrategie in twee stappen in een radiochemisch synthesesysteem met goede radiochemische opbrengsten, hoge enantiomeerovermaat en hoge betrouwbaarheid.

Radiosynthese van 1-(2-[18F]Fluoroethyl)-L-tryptofaan met behulp van een eenpot, tweestapsprotocol

Er wordt een eenvoudig, goedkoop en nieuw apparaat gepresenteerd voor het uitvoeren van peptidesyntheses in vaste fase in een commerciële microgolfreactor.

Een goedkope aanpassing van een commerciële microgolfreactor voor de synthese van peptiden in de vaste fase

Dit protocol beschrijft een methode voor het produceren en evalueren van de antimicrobiële activiteit en cytotoxiciteit van het kationische peptide Mel4 en het peptide-nabootser RK758. Door chemische synthese, recombinante expressie en gestandaardiseerde functionele assays te integreren, biedt het een gestroomlijnde workflow voor de productie en het testen van peptiden en kleinmolecuul-imitaties.

Productie en testen van antimicrobiële peptiden en hun nabootsers

Leer de een-pot microgolf-geassisteerde synthese van [18F]SFB voor PET-beeldvorming. Deze methode elimineert tussenstappen en levert hoge opbrengst en zuiverheid voor biomoleculaire radiolabeling.

Microgolf-geassisteerde Een-pot Synthese van N-Succinimidyl-4-[¹⁸ F] fluorobenzoate ([¹⁸ F] SFB)

Meer video's verkennen