Name: Morris Water Maze test voor leren en geheugen Tekortkomingen in de ziekte van Alzheimer Model Muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-07-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 2 s
Description: Leer de Morris Water Maze methode voor het evalueren van hippocampus-afhankelijk leren en geheugen bij muismodellen voor de ziekte van Alzheimer. Deze techniek meet ontsnappingslatenties en zwempatronen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door de Canadese Institutes of Health Research (CIHR), de familie Townsend, en Jack Brown en familie de ziekte van Alzheimer Research Foundation (naar WAS). WS is de houder van de Canada Research Chair bij de ziekte van Alzheimer. PL werd ondersteund door een NSERC Alexander Graham Bell Canada Graduate Scholarship Doctoral Research Award en een Michael Smith Foundation for Health Research senior studententijd.

1. Voorbereiding <ol><li> Apparatuur voorbereiding <ol><li> Verkrijgen van een rond zwembad met een diameter van 150 cm en een diepte van 50 cm (figuur 1). Bij gebruik van zwarte muizen, moet een witte pool worden gebruikt; bij gebruik van witte muizen, een zwarte pool moet worden gebruikt. </li><li> Schik de ruimte zodanig dat het dier wordt getest kan niet de experimentator te zien tijdens het testen. Dit kan worden bereikt met gordijnen of muurscheidingen. </li><li> Plaats een hoog contrast spatial cues over de kamer, en / of op de binnenkant van het zwembad op een locatie die zou worden boven het wateroppervlak. </li><li> Plaats een 10cm diameter platform in het zwembad - wit voor een wit zwembad, helder plexiglas voor een zwarte pool. Vul het zwembad met water tot het platform is 1 cm boven het wateroppervlak. Laat het water op kamertemperatuur (22 ° C). Afhankelijk van de temperatuur van het water dit kan een tot drie dagen, of anders heet water kan worden toegevoegd aan het versnellen evenwicht. </li></ol></li><li> Software voorbereiding <ol><li> Kalibreer het zwembad in de computer software, zodat de camera kan fysieke afstand informatie van pixel-gebaseerde informatie te creëren. Verdeel het zwembad in 4 kwadranten. Geef de platform-zone als een variabele zone die kan veranderen met elke proef. Maak 5 subzones platform - een in elk kwadrant, en een in het midden van het zwembad. Sla de kalibratie en het gebruiken voor de resterende dagen te testen. (Zie bijvoorbeeld Fig. 2). </li><li> De maximale proef tijd als 60 sec. Als de muis vindt het platform voor dit tijdstip, het programma van de software om het proces te stoppen bij het perron is gevonden. </li><li> Geef het programma begint met het volgen automatisch, wanneer de onderzoeker verlaat de testruimte. Gebruik maken van een "reflectie minimalisatie"-opties van uw software pakket biedt. </li><li> Track weglengte, ontsnappen latency, en de tijd doorgebracht in elk kwadrant. </li></ol></li></ol> 2. Dag 1: Zichtbaar Platform <ol><li> Computer Program <ol><li> Laad het zwembad kalibratie in de tracking software. </li><li> Maak vijf proeven, met een inter-trial interval geschikt is voor uw experiment. Programma van het platform locatie en het starten van richting te verschillen met elke trial. Zie tabel 1 voor een voorbeeld protocol. </li></ol></li><li> Testprocedure <ol><li> Breng de muizen uit hun behuizing mogelijkheid om het gedrag kamer. Houd de muizen in een gebied waar ze niet kunnen zien het zwembad of spatial cues. Laat ze aan de nieuwe omgeving aan te passen voor ten minste 30 minuten voor het testen. </li><li> Plaats een vlag op het platform om de zichtbaarheid te verhogen. </li><li> Om te beginnen testen, lift muis van de kooi door de basis van de staart. Ondersteuning van de muis terwijl je naar het testgebied. Het optillen van de muis door de basis van de staart, voorzichtig Plaats de muis in het water, met uitzicht op de rand van het zwembad. Snel verlaten van de testruimte. </li><li> Als de muis vindt het platform voor de 60 sec cut-off, laat de muis om op het platform blijven gedurende 5 seconden daarna terug in de kooi. Als de muis niet kan vinden van het platform, plaatst u de muis op het platform en laat het daar te blijven gedurende 20 seconden voordat hij terugkeerde naar haar kooi. </li><li> Herhaal dit voor alle muizen in het parcours. Begin elke volgende proef met een ander platform locatie en het starten van richting, zoals u hebt geprogrammeerd in uw software. </li><li> Bij het testen is voltooid, de terugkeer van de muizen naar hun woning faciliteit. Muizen zijn opgedroogd en normothermie is voorafgaand verzekerd terug te keren naar dier faciliteit. </li><li> Ter voorbereiding voor de volgende dag, verwijder de vlag van het platform en voeg extra water naar het zwembad om onder te duiken het platform om 1 cm onder het oppervlak. </li></ol></li></ol> 3. Dagen 2-5: Verborgen Platform <ol><li> Computer Program <ol><li> Laad het zwembad kalibratie in de tracking software. </li><li> Maak vijf proeven, met een inter-trial interval geschikt is voor uw experiment. Programma van het platform plaats te blijven in dezelfde positie in alle proeven en dag, maar hebben de start richting verschillen met elke proef, elke dag. </li></ol></li><li> Testprocedure <ol><li> Voor zwarte muizen, toe te voegen niet-giftig, wit, poeder tempera verf aan het zwembad en meng goed. Gebruik voldoende verf zodanig dat het ondergedompeld platform niet zichtbaar is van het oppervlak van het water. Voor witte muizen, moet een zwarte zwembad met helder water en een helder plexiglas platform worden gebruikt. </li><li> Volg de stappen 2.2.3 tot 2.2.6. </li></ol></li></ol> 4. Dag 6: Probe Trial <ol><li> Computer Program <ol><li> Laad het zwembad kalibratie in de tracking software. </li><li> Maak een proef met geen platform-zone, en een start richting. Het uitgangspunt richting het verst van het platform kwadrant gebruikt op dag 2-5 is de voorkeur. Stel het pad lengte tot 60 sec. </li></ol></li><li> Testprocedure <ol><li> Verwijder het platform van het zwembad. </li><li> Volg de stappen 2.2.3 tot 2.2.6. </li></ol></li></ol> 5. Data-analyse <ol><li> Voor elke dag en elke muis, het gemiddelde van de vijf proeven om een ​​weglengte en ontsnappen latentie te geven voor elke proefpersoon. Adequaat berekent u de totale fout. Voor dag 6, eenvoudig het verzamelen van de weglengte, ontsnappen latency, en de tijd doorgebracht in het platform kwadrant voor elke muis. </li><li> Als er verschillen bestaan ​​tussen de groepen op dag 1, is het waarschijnlijk een probleem met visie in plaats van leren en geheugen. Alleen doorgang bij de analyse als er geen verschillen zijn te zien op dag 1. </li><li> Vergelijk de leercurve voor de dag 2-5 met behulp van statistieken geschikt is voor uw gegevens in te stellen. Een steilere curve geeft sneller taak overname; een ondieper curve geeft een tekort in taak overname. De gegevens van dag 2 tot en met 5 dagen worden geanalyseerd met behulp ANOWA. </li><li> Voor dag 6, vergelijk het percentage van de tijd doorgebracht in de eerder geleerde platform kwadrant, het gebruik van statistieken geschikt is voor uw gegevens in te stellen. Een hoger percentage van de tijd doorgebracht in het platform kwadrant wordt geïnterpreteerd als een hoger niveau van het geheugen vast te houden. </li></ol> 6. Representatieve resultaten Wij hebben gebruik gemaakt van de Morris Water Maze test om het effect van hypoxie te onderzoeken op AD pathogenese (7) en valproïnezuur (VPA) 's farmaceutische potentieel voor AD behandeling (6) in transgene AD model muizen. Figuur 3 is de vertegenwoordiger resultaat dat we gemeld in onze studie effect VPA's op het geheugen tekorten in de APP23 AD muismodel (6). Op dag 1 (zichtbaar platform trials), is er geen verschil tussen de VPA behandelde en de controlegroepen in de latency (Fig. 3A) en de weglengte (Fig. 3A) dat aangeeft dat de beide groepen soortgelijke motor en visuele mogelijkheden zijn. Hieruit kunnen we aannemen dat de muizen in staat zijn om de gemarkeerde-platform en de signalen in de omgeving te zien, en kan aanvaardbaar zwemmen. Voor dag 2-5 (Dag 1 tot 4 van verborgen platform studies) het voorbeeld toont een verschil in de ontsnapping latency (fig. 3C) en de weglengte (fig. 3D) tussen de groepen, wat suggereert dat VPA behandelde muizen beduidend beter dan de controlegroep in de tijd. De probe trail resultaten op de laatste dag (Dag 6) blijkt dat het aantal keren dat de muizen reisde in het derde kwadrant, waar de verborgen platform eerder was geplaatst, was significant groter met VPA behandeling in vergelijking met de controlegroep (Afb. 3E). Deze gegevens wijzen erop dat de VPA behandeling aanzienlijk het geheugen tekorten zien in APP23 muizen verbetert. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig1.jpg" alt="Figuur 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 1"> Figuur 1. Het installeren van apparatuur voor de Morris Water Maze zichtbaar platform testdag. Het zwembad is afgeschermd van de onderzoeker met behulp van scheidingswanden. Spatial cues bevinden zich op de muren, en misschien op de binnenkant van het zwembad, boven het wateroppervlak, indien gewenst. Het zwembad is gevuld met helder water, met het platform bevindt zich 1 cm boven het oppervlak. Een vlag is geplaatst op het platform om de zichtbaarheid te verbeteren. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig2.jpg" alt="Figuur 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 2"> Figuur 2. Screen te nemen van de Any-Maze ™ Video Tracking System demonstreren zwembad kalibratie. Het zwembad is van bovenaf gezien door een zwart-wit analoge camera met een tracking RTV24 Digitizer. Verschillende zones zijn gedefinieerd in de software en de totale zwembad is verdeeld in vier kwadranten. Een vijfde, platform-zone wordt ingevoerd, die kan variëren in de onderzoeken, met vijf mogelijke locaties: NW, NE, SW, SE, of Center. Een ijklijn (aangevinkt lijn over het midden) wordt toegevoegd om de software om pixel afstanden te zetten in fysieke afstanden. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig3.jpg" alt="Figuur 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figuur 3"> Figuur 3. Representatieve resultaten voor de Morris Water Maze. De 7-maanden APP23 transgene muizen die de menselijke Zweedse mutant APP-gen werden getest na een maand van dagelijkse VPA (n = 30 muizen) of voertuig oplossing (n = 30 muizen) injecties. (A) tijdens de eerste dag van zichtbare platform tests, de VPA behandelde en de controlegroepen APP23 muizen vertoonden een vergelijkbaar latency te ontsnappen naar de zichtbare platform. P&gt; 0,05 door de student t-test. (B) De VPA-behandelde en controle muizen APP23 soortgelijke zwemmen afstanden had voordat ontsnappen naar de zichtbare platform in het zichtbare platform te testen. P&gt; 0,05 door de student t-test. (C) in verborgen platform tests, VPA behandelde APP23 muizen bleek een kortere wachttijd aan op de verborgen platform te ontsnappen op de 3 e en 4 e dag, P &lt;0.001 door ANOVA. (D) De VPA-behandelde muizen hadden APP23 een kortere lengte te zwemmen voordat de rook op de verborgen platform op de 3 e en 4 e dag, P &lt;0.01 van ANOVA. (E) In de sonde proef op de 6e dag, de VPA-behandelde muizen APP23 reisde in het derde kwadrant, waar de verborgen platform eerder was geplaatst, significant vaker dan de controlegroep. * P &lt;; 0.005 door de student t-test. (Aangepast en herdrukt uit The Journal of Experimental Medicine 205, 2781-2789, 2008, Rockefeller University Press, Oorspronkelijk gepubliceerd in J. Exp Med doi:... 10.1084/jem.20081588) (6). <table border="1"><tbody><tr><td> </td><td colspan="2"> Dag 1 </td><td> Dag 2 </td><td> Dag 3 </td><td> Dag 4 </td><td> Dag 5 </td><td> Dag 6 </td></tr><tr><td></td><td> Platform locatie </td><td> Beginnend Direction </td><td colspan="4"> Platform Woonplaats: ZW Startlocatie als volgt: </td><td> Geen platform. </td></tr><tr><td> Trial 1 </td><td> SW </td><td> S </td><td> W </td><td> N </td><td> N </td><td> E </td><td> N </td></tr><tr><td> Trial 2 </td><td> NW </td><td> N </td><td> S </td><td> W </td><td> E </td><td> S </td><td></td></tr><tr><td> Trial 3 </td><td> NE </td><td> S </td><td> N </td><td> E </td><td> W </td><td> W </td><td></td></tr><tr><td> Trial 4 </td><td> Centrum </td><td> E </td><td> E </td><td> W </td><td> S </td><td> E </td><td></td></tr><tr><td> Trial 5 </td><td> SE </td><td> W </td><td> S </td><td> S </td><td> N </td><td> N </td><td></td></tr></tbody></table> Tabel 1. Monster water maze protocol * * Merk op hoe zowel het platform positie en het starten van richting te veranderen op een dag, terwijl op dag 2-5 van het platform positie constant blijft, terwijl het uitgangspunt van richting verandert. Op dag 6, is er geen platform en een enkel proces. Het uitgangspunt richting voor dag 6 is het verst van de vorige platform locatie (SW), zodat de muizen moet een afstand afleggen, voordat u het eerder geleerde platform kwadrant.

<ol><li>Morris, R. G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+localization+does+not+require+the+presence+of+local+cues%5BTitle%5D)+AND+%22Learning+and+Motivation%22%5BJournal%5D)">Spatial localization does not require the presence of local cues.</a> Learning and Motivation. 12, 239-260 (1981).</li>
<li>O'Keefe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+hippocampal+place+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">A review of the hippocampal place cells.</a> Prog Neurobiol. 13, 419-439 (1979).</li>
<li>Scoville, W. B., Milner, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+recent+memory+after+bilateral+hippocampal+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Loss of recent memory after bilateral hippocampal lesions.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 20, 11-21 (1957).</li>
<li>Eichenbaum, H., Stewart, C., Morris, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+representation+in+place+learning%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Hippocampal representation in place learning.</a> J Neurosci. 10, 3531-3542 (1990).</li>
<li>Block, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+ischemia+and+behavioural+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Global ischemia and behavioural deficits.</a> Progress in Neurobiology. 58, 279-295 (1999).</li>
<li>Qing, H., He, G., Ly, P. T., Fox, C. J., Staufenbiel, M., Cai, F., Zhang, Z., Wei, S., Sun, X., Chen, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Valproic+acid+inhibits+Abeta+production%2C+neuritic+plaque+formation%2C+and+behavioral+deficits+in+Alzheimer%27s+disease+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Valproic acid inhibits Abeta production, neuritic plaque formation, and behavioral deficits in Alzheimer's disease mouse models.</a> J Exp Med. 205, 2781-2789 (2008).</li>
<li>Sun, X., He, G., Qing, H., Zhou, W., Dobie, F., Cai, F., Staufenbiel, M., Huang, L. E., Song, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+facilitates+Alzheimer%27s+disease+pathogenesis+by+up-regulating+BACE1+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Hypoxia facilitates Alzheimer's disease pathogenesis by up-regulating BACE1 gene expression.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. , 18727-18732 (2006).</li>
<li>D'Hooge, R., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+the+Morris+water+maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory.</a> Brain Research Reviews. 36, 60-90 (2001).</li>
<li>Brandeis, R., Brandys, Y., Yehuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+Morris+Water+Maze+in+the+study+of+memory+and+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The use of the Morris Water Maze in the study of memory and learning.</a> Int J Neurosci. 48, 29-69 (1989).</li>
<li>Lipp, H. P., Wolfer, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+modified+mice+and+cognition%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Genetically modified mice and cognition.</a> Curr Opin Neurobiol. 8, 272-280 (1998).</li>
<li>Sandi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+and+mechanisms+of+action+of+glucocorticoid+involvement+in+memory+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plast%22%5BJournal%5D)">The role and mechanisms of action of glucocorticoid involvement in memory storage.</a> Neural Plast. 6, 41-52 (1998).</li>
</ol>

Alle experimenten werden uitgevoerd in overeenstemming met de Universiteit van British Columbia Dierverzorging en gebruik commissie en CIHR richtlijnen.

Leeftijd, geslacht, soort en stam verschillen beïnvloeden MWM performance (8). Studies tonen aan dat oude muizen slechte prestaties in de MWM hebben, terwijl mannelijke knaagdieren beter presteren dan vrouwen, bovendien, zweven is meer uitgesproken bij muizen dan ratten (9, 10). Daarom moet deze elementen worden gelijkgesteld in alle tests. Bewijs suggereert ook dat gestresste dieren meer slecht presteren in de MWM (11), waardoor het milieu factoren die stress, zoals temperatuur, licht en geluid kunnen veroorzaken, moeten worden gecontroleerd en constant gehouden over de taak.

<table border="1"><tbody><tr><th> Naam van het serum </th><th> Vennootschap </th><th> Commentaar (optioneel) </th></tr><tr><td> AnyMaze Video Tracking System </td><td> Stoelting Company </td><td></td></tr><tr><td> Tempera Paint </td><td> Reeves &amp; Poole groepen </td><td> Wit, in poedervorm </td></tr></tbody></table>

morris water maze test voor leren en geheugen tekortkomingen in de ziekte van alzheimer model muizen

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer&#39;s Disease Model Mice

De Morris Water Maze (MWM) werd het eerst vastgesteld door neurowetenschapper Richard G. Morris in 1981 om hippocampus-afhankelijke leren, inclusief de verwerving van ruimtelijke memoryand op lange termijn een ruimtelijk geheugen te testen. De MWM is een relatief eenvoudige ingreep meestal bestaat uit zes dagen proeven, het belangrijkste voordeel dat het onderscheid tussen de ruimtelijke (verborgen-platform) en niet-ruimtelijke (zichtbaar platform) voorwaarden 2-4. Daarnaast is de MWM testomgeving vermindert de geur trail storing 5. Dit heeft ertoe geleid dat de taak op grote schaal toegepast in de studie van de neurobiologie en neurofarmacologie van het ruimtelijk leren en geheugen. De MWM speelt een belangrijke rol bij de validatie van modellen voor knaagdier neurocognitieve stoornissen zoals de ziekte van Alzheimer 6, 7. In dit protocol hebben we gesproken over de typische procedure van de MWM voor het testen van leren en het geheugen en data-analyse vaak gebruikt bij de ziekte van Alzheimer transgene muizen-model.

De Morris Water Maze is een gedrags taak om hippocampus-afhankelijke leer-en geheugen te testen. Het is op grote schaal gebruikt in de studie van neurobiologie, neurofarmacologie en neurocognitieve stoornissen in knaagdier modellen.

Morris Water Maze test voor leren en geheugen Tekortkomingen in de ziekte van Alzheimer Model Muizen

De Morris Water Maze (MWM) werd voor het eerst ontwikkeld door neurowetenschapper Richard G. Morris in 1981 om hippocampus-afhankelijk leren te testen, waaronder ...

Het algemene doel van het volgende experiment is om het hippocampus-afhankelijke leren en geheugen te testen. Op dag één wordt de muis getraind om een verhoogd platform met een vlaggetje te vinden dat willekeurig in een bassin met helder water is geplaatst, zodat de muis leert dat de taak een ontsnappingspunt heeft. Als tweede stap wordt de muis op opeenvolgende dagen getraind door vanuit verschillende posities in een bassin met opaak water te worden vrijgelaten, waarbij het platform ondergedompeld en op één vaste locatie gefixeerd is.Hierdoor kan de muis de locatie van het platform leren door gebruik te maken van de omgevingskenmerken. Vervolgens wordt het platform op de laatste dag verwijderd en wordt het zwempatroon van de muis gedurende één minuut gevolgd om de taakaanleering te beoordelen. Op deze wijze worden de resultaten voor leren en geheugen verkregen.Die een verslechtering vertonen in het ruimtelijk leren en geheugen, gebaseerd op de ontsnappingstijden en padlengtes waargenomen in de drie verschillende testcondities. Het belangrijkste voordeel van deze techniek ten opzichte van bestaande methoden is dat het relatief eenvoudig is om onderscheid te maken tussen de condities met een speciaal verborgen platform en een niet-speciaal zichtbaar platform. Over het algemeen kunnen mensen die nieuw zijn met deze methode problemen ervaren, omdat deze gevoelig is voor de experimentele hantering.Zorg ervoor dat de muizen tijdens de procedures niet gestrest raken, aangezien dit de resultaten kan beïnvloeden. Deze procedure zal worden gedemonstreerd door Ms. Kelly Bromley en Miss Sweden, promovendi uit mijn laboratorium. Bevestig eerst een ronde bak. Als de experimentele muizen zwart zijn, gebruik dan een witte bak, en als de muizen wit zijn, gebruik dan een zwarte bak. Nu.Richt de ruimte in met schermen zodanig dat de proefdieren de experimentator tijdens de testfase niet kunnen zien. Plaats contrastrijke ruimtelijke aanwijzingen over de kamer en op de binnenkant van het bassin op een locatie boven het wateroppervlak. Vul het bassin met water en laat dit acclimatiseren naar kamertemperatuur.Plaats vervolgens een platform met een diameter van 10 centimeter in het bad, één centimeter boven het wateroppervlak; gebruik wit voor een wit bad of transparant plexiglas voor een zwart bad. Kalibreer het bad in de computersoftware, zodat de camera fysieke afstandsinformatie kan genereren op basis van pixelgegevens.Verdeel het bad in vier kwadranten. Specificeer de platformzone als een variabele zone die per trial kan wijzigen. Creëer vervolgens vijf platformsubzones: één in elk kwadrant en één in het midden van het bad.Sla de kalibratie op en gebruik deze voor de resterende testdagen. Stel vervolgens de maximale proeftijd in op 60 seconden. Als de muis het platform vóór deze tijd vindt, programmeer de software dan zo dat de proef wordt gestopt zodra het platform is gevonden.Stel daarnaast het programma zo in dat het automatisch begint met tracken wanneer de experimentator het testgebied verlaat. Maak gebruik van alle beschikbare opties voor het minimaliseren van reflecties die het softwarepakket biedt. Track tot slot het pad, de lengte, de ontsnapping, de latentie en de tijd die in elk kwadrant wordt doorgebracht.Verplaats de muizen op de dag van de test van hun verblijf naar de gedragskamer, in een gebied waar ze het zwembad of de ruimtelijke aanwijzingen niet kunnen zien. Laat hen zich gedurende ten minste 30 minuten aanpassen aan de nieuwe omgeving. Laad vóór de test de kalibratie van het zwembad in de trackingsoftware.Creëer vijf pogingen met een passend inter-trial interval programma, waarbij de locatie van het platform en de startrichting per poging verschillen. Plaats een vlag op het platform om de zichtbaarheid ervan te vergroten. Til de muis aan de basis van de staart uit de thuiskooi om te beginnen met het testen, en ondersteun de muis tijdens de overdracht naar het testgebied.Plaats de muis vervolgens voorzichtig in het water, met de snuit naar de rand van het bad gericht. Verlaat snel het testgebied. Als de muis het platform vindt vóór de 62e cutoff, laat de muis dan vijf seconden op het platform blijven en breng hem daarna terug naar de thuiskooi.Als de muis het platform niet vindt, plaats de muis dan op het platform en laat deze daar 20 seconden blijven voordat de muis wordt teruggebracht naar de thuiskooi. Herhaal dit voor alle muizen in de proef. Begin elke volgende proef met een andere locatie van het platform en een andere startrichting volgens de programmawsoftware.Wanneer het testen is voltooid, keren de muizen terug naar hun huisvestingsfaciliteit ter voorbereiding op de volgende dag. Verwijder de vlag van het platform en voeg extra water toe aan het bassin om het platform tot één centimeter onder het oppervlak onder te dompelen. Laad de kalibratie van het bassin in de trackingsoftware en maak vijf trials aan met een passend interval tussen de trials.Programmeer vervolgens de locatie van het platform zodanig dat deze tijdens alle tests en dagen op dezelfde positie blijft, maar zorg dat de startrichting bij elke test per dag verschilt. Voeg bij zwarte muizen niet-toxische witte poederverf op waterbasis toe aan het bad en meng dit grondig. Gebruik voldoende verf zodat het ondergedompelde platform vanaf het wateroppervlak niet zichtbaar is.Ga over tot het testen van individuele muizen in het water, zoals eerder beschreven voor de laatste sonde-trial. Laad de poolkalibratie in de trackingsoftware. Maak één trial aan zonder platformzone en met één startrichting.Bij voorkeur wordt de startrichting gekozen die het verst afligt van het platformkwadrant dat op dag twee tot en met vijf is gebruikt. Stel daarnaast de trailduur in op 60 seconden. Verwijder nu het platform uit het bassin en test individuele muizen in het water zoals eerder beschreven voor elke dag; bereken voor elke muis het gemiddelde van de vijf trials om een enkele padlengte en ontsnappingstijd per testsubject te verkrijgen.Analyse en interpreteer vervolgens de gegevens zoals gedetailleerd in het bijbehorende manuscript met behulp van het Morris waterdoolhof. Zeven maanden oude APP 23 transgene muizen die het humane Zweedse mutante APP-gen dragen, werden getest na één maand dagelijkse injecties van valproïnezuur of een vehikeloplossing tijdens de eerste dag van de tests met een zichtbaar platform. De met VPA behandelde en de controle APP 23 muizen vertoonden een vergelijkbare latentietijd om naar het zichtbare platform te ontsnappen.De VPA-behandelde en controle A PP 23-muizen hadden vergelijkbare zwemafstanden voordat zij ontsnapten naar het zichtbare platform. In de test met het zichtbare platform en de tests met het verborgen platform op de derde en vierde dag vertoonden de VPA-behandelde A PP 23-muizen een kortere latentietijd om te ontsnappen naar het verborgen platform. Op de derde en vierde dag hadden de VPA-behandelde A PP 23-muizen een kortere zwemlengte voordat zij ontsnapten naar het verborgen platform.In de probe-trial op de zesde dag bewogen de VPA-behandelde PP 23-muizen, vergeleken met de controlemuizen, significant vaker naar het derde kwadrant waar het verborgen platform voorheen was geplaatst. Bij het uitvoeren van deze procedure is het belangrijk om omgevingsfactoren die stress kunnen veroorzaken, zoals geluid, temperatuur en licht, nauwkeurig te bewaken. Na deze procedure kunnen andere methoden, zoals cued en contextuele angstconditionering, worden uitgevoerd om aanvullende vragen te beantwoorden, zoals of de leertekorten specifiek zijn voor de hippocampus of deel uitmaken van een breder neurocognitief probleem, waarbij mogelijk ook de amygdala betrokken is.

morris-water-maze-test-for-learning-memory-deficits-alzheimer-s

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

De Morris water maze is een goed geaccepteerd instrument dat wordt gebruikt om de betrokkenheid van de hippocampus in een gedrags-taak document.

Morris Water Maze Experiment

De Lashley III doolhof is een route-learning taak die niet afhankelijk is van aversieve stimuli of visuele cues. Het is dus een zeer aantrekkelijke optie voor het evalueren van leren en geheugen, vooral in ouder worden muizen of anderszins waar stress is een overweging.

Lage-stress Route leren met behulp van de Lashley III Maze in Muizen

Ondiep water (Peddelen) Varianten van het Water Maze Tests in Muizen

Cognitieve stoornissen als gevolg van radiotherapeutische behandeling van hersentumoren vormen een klinisch hardnekkige aandoening die de kwaliteit van leven nadelig beïnvloedt. De mogelijkheid om potentiële interventies voor het verbeteren van stralingsgeïnduceerde cognitieve achteruitgang kritisch te evalueren, hangt uiteindelijk af van het vermogen om rigoureuze kwantitatieve beoordelingen van de cognitie uit te voeren.

Kwantificeren Cognitieve Vermindert Veroorzaakt door Cranial Radiotherapie

In this video, we describe the Morris water maze test with platform relocation, a navigational task used to study working memory in rodents.

The Water Maze with Platform Relocation: A Method to Assess Working Memory

Dit manuscript beschrijft een Morris water maze (MWM) protocol dat is aangepast voor gebruik met een veelgebruikte muismodel van de ziekte van Alzheimer. De MWM wordt veel gebruikt in transgene muismodellen. Implementatie van een procedure die gevoelig is voor de achtergrondstam van het muismodel is essentieel voor het detecteren van verschillen tussen groepen.

Morris Water Maze Test: Optimalisatie voor Mouse Strain en testomgeving

De co-morbide ziekte van Alzheimer (AD) en beroerte aandoening in een nieuw model te onderzoeken, zijn drie gedrag taken beschreven die zowel motorische controle en cognitieve gedrag te evalueren. Deze taken zijn onder andere de bundel-walk taak, cilinder taak en Morris water doolhof.

Motor en hippocampus Dependent Ruimtelijke Learning and Reference geheugen Assessment in een transgeen ratmodel van de ziekte van Alzheimer met Stroke

Hier presenteren we een protocol voor een muisspecifieke test van cognitie die geen zwem nodig heeft. Deze test kan gebruikt worden om succesvol gecontroleerde corticale impact-geïnduceerde traumatische hersenletselmuizen te onderscheiden van sham-controles.

Evaluatie van ruimtelijke geheugenvermindering in een muismodel van traumatische hersenletsel met behulp van een radiaal waterdierdool

Hierin, een protocol om de Morris water doolhof tests uit te voeren om het vermogen van het leren en het geheugen van de ziekte van Alzheimer model muizen te evalueren en om het effect van handmatige acupunctuur voor de behandeling van hen te beoordelen wordt beschreven.

Analyse van leren en geheugen vermogen in een ziekte van Alzheimer muis model met behulp van de Morris water Maze

We presenteren een goedkope methode te ontwerpen en een licht headstage voorversterker systeem bouwen met gelijktijdige opname en neurale stimulatie mogelijkheid. Dit apparaat kan worden waterdicht gemaakt voor gebruik in het zwemmen dieren.

Ontwerp en Bouw van een kosteneffectieve Headstage voor Simultaneous neurale stimulatie en opnemen in het Water Maze

Leer de Morris Water Maze methode voor het evalueren van hippocampus-afhankelijk leren en geheugen bij muismodellen voor de ziekte van Alzheimer. Deze techniek meet ontsnappingslatenties en zwempatronen.

Morris Water Maze test voor leren en geheugen Tekortkomingen in de ziekte van Alzheimer Model Muizen

Meer video's verkennen