Scheenbeen Nerve doorsnijding - Een gestandaardiseerd model voor denervatie-geïnduceerde Skeletal Muscle Atrofie in Muizen

Het algemene doel van deze video is om het model van tibiale zenuwtransectie van skeletspieratrofie bij muizen te demonstreren. Dit wordt bereikt door de heupzenuw en zijn drie takken, de tibiale, syl en peroneale zenuwen te isoleren. Eenmaal geïsoleerd, wordt de tibiale zenuw doorgesneden.

Na deinnervatie wordt de wond afgesloten en wordt de toestand van het dier nauwlettend gecontroleerd. Uiteindelijk worden monsters verkregen die een progressieve afname in spiermassa na deinnervatie laten zien. Het model van tibiale zenuwtransectie van deinnervatie geïnduceerde skeletspieratrofie is een veelgebruikt en goed gevalideerd model bij ratten, en dit heeft veel minder morbiditeit dan die geassocieerd met heupzenuwtransectie.

We hebben dit model aangepast voor gebruik bij muizen, wat we hier zullen demonstreren. Dit stelt de onderzoeker in staat om gebruik te maken van de aanwezigheid van genetisch gemanipuleerde muizen en het proces van spieratrofie te bestuderen bij afwezigheid van eiwitten die cruciaal zijn voor de regulatie van skeletspiermassa terwijl minimale morbiditeit bij het dier wordt geïnduceerd. Eerst, noteer het gewicht van de muis na bevestiging van adequate anesthesie door teenprik, identificeer de heupholte door palpatie en scheer de laterale dij en billen van daar tot aan de knie.

Reinig vervolgens het gebied met herhaalde toepassingen van alcohol en pro jodium. Plaats de muis op zijn zij onder een operatie- of dissectiemicroscoop terwijl u steriele handschoenen draagt. Identificeer de heupholte door palpatie.

Snij de huid van de laterale dij van de heupholte tot aan de knie. Spreid de huid voorzichtig open. Identificeer de biceps femoris spier, die de platte oppervlakkige spier van de laterale dij direct onder de huid is met behulp van fijne schaar.

Splits de biceps femoris spier langs de spiervezels en breng een veerretractor in. Om de heupzenuw en zijn takken bloot te leggen, identificeer de heupzenuw direct onder de biceps femoris spier. Deze kan worden geïdentificeerd door zijn karakteristieke glanzende witte kleur en is ongeveer 0,8 millimeter in diameter.

Het loopt van de heupholte tot aan de knie en vertakt zich in de tibiale, peroneale en sal zenuwen op het niveau van de knieholte. Scheid voorzichtig de tibiale van de peroneale en sal zenuwtakken met ultrafijne forceps en veermicrodissectiescharen. De tibiale zenuw is de grootste tak en is meestal centraal.

Voorzichtig omgaan met de heupzenuw en zijn takken is essentieel voor het succes van deze procedure. Zorg ervoor dat de sal en perineale zenuwtakken niet worden beschadigd of uitgerekt. Mocht deze takken beschadigd of uitgerekt zijn, dan zullen ook hun doelen worden gedeactiveerd.

Houd de zenuw net op de buitenste adventitiële laag met de ultrafijne forceps en houd de zenuw los om zenuwkneuzing en tractieletsel te voorkomen voor tijdelijke deinnervatie. Met verwachte volledige reactie in twee tot vier weken, kneus de tibiale zenuw met ultrafijne forceps gedurende 15 seconden voor volledige en blijvende deinnervatie. Snijd de tibiale zenuw met de microdissectiescharen zo distaal mogelijk. Zorg ervoor dat de popliteale vaten worden vermeden als volledige deinnervatie vereist is.

Hecht het uiteinde van de doorgesneden tibiale zenuw aan het vooroppervlak van de biceps femoris spier met 10 T nylon en benader de biceps femoris opnieuw met vijf T Vicryl om aberrante reactie van de gastro- en soleusspieren te voorkomen. Zodra de deinnervatie voltooid is, sluit de huid met een lopende vijf nul Vicryl hechting. Wanneer klaar, zet het inhalatieanestheticum uit, maar houd de zuurstofstroom aan.

Na het toedienen van een pijnstiller alleen, huisvest de muis in een warme schone kooi zonder stro. Houd de muis onder direct toezicht tot hij begint te lopen. Wanneer volledig hersteld, verplaats de muis naar een schone, vaste bodemkooi met voldoende zacht stro.

Inspecteer het operatieve ledemaat en de voet dagelijks op de ontwikkeling van decubitus hielzweren of bewijs van kauwen kleine problemen kunnen worden behandeld met topische antibiotica of antiseptica, zoals jodium. Eindpuntindicatoren die euthanasie van het dier vereisen, zijn gewichtsverlies, bewijs van slechte zelfzorg en gebogen houding. Bovendien moeten dieren met wondverstoring of zweren die niet genezen met een tot twee weken wondverzorging ook worden geofferd.

Bovendien, alle dieren die in onnodige pijn verkeren Op het tijdstip na de operatie, worden de gewenste weefsels verzameld voor analyse. Na euthanasie, scheer de mediale aspecten van zowel de operatieve als contralaterale controlepoten en reinig met alcohol onder werking van een dissectiemicroscoop, snij de mediale kuithuid met een scalpel vanaf de enkel tot aan de knie en cirkelvormig rond de enkel op het operatieve ledemaat. Trek vervolgens voorzichtig de huid van de spier en proximaal richting dij af.

Om alle spieren van het been bloot te leggen, identificeer de gastro spier, die de kuitspier is die van de knie naar de enkel loopt op de achterste kant van het been. Lokaliseer vervolgens de distale invoeging van de biceps femoris spier proximaal van de gastro spier op de mediale kant van de knie. Bij zijn distale invoeging lijkt de biceps femoris dun en filmig en bedekt de meest proximale portie van de gastro met schaar en stompe einde dissectie.

Schei voorzichtig de distale invoeging van de biceps femoris van de gastro spier. Voeg zijn distale invoeging toe aan het calcaneus, de gastro spier vernauwt zich tot de achillespees. Identificeer de achillespees die wit en pezig lijkt.

Houd de achillespees vast met forceps. Zorg ervoor dat u de maagspier niet vasthoudt of verplettert en verdeel de achillespees van de calcaneus invoeging. Gebruik schaar, houd nog steeds het pees vast en til voorzichtig de bleke rode gastro spier op van de diepere rode soleus vanaf de distale invoeging naar zijn oorsprong bij de knie, met zeer voorzichtige tractie.

Om het proces