21 december 2012
Verlies van peritoneale integriteit verschaft een nieuw paradigma te begrijpen en om chronische bekkenpijn bij vrouwen met milde vormen van endometriose en kan gemakkelijk worden gedetecteerd met intraoperatieve instillatie van kleurstof op het moment van laparoscopie.
Het algemene doel van het volgende experiment is om behandelaars van vrouwen met bekkenpijn een eenvoudige methode te bieden om de aanwezigheid en omvang van subtiele endometriose te accentueren. Dit wordt bereikt door eerst een inspectie van zichtbare endometriose uit te voeren om evidente ziektebeelden te identificeren. Als tweede stap wordt methyleenblauw kleurstof aangebracht, wat gebieden met subtiele endometriose aan het licht brengt die bij een normale laparoscopie over het hoofd zouden kunnen worden gezien.
Vervolgens worden alle blauw gekleurde gebieden geresecteerd om de patiënt volledig van de ziekte te verlossen. Resultaten van scanning elektronenmicroscopie tonen aan dat deze aanpak onzichtbare endometriose verwijdert die de onderliggende peritoneale cellen beïnvloedt, waardoor menstruatie- of ovulatiebloed toegang krijgt tot de sensorische zenuwen die het bekken innerveren en pijn veroorzaken. De implicaties van deze techniek strekken zich uit tot zowel de diagnose als de behandeling van endometriose, aangezien het ons in staat stelt subtiele en zelfs onzichtbare endometriose te identificeren die het peritoneale oppervlak kan verstoren en bloed in contact kan brengen met de zenuwen onder de weefsels, wat de pijn verklaart die deze patiënten ervaren.
Normaal gesproken komt er tijdens de ovulatie of menstruatie een kleine hoeveelheid bloed in de bekkenholte terecht. De bekleding van het bekken en het abdomen bevat een intacte laag mesotheel die voorkomt dat dit bloed, of de factoren in het bloed die pijn veroorzaken, in contact komen met sensorische zenuwvezels. Bij vrouwen met endometriose kunnen de inflammatoire endometrioidcellen ervoor zorgen dat de peritoneale cellen hun cel-celcontacten verliezen, waardoor het bloed toegang krijgt tot de onderliggende weefsels en zenuwvezels.
Deze openingen in mesotheelcellen kunnen worden waargenomen met scanning elektronenmicroscopie, maar zij zijn ook de reden dat de blauwe kleurstof de onderliggende weefsels kan kleuren op de plaatsen waar dit gebeurt. I. Vrouwen met chronische bekkenpijn worden eerst geïnterviewd om hun medische geschiedenis en details met betrekking tot de lokalisatie van de pijn en de timing in relatie tot de menstruatiecyclus vast te stellen; geassocieerde symptomen, waaronder klachten aan de prikkelbare dikke darm of blaasklachten, worden genoteerd en geregistreerd. Daarnaast wordt er een lichamelijk onderzoek bij de patiënt uitgevoerd zodra de selectie van de patiënten heeft plaatsgevonden.
Zorg ervoor dat u toestemming vraagt aan vrouwen die een laparoscopie ondergaan voor de mogelijke resectie van endometriose en het gebruik van hun weefsels voor onderzoek. Voer de laparoscopie uit met standaardtechnieken via een navelpunt van vijf millimeter en aanvullende punten van vijf millimeter in de onderbuik. Inspecteer het bekken zorgvuldig om eventuele bevindingen van endometriose te correleren met de preoperatieve lokalisatie van de pijn zoals aangegeven door de patiënt.
Meng vervolgens methyleenblauw-kleurstof in een verhouding van 1:200 met steriele zoutoplossing en gebruik een aspiratienaald om de oplossing op de bekkenoppervlakken te injecteren. Voer daarna zuigirrigatie uit om de overtollige kleurstof te verwijderen en de peritoneale oppervlakken te spoelen. Inspecteer vervolgens zorgvuldig het bekken en noteer alle gebieden waar de blauwe kleurstof is opgenomen.
Voer, indien mogelijk, een resectie uit van de aangetaste gebieden van het peritoneum. Zodra de resectie is voltooid, wordt het bekken geïnspecteerd om te bevestigen dat er geen sprake is van bloedingen. Laat vervolgens het CO2-gas ontsnappen, verwijder de instrumenten en sluit de incisies met een weefsellijm.
Nadat de patiënt een uur heeft gerust in de uitslaapkamer en naar huis mag vertrekken, wordt voor het documenteren van onzichtbare endometriose via scanning elektronenmicroscopie eerst peritoneale secties gehecht aan een steriel Telfa-kussen om het monster af te vlakken en de intraperitoneale zijde naar boven te houden. Plaats vervolgens de secties in glutaraldehyde-fixatief voor SEM. Zodra ze voldoende zijn gefixeerd, kunnen de monsters worden verwerkt voor scanning elektronenmicroscopie bij een andere patiënt bij wie eerder endometriose uit de blaas is geresecteerd en die geen pijn meer heeft in dat gebied.
De kleurstof kleurde de peritoneale oppervlakken niet, wat het verband ondersteunt tussen de correlatie van blauwe kleuring en de aanwezigheid van bekkenpijn. Deze afbeelding van het peritoneale oppervlak is gemaakt van een vrouw met chronische bekkenpijn en blaasklachten die verergerden tijdens de menstruatie. De laparoscopische afbeelding is gemaakt vóór het aanbrengen van de blauwe kleurstof; enkel de reflectie van het laparoscopische licht toonde gebieden die verdacht waren voor duidelijke endometriose-laesies, zoals aangegeven door de pijlen in deze afbeelding die in hetzelfde gebied is genomen; er is te zien dat de op de blaas aangebrachte blauwe kleurstof specifieke delen van het peritoneum kleurde.
Deze afbeelding toont een resectie van het peritoneum dat de blaas bedekt, en deze afbeelding toont de cellen uit dit gebied zoals gezien via scanning elektronenmicroscopie. Het monster werd voorbereid volgens standaardprocedures en gesputtercoat met een goud-platina-legering tot een dikte van 20 nanometers. Er is te zien dat het peritoneum is bedekt met cellen waarvan wordt gedacht dat het endometriose is, en de mesotheelcellen van het peritoneum vertonen openingen in hun cel-celcontacten waardoor de onderliggende extracellulaire matrix wordt blootgesteld.
Terwijl deze scanning elektronenmicroscoopafbeelding van een normaal peritoneum-monster, op dezelfde wijze geprepareerd, laat zien dat de epitheelcellen van het normale peritoneum nauw met elkaar verbonden zijn. Zoals u kunt zien, is dit een vrij eenvoudige techniek die u bij uw laparoscopische procedures kunt gebruiken om subtiele en onzichtbare endometriose te identificeren die permeabiliteit van de peritoneale oppervlakken veroorzaakt. Door de gehele laesie samen met alle endometrioidcellen te resecteren, geeft u uw patiënt de beste kans op pijnverlichting.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Deze studie introduceert een methode voor het detecteren van subtiele endometriose bij vrouwen met chronische bekkenpijn. Door gebruik te maken van methyleenblauw tijdens een laparoscopie kunnen praktijbeoefenaars gebieden met endometriose identificeren en resecteren die mogelijk niet zichtbaar zijn via standaardtechnieken.
Deze studie presenteert een techniek op basis van methyleenblauw-kleurstof om subtiele endometriose tijdens laparoscopie te detecteren, waarmee een belangrijk diagnostisch hiaat bij vrouwen met chronische bekkenpijn wordt overbrugd. Door de visualisatie en resectie van het verlies van peritoneale integriteit mogelijk te maken, ondersteunt deze methode de mechanistische risicovermindering in endometrioseonderzoek en kan zij de doelwitvalidatie in studies naar pijnpaden verbeteren. De benadering biedt een reproduceerbaar instrument met lage complexiteit voor preklinische modellen die interacties tussen het peritoneum en zenuwen bij bekkenpijn onderzoeken.
De methode past binnen het continuüm van endometriose-onderzoek, van vroege ontdekking (hypothesetoetsing via kleurstofopname) tot preklinische validatie (ultrastructurele bevestiging) en therapeutische interventie (resectie), wat bijdraagt aan iteratieve risicoreductie van targets.