Name: Laser capture microdissectie van weefsel van zoogdieren (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 34 s
Description: Leer laser capture microdissectie van zoogdierweefsel met de Leica A-S-L-M-D-microscoop. Deze methode isoleert specifieke cellen met hoge precisie voor RNA-analyse en moleculair onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs hebben niets te melden.

laser capture microdissectie van weefsel van zoogdieren

Laser Capture Microdissection of Mammalian Tissue

Laser capture microscopie, ook wel bekend als laser microdissectie (LMD), kan de gebruiker te isoleren kleine aantallen van cellen of weefsels die bevroren of in formaline gefixeerde, in paraffine ingebedde weefselcoupes. LMD technieken baseren zich op een thermo labiele membraan ofwel bovenaan geplaatst, of onder, het weefsel sectie. In een methode, is gericht laser energie die wordt gebruikt om het membraan smelten op de onderliggende cellen, die vervolgens kunnen worden opgeheven van het weefsel sectie. In de andere, de laser-energie verdampt de folie langs een pad &quot;getrokken&quot; op het weefsel, waardoor de geselecteerde cellen te vallen in een verzameling apparaat. Elke techniek maakt het mogelijk de selectie van cellen met een minimale resolutie van enkele microns. DNA, RNA, eiwit en lipide monsters kunnen worden geïsoleerd en geanalyseerd van micro-ontleed monsters. In deze video, tonen we het gebruik van de Leica AS-LMD laser microdissection instrument in zeven segmenten, waaronder een kennismaking met de beginselen van de LMD, het initialiseren van het instrument voor gebruik, algemene overwegingen voor monstervoorbereiding, montage het monster en het opzetten van vast te leggen buizen , het uitlijnen van de microscoop, het aanpassen van de controles vast te leggen, en het vastleggen van weefselmonsters. Laser-capture micro-dissectie kan de onderzoeker om monsters van de zuivere celpopulaties zo klein isoleren als een enkele cel-equivalenten. Hierdoor kan de analyse van cellen van belang die vrij zijn van naburige verontreinigingen, die kunnen verwarren experimentele resultaten.

Laser capture microdissectie van weefsel van zoogdieren

Lasercapturemicroscopie, ook bekend als lasersmicrodissectie (LMD), stelt de gebruiker in staat om kleine aantallen cellen of weefsels te isoleren uit bevroren of ...

Hallo, mijn naam is Rob Edwards. Ik ben de directeur van de Laser Capture-microscopiefaciliteit van de University of California Irvine. Ik zal u het gebruik beschrijven van de laser capture-microscoop die wij hier hebben.Ons instrument is een Leica A-S-L-M-D, die we ongeveer drie jaar geleden hebben aangeschaft. Er zijn twee verschillende typen laser-capture-systemen. Eén kan worden vergeleken met een puntslasapparaat, waarbij een stuk weefsel op een glazen objectglas ligt, bovenop een plastic membraan dat het weefsel bedekt.Vervolgens wordt een laserbron gebruikt om het membraan te smelten, waardoor het weefsel in feite op het membraan wordt puntgelast, waarna dat membraan wordt verwijderd, waarbij het vastgelegde weefsel wordt meegevoerd. Oké. Om het LCM-systeem op te starten, zetten we hier een aantal instrumenten in volgorde aan. We beginnen met de A-S-L-M-D-bedieningskast, die hier wordt ingeschakeld.Vervolgens zetten we de computer aan, wat vrij eenvoudig is. Als u een preparaat heeft waarvoor fluorescentie-optiek nodig is om de te vangen cellen te identificeren, zou u de kwiklamp voor de fluorescentieverlichting inschakelen. Voor deze demonstratie zullen we dit niet gebruike

laser-capture-microdissection-of-mammalian-tissue

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

The video describes the laser dissection of the 3D organotypic co-culture model with micron-level precision. In 3D organotypic models, stromal constituents such as fibroblasts are 3-dimensionally co-cultured with cancer epithelial cells. The 3D model serves as an experimental tool that enables invasion and cancer-stroma interactions to be studied in near-physiological conditions.

Laser Microdissection: A Technique to Isolate Invading Colorectal Cancer cells from a 3D Organotypic Culture Model

Microdissectie is uitgebreid toegepast voor de behandeling van DNA, RNA en eiwitten in weefsel. Laser capture microscopie (LCM) is de meest gebruikte methode, maar een nieuwe frees-techniek, mesodissection, is sinds kort beschikbaar. We tonen RNA extractie uit mesodissected formaline gefixeerd paraffine-ingebed weefsel slides van Mycobacterium tuberculosis granulomen.

A Novel Microdissection aanpak voor het herstellen<em&gt; Mycobacterium tuberculosis</em&gt; Specifieke Afschriften van formaline gefixeerde in paraffine ingebedde Lung Granulomen

De isolatie van individuele dopamine neuronen of het ventrale tegmentale met directe of indirecte immunohistochemie wordt aangetoond met behulp van lasermicrodissectie. Parameters voor isolatie van weefsel uit een glasplaatje met een infrarood laser en van membraansystemen dia met de combinatie van infrarood en ultraviolet laser besproken.

Lasermicrodissectie - Een demonstratie van de Isolatie van individuele dopamineneuronen en de Gehele Ventral tegmentum

Het doel van dit protocol is om laser-capture micro-dissectie te gebruiken als een effectieve methode om pure populaties van celtypen te isoleren uit heterogene prostaatweefsels voor downstream RNA-analyse.

Laser-capture microdissectie van Human Prostatic Epithelium voor RNA-analyse

Hier beschrijven we een protocol voor een reproduceerbare laser vangt microdissection (LCM) voor het isoleren van trabecular gevlochten (TM) voor downstream RNA analyse. De mogelijkheid om het analyseren van wijzigingen in genexpressie in het Vertaalgeheugen zal helpen bij het begrijpen van de moleculaire mechanismen van TM-gerelateerde oogbeschadigingen en/of ziekten.

Laser vangt Microdissection voor zeer zuivere Trabecular Zitschalen van muis ogen gen expressie p.a.

Een laser Capture microdissection (LCM)-protocol werd ontwikkeld om voldoende hoeveelheid kwalitatief hoogwaardig RNA te verkrijgen voor genexpressie analyse in botcellen. De huidige studie focust op de muis dijbeen secties. Het hier gerapporteerde LCM-protocol kan echter worden gebruikt om genexpressie in cellen van een hard weefsel te bestuderen.

Een laser Capture microdissection protocol dat hoge kwaliteit RNA oplevert van vers-bevroren muis botten

Dit protocol beschrijft de laser Capture micro dissectie voor de isolatie van kraakbeen en bot uit verse bevroren delen van de muis embryo. Kraakbeen en botten kunnen snel worden gevisualiseerd door Cresylacetaat-Violet kleuring en precies worden verzameld om RNA van hoge kwaliteit te leveren voor transcriptomische analyse.

Laser Capture Microdissectie van de muis embryonale kraakbeen en bot voor genexpressie analyse

Laser microdissectie (LMD) is een gevoelige en zeer reproduceerbare techniek die kan worden gebruikt om paden die glioom heterogeniteit en invasie te bemiddelen blootleggen. Hier beschrijven we een geoptimaliseerd protocol om discrete gebieden te isoleren van glioomweefsel met behulp van laser LMD, gevolgd door transcriptomische analyse.

Laser Capture Microdissection of Glioma Subregions for Spatial and Molecular Characterization of Intratumoral Heterogeneity, Oncostreams, and Invasion

Er wordt een protocol beschreven dat lasermicrodissectie gebruikt om individuele nematodenweefsels te isoleren voor RNA-sequencing. Het protocol vereist geen soortspecifieke genetische toolkits, waardoor genexpressieprofielen kunnen worden vergeleken tussen verschillende soorten op het niveau van single-tissue monsters.

Laser microdissectie voor species-agnostische single-tissue toepassingen

Dit protocol beschrijft een high-throughput workflow voor kunstmatige intelligentie-gedreven segmentatie van pathologie-bevestigde gebieden van belang van gekleurde, dunne weefselsectiebeelden voor verrijking van histologie-opgeloste celpopulaties met behulp van lasermicrodissectie. Deze strategie omvat een nieuw algoritme dat de overdracht van afbakeningen die interessante celpopulaties aangeven, rechtstreeks naar lasermicroscopen mogelijk maakt.

Geïndustrialiseerde, kunstmatige intelligentie-geleide lasermicrodissectie voor proteomische analyse op microschaal van de tumormicro-omgeving

Dit protocol beschrijft een methode om RNA te isoleren uit gedefinieerde histologische gebieden van paraformaldehydegebonden, Optimal Cutting Temperature-verbinding-ingebedde muizenleverweefsel met behulp van lasercapture-microdissectie, waardoor gerichte downstream genexpressie-analyse mogelijk is.

Laservangstmicrodissectie van paraformaldehyde-gefixeerd muizenleverweefsel voor RNA-analyse

Leer laser capture microdissectie van zoogdierweefsel met de Leica A-S-L-M-D-microscoop. Deze methode isoleert specifieke cellen met hoge precisie voor RNA-analyse en moleculair onderzoek.

Laser capture microdissectie van weefsel van zoogdieren

Meer video's verkennen