22 augustus 2012
Chronische infectie met grond overdraagbare helminthen (STHs) veroorzaakt malabsorptie, dwerggroei, en het verspillen van het opgroeiende kind. Daarom is het aannemelijk dat deze infecties verminderen ook de lichamelijke conditie van kinderen. Hier hebben we visualiseren twee technieken voor de diagnose van STHs en de 20-meter shuttle run test voor het beoordelen van de kinderen lichamelijke conditie.
Het doel van de volgende methodologieën is om pogingen tot het beoordelen van de status van op deze wijze overgedragen helmintheninfecties te faciliteren en te standaardiseren, en om vast te stellen of dergelijke overgedragen helmintheninfecties een effect hebben op de fysieke conditie van schoolkinderen. Dit wordt bereikt door de Cato Katz-techniek te gebruiken om infecties met veelvoorkomende in de bodem overgedragen helminthen te diagnosticeren, namelijk Ascaris Lumoid TUS Tria en de haakwormen CLIs stoma Duo Denali en NTO ERUs. Als tweede stap wordt de Erman-techniek uitgevoerd, wat de meest gebruikte methode is voor de diagnose van Strully Stir Corrales.
Vervolgens wordt, om de fysieke fitheid van kinderen te beoordelen, de 20 meter shuttle run test uitgevoerd. De resultaten tonen de verschillen in fysieke fitheidsniveaus tussen kinderen met en zonder een Helmut-infectie, gebaseerd op de bovengenoemde methodologieën. Een combinatie van deze methoden kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen, zoals of via soja overgedragen helmet-infecties een impact hebben op de fysieke fitheid van geïnfecteerde individuen en wat de werkelijke last van dergelijke infecties is.
De Cato-Katz-techniek wordt toegepast om de detectie van parasitaire eieren in de feces van geïnfecteerde proefpersonen te vergemakkelijken. Begin met het plaatsen van een standaard Cato-Katz-sjabloon in het midden van een objectglas. Het sjabloon heeft in het midden een opening voor het plaatsen van 41,7 milligram feces, waarbij handschoenen gedragen dienen te worden.
Schep twee tot drie gram van een vers fecesmonster op een stuk krantenpapier of aluminiumfolie. Druk vervolgens een stukje metaaldraad of plastic gaas op de feces om het monster te zeven. Schraap het gezeefde materiaal met een klein plastic spatel van het gaas en vul hiermee het ponsgat in de Cato Kat-sjabloon volledig.
Egaliseer de inhoud van het gat met de spatel om overtollig fecesmateriaal te verwijderen. Verwijder vervolgens de mal verticaal zonder het fecesmateriaal dat nu aan het microscopische objectglas kleeft te verstoren. De mal en de spatel kunnen na reiniging met detergent en water opnieuw worden gebruikt.
Plaats vervolgens een stukje cellofaan, dat gedurende ten minste 24 uur is geweekt in een glycerine-malachietgroenoplossing, over de fecale monstername op het microscopiedraagglas. Om de feces tot een dik uitstrijkje te verspreiden, wordt een schoon microscopiedraagglas voorzichtig tegen het glas met het fecale monster gedrukt, waarbij het materiaal gelijkmatig wordt verdeeld binnen een cirkel met een diameter die iets kleiner is dan de breedte van het microscopiedraagglas. Bewaar het glaasje nu uit direct zonlicht en laat het 30 tot 60 minuten inkleuren.
Haal na 30 tot 60 minuten het objectglas terug en onderzoek het dikke uitstrijkje systematisch onder een lichtmicroscoop bij een vergroting van 40 tot 100 keer. Tel het aantal eieren en stratificeer deze per soort. Vermenigvuldig vervolgens het aantal eieren met 24 om een gestandaardiseerde schatting van de infectie te verkrijgen, die conventioneel wordt uitgedrukt als het aantal eieren per gram feces of EPG.
Om de erman-techniek uit te voeren, stelt u eerst een statief op dat een glazen trechter kan vasthouden. Neem de glazen trechter en bevestig een stuk rubberen slang aan de steel. Sluit de slang af met een klem of een veerclip en plaats de trechter vervolgens op het statief.
Plaats vervolgens een zeef of een kegelvormig stuk draadgaas in de trechter. Bedek dit gaas met een stuk medisch gaas. Vul de trechter daarna met kraanwater en controleer, terwijl u handschoenen draagt, of de opstelling niet lekt.
Schep 20 tot 30 gram verse feces in het midden van het medisch gaas en zorg ervoor dat het volledig onder water staat; voeg indien nodig extra water toe. Vouw vervolgens het medisch gaas over het monster. Schijn daarna gedurende twee uur kunstlicht van onderaf op de trechter.
Dit komt omdat de Baermann-techniek gebaseerd is op het principe dat de larven fototactisch zijn en dus zullen migreren uit een verlicht fecesmonster. Laat na twee uur voorzichtig de klem in de rubberen slang los en giet 50 milliliters van het onderste gedeelte van het water in de trechter in een centrifugebuis. Centrifugeer vervolgens het opgevangen water gedurende vijf minuten bij 600 ×g.
Giet vervolgens voorzichtig de supernatant af zonder het sediment te verstoren. Behoud de laatste paar druppels in de buis, resuspendeer en pipetteer twee druppels van de oplossing op een objectglas. Onderzoek het objectglas onder een lichtmicroscoop eerst bij een 40-voudige vergroting voor de detectie van parasieten, en daarna bij een 100- tot 400-voudige vergroting voor de bevestiging van de soort.
Eerste-stadiumlarven van OID-stires zijn levend en zullen zich onder de microscoop actief bewegen om de shuttle run-test op te zetten. Meet eerst een vlak, recht parcours van 20 meter af en markeer de afstand met kegels. Plaats een hartslagmeter op de pols van de proefpersoon en de bijbehorende zender rond de borst van de proefpersoon.
Deze apparatuur meet de hartslag voor en na de test, en controleert zo of de deelnemer een maximale inspanning heeft geleverd. Nadat de monitoren zijn bevestigd, vraagt u het kind om heen en weer over het parcours te rennen door het tempo van vooraf opgenomen geluidssignalen te volgen die overeenkomen met rondes van 20 meter, beginnend met een loopsnelheid van 8,5 kilometers per uur. De frequentie van de signalen die de intervallen van 20 meter aangeven, neemt automatisch toe met een equivalent van 0,5 kilometers per uur per minuut om ervoor te zorgen dat de deelnemer een nieuw interval van 20 meter begint te rennen.
Telkens wanneer het signaal klinkt, moet dit beëindigd zijn voordat het volgende signaal arriveert. Stop het kind als hij of zij het tempo gedurende twee opeenvolgende intervallen van 20 meter niet kan volgen. Noteer vervolgens de loopsnelheid voor het laatste interval.
De deelnemer voltooide de test volledig, samen met de registratie van de leeftijd, het geslacht en de bereikte hartslag van de deelnemer. Controleer aan het einde van de test of deze hartslag de maximale hartslag van het kind is. Als de maximale hartslag niet is bereikt, is het mogelijk dat het kind geen maximale inspanning heeft geleverd en moet de test worden herhaald.
Schat nu de maximale aerobe capaciteit of VO2 max van de deelnemer met de volgende vergelijking. VO2 max is gelijk aan 31,025 plus 3,238 maal de snelheid in kilometers per uur minus 3,248 maal de leeftijd in jaren plus 0,1536 maal de snelheid in kilometers per uur maal de leeftijd in jaren. De volgende twee afbeeldingen tonen de eieren van *Ascaris lumbricoides*, die ongeveer 45 tot 74 µm lang en 35 tot 50 µm breed zijn en dikke schilwanden hebben, hier weergegeven als een bevrucht ei van *A. lumbricoides*.
Let op het uiterlijk van de albuminehuls van de Alta, die deze een goudbruine kleur geeft. Ter vergelijking wordt hier een onbevrucht egg lumoïde ei getoond. Let op de afwezigheid van de buitenhuls en dat het ei iets langwerpiger en groter is dan het bevruchte ei.
Over het geheel laat deze afbeelding de eitjes van tea trico zien. Deze zijn ongeveer 50 microns lang en 22 microns breed, zijn langwerpig en hebben duidelijke polaire pluggen. In tegenstelling hiermee hebben de hier getoonde hakenwormeitjes een zeer dunne wand, gevolgd door een heldere ring rond een dichte cluster cellen in het centrum van het eitje.
In deze afbeelding worden S stir Corrales L one-larven getoond. Ze zijn ongeveer 180 tot 380 microns lang en hebben een zeer korte mondholte. Een duidelijk genitaal primordium is waarneembaar en wordt gemarkeerd door de blauwe pijl.
De rode pijl toont de staart van de larven, die een scherp uiteinde heeft. De shuttle run-test van 20 meter werd uitgevoerd om de fysieke conditie te meten. De interpretatie van de resultaten van de shuttle run-test kan op verschillende manieren worden uitgevoerd.
De fysieke conditie van kinderen kan worden vergeleken tussen geïnfecteerde en niet-geïnfecteerde proefpersonen die vergelijkbaar zijn wat betreft leeftijd en geslacht, andere potentieel relevante gezondheidstoestanden, sociaaleconomische status en culturele gewoonten. Men kan verder proberen een mogelijke dosis-responserelatie vast te stellen tussen de intensiteit van STH-infecties en de fysieke conditie, en verschillende niveaus van multiparasitisme vergelijken met de fysieke conditie. Ter illustratie laat de grafiek hier zien dat de fysieke conditie significant verminderd was bij kinderen die geïnfecteerd waren met T Tri Coria in vergelijking met kinderen die niet geïnfecteerd waren met T Tri Coia.
Na het bekijken van deze video zou u een goed inzicht moeten hebben in het uitvoeren van de cut cuts-techniek, de bare mount-techniek en de shutter run-test van 20 meter. Deze methoden helpen bij het beoordelen of infecties met soy transmitter-helmen een effect hebben op de fysieke conditie van kinderen in de schoolleeftijd.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Deze studie onderzoekt de impact van bodemoverdraagbare helminth-infecties (STH) op de fysieke conditie van schoolkinderen. Er worden diagnostische technieken ingezet om de infectiestatus vast te stellen en de conditie van de kinderen wordt geëvalueerd via de 20-meter shuttle run test.
Het beoordelen van de infectiestatus van bodemoverdraagbare helminthiasis (STH) en de impact daarvan op de fysieke fitheid biedt een ziekte-relevant systeem voor het evalueren van de last voor de volksgezondheid in omgevingen met beperkte middelen. Gestandaardiseerde diagnostische methoden en fitnessmetingen maken een mechanistische risicoreductie van hypothesen mogelijk die parasitaire infecties koppelen aan een verminderde aerobe capaciteit en productiviteit. Dit ondersteunt doelvalidatie en fenotypische screening in onderzoek naar verwaarloosde ziekten door het genereren van kwantitatieve, reproduceerbare gegevens over infectie-intensiteit en functionele uitkomsten.
De methode integreert de diagnostische bevestiging van een STH-infectie met een functionele beoordeling van de fysieke conditie, waardoor deze wordt gepositioneerd binnen workflows van vroege ontdekking tot preklinisch onderzoek voor verwaarloosde infectieziekten.