Name: Inchworming: A Novel Motor Stereotypy in de BTBR T + Itpr3 Tf / J Mouse Model van autisme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-05T16:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 3 s
Description: Leer een gemodificeerde jeugdige speeltest om inchworming-gedrag te analyseren bij BTBR-muizen. Deze methode meet duur, frequentie en latentie van deze motorische stereotypie relevant voor autismeonderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs zijn dankbaar voor de technische en logistieke steun en expertise uit door Rose Tobias, Younghee Ahn, en David N. Ruskin. Het hier beschreven onderzoek werd gefinancierd door de Alberta Children&#39;s Hospital Foundation en Alberta Children&#39;s Hospital Research Institute.

Alle procedures werden uitgevoerd in overeenstemming met de Canadese Animal Care Comite gedragen en door de Universiteit van Calgary Animal Care Comite goedgekeurd. 1. Bereiding van dieren <ol><li> Isoleer muizen overnacht (12 uur) voor de test. Om dit te doen, plaatst alle BTBR en B6 muizen (P35-P40) die nodig zijn voor experimentele analyse in kooien op zich de dag voor het testen. </li><li> Plaats de geïsoleerde muizen in de gedragsanalyse kamer 30 min voorafgaand aan het testen, zodat dieren wennen aan de nieuwe omgeving. </li></ol> 2. Apparatuur voorbereiding <ol><li> Plaats de 30 x 30 cm Plexiglas box met een verwijderbaar deksel in de testkamer. Plaats de doos op een tafel en plaats de videocamera op een hoek van 45 ° van de bodem; deze plaats van de camera visualisatie van de gehele vloer van de ruimte en de muis mogelijk. Gebruik een infrarood-backlight te helpen minimaliseren schittering van de muur vande doos. </li><li> Gebruik een videocamera die een hoge zoomfunctie bezit met infrarood mogelijkheden om het filmen te optimaliseren in een lage lux omgeving. De focus van de camera op de behuizing het beeld te vergroten, zodat de muizen worden gevisualiseerd in het hele vak. </li><li> Bedek de hele bodem van de doos met zaagsel beddengoed (moet ongeveer 1 cm diep). </li></ol> 3 Testing Procedure <ol><li> Plaats een intra-stam paar muizen (BTBR - BTBR of B6-B6) binnen het testen behuizing. </li><li> Schakel het licht uit in de testkamer. </li><li> Start de video camera op te nemen en verlaat de kamer. Dit experimentator invloed op het gedrag van de muizen te verhinderen. Noteer de activiteit 11 min. </li><li> Zodra de registratie is voltooid, opnieuw in te voeren de testkamer en de terugkeer van de muizen naar hun oorspronkelijke thuis kooien. </li><li> Gooi het zaagsel beddengoed, was het gehele testproces doos met 70% ethanol, en leg nieuwe zaagsel beddengoed in de bodem van de testenbehuizing. </li><li> Herhaal de gehele procedure voor de rest van de intra-vlek paren en terug de muizen om hun oorspronkelijke kooien. </li></ol> Opmerking: Om de betrouwbaarheid van de inchworming gegevens te controleren, kan de procedure worden herhaald op de volgende dagen met verschillende BTBR-BTBR en B6-B6 paar combinaties. Dit zorgt ervoor dat het waargenomen gedrag niet afhankelijk van de specifieke partner in de ruimte, maar de inchworming individu. 4. Data Analysis <ol><li> Inchworming wordt gedefinieerd als de synchrone en afvoer van het dier voor-en achterbenen-meter, met een minimum van een co-voorkomende actieve en daaropvolgende beweging naar buiten die effectief verplaatst het beddengoed. Handmatig kijken en scoren elke video twee keer (een keer voor elke muis) om de totale duur, de frequentie en latency na te gaan in inchworm in de 10 minuten video. Handmatig scoren van inchworming duur, frequentie en latency moeten worden gebaseerd op de following definities: Inchworming Duur: wordt gedefinieerd als de totale tijd elke muis is ingezet in de inchworming gedrag. Om dit aspect van inchworming scoren, gebruik maken van een timer die kan worden gestart en gestopt. Start timing wanneer de muis begint te inchworm en stoppen van de timer wanneer de muis stopt inchworming. Wanneer en als de muis weer begint te inchworm, herstart en opnieuw stop de timer. Herhaal het starten en stoppen van de timer voor de duur van 10 min observatieperiode telkens de muis inchworms. Dit zal een inchworming duur score die 0:00-10:00 min te genereren. Inchworming Frequentie: wordt gedefinieerd als het aantal malen de muis neemt in de inchworming gedrag in de 10 min. observatieperiode. Een enkele telling wordt toegekend telkens wanneer de muis starts en stops inchworming. De inchworming frequentie score zal een getal tussen 0 en ∞. Latentie Inchworm: wordt gedefinieerd als de tijd ebij gaat voordat het eerste begin van inchworming. Start de timer wanneer de video begint, deze keer 00:00, en stopt de timer wanneer de muis inchworms voor de eerste keer. Als de muis de inchworming gedrag niet wordt weergegeven de latency te inchworm zal zijn 10:00. Bij het analyseren van latentie te inchworm, zal een score 0:01-10:00 min worden verkregen. Muizen die niet inchworm voor de duur van de testperiode moet het monster populatie worden verwijderd zodat de resultaten zijn relevant voor een populatie van muizen die de inchworming gedrag vertonen. </li> <li> Bereken de totale frequentie en duur van inchworming voor elke muis in de video. Bereken de benodigde tijd voor de eerste muis van het paar inchworm de latentie inchworm voor die specifieke paar muizen. Deze parameters zijn gebaseerd op voorafgaande methodologische werkzaamheden die verband houden met repetitieve graven gedrag bij muizen 6. </li><li> Bereken de gemiddelde duur, de frequentie,en latency te graven voor elke experimentele groep in de analyse (dwz BTBR vs B6). Gebruik een ANOVA of een t-test om gegevens tussen stammen / experimentele groepen te vergelijken. Opmerking: Wanneer de procedure is voltooid op een tweede dag, gebruik dan een herhaalde metingen ANOVA om ervoor te zorgen dat er geen verdere effecten proef of pairing effecten. </li></ol>

<ol><li>McFarlane, H. G., Kusek, G. K., Yan, M., Phoenix, J. L., Bolivar, V. J., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autism-like+behavioral+phenotypes+in+BTBR+T%2Btf%2FJ+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%2C+Brain%2C+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Autism-like behavioral phenotypes in BTBR T+tf/J mice.</a> Genes, Brain, and Behavior. 7, 152-163 (2008).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Designing+mouse+behavioral+tasks+relevant+to+autistic-like+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Mental+Retardation+and+Developmental+Disabilities+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Designing mouse behavioral tasks relevant to autistic-like behaviors.</a> Mental Retardation and Developmental Disabilities Research Reviews. 10 (4), 248-258 (2004).</li>
<li>Deacon, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digging+and+marble+burying+in+mice%3A+simple+methods+for+in+vivo+identification+of+biological+impacts%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Digging and marble burying in mice: simple methods for in vivo identification of biological impacts.</a> Nature Protocols. 1 (1), 122-124 (2006).</li>
<li>Thomas, A., Burant, A., Bui, N., Graham, D., Yuva-Paylor, L. A., Paylor, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Marble+burying+reflects+a+repetitive+and+perseverative+behavior+more+than+novelty-induced+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Marble burying reflects a repetitive and perseverative behavior more than novelty-induced anxiety.</a> Psychopharmacology. 204, 361-373 (2009).</li>
<li>Dudek, B. C., Adams, N., Boice, R., Abbott, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+influences+on+digging+behaviours+in+mice+%28Mus+musculus%29+in+laboratory+and+seminatural+settings%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Psychology%22%5BJournal%5D)">Genetic influences on digging behaviours in mice (Mus musculus) in laboratory and seminatural settings.</a> Journal of Comparative Psychology. 97 (3), 249-259 (1983).</li>
<li>Webster, D., Williams, M. H., Owens, R., Geiger, V., Dewsbury, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digging+behavior+in+12+taxa+of+muriod+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Learning+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Digging behavior in 12 taxa of muriod rodents.</a> Animal Learning and Behavior. 9 (2), 173-177 (1981).</li>
<li>Pobbe, R. H., Pearson, B. L., Defensor, E., Bolivar, V. J., Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+social+behaviours+of+C57BL%2F6J+versus+BTBR+inbred+mouse+strains+in+the+visible+burrow+system%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Expression of social behaviours of C57BL/6J versus BTBR inbred mouse strains in the visible burrow system.</a> Behavioural Brain Research. 214, 443-449 (2010).</li>
<li>Lewis, M. H., Tanimura, Y., Lee, L., Bodfish, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+restricted+repetitive+behavior+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models of restricted repetitive behavior in autism.</a> Behavioural Brain Research. 176, 66-74 (2007).</li>
<li>Silverman, J. L., Yang, M., Lord, C., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioural+phenotyping+assays+for+mouse+models+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews%22%5BJournal%5D)">Behavioural phenotyping assays for mouse models of autism.</a> Nature Reviews. 11, 490-502 (2010).</li>
<li>Deacon, R., Rawlins, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+lesions%2C+species-typical+behaviours+and+anxiety+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Hippocampal lesions, species-typical behaviours and anxiety in mice.</a> Behavioural Brain Research. 156, 241-249 (2005).</li>
<li>Pearson, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+and+cognitive+sterotypies+in+the+BTBR+T%2Btf%2FJ+mouse+model+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%2C+Brain%2C+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Motor and cognitive sterotypies in the BTBR T+tf/J mouse model of autism.</a> Genes, Brain, and Behavior. 10, 228-235 (2011).</li>
<li>Pobbe, R. H., Defensor, E., Pearson, B. L., Bolivar, V. J., Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((General+and+social+anxiety+in+the+BTBR+T%2B+tf%2FJ+mouse+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">General and social anxiety in the BTBR T+ tf/J mouse strain.</a> Behavioural Brain Research. 216 (1), 446-451 (2011).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Inchworming is een nieuwe maat repetitieve gedrag dat kan worden gebruikt om vele aandoeningen die stereotiep zoals ASS vertonen bestuderen. Er zijn 4 stappen die van groot belang voor het genereren betrouwbare inchworming gegevens van de gewijzigde juveniele sociale interactie protocol: 1) de verlengde afzonderingsperiode is essentieel voor de inchworming testen en niet van het protocol worden verwijderd of ingekort. Deze eis is specifiek proeven op inchworming paarsgewijs beschreven. 2) De videocamera vereist een dege...

Hoewel de pathofysiologie van autisme spectrum stoornissen (ASS) blijft onduidelijk, diagnose hangt af van de aanwezigheid van drie brede categorieën symptoom: abnormale sociale wederkerigheid, beperkingen in de communicatie, en repetitief / stereotiep gedrag 1. De meeste knaagdier modellen zijn niet in staat om gelijktijdig te reproduceren alle drie symptomen bij een enkel dier. Zo modellen die met zekerheid kan simuleren sommige of alle aspecten van de stoornis houden grote waarde voor de ontwikkeling van doeltreffende preventieve en therapeutische strategieën. Een model dat doet al drie aspecten van ASD weer is het BTBR muis 1,2. In combinatie met ultrasone geluiden en sociale aanpak testen, is de jeugdige sociale interactie testen vaak gebruikt om muismodellen van pediatrische ASD karakteriseren; Deze tests meten daalde en abnormale sociale gedragingen die kerneigenschappen van ASD vertegenwoordigen. Naast de juveniele sociale interactie test, vele andereproeven zijn gebruikt om stereotype gedrag meten diermodellen van ASS. Bijvoorbeeld, de marmeren begraven test, die de neiging van een dier strooisel verplaatsen met de snuit en voorpoten in het werk om een object te dekken onderzoekt, wordt gedacht dat dwangmatige stereotypische gedragingen die optreden als gevolg van aversieve stimuli 3,4 meten. Daarom hebben graven testen uitgevoerd om dit repetitief gedrag bij ASS diermodellen en verschillende soorten knaagdieren 3,5-7 kwantificeren. Graven gedrag worden gedefinieerd als voor de hand liggende gerichte acties van de snuit of poten te strooisel verdringen en zijn hypothese een gevoelige parameter van herhalende motorische gedrag 4 zijn. Hier melden wij een nieuw type van graven, die we &quot;inchworming,&quot; hebben genoemd in de BTBR stam van muizen. De karakterisering van deze nieuwe gedrag kan een robuuste maatregel van herhalende motorische gedrag dat kan worden gebruikt voor verdere val biedenidation van knaagdier modellen zoals ASS, Huntington Disease of obsessief dwangmatig gedrag 8,9. Wij &quot;inchworming&quot; ten minste een synchrone beweging van de voor-en achterpoten ledematen binnen gevolgd door een synchrone beweging buiten die leidt tot de verplaatsing van strooisel. Dit verschilt van de typische graafgedrag op vele manieren. Eerst wordt de inchworming gedrag meestal waargenomen als een combinatie episodes plaats van een geïsoleerde gebeurtenis. Daarentegen kan graven optreden als gebundeld beweging van ofwel de achterpoten of voorpoten 3. Bovendien inchworming bewegingen meestal horizontaal plaatsvinden over de leefruimte in tegenstelling tot de stationaire posities die kenmerkend graven gedragingen. Ten slotte is de inchworming gedrag hieronder beschreven komt vaak voor bij de BTBR inteeltstam van muizen, maar wordt zelden genoemd in de B6 controle stam, terwijl typische graafgedrag zijn gemeenschappelijk in B6 en BTBR stammen van muizen <sup&gt; 10. De inchworming testprocedures die in deze studie vertegenwoordigen modificaties van een standaard jeugdige sociale interactie protocol 1. Gezien het feit dat marmer begraven, graven, en juveniele speelwaarde hebben vastgesteld voor het meten van abnormaal gedrag in muismodellen van ASD, de inchworming gedrag vult deze eerder gedefinieerde metingen van stereotiep gedrag. Met name de inchworming gedrag een bruikbare maat voor lagere orde motor stereotiep die gewoonlijk worden geïdentificeerd ASD 8,11. Bovendien kan deze nieuwe inchworming procedure onderzoekers een extra waardevol instrument voor de analyse van zich herhalende motorische gedrag aan ontwikkelingsstoornissen zoals ASS relevant.

<table><tbody><tr><td>30 cm X 30 cm Plexiglas box met deksel</td><td></td><td></td><td>Kan worden gebouwd </td></tr><tr><td>IR Camera </td><td>Survshop (Calgary, Alberta)</td><td>Sony CCD Camera DP955V- 30&#8217; Infrared Armor Dome</td><td>Zoek een camera met hoge resolutie en zoommogelijkheden</td></tr><tr><td>DVR</td><td>Supercircuits (Austin, Texas)</td><td>BLACK Enterprise-Class 4-Channel H.264 beveiligings-DVR met DVD-brander</td><td>Hoge gegevenscapaciteit</td></tr><tr><td>Zaagsel</td><td></td><td></td><td>Hetzelfde als strooisel </td></tr></tbody></table>

inchworming: a novel motor stereotypy in de btbr<em&gt; t<sup&gt; +</sup&gt; itpr3<sup&gt; tf</sup</em&gt; / j mouse model van autisme

Inchworming: A Novel Motor Stereotypy in the BTBR T+ Itpr3tf/J Mouse Model of Autism

Autisme Spectrum Stoornis (ASS) is een gedragsmatig gedefinieerde neurologische aandoening gekenmerkt door verminderde wederkerige sociale interactie, abnormale communicatie, en repetitief gedrag met beperkte belangstelling. Van de diagnose is gebaseerd op klinische criteria, moeten alle mogelijk relevante knaagdier modellen van dit heterogene aandoening ideaal recapituleren deze diverse gedragskenmerken. De BTBR T + Itpr3 tf / J (BTBR) muis is een gevestigd dierlijk model van ASS weergeven herhaald gedrag zoals verhoogde verzorging, alsmede cognitieve starheid. Met betrekking tot sociale interactie en interesse, heeft de jeugd play-test werd toegepast in meerdere knaagdier modellen van ASD. Hier laten we zien dat een repetitieve synchrone graven beweging wanneer BTBR muizen worden getest in een juveniele sociale interactie afgesloten ruimte waarin zaagsel beddengoed, geven ze. Deze herhalende motorische gedrag, aangeduid als &quot;inchworming,&quot; werd genoemdvanwege de stereotiepe aard van de bewegingen vertoond door de muizen terwijl horizontaal bewegen over de vloer. Inchworming muizen moeten hun voor-en achterste ledematen gebruiken synchroon met de aanwezige verplaatsen, uitvoeren van ten minste een actieve en een passieve beweging. Hoewel zowel BTBR en C56BL/6J (B6) muizen vertonen dit gedrag, BTBR muizen tonen een significant hogere duur en frequentie van inchworming en een verminderde latentie te leiden inchworming wanneer geplaatst in een bedden behuizing. Wij concluderen dat deze nieuw beschreven gedrag biedt een maatstaf voor een herhalende motorische stereotypy die gemakkelijk kan worden gemeten in diermodellen van ASD.

De aangepaste versie van de jeugdige play-test hier beschreven kan worden gebruikt om te observeren en analyseren van de roman repetitieve graafgedrag genoemd inchworming. Inchworming wordt tentoongesteld in veel grotere mate door BTBR muizen dan B6 controles. In een typische 10 min sessie, zal BTBR muizen de verschillende inchworming gedrag vertonen (synchroon-en afvoer van de poten in een poging om het zaagsel beddengoed verdringen) gedurende ongeveer 5 minuten, of de helft van de observatieperiode. Bovendien, de late...

Inchworming is een zeer repetitief synchrone graven motion weergegeven door BTBR T + Itpr 3tf / J (BTBR) muizen wanneer geplaatst in een test kooi met voldoende zaagsel beddengoed. De procedure is een wijziging van de jeugdige sociale interactie protocol en wordt hier gebruikt om herhalende motorische stereotiep om Autisme Spectrum Stoornis relevant beoordelen.

Inchworming: A Novel Motor Stereotypy in de BTBR<em&gt; T<sup&gt; +</sup&gt; Itpr3<sup&gt; Tf</sup</em&gt; / J Mouse Model van autisme

Autism Spectrum Disorder (ASD) is a behaviorally defined neurodevelopmental disorder characterized by decreased reciprocal social interaction, abnormal ...

Het algemene doel van deze procedure is het gebruik van een aangepaste speeltest voor juveniele dieren om 'inch worming'-gedrag, een nieuwe motorische stereotypie, te observeren. Dit wordt bereikt door elke muis eerst 12 uur voor aanvang van de test sociaal te isoleren, met onafhankelijk toegang tot voedsel en water. De tweede stap is het opstellen van de videocamera in een hoek van 45 graden ten opzichte van de testomgeving.Vervolgens worden de geïsoleerde muizen in paren in de behuizing geplaatst, waar ze gedurende 11 minuten in het donker worden gefilmd. De laatste stap is het analyseren van het 'inch worming'-gedrag op basis van de video om de duur, frequentie en latentietijd tot aan het begin van het 'inch wormen' te meten. Uiteindelijk maakt deze methode de analyse van motorische neuropathieën mogelijk en kan deze worden gebruikt als indicator voor het testen van nieuwe therapeutische interventies.Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen binnen het autisme-onderzoek, zoals de incidentie en regulatie van motorische stereotypieën. Een visuele demonstratie van deze procedure is essentieel voor het aanleren van de taak, omdat het gedragsfenotype moeilijk te identificeren is en het 'inch worming'-gedrag zich op een snelle en repetitieve wijze manifesteert. Bereid de BTBR- en black six-muizen voor op de procedure door ze gedurende 12 uur overnacht in afzonderlijke kooien te isoleren.Voordat er wordt getest, vertonen de BTBR-muizen die in deze studie worden gebruikt alle belangrijkste aspecten van autismespectrumstoornissen die bij muizen worden gevonden; black six-muizen worden op de dag van het experiment als controles gebruikt. Plaats de geïsoleerde muizen 30 minuten voor aanvang van de test in de ruimte voor gedragsanalyse, zodat de dieren kunnen wennen aan de nieuwe omgeving. Plaats vervolgens een plexiglas box van 30 bij 30 centimeter met een afneembaar deksel diagonaal op de tafel.Verlicht de box in de testruimte van achteren met infraroodlicht om schittering te minimaliseren. Plaats vervolgens een videocamera met een sterke zoomfunctie en infraroodmogelijkheden onder een hoek van 45 graden, zodat de gehele bodem van de behuizing en de muis kunnen worden vastgelegd. Stel de camera scherp op de behuizing, zodat de muizen overal in de box zichtbaar zijn.Zodra de box en de camera zijn opgesteld, bedekt u de gehele bodem van de box met een laag zaagsel van ongeveer één inch dik. Plaats twee BTBR- of zwarte zes muizen tegelijkertijd in de testomgeving en schakel de verlichting in de testruimte uit. Start vervolgens de videocamera om op te nemen en verlaat de ruimte om te voorkomen dat u het gedrag van de muizen beïnvloedt of beïnvloedt tijdens het experiment.Registreer de activiteit gedurende 11 minuten. Zodra de registratie is voltooid, gaat u de testruimte opnieuw binnen en plaatst u de muizen terug in hun oorspronkelijke thuiskooien. Voer de zaagselbedekking af.Was de volledige testbox met 70% ethanol en plaats vervolgens nieuwe zaagselbedekking op de bodem van de testomheining met een diepte van ongeveer één inch. Herhaal de volledige procedure voor de overige paren van de onderzochte stammen en plaats de muizen terug in hun oorspronkelijke thuiskooien. Om na voltooiing de betrouwbaarheid van de data over het meetwormgedrag te verifiëren, wordt de procedure op opeenvolgende dagen herhaald met verschillende combinaties van paren van de BTBR- en C57BL/6-stammen.Dit zorgt ervoor dat het waargenomen gedrag niet wordt beïnvloed door een specifieke partner in de kooi. Bekijk en score elke video handmatig twee keer, één keer voor elke muis, om de totale duur, frequentie en latentie tot de inchworm-beweging vast te stellen. In de video's.Analyseer elke video gedurende 10 minuten, beginnend bij het tijdstip van drie seconden tot en met 10 minuten. Drie seconden. Definieer 'inchworming' als de synchrone, naar binnen en naar buiten gerichte beweging van de voor- en achterpoten van de dieren, met minimaal één gelijktijdige naar binnenwaartse en vervolgens naar buitenwaartse beweging die de ondergrond effectief verplaatst. Scoor de duur van de inchworming als de totale tijd die elke muis besteedt aan dit inchworming-gedrag.Om dit aspect van inchworming te scoren, gebruikt u een timer die kan worden gestart en gestopt. Start de timer wanneer de muis begint met inchwormen en stop de timer wanneer de muis hiermee stopt. Als de muis opnieuw begint met inchwormen, start de timer opnieuw en laat deze lopen tot de muis weer stopt.Dit zal een score voor de duur van het warmschuimelen genereren die tussen nul en 10 minuten ligt. Definieer de frequentie van het warmschuimelen als het aantal keren dat de muis het warmschuimelgedrag vertoont. Tijdens de observatieperiode van 10 minuten wordt telkens wanneer de muis start en stopt, één telling toegekend.Inchworming. Definieer de latentietijd tot inchworming als de tijd die verstrijkt vóór het eerste begin van inchworming. Start de timer wanneer de video begint en stop de timer wanneer de muis voor het eerst inchwormt.Als de muis geen inchworm-gedrag vertoont, wordt de latentie tot inchworming vastgesteld op 10 minuten. Bereken vervolgens de totale frequentie en duur van de inchworming voor elke muis in de video. Het gemiddelde van de twee muizen wordt gebruikt als de totale frequentie en duur voor die video.Bepaal vervolgens de tijd die nodig is voordat de eerste muis in het paar het inchworm-gedrag vertoont voor de latentie van het inchwormen. Verwijder voor dat specifieke muizenpaar de muizen die gedurende de testperiode geen inchworm-gedrag vertonen uit de steekproefpopulatie, om ervoor te zorgen dat de resultaten relevant zijn voor een populatie muizen die dit gedrag vertonen. Bereken de gemiddelde duur, frequentie en latentie tot het graven voor elke experimentele groep in de analyse en gebruik vervolgens een ANOVA of t-toetsen om de gegevens tussen stammen binnen de experimentele groepen te vergelijken. Gebruik na de tweede testdag een ANOVA voor herhaalde metingen om vast te stellen dat er geen effecten van opeenvolgende tests of koppelings-effecten in de getoonde gegevens aanwezig waren.Hier zijn de gemiddelde frequentie, duur en latentie tot het vertonen van 'inchworming' door paren BTBR- en C57BL/6-muizen. De BTBR-stam vertoonde een significant hogere frequentie en duur van inchworming, evenals een significant kortere latentie dan de C57BL/6-controlestam. Wanneer deze tests werden herhaald met alternatieve koppelingen, werden er geen significante verschillen gevonden, wat bevestigt dat de effecten niet afhankelijk waren van specifieke muiskoppelingen of de herhaling van de tests. Bij het uitvoeren van deze procedure is het belangrijk om te onthouden dat alleen de synchrone naar binnen en naar buiten beweging van de voor- en achterpoten van het dier als inchworming moet worden gescoord. Na beheersing van deze procedure.Andere methoden, zoals het toedienen van geneesmiddelen, kunnen aan het paradigma worden toegevoegd om aanvullende vragen te onderzoeken, zoals therapeutische doelwitten voor stereotiep gedrag.

inchworming-novel-motor-stereotypy-btbr-t-itpr3tfj-mouse-model

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

This video demonstrates the use of a radial locomotion assay to evaluate motor dysfunction in C. elegans expressing either wild-type or ALS-mutant human TDP-43 protein. Worms with varying levels of wild-type or mutant TDP-43 expression are allowed to crawl, and their movement is measured by the radial distance traveled from the central point on the assay plate. The assay distinguishes between mild, moderate, and severe motor impairments based on the distance traveled by the different C. elegans...

Evaluating Motor Impairment in C. elegans Models Using the Radial Locomotion Assay

Ziekte, hoofdletsel, genetische modificaties en de behandeling van muizen met medicijnen kunnen diepgaande effecten hebben op het gedrag. Door gebruik te maken van goed gekarakteriseerde en gevalideerde benaderingen zoals het begraven van marmer en het versnipperen van nestjes, kunnen dwangmatig gedrag nauwkeurig worden gedocumenteerd bij muizen als modellen van menselijke obsessieve-compulsieve stoornis en autismespectrumstoornis.

Marmer begraven en Nestlet verscheuren als Tests van Repetitive, dwangmatig-achtig gedrag in Muizen

Dit artikel beschrijft een video-imagingtechniek en hoogwaardige ruimte-tijdelijke mapping om veranderingen in de neurale regulatie van colonische motiliteit bij volwassen muizen te identificeren. Subtiele effecten op gastro-intestinale (GI) functie kunnen worden gedetecteerd met behulp van deze aanpak in geïsoleerde weefselpreparaten om ons begrip van GI-ziekte te bevorderen.

Video Imaging en Maps Spatiotemporal om gastro-intestinale motiliteit analyseren in Muizen

Ultrasone vocalisaties van muizen worden gebruikt als proxy's om de genetische basis van vocale communicatiedeficiënties te modelleren in muismodellen voor neuropsychiatrische stoornissen. Het huidige protocol beschrijft drie experimentele contexten die betrouwbaar ultrasone vocalisaties oproepen bij pups (gedurende de ontwikkeling) en volwassen muizen (interacties tussen dieren van hetzelfde geslacht, interacties tussen mannetjes en vrouwtjes in oestrus).

Opname Mouse Ultrasone geluiden om sociale communicatie Evalueer

Gecompliceerdere, beperkte, repetitieve gedragingen (RRB's) verstoren het leven van getroffen individuen. Dit gedrag is moeilijk te modelleren bij knaagdieren, waardoor fundamenteel biomedisch onderzoek naar mogelijke behandelingen of interventies voor RRB's moeilijk wordt. Hier beschrijven we de exploratie van nieuwe objecten als een potentiële test voor complexere RRB's bij muizen.

Novel Object Exploration als een potentiële test voor hogere orde repetitief gedrag in Muizen

We presenteren protocollen voor het genereren van acute en chronische experimentele modellen van tic expressie bij vrijdragende ratten. De modellen zijn gebaseerd op striatale canule implantatie en daaropvolgende GABAA antagonist toepassing. Het acute model maakt gebruik van voorbijgaande injecties, terwijl het chronische model langdurige infusies gebruikt via een subcutane geïmplanteerde mini-osmotische pomp.

Het genereren van acute en chronische experimentele modellen van motorische tic expressie bij ratten

Dit protocol beschrijft twee gevoelige testen voor het onderscheid tussen milde, matige en ernstige motorische stoornissen in C. elegans-modellen van amyotrofische laterale sclerose, met algemeen nut voor C. elegans-stammen , met veranderde beweeglijkheid.

Evaluatie van motorische stoornissen in C. elegans-modellen van amyotrofische laterale sclerose

Dit manuscript presenteert een reeks zeer reproduceerbare gedragstests om een muismodel met het Angelman-syndroom te valideren.

Gedragskarakterisering van een Angelman Syndroom Muismodel

Autisme Spectrum Stoornis (ASS) wordt geassocieerd met verminderd sociaal en communicatief gedrag en het ontstaan van repetitief gedrag. Voor het bestuderen van de onderlinge relatie tussen ASS-genen en gedragsstoornissen in het Drosophila-model , worden in dit artikel vijf gedragsparadigma's beschreven voor het bepalen van sociale afstand, agressie, verkering, verzorging en gewenningsgedrag.

Paradigma's voor gedragsbeoordeling in het Drosophila-model van autismespectrumstoornis

Knaagdiermodellen zijn waardevolle hulpmiddelen voor het bestuderen van kerngedrag dat verband houdt met autismespectrumstoornis (ASS). In dit artikel gaan we dieper in op twee gedragstests voor het modelleren van de kernkenmerken van ASS bij muizen: zelfverzorging, die repetitief gedrag beoordeelt, en de driekamertest voor sociale interactie, die sociale beperkingen documenteert.

Strategieën voor het beoordelen van autistisch-achtig gedrag bij muizen

Dit protocol beschrijft een gedragstest om sociale dominantie bij knaagdieren te evalueren met behulp van de buistest. Sociale dominantie blijft in de loop van de tijd stabiel en verschillende modellen van ontwikkelings- en neurologische aandoeningen vertonen robuuste afwijkingen in sociale dominantie. Daarom dient de sondebuistest als een handige uitkomstmaat voor mechanistische studies of preklinische therapeutische screening.

Beoordeling van sociale dominantie in muismodellen met behulp van de buistest

Leer een gemodificeerde jeugdige speeltest om inchworming-gedrag te analyseren bij BTBR-muizen. Deze methode meet duur, frequentie en latentie van deze motorische stereotypie relevant voor autismeonderzoek.

Inchworming: A Novel Motor Stereotypy in de BTBR

Meer video's verkennen