Name: Een inleiding tot sluipwespen van Drosophila En de Antiparasite immuunrespons (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-07T12:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 4 s
Description: Leer hoe je sluipwespen kweekt op Drosophila-larven en immuunweefsels zoals lymfeklieren en vetlichamen dissecteert. Deze methode maakt visualisatie van genexpressie en immuunreacties mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

We zijn dankbaar aan Prof Todd Schlenke voor Trichopria drosophilae, prof. dr. Tony IP voor transgene vlieg stammen, en prof. dr. Carl Hashimoto voor anti-Spätzle antilichamen. Wij danken heden en verleden leden van het lab voor hun bijdrage aan deze presentatie. Dit werk werd ondersteund door de volgende subsidies: van NIH (S06 GM08168, RISE 41399-009, en de G12-RR03060), USDA (NRI / USDA CSREES 2006 tot 03817 en 2009-35302-05277) en PSC-CUNY.

<ol><li>Schlenke, T. A., Morales, J., Govind, S., Clark, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrasting+infection+strategies+in+generalist+and+specialist+wasp+parasitoids+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Contrasting infection strategies in generalist and specialist wasp parasitoids of Drosophila melanogaster.</a> PLoS Pathog. 3, 1486-1501 (2007).</li>
<li>Chiu, H., Morales, J., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+immuno-electron+microscopy+localization+of+p40%2C+a+protein+component+of+immunosuppressive+virus-like+particles+from+Leptopilina+heterotoma%2C+a+virulent+parasitoid+wasp+of+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gen.+Virol%22%5BJournal%5D)">Identification and immuno-electron microscopy localization of p40, a protein component of immunosuppressive virus-like particles from Leptopilina heterotoma, a virulent parasitoid wasp of Drosophila.</a> J. Gen. Virol. 87, 461-470 (2006).</li>
<li>Gueguen, G., Rajwani, R., Paddibhatla, I., Morales, J., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VLPs+of+Leptopilina+boulardi+share+biogenesis+and+overall+stellate+morphology+with+VLPs+of+the+heterotoma+clade%5BTitle%5D)+AND+%22Virus+Res%22%5BJournal%5D)">VLPs of Leptopilina boulardi share biogenesis and overall stellate morphology with VLPs of the heterotoma clade.</a> Virus Res. 160, 159-165 (2011).</li>
<li>Paddibhatla, I., Lee, M. J., Kalamarz, M. E., Ferrarese, R., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+for+sumoylation+in+systemic+inflammation+and+immune+homeostasis+in+Drosophila+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Role for sumoylation in systemic inflammation and immune homeostasis in Drosophila larvae.</a> PLoS Pathog. 6, e1001234(2010).</li>
<li>Sorrentino, R. P., Carton, Y., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+immune+response+to+parasite+infection+in+the+Drosophila+lymph+gland+is+developmentally+regulated%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Cellular immune response to parasite infection in the Drosophila lymph gland is developmentally regulated.</a> Dev. Biol. , 243-265 (2002).</li>
<li>Sorrentino, R. P., Melk, J. P., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+analysis+of+contributions+of+dorsal+group+and+JAK-Stat92E+pathway+genes+to+larval+hemocyte+concentration+and+the+egg+encapsulation+response+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic analysis of contributions of dorsal group and JAK-Stat92E pathway genes to larval hemocyte concentration and the egg encapsulation response in Drosophila.</a> Genetics. 166, 1343-1356 (2004).</li>
<li>Jung, S. H., Evans, C. J., Uemura, C., Banerjee, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+lymph+gland+as+a+developmental+model+of+hematopoiesis%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The Drosophila lymph gland as a developmental model of hematopoiesis.</a> Development. 132, 2521-2533 (2005).</li>
<li>Krzemien, J., Crozatier, M., Vincent, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ontogeny+of+the+Drosophila+larval+hematopoietic+organ%2C+hemocyte+homeostasis+and+the+dedicated+cellular+immune+response+to+parasitism%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Ontogeny of the Drosophila larval hematopoietic organ, hemocyte homeostasis and the dedicated cellular immune response to parasitism.</a> Int. J. Dev. Biol. 54, 1117-1125 (2010).</li>
<li>Martinez-Agosto, J. A., Mikkola, H. K., Hartenstein, V., Banerjee, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hematopoietic+stem+cell+and+its+niche%3A+a+comparative+view%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">The hematopoietic stem cell and its niche: a comparative view.</a> Genes Dev. 21, 3044-3060 (2007).</li>
<li>Lemaitre, B., Hoffmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+host+defense+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Immunol%22%5BJournal%5D)">The host defense of Drosophila melanogaster.</a> Annu. Rev. Immunol. 25, 697-743 (2007).</li>
<li>Schlegel, A., Stainier, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+from+%22lower%22+organisms%3A+what+worms%2C+flies%2C+and+zebrafish+can+teach+us+about+human+energy+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">Lessons from "lower" organisms: what worms, flies, and zebrafish can teach us about human energy metabolism.</a> PLoS Genet. 3, e199(2007).</li>
<li>Ferrandon, D., Jung, A. C., Criqui, M., Lemaitre, B., Uttenweiler-Joseph, S., Michaut, L., Reichhart, J., Hoffmann, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+drosomycin-GFP+reporter+transgene+reveals+a+local+immune+response+in+Drosophila+that+is+not+dependent+on+the+Toll+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">A drosomycin-GFP reporter transgene reveals a local immune response in Drosophila that is not dependent on the Toll pathway.</a> EMBO J. 17, 1217-1227 (1998).</li>
<li>Bruckner, K., Kockel, L., Duchek, P., Luque, C. M., Rorth, P., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+PDGF%2FVEGF+receptor+controls+blood+cell+survival+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Cell%22%5BJournal%5D)">The PDGF/VEGF receptor controls blood cell survival in Drosophila.</a> Dev. Cell. 7, 73-84 (2004).</li>
<li>Tokusumi, T., Shoue, D. A., Tokusumi, Y., Stoller, J. R., Schulz, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+hemocyte-specific+enhancer-reporter+transgenes+for+the+analysis+of+hematopoiesis+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Genesis%22%5BJournal%5D)">New hemocyte-specific enhancer-reporter transgenes for the analysis of hematopoiesis in Drosophila.</a> Genesis. 47, 771-774 (2009).</li>
<li>Tokusumi, T., Sorrentino, R. P., Russell, M., Ferrarese, R., Govind, S., Schulz, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+lamellocyte+transcriptional+enhancer+located+within+the+misshapen+gene+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Characterization of a lamellocyte transcriptional enhancer located within the misshapen gene of Drosophila melanogaster.</a> PLoS One. 4, e6429(2009).</li>
<li>Morales, J., Chiu, H., Oo, T., Plaza, R., Hoskins, S., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biogenesis%2C+structure%2C+and+immune-suppressive+effects+of+virus-like+particles+of+a+Drosophila+parasitoid%2C+Leptopilina+victoriae%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Biogenesis, structure, and immune-suppressive effects of virus-like particles of a Drosophila parasitoid, Leptopilina victoriae.</a> J. Insect Physiol. 51, 181-195 (2005).</li>
<li>Bettencourt, R., Asha, H., Dearolf, C., Ip, Y. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemolymph-dependent+and+-independent+responses+in+Drosophila+immune+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">Hemolymph-dependent and -independent responses in Drosophila immune tissue.</a> J. Cell Biochem. 92, 849-863 (2004).</li>
<li>Melk, J. P., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+analysis+of+Ganaspis+xanthopoda%2C+a+larval+parasitoid+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Developmental analysis of Ganaspis xanthopoda, a larval parasitoid of Drosophila melanogaster.</a> J. Exp. Biol. 202, 1885-1896 (1999).</li>
</ol>

Geen belangenconflicten verklaard.

De belangstelling voor sluipwespen van Drosophila is stijgende als moleculaire technieken voor het hele genoom te decoderen efficiënt en kosteneffectief. Echter, ten opzichte van hun uitzonderlijk goed bestudeerde gastheren, vele fascinerende aspecten van de biologie wesp blijft onduidelijk. Deze omvatten kwesties in verband met bereik, onderdrukking van het immuunsysteem, superparasitering, en het gedrag te hosten. De focus van deze presentatie was om de effecten van de infectie aan te tonen op het immuunsyste...

<table border="1"><tbody><tr><td> Materialen </td><td> Type </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogusnummer </td></tr><tr><td> Materiaal voor insecten in stand te houden </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Gist </td><td> Actieve gedroogde </td><td> Fisher Scientific </td><td> S802453 </td></tr><tr><td> Fly voedsel </td><td> Maïsmeel, suiker </td><td></td><td> Standaard recept </td></tr><tr><td> Honing </td><td> Klaver </td><td> Nederlands Goud- </td><td></td></tr><tr><td> Vials </td><td> Polypropyleen shell flacons (smal) </td><td> Fisher Scientific </td><td> AS514 </td></tr><tr><td> Vial sluitingen </td><td> Katoen plug </td><td> Fisher Scientific </td><td> AS212 </td></tr><tr><td> Vial sluitingen </td><td> Buzz plug </td><td&gt; Genesee Wetenschappelijk </td><td> AS273 </td></tr><tr><td> Gekoelde incubator </td><td> Precision 815 </td><td> Thermo Scientific </td><td> 3721 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Materialen voor monstervoorbereiding </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> CO 2 tank </td><td> Kurkdroog kwaliteit </td><td> TW Smith </td><td> UN1013 </td></tr><tr><td> Spatel </td><td> Micro spatel (14 cm) </td><td> Fisher Scientific </td><td> 21-401-15 </td></tr><tr><td> Pyrex plek testplaten </td><td> 9-goed ontleden van plaat 85 mm x 100 mm </td><td> Thomas Wetenschappelijk </td><td> 7812G17 </td></tr><tr><td> Pasteurpipetten </td><td> Natronkalk </td><td> J &amp; H Berge </td><td> 71-5200-05 </td></tr><tr><td> Pincet </td><td> Stijl # 5 </td><td> Sigma </td><td> T-4662 </td></tr><tr><td> Ethanol </td><td> 190 proof USP </td><td> Fisher Scientific </td><td> 04-355-221 </td></tr><tr><td> Formaldehyde </td><td> 37% w / w </td><td> Fisher Scientific </td><td> F79-1 </td></tr><tr><td> Secundair antilichaam Cy3 AffiniPure ezel anti-konijn IgG (H + L) </td><td> 01:50 Excitatie 546 nm; Emissie 565 nm </td><td> Jackson Immuno Research Laboratories, Inc </td><td> 711-165-152 </td></tr><tr><td> Antifade (N-propylgallaat) </td><td> 4 ug / ml in 50% glycerol in 1X PBS </td><td> MP Biomedicals </td><td> 10274790 </td></tr><tr><td> Glycerol </td><td></td><td> Fisher Scientific </td><td> G33-1 </td></tr><tr><td> Hoechst 33258 </td><td> 0,2 ug / ml excitatie 352 nm, emissiegolflengte 461 nm </td><td> Molecular Probes </td><td> H-1398 </td></tr><tr><td> Rhodamine phalloidin </td><td> 200 eenheden / ml (6,6pM) Excitatie 540 nm, emissiegolflengte 565 nm </td><td> Molecular Probes </td><td> R415 </td></tr><tr><td> Alexa Fluor 488 phalloidin </td><td> 300 eenheden / ml excitatie 495 nm; Emissie 518 nm </td><td> Molecular Probes </td><td> A12379 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Disposables </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Was de fles </td><td> Fisherbrand </td><td> Fisher Scientific </td><td> 03 tot 409-22A </td></tr><tr><td> Kimwipes </td><td> Kimberly Clark </td><td> Fisher Scientific </td><td> 06-666A </td></tr><tr><td> Papieren handdoek </td><td> 1-laags C-vouw </td><td> Veer </td><td> 901-7CFTB2400 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Microscopie </td><td> &amp;nbsp; </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Leica stereomicroscoop </td><td> MZFLIII </td><td> Empire Imaging Systems, Inc </td><td> 10446208 </td></tr><tr><td> Zeiss Stereomicroscoop </td><td> Stemi 1000 of 2000-C </td><td> Carl Zeiss </td><td> 000000-1006-126 </td></tr><tr><td> Lichtbron - LED </td><td> Zwanenhals verlichting </td><td> Fisher Scientific </td><td> 12563501 </td></tr><tr><td> Stadium </td><td> Verzonden lichtbak met plaat </td><td> Carl Zeiss </td><td> 455137000 </td></tr><tr><td> Zeiss laser scanning confocale microscoop </td><td> LSM 510 </td><td> Carl Zeiss </td><td></td></tr><tr><td> Zeiss samengestelde microscoop </td><td> Axioplan 2 rechtop </td><td> Carl Zeiss </td><td></td></tr></tbody></table><table border="1"><tbody><tr><td> Wasp Stammen </td><td> Fly Zeefs </td></tr><tr><td> Leptopilina victoriae 16 </td><td> yw </td></tr><tr><td> Leptopilina boulardi 17 1 </td><td> UAS-GFP-Dorsale 17 </td></tr><tr><td> Leptopilina Heterotoma 2 </td><td> SerpentHemoGal4 13 </td></tr><tr><td> Leptopilina Heterotoma 14 1 </td><td> MSNF9-moCherry 14 </td></tr><tr><td> Trichopria drosophilae </td><td> MSNF-GFP 15 </td></tr><tr><td> Ganaspis xanthopoda 18 </td><td> yw Serpent-Gal4 UAS GFP-Dorsal/Basc 4 </td></tr><tr><td></td><td> yw; Drosomycin-GFP/CyO y + 12 </td></tr></tbody></table>

een inleiding tot sluipwespen van<em&gt; drosophila</em&gt; en de antiparasite immuunrespons

An Introduction to Parasitic Wasps of Drosophila and the Antiparasite Immune Response

De meeste bekende parasitische wespensoorten vallen de larvale of poppenstadia van Drosophila aan. Terwijl Trichopria drosophilae de poppenstadia van de gastheer infecteren (Fig. 1A-C), vallen vrouwtjes van het geslacht Leptopilina (Fig. 1D, 1F, 1G) en Ganaspis (Fig. 1E) de larvale stadia aan. Wij gebruiken deze parasieten om de moleculaire basis van een biologische wapenwedloop te bestuderen. Parasitische wespen hebben een enorme waarde als biologische bestrijdingsmiddelen. De meeste van hen dragen virulentiefactoren en andere factoren bij die de fysiologie en immuniteit van de gastheer beïnvloeden. De analyse van Drosophila-wespen biedt inzicht in hoe soortspecifieke interacties de genetische structuren van natuurlijke gemeenschappen vormgeven. Deze studies dienen tevens als model om de immuunfysiologie van de gastheren te begrijpen en hoe gecoördineerde immuunreacties worden gedwarsboomd door deze klasse parasieten.
De larvale/pupale cuticula dient als de eerste verdedigingslinie. De ovipositor van de wesp is een scherpe, naaldachtige structuur die eitjes efficiënt in de hemocoel van de gastheer afzet. De ovipositie wordt gevolgd door een wondgenezingsreactie in de cuticula (Fig. 1C, pijlpunten). Sommige wespen kunnen twee of meer eitjes in dezelfde gastheer plaatsen, hoewel de ontwikkeling van slechts één eitje slaagt. Supernumeraire eitjes of ontwikkelende larven worden geëlimineerd door een proces dat nog niet volledig is begrepen. Deze wespen worden daarom aangeduid als solitaire parasitoïden.
Afhankelijk van de vliegenstam en de wespensoort is er voor het ei van de wesp een van de twee mogelijke uitkomsten. Het ei wordt ofwel ingekapseld, waardoor de ontwikkeling wordt geblokkeerd (gastheer komt uit; Fig. 2 links); of het ei van de wesp komt uit, ontwikkelt zich, vervelt en groeit uit tot een volwassen exemplaar (wesp komt uit; Fig. 2 rechts). L. heterotoma is een van de best bestudeerde soorten parasitaire wespen van Drosophila. Het is een "generalist", wat betekent dat het de meeste Drosophila-soorten als gastheer kan gebruiken1. L. heterotoma en L. victoriae zijn zustersoorten en produceren virusachtige deeltjes die de inkapselingsrespons actief verstoren2. In tegenstelling tot L. heterotoma is L. boulardi een gespecialiseerde parasiet en is het scala aan Drosophila-soorten dat het gebruikt relatief beperkt1. Stammen van L. boulardi produceren ook virusachtige deeltjes3, hoewel ze aanzienlijk verschillen in hun vermogen om succesvol te zijn op D. melanogaster1. Sommige van deze L. boulardi-stammen zijn moeilijk te kweken op D. melanogaster1, omdat de vlieggastheer er vaak in slaagt hun eieren in te kapselen. Daarom is het belangrijk om kennis te hebben van beide partners in specifieke experimentele protocollen.
Naast barrièreweefsels (cuticula, darm en trachea) hebben Drosophila-larven systemische cellulaire en humorale immuunresponsen die respectivelijk voortkomen uit functies van bloedcellen en het vetlichaam. Eiafzetting door L. boulardi activeert beide immuunarmen1,4. Bloedcellen bevinden zich in de circulatie, in sessiele populaties onder de gesegmenteerde cuticula en in de lymfeklier. De lymfeklier is een klein hematopoëtisch orgaan aan de dorsale zijde van de larve. Clusters van hematopoëtische cellen, lobben genoemd, zijn segmentaal in paren gerangschikt langs het dorsale vat dat langs de anterior-posterior as van het dier loopt (Fig. 3A). Het vetlichaam is een groot multifunctioneel orgaan (Fig. 3B). Het scheidt antimicrobiële peptiden af als reactie op microbiële en metazoaire infecties.
Infectie door wespen activeert immuunsignalering (Fig. 4)4. Op cellulair niveau triggert dit de deling en differentiatie van bloedcellen. Als zelfverdediging ontwikkelen zich aggregaten en capsules in de hemocoel van geïnfecteerde dieren (Fig. 5)5,6. Geactiveerde bloedcellen migreren naar het wespenei (of de wespenlarve) en beginnen een capsule eromheen te vormen (Fig. 5A-F). Sommige bloedcellen aggregeren om noduli te vormen (Fig. 5G-H). Zorgvuldige analyse onthult dat infectie door wespen ervoor zorgt dat de meest anterieure lobben van de lymfeklier aan hun periferie uiteenvallen (Fig. 6C, D).
We presenteren representatieve gegevens met de Toll-signaaltransductiepadcomponenten Dorsal en Spätzle (Fig. 4,5,7), en het doelgen Drosomycin (Fig. 6), om te illustreren hoe specifieke veranderingen in de lymfeklier en hemocoel bestudeerd kunnen worden na infectie met wespen. De hier beschreven dissectieprotocollen leveren ook de wespeneieren (of ontwikkelingsstadia van wespen) op uit de hemolymfe van de gastheer (Fig. 8).

Sluipwesp (parasitaire) wespen vormen een belangrijke klasse van natuurlijke vijanden van veel insecten waaronder<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt;. We zullen de technieken om deze parasieten verspreiden in<em&gt; Drosophila</em&gt; Spp. en laten zien hoe ze hun effecten te analyseren op het immuunsysteem van weefsels van<em&gt; Drosophila</em&gt; Larven.

Een inleiding tot sluipwespen van<em&gt; Drosophila</em&gt; En de Antiparasite immuunrespons

De meeste bekende soorten parasitoïde wespen vallen de larvale of pupale stadia van Drosophila aan. Terwijl Trichopria drosophilae de pupale stadia van de gastheer infecteren (Fig. ...

De algemene doelstellingen van deze procedure zijn het aantonen hoe culturen van parasitoïde wespen op drosophila-gastheren kunnen worden onderhouden en hoe de lymfklier en het vetlichaam kunnen worden gedissecteerd. Dit wordt bereikt door eerst wespen op drosophila-larven te kweken. Vervolgens worden de dieren gedissecteerd om de lymfklieren van de larve te isoleren, wat inhoudt dat de cuticula wordt afgepeld en de vetlichamen en andere fijnere structuren worden verwijderd om de lymfklieren te isoleren.Hetzelfde geldt voor de vetlichamen zelf, die via een vergelijkbare procedure kunnen worden geïsoleerd met behulp van immunocytochemie en fluorescentiemicroscopie. Genexpressie en celspecifieke veranderingen worden gevisualiseerd in de immuunweefsels. Na besmetting met wespen bestuderen we een uniek systeem van infectie en immuniteit waarbij gebruik wordt gemaakt van de drosophila-gastheer en zijn parasitaire wesp.Ons laboratorium is een van de weinige waar levende culturen van drosophila-parasitoïden worden onderhouden. Daarom wordt ons vaak gevraagd onze technieken te delen. Parasitoïden zijn natuurlijke vijanden van veel insecten.De soorten die wij bestuderen, vallen de larvale s

an-introduction-to-parasitic-wasps-drosophila-antiparasite-immune

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Wolbachia bacteriële infectie in Drosophila

Fopius arisanus is een ei-larve-parasiet van Tephritid fruitvliegen die met succes wordt toegepast in de biologische bestrijding van deze belangrijke tropische ongedierte. We beschrijven hier een geoptimaliseerd protocol voor het kweken van F. arisanus op kleine schaal met behulp van gemakkelijk beschikbare materialen.

Een geoptimaliseerde protocol voor het kweken van Fopius arisanus, Een Parasitaire van Tephritid Fruit Flies

Om een ​​verband tussen de immuunrespons en gedrag te begrijpen, beschrijven we een methode om locomotorisch gedrag te meten...

Kwantitatieve meting van de immuunrespons en Sleep in<em&gt; Drosophila</em

Drosophila melanogaster is een uitstekend modelorganisme voor het bestuderen van aangeboren immuunsystemen en de fysiologische gevolgen van infectie en ziekte. Dit protocol beschrijft hoe robuuste en kwantitatief herhaalbare bacteriële infecties aan D. melanogaster kunnen worden toegediend, en hoe vervolgens de ernst van de infectie kan worden gemeten en de immuunrespons van de gastheer kan worden gekwantificeerd.

Systemische bacteriële infectie en afweer Phenotypes in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Deze methode laat zien hoe om te visualiseren pathogen invasie in insect cellen met driedimensionale (3D) modellen. Hemocytes van Drosophila larven waren besmet met virale of bacteriële pathogenen, ex vivo of in vivo. Besmette hemocytes werden vervolgens vast en gekleurd voor imaging met een confocal microscoop en de daaropvolgende 3D cellulaire wederopbouw.

Winning van Hemocytes van Drosophila melanogaster larven voor microbiële infectie en analyse

Dit protocol wordt beschreven methoden om mondeling bloot en de fruitvlieg Drosophila melanogaster met bacteriële pathogenen infecteren, en voor het meten van het aantal infectieuze bacteriën schuur na infectie van de darm. Verder beschrijven we het effect van immuun mutanten op vliegen overleving na mondelinge bacteriële infectie.

Mondelinge bacteriële infectie en Shedding bij Drosophila melanogaster

Dit protocol beschrijft een in vivo fagocytose assay in volwassen Drosophila melanogaster te kwantificeren fagocytensysteem erkenning en goedkeuring van de microbiële infecties.

Beoordeling van de cellulaire immuunrespons van de fruitvlieg, Drosophila melanogaster, met behulp van een In Vivo fagocytose Assay

Drosophila melanogaster volwassen vliegen zijn uitgebreid gebruikt als modelorganismen om de moleculaire mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan antimicrobiële aangeboren immuunresponsen van de gastheer en microbiële infectiestrategieën. Om het D. melanogaster larvestadium als aanvullend of alternatief modelsysteem te promoten, wordt een larvale injectietechniek beschreven.

Drosophila melanogaster Larva Injection Protocol

Ganaspis brasiliensis - een larvale parasitoïde van Drosophila suzukii (een wereldwijde invasieve fruitgewasplaag) - is goedgekeurd of wordt overwogen voor introductie in Europa en de Verenigde Staten voor biologische bestrijding van deze plaag. Dit artikel geeft protocollen voor zowel kleinschalige als grootschalige opfok van deze parasitoïde.

Methoden voor het fokken van de parasitoïde Ganaspis brasiliensis, een veelbelovend biologisch bestrijdingsmiddel voor de invasieve Drosophila suzukii

Het doel van dit protocol is het faciliteren van functionele analyse van parasitoïde-gastheerinteracties in Asobara japonica en Drosophila melanogaster. Door geoptimaliseerde kweekmethoden, een infectietest met één eicel en RNAi-gemedieerde gen-knockdown.

Protocollen voor efficiënte opvoeding en functionele analyse van de endoparasitoïde wesp Asobara japonica en haar gastheer Drosophila melanogaster

Leer hoe je sluipwespen kweekt op Drosophila-larven en immuunweefsels zoals lymfeklieren en vetlichamen dissecteert. Deze methode maakt visualisatie van genexpressie en immuunreacties mogelijk.

Een inleiding tot sluipwespen van

Meer video's verkennen