Name: Maaltijdduur als maat voor orofaciale nociceptieve reacties bij knaagdieren (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 5 s
Description: Leer hoe maaltijdduur als kwantitatieve maat voor orofaciale pijn bij knaagdieren wordt gebruikt. Deze niet-invasieve methode meet voedingsgedrag zonder dieren te immobiliseren.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

In dit model kregen de ratten of muizen voedsel en water ad libitum. Het Texas A&M University Baylor College of Dentistry Institutional Animal Care and Use Committee keurde alle experimentele protocollen goed. Onderstaande specifieke instellingen worden cursief weergegeven en worden specifiek gebruikt voor het TMJ-artritismodel van ratten. Muizen kunnen ook worden gebruikt in dit model en alternatieve tandpijn en myogene orofaciale pijn dierlijke modellen kunnen ook worden gebruikt42,43.
1. Software-instellingen
<ol><li>Laad de Animal Monitor-software voor de feederunits op de computer.</li>
	<li>De Animals Monitor-software wordt nu geopend door op het pictogram te klikken en kies onder de bestandsmenuselectie de keuzeoptie "configuratie".</li>
	<li>Schakel in het venster "Configuratie van dierenmonitoren" het vakje "Pellet Delivered Input" (Figuur 1A ) uit. Opmerking: Dit vakje wordt meestal standaard in de fabriek aangevinkt. Schakel deze optie uit. Zodra de onderzoeker deze optie uitschakelt, worden de resultaten geregistreerd door een pellet uit de trog te verwijderen in plaats van wanneer een pellet wordt afgegeven. Opmerking: Wanneer het vakje "Automatische bestandsnaamgeving" is ingeschakeld, zal de software de bestanden automatisch een naam geven (Figuur 1A). Dit vakje wordt meestal standaard in de fabriek aangevinkt.</li>
	<li>Stel de timerlampjes in om om 06:00 uur (06:00 uur) en om 20:00 uur (20:00 uur) uit te schakelen. Opmerking: de hardware voor de feeders is zo aangepast dat de lampjes in de dozen niet door de software worden bediend, maar in plaats daarvan worden aangesloten op een geïsoleerde 24-uurs timer. Het "House Light" dat op de configuratiesoftware werd aangegeven, was dus niet functioneel in deze voorbeelden.</li>
	<li>Selecteer het keuzemenu bewerken en kies Experiment. Er verschijnt een venster met de titel "Vak 01 -" (figuur 1B).</li>
	<li>Voer de bestandsnaam in waaronder de gegevens in dit venster worden opgeslagen. Opmerking: als er geen bestandsnaam wordt ingevoerd, worden de gegevensbestanden automatisch door de software benoemd. Details van het experiment kunnen in dit venster worden toegevoegd en opgeslagen met de gegevensbestanden. De informatie in het venster kan ook worden opgeslagen en gebruikt voor latere experimenten.</li>
	<li>Voer een getal in dat groter is dan de totale tijd van het experiment in het invoervak met de titel "Experimentlengte (dagen):". Opmerking: Dit zorgt ervoor dat de software de gegevens opslaat totdat het experiment is voltooid, een fout kan zijn door deze waarde te kort in te stellen, waardoor de software de gegevens niet kan opnemen, ook al zitten dieren nog in de voedermodules.</li>
	<li>Voer 24 in het invoervak met de titel "Aantal uren op een dag" in. Opmerking: de lengte kan worden aangepast aan de specificaties van de experimenteerder.</li>
	<li>Voer 10 in het vak "Einde criteria maaltijdperiode (min):" Opmerking: voor ratten werd een maaltijd gedefinieerd aan de hand van een eindwaardecriterium van 10 minuten op basis van eerdere studies48 (d.w.z. een maaltijd werd voor en na een periode van 10 minuten zonder pellets gebeugeld) en de minimummaaltijdgrootte werd in dit softwarepakket vastgesteld op drie pellets per maaltijd.</li>
	<li>Voer 45 in het vak "Pelletgrootte (mg)"in. Als een persoon muizeninput 20 binnen dit venster wil gebruiken.</li>
	<li>Voeg voor ratten 45 mg knaagdiervoerkorrels toe aan de feederdispensertrechter. Opmerking: voeg voor muizen 20 mg knaagdiervoerkorrels toe aan de chow hopper.</li>
	<li>Voer in het gedeelte "Fase" van het experimentvenster de term Dag in het veld "Naam" in en in het veld "Aantal uren" type 24 (figuur 1B). Opmerking: onder de sectie "Fase" zijn er twee grote open velden. Het eerste grote open veld wordt ingevuld met de tekst die is ingevoerd in de vorige velden 'Fase' en 'Naam'.</li>
	<li>Het volgende grote open veld heeft de kop "Dagfase" Voer in het veld met de naam "Naam" het woord Licht in en voer in het veld met de titel "Percentage" het getal 60 in. Opmerking: deze ingevoerde tekst vult het grote veld hieronder.</li>
	<li>Voer vervolgens in het veld "Naam" het woord Donker in en voer in het veld met de titel "Percentage" het getal 40 in. Let op: bij deze inzendingen wordt 60% van de dag toegeschreven aan de lichtfase en 40% aan de donkere fase. Wanneer de software de maaltijdpatronen berekent, wordt deze informatie gebruikt. Deze instellingen zijn typisch voor fietsende vrouwelijke dieren die op een 14:10 licht / donker cyclus worden gehouden.</li>
	<li>Selecteer de knop "Alle vakken zo instellen". Sla deze informatie op en druk op OK.</li>
	<li>Het scherm "Startvakken" verschijnt, selecteer de feeders om te activeren en druk op OK (Figuur 1C).</li>
	<li>Vervolgens verschijnen de run-timevensters van Animal Monitor met de maaltijdpatroongegevens (figuur 1D). Opmerking: controleer en noteer de "# van pellets die worden afgegeven" vanuit dit venster om de huidige gezondheid van de rat te bepalen. Een gezonde mannelijke rat met een gewicht van ongeveer 300 g eet meestal tussen de 300-800 45 mg pellets per dag.</li>
	<li>Bestanden worden dagelijks gegenereerd en automatisch opgeslagen met een . CSV-extensie. Open deze bestanden om maaltijdpatroongegevens op te halen, zoals voedselinname, maaltijdnummer, maaltijdduur, maaltijdgrootte of intermeal interval. De intervallen voor deze maaltijdpatronen kunnen worden berekend voor de hele dag of voor een fase van de dag, zoals de donkere en lichte fase. Zoals hierboven vermeld, zijn de instellingen voor een licht/donkercyclus van 14:10 uur. De ruwe gegevens van wanneer elke pellet uit de trog werd verwijderd, worden ook geregistreerd als een ruwe . CSV-bestand. Opmerking: In oudere versies van de software wordt een minimale maaltijdgrootte van 3 pellets niet gebruikt in de berekeningen voor het genereren van de . CSV-bestand.  Bovendien, om de gemiddelde maaltijdduur te krijgen met behulp van de oudere software, moet u 10 minuten aftrekken van de waarden in de kolom Gemiddelde maaltijdduur van de . CSV-bestand. Wanneer de software in werking is, kan de operator handmatig de menuoptie voor het uittrekken van het bestand selecteren en dagelijks "onbewerkte gegevens opslaan" selecteren. Dit bespaart de ruwe gegevens voor een periode van 24 uur in plaats van voor het hele experiment. Deze ruwe gegevens kunnen naar goeddunken van de gebruiker door alternatieve software worden verwerkt. Opmerking: in de getoonde resultaten gebruikten we alternatieve software om een minimale maaltijdgrootte van 3 pellets op te nemen.</li>
</ol>2. Maaltijd duur test
<ol><li>Plaats individuele ratten in de geluidverzwakkende kamers die zijn uitgerust met fotobeam computergestuurde pelletvoeders. Opmerking: in deze voerunits bevinden zich gegradueerde waterflessen en afvalpannen waarin een vel dik absorberend papier is geplaatst. In de feeder dispenser hopper kunnen 45 mg knaagdiervoerkorrels worden toegevoegd voor ratten of 20 mg knaagdiervoerkorrels voor muizen. Chow pellets worden in een V-vormige voederbak afgegeven en aan de onderkant van deze trog bevindt zich een fotobeam. Een pellet die in de trog wordt afgegeven, wordt gedetecteerd door deze fotobeam te breken. Zodra een rat deze pellet uit de feeder via de fotobeam verwijdert, wordt deze hersteld en dit geeft de computer het signaal om een andere pellet te laten vallen. Herstel van de fotobeam activeert ook de computer om de datum en tijd vast te leggen en houdt een lopende telling bij van de afgegeven pellets. Deze telling van pellets wordt vervolgens geanalyseerd om de voedselinname, het maaltijdnummer, de maaltijdduur, de maaltijdgrootte of het intermeal interval tijdens een deel van de dag te bepalen met behulp van Med Assoc. Inc. software. Opnieuw de ruwe . CSV-gegevensbestand kan worden geanalyseerd door externe software39,40,49-51.</li>
	<li>Registreer het totale aantal gegeten pellets, de hoeveelheid verbruikt water en het gewicht van de dieren om de algemene gezondheid van de ratten tijdens de experimenten te onderscheiden.</li>
	<li>Spoel waterflessen af en vul dagelijks met vers water en voeg indien nodig chow toe aan de feeder hopper.</li>
	<li>Dump dagelijks de afvalpan en het dikke absorberende papier onder de kooi en blaas het stof van het dagelijks verplaatsen van een deel van de feeder met behulp van hogedruklucht. Opmerking: persoonlijke beschermingsmiddelen(bijv. toga's, handschoenen, maskers en maskers) zijn vereist.</li>
	<li>Verwijder vloeren, afvalpannen en waterflessen nadat het experiment is voltooid en was deze componenten. Verwijder ook de voedingselektronica uit de kooiwas met de hand of in een vaatwasser.</li>
</ol>3. Inductie van TMJ Artritis
<ol><li>Plaats dieren ten minste 4 dagen voor het experimenteren in de feeders. Opmerking: deze gegevens worden gerapporteerd als voordagen om een basisvoedingsgedrag te verkrijgen. Vervolgens worden de dieren uit de feeder verwijderd voor behandeling. Een van de behandelingen was het induceren van een artritis TMJ. Voor dit model worden ratten om 08:00 uur(d.w.z. begin van de lichtfase) geïnjecteerd met het volledige Freund-adjuvans (CFA) nadat de ratten zijn verdoofd met isofluraan (5% stroom).</li>
	<li>Injecteer 250 mg CFA in 50 L bilateraal in de periarticulaire ruimte van elke TMJ. Opmerking: in het voorbeeld (figuur 2) werd 250 mg CFA in 50 L in elke TMJ geïnjecteerd, maar doses tot 10 mg in volumes van slechts 15 μl zijn effectief over kortere perioden52.</li>
	<li>Injecteer controleratten TMJ met 50 L van 0,9% zoutoplossing. Opmerking: alle dieren waren mobiel binnen 5 minuten of minder na inductie van anesthesie. In het geval dat een kleinere dosis CFA in een kleiner volume wordt toegediend, zouden de controleratten hetzelfde volume zoutoplossing krijgen.</li>
</ol>

Er valt niets te onthullen.

TMJ-patiënten met orofaciale pijn melden verhoogde pijn met een verhoogde kauwtijd, zodat de kauwcyclus langer wordt naarmate het individu langer op45,53-56heeft gekauwd . Onze gedragstest maakt vergelijkbare tests bij ratten en muizen mogelijk bij het meten van de maaltijdduur39. Een recente niet-gepubliceerde studie suggereerde dat von Frey filament testen een grotere gevoeligheid had dan maaltijdduurmetingen, wat een significante verandering voor een langere periode aantoont, maar von Frey filame...

Diermodellen zijn gebruikt om pijn en nociceptie geassocieerd met orofaciale schade en of ontsteking1,2te bestuderen, maar een gebrek aan geschikte diermodellen resulteert in een onvolledig begrip van de mechanismen. Hoewel de huidige modellen ons helpen om verschillende mechanismen te begrijpen die betrokken zijn bij acute en chronische orofaciale pijn, zijn er sterke en zwakke punten aan deze diermodellen.
Veel modellen meten gedragsmatige nociceptieve reacties voor korte duur. Gezichtsverzorging is een bekende gedragsreactie na vernauwing van gezichtszenuwen3. Andere studies gemeten gezichtswrijven met de ipsilaterale voor- of achterpoot, evenals, terugdeinzen van het hoofd na het toedienen van formaline-injecties in het temporomandibulaire gewricht (TMJ) of lip4-7. Head withdrawal latencies is een ander model voor het meten van nociceptief gedrag waarbij een gemodificeerde tail flick analgesia meter wordt gebruikt om de nociceptieve respons(d.w.z. head withdrawal) te kwantificeren na het aanbrengen van warmte op het geschoren vibrissae pad van een rat8. Digastrische en masseter spieractiviteit is ook geregistreerd als een correlaat van pijn na glutamaat injecties in de TMJ9. Een andere studie heeft veranderingen in slaapparameters gemeten om nociceptieve reacties te beoordelen bij mannelijke en vrouwelijke ratten met een ontstoken TMJ, deze parameters omvatten slaaplatentie, snelle oogbeweging (REM), percentage niet-REM-slaap en percentage REM-slaap10. De meeste diermodellen die gedragsmatige nociceptieve reacties meten, gebruiken een kort tijdsbestek, d.w.z. minuten tot uren per dag11-14. Bovendien vinden de meeste diermodellen testen plaats tijdens de lichtfase en bij een nachtdier, zoals een rat, kan dit stress veroorzaken die de nociceptieve resultaten15-18kan verwarren. De bovenstaande test meet de nociceptieve respons in verschillende orofaciale aandoeningen, maar voor een korte duur en kan daarom alleen worden gebruikt om acute aandoeningen te bestuderen. Een alternatieve test heeft gezichtsuitdrukking gebruikt als een maat voor nociceptie van matige duur, maar deze methodologie kan subjectief zijn19.
Om persistente of chronische orofaciale nociceptie te evalueren, hebben sommigen de toepassing van een von Frey-gloeidraad op het huidoppervlak gebruikt om de mechanische gevoeligheid te beoordelen van dieren die zijn blootgesteld aan zenuwvernauwing of TMJ-ontsteking3,20. Liverman et al. 2009 maten ontwenningsreacties met behulp van gegradueerde monofilamenten na CFA-injecties in de masseterspier van ratten 21,22. Yamazaki et al. 2008 injecteerden de TMJ met CFA en vervolgens gedurende 14 dagen gekwantificeerd nociceptief gedrag op mechanische of warmte- of koudestimulatie toegepast op de TMJ-regio. Helaas omvatten deze nociceptieve gedragstesten dierlijke terughoudendheid, die stresshormonen, leer- of alternatief gedrag produceren dat de gemeten resultaten kan verstoren.
Modellen om nociceptie in tanden te meten gebruiken de kaakopeningsreflex, maar deze methode kan onbetrouwbaar zijn23 of onnauwkeurig24. Elektromyografische activiteit is gebruikt om tand nociceptie25te meten , maar deze methode vereist meestal dat het dier bewusteloos is, hoewel in één studie tand nociceptie werd onderzocht bij vrij bewegende ratten26. In 2008 bestudeerde Khan de relatie tussen tandheelkundige nociceptie en mastiekfunctie met behulp van een gevoelige stammeter27, maar dit bijtduurmodel vereist het beperken van het dier van normale activiteit 28. Bijtkracht is een betrouwbare maat voor tandpijn bij mensen, maar omdat ratten training en/of terughoudendheid nodig hebben om bijtkracht te meten, wordt een bron van stress geïntroduceerd die bevindingen kan opleveren met twijfelachtige fysiologische betekenis29-31
Sommige beperkingen van terughoudendheid en stress kunnen worden overwonnen door een operant ontwerp te gebruiken om nociceptief gedrag te beoordelen. Een operant model maakt gebruik van het vermijden van een ongemakkelijke temperatuur te evalueren en te karakteriseren orofaciale nociceptie32-35. Dit beloningsconflictmodel is gebaseerd op een beloning van gezoete melk om het knaagdier ertoe aan te zetten zijn gezicht vrijwillig tegen een verwarmde of gekoelde thermische sonde te plaatsen34,36. De test vereist echter diertraining, maar een kracht van de test is dat de gegevens op een geautomatiseerde manier worden verzameld.
Nog een ander diermodel gebruikte nociceptie-geïnduceerde knaagdisfunctie als een index van orofaciale nociceptie37. Het knaagdier is echter beperkt tot een buis en zijn enige ontsnapping is om door een deuvel te knagen om uit te komen. Een voordeel van dit model is dat het de kaakfunctie meet na acuut of chronisch kaakletsel bij muizen. Het knaagdier is echter beperkt, wat een verwarrend alternatief concurrerend gedrag toevoegt, d.w.z. ontsnappen, wat stressvol zou zijn en dus de resultaten van de nociceptietest zou kunnen beïnvloeden.
Maaltijdduur is gebruikt om nociceptie te meten bij dieren metTMJ-artritis 38-41, blootstelling aan tandpulp42en spierschade43. Een knaagdier dat orofaciale nociceptie ervoer, at langzamer nadat het dier een maaltijd had geïnitieerd. Patiënten die TMJ-pijn ervaren, doen er ook langer over om op hun voedsel te kauwen en de cycluslengte verkort wanneer TMJ-pijn wordt verminderd44-46. De verlenging van de maaltijdduur wanneer TMJ-pijn aanwezig is, zal naar verwachting een "bewakingsgedrag" zijn, operationeel gedefinieerd als nociceptief gedrag47.
Maaltijdduur meet TMJ-nociceptie met behulp van een niet-invasieve methode gedurende maximaal 19 dagen bij mannelijke en vrouwelijke ratten en 6 dagen (langste geteste periode) bij mannelijke muizen en kan worden beschreven als een biologische marker van nociceptie38-41. Ter ondersteuning van het feit dat de duur van de maaltijd nociceptieve reacties meet, kan de nociceptie worden verminderd door farmacologische interventie, waardoor de maaltijdduur van het dier terugkeert naar normaal38,40,41. Dit werd ook bevestigd toen nociceptieve neuronen werden vernietigd met behulp van capsaïcine; na zenuwvernietiging werd de maaltijdduur van de dieren niet verhoogd na injectie van CFA in TMJ 40.
Hieronder vindt u het protocol voor het verkrijgen en statistisch analyseren van maaltijdduurgegevens.

<table><tbody><tr><td>Animal Monitor software</td><td>Med Assoc. Inc</td><td>SOF-710</td><td>East Fairfield, VT</td></tr><tr><td>Dustless Precision Pellets, Rodent, Grain-Based&nbsp;</td><td>Bio-Serv</td><td>F0165</td><td>45 mg pellets, 50.000/doos</td></tr><tr><td>Dustless Precision Pellets, Rodent, Grain-Based&nbsp;</td><td>Bio-Serv</td><td>FO163</td><td>20 mg pellets</td></tr><tr><td>Complete Freund's Adjuvant</td><td>Chondrex, Inc.</td><td>7001</td><td>Biedt niet langer de 5 mg/ml concentratie.  U kunt CFA van andere bronnen gebruiken zolang de onderzoeker consequent deze bron gebruikt</td></tr></tbody></table>

maaltijdduur als maat voor orofaciale nociceptieve reacties bij knaagdieren

Meal Duration as a Measure of Orofacial Nociceptive Responses in Rodents

Een verlenging van de maaltijdduur kan worden gebruikt om een toename van orofaciale mechanische hyperalgesie te meten die overeenkomsten vertoont met het bewakingsgedrag van mensen met orofaciale pijn. Om de maaltijdduur te meten, worden ongeremde ratten dagen tot weken continu in geluidsverzwakkingsmodules gehouden om het voedingsgedrag vast te leggen. Deze geluiddempende kamers zijn uitgerust met chow pellet dispensers. De dispenser heeft een pellettrog met een fotobeam op de bodem van de trog geplaatst en wanneer een knaagdier een pellet uit de feederbak verwijdert, wordt deze balk niet langer geblokkeerd, wat de computer aangeeft om een andere pellet te laten vallen. De computer registreert de datum en tijd waarop de pellets uit de trog zijn gehaald en uit deze gegevens kan de experimenteerder de maaltijdparameters berekenen. Bij het berekenen van maaltijdparameters werd een maaltijd gedefinieerd op basis van eerder werk en werd ingesteld op 10 minuten (met andere woorden wanneer het dier 10 minuten niet eet, dat zou het einde van de maaltijd van het dier zijn), ook werd de minimale maaltijdgrootte vastgesteld op 3 pellets. De maaltijdduur, het maaltijdnummer, de voedselinname, de maaltijdgrootte en het interval tussen de maaltijden kunnen vervolgens door de software worden berekend voor elke periode die de exploitant wenst. Van de voedingsparameters die de maaltijdduur kunnen worden berekend, is aangetoond dat het een continue niet-invasieve biologische marker is van orofaciale nociceptie bij mannelijke ratten en muizen en vrouwelijke ratten. Maaltijdduurmetingen zijn kwantitatief, vereisen geen training of manipulatie van dieren, vereisen corticale participatie en concurreren niet met ander experimenteel geïnduceerd gedrag. Deze factoren onderscheiden deze test van andere operant of reflexmethoden voor het registreren van orofaciale nociceptie.

Maaltijdduur is een gedragscorrosie van orofaciale pijn en maaltijdduurmetingen zijn toegepast op dieren met TMJ-artritis (figuur 2) en tandbederf (figuur 3). In één experiment hadden ratten TMJ-artritis na toediening van een hoge dosis van 250 mg CFA en deze behandeling veroorzaakte een significante toename van de maaltijdduur gedurende 19 dagen (figuur 2). Een lagere dosis CFA (10 mg) geïnjecteerd in elk TMJ-gewricht veroorzaakte een kleinere toename van de maaltijdduu...

Een verlenging in maaltijdduur vertegenwoordigt orofaciaal nociceptief gedrag bij knaagdieren vergelijkbaar met het bewakingsgedrag van mensen met orofaciale pijn. Eten is een gedrag dat geen training of dierlijke manipulatie vereist, corticale participatie vereist en niet concurreert met ander experimenteel geïnduceerd gedrag, waardoor deze test wordt onderscheiden van alternatieve reflex- of operantmetingen.

Maaltijdduur als maat voor orofaciale nociceptieve reacties bij knaagdieren

A lengthening in meal duration can be used to measure an increase in orofacial mechanical hyperalgesia having similarities to the guarding behavior of ...

Het algemene doel van deze procedure is vaststellen of metingen van de maaltijdsduur een kwantitatieve correlaat zijn voor pijn aan de kaak en het gebit. Dit wordt bereikt door de ratten eerst in voerkooien te plaatsen om een basislijnmeting van de maaltijdsduur te verkrijgen. Zodra de basislijnmetingen zijn verkregen, wordt een pijnopwekkend middel geïnjecteerd in het temporomandibulaire gewricht of, als controle, in het kniegewricht.Na de injectie wordt het dier teruggeplaatst in de voerkooi en wordt het voedingsgedrag geobserveerd totdat dit terugkeert naar de baseline-waarden. Uiteindelijk worden gegevens verzameld en geanalyseerd om aan te tonen dat dieren met kaakpijn een langere maaltijdsduur hebben. Er zijn veel voordelen verbonden aan het gebruik van de maaltijdsduur en maaltijdpatronen om pijn in knaagdiermodellen te analyseren, maar wij menen dat twee van de belangrijkste voordelen van dit model ten opzichte van andere typen modellen zijn dat we de dieren niet hoeven te fixeren en dat het dier niet getraind hoeft te worden.Enkele jaren geleden merkten we op dat er geen goede methode bestond om orofaciale pijn in een diermodel te meten. Dit leidde ertoe dat we de mogelijkheid onderzochten of maaltijdpatroonanalyse gebruikt kon worden om orofaciale pijn te meten. Dit resulteerde in de ontwikkeling van het model dat we vandaag de dag gebruiken om orofaciale pijn te meten.Studies naar de maaltijdsduur worden uitgevoerd in geluidsgedempte kamers die zijn uitgerust met computergestuurde pelletvoeders die knaagdiervoer bestaande uit pellets van 45 milligram aan de voedersbak toevoegen. Deze pellets worden afgegeven in de onderliggende trog die is uitgerust met een fotobalk. Er is een glazen dekglas over de opening van de fotobalk geplaatst om te voorkomen dat deeltjes de lichtstraal blokkeren.Zodra een rat het pellet uit het voerbakje verwijdert, wordt de fotobalk hersteld en krijgt de computer een signaal om een volgend pellet te laten vallen. Op deze manier is er altijd een pellet beschikbaar zonder dat dit extra inspanning van het dier vereist. Plaats na het vullen van de waterfles absorberend papier in de opvangbak eronder.Start met het laden van de software voor dierbewaking en selecteer 'configuratie' in het uitklapmenu om de voereenheden in te stellen. Vink het vakje 'pellet delivered' uit om te registreren wanneer de pellet uit het voerbakje wordt verwijderd in plaats van wanneer deze wordt afgegeven. Vink vervolgens het vakje 'automatic file naming' aan om de bestanden automatisch te benoemen.Nadat u de experiment-optie hebt gekozen uit het vervolgkeuzemenu 'bewerk', voert u de bestandsnaam in het nieuwe venster in om ervoor te zorgen dat de gegevens correct worden verzameld. Voer in het vak voor de experimentduur in dagen een waarde in die de totale tijd van het experiment overschrijdt. Stel vervolgens de waarde voor het aantal uren per dag in op 24 voor de maaltijdperiode en de criteria.Voer een waarde van 10 minuten in. Voer 45 in het vak met de titel pellet size milligrams in. Voer in het fasegedeelte van het experimentvenster de term day in het naamveld en in het veld voor het aantal uren in.Typ 24 als voorbeeld. Voer onder de kop van de dagfase het woord light in het naamveld in en voer 60 in het percentageveld in. Herhaal deze procedure door dark in het naamveld in te voeren met een percentagewaarde van 40.Select vervolgens de knop 'alle vakjes selecteren' zoals hier getoond. Sla deze informatie op en klik daarna op oké. Wanneer het scherm voor het starten van de vakjes verschijnt, selecteert u de te activeren voeders en klikt u op oké.De runtime-vensters van de dierenmonitor verschijnen vervolgens met de gegevens van het voedingspatroon. Na het observeren van het basisvoedingsgedrag wordt het dier uit de voerbak gehaald voor de inductie van pijn door artritis van het temporomandibulaire gewricht. Zodra het dier is geanestheseerd, wordt het temporomandibulaire gewricht gelokaliseerd en wordt complete fres adjuvant in de gewrichtsspleet geïnjecteerd.Herhaal deze procedure aan de andere zijde. Controle-ratten krijgen een injectie van 50 µL 0,9% zoutoplossing. Een andere groep dieren krijgt een injectie van CFA in het kniegewricht.Breng de dieren na de injectie terug naar de voedereenheid zodra ze zich hebben hersteld van de anesthesie. Monitor tijdens de assay voor maaltijdsduur het voedingsgedrag van de arthritische ratten totdat hun maaltijdsduur is teruggekeerd naar de basiswaarden. Dit kan één tot 19 dagen duren, afhankelijk van de dosis CFA.De eerder geconfigureerde software-instellingen houden het aantal afgegeven korrels over een specifieke tijdsperiode tijdens de assay bij. Spoel de waterflessen dagelijks om, vul ze bij en voeg voer toe aan de trechter van de voerbak. Vervang bij behovte dagelijks het absorberende papier voor de beste resultaten.Blaas het stof uit het trogje en de bewegende delen van de voeder door middel van perslucht en veeg het dekglas dagelijks schoon. Reinig het pad van de fotobeam als er een blokkering wordt waargenomen. Na voltooiing van de studie moeten alle kooi-componenten worden verwijderd en gewassen.Bestanden worden dagelijks gegenereerd; open deze bestanden automatisch om gegevens over maaltijdpatronen op te halen, zoals voedselinname, het aantal maaltijden of de maaltijdsduur. Alternatief kunnen maaltijdpatronen worden berekend met behulp van eigen software, afhankelijk van de behoeften van de onderzoeker in dit experiment. Ratten met door CFA geïnduceerde pijn door temporomandibulaire gewrichtsartritis vertoonden een significante toename in de maaltijdsduur gedurende 19 dagen in vergelijking met dieren die een saline-injectie kregen of dieren die CFA-injecties in de knie ontvingen.Deze methode kan worden toegepast op andere vormen van orale pijn, zoals hier wordt getoond. De maaltijdsduur was ook verhoogd bij ratten die pijn ervoeren na blootstelling van de tandpulpa. Bij het gebruik van deze procedure zijn er twee zaken die u waarschijnlijk dagelijks moet oplossen.Wanneer u spray dolly-ratten van ongeveer 300 gram gebruikt, zouden ze tussen de 300 en 600 pellets per dag moeten eten. Als ze minder pellets eten, bijvoorbeeld minder dan 300, is er waarschijnlijk een probleem met de sensor aan de bovenkant van de voedereenheid die schoongemaakt moet worden. Als ze meer dan 600 pellets eten, ligt het waarschijnlijk aan de sensor in de voerbak en moet deze worden gereinigd.Dit zijn dus de twee zaken waar u rekening mee moet houden bij het uitvoeren van deze assay. Het model voor de analyse van maaltijdpatronen biedt verschillende voordelen ten opzichte van andere modellen bij het bestuderen van orofaciale pijn. Het model omvat corticale pathways en meet daarom niet simpelweg reflexmechanismen.Het model kan 24 uur per dag worden gebruikt en vertoont geen alternatieve gedragingen. Dit model wordt hiermee een zeer krachtig instrument bij het bestuderen van orofaciale pijn.

meal-duration-as-measure-orofacial-nociceptive-responses

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

This video demonstrates the induction of orofacial neuropathic pain in a rat model by ligating the infraorbital nerve. This results in nerve damage and inflammation, causing abnormal pain signaling and mimicking chronic pain conditions, which can be used to study the orofacial pain assay.

Inducing Orofacial Neuropathic Pain in a Rat Model via Infraorbital Nerve Ligations

We presenteren een gebruiksvriendelijke, high-throughput operante systeem voor de evaluatie van pijn gedragingen in wakkere, bewuste knaagdieren. De Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) kan de pijn te beoordelen door middel van een beloning / conflict paradigma waardoor een meer humane manier van testen. Dit protocol zal meer klinisch relevante en translationele gegevens uit knaagdieren opleveren.

Gebruik van de operante Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) om veranderingen in Nociceptieve Gedrag Meet

We beschrijven een protocol bij de ontwikkeling van door opioïden veroorzaakte hyperalgesie en tolerantie in muizen te onderzoeken. Op basis van de meting van thermische en mechanische nociceptieve reacties van naïeve en morfine behandelde dieren, het mogelijk om de toename van gevoeligheid voor pijn (hyperalgesie) kwantificeren afname analgesie (tolerantie) geassocieerd met chronische opiaat toediening.

Beoordeling van de Morfine-geïnduceerde hyperalgesie en analgesietolerantie in Muizen middel van thermische en mechanische Nociceptieve modaliteiten

In deze paper we nadere bijzonderheden te geven voor de wijze van productie en kwaliteitscontrole van een IL4-10 recombinante fusieproteïne. Ook laten we zien hoe te testen van de effectiviteit van dit eiwit op te lossen in een muismodel van inflammatoire pijn pijn.

Ontwikkeling van recombinante eiwitten voor de behandeling van chronische pijn

Verstrekt hier is een protocol dat details stappen om een diermodel van chronische post-ischemie pijn (CPIP) te vestigen. Dit is een goed herkend model nabootsen van humaan complex regionaal pijnsyndroom type-I. Mechanische en thermische overgevoeligheid worden verder geëvalueerd, evenals capsaïcine-geïnduceerde nocifensieve gedrag waargenomen in de CPIP rat model.

Chronische post-ischemie pijn model voor complexe regionale pijnsyndroom type-I bij ratten

Het meest opvallende symptoom van migraine is ernstige hoofdpijn, en er wordt verondersteld dat dit wordt gemedieerd door sensorische neuronen die de hersenvliezen innerveren. Hier presenteren we een methode om stoffen lokaal op de dura toe te passen op een minimaal invasieve manier met behulp van gezichtsovergevoeligheid als output.

Durale stimulatie en periorbitale von Frey-testen bij muizen als een preklinisch model van hoofdpijn

De mechanische conflictvermijdingstest wordt gebruikt als een niet-reflexieve uitlezing van pijngevoeligheid bij muizen die kan worden gebruikt om affectieve-motiverende reacties in verschillende muispijnmodellen beter te begrijpen.

Mechanische conflictvermijdingstest om pijngedrag bij muizen te meten

Dit protocol beschrijft de beoordeling van mechanische overgevoeligheid in een rattenmodel van neuropathische orofaciale pijn met behulp van een op operant gebaseerd orofaciaal pijnbeoordelingsapparaat.

Beoordeling van door zenuwletsel geïnduceerde mechanische overgevoeligheid bij ratten met behulp van een orofaciale operante pijntest

Chronische vernauwingsschade van de distale infraorbitale zenuw bij muizen induceert veranderingen in spontaan gedrag (verhoogde gezichtsverzorgingsactiviteit) en nocifensief gedrag als reactie op tactiele stimulatie (hyperreactiviteit op von Frey-haarstimulatie) die tekenen zijn van aanhoudende pijn en allodynie, en dient als model voor trigeminusneuropathische pijn.

Chronisch vernauwingsletsel van de distale infraorbitale zenuw (DIoN-CCI) bij muizen om trigeminusneuropathische pijn te bestuderen

Dit protocol beschrijft hoe het meten van de bijtkracht en de drempel voor hoofdterugtrekking pijngedrag kan vastleggen bij ontstekingsaantasting van het temporomandibulair gewricht (TMJ) veroorzaakt door Complete Freund's Adjuvant (CFA).

Temporomandibulair gewrichtspijnmeting door bijtkracht en Von Frey filamenttests bij muizen

Recente ontwikkelingen in pijnonderzoek benadrukken het potentieel van fotoneuromodulatie met behulp van groene lichtgevende diodes (GLED) als niet-medicamenteuze behandeling. GLED moduleert pijnpaden en biedt effectieve pijnverlichting. Dit artikel heeft tot doel de GLED-blootstellingsprotocollen te standaardiseren en te verfijnen, de consistentie tussen onderzoeken te verbeteren en de klinische toepassing van deze therapie te bevorderen.

Optimalisatie van fotoneuromodulatietechnieken om de rol van groen lichtgevende diodes bij pijnbestrijding te evalueren

Leer hoe maaltijdduur als kwantitatieve maat voor orofaciale pijn bij knaagdieren wordt gebruikt. Deze niet-invasieve methode meet voedingsgedrag zonder dieren te immobiliseren.

Maaltijdduur als maat voor orofaciale nociceptieve reacties bij knaagdieren

Meer video's verkennen