Name: Muismodel van chirurgisch geïnduceerde Endometriose door Auto-transplantatie van baarmoeder weefsel (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-06T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 2 s
Description: Leer een chirurgische methode om endometriose bij muizen te induceren door autotransplantatie van baarmoederweefsel naar het mesenterium. Dit model ondersteunt onderzoek naar ziektepathofysiologie en nieuwe behandelingen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Speciale dank aan Chris Kassotis en Audrey Bailey voor een kritische herziening van dit manuscript en aan Dr Scott Korte, Joseph Beeman, Alison Curfman, Paul Kimball, Bridget Neibreggue, Jacob Redel, Amy Schroder, Maija Steinberg, en Stacey Winkeler voor hun hulp bij optimalisatie van dit model in ons laboratorium. De financiering werd verstrekt door de Clinical Biodetectives Training Grant (NIH T90) (KEP), Universiteit van Missouri Life Sciences Undergraduate Research Opportunities Program, MU Research Council, MU Research Board subsidies en NIH R21HD056441 (SCN).

<ol><li>Simoens, S., Hummelshoj, L., D'Hooghe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometriosis%3A+cost+estimates+and+methodological+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod.+Update%22%5BJournal%5D)">Endometriosis: cost estimates and methodological perspective.</a> Hum. Reprod. Update. 13, 395-404 (2007).</li>
<li>Grummer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+endometriosis+research%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod.+Update%22%5BJournal%5D)">Animal models in endometriosis research.</a> Hum. Reprod. Update. 12, 641-649 (2006).</li>
<li>Vernon, M. W., Wilson, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+the+surgical+induction+of+endometriosis+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Studies on the surgical induction of endometriosis in the rat.</a> Fertil. Steril. 44, 684-694 (1985).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+endometriosis+in+mice%3A+a+new+model+sensitive+to+estrogen%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Induction of endometriosis in mice: a new model sensitive to estrogen.</a> Reprod. Toxicol. 9, 233-238 (1995).</li>
<li>Pelch, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aberrant+gene+expression+profile+in+a+mouse+model+of+endometriosis+mirrors+that+observed+in+women%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Aberrant gene expression profile in a mouse model of endometriosis mirrors that observed in women.</a> Fertil. Steril. 93, 1615-1627 (2010).</li>
<li>Flores, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+profiling+of+experimental+endometriosis+identified+gene+expression+patterns+in+common+with+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Molecular profiling of experimental endometriosis identified gene expression patterns in common with human disease.</a> Fertil. Steril. 87, 1180-1199 (2007).</li>
<li>Giudice, L. C., Kao, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Endometriosis.</a> Lancet. 364, 1789-1799 (2004).</li>
<li>Lin, Y. J., Lai, L. ei, Y, H., Wing, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophils+and+macrophages+promote+angiogenesis+in+the+early+stage+of+endometriosis+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Neutrophils and macrophages promote angiogenesis in the early stage of endometriosis in a mouse model.</a> Endocrinology. 147, 1278-1286 (2006).</li>
<li>Fang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intact+progesterone+receptors+are+essential+to+counteract+the+proliferative+effect+of+estradiol+in+a+genetically+engineered+mouse+model+of+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Intact progesterone receptors are essential to counteract the proliferative effect of estradiol in a genetically engineered mouse model of endometriosis.</a> Fertil. Steril. 82, 673-678 (2004).</li>
<li>Fang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+or+enzymatic+disruption+of+aromatase+inhibits+the+growth+of+ectopic+uterine+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">Genetic or enzymatic disruption of aromatase inhibits the growth of ectopic uterine tissue.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 87, 3460-3466 (2002).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L., Birnbaum, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Promotion+of+endometriosis+by+2%2C3%2C7%2C8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin+in+rats+and+mice%3A+time-dose+dependence+and+species+comparison%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Appl.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Promotion of endometriosis by 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin in rats and mice: time-dose dependence and species comparison.</a> Toxicol. Appl. Pharmacol. 138, 131-139 (1996).</li>
<li>Foster, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphologic+characteristics+of+endometriosis+in+the+mouse+model%3A+application+to+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Can.+J.+Physiol.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Morphologic characteristics of endometriosis in the mouse model: application to toxicology.</a> Can. J. Physiol. Pharmacol. 75, 1188-1196 (1997).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+surgically+induced+endometriosis+on+pregnancy+and+effect+of+pregnancy+and+lactation+on+endometriosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Soc.+Exp.+Biol.+Med%22%5BJournal%5D)">Effect of surgically induced endometriosis on pregnancy and effect of pregnancy and lactation on endometriosis in mice.</a> Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 212, 332-337 (1996).</li>
<li>Lu, Y., Nie, J., Liu, X., Zheng, Y., Guo, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trichostatin+A%2C+a+histone+deacetylase+inhibitor%2C+reduces+lesion+growth+and+hyperalgesia+in+experimentally+induced+endometriosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Trichostatin A, a histone deacetylase inhibitor, reduces lesion growth and hyperalgesia in experimentally induced endometriosis in mice.</a> Hum. Reprod. 25, 1014-1025 (2010).</li>
<li>Whitten, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+of+the+oestrous+cycle+of+the+mouse+by+external+stimuli+associated+with+the+male%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Modification of the oestrous cycle of the mouse by external stimuli associated with the male.</a> J. Endocrinol. 13, 399-404 (1956).</li>
<li>Whitten, W. K., Bronson, F. H., Greenstein, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrus-inducing+pheromone+of+male+mice%3A+transport+by+movement+of+air%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Estrus-inducing pheromone of male mice: transport by movement of air.</a> Science. 161, 584-585 (1968).</li>
<li>Goldman, J. M., Murr, A. S., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rodent+estrous+cycle%3A+characterization+of+vaginal+cytology+and+its+utility+in+toxicological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Birth.+Defects.+Res.+B.+Dev.+Reprod.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">The rodent estrous cycle: characterization of vaginal cytology and its utility in toxicological studies.</a> Birth. Defects. Res. B. Dev. Reprod. Toxicol. 80, 84-97 (2007).</li>
<li>Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+Rodent+Surgery+for+the+New+Surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.</a> J. Vis. Exp. (47), e2586-e2586 (2011).</li>
<li>Moen, M. H., Halvorsen, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histologic+confirmation+of+endometriosis+in+different+peritoneal+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Acta.+Obstet.+Gynecol.+Scand%22%5BJournal%5D)">Histologic confirmation of endometriosis in different peritoneal lesions.</a> Acta. Obstet. Gynecol. Scand. 71, 337-342 (1992).</li>
<li>Cummings, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methoxychlor+as+a+model+for+environmental+estrogens%5BTitle%5D)+AND+%22Crit.+Rev.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Methoxychlor as a model for environmental estrogens.</a> Crit. Rev. Toxicol. 27, 367-379 (1997).</li>
<li>Fowler, R. E., Edwards, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+superovulation+and+pregnancy+in+mature+mice+by+gonadotrophins%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Induction of superovulation and pregnancy in mature mice by gonadotrophins.</a> J. Endocrinol. 15, 374-384 (1957).</li>
<li>Wilson, E. D., Zarrow, M. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+superovulation+in+the+immature+mouse+and+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Reprod.+Fertil%22%5BJournal%5D)">Comparison of superovulation in the immature mouse and rat.</a> J. Reprod. Fertil. 3, 148-158 (1962).</li>
<li>Lee, B., Du, H., Taylor, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+murine+endometriosis+induces+DNA+methylation+and+altered+gene+expression+in+eutopic+endometrium%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Experimental murine endometriosis induces DNA methylation and altered gene expression in eutopic endometrium.</a> Biol. Reprod. 80, 79-85 (2009).</li>
<li>Somigliana, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometrial+ability+to+implant+in+ectopic+sites+can+be+prevented+by+interleukin-12+in+a+murine+model+of+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Endometrial ability to implant in ectopic sites can be prevented by interleukin-12 in a murine model of endometriosis.</a> Hum. Reprod. 14, 2944-2950 (1999).</li>
<li>Hirata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+experimental+model+of+endometriosis+using+mice+that+ubiquitously+express+green+fluorescent+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Development of an experimental model of endometriosis using mice that ubiquitously express green fluorescent protein.</a> Hum. Reprod. 20, 2092-2096 (2005).</li>
<li>Story, L., Kennedy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+studies+in+endometriosis%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Ilar.+J%22%5BJournal%5D)">Animal studies in endometriosis: a review.</a> Ilar. J. 45, 132-138 (2004).</li>
<li>Cummings, A. M., Hedge, J. M., Birnbaum, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+prenatal+exposure+to+TCDD+on+the+promotion+of+endometriotic+lesion+growth+by+TCDD+in+adult+female+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of prenatal exposure to TCDD on the promotion of endometriotic lesion growth by TCDD in adult female rats and mice.</a> Toxicol. Sci. 52, 45-49 (1999).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+estrogen%2C+progesterone%2C+and+methoxychlor+on+surgically+induced+endometriosis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Fundam.+Appl.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Effects of estrogen, progesterone, and methoxychlor on surgically induced endometriosis in rats.</a> Fundam. Appl. Toxicol. 27, 287-290 (1995).</li>
<li>Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometriotic+lesions+synthesize+and+secrete+a+haptoglobin-like+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Endometriotic lesions synthesize and secrete a haptoglobin-like protein.</a> Biol. Reprod. 58, 988-994 (1998).</li>
<li>Yavuz, E., Oktem, M., Esinler, I., Toru, S. A., Zeyneloglu, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genistein+causes+regression+of+endometriotic+implants+in+the+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Genistein causes regression of endometriotic implants in the rat model.</a> Fertil. Steril. 88, 1129-1134 (2007).</li>
<li>Dmitrieva, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocannabinoid+involvement+in+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Endocannabinoid involvement in endometriosis.</a> Pain. 151, 703-710 (2010).</li>
<li>Efstathiou, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsteroidal+antiinflammatory+drugs+differentially+suppress+endometriosis+in+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Nonsteroidal antiinflammatory drugs differentially suppress endometriosis in a murine model.</a> Fertil. Steril. 83, 171-181 (2005).</li>
<li>Becker, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endostatin+inhibits+the+growth+of+endometriotic+lesions+but+does+not+affect+fertility%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Endostatin inhibits the growth of endometriotic lesions but does not affect fertility.</a> Fertil. Steril. 84, Suppl 2. 1144-1155 (2005).</li>
<li>Becker, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+synthetic+endostatin+peptides+inhibit+endothelial+migration+in+vitro+and+endometriosis+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Short synthetic endostatin peptides inhibit endothelial migration in vitro and endometriosis in a mouse model.</a> Fertil. Steril. 85, 71-77 (2006).</li>
<li>Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+rats+as+a+research+model+for+the+study+of+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+N.Y.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Using rats as a research model for the study of endometriosis.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 955, 318-327 (2002).</li>
<li>Stilley, J. A., Woods-Marshall, R., Sutovsky, M., Sutovsky, P., Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+Fecundity+in+Female+Rats+with+Surgically+Induced+Endometriosis+and+in+Their+Daughters%3A+A+Potential+Role+for+Tissue+Inhibitors+of+Metalloproteinase+1%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Reduced Fecundity in Female Rats with Surgically Induced Endometriosis and in Their Daughters: A Potential Role for Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1.</a> Biol. Reprod. 80, (2009).</li>
</ol>

Geen belangenconflicten verklaard.

Er zijn een aantal kritische parameters die moet worden opgemerkt tijdens het uitvoeren van de chirurgische inductie van endometriose bij muizen. De eerste, endometriose is een oestrogeengevoelige ziekte en als zodanig deze operatie moeten worden uitgevoerd in intacte dieren of als alternatief in ovariëctomie dieren aangevuld met oestrogenen 20. Ten tweede moet hechten de endometriale biopsies om de arteriële cascade worden uitgevoerd met uiterste zorg. We hebben gevonden dat het gebruik van slechts twee rela...

<table border="1"><tbody><tr><td> Naam van het reagens / apparatuur </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogus nummer </td></tr><tr><td> Wax potlood </td><td> Visser </td><td> NC9954135 </td></tr><tr><td> Glasplaatje </td><td> Visser </td><td> 12-550-433 </td></tr><tr><td> Oogdruppelaar </td><td> Visser </td><td> S79383 </td></tr><tr><td> Standaard lichtmicroscoop voor het evalueren van vaginale cytologie uitstrijkjes </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Buprenorfine HCL c3 (CARJET) 10X1ml </td><td> Butler Animal Health Supply </td><td> 022891 </td></tr><tr><td> Steriele fosfaat gebufferde zoutoplossing (PBS) </td><td> Gibco </td><td> 14040-117 </td></tr><tr><td> 10000 U / ml penicilline, 10.000 ug / ml streptomycine in 0,85% NaCl </td><td> Hyclone </td><td> SV30010 </td></tr><tr><td> Isofluraan </td><td> AbbottAnimal Health </td><td> 05260-05 </td></tr><tr><td> Isofluraan non-rebreathing verdoving systeem </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Recirculerende warm water verwarming pad </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 30 ml spuit schede </td><td> Visser </td><td> 14 tot 823-16G </td></tr><tr><td> Poeder vrij steriele handschoenen </td><td> Fisherbrand </td><td> 19020558 </td></tr><tr><td> Oogzalf </td><td> Grote Pharmaceuticals </td><td> 10033691 </td></tr><tr><td> Kleine elektrische tondeuse </td><td> Wahl </td><td> 9861-600 </td></tr><tr><td> Chloorhexidine scrub </td><td> Visser </td><td> NC9863042 </td></tr><tr><td> 70% Ethanol </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Polylined steriel veld </td><td> Busse Ziekenhuis Disposables </td><td> 696 </td></tr><tr><td> Maat 3 scalpel </td><td> Visser </td><td> 22-079-657 </td></tr><tr><td> Nummer 10 scalpelmesjes </td><td> Visser </td><td> 22-079-681 </td></tr><tr><td> Kleine chirurgische schaar </td><td> Roboz </td><td> RS-5850 </td></tr><tr><td> Kleine getande semi-gebogen pincet </td><td> Roboz </td><td> RS-5135 </td></tr><tr><td> 5-0 zwart gevlochten zijden hechtdraad </td><td> Ethicon </td><td> K870H </td></tr><tr><td> Gesteriliseerd Pyrex-glazen petrischalen </td><td> Corning </td><td> 70160-101 </td></tr><tr><td> 2 mm biopsie punch </td><td> Miltex </td><td> 33-31 </td></tr><tr><td> Steriel gaas </td><td> Kendall </td><td> 1806 </td></tr><tr><td> 6-0 zwart monofilament ethilon nylon hechtdraad </td><td> Ethicon </td><td> 697G </td></tr><tr><td> Naald drivers (optioneel) </td><td> Wereld precisie-instrumenten </td><td> 500023 </td></tr><tr><td> 5-0 ongeverfde gevlochten gecoat vicryl hechtdraad </td><td> Ethicon </td><td> J490G </td></tr><tr><td> 9mm Autoclip wond clips </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427631 </td></tr><tr><td> Autoclip aanvrager &amp; remover </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427630 </td></tr><tr><td> 23G naald </td><td> Becton Dickinson </td><td> 305193 </td></tr><tr><td> 1cc spuit </td><td> Becton Dickson </td><td> 301025 </td></tr><tr><td> 5X vergrootglas (optioneel) </td><td> Visser </td><td> 14-648-23 </td></tr><tr><td> 10% gebufferde formaline </td><td> Visser </td><td> SF100-4 </td></tr><tr><td> Calipers </td><td> Roboz </td><td> RS-6466 </td></tr><tr><td> Verwerking / embedding cassettes </td><td> Visser </td><td> 15 tot 197-700A </td></tr><tr><td> Biopsie foam pads </td><td> Visser </td><td> 22-038-222 </td></tr><tr><td> RNAqueous RNA isolatie kit </td><td>Ambion </td><td> AM1912 </td></tr><tr><td> Vloeibare stikstof </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Snap cap microcentrifugebuis vlakke bovenbuis </td><td> Visser </td><td> 02-681-240 </td></tr><tr><td> Ketamine (optioneel) </td><td> Simga </td><td> K4138 </td></tr><tr><td> Domitor (medetomidine hydrochloride) (optioneel) </td><td> Tocris </td><td> 2023 </td></tr><tr><td> Antisedan (atipamezol) (optioneel) </td><td> Sigma </td><td> A9611 </td></tr></tbody></table>

muismodel van chirurgisch geïnduceerde endometriose door auto-transplantatie van baarmoeder weefsel

Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue

Endometriose is een chronische, pijnlijke ziekte waarvan de oorzaak blijft onbekend. Bovendien kan behandeling van endometriose moet laparoscopische verwijdering van de laesies, en / of chronische farmaceutische het beheer van de pijn en onvruchtbaarheid symptomen. De kosten verbonden aan endometriose wordt geschat op 22 miljard dollar per jaar in de Verenigde Staten 1. Om verdere ons begrip van de mechanismen die ten grondslag liggen aan deze raadselachtige ziekte, zijn diermodellen in dienst. Primaten spontaan ontwikkelen endometriose en daarom primaatmodellen het meest lijken op de ziekte bij vrouwen. Knaagdier modellen zijn echter meer kosteneffectieve en gemakkelijk beschikbaar 2. Het model dat we hier beschrijven betreft een autologe overdracht van de baarmoeder weefsel van de darm mesenterium (figuur 1) en werd voor het eerst ontwikkeld in de rat 3 en later overgebracht naar de muis 4. Het doel van de autologe knaagdier model van chirurgisch geïnduceerde endometriose is na te bootsen omde ziekte bij vrouwen. Wij en anderen hebben eerder aangetoond dat de veranderde genexpressie patroon dat in endometriose letsels van muizen of ratten spiegels die bij vrouwen waargenomen met de ziekte 5,6. Een voordeel van het uitvoeren van de operatie in de muis is dat de overvloed van transgene muizenstammen beschikbaar kan helpen onderzoekers bij het bepalen van de rol van specifieke componenten van belang bij de oprichting en groei van endometriose. Een alternatief model waarin weggesneden menselijke endometrium fragmenten maken kennis met het buikvlies van muizen immuun wordt ook veel gebruikt, maar wordt beperkt door het ontbreken van een normale immuunsysteem dat wordt gedacht dat belangrijk zijn in endometriose 2,7. Belangrijk is dat de muis model van chirurgisch geïnduceerde endometriose is een veelzijdig model dat is gebruikt om te bestuderen hoe het afweersysteem 8, hormonen 9,10 en omgevingsfactoren 11,12 endometriose, alsmede de gevolgen van endometriose op de Fert invloedafb reekbaarheid 13 en pijn 14.

Een beschrijving van de chirurgische inductie van endometriose bij muizen en ratten door auto-transplantatie van baarmoeder weefsel om de arteriële cascade van de intestinale mesenterium.

Muismodel van chirurgisch geïnduceerde Endometriose door Auto-transplantatie van baarmoeder weefsel

Endometriose is een chronische, pijnlijke ziekte waarvan de etiologie onbekend blijft. Bovendien kan de behandeling van endometriose een laparoscopische verwijdering van ... vereisen.

Het algemene doel van deze procedure is om chirurgisch endometriose te induceren bij muizen door autologe transfer van baarmoederweefsel naar de arteriële cascade van het mesenterium van de darm. Dit wordt bereikt door eerst het endometrium van de uterus af te binden, te verwijderen en bloot te leggen. De tweede stap van de procedure is het creëren van drie endometrioïde implantaten vanuit het blootgelegde endometrium met behulp van een biopsietang van twee millimeter.De derde stap van de procedure is het hechten van de drie endometrioïde implantaten aan slagaders in de arteriële cascade van het mesenterium van de darm. De laatste stap van de procedure is het sluiten van de buikwand en de huid, waarna het dier de tijd krijgt om de endometrioïde laesies te ontwikkelen. De uit de muizen geëxciteerde laesies vertonen gelijkenis met die van vrouwen met endometriose, zoals vastgesteld door histologische analyse en gen- en eiwitexpressiepatronen.Over het algemeen zullen personen die nieuw zijn met deze methode met drie belangrijke problemen kampen. Ten eerste zijn de weefsels van de muis simpelweg erg klein. Ten tweede is het mesenterium van de darm gemakkelijk te beschadigen en ten derde zullen hechtingen, indien te strak geplaatst, leiden tot darmnecrose.Begin met het verzamelen van alle benodigde chirurgische instrumenten voor een succesvolle aseptische operatie, inclusief oplossingen voor zowel analgesie als anesthesie. Nadat het dier is geanestheseerd met geïnhaleerd isofluraan, dient de volledige anesthesie te worden bevestigd door een negatieve respons op een knijpstimulus van de teen. Breng vervolgens oogzalf aan op de ogen om uitdroging tijdens de operatie te voorkomen en scheer de operatieplaats met een kleine tondeuse. Desinfecteer de operatieplaats met drie afwisselende veegbewegingen van een chloorhexidinescrub en 70% ethanol, en dek het dier vervolgens af met een steriel veld.Maak een kleine middenincisie met een klein schaartje of een scalpellamel, eindigend 0,5 tot 1,0 centimeter rostraal van de vaginale opening. Dissekeer de lichaamswand voorzichtig stomp van de buikwand om het sluiten van de operatiewond te vergemakkelijken. Maak na de stompe dissectie een kleine middenincisie in de buikwand.Lokaliseer vervolgens voorzichtig de linker uterushoorn met een kleine pincet. De uterus bevindt zich dorsaal van de darm, wat doorgaans het eerste is dat zichtbaar is bij het betreden van de incisieplaats; trek de uterushoorn voorzichtig omhoog en schuif een open pincet eronder om als retractor te dienen. Het is op dit moment ook nuttig om het uiterlijk van de ovaria en de uterus te noteren.Ter ondersteuning bij het bepalen van de datum van de oestruscyclus. Schuif stukken van zes tot acht centimeter van 5-0 zwart gevlochten zijden hechtdraad onder de uitgerekte uterine hoorn. Ligeer de hoorn stevig bij de overgang van de uterus naar de tuba uteri.Bind de eileider en de utero-cervicale overgang voorzichtig af. Gebruik op beide locaties een vierkante knoop en laat de uiteinden van de hechtdraad ondoorgesneden. Snijd het deel van de uterine hoorn tussen de twee ligaturen uit en plaats het weefsel in een glazen Petrischaal met ongeveer 100 µL PBS met penicilline en streptomycine.Knip als laatste de uiteinden van de zijden hechtdraad af. Als de hechting loslaat of er sprake is van bloedingen, zoek dan de stomp en knoop deze opnieuw vast met een kleine schaar. Verwijder het vet van de uterine hoorn.Open de uterinehoorn door één blad van een kleine schaar in het lumen in te brengen. Schuif de schaar voorzichtig naar beneden langs de uterinehoorn terwijl u de hoorn met een pincet vasthoudt. Snijd in de glazen petrischaal met een biopsiepons van twee millimeter drie gelijke implantaten uit. Zorg ervoor dat deze niet uitdrogen.Plaats steriel gaas direct boven de incisieplaats en maak dit grondig nat met steriele PBS die penicilline en streptomycine bevat. Het is belangrijk om tijdens de volgende stappen de hydratatie te behouden met kleine, gladde pincetten. Zoek voorzichtig het caecum en beweeg dit langzaam langs de dunne darm.Trek een klein stuk darm van vier tot vijf centimeter uit en leg dit waaiervormig op het vooraf bevochtigde gaas, zodat de arteriële cascade van het mesenterium clearly zichtbaar is. Zorg ervoor dat de darm te allen tijde vochtig wordt gehouden met steriele zoutoplossing. Plaats één implantaat op een naald en gebruik vervolgens een 6-0 zwarte nylon hechtdraad om het implantaat voorzichtig aan een arterie vast te zetten, ongeveer 0,5 centimeter van de darm.Gebruik er slechts één. Sla de hechting over de pincet heen en trek deze niet te strak aan, aangezien dit kan leiden tot een verminderde bloedtoevoer en daaropvolgende necrose van de darm.Maak twee knopen met één worp, trek elke knoop aan en trim de hechtdraad binnen twee millimeter van het implantaat, hydrateer de darm. Beweeg vervolgens in rostrale richting. Trek de volgende drie tot vier centimeter darm naar buiten en plaats het gedeelte dat al een implantaat bevat voorzichtig terug.Sla één of twee slagaders over vanaf de vorige implantatieplaats en hecht het volgende implantaat; herhaal dit voor het derde implantaat. Hecht tot slot de buikwand en sluit de huid met wondklemmen. Plaats het dier na het sluiten van de operatieplaats en het toedienen van analgetica met de buikzijde naar beneden in de kooi, gedeeltelijk op een recirculerend verwarmd waterkussen tot het dier is hersteld.Om de endometrioïde laesies te bergen, lokaliseer de zwarte hechtingen in het mesenterium van de darm. Meet de lengte en breedte van elke endometrioïde laesie met een schuifmaat. Dissekeer de endometrioïde laesies uit, waarbij u voorzichtig bent om ze niet te doorsteken.Verwijder elk niet-endometrioïd weefsel uit de laesie. Beweeg de drie vloeistofgevulde endometrioïde laesies heen en weer voordat de hechting wordt verwijderd. Verwijder voorzichtig de hechting en ponceer twee van de endometrioïde laesies.Weeg deze opnieuw voordat u overgaat tot de weefselverwerking. Exciteer vervolgens de resterende uterine hoorn en weeg deze; histologische analyse van endometriose bij zowel vrouwen als in het hier getoonde muismodel geeft aan dat de endometrioid laesie endometrale klieren en stroma bevat. Endometriotische laesies bij muizen bevatten ook hemosiderine-geladen macrofagen, wat een kenmerkend kenmerk is van endometriose bij vrouwen. Endometrioid laesies die drie dagen na inductie bij muizen zijn verwijderd, lijken ontstoken en hemorragisch, zoals links getoond, na twee tot vier weken groei.Endometriotische laesies in het muismodel zijn cyste-achtig, gevuld met vloeistof en omringd door peritoneale adhesies in vergelijking met het laesiegewicht bij inductie. Vloeistofgevulde laesies waren respectievelijk 306% en 862% groter en lance-laesies waren 51% en 172% groter één en twee maanden na inductie. Vloeistofgevulde en lad endometrioid laesie.De gewichten blijven consistent één maand na inductie over vijf verschillende experimenten waarbij deze procedure werd gevolgd. Dit model kan worden gebruikt om vragen over de pathofysiologie van endometriose te beantwoorden en om nieuwe therapeutische middelen te onderzoeken voor de behandeling van pijn en onvruchtbaarheid die met deze ziekte gepaard gaan.

mouse-model-surgically-induced-endometriosis-auto-transplantation

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

This video demonstrates the generation of a rabbit model of endometrial cancer by injecting a highly metastatic VX2 cell suspension into the sutured uterine horns of the rabbit. This leads to generation of primary endometrial cancer with retroperitoneal lymph node metastases.

Modeling Metastatic Endometrial Cancer  Model: A Technique to Generate Endometrial Cancer with Lymph Node Metastasis in Rabbit Models

Hier presenteren we een protocol voor live-imaging van fluorescently geëtiketteerde menselijke baarmoederslijmvlies fragmenten geënt in muizen. De methode kunt bestuderen van de gevolgen van de drugs van keuze voor endometriotic laesie grootte door middel van controle en kwantificering van de fluorescentie die wordt uitgestoten door de fluorescerende verslaggever op...

Noninvasive controle van de grootte van de laesie in een heteroloog muismodel van endometriose

Veel knaagdiermodellen van endometriose worden beperkt door technische complexiteit, reproduceerbaarheid en/of behoefte aan immuungecompromitteerde dieren of speciale reportermuizen. We presenteren een vereenvoudigd systeem van laesie-inductie met behulp van elke experimentele muis met een onafhankelijk verifieerbaar, objectief scoresysteem en zonder vereiste voor ovariëctomie of overlevingsoperaties.

Een syngeneïsch murinemodel van endometriose met natuurlijk fietsende muizen

Deze studie introduceert een nieuw muismodel dat speciaal is ontworpen om endometrioom te simuleren, een klinisch significant subtype van endometriose. Door gebruik te maken van C57BL/6J-muizen wil het model de pathofysiologische mechanismen die ten grondslag liggen aan endometrioomgerelateerde onvruchtbaarheid ophelderen en een verfijnd hulpmiddel bieden om de huidige kenniskloof in de reproductieve geneeskunde te overbruggen.

Oprichting van een experimenteel muismodel van endometrioom om de gerelateerde onvruchtbaarheid te bestuderen

Dit artikel beschrijft een gedetailleerd protocol voor het produceren van een betrouwbaar en reproduceerbaar dun baarmoederslijmvlies met een zeer laag sterftecijfer en minimale intra-uteriene verklevingen door binnen 1-3 minuten 95% ethanol in de baarmoeder van de muis te injecteren.

Een muismodel van dun endometrium opstellen

Dit protocol beschrijft een procedure voor het induceren van baarmoederbeschadiging in een muismodel, gevolgd door stroomafwaartse analyses tijdens een volgende zwangerschap.

Muismodel van chirurgisch baarmoederletsel en daaropvolgende zwangerschapsuitkomsten

De intraluminale cerebralis occlusie bij muizen wordt hierin gepresenteerd. De omvang van herseninfarct wordt beoordeeld door een neurologische score en cresyl violet kleuring, een kleuring met TTC alternatief biedt het grote voordeel te testen in parallel veel belang markers.

Muis Model van Intraluminale mCaO: herseninfarct Evaluatie door cresyl Violet Staining

Om onze kennis van cellulaire en moleculaire neotissue vorming te verbeteren, werd een muizenmodel van het TEVG recent ontwikkelde. De transplantaten werden geïmplanteerd infrarenale vena cava tussenvoeging enten in C57BL / 6 muizen. Dit model behaalt dezelfde resultaten als die bereikt bij onze klinische onderzoek, maar over een veel kortere tijd-cursus.

Implantatie van de vena cava inferior Interpositie Graft in muismodel

Om de cellulaire en moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen neotissue vorming en stenose ontwikkeling in tissue engineered hartkleppen begrijpen, een muizenmodel van heterotopische hartklep transplantatie werd ontwikkeld. Een pulmonale hartklep werd getransplanteerd naar ontvanger via de heterotopische harttransplantatie techniek.

Transplantatie van Pulmonary Valve een muis model van Heterotope Heart Transplantation

Hier beschrijven we een semi-invasieve optische microscopiebenadering voor het induceren van een Rose Bengal fototrombotrotisch stolsel in de somatosensorische cortex van een muis in vivo. De technische aspecten van de beeldvormingsprocedure worden beschreven, van de inductie van een fototrombotrotisch evenement tot de toepassing en gegevensverzameling.

Rose Bengal Photothrombosis door confocale Optical Imaging<em&gt; In Vivo</em&gt;: Een model van de Single Vessel Stroke

Leer een chirurgische methode om endometriose bij muizen te induceren door autotransplantatie van baarmoederweefsel naar het mesenterium. Dit model ondersteunt onderzoek naar ziektepathofysiologie en nieuwe behandelingen.

Muismodel van chirurgisch geïnduceerde Endometriose door Auto-transplantatie van baarmoeder weefsel

Meer video's verkennen