Name: Protocol voor Long Duration Whole Body Hyperthermie in Muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-08-25T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 10 s
Description: Leer een gestandaardiseerd protocol voor langdurige gehele lichaamshyperthermie bij muizen om koortslige toestanden gedurende 12-24 uur te induceren. Deze methode ondersteunt onderzoek naar fysiologische responsen en immuunmechanismen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. Animal Ethics Voor het uitvoeren van de lange duur hyperthermie op muizen ervoor te zorgen dat de procedure is goedgekeurd door Institutional Animal Care en gebruik Comite. Alle procedures die in dit document en in de bijbehorende video werd goedgekeurd door de Institutional Animal Ethics Committee van het National Institute of Immunology. 2. Inzicht Hyperthermie Whole Body Hyperthermie (WBH) wordt geleverd door het plaatsen van de dieren in voorverwarmde kooien die in incubator geplaatst gehandhaafd op 39,5 ° C. Tijdens de standaardisatie van protocol werd een temperatuursensor chirurgisch geïmplanteerd in muizen en hun lichaamstemperatuur werd gevolgd in verschillende experimentele condities. Er werd waargenomen dat bij het ​​plaatsen van de dieren verwarmde omgeving, geleidelijk de temperatuur steeg van 37 ° C tot maximaal 42 ° C voor de duur van 100 min (figuur 1). The resulterende &quot;spike&quot; in de temperatuur is intrigerend als de interne lichaamstemperatuur schoot zelfs hoger dan de externe milieu-temperatuur. Wanneer het lichaam 40 ° C overschreden, zou het dier tekenen van stress en uitdroging zoals bevochtigingsmiddelen rond de snuit. Verhoog de lichaamstemperatuur boven 40 ° C, zal leiden tot bevochtiging en onomkeerbare stress of zelfs de dood van dieren door hittestress. Dus is het belangrijk te voorkomen dat de temperatuur spikes in de loop van hyperthermie. Dit fenomeen van hoge temperatuur spikes wordt geassocieerd met hyperactiviteit van de fysieke dier tijdens hyperthermie blootstelling. Vergelijkbare temperatuur spikes werden waargenomen door andere groepen ook en werden in verband gebracht met de fysieke hyperactiviteit van het dier na te zijn voorgesteld aan omgeving met hogere temperaturen 10. In ons protocol worden muizen geïmmobiliseerd tijdens de hyperthermie belichting. Alsgetoond in figuur 2, immobilisatie van dieren voorkomt dat de temperatuur spikes. We hebben gebruik gemaakt 8-12 weken oude Balb / Cj muizen voor het aantonen van dit protocol. Het protocol is niet beperkt tot een bepaald type / stam van de muizen. 3. Voorbereiding op het Experiment 3,1 Incubator Dit experiment kan worden uitgevoerd in een normale CO 2 incubator omdat ze een goede temperatuurregeling. Ontkoppel CO 2 gas los en verwijder het water houden lade van de CO 2 incubator. In sommige modellen van incubators is het mogelijk om het uitschakelen van de CO 2-controller. Schik schappen van de incubator, zodat een muizen kooi kan gemakkelijk binnen worden geplaatst. Stel de temperatuur van de incubator bij 39,5 ° C. 3,2 Kooien Typisch wordt de hyperthermie experiment uitgevoerd op 4 muizen per keer. Twee kooien nodig, aane wordt geplaatst in de incubator en de ander buiten geplaatst bij kamertemperatuur. Beddengoed kooien vermeden, als de vlakjes van beddengoed nat met de tijd waardoor ongelijkmatige temperatuur in de kooi. De buitenkant kooi moet voedsel pellets en waterfles. 3,3 Muizen immobilisatie buizen Tijdens eerste 4 cycli van hyperthermie muizen geïmmobiliseerd in geperforeerde buizen. Deze immobilisatie buizen worden gemaakt van 50 ml &quot;centrifuge&quot; buizen door piercing 3 mm gaten over zijn hele lichaam en vier van dergelijke buizen is vereist. De 50 ml buis kan gemakkelijk immobiliseren BALB / Cj muizen die ouder zijn dan 8 weken. Buizen van geschikte afmetingen nodig zijn voor sommige ongebruikelijk andere stam van muizen of muizen die zeer jong of ouder dan 50 weken. Place immobilisatie buizen en een kooi in de incubator gehouden bij 39,5 ° C. Wacht ten minste 2 uur, zodat de kooi immobilization buizen bereikt de temperatuur van de incubator. 4. Eerste cyclus van de hyperthermie Muizen kunnen ervaren uitdroging tijdens de hyperthermie belichting. Daarom voor het begin van het experiment, beheren 0,5 ml normale fysiologische zoutoplossing intraperitoneaal aan elke muis. Gebruik een 26 G naald met 1 ml spuit. Snel af met de kooi geplaatst in de incubator, plaats een dier in elk immobilisatie buizen en plaats de kooi terug in de incubator. Noteer de tijd. Het is essentieel om de kooi te houden op dezelfde plaats in de incubator elke keer. Na 90 min, neem de kooi uit de incubator. Laat dieren uit de immobilisatie buizen en plaats ze in de kooi bij normale temperatuur met gemakkelijke toegang tot voedsel en water. Terug te plaatsen lege immobilisatie buizen in de incubator. Na 15 min wordt de tweede cyclus van hyperthermie gestart door het leveren 0.5 ml zoutoplossing intraperitoneaal toegediend aan elke muis. Ze worden vervolgens geïmmobiliseerd in 50 ml geperforeerde buizen immobilisatie en in de incubator. 5. Latere Hyperthermie Cycles Voor de eerste 4 cycli, is het essentieel om te immobiliseren muizen tijdens de hyperthermie blootstellingsroute en voor de eerste twee cycli, wordt zoutoplossing gegeven voor het begin van de hyperthermie periode. Na deze cycli van hyperthermie gevolgd door rust zijn voltooid, muizen krijgen acclimatiseren en niet hyperactief worden tijdens de hyperthermie belichting. De intraperitoneale injectie van zoutoplossing niet nodig als muizen gemakkelijk voedsel en water tijdens de rusttijd. 6. Na alle cycli voltooid, de laatste stap is het onderzoeken van de Dieren Er enige dood niet tijdens de hyperthermie cycli. Elk dier moet zeer zorgvuldig worden bekeken in het eerstecycli. Snel zoeken naar eventuele bevochtiging rond de snuit. Dit symptoom is een handtekening van uitdroging. Muizen met dergelijke symptomen te worden gegeven onmiddellijk 0,5 ml normale zoutoplossing ip en rust bij kamertemperatuur. Het grootste deel van de geïmmobiliseerde muizen vergt geen specifieke extra zorg en met succes dragen de stress van de hyperthermie. Na het voltooien van benodigde cycli, kunnen dieren kijken zwak en uitgedroogd, maar ze zullen snel herstellen binnen enkele uren. <img src="/files/ftp_upload/3801/3801fig1.jpg" alt="Figuur 1" /> Figuur 1. Variatie van de kerntemperatuur van muizen wanneer de kooi werd in een incubator bij 39,5 ° C. Na 90 min werd de kooi uit de incubator en geplaatst bij 25 ° C. Rode cirkels geven aan hoge temperatuur spikes. <img src="/files/ftp_upload/3801/3801fig2.jpg" alt="Figuur 2" /> Figuur 2. Variatie van de kerntemperatuur van het lichaam temperatuopnieuw van een geïmmobiliseerd muizen tijdens de hyperthermie cycli. Na het immobiliseren van het dier werden hoge temperaturen spikes niet aan wanneer de kooi werd geplaatst bij 39,5 ° C.

<ol><li>Braude, A. I., Beck, J., Zalesky, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Febrile+response+to+bacterial+pyrogens+in+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Febrile response to bacterial pyrogens in leukemia.</a> Blood. 16, 1279(1960).</li>
<li>Dovern, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperthermic+intraperitoneal+chemotherapy+added+to+the+treatment+of+ovarian+cancer.+A+review+of+achieved+results+and+complications%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Gynaecol.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Hyperthermic intraperitoneal chemotherapy added to the treatment of ovarian cancer. A review of achieved results and complications.</a> Eur. J. Gynaecol. Oncol. 31, 256(2010).</li>
<li>Gaworek, J., Mayer, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+whole+body+hyperthermia+in+oncology%3A+fatal+heat+for+tumor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Pflege.+Z%22%5BJournal%5D)">Systemic whole body hyperthermia in oncology: fatal heat for tumor cells.</a> Pflege. Z. 56, 15(2003).</li>
<li>Hegewisch-Becker, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+whole+body+hyperthermia+%2841.8+degrees+C%29+on+the+frequency+of+tumor+cells+in+the+peripheral+blood+of+patients+with+advanced+malignancies%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of whole body hyperthermia (41.8 degrees C) on the frequency of tumor cells in the peripheral blood of patients with advanced malignancies.</a> Clin. Cancer Res. 9, 2079( ).</li>
<li>Jia, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+B16+murine+melanoma+metastasis+and+enhancement+of+immunity+by+fever-range+whole+body+hyperthermia%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Inhibition of B16 murine melanoma metastasis and enhancement of immunity by fever-range whole body hyperthermia.</a> Int. J. Hyperthermia. 27, 275(2011).</li>
<li>Maluta, S., Dall'oglio, S., Nadalini, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+for+intermediate+and+high-risk+prostate+cancer%3A+controversial+issues+and+the+role+of+hyperthermia%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Treatment for intermediate and high-risk prostate cancer: controversial issues and the role of hyperthermia.</a> Int. J. Hyperthermia. 26, 765(2010).</li>
<li>Moyer, H. R., Delman, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+hyperthermia+in+optimizing+tumor+response+to+regional+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">The role of hyperthermia in optimizing tumor response to regional therapy.</a> Int. J. Hyperthermia. 24, 251(2008).</li>
<li>Muthana, M., Multhoff, G., Pockley, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumour+infiltrating+host+cells+and+their+significance+for+hyperthermia%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Tumour infiltrating host cells and their significance for hyperthermia.</a> Int. J. Hyperthermia. 26, 247(2010).</li>
<li>Ostberg, J. R., Repasky, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+effects+of+two+different+whole+body+hyperthermia+protocols+on+the+distribution+of+murine+leukocyte+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Comparison of the effects of two different whole body hyperthermia protocols on the distribution of murine leukocyte populations.</a> Int. J. Hyperthermia. 16, 29(2000).</li>
<li>Pritchard, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocols+for+simulating+the+thermal+component+of+fever%3A+preclinical+and+clinical+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Protocols for simulating the thermal component of fever: preclinical and clinical experience.</a> Methods. 32, 54(2004).</li>
<li>Repasky, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+mild+whole-body+hyperthermia+protocols+using+human+breast%2C+ovarian%2C+and+colon+tumors+grown+in+severe+combined+immunodeficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Dis.+Obstet.+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Characterization of mild whole-body hyperthermia protocols using human breast, ovarian, and colon tumors grown in severe combined immunodeficient mice.</a> Infect. Dis. Obstet. Gynecol. 7, 19(1999).</li>
<li>Willnow, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+otherwise+incurable+tumor+diseases+in+childhood+using+whole-body+hyperthermia+and+chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Dtsch.+Med.+Wochenschr%22%5BJournal%5D)">Treatment of otherwise incurable tumor diseases in childhood using whole-body hyperthermia and chemotherapy.</a> Dtsch. Med. Wochenschr. 114, 208(1989).</li>
</ol>

We hebben niets te onthullen.

<html> Al in 5000 voor Christus, Egyptische artsen behandelde tumoren met warmte. De Grieken ontdekten de waarde van de warmte in sommige medische behandelingen. De oudste teksten van de wet van Mozes vermelding hete bronnen (Genesis 36:24) om therapeutisch te verheffen lichaamstemperatuur. De eerdere technieken ofwel het gebruik van pyrogeen microbiële extracten voor inductie van koorts of warm water baden voor de inductie van hyperthermie 1. Geen van deze benaderingen gemakkelijk...

<table border="1"><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Thermistor </td><td> RS Components </td><td> 528-8558 </td><td></td></tr><tr><td> CO 2 incubator </td><td> Heraeus </td><td> B5060 EK-CO2 </td><td></td></tr><tr><td> Muizen kooien </td><td> Citizen Industries Ltd. </td><td></td><td> Type B 365X207X190 cm </td></tr><tr><td> Diervoeding </td><td> Provimi India </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Drinkfles voor kooi </td><td> Lokale leverancier </td><td></td><td> Glazen fles </td></tr><tr><td> Soldeerbout </td><td> Solderon, India </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 50 ml Centrifugebuizen </td><td> BD Biosciences </td><td> 352070 </td><td></td></tr><tr><td> Timer </td><td> Lokale leverancier </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 1 ml spuit met naald 26G </td><td> BD Biosciences </td><td> 309602 </td><td></td></tr><tr><td> Zoutoplossing </td><td> Lokale leverancier </td><td></td><td></td></tr></table>

protocol voor long duration whole body hyperthermie in muizen

Protocol for Long Duration Whole Body Hyperthermia in Mice

Hyperthermie is een algemene term die wordt gebruikt om de stijging van de kerntemperatuur van het lichaam boven de normale definiëren. Het wordt vaak gebruikt om de verhoogde lichaamstemperatuur die wordt waargenomen tijdens koorts beschreven. Gebruik van hyperthermie als adjuvans is ontstaan ​​als een veelbelovende procedure voor tumor regressie op het gebied van kankerbiologie. Hiertoe is de belangrijkste eis aan betrouwbare en gelijkmatige verwarming protocollen. We hebben een protocol ontwikkeld voor hyperthermie (gehele lichaam) in muizen. In dit protocol worden de dieren blootgesteld aan cycli van hyperthermie gedurende 90 min gevolgd door een rusttijd van 15 minuten. Tijdens deze periode muizen gemakkelijk toegang hebben tot voedsel en water. Hoge lichaamstemperatuur spikes in de muizen tijdens de eerste paar cycli hyperthermie blootstelling worden voorkomen door het immobiliseren van het dier. Bovendien wordt normale zoutoplossing toegediend in eerste cycli om de effecten van dehydratie minimaliseren. Dit protocol kan simuleren koorts achtige omstandigheden bij muizen tot 12 tot 24 uur. We hebbengebruikt 8-12 weken oude Balb / Cj vrouwelijke muizen om het protocol aan te tonen.

Dit artikel beschrijft een protocol voor het hele lichaam hyperthermie bij muizen die koorts kunnen als voorwaarden te stimuleren tot 12 tot 24 uur.

Protocol voor Long Duration Whole Body Hyperthermie in Muizen

Hyperthermie is een algemene term die wordt gebruikt om de stijging van de kerntemperatuur van het lichaam boven het normale niveau te definiëren. Het wordt vaak gebruikt om de verhoogde kerntemperatuur van het lichaam ...

protocol-for-long-duration-whole-body-hyperthermia-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

In this video we describe a step-by-step protocol to study exertional heat stroke (EHS) in a mouse model.

Exertional Heat Stroke Mouse Model: A Protocol to Study Mechanisms Underlying Exertional Heat Stroke

This video demonstrates the procedure to induce heat-induced seizures in a transgenic mouse with epilepsy-related gene mutations by gradually increasing body temperature in a controlled chamber. This protocol is used to study seizure mechanisms and potential therapies for epilepsy.

Triggering and Monitoring Heat-Induced Seizures in a Transgenic Mouse Model

Hier wordt een protocol gepresenteerd voor de fabricage van ijzeroxide nanodeeltjes-shelled microbubbels (NSM's) door middel van zelfassemblage, synergetische magnetische, akoestische en optische responsiviteit in één nanotherapeutisch platform voor magnetische hyperthermie en fototherme combinatie kankertherapie.

Magnetische,akoestische en optisch-drievoudig-responsieve microbubbels voor magnetische hyperthermie en pothotothermale combinatie kankertherapie

Dit artikel beschrijft twee methoden voor kortdurende hypothermie-inductie van het hele lichaam bij ratten. De eerste, snelle inductiemethode, maakt gebruik van actieve koeling met behulp van ventilatoren en ethanolspray voor een snelle temperatuurdaling. De tweede methode is een geleidelijke afkoelmethode. Dit wordt bereikt door de combinatie van isofluraan-anesthesie en de verlaging van temperatuurinstellingen op de huisotherme warmtemat. Dit resulteert in een geleidelijke daling van de...

Kortdurende hypothermie-inductie bij ratten met behulp van modellen voor studies die klinische relevantie en mechanismen onderzoeken

Het protocol beschrijft de ontwikkeling van een gestandaardiseerd, herhaalbaar, preklinisch model van inspanningswarmteberoerte (EHS) bij muizen die vrij zijn van ongunstige externe stimuli zoals elektrische schokken. Het model biedt een platform voor mechanistische, preventieve en therapeutische studies.

Een preklinisch model van inspanningswarmteslag bij muizen

Het doel van de methode is om te screenen op hyperthermie of door hitte geïnduceerde aanvallen in muismodellen. Het protocol beschrijft het gebruik van een op maat gemaakte kamer met continue monitoring van de lichaamstemperatuur om te bepalen of verhoogde lichaamstemperatuur leidt tot epileptische aanvallen.

Een gedragsscherm voor door hitte geïnduceerde aanvallen in muismodellen van epilepsie

Muizen en ratten worden chirurgisch geïmplanteerd met externe temperatuurtransponders en vervolgens gewend aan de testomgeving en procedure. Veranderingen in spiertemperatuur worden gemeten als reactie op farmacologische of contextuele stimuli in de thuiskooi of tijdens voorgeschreven fysieke activiteit (d.w.z. loopband lopen met een constante snelheid).

Het meten van de thermogenese van de skeletspieren bij muizen en ratten

Hier wordt een protocol gepresenteerd om gecontroleerde hyperthermie te gebruiken, gegenereerd door magnetische resonantiegeleide hoge intensiteit gerichte echografie, om medicijnafgifte te activeren van temperatuurgevoelige liposomen in een rhabdomyosarcoommuismodel.

Magnetische resonantie-geleide hoge intensiteit gerichte echografie gegenereerde hyperthermie: een haalbare behandelingsmethode in een Murine Rhabdomyosarcoom-model

Dit protocol presenteert technieken en methodologie die nodig zijn voor gerichte hyperthermische therapie in solide tumormodellen. De aanpak maakt gebruik van de fotothermische conversie van nabij-infrarood licht door intratumoraal geïnjecteerde gouden nanostaafjes om plaatselijke verwarming in de micro-omgeving van de tumor te induceren.

Induceren van gerichte milde hyperthermie in muizentumormodellen door fotothermische conversie van nabij-infrarood licht door intratumorale gouden nanostaafjes

Parabiotic samenvoegen van twee organismen leidt tot de ontwikkeling van een gedeelde bloedsomloop. In dit protocol beschrijven we de chirurgische stappen om parabiotic verbinding tussen een wildtype muis en een constitutieve GFP-expressie muis vormen.

Parabiose in Muizen: Een gedetailleerd protocol

Leer een gestandaardiseerd protocol voor langdurige gehele lichaamshyperthermie bij muizen om koortslige toestanden gedurende 12-24 uur te induceren. Deze methode ondersteunt onderzoek naar fysiologische responsen en immuunmechanismen.

Protocol voor Long Duration Whole Body Hyperthermie in Muizen

Meer video's verkennen