Name: Parasite Induced Genetisch Gedreven Auto Chagas hart-en vaatziekten in de Chicken Model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-29T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 23 s
Description: Ontdek de integratie van Trypanosoma cruzi kDNA in het kippengenoom en de ontwikkeling van Chagas-achtige hartziekte in nakomelingen. Dit model biedt nieuwe inzichten in de genetische mechanismen van de ziekte.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

We zijn dank verschuldigd aan Nancy R. Sturm, afdeling Immunologie, Microbiologie en Moleculaire Biologie, David Geffen School of Medicine, University of California in Los Angeles, voor kritische lezing van het manuscript. De Nationale Raad van Onderzoek-CNPq, en de Stichting voor Onderzoek en Ontwikkeling-FAPDF, Brazilië, ondersteund de studie. Wij danken de technische hulp van Alessandro O. Souza, Maria C. Guimaro, Ciro Cordeiro, Ana de Cassia Rosa, Roseneide Alves en Rafael Andrade, van de Universiteit van Brasilia, Brazilië.

<ol><li>Teixeira, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+chagas%27+disease%3A+parasite+persistence+and+autoimmunity%5BTitle%5D)+AND+%22CMR%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of chagas' disease: parasite persistence and autoimmunity.</a> CMR. 24, 592-630 (2011).</li>
<li>Teixeira, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chagas+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Postg.+Med.+J%22%5BJournal%5D)">Chagas disease.</a> Postg. Med. J. 82, 788-798 (2006).</li>
<li>Teixeira, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trypanosoma+cruzi+in+the+chicken+model%3A+Chagas-like+heart+disease+in+the+absence+of+parasitism%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Negl.+Trop.+Dis%22%5BJournal%5D)">Trypanosoma cruzi in the chicken model: Chagas-like heart disease in the absence of parasitism.</a> PLoS Negl. Trop. Dis. 5, e1000(2011).</li>
<li>Hecht, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inheritance+of+DNA+transferred+from+American+trypanosomes+to+human+hosts%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Inheritance of DNA transferred from American trypanosomes to human hosts.</a> PLoS One. 5, e9181(2010).</li>
<li>Xing, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roles+of+the+ERK+MAPK+in+the+regulation+of+proinflammatory+and+apoptotic+responses+in+chicken+macrophages+infected+with+H9N2+avian+influenza+virus%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gen.+Virol%22%5BJournal%5D)">Roles of the ERK MAPK in the regulation of proinflammatory and apoptotic responses in chicken macrophages infected with H9N2 avian influenza virus.</a> J. Gen. Virol. 91, 343-351 (2010).</li>
<li>Kim, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIK+and+IKKbeta+interdependence+in+NF-kappaB+signalling--flux+analysis+of+regulation+through+metabolites%5BTitle%5D)+AND+%22Biosystems%22%5BJournal%5D)">NIK and IKKbeta interdependence in NF-kappaB signalling--flux analysis of regulation through metabolites.</a> Biosystems. 99, 140-149 (2010).</li>
<li>Karakhanova, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ERK%2Fp38+MAP-kinases+and+PI3K+are+involved+in+the+differential+regulation+of+B7-H1+expression+in+DC+subsets%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">ERK/p38 MAP-kinases and PI3K are involved in the differential regulation of B7-H1 expression in DC subsets.</a> Eur. J. Immunol. 40, 254-266 (2010).</li>
<li>Finsterer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+heart+in+human+dystrophinopathies%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiology%22%5BJournal%5D)">The heart in human dystrophinopathies.</a> Cardiology. 99, 1-19 (2003).</li>
<li>Nitz, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heritable+integration+of+kDNA+minicircle+sequences+from+Trypanosoma+cruzi+into+the+avian+genome%3A+insights+into+human+Chagas+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Heritable integration of kDNA minicircle sequences from Trypanosoma cruzi into the avian genome: insights into human Chagas disease.</a> Cell. 118, 175-186 (2004).</li>
<li>Simpson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetoplast+DNA+in+trypanosomid+flagellates%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+Rev.+Cytol%22%5BJournal%5D)">Kinetoplast DNA in trypanosomid flagellates.</a> Int. Rev. Cytol. 99, 1-19 (1986).</li>
<li>Bonney, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heat-killed+Trypanosoma+cruzi+induces+acute+cardiac+damage+and+polyantigenic+autoimmunity%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Heat-killed Trypanosoma cruzi induces acute cardiac damage and polyantigenic autoimmunity.</a> PLoS One. 6, e14571(2011).</li>
<li>Moser, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+Trypanosoma+cruzi+by+DNA+amplification+using+the+polymerase+chain+reaction%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Detection of Trypanosoma cruzi by DNA amplification using the polymerase chain reaction.</a> J. Clin. Microbiol. 27, 1477-1482 (1989).</li>
<li>Sturm, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitive+detection+and+schizodeme+classification+of+Trypanosoma+cruzi+cells+by+amplification+of+kinetoplast+minicircle+DNA+sequences%3A+use+in+diagnosis+of+Chagas%27+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Biochem.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Sensitive detection and schizodeme classification of Trypanosoma cruzi cells by amplification of kinetoplast minicircle DNA sequences: use in diagnosis of Chagas' disease.</a> Mol. Biochem. Parasitol. 33, 205-214 (1989).</li>
<li>Teixeira, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+and+pathology+in+chagas+disease--a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Mem.+Inst.+Oswaldo+Cruz%22%5BJournal%5D)">Evolution and pathology in chagas disease--a review.</a> Mem. Inst. Oswaldo Cruz. 101, 463-491 (2006).</li>
<li>Yurchenko, V. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+Leishmania+minicircle+kinetoplast+DNA+classes%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Structure of Leishmania minicircle kinetoplast DNA classes.</a> J. Clin. Microbiol. 37, 1656-1657 (1999).</li>
<li>Simpson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genomic+organization+of+guide+RNA+genes+in+kinetoplastid+protozoa%3A+several+conundrums+and+their+solutions%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Biochem.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">The genomic organization of guide RNA genes in kinetoplastid protozoa: several conundrums and their solutions.</a> Mol. Biochem. Parasitol. 86, 133-141 (1997).</li>
<li>Thomas, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-universal+transcription+factor%3F+The+Leishmania+tarentolae+TATA+box-binding+protein+LtTBP+associates+with+a+subset+of+promoters%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">A non-universal transcription factor? The Leishmania tarentolae TATA box-binding protein LtTBP associates with a subset of promoters.</a> Int J. Parasitol. 36, 1217-1226 (2006).</li>
</ol>

Geen belangenconflicten verklaard.

In tegenstelling tot zoogdieren gevoelig voor een leven lang T. cruzi infecties, kippen niet reageren op T. cruzi-infectie. Het grote voordeel van de kip modelsysteem is de verwijdering van de infectie in de beginfase van de embryonale immuunsysteem. Aldus is de enige parasiet DNA dat in de kip lichaam opgenomen op verschillende loci. Het gebruik van de optimale hoeveelheid van virulent T. cruzi trypomastigotes te inoculeren vruchtbare ei is de belangrijkste stap naar het verkrijgen van de integratie van de kDNA minicircles in het kippenembryo genoom. Het tarief van de levende kuikens uitbroeden van eieren die geënt is met 100 trypomastigotes is vier keer hoger dan die verkregen met 500 parasieten. Er moet worden genomen om de parasieten suspensie inoculeren in 10 pi kweekmedium in het ei luchtkamer. Er mag geen lekkage van eiwit zijn. Onder optimale omstandigheden, de intracellulaire parasitaire infectie vindt plaats widunne een paar uur na incubatie en parasieten vermenigvuldigen in de gastheer cellen opbrengst voor een week, daarna de infectie wordt geëlimineerd door de aangeboren afweer. De kDNA integratie vereist een levende infectie, en de inoculatie van naakte minicircles in vroege embryo kippeneieren niet leidt tot integratie. De kDNA-positieve embryo&#39;s en controles moeten worden gehuisvest onder gecontroleerde omstandigheden bij 37,5 ° C en 65% luchtvochtigheid. De kuikens worden in kooien twee weken bij 33 ° C kamertemperatuur. Daarna worden de kippen worden gehouden in kooien op in zwevende rekken van elkaar gescheiden door 1.5 meter breedte gangpaden in een kamer bij 22 ° C met gefilterde lucht en positieve druk onder constante uitputting om het dierenwelzijn te scheppen. De volwassenen worden gevoed kip-chow en drink drinkbaar stromend water tot volle wasdom en volwassenheid te bereiken, eieren leggen op vijf maanden oud. Onderhoud van hygiënische procedures zijn essentieel voor de reproduceerbaarheid van de resultaten bij het ​​werken met T. cruzi ingeëntin vruchtbare kippeneieren. In de kip modelsysteem T. cruzi infecties worden uitgeroeid na de ontwikkeling van het immuunsysteem in de vroege periode van embryo groei. Bovendien aan zijn infectie zijn, mogen de kuikens die uitkomen van T. cruzi geënte eieren, in een gebrek aan specifieke antilichamen, tolerant zijn tegen de parasiet antigenen. De afwijzing van het doel hartcellen door cytotoxische lymfocyten (minimaal afwijzing eenheid, figuur 3) is te zien in de kDNA-gemuteerde kippen met genotype wijzigingen en afbraak van de immunologische bewaking 3. De genotypisch gemodificeerd T-cellen aanwezig versnelde verworpen zelf weefsels in het lichaam. De belangrijkste laesie site is het hart, dat is een kenmerk van de ziekte van Chagas. De overgang van een fysiologische (surveillance) om een fysiopathologische staat wordt gezien in de kDNA-gemuteerde kip met klonaal proliferatie van cytotoxische lymfocyten 3. Tzijn transkingdom model systeem toont een parasiet veroorzaakte, genetisch aangedreven auto-immuunziekte (Figuur 6), die voortvloeien uit genoom wijzigingen door de T. cruzi kDNA minicircle integraties. Deze wijzigingen worden niet gezien in kuikens uitgebroed uit Lb-geïnoculeerde eieren. Dit fenomeen duidt erop dat de experimentele behandeling van de auto-immune inflammatoire cardiomyopathie in kDNA-gemuteerde kippen kunnen drug onderdrukking van beenmerg van specifieke T-cel fenotype te infiltreren in de hartspier en transplantatie van histocompatible gezond beenmerg nodig hebben om de afwijzing van zelf-weefsel te voorkomen.

<table border="1"><tbody><tr><td> Naam van het serum </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogusnummer </td><td> Reacties </td></tr><tr><td> Taq DNA Polymerase Recombinant </td><td> Invitrogen </td><td> 11615-010 </td><td></td></tr><tr><td> Platina Taq DNA Polymerase </td><td> Invitrogen </td><td> 10966-030 </td><td></td></tr><tr><td> Willekeurige Primers DNA Labeling System </td><td> Invitrogen </td><td> 18187-013 </td><td></td></tr><tr><td> EcoRI </td><td> Invitrogen </td><td> 15202-021 </td><td></td></tr><tr><td> Mbo I </td><td> Invitrogen </td><td> 15248-016 </td><td></td></tr><tr><td> dNTP Set, 100mm Solutions </td><td&gt; GE Healthcare </td><td> 28-4065-51 </td><td></td></tr><tr><td> Amersham Hybond - N + - Cat n. </td><td> GE Healthcare </td><td> RPN303B </td><td></td></tr><tr><td> PlasmidPrep Mini Spin kit </td><td> GE Healthcare </td><td> 28-9042-70 </td><td></td></tr><tr><td> Nsi I </td><td> SIGMA-ALDRICH </td><td> R5884 1KU </td><td></td></tr><tr><td> DNA, Sodium Salt Fish Sperma </td><td> AMRESCO </td><td> 0644-10G </td><td></td></tr><tr><td> Muis anti-kip Bu-1b </td><td> SouthernBiotech </td><td> 8370-02 </td><td></td></tr><tr><td> Muis anti-kip CD45 </td><td> SouthernBiotech </td><td> 8270-08 </td><td></td></tr><tr><td>Muis anti-kip TCRγδ </td><td> SouthernBiotech </td><td> 8230-08 </td><td></td></tr><tr><td> Muis anti-kip CD8α </td><td> SouthernBiotech </td><td> 9220-02 </td><td></td></tr><tr><td> Muis anti-kip monocyt / macrofagen </td><td> SouthernBiotech </td><td> 8420-02 </td><td></td></tr><tr><td> MyCycle Termocycler </td><td> Bio-Rad Laboratories </td><td> 580BR 5501 </td><td></td></tr></tbody></table>

parasite induced genetisch gedreven auto chagas hart-en vaatziekten in de chicken model

Parasite Induced Genetically Driven Autoimmune Chagas Heart Disease in the Chicken Model

De Trypanosoma cruzi acute infecties die in de kindertijd lijken asymptomatisch, maar ongeveer een derde van de chronisch geïnfecteerd gevallen blijkt de ziekte van Chagas tot drie jaar of later. Auto-immuniteit en parasieten doorzettingsvermogen zijn concurrerende theorieën om de pathogenese van de ziekte van Chagas 1, 2 uit te leggen. Om verschillende rollen gespeeld door parasiet persistentie en auto-immuniteit in de ziekte van Chagas we inoculeren de T. cruzi in de luchtkamer van bevruchte eieren. De volwassen kip immuunsysteem is een strakke biologische barrière tegen T. cruzi en de infectie wordt vernietigd bij ontwikkeling van het immuunsysteem door het einde van de eerste week groei 3. De kuikens zijn parasiet vrij bij het uitkomen, maar ze behouden geïntegreerd parasiet mitochondriaal DNA kinetoplast (kDNA) minicircle in hun genoom worden overgebracht naar hun nageslacht. Documentatie van de kDNA minicircle integratie in de kip genoom werd verkregen door een Targeted prime TAIL-PCR, Southern hybridisaties, klonen, en sequencing 3, 4. De kDNA minicircle integraties scheuren open reading frames voor transcriptie en immuunsysteem factoren, fosfatase (GTPase), adenylaatcyclase en phosphorylases (PKC, NF-kappa B activator, PI-3K) geassocieerd met cel-fysiologie, groei en differentiatie 3, 5 - 7 en genfuncties. Ernstige myocarditis als gevolg van afwijzing van target heart vezels door effectoren cytotoxische lymfocyten is te zien in de kDNA gemuteerde kippen, met een inflammatoire cardiomyopathie vergelijkbaar met dat bij de mens de ziekte van Chagas. Met name hartfalen en spierzwakte aanwezig zijn bij volwassen kippen met kDNA breuk van het dystrofine-gen op chromosoom 1 8. Vergelijkbare genotipic wijzigingen worden geassocieerd met weefselvernietiging uitgevoerd door effectoren CD45 +, CD8γδ +, CD8α lymfocyten. Dus deze protozoaire infectie kan induceren genetisch gestuurde auto-immuunziekte.

De inenting van<em&gt; Trypanosoma cruzi</em&gt; In vruchtbare eieren voor incubatie maakt de parasiet kDNA integratie minicircle in cellen van embryo&#39;s genoom. Kruisen toont de verticale verplaatsing van de mutaties nakomelingen. De kDNA integreert in coderende gebieden op verschillende chromosomen en de kippen sterven met een inflammatoire auto-hart-en vaatziekten.

Parasite Induced Genetisch Gedreven Auto Chagas hart-en vaatziekten in de Chicken Model

De acute Trypanosoma cruzi-infecties die op baby- en kinderleeftijd worden opgelopen, lijken asymptomatisch, maar bij ongeveer een derde van de chronisch geïnfecteerde gevallen ...

De ziekte van Cha is de klinische toestand die volgt op chronische infecties door ate prot en tno mausi. De ziekte tast het hart van chronisch geïnfecteerde personen aan, meerdere decennia na het oplopen van de infecties. Een model-systeem over verschillende koninkrijken heen laat zien dat kippeneieren vatbaar zijn voor Taz macro cruise-infecties.Tijdens de eerste week van de embryonale groei laten de experimenten zien dat infectievrije kippen de parasiet KA in hun genomen behouden en sterven aan de ziekte van Chagas (hartfalen); uitstekende huisvesting, voedsel- en watervoorziening waarborgen het dierenwelzijn. De cruise triple mass, goede zwemvormen worden verkregen uit weefselkweek. Transillumineer voor tio en eieren om hun bellencontrole aan te tonen.Eieren ontvangen geen para-inoculatie. Mock-controle-eieren worden geïnoculeerd met 10 µL kweekmedium. Het gat wordt afgedicht met essive-tape 100 virale FL mania.Brazilians is pro master. Geiten inoculeren de luchtkamer van bevruchte kippeneieren met 100 virale en vangen macro triple master geiten in 10 µL calciummedium die de luchtkamer van bevruchte kippeneieren inoculeren. De eieren worden geïncubeerd bij 37 °C bij 65% luchtvochtigheid gedurende één tot tien dagen met een zachte rotatie elke 30 minuten; de kuikens komen gelijkmatig uit de renoso macro geïnoculeerde eieren en uit de mark-controles.De vissen groeien door tot de volwassen fase. Bloedmonsters worden afgenomen uit de vleugeladers. Het bloed wordt overgebracht naar 15 Ml conische buizen.Mononucleaire cellen worden gescheiden door centrifugatie met een FICO-gradiënt; was de witte cellenlaag af en gooi de scheidingslaag weg. Medium genomisch DNA wordt geëxtraheerd uit mononucleaire bloedcellen. Gebruik 1,5 ml conische buizen in overeenstemming met het PCR-ontwerp. De PCR wordt uitgevoerd om chroy nucleair G-N-A-N-G-N-A en pls GNA kg NA te amplificeren. Gebruik specifieke primer-sets en plaats de reactiebuizen in de thermocycler voor de run.Haal de buisjes uit de thermocycler. Analyseer de PCR-producten. De PCR-producten worden gescheiden via agarose-gelelektroforese.De GNA-banden in de gel worden overgebracht naar een positief geladen nylonmembraan. Hybridisatie vindt plaats met specifieke radioactief gelabelde probes om de onafhankelijke rollen van parasitaire persistentie en immuunrespons te scheiden. Bij de pathogenese van de ziekte van Chagas gebruiken we een kippenmodel dat refractair is voor TNO cruise-infectie, behalve tijdens de vroege embryonale groei voorafgaand aan de ontwikkeling van het immuunsysteem; de kuikens die uit met TNO cruise geinoculeerde eieren komen, zijn vrij van infectie, maar het mitochondriale AKG A van de parasiet blijft in het lichaam behouden.Alleen kuikens die uit tzo-macro-geïnoculeerde eieren komen, vertonen kg a-banden, terwijl dit DNA niet aanwezig is in het kippen内部genoom. Kuikens die uit eieren komen die zijn geïnoculeerd met pro-master-geiten van Leia Brazilian, behouden de mitochondriale cirkelsequenties niet in hun genomen. Baan één blanco, baan twee controle GNA, banen drie en vier mock GS, banen vijf tot 14 GS van kuikens die uit Las mania Brazilian-geïnfecteerde eieren komen.Baan 15 toont de ampliconband van 750 basenparen van las mania Brazil, verkregen met LB drie en LB vijf specifieke KDNA-primerets. De L-P-C-R-A checkerboard-scan beeldt de gallus guns-primers uit die werden ingezet na drie cycli van amplificatie met een oplopende temperatuur-walking nest. PCR is uitgevoerd met verschillende KDNA PRI-sets.De cyclus met lage strengentie creëert sites voor priming en annealing, gevolgd door een cyclus met hoge strengentie. Dit verhoogt de specificiteit van de amplificatieproducten. De PCR-producten van de beperkte amplificatie die hybrideerden met de KA-probe werden commercieel gekloneerd en gesequentieerd.De sequentie toont de kg NA in blauwe cirkel, de intermediate microhomologie recombinatie-junction in geel en de gallo ga GNA in groen. De mapping van de kg NA die in het kippenroom geïntegreerd is, wordt bepaald door middel van een target primer type PCR R TP therapy PCR-techniek. De Cajun, een gemuteerde volwassen kip, ontwikkelde de ziekte van Chagas aan het hart.De controles groeiden verder tot een gezond leven. De KDNA-gemuteerde kippen vertonen een vergroot hartsilhouet op röntgenfoto's. De necropsie laat zien dat de controlekippen een kleine hartomvang hebben.De Cajun, een gemuteerde kip, vertoont hydropericardium, hydrotox en een vergroot hart. De cardiomegalie is vergelijkbaar met die bij de ziekte van Chagas. Het door Moog gecontroleerde kippenhart vertoont een normale histologie.De kg gemuteerde kip vertoont een tunnel in het myocardium, veroorzaakt door cytotoxische lymfocyten die de hartvezels aantasten. De sequenties van aian-cirkels die integreren in coderende regio's op verschillende chromosomen worden onthuld door middel van een aangepaste nested type PCR, waarbij kg NA-primers worden gecombineerd met gastheer-GNA-specifieke primer-sets. GNA gemuteerde kippen sterven aan hartfalen en vertonen cardiomegalie.De microscopische pathologie toont myocarditis die lijkt op de myocarditis bij de ziekte van Chagas, met een vertrokken hart. In kg NA gemuteerde kippen is dit een genetisch gedreven ziekte. Dit is de eerste keer dat de klinische en pathologische manifestaties van de ziekte van Chagas worden gereproduceerd in een schoon cross-kingdom modelsysteem.Dank u wel.

parasite-induced-genetically-driven-autoimmune-chagas-heart-disease

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

This video demonstrates the procedure of intravenously injecting cancer cells into the chicken chorioallantoic membrane vasculature to generate a CAM cancer metastasis model. The injected cells eventually form scattered single-cancer cell colonies, allowing for the study of cancer invasion and metastasis.

Intravenous Injection of Cancer Cells into Chicken Chorioallantoic Membrane Vasculature: A Procedure to Establish Chorioallantoic Membrane Cancer Model to Study Cancer Invasion and Metastasis

In dit protocol, fluorescently geëtiketteerde T. cruzi werden ingespoten in transparante zebrafish larven en de beweeglijkheid van de parasiet werd waargenomen in vivo met licht blad fluorescentie microscopie.

Oprichting van larvale zebravis als Model van een dier te onderzoeken Trypanosoma cruzi Motility In Vivo

De Trypanosoma cruzi agent van de ziekte van Chagas produceert langdurig asymptomatische infecties die abrupt tot klinisch erkende pathologie uitgroeien. Het volgende onderzoeksprotocol beschrijft een short-run programma gezinsgerichte epidemiologische studie om te ontrafelen de T. cruzi infectie van bovenliggende seksueel overgedragen aan nakomelingen.

Seksuele transmissie van Amerikaanse trypanosomen van mannetjes en vrouwtjes te naïeve Mates

Uitgezaaid helder celnieraal celcarcinomis is een ziekte zonder een uitgebreid diermodel voor grondig preklinisch onderzoek. Dit protocol illustreert twee nieuwe diermodellen voor de ziekte: het orthotopicalisch geïmplanteerde muismodel en het kipchorioallantoïsche membraanmodel, die beide longmetastasen aantonen die lijken op klinische gevallen.

Vergelijking van uitgezaaide Clear Cell Renal Cell Carcinoma Model opgericht in muisnier en op Kip Chorioallantoic Membraan

Hier hebben we een methode om stabiele transfection van kip Eimeria parasieten te bereiken door nucleofecting sporozoites of tweede generatie merozoiten. Genetisch gemodificeerde eimerian parasieten die heterologe antigene genen uitdrukken, kunnen worden gebruikt als vaccinleveringsvoertuigen.

Nucleofection en in Vivo propagatie van kippeneimeria parasieten

We presenteren het kipchorioallantoïsche membraanmodel als een alternatief, transplanteerbaar, in vivo model voor de engraftment van gynaecologische en urologische kankercellijnen en tumoren die door de patiënt zijn afgeleid.

Met behulp van de Chicken Chorioallantoic Membrane In Vivo Model om gynaecologische en urologische kankers studie

Kippenembryo's, als klassiek ontwikkelingsmodel, worden in ons lab gebruikt om ontwikkelingscarditoxiciteiten te beoordelen na blootstelling aan verschillende milieuverontreinigingen. Blootstellingsmethoden en vastgestelde morfologische/functionele beoordelingsmethoden worden in dit manuscript beschreven.

Kipembryo gebruiken als een krachtig hulpmiddel bij de beoordeling van ontwikkelingscarditoxiciteiten

We beschrijven een high-throughput colorimetrische test die β-galactosidase-activiteit meet in drie levenscyclusstadia van Trypanosoma cruzi, de veroorzaker van de ziekte van Chagas. Deze test kan worden gebruikt om trypanocidale verbindingen op een eenvoudige, snelle en reproduceerbare manier te identificeren.

In vitro Drugsscreening tegen alle levenscyclusstadia van Trypanosoma cruzi met behulp van parasieten die β-galactosidase tot expressie brengen

Het hier verstrekte protocol beschrijft de gedetailleerde stappen om onderzoeken naar de werkzaamheid van geneesmiddelen uit te voeren in een bioluminescent model van Trypanosoma cruzi-infectie , met een focus op gegevensverzameling, -analyse en -interpretatie. Er zijn ook procedures voor probleemoplossing en kwaliteitscontrole om technische problemen tot een minimum te beperken.

Demystificerende in vivo bioluminescentiebeeldvorming van een muismodel van de ziekte van Chagas voor onderzoeken naar de werkzaamheid van geneesmiddelen

Deze video laat zien hoe u auto-immune hypophysitis induceren in SJL muizen en hoe u de ernst ervan te beoordelen door de histopathologie.

Inductie van experimentele auto-immune Hypophysitis in SJL Muizen

Ontdek de integratie van Trypanosoma cruzi kDNA in het kippengenoom en de ontwikkeling van Chagas-achtige hartziekte in nakomelingen. Dit model biedt nieuwe inzichten in de genetische mechanismen van de ziekte.

Parasite Induced Genetisch Gedreven Auto Chagas hart-en vaatziekten in de Chicken Model

Meer video's verkennen