Name: Voorbereiding en pathogeeninactivatie van Double Dose Buffy Coat bloedplaatjesproducten met behulp van het INTERCEPT Blood System (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-12-07T11:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 40 s
Description: Leer de bereiding van dubbele dosis buffy coat bloedplaatjes met het INTERCEPT Blood System voor pathogeeninactivatie. Deze methode waarborgt veilige transfusies en behoudt kwaliteit gedurende zeven dagen opslag.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De financiering voor de publicatie wordt verzorgd door Cerus Corp, fabrikant van het INTERCEPT Blood System.

1. Hele bloedafname <ol><li> Verzamel volledig bloed van vrijwillige donoren in 450 ml boven / onder collectie stelt volgens de lokale bloedafname richtlijnen. </li><li> Het bloed wordt opgeslagen gedurende ten minste 2 uur op een koelplaat vóór centrifugatie en scheiding. </li></ol> 2. Buffy Coat Voorbereiding <ol><li> Centrifugeer het volbloed met een harde rotatie om het bloed gescheiden in drie lagen: rode bloedcellen, buffy coat en plasma. Centrifuge gebruikte parameters waren 4880 RCF gedurende 11 min bij 22 ± 2 ° C. </li><li> Een geautomatiseerd bloedscheider de plasma drukken in de bovenste satellietzak en de rode bloedcellen (RBC) in de onderste satellietzak, waarbij de bufferlaag in de verzamelcontainer. Target betekenen volume en hematocriet bereiken voor buffy coats zijn ongeveer 48 ml en 37%, respectievelijk. </li><li> De buffy-coats worden overnacht opgeslagen op een bloedplaatjes roerder bij 22 ± 2 ° C. </li></ol><ol><li> Steriele connect 7 buffy coats en 300 ml SSP + bloedplaatjes bewaarvloeistof (PAS) in een trein configuratie met parallelle lijnen aan de treinlengte verminderen; de PAS moet aan de bovenkant van de trein. Klem de lijn tussen de PAS en de eerste buffy coat. </li><li> Open de steriele verbindingen tussen de buffy coat eenheden en laat de buffy coats op afwateren in de laatste container. </li><li> Open de las en de klem tussen de PAS en de eerste bufferlaag. Toestaan ​​een derde van de bewaarvloeistof opeenvolgend spoelen door elk van de buffy coat containers. Herhaal 2 keer met telkens de helft van de resterende PAS. </li><li> De gemiddelde buffy coat zwembad volume moet ongeveer 600 ml te bedragen. Als het doelvolume en de hematocriet van het individu buffycoats wordt voldaan, zal de plasma-ratio zijn 32 - 47%, zoals vereist voor het INTERCEPT pathogeeninactivatie behandeling later in het proces. </li><li> Gooi de lege SSP + en buffycoat containers. </li><li> Voor een optimale herstel van de bloedplaatjes, houden het zwembad op het roerwerk gedurende 1 uur voorafgaand aan de centrifugeren. </li><li> Steriele sluit een bloedplaatjes opslagcontainer met geïntegreerde leukoreduction filter om de buffy coat zwembad. </li><li> Voer een &quot;soft spin&quot; van de bufferlaag pool om de rode bloedcellen te scheiden van de bloedplaatjes in suspensie (462 RCF gedurende 9 min, 20 sec). Druk de suspensie van bloedplaatjes met behulp van een geautomatiseerd bloedscheider door het leukoreduction filter in de bloedplaatjes opslag container. </li><li> De eerder beschreven verwerking voorschriften ervoor zorgen dat de bloedplaatjes schorsing van het INTERCEPT verwerking specificaties van 300 ml voldoet - 420 ml volume, +2.5-+7.0 x 10 11 bloedplaatjes dosis, en ≤ 4 x 10 6 / ml rode bloedcellen. </li></ol> 4. Behandeling met INTERCEPT <ol><li> Voer de INTERCEPT behandeling voor het einde van dag 1 na inzameling (dag 0 is de dag van de winning). </li><li> Haal de INTERCEPT Processing Setmet Dual Storage Containers van de doorzichtige plastic zak. </li><li> Steriele sluit de bloedplaatjes schorsing container naar de slang van de amotosalen container op de INTERCEPT verwerking set. </li><li> Label de INTERCEPT verwerking set opslagcontainers met de juiste bloedproduct identificatie na lokale voorschriften. </li><li> Hang de bloedplaatjes en breken eerst de onderste canule op amotosalen container, waardoor de amotosalen oplossing te stromen in de belichtingszak. Breek het topje canule op de amotosalen container waardoor de bloedplaatjes om door de amotosalen container stromen in de belichtingszak. </li><li> Meng voorzichtig de bloedplaatjes en amotosalen mengsel en drukken de lucht uit de belichtingszak in de amotosalen container. </li><li> Drukken een kleine hoeveelheid bloedplaatjes mengsel in de buis, vult ongeveer 4 cm van de buis. Dit zorgt voor bloedplaatjes in zowel de slang en belichtingszak ondergaan de ziekteverwekker inactivatiop de behandeling. </li><li> Sluit de slang tussen de belichtingszak en amotosalen container. Reactie niet meer dan ongeveer 4 cm van de slang zich uitstrekt vanaf de belichtingszak. Verwijder de lege bloedplaatjes en amotosalen containers en sluit de klemmen op de bemonstering zakjes. </li><li> Plaats de bewerkingsset in de lamp met de belichtingszak in het grote compartiment aan de linkerkant en de organisator in het kleinere compartiment aan de rechterkant. </li><li> Gebruik de hand-held barcode apparaat om de donatie ID, productcode, en de verwerking set lotnummer in de verlichting in te voeren. Sluit de metalen kap en wanneer u wordt gevraagd op de illuminator grafische interface, sluit de lade. Druk op &quot;Start&quot; om de verlichting te starten. </li><li> Na verlichting, verwijder de verwerking set van de lichtbron. De verlichting wordt automatisch afgedrukt de behandeling rapport voor de behandelde bloedplaatjes unit (s). </li><li> Haal de containers van de organisator en hang de platelets en bewerkingsset, breken de canule aan de uitgang van het belichtingsstelsel container en laat de plaatjes te stromen in de verbinding adsorptie inrichting (CAD) container. </li><li> Zorg ervoor dat u de CAD-wafer buigen, de lucht drukken van de CAD-container in de belichtingszak met behulp van een plasma afzuigkap. </li><li> Dicht de slang nabij de inlaatpoort van de CAD container. Verwijder de lege belichtingszak. </li><li> Plaats de houder met het CAD aangesloten opslag containers op bloedplaatjes roerder gedurende ten minste 6 uur, maar niet meer dan 16 uur. Dit zal leiden tot vermindering van residuele amotosalen tot een concentratie van ≤ 2 uM. </li><li> Na CAD behandeling, verwijdert u de bloedplaatjes eenheden van het roerwerk. Hang de bloedplaatjes. Breek de canule en laat bloedplaatjes te stromen in de opslag van containers. </li><li> Druk de lucht uit de voorraadvaten in de CAD container. Laat de resterende bloedplaatjes concentraat, terugstromen in de opslag van containers doorzwaartekracht. Sluit de buis boven het Y-stuk en verwijder de lege CAD container. </li><li> Verdeel het volume tussen de voorraadvaten indien nodig. Volume-aanpassingen zijn gemaakt door het wegen van de opslag van containers. Dicht de slang elke voorraadhouder enkele centimeters boven de inlaat van het voorraadvat en dit vergemakkelijkt het verkrijgen van een steriele monster van het eindproduct zoals beschreven in 5.2. </li></ol> 5. Product Sampling <ol><li> Voor routine QC testen, kan de definitieve opslag containers eenmaal bemonsterd met de sampling zakje op de voorraadvaten. Om dit te doen, zorgen voor de bloedplaatjes-eenheid is goed gemengd, open de klem om de zak en knijp meerdere keren. Sluit de slang na de zak is gevuld met bloedplaatjes. Breng de bloedplaatjes monster in een geschikt laboratorium buis en onmiddellijk uit te voeren testen. </li><li> Om monsters te verkrijgen op verschillende tijdstippen in de loop van opslag, zoals voor een valideringsonderzoek steriel verbindeneen nieuwe bemonstering container naar de slang van de bloedplaatjes opslagcontainer. Ervoor zorgen dat bloedplaatjes voorafgaand gemengd over te dragen aan de bemonstering container. </li></ol> 6. In vitro evaluatie Functie <ol><li> Voor deze validatie studie werd in vitro evaluatie uitgevoerd na CAD behandeling (dag 1 of dag 2, afhankelijk van CAD ​​duur) en nogmaals op dag 4 (of Dag 5) en dag 7. In vitro metingen inbegrepen volume, het aantal bloedplaatjes, pH, bloedgas (pO 2, pCO 2), glucose, lactaat, en zwenken. </li><li> Volume werd bepaald door het gewicht met 1,01 g / ml als de dichtheid van bloedplaatjes in bewaarvloeistof. </li><li> Hemoglobine besmetting werd visueel geëvalueerd met behulp van vergelijking met een kleurenkaart. </li><li> Wervelende werd visueel bepaald. </li><li> Zie &quot;Tabel van apparatuur&quot; voor de methodologie van andere testen. </li></ol> 7. Representatieve resultaten De aanmaak van double dosis buffy coat bloedplaatjes begint met de productie van afzonderlijke buffy coats die gericht specificaties voor volume en hematocriet. Aangezien het niet praktisch is om de hematocriet van het individu buffycoats meten tijdens de finale procesvalidatie, begonnen we door het verrichten van een aparte inspanning om onze buffy coats te optimaliseren om ervoor te zorgen dat we konden consequent doelvolume en hematocriet te voldoen. Zoals getoond in Tabel 1, onze geoptimaliseerde buffy coats gunstig vergeleken met de streefwaarden voor volume en hematocriet op 46 ± 2 ml en 37 ± 3%, respectievelijk. Na pooling dient het volume en hematocriet van de buffy coat pool is ongeveer 600 ml en 20% respectievelijk voor de zachte rotatie centrifugeren. Zoals weergegeven in tabel 2, onze buffy coat pools gemiddeld 615 ± 5 ml, de hematocriet gemiddeld 19 ± 1%. De zachte spin-centrifugeren resulteert in een dubbele dosis van bloedplaatjes concEntrate die zal voldoen aan de input voor pathogeeninactivatie gebruik te maken van het INTERCEPT Blood System DS verwerking set. Belangrijke input parameters voor INTERCEPT behandeling onder meer volume, bloedplaatjes, plasma-ratio, en RBC inhoud. Bovendien willen we ≥ 75% van de bloedplaatjes in de bloedplaatjes concentraat terug ten opzichte van de bufferlaag pool. Per lokale eisen, moet de witte bloedcellen (WBC) verontreiniging zijn &lt;1x10 6 / unit. De bloedplaatjesconcentraten in onze validatie de belangrijkste parameters voldaan INTERCEPT behandeling en de doelstellingen voor WBC vervuiling en trombocytenherstel zoals getoond in Tabel 3. De werkwijze voor INTERCEPT pathogeeninactivatie wordt uitgevoerd op een dubbele dosis trombocytenconcentraat met een INTERCEPT bewerkende set. De verwerking set bevat twee geïntegreerde opslagcontainers waardoor het behandelde apparaat te splitsen in twee afzonderlijke therapeutische doses bloedplaatjes bij de voltooiing van de baanOgen inactivatie proces. Europese richtlijnen vereisen dat 75% van de geteste apparatuur ≥ 200x10 9 bloedplaatjes bevatten per therapeutische dose1; lokale vereisten in Zweden eisen dat 75% van de geteste eenheden bevatten&gt; 240x10 9 bloedplaatjes per dosis. Na behandeling met INTERCEPT de gemiddelde trombocytengehalte was 265 ± 22 x10 9 (n = 24). Bovendien, 88% van de eenheden bereikt of overtroffen 240x10 9 bloedplaatjes per therapeutische dosis, dit is ruim binnen zowel de Europese richtlijnen en de Zweedse regelgeving. Zie de figuren 1 en 2 voor een illustratie van de dubbele dosis buffy coat preparaat en INTERCEPT behandelingsprocessen respectievelijk. Voor deze validatie, maten we de in vitro eigenschappen van de bloedplaatjesconcentraten na INTERCEPT behandeling (dat wil zeggen na de splitsing in de individuele opslag van containers); parameters werden gemeten over 7 dagen opslag. Gemiddelde en standaardafwijking werden verzameldbloedplaatjes dosis, pH, pO 2, pCO 2, lactaat productie en glucose verbruik. Figuur 3 toont de gemiddelde bloedplaatjes dosis vanaf de dubbele dosis bloedplaatjesconcentraat voor INTERCEPT behandeling en het gemiddelde bloedplaatjesvolume dosis in elk van de gesplitste producten na INTERCEPT behandeling gedurende 7 dagen opslag. Bloedplaatjes verlies tijdens opslag was ongeveer 9%. Deze vermindering is niet anders dan het verwachte verlies van bloedplaatjes tijdens de opslag van conventionele plaatjes. Twee Tabel 4 vat de in vitro eigenschappen van de INTERCEPT bloedplaatjes na behandeling en splitsen in afzonderlijke eenheden. Per Europese eisen, moet de pH van bloedplaatjes blijven boven 6,4 door het einde van de houdbaarheidstermijn. Tijdens de verwerking, de pH van de bloedplaatjesconcentraten iets daalt gebaseerd op de concentratie van bloedplaatjes, volume en de gaspermeabiliteit van de bloedplaatjes storage container. Figuur 4 illustreert de pH van de split bloedplaatjesproducten over 7 dagen opslag. Tijdens de opslag de pH stabiel en goed onderhouden binnen de verwerkingseisen. Zoals getoond in figuren 5A en 5B, de bloedplaatjes O 2 verbruik en de CO 2 dan verder door de ademhaling INTERCEPT bloedplaatjes in de PL2410 container gedurende 7 dagen opslag. Figuren 6A en 6B tonen het lactaat en glucose niveaus gedurende 7 dagen opslag . Bloedplaatjes glucose consumptie en lactaat productie zijn consistent met elkaar tijdens de 7 dagen van de opslag. 5 eenheden had glucose niveau minder dan 1,11 mmol / l (de ondergrens voor de glucose assay). De buffy coat voorbereiding en bundeling validatie geproduceerd bloedplaatjesconcentraten die voldeden aan de criteria voor de ingang INTERCEPT behandeling, met name, het volume, het aantal bloedplaatjes, plasma-ratio, en rood blood cel contaminatie. De laatste eenheden de validatie criteria voldaan dan 7 dagen opslag waaronder bloedplaatjes dosering en pH. <table border="1"><tbody><tr><td> Parameter </td><td> Doelbereik </td><td> Resultaten Gemiddelde ± SD </td></tr><tr><td> Volume (ml) </td><td> ~ 48 </td><td> 46 ± 2 </td></tr><tr><td> Hematocriet (%) </td><td> ~ 37 </td><td> 37 ± 3 </td></tr><tr><td> Houd tijd voor bundeling van </td><td> Overnachting aan roerwerk </td><td> Overnachting aan roerwerk </td></tr></tbody></table> Tabel 1. Kenmerken van de individuele Buffy Coats (n = 19). <table border="1"><tbody><tr><td> Parameter </td><td> Doelbereik </td><td> Resultaten Gemiddelde ± SD </td></tr><tr><td> Volume (ml) </td><td> ~ 600 </td><td> 615 ± 5 </td></tr><tr><td> Hematocrit (%) </td><td> ~ 20 </td><td> 19 ± 1 </td></tr><tr><td> Houd tijd voordat centrifugeren </td><td> 1 uur op agitator </td><td> 1 uur op agitator </td></tr></tbody></table> Tabel 2. Kenmerken van de Buffy Coat Pools (n = 12). <table border="1"><tbody><tr><td> Parameter </td><td> Doel </td><td> Resultaten Gemiddelde ± SD </td></tr><tr><td> Volume (ml) </td><td> 370-420 </td><td> 404 ± 8 </td></tr><tr><td> Bloedplaatjes (x10 9 / eenheid) </td><td> 250-700 </td><td> 577 ± 62 </td></tr><tr><td> De gemiddelde herstel van de bloedplaatjes (%) </td><td> ≥ 75 </td><td> 75 ± 4 </td></tr><tr><td> Plasma ratio (%) </td><td> 32-47 </td><td> 38 ± 1 </td></tr><tr><td> RBC (x10 6 / ml) </td><td> ≤ 4 </td><td> 1,2 ± 0,4 </td></tr><tr><td> WBC (x10 6 </sup&gt; / eenheid) </td><td> ≤ 1 </td><td> 0,11 ± 0,1 </td></tr><tr><td> Houd tijd voordat INTERCEPT (uur) </td><td> ≤ einde van dag 1 </td><td> ≤ einde van dag 1 </td></tr></tbody></table> Tabel 3. Kenmerken van de dubbele dosis bloedplaatjesconcentraten (n = 12). <table border="1"><tbody><tr><td></td><td> Gemiddelde ± SD </td><td> Min </td><td> Max </td></tr><tr><td> Volume (ml) </td><td> 199 ± 16 </td><td> 182 </td><td> 236 </td></tr><tr><td> Bloedplaatjes (x10 9 / eenheid) </td><td> 265 ± 22 </td><td> 225 </td><td> 292 </td></tr><tr><td> pH (22 ° C) </td><td> 6,9 ± 0,1 </td><td> 6,8 </td><td> 7,0 </td></tr><tr><td> pO 2 (kPa) </td><td> 21,4 ± 4,8 </td><td> 12,8 </td><td> 27,3 </td></tr><tr><td> pCO 2 (kPa) </td><td> 4,3 &amp; plusmn; 0,4 </td><td> 3,3 </td><td> 4,9 </td></tr><tr><td> Lactaat (mmol / l) </td><td> 9,1 ± 1,7 </td><td> 6,8 </td><td> 12,4 </td></tr><tr><td> Glucose (mmol / l) </td><td> 5,3 ± 0,9 </td><td> 3,7 </td><td> 6,5 </td></tr></tbody></table> Tabel 4. Kenmerken van het INTERCEPT behandelde bloedplaatjes Dag 1/2 (Single-eenheden, n = 24). <img alt="Figuur 1" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig1.jpg" /> Figuur 1. Productie van een dubbele dosis trombocytenconcentraat uit een pool van 7 buffy coats. <img alt="Figuur 2" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig2.jpg" /> Figuur 2. Pathogeeninactivatie van een dubbele dosis van bloedplaatjes concentraat met het INTERCEPT Blood System. <img alt="Figuur 3" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig3.jpg" /> Figuur 3. Gemiddelde bloedplaatjesvolume dosis voor en7 dagen na INTERCEPT behandeling (n = 12 voor INTERCEPT; n = 24 na INTERCEPT). <img alt="Figuur 4" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig4.jpg" /> Figuur 4. Gemiddelde bloedplaatjesvolume pH ± SD na INTERCEPT behandeling (n = 24). <img alt="Figuur 5A" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig5a.jpg" /> Figuur 5A. Gemiddelde ± SD pO 2 na INTERCEPT behandeling (n = 24). <img alt="Figuur 5B" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig5b.jpg" /> Figuur 5B. Gemiddelde ± SD pO 2 na INTERCEPT behandeling (n = 24). <img alt="Figuur 6A" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig6a.jpg" /> Figuur 6A. Gemiddelde ± SD lactaatniveaus na INTERCEPT behandeling (n = 24). <img alt="Figuur 6B" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig6b.jpg" /> Figuur 6B. Gemiddelde glucosespiegels &amp;plusmn; SD na INTERCEPT behandeling (n = 24).

<ol><li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+to+the+preparation%2C+use+and+quality+assurance+of+blood+components%22">Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components</a>. , 16th, Council of Europe. (2010).</li>
<li>Van Rhenen, D. J., Vermeij, J., Mayaudon, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+characteristics+of+S-59+photochemically+treated+platelet+concentrates+derived+from+buffy+coats%5BTitle%5D)+AND+%22Vox+Sang%22%5BJournal%5D)">Functional characteristics of S-59 photochemically treated platelet concentrates derived from buffy coats.</a> Vox Sang. 79, 206-214 (2000).</li>
<li>Wollowitz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+DNA+and+RNA+in+pathogens%3A+mode+of+action+of+amotosalen+HCl%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus.+Med.+Rev%22%5BJournal%5D)">Targeting DNA and RNA in pathogens: mode of action of amotosalen HCl.</a> Transfus. Med. Rev. 31, 11-16 (2004).</li>
<li>Irsch, J., Lin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogen+Inactivation+of+Platelet+and+Plasma+Blood+Components+for+Transfusion+Using+the+INTERCEPT+Blood+SystemTM%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus.+Med.+Hemother%22%5BJournal%5D)">Pathogen Inactivation of Platelet and Plasma Blood Components for Transfusion Using the INTERCEPT Blood SystemTM.</a> Transfus. Med. Hemother. 38, (2011).</li>
<li>Lin, L., Dikeman, R., Molini, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photochemical+treatment+of+platelet+concentrates+with+amotosalen+and+long-wavelength+ultraviolet+light+inactivates+a+broad+spectrum+of+pathogenic+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Photochemical treatment of platelet concentrates with amotosalen and long-wavelength ultraviolet light inactivates a broad spectrum of pathogenic bacteria.</a> Transfusion. 44, 1496-1504 (2004).</li>
<li>Lin, L., Hanson, C., Alter, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inactivation+of+viruses+in+platelet+concentrates+by+photochemical+treatment+with+amotosalen+and+long-wavelength+ultraviolet+light%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Inactivation of viruses in platelet concentrates by photochemical treatment with amotosalen and long-wavelength ultraviolet light.</a> Transfusion. 45, 580-590 (2005).</li>
<li>Allain, J. P., Cianco, C., Blajchman, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protecting+the+blood+supply+from+emerging+pathogens%3A+the+role+of+pathogen+inactivation%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus.+Med.+Rev%22%5BJournal%5D)">Protecting the blood supply from emerging pathogens: the role of pathogen inactivation.</a> Transfus. Med. Rev. 19, 110-126 (2005).</li>
<li>Stramer, S., Hollinger, F., Katz, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+infectious+disease+agents+and+their+potential+threat+to+transfusion+safety%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Emerging infectious disease agents and their potential threat to transfusion safety.</a> Transfusion. 49, 1S-29S (2009).</li>
<li>Nussbaumer, W., Allesdorfer, D., Grabmer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+transfusion+of+platelet+components+contaminated+with+low+levels+of+bacteria%3A+a+comparison+of+bacteria+culture+and+pathogen+inactivation+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Prevention of transfusion of platelet components contaminated with low levels of bacteria: a comparison of bacteria culture and pathogen inactivation methods.</a> Transfusion. 47, 1125-1133 (2007).</li>
<li>Schlenke, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+against+Transfusion-Associated+Graft-versus-Host+Disease+in+Blood+transfusion%3A+Is+Gamma-Irradiation+the+Only+Answer%3F+Transfus%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Hemother%22%5BJournal%5D)">Protection against Transfusion-Associated Graft-versus-Host Disease in Blood transfusion: Is Gamma-Irradiation the Only Answer? Transfus.</a> Med. Hemother. 31, 24-31 (2004).</li>
<li>Lin, L., Corash, L., Osselear, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+Against+TA-GVHD+Due+to+Platelet+Transfusion+By+Using+Pathogen+Inactivation+with+the+INTERCEPT+Blood+SystemTM+-+Gamma+Irradiation+is+Not+the+Only+Answer%5BTitle%5D)+AND+%22Haematologica%22%5BJournal%5D)">Protection Against TA-GVHD Due to Platelet Transfusion By Using Pathogen Inactivation with the INTERCEPT Blood SystemTM - Gamma Irradiation is Not the Only Answer.</a> Haematologica. 95 (Extra 1), 230-237 (2010).</li>
<li>Corash, L., Lin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+processes+for+inactivation+of+leukocytes+to+prevent+transfusion-associated+graft-verus-host+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Marrow+Transplant%22%5BJournal%5D)">Novel processes for inactivation of leukocytes to prevent transfusion-associated graft-verus-host disease.</a> Bone Marrow Transplant. 33, 1-7 (2004).</li>
</ol>

Productie en gratis toegang tot dit artikel wordt gesponsord door Cerus.

Buffy coat-bloedplaatjes vereisen verschillende processtappen die resulteren in post-incassokosten, daaronder begrepen het personeel tijd, verbruiksgoederen, apparatuur en afval, die moet rekening worden gehouden de totale kosten van de productie van de eenheden bloedplaatjes. Verbetering van de opbrengst van elke bloedplaatjes buffy coat (via optimale buffy coat volume en hematocriet) maakt de productie van een dubbele dosis buffy coat bloedplaatjes eenheid uit een pool van zeven buffy coats. Wanneer deze optimalisatie wordt uitgevoerd, het aantal buffy coats nodig is om een ​​vast aantal bloedplaatjes doseringen kan worden verminderd, zodat de algemene gebruik van buffy coats en die de productie van extra bloedplaatjesconcentraten (PC). Personeel tijd en verbruiksartikelen en apparatuur kosten zoals poolen sets, bloedplaatjes bewaarvloeistof, steriele verbinding wafels, filter sets, en centrifugeren procedures worden verminderd tot 50%. Naast het optimaliseren van bloedplaatjes en vermindering van bijkomende kosten, this poolingmethode genereren een trombocytenconcentraat (PC) die de ingang voorwaarde voor gebruik met de INTERCEPT dual voorraadvat verwerking voldoet, zodat we betere bescherming aan onze bloedtransfusie ook. De INTERCEPT Blood System voor pathogeeninactivatie gebruikt amotosalen en ultraviolet A (UVA) licht covalent verknopen DNA en RNA, waardoor nucleïnezuurreplicatie en rendering pathogenen geen ziekte veroorzaken. 3 feitelijk een breed spectrum aan pathogenen inactiveert waaronder virussen, bacteriën , parasieten en vervuilende donor witte bloedcellen. 4 tot 6 INTERCEPT biedt een alternatief voor de huidige testen paradigma voor de opkomende pathogenen, die in het verleden een aanmerkelijke vertraging, terwijl een nieuwe test wordt ontwikkeld en uiteindelijk vergt een aanzienlijke financiële investering te implementeren om bij een test beschikbaar komt. 7,8 Het kan ook een alternatief bieden voor redundante veiligheid meetres zoals bacteriële detectie 9 en gammastraling. 10-12 in Daarnaast INTERCEPT stelt ons in staat om te behandelen dubbele dosis eenheden bloedplaatjes die profiteert onze productie-efficiëntie en helpt ons voldoen aan onze budgetten. Onderscheppen en de dubbele dosis buffy coat methode kan worden aangepast aan verschillende bloedcentrum workflows. Als voorbeelden kunnen geheel bloedafname worden verhoogd tot 500 ml, collecties kunnen ook &#39;s nachts bewaard bij 22 ° C voor de scheiding. Bovendien een alternatieve buffy coat poolingmethode mogelijk (bijvoorbeeld een octopus methode in plaats van een trein methode) en / of een geautomatiseerd apparaat (bijv. TACSI) kan worden gebruikt voor de tweede centrifugatie en scheiding van de bloedplaatjessuspensie van de resterende rode cellen . Als verhoogde trombocytengehalte nodig verschillende technieken beschikbaar zoals voorselectie van donoren op basis van bloedplaatjes, overnacht incubatie van het volbloed, het bijstellentment van centrifugeren instellingen, of gebruik te maken van een zwembad van 8 buffy coats in plaats van 7. Door de beperking van pooling stelt momenteel beschikbaar is en de centrifuge van emmers, wanneer het totale volume van de bufferlaag pool van circa 600 ml. Het centrifugeren proces en instellingen die in dit protocol zijn geoptimaliseerd om product dat de INTERCEPT parameters voldoet voor een zwembad van 7 buffycoats opleveren. De centrifugatie instellingen moeten worden aangepast wanneer het aantal buffy coats in het zwembad wordt gewijzigd. In sommige landen, de minimale bloedplaatjes dosis hoger is en het QC eisen zijn strenger dan in Zweden. Als zodanig kan onze resultaten niet universeel toepasbaar zijn. In deze landen zal de dubbele dosis pc alvorens het te INTERCEPT behandeling nodig om een ​​groter aantal bloedplaatjes bevatten om aan de lokale vereisten na behandeling met INTERCEPT en split. Omdat de maximale bloedplaatjes inhoud behandelingsvolume for INTERCEPT zijn respectievelijk 7x10 11 bloedplaatjes en 420 ml, is het percentage van eenheden die het INTERCEPT verwerking te overtreffen of onvoldoende bloedplaatjes inhoud te splitsen in twee therapeutische doses variëren, afhankelijk van factoren zoals de lokale vereisten voor bloedplaatjes dosis, QC criteria, buffy coat optimalisatie resulteert en productie stabiliteit. Indien een dubbele dosis PC overschrijdt INTERCEPT verwerkingseisen kunnen handmatig worden aangepast aan de eisen en vervolgens behandeld. In die paar gelegenheden waar de 7-buffy-coat zwembad onvoldoende bloedplaatjes levert voor een dubbele dosis product na INTERCEPT, we ervoor kiezen om de INTERCEPT behandeling uit te voeren. Als alternatief kunnen andere bloed centra voor kiezen om de PC te behandelen met een enkele dosis INTERCEPT verwerking set (dat wil zeggen het grote volume set) en de PC op te slaan als een enkele grotere therapeutische dosis, waardoor het uitvoeren van pathogeeninactivatie op alle units. Om ervoor te zorgen dat we voldoen aan onzeQC eisen en pathogenen inactiveren zoveel van onze eenheden bloedplaatjes mogelijk we buffy coats op basis van de donor bloedplaatjes, die wanneer samengevoegd, zal resulteren in een minimale trombocytengehalte van 5.6x10 11 bloedplaatjes in de pool selecteren. Daardoor is er voldoende trombocytengehalte twee therapeutische doses na behandeling INTERCEPT produceren. De validatie blijkt dat 7 volbloed verkregen buffy coat units succes kan worden samengevoegd en behandeld met de INTERCEPT werkwijze voor bloedplaatjes, wat resulteert in 2 pathogeen geïnactiveerd bloedplaatjesproducten die aan de acceptatiecriteria voor de industrie (Zweedse eisen en Europese richtlijnen) en begeleiding van patiënten waarbij bloedplaatjes transfusies volgens klinische richtlijnen en standaard bloedplaatjes infusie methoden in Zweden.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Donatie van volbloed, primaire scheiding en productie van bloedplaatjes</td></tr><tr><td>Bloedafnameset</td><td>Fenwal</td><td>R6485</td><td>Top/Bottom set</td></tr><tr><td>Geautomatiseerde componentextractor</td><td>Fenwal</td><td>Optipress-II</td><td></td></tr><tr><td>Bloedmeng- en weegsysteem</td><td>Baxter</td><td>Easymix V3</td><td></td></tr><tr><td>Filtratieset voor bloedplaatjes en leukocyten</td><td>Fenwal</td><td>K4R7042</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>Hettich</td><td>Roto Silenta 63 RS</td><td>Versie 5.5</td></tr><tr><td>Additieve oplossing voor bloedplaatjes - SSP+</td><td>MacoPharma</td><td>SSP2030U</td><td>300 ml</td></tr><tr><td>Steriele slanglasapparaat</td><td>Terumo</td><td>T-SCD</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">INTERCEPT-behandeling &amp;amp; opslag</td></tr><tr><td>INTERCEPT-verwerkingsset</td><td><a href="http://www.interceptbloodsystem.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Cerus</a></td><td>INT2503</td><td>Dual Storage (DS) set</td></tr><tr><td>INTERCEPT-illuminator</td><td><a href="http://www.interceptbloodsystem.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Cerus</a></td><td>INT100</td><td></td></tr><tr><td>PC-monsterpack</td><td>Fenwal</td><td>FTX 1122</td><td></td></tr><tr><td>Incubator</td><td>Helmer</td><td>PC2200/PC3200</td><td></td></tr><tr><td>Agitator</td><td>Helmer</td><td>PF48H/PF96H</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Evaluatie van &lt;em&gt;in vitro&lt;/em&gt; bloedplaatjesfunctie</td></tr><tr><td>Bloedgasanalyser</td><td>Radiometer</td><td>ABL 735</td><td>Gebruikt voor meting van pH, bloedgassen en lactaat</td></tr><tr><td>Chemiesysteem</td><td>Ortho Clinical Diagnostic</td><td>Vitros 5.1</td><td>Gebruikt voor glucosemeting</td></tr><tr><td>Hematologieanalyser</td><td>Boule Medical AB</td><td>Medonic CA620-Cellguard</td><td>Gebruikt voor meting van het aantal bloedplaatjes</td></tr><tr><td>Flowcytometer</td><td>BD</td><td>FACSCanto</td><td>Gebruikt voor meting van het aantal witte bloedcellen</td></tr></tbody></table>

voorbereiding en pathogeeninactivatie van double dose buffy coat bloedplaatjesproducten met behulp van het intercept blood system

Preparation and Pathogen Inactivation of Double Dose Buffy Coat Platelet Products using the INTERCEPT Blood System

Bloed centra worden geconfronteerd met tal van uitdagingen, waaronder maximaliseren van de productie opbrengst van het bloedproduct donaties die ze ontvangen, alsmede het waarborgen van de hoogst mogelijke niveau van veiligheid voor transfusie patiënten, waaronder bescherming tegen transfusie overdraagbare aandoeningen. Dit moet worden verwezenlijkt in een fiscaal verantwoorde manier waarop operationele kosten inclusief verbruiksgoederen, apparatuur, afval, en personeelskosten, onder anderen minimaliseert. Verschillende werkwijzen zijn te produceren bloedplaatjesconcentraten voor transfusie. Een van de meest voorkomende is de buffy coat methode waarbij een therapeutisch bloedplaatjes unit (≥ 2,0 x10 11 bloedplaatjes per eenheid of per lokale regelgeving) wordt bereid door het poolen van de buffercoatingslaag uit zes volbloeddonaties. Een procedure voor het produceren van &quot;dubbele dosis&quot; volbloed afgeleid bloedplaatjes is pas onlangs ontwikkeld. Hier gepresenteerde een nieuwe werkwijze voor het bereidendubbele dosis volbloed afgeleid bloedplaatjesconcentraten van zwembaden van 7 buffy coats en vervolgens behandelen van het dubbele dosis eenheden met het INTERCEPT Blood System voor pathogeeninactivatie. INTERCEPT is ontwikkeld om virussen, bacteriën, parasieten en contaminerende donor witte bloedcellen die aanwezig kunnen zijn in gedoneerd bloed te inactiveren. Koppelen snijpunt met de dubbele dosis buffy coat-methode door gebruik te maken van het INTERCEPT Processing Set met Dual Storage Containers (de &quot;DS set&quot;), kan het bloed centra voor de behandeling van elk van hun dubbele dosis eenheden in een enkele pathogeen inactivatie verwerking set, waardoor het maximaliseren van de veiligheid van patiënten terwijl het minimaliseren van de kosten. De dubbele dosis buffy coat methode vergt minder buffy coats en vermindert het gebruik van toebehoren met 50% (bijvoorbeeld pooling sets, filtersets, bloedplaatjes bewaarvloeistof en steriele verbinding wafers) in vergelijking met Bereiding en behandeling van enkele dosis buffy coat eenheden bloedplaatjes . Andere kostenbesparingen zijn minder afval, minder apparatuur maintenance, lager stroomverbruik, minder personeel de tijd, en lagere collectie kosten in vergelijking met de aferese techniek.

Dit artikel beschrijft het proces wordt gebruikt door Örebro University Hospital om een ​​dubbele dosis buffy coat bloedplaatjesconcentraten bereid uit volbloed donaties en behandeld met het INTERCEPT Blood System voor pathogeeninactivatie produceren. De<em&gt; In vitro</em&gt; Kwaliteit van de uiteindelijke eenheden bloedplaatjes worden geëvalueerd over 7 dagen opslag.

Voorbereiding en pathogeeninactivatie van Double Dose Buffy Coat bloedplaatjesproducten met behulp van het INTERCEPT Blood System

Bloedcentra staan voor tal van uitdagingen, waaronder het maximaliseren van de productieopbrengst van de ontvangen bloedproductdonaties en het waarborgen van de ...

In deze video wordt een dubbele dosis trombocytenconcentraat bereid uit een pool van zeven buffy coats en vervolgens behandeld met Intercept. Na het bekijken van deze video heeft u een goed inzicht in hoe u een pathogeen-geïnactiveerd dubbel-dosis trombocytenconcentraat produceert. Eerst presenteren we een schematisch overzicht, gevolgd door een demonstratie.De eerste zeven eenheden gedoneerd volbloed worden gecentrifugeerd en gescheiden om zeven buffy coat-eenheden te verkrijgen die voldoen aan de volume- en hematocrietdoelen. De buffy coats worden verbonden, samengevoegd en gecentrifugeerd. De bloedplaatjessuspensie wordt vervolgens gescheiden van de resterende rode bloedcellen om een dubbele dosis plaatjesconcentraat te produceren voor de inactivatie van pathogenen en leukocyten.Het dubbele dosis trombocytenconcentraat wordt behandeld met het Intercept-systeem, dat nucleïnezuren crosslinkt. Uiteindelijk levert deze procedure twee therapeutische trombocytendoses op met een acceptabele in vitro kwaliteit over zeven dagen bewaring, bepaald door de beoordeling van pH, glucose, lactaat, PO₂ en PCO₂, en het aantal trombocyten. Een technicus van het bloedcentrum zal de procedure demonstreren en wij zullen de verwerkingseisen beschrijven.Controleer eerst of het dubbele dosis trombocytenconcentraat voldoet aan de intercept-verwerkingsspecificaties van 300 tot 420 milliliter, een volume van 2,5 tot 7 × 10¹¹ aan trombocyten en minder dan 4 × 10⁶ rode bloedcellen per milliliter. Begin deze procedure met zeven eenheden volbloed, verzameld in 450 milliliter top-bottom collectiesets.Plaats de bloedzakken in centrifugebuizen en voer een harde centrifugatie uit bij 4,880 RCF gedurende 11 minuten bij kamertemperatuur met reminstelling B vijf volgens de instructies van de fabrikant. Na de centrifugatie zal het bloed gescheiden zijn in drie lagen: rode bloedcellen, de buffy coat en plasma. Pers het plasma in de bovenste satellietzak en de rode bloedcellen in de onderste satellietzak, waarbij de buffy coat van ongeveer 48 milliliters en 37% hematocriet in de opvangcontainer achterblijft.Plaats de buffy coats gedurende de nacht bij kamertemperatuur op een plaatjesagitator en maak een steriele verbinding tussen zeven buffy coats en 300 milliliters SSP plus plaatjesadditieve oplossing. Klem in een treinkonfiguratie, met de additieve oplossing bovenaan, de lijn tussen de additieve oplossing en de eerste buffy coat af zoals hier wordt getoond. Open de lassen tussen de buffy coat-eenheden en laat ze in de laatste buffy coat-container lopen.Open vervolgens de klem en de verbinding tussen de additieve oplossing en de eerste buffycoat, en laat ongeveer een derde van de additieve oplossing, circa 100 milliliters, sequentieel door elk van de buffycoat-containers spoelen voordat de klem wordt gesloten; herhaal deze wasbeurt nog twee keer, waarbij telkens ongeveer 100 milliliters van de additieve oplossing wordt gebruikt. Koppel de container met de verzamelde buffycoat los van de lege containers. Het volume van de verzamelde buffycoat, inclusief de additieve oplossing, moet ongeveer 600 milliliters zijn.Plaats de samengevoegde buffycoats gedurende één uur bij kamertemperatuur op een agitator. Verbind vervolgens een bewaarbehulpstuk voor bloedplaatjes met een geïntegreerd leuco-reductiefilter met de zak die de pool van buffycoats bevat. Plaats de samengevoegde buffycoats en het bewaarbehulpstuk voor bloedplaatjes in een centrifuge en centrifugeer gedurende negen minuten en 20 seconden bij 462 RCF.Breng na het centrifugeren de plaatjessuspensie via het Luca-reductiefilter over in de bewaarcontainer voor bloedplaatjes. Het resultaat is een dubbele dosis plaatjesconcentraat met ongeveer zeven x 10¹¹ bloedplaatjes in 420 milliliters, dat behandeld kan worden met Intercept voor pathogeneninactivering. Het dubbele dosis plaatjesconcentraat wordt behandeld met een Intercept-verwerkingsset, bestaande uit een antoin-container, een belichtingscontainer en dubbele bewaarcontainers.Sluit de houder van de bloedplaatjessuspensie aan op de Amin-houder van de intercept-verwerkingsset. Hang vervolgens de bloedplaatjes op. Breek de onderste canule op de Amin-houder om de oplossing naar de verlichtingshouder te laten stromen.Breek vervolgens de bovenste canule van de Amin-container zodat de bloedplaatjes door de Amin-container in de illuminatiecontainer kunnen stromen. Meng het mengsel van bloedplaatjes en am tosin voorzichtig. Knijp lichtjes in de illuminatiecontainer om de lucht uit de illuminatiecontainer te persen.Sluit de slang tussen de verlichtings- en amato-container af, zodat er niet meer dan vier centimeter slang uit de verlichtingscontainer steekt. Verwijder en gooi de lege containers weg. Plaats de verwerkingsset in de illuminator, met de verlichtingscontainer in het grote compartiment aan de linkerkant en de organizer in het kleinere compartiment aan de rechterkant.Scan het donatie-id. Productcode en verwerking. Stel het lotnummer in op de illuminator.Sluit de metalen afdekking en de lade. Druk op start om de belichting te beginnen. De illuminator geeft een gecontroleerde dosis UVA-licht aan het plaatjes-aminmengsel in de belichtingscontainer.Amine koppelt tussen de baseparen van de nucleïnezuren van pathogenen die in de bloedplaatjesunit aanwezig kunnen zijn. Na belichting worden permanente crosslinks gevormd die het DNA of RNA aan elkaar vergrendelen, waardoor de pathogenen zich niet langer kunnen repliceren en geen ziekte meer kunnen veroorzaken bij de ontvanger van het bloedproduct. Verwijder na de belichting de verwerkingsset.Pak vervolgens de containers uit de houder en hang de bloedplaatjes en de verwerkingsset op. Breek de canule bij de uitlaat van de verlichtingscontainer en laat de bloedplaatjes in de CAD-container stromen. In de CAD-container bevindt zich een wafer met geïmmobiliseerde macroporeuze polystyreenbolletjes die de hoeveelheid residu-aminen in het bloedproduct verminderen.Zorg ervoor dat de CAD-wafer niet buigt. Laat de lucht uit de CAD-container in de verlichtingscontainer stromen. Sluit de slang af nabij de inlaatpoort van de CAD-container.Verwijder de lege belichtingscontainer en gooi deze weg. Plaats de CAD-container met de bijbehorende bewaarcontainers gedurende zes tot 16 uur op een plaatjesroerder. Dit zal leiden tot een vermindering van het residuele amline tot een concentratie van minder dan of gelijk aan twee micromolair.Verwijder na de CAD-behandeling de bloedplaatjeseenheden uit de agitator, hang de bloedplaatjes op, breek de canule bij de uitlaat van de CAD-container en laat de bloedplaatjes in de twee bewaarbunners stromen. Pers vervolgens de lucht uit de bewaarbehakers. Afdichten van de slang boven de Y-koppeling en verwijder de CAD-container.Het resultaat is twee pathogeen-geïnactiveerde bloedplaatjesconcentraten om de in vitro plaatjesfunctie te beoordelen. De plaatjesdosis, pH, pO₂ en de productie van lactaat en glucoseconsumptie van het intercept werden bepaald voor de bloedplaatjesconcentraten tot dag zeven van de bewaring.Deze figuur toont de gemiddelde startdosis bloedplaatjes van het dubbele dosis bloedplaatjesconcentraat vóór de intercept-behandeling, en de gemiddelde bloedplaatjesdosis in elk van de behandelde gesplitste producten tot dag zeven van de bewaring. Zoals hier te zien is, was het verlies aan bloedplaatjes tijdens de bewaring ongeveer 9%. Deze afname verschilt niet van het verwachte verlies aan bloedplaatjes tijdens de bewaring van conventionele bloedplaatjes. Volgens de Europese vereisten moet de pH van bloedplaatjes tot het einde van de houdbaarheidsduur boven 6.4 blijven.Tijdens de verwerking daalt de pH van bloedplaatjesconcentraten licht, afhankelijk van het volume van de bloedplaatjesconcentratie en de gasdoorlaatbaarheid van de bewaarcontainer voor bloedplaatjes. Deze figuur toont de pH van de gesplitste bloedplaatjesproducten over zeven dagen bewaring; gedurende de bewaring is de pH stabiel en blijft deze goed behouden binnen de verwerkingseisen. Aerobe stofwisseling dient in bewaarde bloedplaatjes te blijven plaatsvinden en is een indicator voor het vermogen van de bloedplaatjes om in vivo te functioneren na transfusie in een patiënt.Het O2-verbruik en de CO2-productie van de bloedplaatjes wijzen op een voortdurende respiratie door de intercept-bloedplaatjes in de PL 24 10-container gedurende zeven dagen bewaring. Evenzo zou het anaerobe metabolisme in bewaarde bloedplaatjes moeten doorgaan. Daarom zijn glucoseverbruik en lactaatproductie eveneens indicatoren voor het vermogen van de bloedplaatjes om na transfusie te functioneren.Deze twee figuren tonen de lactaat- en glucoseniveaus over zeven dagen bewaring. Het glucoseverbruik en de lactaatproductie van de bloedplaatjes zijn consistent met elkaar. Gedurende de zeven dagen bewaring hadden vijf eenheden glucoseniveaus van minder dan 1,11 millimol per liter, wat de ondergrens is voor de glucose-assay.De bereiding en pooling-validatie van de buffy coat hebben geleid tot trombocytenconcentraten die voldoen aan de inputcriteria voor intercept-behandeling, specifiek wat betreft volume, trombocytenaantal, plasmaratio en contaminatie met rode bloedcellen. De uiteindelijke eenheden voldoen aan de validatiecriteria over zeven dagen bewaring, inclusief de trombocytendosis en pH. Het belangrijkste voordeel van deze techniek ten opzichte van de conventionele methode voor de bereiding van buffy coat, waarbij een enkelvoudige dosis trombocytenconcentraat wordt geproduceerd, is dat het de opbrengst van componenten uit bloedafnames maximaliseert, de operationele kosten verlaagt door gebruik te maken van een dubbele dosistechniek en de patiëntveiligheid verbetert door transmissie-pathogenen bij transfusies te inactiveren.

preparation-pathogen-inactivation-double-dose-buffy-coat-platelet

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

In this video, we demonstrate the isolation of peripheral blood mononuclear cells, PBMCs, containing monocytes and lymphocytes from a human buffy coat by density gradient centrifugation. The isolated PBMCs can be used for further analysis.

Isolation of Peripheral Blood Mononuclear Cells from Human Buffy Coats

In this video, we describe a protocol for purifying platelets from murine whole blood and their subsequent activation with the platelet agonist thrombin. When analyzed with flow cytometry, the purified resting platelets are characterized based on the expression of their cell-surface marker CD41, whereas purified activated platelets co-express both the surface markers CD41 and CD62P.

Purification and Activation of Platelets from Murine Whole Blood

This video demonstrates the riboflavin and UV light-based pathogen reduction process against high-titer bacterial contamination in human platelet products. This process could help to lower the risk of severe adverse transfusion events associated with bacterial contamination.

A Riboflavin and UV Light Treatment of Platelet Products to Eliminate Bacteria

De opslagomstandigheden van bloedplaatjesproducten creëren een ideale omgeving voor bacteriële verontreinigingen om zich te vermenigvuldigen tot gevaarlijke niveaus. Het doel van deze studie was om een koloniaal vormingstest te gebruiken om een riboflavine-gebaseerd ziekteverwekkerreductieproces te evalueren tegen bacteriële besmetting met hoge titer in humane bloedplaatjesproducten.

Behandeling van bloedplaatjes Producten met riboflavine en UV-licht: Effectiviteit tegen hoge titer bacteriële besmetting

Trombocyttransfusie en hemostase werden gemodelleerd met behulp van bloedreconstitutie en microfluïdische stroomkamers om de functie van bloedbanktrombocyt te onderzoeken. De gegevens tonen de gevolgen van trombocyt-opslageffect op hemostase, in vitro aan.

Microfluïdische Flow Chambers behulp Gereconstitueerde Blood voor Model hemostase en bloedplaatjestransfusie<em&gt; In Vitro</em

In deze paper beschrijven we een methode om te beoordelen endothelial von Willebrand factor release en de daaropvolgende bloedplaatjes vangen onder vloeistof shear stress in reactie op inflammatoire stimuli met behulp van een in vitro kamer-stroomsysteem.

Onderzoeken van von Willebrand Factor pathofysiologie met behulp van een Flow kamer Model van von Willebrand Factor-bloedplaatjes String vorming

Bloedplaatjes voorraadbeheer gebaseerd op screening microparticle inhoud in bloedplaatjes concentraten is een nieuw initiatief van de verbetering van de kwaliteit in ziekenhuisbloedbanken. Het doel is om te onderscheiden van niet-geactiveerde bloedplaatjes aan optimaal gebruik van de bloedplaatjes geactiveerd. Verstrekken van niet-geactiveerde bloedplaatjes aan hematologie-oncologie patiënten kan hun hoge risico tot vuurvaste.

Routine Screening Method voor microdeeltjes in bloedplaatjes transfusies

Dit protocol biedt een toegankelijke gids voor het verzamelen, bewaren en ontdooien van perifere mononucleaire bloedcellen die geschikt zijn voor stroomafwaartse analyses en workflows zoals flowcytometrie en RNA-sequencing. Plasma- en buffy-jascollecties worden ook gedemonstreerd.

Isolatie en cryopreservatie van zeer levensvatbare mononucleaire cellen van menselijk perifeer bloed uit volbloed: een gids voor beginners

Dit protocol beschrijft een high-throughput automatisering-compatibele methode om menselijke perifere bloed mononucleaire cellen te isoleren voor biobanking en andere doeleinden.

Het isoleren van Menselijke Perifere Bloed Mononucleaire Cellen van Buffy Coats via de Scheiding van de Hoge Doorvoer Immunomagnetische Parel

De bloedplaatjesfunctie onder stroom kan worden beoordeeld en gesimuleerde hemostatische reanimatie kan worden gemodelleerd met behulp van een microfluïdisch apparaat, dat toepassingen heeft in de trauma- en transfusiegeneeskunde.

Microfluïdica bij het beoordelen van de bloedplaatjesfunctie

Het metabolisme van bloedplaatjes is van belang, vooral omdat het betrekking heeft op de rol van hyper- en hypoactiviteit van bloedplaatjes bij bloedingen en trombotische aandoeningen. Het isoleren van bloedplaatjes uit plasma is noodzakelijk voor sommige metabole testen; Hier wordt een methode gepresenteerd voor het isoleren van intracellulaire metabolieten uit gewassen bloedplaatjes.

Preparaat van gewassen menselijke bloedplaatjes voor kwantitatieve metabole fluxstudies

Leer de bereiding van dubbele dosis buffy coat bloedplaatjes met het INTERCEPT Blood System voor pathogeeninactivatie. Deze methode waarborgt veilige transfusies en behoudt kwaliteit gedurende zeven dagen opslag.

Voorbereiding en pathogeeninactivatie van Double Dose Buffy Coat bloedplaatjesproducten met behulp van het INTERCEPT Blood System (Video) | JoVE Journal

Voorbereiding en pathogeeninactivatie van Double Dose Buffy Coat bloedplaatjesproducten met behulp van het INTERCEPT Blood System

Meer video's verkennen