Name: Intranasale toediening van CNS Therapeutics naar Awake Muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-04-08T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 15 s
Description: Leer intranasale toediening van CNS-therapeutics bij wakker muizen zonder anesthesie. Deze methode richt medicijnen rechtstreeks op het centrale zenuwstelsel en minimaliseert systemische blootstelling.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

De auteurs willen graag de HealthPartners Institutionele Animal Care bedanken en Comite Gebruik bij Regio&#39;s Hospital.

1. Acclimatisatie aan Handeling voor intranasale dosering te Awake Muizen Introductie Muizen worden geacclimatiseerd behandeling gedurende twee tot vier weken voor het begin van intranasale toediening. Acclimatisatie aan behandeling is belangrijk, omdat het helpt zorgen voor een juiste lichaamshouding voor een maximale doeltreffendheid van wakker intranasale toediening van medicijnen. Bovendien kunnen muizen die niet goed gewend aan dit proces een ernstige angst reactie na toediening. Muizen moet besteden ongeveer 2-3 dagen op elk van negen stappen alvorens naar de volgende stap, afhankelijk van het comfort van het dier te hanteren. De muis stress worden gebruikt als een maat voor de voortgang. Dit betekent dat het toezicht op de muis de bewegingen, de hoeveelheid / frequentie van het plassen, ontlasting, beven, en bijten. Als een muis heeft een hoge stress respons, blijf op die stap voor doorgaat naar de volgende totdat de respons wordt verminderd. Een voorbeeld van een acclimatisatie schedule te zien in Tabel 1. Acclimatisering van de muizen, moet worden door de volgende keer per dag stappen. Deze stappen meerdere keren per dag, in een poging om de acclimatisering versnellen, wordt niet aanbevolen. <ol><li> Plaats de muis in de palm van de hand gedurende twee tot drie minuten niet meer dan een voet boven de kooi top aangezien dieren vaak springen tijdens deze inleidende stap. Als de muis probeert te kruipen van de hand en up one&#39;s arm, gewoon de muis optillen door de basis van de staart en plaats het terug in de hand. </li><li> Plaats de muis in de palm van de hand gedurende drie minuten en huisdier het dier voorzichtig. Pet de muis directioneel van het hoofd naar de staart, terwijl het dier zich vrij bewegen. </li><li> Plaats de muis in de palm van de hand gedurende drie minuten tijdens het masseren achter de oren (licht knijpen samen de huid op de rug van de nek met behulp van de duim en wijsvinger). </li><li> Hold / lift de muis door het nekvel van de nek voor 30 sec, waardoor de muis rusten op de top kooi gedurende 30 seconden voordat men het ruim weer. </li><li> Houd de muis met behulp van de intranasale grip, die is beschreven in hoofdstuk 2, maar niet omgekeerd het dier (in te vullen tot 2,4 stappen). Houd het dier zoals deze gedurende 30 sec en laat terug naar de kooi top. Herhaal voor de tweede keer na een minuut rust periode. </li><li> Houd de muis met de intranasale grip, zoals beschreven in hoofdstuk 2, met inbegrip van het omkeren van de dieren, zodat de buikzijde naar boven naar het plafond. Zorg ervoor dat het dier hals is parallel aan de grond. Houd deze positie gedurende 30 sec. Herhaal dit een tweede keer na een minuut rust periode. Sommige muizen tegen de intranasale grip dan andere, vooral bij gebruik voor het eerst met inversie bij deze stap in de acclimatisering. Als de muis bevrijdt zich van de greep, zet de muis op de kooi boven-en re-grip. Herhaal de re-grip indien nodigMaar bewaken het spanningsniveau van de muis en de kooi eventueel terugkeren. Een andere factor die een rol kan spelen in het verliezen van de greep op dit punt in de acclimatisering proces is onervarenheid van de dierverzorgers met de intranasale levering techniek. </li><li> Houd de muis met de intranasale grip, omkeren, kort plaats een pipet met een lege tip over elk neusgat, en houd de dieren positie gedurende 30 sec. Herhaal dit na een minuut rust periode. </li><li> Houd de muis met de intranasale grip, omkeren, en intranasaal 6 pi van zoutoplossing te beheren in het linker en rechter nare zoals beschreven in paragraaf 3 (tot en met stap 3.7). </li><li> De muis met de intranasale grip, invertsuiker, en intranasaal 6 pi zoutoplossing toe in de linker en rechter nare tweemaal plaatsen het dier weer op de kooi top daartussen zoals beschreven in sectie 3. </li></ol> 2. De intranasale Grip op Awake Muizen Immobiliseer <ol><li> Plaats de muis on de kooi top. </li><li> Met de duim en wijsvinger van je dominante hand, houd de muisknop bij de staart. Gebruik uw midden ring en pink, licht pin het onderste gedeelte van het lichaam om de kooi top (Figuur 1A). Laat de muis grijpen op de bars als je licht rekken van de muis uit en beter pak de nekvel. </li><li> Met behulp van de duim en middelvinger op de niet-dominante hand, stevig knijpen met de muis op het nekvel (overtollige huid) achter de nek en schouders. Trek de losse huid van een tent van de huid aan de overkant van de schouderbladen (Figuur 1B) te maken. Neem zo zoveel mogelijk de huid, maar wees voorzichtig niet te trekken de spieren, omdat dit zal ongemak voor de muis veroorzaken. Wees voorzichtig om niet te veel druk op borstkas van het dier of de ruggengraat van toepassing zijn. Overdruk of trekken van de huid kan leiden tot remming van de ademhaling in sommige gevallen. </li><li> Plaats snel de wijsvinger van uw niet-dominante hand op het hoofd van de muis alsdicht bij de neus mogelijk en trek op de huid (figuur 1C, 1D). Tegelijkertijd schuift de duim en middelvinger naar de richting optimale positie. Idealiter zou de muis niet in staat zijn haar hoofd te bewegen verticaal of horizontaal. </li><li> Met behoud van de greep op de nekvel, zet u de muis op zijn rug. De muis is terug moeten zijn in de palm van je hand. Stevig vast met de muis de staart (in de buurt van de basis) tegen je handpalm met je laatste twee vingers (ring en pink) om de muis te stabiliseren, of u kunt uw vingers over het onderlichaam (figuur 1E, 1F). </li><li> Op dit punt ervoor zorgen dat de muis de nek en de kin zijn plat en parallel aan de vloer. De kaak moet dicht bij een 180 graden hoek met de hals zoveel mogelijk te helpen met intranasale afgifte. Kleine veranderingen in de hoek zal drug om op de verkeerde plaats. Controleer of de muis is in staat om te ademen door te kijken naar de buik. De muis should niet kunnen bewegen, maar moet comfortabel en op geen enkele pijn. Als u met de muis de nek en kin het maken van een &quot;V&quot;, dan moet je opnieuw grip. </li></ol> 3. Intranasale toediening van geneesmiddelen aan Awake Muizen Introductie Met de intranasale grip wordt elke muis tweemaal beperkt en daar met hun nek parallel aan de grond, terwijl een volume van 20-30 gl vloeistof toegediend. Dit volume is veilig en effectief voor kleine-grote muizen, we gebruiken meestal 24 ul, en dat wordt beschreven in dit protocol. De intranasale wakker methode kan worden gebruikt in muizen van elke leeftijd, bijvoorbeeld in pasgeboren muizen ontwikkeling neurowetenschappelijk onderzoek. In pasgeboren muizen, moet een kleinere totale volume (8 pl) en druppelgrootte (1 ul) worden gebruikt om de kleinere volume van de neusholte tegemoet. Geneesmiddel wordt meestal geleverd met twee muizen op een moment, afwisselend rusttijden naar de meest efficiënte gebruik van tijd te maken en o te houdenn schema. Set-up zal een beetje anders, afhankelijk van of u de dosering groepsgewijs worden gehuisvest, muizen of individueel gehuisveste muizen. Met de individueel gehuisveste muizen, is het nuttig om al uw materialen te plaatsen in tussen de kooien om muizen te voorkomen dat de oversteek naar de andere kooi top. Met de groep gehuisvest muizen, dosis van die kooi alleen. Het is belangrijk dat elke muis in een groep ondergebracht kooi dezelfde intranasale behandeling ontvangt als mogelijke kruisbesmetting van twee verschillende behandelingen bestaat door drugs uitzetting in de lucht of huidcontact. Het is sterk aanbevolen dat een dosering vel worden afgedrukt op voorhand, om technici van de behandeling opdrachten te herinneren, tot alle notities van gemiste druppels op te nemen, om de algemene gezondheid van elk dier, enz. Opmerking Stappen <ol><li> Stel kooien waar ze moeten zijn voor het doseren, en het opzetten van een doseerstation (figuur 2). </li><li> Verwijder de muis uit kooi en blijf op de kooi van boven tijdens het doseren. </li><li> Pak de muis met behulp van de intranasale greep beschreven in hoofdstuk 2. </li><li> Met behulp van uw dominante hand, plaatst u de pipet met 6 pi van drugs of voertuig. Plaats de punt van de pipet vol nabij de muis linker neusgat, doorgaans bij een hoek van 45 graden (figuur 1G, 1H). Als je een viskeuze oplossing die u nodig heeft om uw hoek te verhogen tot 90 graden, omdat de drug kan lopen op de zijkant van de pipetpunt in plaats van het maken van een druppel. Als zeer visceus is, kan het afvegen van de pipetpunt met een tissue voor het verdrijven van vloeistof te helpen. Langzaam uitwerpen het medicijn aan een kleine druppel vormen met ongeveer de helft van het volume (3 pi). </li><li> De druppel moet worden geplaatst dicht genoeg bij neusgat de muis, zodat de muis kan de druppel inhaleren. Onmiddellijk na de muis deze kleine druppel inhaleert, verwijdert de rest van het geneesmiddel in de pipetpunt om een ​​kleine druppel van de muis te vormen later inhaleren door hetzelfde neusgat ongeveer 2-3 sec. Zorg ervoor dat u de mond te kijken. Als er is geen vloeistof in de mond, heeft de daling niet volledig maken in de neus en dit dient te worden opgemerkt. </li><li> Houd de muis in deze positie gedurende 15 sec. Het is sterk aanbevolen dat een timer worden gebruikt om deze 15 sec wacht te standaardiseren. </li><li> Herhaal de stappen 3,3 tot 3,6 voor het rechter neusgat. Als er druppels worden gesnoven out, moet die daling worden vervangen en genoteerd. </li><li> Plaats de muis op de top van zijn kooi gedurende 2 minuten. Herhaal het hele proces begint 2 minuten. na aflevering van de eerste druppel. Dit geeft de muis vier druppels van 6 pl per totaal 24 ul oplossing. Een monster schema voor dosering een of twee muizen tegelijkertijd te zien in Tabel 2. </li><li> Nadat de muis heeft alle druppels, de terugkeer van de muis zijn kooi. </li></ol> 4. Algemene Animal Handling Technieken voor acclimatisatie en intranasale toediening van het geneesmiddel aan Awake Muizen Na elke acclimatisatie of intranasale toediening sessie moet worden geven muizenna, te behandelen, zoals een Cheerio of geschild zonnebloemzaad als positieve versterking. Treats worden gegeven als een beloning en om hen af ​​te leiden van krabben hun neus, mogelijk schade toebrengen aan zichzelf. Bij het werken met groepsgewijs worden gehuisvest, muizen, zou voldoende traktaties worden gedropt voor elke muis. Alvorens terug te keren dieren naar de kooien moet u nesten te herstellen in hun oorspronkelijke staat om de stress te verminderen. Bij dosering groep gehuisveste dieren, moeten handschoenen worden gewijzigd tussen toediening van de kooien, zodat er geen geur te dragen van kooi naar kooi kolonie kolonie, want zij zullen worden agressief naar elkaar toe.

<ol><li>Dhuria, S. V., Hanson, L. R., Frey, W. H. 2nd <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+delivery+to+the+central+nervous+system%3A+mechanisms+and+experimental+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">Intranasal delivery to the central nervous system: mechanisms and experimental considerations.</a> J. Pharm Sci. 99, 1654-1673 (2010).</li>
<li>Thorne, R. G., Pronk, G. J., Padmanabhan, V., Frey, W. H. 2nd <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+insulin-like+growth+factor-I+to+the+rat+brain+and+spinal+cord+along+olfactory+and+trigeminal+pathways+following+intranasal+administration%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Delivery of insulin-like growth factor-I to the rat brain and spinal cord along olfactory and trigeminal pathways following intranasal administration.</a> Neuroscience. , 127-481 (2004).</li>
<li>Benedict, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+insulin+as+a+therapeutic+option+in+the+treatment+of+cognitive+impairments%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Intranasal insulin as a therapeutic option in the treatment of cognitive impairments.</a> Exp. Gerontol. 46, 112-115 (2011).</li>
<li>Francis, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+insulin+prevents+cognitive+decline%2C+cerebral+atrophy+and+white+matter+changes+in+murine+type+I+diabetic+encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Intranasal insulin prevents cognitive decline, cerebral atrophy and white matter changes in murine type I diabetic encephalopathy.</a> Brain. 131, 3311-3334 (2008).</li>
<li>Francis, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+insulin+ameliorates+experimental+diabetic+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Intranasal insulin ameliorates experimental diabetic neuropathy.</a> Diabetes. 58, 934-945 (2009).</li>
<li>Marks, D. R., Tucker, K., Cavallin, M. A., Mast, T. G., Fadool, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Awake+intranasal+insulin+delivery+modifies+protein+complexes+and+alters+memory%2C+anxiety%2C+and+olfactory+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Awake intranasal insulin delivery modifies protein complexes and alters memory, anxiety, and olfactory behaviors.</a> J. Neurosci. 29, 6734-6751 (2009).</li>
<li>Hanson, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+delivery+of+deferoxamine+reduces+spatial+memory+loss+in+APP%2FPS1+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Delivery+and+Translational+Research%22%5BJournal%5D)">Intranasal delivery of deferoxamine reduces spatial memory loss in APP/PS1 mice.</a> Drug Delivery and Translational Research. 2, 160-168 (2012).</li>
<li>Danielyan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+intranasal+losartan+in+the+APP%2FPS1+transgenic+mouse+model+of+Alzheimer+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Rejuvenation+Research%22%5BJournal%5D)">Protective effects of intranasal losartan in the APP/PS1 transgenic mouse model of Alzheimer disease.</a> Rejuvenation Research. 13, 195-201 (2010).</li>
<li>Fine, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+deferoxamine+improves+performance+in+radial+arm+water+maze%2C+stabilizes+HIF-1alpha%2C+and+phosphorylates+GSK3beta+in+P301L+tau+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Intranasal deferoxamine improves performance in radial arm water maze, stabilizes HIF-1alpha, and phosphorylates GSK3beta in P301L tau transgenic mice.</a> Exp. Brain Res. 219, 381-390 (2012).</li>
<li>Lochhead, J. J., Thorne, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+delivery+of+biologics+to+the+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Drug+Deliv.+Rev%22%5BJournal%5D)">Intranasal delivery of biologics to the central nervous system.</a> Adv. Drug Deliv. Rev. 64 (11), 614-628 (2012).</li>
<li>Hanson, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+deferoxamine+provides+increased+brain+exposure+and+significant+protection+in+rat+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">Intranasal deferoxamine provides increased brain exposure and significant protection in rat ischemic stroke.</a> J. Pharmacol. Exp Ther. 330, 679-686 (2009).</li>
<li>Reger, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+intranasal+insulin+on+cognition+in+memory-impaired+older+adults%3A+modulation+by+APOE+genotype%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Aging%22%5BJournal%5D)">Effects of intranasal insulin on cognition in memory-impaired older adults: modulation by APOE genotype.</a> Neurobiol. Aging. 27, 451-458 (2006).</li>
<li>Kim, C. H., Song, H. yun, M, E. unA. hn, Lee, Y., G, J., Yoon, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+hypo-%2C+iso-+and+hypertonic+saline+irrigation+on+secretory+mucins+and+morphology+of+cultured+human+nasal+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Effect of hypo-, iso- and hypertonic saline irrigation on secretory mucins and morphology of cultured human nasal epithelial cells.</a> Acta Otolaryngol. 125, 1296-1300 (2005).</li>
<li>Greiff, L., Andersson, M., Wollmer, P., Persson, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertonic+saline+increases+secretory+and+exudative+responsiveness+of+human+nasal+airway+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Respir.+J%22%5BJournal%5D)">Hypertonic saline increases secretory and exudative responsiveness of human nasal airway in vivo.</a> Eur. Respir. J. 21, 308-312 (2003).</li>
</ol>

Geen belangenconflicten verklaard.

Deze methode toont hoe muizen vaste dosis intranasale geneesmiddel aan de hersenen richten zonder de toepassing van anesthesie worden gegeven. Intranasale geneesmiddel worden geleverd aan grote groepen muizen gedurende langere tijd met een minimale inspanning. Een groep van 20 muizen intranasaal worden behandeld door een persoon in minder dan een uur. Een breed scala van moleculen, van kleine ijzerchelatoren aan groeifactoren mesenchymale stamcellen zijn aangetoond snel richten op de CNS en zijn werkzaamheid getoond bij...

<table><tbody><tr><td>P20 pipet ingesteld op 6 &amp;mu;l</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pipetpunten voor gel-loading</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Timer</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Afvalbak voor punten</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Doseringsblad voor aantekeningen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Drugmiddel en vehikel</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Container voor drugsvials</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dieren voor dosering</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Reservehandschoenen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Papierhanddoeken om urine af te vegen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;Tabel 3. &lt;/strong&gt; Benodigde materialen</td></tr></tbody></table>

intranasale toediening van cns therapeutics naar awake muizen

Intranasal Administration of CNS Therapeutics to Awake Mice

Intranasale toediening is een methode afgeven van therapeutische middelen aan het centrale zenuwstelsel (CNS). Het is niet-invasief en kunnen grote moleculen die niet de bloed-hersenbarrière toegang tot het CNS. Drugs zijn direct gericht op het centrale zenuwstelsel met intranasale toediening, het verminderen van de systemische blootstelling en dus ongewenste systemische bijwerkingen 1. Levering van de neus tot het CNS wordt binnen enkele minuten langs zowel de geur en trigeminale zenuwbanen via een extracellulair route en vereist geen drug te binden aan een receptor of axonale transport 2. Intranasale toediening is een ruime bekendheid methode en wordt momenteel gebruikt in klinische proeven op mensen 3. Intranasale toediening van geneesmiddelen in diermodellen maakt eerste evaluatie van farmacokinetische verdeling en werkzaamheid. Met muizen, is het mogelijk om medicijnen toe te wekken (niet geanesthetiseerde) dieren regelmatig met een speciaseerde intranasale grip. Awake levering voordelig is omdat het mogelijk maakt voor de lange termijn chronische toediening zonder verdoving, het minder tijd kost dan bij anesthesie, en kan worden geleerd en gedaan door veel mensen, zodat teams van technici kan de dosis van grote aantallen muizen in korte tijd. Werkzaamheid van therapeutische intranasaal toegediend op deze wijze muizen is aangetoond in een aantal studies waaronder insuline in diabetische muismodellen 4-6 en deferoxamine in muizen Alzheimer&#39;s models. 7,8 De intranasale grip voor muizen kan worden geleerd, maar is niet eenvoudig en vereist oefening, vaardigheid, en een precieze grip om effectief medicijn te leveren aan de hersenen en voorkomen drainage naar de longen en de maag. Muizen worden beïnvloed door de hand met behulp van een gemodificeerde nekvel in de niet-dominante hand met de nek die evenwijdig aan de vloer, terwijl geneesmiddel wordt geleverd met een pipet met behulp van de dominante hand. Het duurt meestal 3-4 weken van acclimatiseren voor het hanteren van vóór muizenkan worden gehouden met deze grip zonder stress respons. We hebben dit Jove video om deze intranasale toediening techniek meer toegankelijk.

Er zijn verschillende manieren om de effectiviteit van geneesmiddel levering. De eerste is intranasaal toedienen van een kleurstof, zoals inkt of India methyleenblauw en de kleurstof zichtbaar na euthanasie van het dier in de reukepitheel en na de hersenen worden verwijderd, die het CNS door de zeefplaat. De tweede is het meten van het geneesmiddel ofwel geleverd door een radioactief gelabelde tag of met ELISA-detectie van de gemerkte molecuul. Een goed voorbeeld van de distributie van medicijnen in het CNS na toedienin...

Werkwijze voor intranasaal toedienen drugs wakker muizen voor de targeting van de hersenen beschreven. Deze methode zorgt voor een herhaalde dosering gedurende een lange periode met behulp van intranasale toediening van het geneesmiddel zonder verdoving, en de neus-tot-brein levering met minimale systemische blootstelling.

Intranasale toediening van CNS Therapeutics naar Awake Muizen

Intranasale toediening is een methode om therapeutische middelen aan het centraal zenuwstelsel (CZS) toe te dienen. Het is non-invasief en maakt de toediening van grote...

Het algemene doel van deze procedure is om geneesmiddelen gericht naar het centrale zenuwstelsel te transporteren via intranasale toediening bij muizen zonder anesthesie. Dit wordt bereikt door de muis eerst te laten wennen aan hantering. De tweede stap is het gebruik van een aangepaste nekgreep om de kop van het dier te immobiliseren.Vervolgens worden druppels van het geneesmiddel met een pipet intranasaal toegediend. In de laatste stap wordt de muis met een beloning teruggeplaatst in de kooi. De belangrijkste voordelen van deze techniek zijn dat intranasale toediening geneesmiddelen naar het centrale zenuwstelsel transporteert zonder systemische blootstelling, en dat intranasale toediening van geneesmiddelen bij wakke dieren chronische behandeling bij muizen zonder anesthesie mogelijk maakt.Deze methode kan worden gebruikt om te helpen bij het beantwoorden van kernvragen bij de ontwikkeling van geneesmiddelen voor de behandeling van neurologische aandoeningen. Over het algemeen zullen personen die nieuw zijn met deze methode moeite hebben, omdat het lastig is om de bek stevig vast te houden om beweging van de kop te voorkomen. Een visuele demonstratie van deze methode is essentie

intranasal-administration-of-cns-therapeutics-to-awake-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Grondige preklinische testen van geneesmiddelen die handelen in het centrale zenuwstelsel gaat vaak gepaard met het beoordelen en vergelijken van drugs biodistributie in associatie met specifieke routes van toediening. Hier zijn drie veel gebruikte methoden van systemische toediening (intraveneus, intraperitoneaal, en mondeling) en een methode voor lokale levering (convectie-enhanced levering) aangetoond in muizen.

Systemische en lokale Drug Delivery voor de behandeling van ziekten van het centrale zenuwstelsel in knaagdiermodellen

Dit artikel legt uit twee zeer verschillende methoden voor injectie: 1) in de hersenen (intracerebroventriculaire) en 2) systemische (intraveneus) op de therapeutische middelen te introduceren in het centrale zenuwstelsel van neonatale muizen.

Levering van therapeutische middelen door intracerebroventriculaire (ICV) en intraveneuze (IV) injectie in Muizen

Elektrofysiologische eigenschappen van de neuronale antwoorden is van belang voor het begrijpen van de hersenfunctie en voor het geleiden van de plaatsing van kleurstoffen voor route tracing. Er zijn echter vele studies uitgevoerd in verdoofde dieren. Om de hersenfunctie te begrijpen zonder verdoving, ontwikkelden we een methode om neuronale respons-eigenschappen op te nemen en te injecteren kleurstoffen in wakkere muis.

Voorbereiding van een Awake Muis voor opnemen Neurale Reacties en injecteren van Tracers

This video demonstrates the intranasal delivery of oncolytic virus loaded therapeutic neural stem cells into a brain-tumor bearing mouse model. The non-invasive intranasal administration of stem cells bypasses the blood brain barrier, facilitating their delivery to the tumor site in the brain for therapeutic applications.

Intranasal Delivery of Therapeutic Neural Stem Cells (NSCs) in Murine Model: A Procedure for Tumor-targeted Delivery of Oncolytic Virus Loaded NSCs into Brain Tumor Bearing Mouse Model

Source: Shahror, R. A. et. al., Tracking Superparamagnetic Iron Oxide-labeled Mesenchymal Stem Cells using MRI after Intranasal Delivery in a Traumatic Brain Injury Murine Model. J. Vis. Exp. (2019)This video demonstrates intranasal mesenchymal stem cell (MSC) delivery in a mouse model. MSCs absorb into nasal tissue, migrate to the brain via cytokine signals, and secrete neurotrophic factors at the injury site, offering neurotherapeutic potential for neuronal repair.

Intranasal Mesenchymal Stem Cell Delivery in a Mouse Model of Traumatic Brain Injury

Source: Ullah, I., et.al. A Positioning Device for the Placement of Mice During Intranasal siRNA Delivery to the Central Nervous System. J. Vis. Exp. (2019)This video demonstrates a precise intranasal administration technique for delivering neuron-targeting peptide-siRNA complexes to the mouse brain using a specialized positioning device. Anesthetized mice are secured in a head-down-and-forward position to optimize siRNA inhalation while preventing lung drainage. The targeting peptide...

Intranasal Delivery of siRNA to the Mouse Brain Using a Positioning Device

Source: Kanazawa, T., et al. Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery. J. Vis. Exp. (2018)This video demonstrates the intranasal administration of radiolabeled drugs in an anesthetized mouse to achieve nose-to-brain drug delivery. It explains how drugs cross the nasal epithelium and travel via neuronal pathways to reach the brain, as well as how ciliary motion influences drug retention and clearance. Additionally, the video...

Intranasal Drug Administration in Mice via Pipette and Reverse-Cannulation for Nose-to-Brain Drug Delivery

Stamcellen zijn veelbelovende therapeutische dragers om hersentumoren te behandelen als gevolg van hun intrinsieke tumor tropisme. Niet-invasieve intranasale stamcelafgifte omzeilt de bloedbreinbarrière en toont een sterk potentieel voor klinische vertaling. In dit artikel worden de basisprincipes van intranasale stamcellen in een muismodel van glioma samengevat.

Intranasale Levering van Therapeutische Stamcellen aan Glioblastoma in een Muis Model

Hier beschrijven we twee nieuwe methoden van stabiele intranasale toediening onder inademing verdoving met minimale fysieke stress voor proefdieren. Ook beschrijven we een methode voor kwantitatieve beoordeling van drug distributie niveaus in de hersenen via de neus-aan-hersenen pathway met behulp van radiolabeled [14C]-inuline als model substraat van in water oplosbare macromoleculen.

Nieuwe methoden voor intranasale toediening onder inademing verdoving te evalueren van de neus-naar-Brain Drug Delivery

Hier presenteren we een protocol met behulp van een muis positionerings apparaat dat de juiste plaatsing van muizen mogelijk maakt voor de intranasale toediening van een hersen gerichte peptide-siRNA-formulering die effectieve gen-uitschakeling in het centrale zenuwstelsel toelaat.

Een positionerings apparaat voor de plaatsing van muizen tijdens intranasale siRNA levering aan het centrale zenuwstelsel

Leer intranasale toediening van CNS-therapeutics bij wakker muizen zonder anesthesie. Deze methode richt medicijnen rechtstreeks op het centrale zenuwstelsel en minimaliseert systemische blootstelling.

Intranasale toediening van CNS Therapeutics naar Awake Muizen

Meer video's verkennen