Name: Orthotope levertransplantatie bij ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 25 s
Description: Leer orthotope levertransplantatie bij ratten voor transplantatiebiologie met een verbeterde chirurgische techniek. Deze methode optimaliseert precisie en snelheid tijdens het implanteren van het levertransplantaat.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

CT werd gesteund door de Zwitserse National Science Foundation (SCORE subsidie ​​3,232,230 tot 126.233). De studie werd gesteund door de Artères Stichting, de Astellas Foundation Europe en de Boninchi Foundation.

1. Donor Operation <ol><li> Verdoven mannelijke ratten met een gewicht 200 ± 20 g met isofluraan op kegel masker (3% voor de inductie, 2% tijdens de werking, 1 l / min luchtstroom FiO2 70%). </li><li> Voer een groot mediaan en dwars laparotomie en cauterize de epigastrische vaten aan beide zijden. </li><li> Snijd de falciform ligament, en scheid de linker middenrif ader van de suprehepatic vena cava. Tot slot, verdelen de middenrif ader tussen twee 7-0 zijde ligaturen. </li><li> Snijd de linker driehoekige en het maag-lever-ligamenten. </li><li> Verdeel de hepato-oesofageale ligament en de slagader tussen de 7-0 ligaturen (coagulatie is een goed alternatief). </li><li> Isoleer de infrahepatic vena cava links naar beneden renale ader. Scheid het recht nierader uit de omliggende weefsels en verdelen tussen een 10-0 en een 7-0 ligatuur, op zijn proximale en distale uiteinden, respectievelijk. </li><li> Verdeel het recht suprarenale ader tussen de 7-0 bindes en vrij de lever van zijn achterste ligamenten door te snijden onder zachte tractie. </li><li> Isoleer de gastrosplenic ader en verdelen tussen een 10-0 en een 7-0 ligatuur, op de proximale en distale uiteinden, respectievelijk. </li><li> Verdeel de juiste leverslagader tussen 7-0 banden. </li><li> Isoleer de duodeno-pancreatische ader en verdeelde het is in een 10-0 en een 7-0 ligatuur, op de proximale en distale einde, respectievelijk. </li><li> Plaats een 22G, 3,5 mm stent in de galbuis door het beoefenen van een kleine insnijding op 1 cm afstand van de lever navel. Zet de stent op zijn plaats met een 7-0 ligatuur. </li><li> Injecteer 10 UI van heparine, verdund in 1 ml normale fysiologische zoutoplossing, door middel van de dorsale ader van de penis. </li><li> Canule de vena porta (voor zover mogelijk van de navel) met een 21G naald en voorzichtig de lever spoelen met 20 ml koud Ringer (of andere preservatievloeistoffen). Tegelijkertijd, snijden de vena cava onder de nieraderen een adequate outfl kunnenow. Lever koude perfusie zou moeten duren tussen de een en twee minuten. </li><li> Snijd de vena porta onder de duodeno-pancreatische ader. </li><li> Snijd de galbuis distaal aan de ligatuur rond de stent. </li><li> Vul het insnijden van de infrahepatic vena cava. </li><li> Snijd de suprahepatic vena cava magere naar het middenrif en verwijder de lever. </li><li> Leg de lever in een bak gevuld met koud beltoon lactaat en leg de wastafel op een ijs pad. </li></ol> 2. Graft Voorbereiding <ol><li> Plaats de vena porta in zijn manchet, dan buiten keren van het schip langs de rand van de intima bloot te leggen. Zet de omgeslagen segment op de manchet met een 7-0 ligatuur. </li><li> Herhaal deze bewerking op de infrahepatic vena cava. </li><li> Plaats een micro-klem (4-6 mm lengte) van het proximale deel van de infrahepatic vena cava. Deze operatie voorkomt dat het bloedverlies na de portal reperfusie. </li><li> Overturn de lever en plaats twee prolene 8-0 hechtingende tegenoverliggende laterale randen van de suprahepatic vena cava, van buiten naar binnen. </li><li> Bewaar het transplantaat (ondergedompeld in Ringer) in de koelkast bij 0-4 ° C. </li></ol> 3. Ontvanger Operation <ol><li> Verdoof mannelijke ratten met een gewicht van 200 ± 20 gram met isofluraan op de conus masker (3% voor de inductie, 2% tijdens de operatie, 1 l / min luchtstroom, FiO2 70%) en te houden op een warme pad. Van de nota, moet de ontvanger en donor gewichten worden afgestemd (± 40 gram). </li><li> Injecteer 10 ml normale fysiologische zoutoplossing subcutaan en 0,03 g van piperacilline / tazobactam intramusculaire voor laparotomie. </li><li> Voer een middellijn xipho-schaamhaar laparotomie. </li><li> Draai de zwaardvormig proces met een auto-statische pincet om beter te kunnen ontmaskeren de lever. </li><li> Snijd de voorste ligamenten en verdeel de linker middenrif ader tussen twee 7-0 banden. </li><li> Verdeel de hepato-oesofageale ligament en de slagader tussen de 7-0 ligaturen (coagulation is een goed alternatief). Niet getoond in de video (identiek aan donor werking). </li><li> Isoleer de infrahepatic vena cava Down om de juiste renale ader. </li><li> Verdeel het recht suprarenale ader tussen 7-0 ligaturen en vrij de lever van zijn achterste ligamenten door te snijden onder zachte tractie (niet getoond in de video (identiek aan donor werking)). </li><li> Plaats een 7-0 ligatuur rond de galbuis, net onder haar divisie. Hieronder Zet een andere ligatuur een millimeter en snijd ze in tussen. </li><li> Isoleer de leverslagader bij de navel en verdeel deze tussen 7-0 ligaturen. </li><li> Voorzichtig te scheiden links en rechts portal takken. Let niet op het gemeenschappelijk leverslagader of het maag-milt ader beschadigen. </li><li> Plaats de caval ring rond de vena cava, craniaal naar rechts renale ader. Zet daarna de vaatwand naar de ring door het plaatsen van vier kardinale 9-0 hechtingen. </li><li> Herhaal dezelfde handeling met het portaal ring op de vena porta. </li&gt; <li> Injecteer 10 UI van heparine, verdund in 1 ml normale fysiologische zoutoplossing, door middel van de dorsale ader van de penis. </li><li> Zet de narcose op 0,25% en de FiO2 op 100%. </li><li> Klem de infrahepatic vena cava net boven de rechter nier-ader, dan klemt u de vena porta net boven de maag-milt ader. Tot slot klem de suprahepatic vena cava en zorg ervoor dat ten minste 2 mm van de membraan op te nemen. </li><li> Snijd de suprahepatic vena cava in de buurt van het parenchym. </li><li> Snij de linker en rechter portaal takken en verdelen tussen septum. </li><li> Snijd de infrahepatic vena cava in de buurt van het parenchym, waarbij aandacht niet voor een van de hechtingen eerder geplaatst incisie. Verwijder de lever en plaats de ent in de buikholte. </li><li> Voer een end-to-end anastomose tussen de suprahepatic vena cava van het transplantaat en de ontvanger. Begin met de lopende hechting van de achterste muur van links naar rechts, ga dan op de voorste wand van rechts naar left de voorste hechtingen los te houden tot het einde om een ​​royale doorspoelen van het interieur lumen mogelijk te maken voor het aandraaien van de uiteinden. </li><li> Plaats de caudale tak van de approximator in het portaal ring handgreep; dan is de vena porta van het transplantaat te voegen in de gleuf van de craniale tak van de approximator, met het portaal manchet het vinden van zijn positie in de sleuf. </li><li> Sluit de approximator tijdens het leegmaken van de ontvanger vena porta met een fysiologische zoutoplossing en laat de manchet om in te voegen in het vat. Zet de ontvanger vena porta rond de manchet met een 7-0 gelijkspel omtrek. </li><li> Verwijder de approximator. Open de klem op de suprahepatic vena cava en de vena porta om: portaal stroming wordt nu hersteld. </li><li> Verwijder het portaal ring door het snijden van de 9-0 ligaturen met extra-fijne schaar. </li><li> Plaats de caudale tak van de approximator in de vena cava ring handgreep; en plaats vervolgens de infrahepatic vena cava van het transplantaat in de gleuf van de craniale<html> tak van de approximator, met de cava manchet het vinden van zijn positie in de sleuf. </li><li> Sluit de approximator tijdens het leegmaken van de ontvanger infrahepatic vena cava met een fysiologische zoutoplossing en laat de manchet om in te voegen in het vat. Zet de ontvanger vena cava rond de manchet met een 7-0 gelijkspel omtrek. </li><li> Verwijder de approximator. Open de microclamps op de infrahepatic vena cava van het transplantaat en de ontvanger in volgorde: veneuze doorstroming is nu hersteld. </li><li> Voer een gedeeltelijke incisie van de gemeenschappelijke van de ontvanger galwegen, breng dan een zachte tractie naar het hoofd, en steek de vrije kant van de stent eerder ingebracht in de galwegen van het transplantaat. Zet de stent met een omtrek 7-0 gelijkspel. </li><li> Sluit het dier door lagen met 5-0 hechtingen. Laat gratis water en levensmiddelen uit ontwaken. </li><li> Dien effectieve analgesie op basis van lokale institutionele protocollen. Een minimum periode van 24 uur wordt aanbevolen. </li></ol>_content &quot;&gt; Van de nota: end-to-end leverslagader anastomose kan worden uitgevoerd, indien vereist door de experimentele ontwerp (de slagader is niet vereist voor de lange termijn overleving na rat levertransplantatie). 4. Representatieve resultaten De beschreven techniek kan met succes worden beheerst door ons team na ongeveer 10 training operaties. Het stond 100% op lange termijn (&gt; 21 dagen) overleven op 36 opeenvolgende Lewis-to-Lewis en Dark Agouti-to-Lewis transplantaties, na de korte training periode (een aantal syngene lever transplantatie ontvangers zijn in leven gehouden voor meer dan 12 maanden). Post-transplantatie syngene dag 1 leverfunctietesten vertoonde mediane aspartaattransaminase (AST): 84 U / l (51.7 tot 92.7) en de mediane alanine transaminase (ALT): 172,5 U / l (127.5-240.2). De gemiddelde anhepatische fase (vena porta klemmen enten re-perfusie) is 14 ± 2 min, waarbij de langste stap de suprahepatic vena cava anastomose (lopen enOEKOMSTIGE) tijd 9 ± 2 minuten. De snelle-linker-systeem kon de positionering van 1,55 mm-boring manchetten op de vena porta en 2,40 mm-boring manchetten op de vena cava (ontvangers met een gewicht van 200 ± 20 g). Daarentegen, toen we probeerden met behulp van het transplanteren van Kamada&#39;s techniek, konden ze niet meer bedragen dan 1,40 mm en 2,16 mm, respectievelijk (ratten matching voor spanning en gewicht). Zoals in figuur 7 zijn snel linker ringen ontworpen schepen ontvanger houden optimale strekken, waardoor minimum dikte en lengte verspilling, waardoor dichter bij de fysiologische hemodynamische resultaten. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig1.jpg" alt="Figuur 1" /> Figuur 1. Ringen maatregelen. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig2.jpg" alt="Figuur 2" /> Figuur 2. Microclamps maatregelen. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig3.jpg" alt="Figuur 3" /> Figuur 3. Quick-linker kit. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig4.jpg" alt="Figuur 4" /> Figuur 4. Quick-linker bewapend. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig5.jpg" alt="Figuur 5" /> Figuur 5. Direct linker gesloten. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig6.jpg" alt="Figuur 6" /> Figuur 6. SHVC klem. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig7.jpg" alt="Figuur 7" /> Figuur 7. Classic vs quick-linker assisted manchet-anastomose hemodynamiek. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig8.jpg" alt="Figuur 8" /> Figuur 8. Donor en de ontvanger van de voorbereiding van de huid en de incisie.

<ol><li>Starzl, T. E., Marchioro, T. L., Porter, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+clinical+observation+after+homotransplantation+of+the+whole+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Revue+internationale+d%27hepatologie%22%5BJournal%5D)">Experimental and clinical observation after homotransplantation of the whole liver.</a> Revue internationale d'hepatologie. 15, 1447(1965).</li>
<li>Starzl, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Evolution of liver transplantation.</a> Hepatology. 2, 614S-636S (1982).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47(1979).</li>
<li>Kashfi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+various+techniques+of+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+proceedings%22%5BJournal%5D)">A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation proceedings. 37, 185-188 (2005).</li>
<li>Hori, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+and+innovative+techniques+for+liver+transplantation+in+rats%3A+A+surgical+guide%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%3A+WJG%22%5BJournal%5D)">Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide.</a> World Journal of Gastroenterology: WJG. 16, 3120(2010).</li>
<li>Oldani, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+technique+for+rat+liver+transplantation+using+Quick+Linker+system%3A+a+preliminary+result%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result.</a> Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).</li>
<li>Nosaka, T., Bowers, J. L., Cay, O., Clouse, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biliary+complications+after+orthotopic+liver+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Surg.+Today%22%5BJournal%5D)">Biliary complications after orthotopic liver transplantation in rats.</a> Surg. Today. 29, 963-965 (1999).</li>
<li>Li, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+incidence+of+biliary+complications+in+rat+liver+transplantation%3A+can+we+avoid+it%5BTitle%5D)+AND+%22World+J.+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">High incidence of biliary complications in rat liver transplantation: can we avoid it.</a> World J. Gastroenterol. 17, 3140-3144 (2011).</li>
<li>Peng, Y., Gong, J. P., Yan, L. N., Li, S. B., Li, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+two-cuff+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatobiliary+Pancreat.+Dis.+Int%22%5BJournal%5D)">Improved two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.</a> Hepatobiliary Pancreat. Dis. Int. 3, 33-37 (2004).</li>
<li>Urata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+survival+in+rat+liver+transplantation+with+extended+cold+preservation%3A+role+of+portal+vein+clamping+time%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Decreased survival in rat liver transplantation with extended cold preservation: role of portal vein clamping time.</a> Hepatology. 28, 366-373 (1998).</li>
</ol>

Geen belangenconflicten verklaard.

De onderhavige rattenlever transplantatiemodel gemakkelijk worden vastgesteld. In onze ervaring, een paar belangrijke punten te helpen het risico van overlijden (≤ 20%). Vroege sterfgevallen optreedt binnen de eerste drie uren van reperfusie, zijn meestal door een darminfarct, als gevolg van lange portaal klemmen. Het wordt daarom aanbevolen om de anhepatische fase te houden binnen de ideale grens van 15 minuten (20 minuten nog aanvaardbaar). Centraal luchtembolie kan ook een oorzaak van de plotselinge dood en het is verplicht om alle aderen spoelen voorafgaand aan de anastomose. Sterfgevallen die zich voordoen tussen postoperatieve dag een en drie zijn vaak te wijten aan leverfalen of trombose van de vena cava. Men moet derhalve van elke agressieve graft spoelen voordat de explantatie in de donor (we met 20 ml te spoelen gedurende ongeveer 60 seconden) en zorgen voor een passende koude preservatie (volledige onderdompeling in 0-4 ° C Ringer). De kans op trombosekan worden verminderd door het minimaliseren van de manipulatie van de intima en het behoud van de integriteit. We raden het gebruik van antistolling na de operatie. Sterfgevallen tussen postoperatieve dag vier en negen zijn vaak gerelateerd aan bacteriële cholangitis 7. Op basis van onze ervaring, een enkele dosis van piperacilline / tazobactam (0,03 g) gegeven voor laparotomie is genoeg om het risico van galbuis-infectie te minimaliseren. De dood is een zeldzame gebeurtenis na dag 10. Vanwege het ontbreken van arteriële stroom kunnen sommige galgang problemen worden waargenomen cholastasis 8. Afhankelijk van de behoefte van de onderzoeker een arterialization worden overwogen 9. Van de nota, kan een koude ischemie tijd tot 24 uur als aanvaardbaar beschouwd 10. De snelle-linker-systeem is oorspronkelijk ontworpen om levertransplantatie uit te voeren met drie manchet anastomosen (zeer korte anhepatische fase). Echter, de drie-manchet technique vereist het gebruik van zeer kleine remklauwen voor de suprahepatic vena cava (SHVC) manchet en het is niet algemeen aanvaard vanwege het risico van lever-uitstroom problemen 11-14. We hebben daarom voorstander van een snelle-linker assisted drie-manchet techniek alleen als warme ischemie keer korter dan tien minuten nodig. In de meeste onderzoeken echter implantatie fasen tot 15-18 minuten aanvaardbaar, waardoor het gebruik van de twee manchet techniek en een fysiologisch SHVC drainage. Zoals in deze video paper gewoonlijk het snel linker systeem in het tweede deel van de implantatie alleen. Terwijl sommige extra chirurgische tijd nodig is om de quick-linker handvatten te positioneren, wordt dit deel van de procedure in verband met minimale risico&#39;s en zorgt voor een verkorting van de kritische anhepatische fase dankzij makkelijker manchetten inserties. Andere voordelen van het quick-linker-systeem zijn een betere graft-ontvangende vaartuig uitlijning en het gebruik van grotere manchetten met betere hemodynamische resultaten in vergelijking met deeerder beschreven technieken (zoals die beschreven door Kamada et al.). 6 (fig. 7).

<table border="1"><tbody><tr><td> Tool / Reagens </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogus n. </td><td> Commentaar </td></tr><tr><td> Portal manchet </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> of <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">Smiths-medical.com</a> </td><td> Coil 01-96-1729 800/100/420 </td><td> Boring: 1.55mm Wall: 0,30 mm Lengte: 3,5 mm </td></tr><tr><td> Infrahepatic v. cava manchet </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> of <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">Smiths-medical.com</a> </td><td> Coil 01-96-1733 800/100/540 </td><td> Boring: 2.40mm Wall: 0,30 mm <br/&gt; Lengte: 3,5 mm </td></tr><tr><td> Ductus choledochus stent </td><td> gemeenschappelijke 22G Venflon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 7-0 zijden dassen </td><td> <a href="http://georgetiemann.com" target="_blank">georgetiemann.com</a> </td><td> 160-1226-7 / 0 </td><td></td></tr><tr><td> 10-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 9-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 8-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Rechte micro-pincet </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">s-t-en</a>. Net </td><td> FRC-15RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> Gebogen micro-pincet </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">s-en t.net</a> </td><td> FRS-15-RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> Dissection naald-houder </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">s-en t.net</a> </td><td> B-15-8,2 </td><td></td></tr><tr><td> Anastomose naald-houder </td><td> <a href="http://rumex.net" target="_blank">rumex.net</a> </td><td> 8 021T </td><td></td></tr><tr><td> Micro klemmen </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18055-03 </td><td> 6 x 1 mm </td></tr><tr><td> Micro klemmen applicator </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18057-14 </td><td></td></tr&gt; <tr><td> Suprahepatic v. cava klem </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> 13.349.14 </td><td></td></tr><tr><td> Quick-Linker ringen </td><td> <a href="http://dltchiropody.co.uk" target="_blank">dltchiropody.co.uk</a> </td><td> PAR 10 </td><td> gewijzigd scalpelmesjes </td></tr><tr><td> Quick-Linker approximator </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> UD-04-275 </td><td> gemodificeerde Kocher&#39;s tang </td></tr></tbody></table>

orthotope levertransplantatie bij ratten

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Klinische vooruitgang op het gebied van levertransplantatie is grotendeels ondersteund door diermodellen 1,2. Sinds de publicatie van de eerste orthotope rat levertransplantatie in 1979 door Kamada et al.. 3, is dit model nog steeds de gouden standaard, ondanks de verschillende voorgestelde alternatieve technieken 4. Toch is het breder gebruik beperkt door de steile leercurve 5. In deze video papier, laten we een eenvoudig en makkelijk te stellen herziening van Kamada de twee-manchet techniek. De suprahepatic vena cava anastomose wordt handmatig uitgevoerd met een actieve hechting, en de vena porta en de vena cava infrahepatic anastomosen worden uitgevoerd met behulp van een quick-linker manchet systeem 6. De productie van de quick-linker-kit wordt in een aparte video-papier.

We een gemakkelijk te stellen herziening van de klassieke twee manchet techniek orthotope levertransplantatie in rat.

Orthotope levertransplantatie bij ratten

Klinische vooruitgang op het gebied van levertransplantatie is grotendeels ondersteund door diermodellen1,2. Sinds de publicatie van de eerste orthotope rat...

Orthotope levertransplantatie bij de rat is een veeleisende procedure en vereist een training in longmicroschirurgie om correct beheerst te worden. Nauwkeurigheid en snelheid, vooral tijdens de implantatiefase, zijn de sleutels tot succes. In de volgende video's onthullen we elke fundamentele stap voor een succesvolle transplantatie en leggen we uit hoe een snel klinisch hulpmiddel de implantatiefase kan vergemakkelijken.Kijk met plezier naar de video's. De donor wordt geopend via een transversale incisie. Het ligamentum falciforme wordt doorgesneden en de vena cava inferior wordt blootgelegd.De linker diafragmatische vene wordt losgemaakt van de vena cava en vervolgens tussen zijden 7-0 hechtingen doorgesneden. Het osteopathische ligament wordt doorgesneden, waarna het oesofageale ligament tussen hechtingen wordt doorgesneden. De vena cava wordt blootgelegd door de dunne en dikke darm voorzichtig opzij te trekken.Aan de linkerzijde wordt het peritoneum geopend en wordt de vena cava voorzichtig uit het omliggende weefsel bevrijd. De rechter bijnieradervene wordt geïsoleerd en vervolgens tussen zeven ligaturen onderbroken. De lever wordt naar de linkerzijde getrokken en voorzichtig onder tractie gehouden.De retrohepatische en rechter driehoekige ligamenten worden doorgesneden. De vena renalis rechts wordt aan het proximale uiteinde afgebonden met een nylon draad van 10 oh. De vena renalis en arteria renalis rechts worden aan hun distale uiteinde samen afgebonden, waarna de vena renalis rechts wordt doorgesneden.Een overzicht van de volledig geïsoleerde vena cava is getoond. Overzicht van de regionale anatomie van de hepatische hilum en poortader, arteria hepatica propria, ductus choledochus, vena gastrosplenica. De pancreas.De vena gastrosplenica wordt geïsoleerd en doorgesneden tussen een 10-0 en een 7-0 ligatuur. De arteria hepatica superior wordt doorgesneden tussen 7-0 ligaturen. Tot slot wordt de vena pancreaticosplenica doorgesneden.Er wordt een overzicht van de geïsoleerde vena portae getoond. De gemeenschappelijke galgang is gedeeltelijk geopend bij de overgang met het pancreasweefsel. Een 3,5 millimeter 22 G stent wordt ingebracht en stevig vastgezet.Er worden 10 units heparine geïnjecteerd. De lever wordt vervolgens doorgespoeld via de vena portae met 20 milliliter gekoelde Ringer-lactaatoplossing, terwijl de distale vena cava wordt ingesneden om een adequate uitstroom mogelijk te maken; de vena portae wordt aan het distale uiteinde doorgesneden en het gedeelte van de ductus choledochus wordt voltooid. De vena cava hepatica wordt vervolgens aan het distale uiteinde doorgesneden, terwijl de vena cava suprahepatica wordt doorgesneden, vlakbij het diafragma, dat wordt verwijderd en ondergedompeld in een Ringer-lactaatoplossing van 4 °C.De vena porta wordt in het kuitgedeelte ingebracht, vervolgens omgeleid om de intima bloot te leggen en tot slot met een 7-0 hechtdraad aan het kuitgedeelte vastgezet. Hetzelfde wordt gedaan bij de vena cava. Een microklem wordt geplaatst op het meest craniale deel van de vena cava.De lever wordt omgeklapt en twee ATO-prolene hechtingen worden van buiten naar binnen door de tegenoverliggende laterale randen van de vena cava inferior gevoerd. De ontvanger wordt onder isofluraan-anesthesie op een warmtepellet gehouden, 10 milliliters. Normale cellijnen worden subcutaan geïnjecteerd vóór de laparotomie; een midline pubische incisie wordt uitgevoerd en de uterus wordt geretroverteerd om de lever beter bloot te leggen.De ductus choledochus wordt vastgezet met een 7-0 tie en doorgesneden vlak voor de bifurcatie in links en rechts. De poortadertakken worden zorgvuldig gescheiden. De vena cava-ring wordt geplaatst rond de vena cava, cranial van de linker nierenader.Een eerste 9-0 hechting wordt door de vaatwand aan de rechterrand gevoerd en vervolgens in de vooraf vastgestelde positie aan de vena cava-ring bevestigd. Een tweede hechting wordt door de tegenovergestelde rand gevoerd en bevestigd. De derde hechting wordt in ventrale positie bevestigd.Ten slotte wordt de vierde vastgezet in dorsale positie. Nadat de ring aan de linkerzijde is omgedraaid, wordt de eerste hechting door de achterwand gehaald door het vat op te tillen. De portaalring wordt vervolgens gepositioneerd en de knoop wordt vastgezet aan de posterieure tak ervan.Een tweede hechting wordt door de rand van de linkerportale tak gehaald en vastgezet; een derde hechting wordt aan de rand van de rechterportale tak bevestigd. Daarna wordt deze vastgezet. De laatste hechting doorboort de voorwand van de poort en wordt in positie vastgezet vóór het afklemmen.Een laatste schoonmaak van de vena cava wordt uitgevoerd in de richting van de vena cava. De vena cava en vena porta worden opeenvolgend afgeklemd. De vena cava wordt vervolgens afgeklemd en ingesneden in de richting van het parenchym. De linker- en rechterpoortadertakken worden doorgesneden en het septum daartussen wordt verdeeld. De vena cava wordt doorgesneden in de richting van het parenchym. Vervolgens wordt de lever verwijderd.Vena cava en vena porta worden veilig opengehouden door de twee ringen. Het transplantaat wordt in de buikholte geplaatst en de NATO-hechting wordt vastgemaakt aan de linkerzijde van de vena cava. Een tweede hechting wordt aan de rechterzijde vastgemaakt.De Iraanse hechting van de achterwand wordt van links naar rechts uitgevoerd, zodat het leverparenchym niet in de hechting wordt meegenomen. De hechting van de voorwand wordt losgelaten om een royale spoeling mogelijk te maken vóór de volledige sluiting. Deze handeling voorkomt een luchtembolie.De coddle-tak van de approximator wordt in het handvat van de portaalring geplaatst en de portaalkalf wordt door de sleuf van de craniale tak gestoken. De Vina porter van de ontvanger wordt gespoeld met normale zoutoplossing terwijl de approximator wordt gesloten. Om de kalfinsertie van de ontvanger te ondersteunen, wordt de Porter aan het kalf vastgezet met een 7-0 hechtdraad.De approximator wordt verwijderd en de poortstroom wordt hersteld door opeenvolgend de Atic VNA CVA-klem en de poortklem te verwijderen; de poortring wordt door doorknippen verwijderd. De nanoligaturen worden hersteld met dezelfde techniek bij de ontvangers. De galweg wordt onder tractie gehouden en de stent wordt via een kleine incisie ingebracht.Een circulaire ligatuur bevestigt de positie. Een overzicht van het gefuseerde transplantaat wordt getoond in a.

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Orthotope levertransplantatie bij ratten is een onmisbare experimenteel model voor biomedisch onderzoek. Hier presenteren we onze chirurgische procedures voor orthotope rat levertransplantatie met een lever-arteriële reconstructie met behulp van een 50% gedeeltelijke graft.

Chirurgische ingrepen voor een Rat Model van deelspoelen orthotope levertransplantatie met hepatische arteriële reconstructie

We beschrijven het ontwerp van de "quick-linker" apparaat voor eenvoudiger rat orthotope levertransplantatie.

Productie apparaten en instrumenten voor eenvoudiger Rat Liver Transplantation

Auxiliary levertransplantatie biedt een tijdelijke ondersteuning in acuut leverfalen, tot de regeneratie van het falende lever. Heterotopisch extra levertransplantatie (HALT) met poortader arterialization (PVA) maakt voldoende leverfunctie. We ontwikkelden een analoge techniek in de rat, de invloed van de poortader arterialization de morfologie en functie van het transplantaat te onderzoeken.

Heterotopische Auxiliary Rat Liver Transplantation Met Flow-gereguleerd poortader Arterialization in acuut leverfalen

We beschrijven een nieuwe techniek voor heterotope abdominale hart-longtransplantatie (HAHLT) bij ratten. De transplantaatconfiguratie resulteert in een gedeeltelijk belaste graftcirculatie, waardoor een directe functionele beoordeling mogelijk is. Dit model kan worden gebruikt voor acute of chronische studies van de functie en het immunologische status van het getransplanteerde graft.

Rat Heterotope Abdominale Hart / Single-longtransplantatie in een Volume geladen configuratie

Hier, wordt een protocol met betrekking tot de gedeeltelijke levertransplantatie opnieuw arterialized rat gepresenteerd. 70% lever was precies gereseceerd in vivo met behulp van een bijgewerkte techniek van het vaartuig georiënteerde hepatectomy. De hepatische slagader werd gereconstrueerd op een end-to-side wijze. De manchet techniek was aangepast zodat het verkorten van de infrahepatic vena cava anastomose.

Opnieuw Arterialized Rat gedeeltelijke lever transplantatie met een in vivo vaartuig georiënteerde 70% Hepatectomy

De wederopbouw van de suprahepatic vena cava (SHVC) blijft een moeilijke stap in rat orthotopic lever transplantatie. In dit artikel tonen we een stapsgewijze protocol voor SHVC wederopbouw in ratten met behulp van een roman magnetische wapendrager-techniek.

Een Rat Model van Orthotopic met behulp van een roman magnetische Anastomosis techniek voor Suprahepatic Vena Cava wederopbouw levertransplantatie

Het doel van deze studie is om de rat orthotopische levertransplantatie model te wijzigen om beter te vertegenwoordigen menselijke levertransplantatie en verbetering van de overleving van de ontvanger. De gepresenteerde methode hersteld leverslagaderlijke instroom door het aansluiten van de donor lever gemeenschappelijke lever slagader aan de juiste lever van de ontvanger slagaderslagader.

Verminderde complicaties na arteriële heraansluiting in een ratmodel van orthotopische levertransplantatie

Dit artikel geeft een gedetailleerde beschrijving van hoe een diermodel van de anhepatische fase (leverischemie) bij ratten kan worden gebouwd om fundamenteel onderzoek naar ischemie-reperfusieletsel na levertransplantatie te vergemakkelijken.

Orgaan Ischemia-Reperfusie Letsel door het simuleren van hemodynamische veranderingen in rat levertransplantatie model

Het hier beschreven heterotope hulplevertransplantatieprotocol bij ratten biedt een praktisch onderzoeksinstrument voor het onderzoeken van mechanismen van afstoting van het levertransplantaat. Dit model helpt bij het verlichten van de chirurgische hindernissen en dierlijke stress van orthotope levertransplantatie bij ratten.

Heterotopisch aanvullend transplantaatmodel voor ratten in de hele lever met behulp van een hepaticouretostomie voor onderzoeken naar afstoting van transplantaten

Dit protocol beschrijft een verbeterde techniek voor orthotope linkerlongtransplantatie bij ratten, gericht op het verminderen van operationele problemen en het verbeteren van overlevingskansen.

Orthotope linkerlongtransplantatie bij ratten

Leer orthotope levertransplantatie bij ratten voor transplantatiebiologie met een verbeterde chirurgische techniek. Deze methode optimaliseert precisie en snelheid tijdens het implanteren van het levertransplantaat.

Orthotope levertransplantatie bij ratten

Meer video's verkennen