Name: Techniek voor het bestuderen van geleedpotigen en microbiële gemeenschappen binnen Tree Tissues (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-11-16T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 30 s
Description: Leer een betrouwbare methode om organismen in boomfloëem te observeren met behulp van een floëemsandwich. Deze techniek maakt het mogelijk om schorskevers, mijten, nematoden en schimmels te bestuderen voor ecologisch onderzoek en educatieve doeleinden.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

We danken Eli Jensen, Stefano Padilla en Kasey Yturralde voor hun hulp, en Karen London en anonieme recensenten van het manuscript. We danken Jake Baker en Karla Torres voor videobeelden. Financiering werd verstrekt aan R.W.H door de NAU School of Forestry en NAU Technology and Research Initiative Fund (TRIF).

1. Floëem Selectie- en Verwijdering van de Boom <ol><li> Kies een boom met bijzondere kenmerken. Verzamel floëem van dennen (dwz, bomen in het geslacht Pinus), omdat ze hebben een kenmerkende floëem laag die is enkele millimeters dik. 18,27 Zodra een boom ligt dat enkele lagere takken heeft, inspecteren voor enige andere gebreken zoals insecten aanvallen en / of pathogenen. U kunt ook gebruik maken van floëem van andere coniferen, zoals sparren in floëem sandwiches. 9 Overige bomen soorten kunnen geschikt zijn voor floëem verwijdering zoals hardhout. OPMERKING: Naald bomen met grote kronen hebben meestal de dikste floëemweefsel. Om de hoeveelheid floëem te maximaliseren, is het het beste om bomen die enkele gebreken en takken op de stam (stam) hebben gesneden. Pine soorten die best zelf-snoeiwerk zijn. Floëem typisch dikste tijdens het groeiseizoen en dikker hoger de romp dan nabij de grond. Floëem is soms moeilijk om remove van bomen tijdens de herfst of winter seizoenen. </li><li> Snijd een boom naar beneden of gebruik onlangs gesneden logs om floëemweefsel verkrijgen. Kies een dalende richting die schade aan de boom en in de buurt bomen zal minimaliseren. Cut vertakt de stam om gemakkelijker toegang te blaffen materialen tijdens floëem kunnen blijven zitten. </li><li> Zodra een boom wordt gesneden (geveld; laten vallen op de grond) begint het schrapen van de bast van de stam met een scherp mes gelijkspel (Fig 1A.). Schraap een gebied van de bast totdat het floëem laag wordt bereikt. OPMERKING: De floëem laag is typisch lichter van kleur (bijvoorbeeld crème kleur) en vochtig, terwijl de buitenste schors droger en donkerder (figuur 1B.). Wees extra voorzichtig het floëem niet te schrapen. Het gebied van de schors afgeschraapt afhankelijk van de grootte van het floëem stuk (s) nodig. </li><li> Nadat de bast is verwijderd, snijd een schets van het floëem stuk met een scherp mes. Controleer het mes snijdt helemaal naar het xyleem (fig. 2A). </li><li> Om het floëem te verwijderen, te beginnen bij een hoek van het floëem stuk met behulp van de vingers om voorzichtig afpellen het floëem. Gebruik een mes om te helpen bij het schrapen het floëem van de houtvaten. Trek net het floëem uit tot het hele stuk wordt verwijderd. OPMERKING: Floëem pelt meestal af van de boom makkelijkste in de zomer. Voor floëem dat is bijzonder moeilijk te verwijderen is, kan een spatel-vormige hulpmiddel te helpen bij de inspanning. </li><li> Plaats het floëem stuk onmiddellijk in een steriele zak. Voor het beste resultaat, vacuum sluit de zak (Fig. 2B) of, bij gebruik van ziploc zakken, verwijder alle lucht uit de zak. Dit verhoogt de levensduur van het floëem. Eventueel plaatst u meerdere stukken van floëem in één zak. WINKEL floëem in luchtdichte zakken iets boven het vriespunt (tussen 1 en 10 ° C) om de versheid te behouden. </li></ol> 2. Het creëren van de Floëem Sandwich <ol><li> Snij twee gelijke stukken helder acryl, polycarbonaat, of een dergelijke harde, doorzichtig materiaal (bijvoorbeeld glas) licht grootr dan het stuk van floëem (Fig. 2C). Rond de randen van de acryl te voorkomen dat de hoeken scheurt de Parafilm afdichting. Dit protocol maakt gebruik van een 1/8 in. Dik helder acryl. OPMERKING: De grootte van de gesneden stukken afhankelijk van de behoeften van de betreffende organisme en de duur van de studie. Bijvoorbeeld, een paar bastkevers gebruikt 4 dm2 van floëem gedurende maanden, maar alleen 1 dm2 indien het onderzoek plaatsvindt binnen enkele dagen. </li><li> Boor een gat in één van de acryl stukken opneming van onderzoek organisme (n) mogelijk. De grootte en aantal gaten afhankelijk van de doelen (Fig. 2D). </li><li> Voorafgaand aan het plaatsen van het floëem tussen de acryl stukken, steriliseren het acryl oppervlak (met&gt; 70% ethanol) of, bij gebruik van nieuwe acryl, verwijder de beschermende folie. </li><li> Leg de verse stuk floëem tussen de steriele acryl stukken. Plaats de acrylstuk met het gat (en) op de binnen- of buitenzijde van het floëem, whichever nodig. Typisch gezicht van de buitenzijde van het floëem (kant die schors op het had) naar de ingang gaten. </li></ol> 3. Het afdichten van de Floëem Sandwich <ol><li> Een tijdelijke afdichting rond het floëem sandwich maken gebruik 2 in. Parafilm brede stroken getrokken rond de randen van het floëem sandwich (fig. 2C). Als alternatief gebruikt een polyvinylideenchloride wikkel om de randen te verzegelen. 6 Plaats vervolgens een klem aan beide zijden van de sandwich acryl aan het floëem knijpen. Zorg ervoor dat het gehele oppervlak is geklemd omlaag om de lucht ruimte tussen de acryl en floëem (Fig 2C) te voorkomen. Als dit niet goed geklemd, kan exemplaren tussen de acryl en floëem bewegen. </li><li> Het creëren van een semi-permanente afdichting toe een niet-lijmen of epoxy vaseline rond het floëem. Zorg ervoor dat het materiaal volledig omringt het floëem. Vervolgens gebruikt klemmen of schroeven met moeren (kan nodig zijn om gaten te boren van tevoren) om de acryl strak om het floëem te houden.De broodjes alleen levensvatbaar blijven tot één of twee maanden. </li><li> Afhankelijk van de zuurstofbehoefte van de studie organismen, voeg een luchtfilter op één of meer zijden van de sandwich. Dit zal de lucht in het floëem sandwich aan te gaan, maar te beperken waterverlies uit het floëem. We gebruiken eenvoudige koolstoffilters dat het risico van schimmel en bacteriële verontreiniging te verminderen. </li><li> Voor studie exemplaren die in- en uitstappen op wil vereisen, vervangt een van de acryl-stukken met hout of soortgelijk materiaal dat een insect kan boren zich in. Dit is bijzonder belangrijk voor de waarneming van houtboorders, want na larvale staat het floëem laag is voltooid, dan droegen ze in het xyleem. </li><li> Om proefpersonen verhinderen de toegang gaten verlaten, plaatst kleine petrischalen (of andere objecten, tape) over de gaten, het blokkeren ontsnappen. Sinds organismen die in deze ruimten bevinden zijn wennen aan lage lichtniveaus, kan het nodig zijn om de broodjes te plaatsen in een donkere kamer of een doos, of plaats oPaque materiaal op de top aan het licht af. </li></ol> 4. Observeren Organismen in het floëem Sandwich <ol><li> Introduceren studie specimens in ingangsgat van het floëem sandwich (Fig. 2D). Observeer exemplaren met behulp van een dissectie microscoop onder een rood licht of wit licht instellen op een lage stand (fig. 2E). </li><li> Om de activiteiten of de groei van specimens in de floëem sandwich neem een ​​camera of video camera aan de microscoop te bevestigen. Bevestig speciale videocamera&#39;s om de microscoop oculair (Fig. 2E &amp; F). Voor zeer kleine organismen zoals mijten, nematoden, en pseudo-schorpioenen, gebruik dan een high definition video camera op de microscoop. </li><li> Om geluiden op te nemen, plaatst microfoons in het gat van de vermelding van het floëem sandwich of via de zijkant van het floëem sandwich. Omdat de ingang gat klein is, gebruik dan een kleine microfoon, zoals een electret condensator microfoon. </li><li> Om op te nemen vanaf de kant of het vlak vanhet floëem sandwich gebruiken een piëzo-element (fig. 3B). Om het geluid weer, maken gebruik van dezelfde piëzo-element of bevestig een tactiele transducer (Excitor) aan het oppervlak van de bovenkant of onderkant van de acryl. </li></ol>

<ol><li>Aukema, B. H., Raffa, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavior+of+adult+and+larval+Platysoma+cylindrical.+%28Coleoptera%3A+Histeridae%29+and+larval+Medetera+bistriata.+%28Diptera%3A+Dolichopodidae%29+during+subcortical+predation+of+Ips+pini+%28Coleoptera%3A+Scolytidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Behav%22%5BJournal%5D)">Behavior of adult and larval Platysoma cylindrical. (Coleoptera: Histeridae) and larval Medetera bistriata. (Diptera: Dolichopodidae) during subcortical predation of Ips pini (Coleoptera: Scolytidae).</a> J Insect Behav. 17, 115-128 (2004).</li>
<li>Bedard, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+number+of+larval+instars+and+the+appropriate+length+of+the+larval+stadia+of+Dendroctonus+pseudotsugae.+Hopk.%2C+with+a+method+for+their+determination+in+relation+to+other+bark+beetle%5BTitle%5D)+AND+%22J+Econ+Entomol%22%5BJournal%5D)">The number of larval instars and the appropriate length of the larval stadia of Dendroctonus pseudotsugae. Hopk., with a method for their determination in relation to other bark beetle.</a> J Econ Entomol. 26, 128-134 (1933).</li>
<li>Bridges, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitrogen-fixing+bacteria+associated+with+bark+beetles%5BTitle%5D)+AND+%22Microb+Ecol%22%5BJournal%5D)">Nitrogen-fixing bacteria associated with bark beetles.</a> Microb Ecol. 7, 131-137 (1981).</li>
<li>Cardoza, Y. J., Klepzig, K. D., Raffa, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacteria+in+oral+secretions+of+an+endophytic+insect+inhibit+antagonistic+fungi%5BTitle%5D)+AND+%22Ecol+Entomol%22%5BJournal%5D)">Bacteria in oral secretions of an endophytic insect inhibit antagonistic fungi.</a> Ecol Entomol. 31, 636-635 (2006).</li>
<li>Cardoza, Y. J., Moser, J. C., Klepzig, K. D., Raffa, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multipartite+symbioses+among+fungi%2C+mites%2C+nematodes%2C+and+the+spruce+beetle%2C+Dendroctonus+rufipennis%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Entomol%22%5BJournal%5D)">Multipartite symbioses among fungi, mites, nematodes, and the spruce beetle, Dendroctonus rufipennis.</a> Environ Entomol. 37, 956-963 (2008).</li>
<li>Chen, H. -F., Salcedo, C., Sun, J. -H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+mate+choice+by+chemical+cues+leads+to+higher+reproductive+success+in+a+bark+beetle%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Behavior%22%5BJournal%5D)">Male mate choice by chemical cues leads to higher reproductive success in a bark beetle.</a> Animal Behavior. 83, 421-427 (2012).</li>
<li>Dodds, K. J., Graber, C., Stephen, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Facultative+intra+guild+predation+by+larval+Cerambycidae+%28Coleoptera%29+on+bark+beetle+larvae+%28Coleoptera%3A+Scolytidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Facultative intra guild predation by larval Cerambycidae (Coleoptera) on bark beetle larvae (Coleoptera: Scolytidae).</a> Environmental Entomology. 30, 17-22 (2001).</li>
<li>Franklin, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+studying+the+insect+parasites+of+Dendroctonus+frontalis.+and+other+bark+beetles+%28Coleoptera%3A+Scolytidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Georgia+Entomology+Society%22%5BJournal%5D)">A technique for studying the insect parasites of Dendroctonus frontalis. and other bark beetles (Coleoptera: Scolytidae).</a> Journal of Georgia Entomology Society. 2, 43-44 (1967).</li>
<li>Gries, G., Pierce, H. D. Jr, Lindgren, B. S., Borden, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+techniques+for+capturing+and+analyzing+semiochemicals+for+Scolytid+beetles+%28Coleoptera%3A+Scolytidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Econ+Entomol%22%5BJournal%5D)">New techniques for capturing and analyzing semiochemicals for Scolytid beetles (Coleoptera: Scolytidae).</a> J Econ Entomol. 81, 1715-1720 (1988).</li>
<li>Hofstetter, R. W., Moser, J. C., McGuire, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Observations+of+the+mite+Schizosthetus+lyriformis.+%28Acari%3A+Parasitidae%29+preying+on+bark+beetle+eggs+and+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Entomology.+News%22%5BJournal%5D)">Observations of the mite Schizosthetus lyriformis. (Acari: Parasitidae) preying on bark beetle eggs and larvae.</a> Entomology. News. 120, 397-400 (2009).</li>
<li>Hofstetter, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+11%3A+Mutualists+and+Phoronts+of+the+Southern+Pine+Beetle%5BTitle%5D)+AND+%22United+States+Dept.+of+Agriculture+Forest+Service%2C+Southern+Research+Station+General+Technical+Report+SRS-140%22%5BJournal%5D)">Chapter 11: Mutualists and Phoronts of the Southern Pine Beetle.</a> United States Dept. of Agriculture Forest Service, Southern Research Station General Technical Report SRS-140. Klepzig, K. D., Coulson, R. , 161-181 (2011).</li>
<li>Hofstetter, R. W., Dunn, D. D., McGuire, R., Potter, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+acoustic+technology+to+reduce+bark+beetle+reproduction%29%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Sci%22%5BJournal%5D)">Using acoustic technology to reduce bark beetle reproduction).</a> Pest Manag Sci. 70, 24-27 (2014).</li>
<li>Hopping, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+for+rearing+Ips%5BTitle%5D)+AND+%22De+Geer+%28Coleoptera%3A+Scolytidae%29.+Can+Entomol%22%5BJournal%5D)">Techniques for rearing Ips.</a> De Geer (Coleoptera: Scolytidae). Can Entomol. 93, 1050-1063 (1961).</li>
<li>Hougardy, E., Gregoire, J. -C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cleptoparasitism+increases+the+host+finding+ability+of+a+polyphagous+parasitoid+species%2C+Rhopalicus+tutela+%28Hymenoptera%3A+Pteromalidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Ecol+Sociobiol%22%5BJournal%5D)">Cleptoparasitism increases the host finding ability of a polyphagous parasitoid species, Rhopalicus tutela (Hymenoptera: Pteromalidae).</a> Behav Ecol Sociobiol. 55, 184-189 (2003).</li>
<li>Kaston, B. J., Riggs, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+the+larvae+of+the+native+elm+bark+beetle%5BTitle%5D)+AND+%22J+Econ+Entomol%22%5BJournal%5D)">Studies on the larvae of the native elm bark beetle.</a> J Econ Entomol. 30, 98-108 (1937).</li>
<li>Kinn, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Life+cycle+of+Dendrolaelaps+neodisetus.+%28Mesostigmata%3A+Digamasellidae%29%2C+a+nematophagous+mite+associated+with+pine+bark+beetles+%28Coleoptera%3A+Scolytidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Entomol%22%5BJournal%5D)">Life cycle of Dendrolaelaps neodisetus. (Mesostigmata: Digamasellidae), a nematophagous mite associated with pine bark beetles (Coleoptera: Scolytidae).</a> Environ Entomol. 13, 1141-1144 (1984).</li>
<li>Kinn, D. N., Miller, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+phloem+sandwich+unit+for+observing+bark+beetles%2C+associated+predators%2C+and+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22USDA+FS+Res.+Notes+SO-269%22%5BJournal%5D)">A phloem sandwich unit for observing bark beetles, associated predators, and parasites.</a> USDA FS Res. Notes SO-269. , 3(1981).</li>
<li>Lieutier, F., Day, K. R., Battisti, A., Gregoire, J. -C., Evans, H. F. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLieutier%2C+F+%22Bark+and+wood+boring+insects+in+living+trees+in+Europe%2C+a+synthesis%22">Bark and wood boring insects in living trees in Europe, a synthesis</a>. , Kluwer Academic Publishers. Boston, USA. 569(2004).</li>
<li>Massey, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+nematode+parasites+and+associates+on+bark+beetles+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+the+Entomology+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">The influence of nematode parasites and associates on bark beetles in the United States.</a> Bulletin of the Entomology Society of America. 12, 384-386 (1966).</li>
<li>Moser, J. C., Roton, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mites+associated+with+southern+pine+bark+beetles+in%5BTitle%5D)+AND+%22Allen+Parish%2C+Louisiana.+Can+Entomol%22%5BJournal%5D)">Mites associated with southern pine bark beetles in.</a> Allen Parish, Louisiana. Can Entomol. 103, 1775-1798 (1971).</li>
<li>Mills, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+natural+enemies+of+scolytids+infesting+conifer+bark+in+Europe+in+relation+to+the+biological+control+of+Dendroctonus.+spp+in+Canada%5BTitle%5D)+AND+%22Biocontrol+News+Information%22%5BJournal%5D)">The natural enemies of scolytids infesting conifer bark in Europe in relation to the biological control of Dendroctonus. spp in Canada.</a> Biocontrol News Information. 4, 305-328 (1983).</li>
<li>Nagel, W. P., Fitzgerald, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medetera+aldrichii.+larval+feeding+behavior+and+prey+consumption+%5BDipt.%3A+Dolichopodidae%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Entomophaga%22%5BJournal%5D)">Medetera aldrichii. larval feeding behavior and prey consumption [Dipt.: Dolichopodidae].</a> Entomophaga. 20, 121-127 (1975).</li>
<li>Paine, T., Raffa, K., Harrington, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+among+scolytid+bark+beetles%2C+their+associated+fungi%2C+and+live+host+conifers%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Entomol%22%5BJournal%5D)">Interactions among scolytid bark beetles, their associated fungi, and live host conifers.</a> Annu Rev Entomol. 42, 179-206 (1997).</li>
<li>Reeve, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predators+of+the+southern+pine+beetle%5BTitle%5D)+AND+%22Southern+Pine+Beetle+II%22%5BJournal%5D)">Predators of the southern pine beetle.</a> Southern Pine Beetle II. Coulson, R. N., Klepzig, K. D. , U.S. Department of Agriculture Forest Service, Southern Research Station. Asheville, NC. 153-160 Forthcoming.</li>
<li>Reid, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+behavior+of+the+mountain+pine+beetle%2C+Dendroctonus+monticolae.+Hopkins%2C+during+mating%2C+egg+laying+and+gallery+construction%5BTitle%5D)+AND+%22Can+Entomol%22%5BJournal%5D)">The behavior of the mountain pine beetle, Dendroctonus monticolae. Hopkins, during mating, egg laying and gallery construction.</a> Can Entomol. 90, 505-509 (1958).</li>
<li>Taylor, A. D., Hayes, J. L., Roton, L., Moser, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+phloem+sandwich+allowing+attack+and+colonization+by+bark+beetles+%28Coleoptera%3A+Scolytidae%29+and+associates%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Entomol.+Soc.+Amer%22%5BJournal%5D)">A phloem sandwich allowing attack and colonization by bark beetles (Coleoptera: Scolytidae) and associates.</a> J. Entomol. Soc. Amer. 27, 101-116 (1992).</li>
<li>Yu, C. C., Tsao, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gallery+construction+and+sexual+behavior+in+the+southern+pine+beetle%2C+Dendroctonus+frontalis.+Zimm.+%28Coleoptera%3A+Scolytidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Georgia+Entomology+Society%22%5BJournal%5D)">Gallery construction and sexual behavior in the southern pine beetle, Dendroctonus frontalis. Zimm. (Coleoptera: Scolytidae).</a> Georgia Entomology Society. 2, 95-98 (1967).</li>
<li>Yturralde, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Acoustic+Ecology+of+Bark+Beetles+and+Bed+Bugs%5BTitle%5D)+AND+%22PhD.+Dissertation%22%5BJournal%5D)">The Acoustic Ecology of Bark Beetles and Bed Bugs.</a> PhD. Dissertation. , Northern Arizona University. 323 (2013).</li>
<li>Wermelinger, B., Seifert, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+temperature+dependent+development+of+the+spruce+bark+beetle+Ips+typographus+%28L.%29+%28Col.%2C+Scolytidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Entomology%22%5BJournal%5D)">Analysis of the temperature dependent development of the spruce bark beetle Ips typographus (L.) (Col., Scolytidae).</a> Journal of Applied Entomology. 122, 185-191 (1998).</li>
<li>Whitney, H. S. Relationships between bark beetles and symbiotic organisms. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWhitney%2C+HS+%22Bark+Beetles+in+North+American+Conifers%22">Bark Beetles in North American Conifers</a>. Mitton, J. B., Sturgeon, K. B. , University of Texas Press. Austin, TX. 183-211 (1982).</li>
<li>Wood, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+bark+and+ambrosia+beetles+of+North+and+Central+America+%28Coleoptera%3A+Scolytidae%29%2C+a+taxonomic+monograph%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">The bark and ambrosia beetles of North and Central America (Coleoptera: Scolytidae), a taxonomic monograph.</a> , Brigham Young University. Provo, Utah. 1359 (1982).</li>
</ol>

Geen belangenconflicten verklaard

Het floëem sandwich maakt de invoering en observatie van geleedpotigen, microben en andere kleine organismen die floëem weefsels bewonen. 1,7,8,9,17,18 Deze techniek heeft geleid tot nieuwe ontdekkingen en een beter begrip van gedrag, leven- history kenmerken, de ontwikkeling, en de interacties van organismen in boom floëem. 1,5,10 De sandwich protocol hier beschreven is een hybride van verleden ontwerpen, en zal een economische sandwich die gemakkelijk is gebouwd met een minimale uitrusting en materialen. Het glas, acryl, polycarbonaat of stukken kunnen worden hergebruikt, en de enige verbruiksmaterialen de Parafilm en floëem. Hoewel alle stappen in het protocol zijn belangrijk, moeten bepaalde stappen strikt worden opgevolgd om de hoogste mate van succes te verzekeren. Ten eerste moet een boom worden geplaatst dat een deel van de stam vrij, of relatief vrij van takken heeft. Bomen die veel takken hebben, zijn moeilijk te scheren en wil yield weinige levensvatbare floëem stukken, zoals elke tak rond moet worden gesneden bij het verwijderen van het floëem. Vervolgens is het belangrijk blootstelling lucht van het floëem minimaliseren. We plaatsen snel elke floëem stuk in een zak bij verwijdering. Zodra 5:57 stukken zijn verwijderd, worden deze overgebracht in een vacuüm zak; we maken gebruik van een omvormer om de sealer vandoor accu van een voertuig in het veld. Last, ontsmetten de acryl stukken en de algemene netheid bij de uitvoering van dit protocol zal schimmelgroei in de sandwich te verminderen. Dit is vooral belangrijk voor uitgebreide observaties. Zoals hierboven vermeld, zijn er beperkingen van het floëem sandwich inrichting. Aangezien het floëem dun is, kan slechts kleine organismen die gewoonlijk in het bastweefsel nog worden ingebracht in de sandwich. Grotere insecten zoals hout boren (dwz Buprestid, Cerambycid species) kunnen worden ingevoerd en gecontroleerd op het begin van hun levenscyclus. Dit tijdsbestek is meestal beperkt tot twee totdrie weken; na dit punt de larven vereisen xylem hout te boren in voor de verpopping. In contrast, voor schorskevers, vooral die in het geslacht Ips, een volledige levenscyclus kan worden waargenomen, waaronder de paring, ei uitbroeden, voeden, pupating en verpopping tot een volwassen kever. Op dit punt wordt de levensvatbaarheid van de sandwich meestal uitgeput als gevolg van verdroging en schimmelgroei. 28 Bovendien wordt dit apparaat niet toe insecten te vrij en natuurlijk te koloniseren of verlaat het floëem sandwich. 27 Ons protocol is flexibel in termen van grootte, vorm en het type van floëem gebruikt. Korte studies vereisen minder floëem materiaal en sandwich grootte kan dienovereenkomstig worden aangepast. Veel naaldbomen zijn gebruikt als floëem donoren in een floëem sandwich (bijv ponderosapijnboom 12, Douglas-spar 2, sparren 29, loblolly grenen 27, longleaf grenen 27). Materialen in de sandwich kan worden gewijzigd; exruim, glasplaten gebruikt worden in plaats van acryl- en epoxy of tape in plaats van Parafilm. Het moeilijkste deel van dit protocol is het floëem verwijdering proces. Bomen naast elkaar kunnen verschillen hoe moeilijk het floëem te verwijderen. Wanneer een boom heeft moeilijke floëem, geduld is kritiek. In deze gevallen nauwkeurig uitvoeren van een mes tussen de harde xyleem en floëem het sponsachtige. Dit proces voelt letterlijk als het villen van de boom. Na het beheersen van de basis-sandwich-techniek, kan wijzigingen in het protocol te helpen fit specifieke behoeften. Bijvoorbeeld door honen technieken nodig floëem verwijderen grotere stukken kunnen worden verwijderd en gebruikt om grotere sandwiches maken. Ook kunnen wijzigingen worden aangebracht in specifieke instrumenten, bijvoorbeeld, extra gaten aan chemische uitstoot (Fig. 3A), of opnemen of afspelen geluiden (Fig. 3B) monitor tegemoet. Modificaties kunnen worden gemaakt om semi-permanente instandhouding van het floëem en orgelismen, of voor tijdelijke waarnemingen van organismen die later kan worden verhuurd gratis.

Het floëem en schors weefsels van naaldbomen zijn gastheer voor duizenden organismen. Phloeophagy, het voeden op floëem weefsels van de bast, is een gewoonte meestal geassocieerd met schors kevers, woodborers, en diverse andere ongewervelde en microbiële taxa die leven binnen de bomen 23 Bastkevers. (Coleoptera: Curculionidae) te ontwikkelen en te leven binnen floëem behalve voor korte periodes waarin volwassenen op zoek naar nieuwe gastheer bomen. 31 Bastkevers zijn uitgebreid bestudeerd door hun economische effecten op bomen 18,19, maar directe gedragsobservaties van de insecten binnen boom materialen zijn beperkt. 4 Bovendien, de galerijen gebouwd door schorskevers geworden habitat voor een groot aantal diersoorten. 11 Grote aantallen schimmels 30, bacteriën 3, mijten 10,21, en ​​nematoden 16,19 samen met andere roofzuchtige en parasitaire geleedpotigen 22,24 bewonen het floëem materiaal. De technieken die hierzorgen voor directe observatie van de schors kevers, mijten, en houtboorders die typisch leven in subcorticale omgevingen. Kleine veranderingen in protocol kan worden gemaakt schimmels en bacteriën te bestuderen. Schorskevers en bijbehorende organismen in boom weefsels zijn onderzocht met behulp van een &quot;floëem sandwich.&quot; Vroege toepassing van deze techniek is te vinden in de literatuur dateert uit 1933, toen het werd gebruikt om de larvale stadia van de Douglas-spar kever observeren (Dendroctonus pseudotsugae). 2 De floëem sandwich is gegaan door vele afleidingen zoals verschillende materialen beschikbaar kwamen. Oorspronkelijk dit apparaat bestond uit een stuk floëem geplaatst tussen twee glasplaten, samengedrukt door elastiekjes. 2 later klemmen, plakband, lijm, kunststof en andere materialen gebruikt bij de constructie van de sandwich. 13,14 , 15,17,26,28 Het hier beschreven protocol biedt verbeteringen ten opzichte van een aantal van de laatste ontwerpen. Bijvoorbeeld, inVroeger testsoort werden in de zijkant van de sandwich tussen de platen van glas of plastic ingevoerd. Dit beperkt de bouw van galerijen naar een richting. Het gebruik van binnenkomst gaten in de bovenplaat zorgt voor een grotere vrijheid voor de test soorten die de natuurlijke galerij bouw te starten. Een ander voordeel van het gepresenteerde protocol is zijn vereenvoudigd ontwerp, dat gemakkelijk kan worden vervaardigd met weinig hulpmiddelen. Het gebruik van het floëem sandwich heeft het mogelijk gemaakt voor de directe waarneming van eetgedrag, de voortplanting, de ontwikkeling, en de interacties van organismen die anders niet mogelijk zijn geweest. 1,5, 22 Deze methode is ook een uitstekend hulpmiddel voor K-12 onderwijs en wetenschap programma&#39;s en displays. Er zijn verschillende subtiliteiten in de oprichting van een floëem sandwich die moeilijk te interpreteren vanuit of niet gemeld in manuscripten zijn. Wij geloven dat een visuele (bijvoorbeeld, video) beschrijving van de productie van een floëem sandwich noodzakelijk en zouvan waarde zijn voor wetenschappers en opvoeders geïnteresseerd in het bestuderen phloeophagous organismen. Ons protocol een eenvoudige en goedkope manier om geleedpotigen, microben en andere organismen die floëem weefsels bewonen observeren.

<table><tbody><tr><td>Draw blade</td><td>Big Horn Brand&nbsp;</td><td>20265</td><td>11&rdquo; blade</td></tr><tr><td>Fillet Knife</td><td>American Angler</td><td>30530</td><td>9&rdquo; blade</td></tr><tr><td>Polycarbonate</td><td>Nexan</td><td>GE-33</td><td>0.093 in. thickness</td></tr><tr><td>Parafilm M</td><td>Fisher Scientific</td><td>S37441</td><td>2&rdquo; wide</td></tr><tr><td>Clamps</td><td>Pony Jaw Opening</td><td>3201-HT-K</td><td>4&rdquo; x 1&rdquo;</td></tr><tr><td>Vacuum Sealer&nbsp; en zakjes</td><td>FoodSaver</td><td>V2840; FSFSBF0742-015</td><td>VacLoc vacuum&nbsp; zakjes in rollen</td></tr></tbody></table>

techniek voor het bestuderen van geleedpotigen en microbiële gemeenschappen binnen tree tissues

Technique for Studying Arthropod and Microbial Communities within Tree Tissues

Floëmgeweven van dennen zijn habitats voor duizenden organismen. Geleedpotigen en microben gebruiken floëm en cambiumweefsels om partners te zoeken, eieren te leggen, jongen groot te brengen, te voeden of zich te verbergen voor natuurlijke vijanden of barre omgevingsomstandigheden buiten de boom. Organismen die in het floëmgeweven blijven, zijn moeilijk waar te nemen vanwege hun locatie onder de bast. We bieden een techniek om intact floëm te behouden en het voor te bereiden op experimenten met ongewervelden en micro-organismen. De apparaat wordt een ‘floëmsandwich’ genoemd en maakt het mogelijk om geleedpotigen, microben en andere organismen te introduceren en te observeren. Deze techniek heeft geresulteerd in een beter begrip van de voedingsgedragingen, levensgeschiedeniskenmerken, voortplanting, ontwikkeling en interacties van organismen in het floëmgeweven van bomen. De sterke punten van deze techniek zijn het gebruik van goedkope materialen, variabiliteit in de grootte van de sandwich, flexibiliteit om de sandwich te heropenen of meerdere organismen te introduceren via geboorde gaten, en het behoud en de instandhouding van de integriteit van het floëm. De floëmsandwich is een uitstekend educatief hulpmiddel voor wetenschappelijke ontdekkingen in zowel K-12 wetenschapscursussen als universitaire onderzoekslaboratoria.

De hierboven beschreven protocol zal een onderzoeker in staat stellen om organismen die in de cryptische milieu onder de schors van een boom leven te observeren. Om het gebruik van deze techniek beschrijven we een representatief onderzoek van ons laboratorium dat deze techniek. 12 In dit experiment gebruikt illustreren, werden floëem sandwiches gebruikt om de effecten van akoestische behandelingen voortplantingsresultaat, tunneling afstand en overleving schors kevers zien (Fig . 2E en 2F). Directe observatie van kevers, mogelijk gemaakt door het gebruik van een sandwich floëem, onthulde een aantal interessante bevindingen. Ten eerste hebben we opgenomen dagelijkse tunneling afstanden door het markeren van de locatie van de kevers &#39;op de acryl met een marker elke 24h. Dit proces bleek echter belangrijke verschillen tussen geluid behandelingen die zou zijn verborgen, zonder het floëem sandwich. Vervolgens zagen we een verlaging van eierproductie bijzonder geluid behandelingen. Het mobiele karakter van het floëem sandwich toegestaan ​​voor egg waarnemingen onder een dissectie microscoop worden afgerond zonder verstoring van de kevers. Tijdens deze observaties, we gevangen kever eierleggende gedrag met een high-definition camera bevestigd aan de microscoop. Andere opmerkelijke waarnemingen waren de doden van stuurlieden en de inleiding van de vlucht in verband met bijzondere akoestische behandelingen. Het floëem sandwich assay was cruciaal voor onze studie van schorskever reacties op akoestische behandelingen. Deze ontdekkingen, die onmogelijk waar te nemen onder de schors van een boom zou zijn, zijn waardevolle bijdragen aan de ontwikkeling van het management opties voor het bestrijden van schorskever uitbraken. <img alt="Figuur 1" src="/files/ftp_upload/50793/50793fig1highres.jpg" /> Figuur 1. A) Hulpmiddelen die nodig zijn om de schors van boom verwijderen. Artikelen 1 en 2 zijn gelijkspel messen gebruikt om bast afschrapen van de boom. Artikelen 3 (bijl) en 4 (pull saw) zijn nuttig om takken te verwijderenin de buurt van het scheren gebied. B) Gebruik van draw mes om schors van boom verwijderen. Let op de lichte kleur van het floëem onder de roodachtige schors. <img alt="Figuur 2" src="/files/ftp_upload/50793/50793fig2highres.jpg" /> Figuur 2. A) Verwijdering van floëem na schors werd afgeschraapt van boom. B) Verse floëem opgeslagen in vacuüm verzegelde tas. C) Floëem sandwich met klemmen die de acryl stukken samen en Parafilm rond randen om verontreiniging en verdroging van floëem voorkomen. D ) Bark kever dichtbij gat geboord in acryl. E) met behulp van microscoop tot floëem sandwich observeren. F) Video weergave van de schors kevers binnen floëem sandwich. <img alt="Figuur 3" src="/files/ftp_upload/50793/50793fig3highres.jpg" /> Figuur 3. <strong&gt; A) Pheromone overname van kevers in floëem sandwich. De lucht wordt via buisjes met Super-Q absorberend. B) opnemen en afspelen van geluid via een piëzo-elektrische transducer (midden van de foto) om te mountain pine kevers binnen floëem sandwich wordt getrokken.

We bieden een techniek om intact boomfloëem te behouden en het voor te bereiden op observatie. We creëren een apparaat genaamd een floëemsandwich dat het mogelijk maakt om geleedpotigen, microben en andere organismen die in floëemweefsels leven te introduceren en observeren.

Techniek voor het bestuderen van geleedpotigen en microbiële gemeenschappen binnen Tree Tissues

Phloem tissues of pine are habitats for many thousands of organisms.  Arthropods and microbes use phloem and cambium tissues to seek mates, lay eggs, rear ...

Het algemene doel van deze procedure is het creëren van een apparaat genaamd de AOL-sandwich, waarmee de introductie en observatie van arthropoden, microben en andere organismen die in herfstweefsel leven, mogelijk wordt. Het verstrekte protocol is, soms met kleine variaties, een effectief instrument geweest voor onderzoekers en docenten om schorskevers, mijten, nematoden en schimmels te bestuderen. Allereerst wordt een geschikte boom gelokaliseerd.Vervolgens wordt de schors verwijderd om de F-flomlaag bloot te leggen. Zodra de flom is verwijderd, wordt deze teruggebracht naar het laboratorium of tussen twee stukken plexiglas geplaatst. Zodra het is afgesloten en stevig is vastgeklemd, kan het organisme worden geïntroduceerd.Bij de bestudeerde dennen is er een kenmerkende stroomlaag aanwezig die enkele millimeters dik kan zijn. Het bestudeerde organisme bepaalt welke soort F-stroom vereist is. We bevinden ons hier in een Ponderosa-dennenbos in Noord-Arizona.We zijn op zoek naar een ideale boom die bescheiden van omvang is, een grote kroon heeft en weinig lagere takken. Hier hebben we een geschikte boom gevonden. Deze kenmerken zullen waarschijnlijk zorgen voor een flow die dikker is en gemakkelijker te verwijderen, omdat elke tak omgesneden moet worden bij het verwijderen van de flow.Hier is een voorbeeld van de apparatuur die we gebruiken om een boom te kappen. Onthoud dat het vellen van een boom gevaarlijk is en alleen moet worden uitgevoerd door een ervaren persoon met de juiste veiligheidsuitrusting. Zodra de boom veilig op de grond ligt, kunt u beginnen met het verwijderen van de takken.Snijd de stam vervolgens in hanteerbare stukken, gewoonlijk van ongeveer zes tot acht voet, afhankelijk van de diameter van de boom. Nu is het tijd om de schors te verwijderen. Hier is een voorbeeld van het gereedschap dat we hiervoor gebruiken.Ijs is onmisbaar tijdens dit proces; schraap de schors voorzichtig weg tot er witte of lichtbruine vlekken zichtbaar worden die de stroomlaag aanduiden. Het is belangrijk om deze laag niet uit te hollen, omdat dit het latere nut ervan sterk vermindert. Zodra een deel van de boom voldoende is ontbast, gebruik dan een mes om het volledige stuk uit te snijden.Trek deze laag voorzichtig omhoog terwijl u, indien nodig, aan de onderzijde snijdt. Houd er rekening mee dat het bij sommige bomen gemakkelijker is om de gevallen bladeren te verwijderen dan bij andere. Geduld is hierbij essentieel.Bij het werken met een problematische boom is de zomer over het algemeen een gunstigere tijd van het jaar om het gevallen materiaal te verwijderen. Zodra we vijf tot zeven stukken in de plastic zak hebben verzameld, brengen we deze over naar een vacuümoverdrachtzak die we mee naar het veld nemen. Het is het beste om deze zakken net boven het vriespunt te bewaren.We hebben nu het veldgedeelte van dit protocol voltooid en keren terug naar het laboratorium om de sandwich te construeren. Hier ziet u wat we gebruiken voor de constructie van de sandwich. Onderaan bevinden zich diverse plexiglasplaten en paren.Parafilm wordt gebruikt om de randen af te dichten en klemmen worden gebruikt om ervoor te zorgen dat er geen ruimte is tussen het plexiglas en de flow-cel. Zodra de plexiglasstukken zijn gesneden en geboord, worden ze gesteriliseerd met 90% of hoger ethanol. Begin met het samenstellen van de sandwich door een nieuw stuk flow-cel en maat te verwijderen.Het is passend voor het stuk plexiglas. Glas kan ook in de plaats van plexiglas worden gebruikt. Er kunnen ook sandwiches van verschillende afmetingen worden gemaakt om aan te sluiten bij verschillende organismen en proefduur.Bijvoorbeeld, een paar schorskevers kan gedurende een maand een gevallen stuk van vier demeter² gebruiken, maar heeft slechts een stuk van één demeter² nodig als de studie binnen enkele dagen plaatsvindt. Let op dat u ook het aantal toegangspunten in het plexiglas kunt wijzigen om meerdere organismen tegelijkertijd te introduceren. Dit is nuttig om competitie of predatie door verschillende soorten te observeren.Nu wordt parafilm van twee inch gebruikt om de randen af te dichten. Andere materialen kunnen worden gebruikt voor de afdichting, zoals niet-grip lijmepoxy of vaseline. Plaats vervolgens een voldoende aantal klemmen rond de rand om het plexiglas stevig aan de stroomlaag te bevestigen.We zijn nu klaar om het studieorganisme te introduceren. In ons laboratorium gebruiken we vaak het verstrekte protocol om schorskevers en geassocieerde organismen te observeren. Dit biedt een uitstekende gelegenheid om zaken als de dagelijkse ganglengte en de eiproductie te bestuderen, naast vele andere aspecten.We kunnen ook de chemische emissies van schorskevers extraheren, produceren en later analyseren, of we kunnen een behandeling starten en de respons observeren. Hier probeert een schorskever zich te verwijderen van een akoestische behandeling. We hebben met dit protocol ook mijten, nematoden en insectenpredatoren waargenomen.Na het bekijken van deze video zou u in staat moeten zijn om een 'flown sandwich' te construeren en deze aan te passen aan de specifieke behoeften van uw onderzoek. Naast het feit dat deze procedure een effectief onderzoeksinstrument is, is deze uitstekend geschikt voor educatieve en ontdekkingsdoeleinden voor studenten, variërend van het basisonderwijs tot het universitair niveau.

technique-for-studying-arthropod-microbial-communities-within-tree

Research

JoVE Journal

Environment

Milieu

Deze video illustreert de techniek voor de extractie van DNA van de soorten van microben woonachtig zijn in de termiet einddarm. De voorbereiding van een natte glijbaan berg, wat handig is voor het visualiseren van de darm microbiële gemeenschap wordt ook geïllustreerd, en een rondleiding door het soortenrijke darm-omgeving wordt gegeven.

Extraheren van DNA uit de Gut Microben van de Termite (Zootermopsis Angusticollis) en visualiseren Gut microben

Jared Leadbetter verklaart waarom de termiet-darm microbiële gemeenschap is een uitstekend systeem voor het bestuderen van de complexe interacties tussen microben. De symbiotische relatie bestaat tussen de host insecten en lignocellulose-afbrekende darm microben wordt uitgelegd, evenals het industrieel gebruik van deze micro-organismen voor de afbraak van plantaardige biomassa en het genereren van biobrandstoffen.

Het onderzoeken van de microbiële gemeenschap in de Termite einddarm - Interview

Hier presenteren we een protocol dat beschrijft hoe houten exemplaren moeten worden bemonsterd voor de algehele beoordeling van hun groeistructuren. Macro- en microscopische bereidings- en visualisatietechnieken die nodig zijn om een goed gerepliceerd en zeer gedetailleerd houtanatomisch en dendro-ecologisch dataset te genereren, worden beschreven.

Een technisch perspectief in Modern Boom-ring Onderzoek - Hoe Dendroecological en houtanatomische uitdagingen te overwinnen

Opgraving van plantenwortels uit het veld en verwerking van de monsters in endosphere, rhizosfeer en bodem worden in detail, met inbegrip van DNA-extractie en gegevens analysemethoden beschreven. Dit document is bedoeld om andere laboratoria maken gebruik van deze technieken voor de studie van de bodem, endosphere en microbiomes van de rhizosfeer.

Isolatie en analyse van microbiële gemeenschappen in bodem, rhizosfeer en wortels in de overblijvende gras experimenten

Om ultrastructuur van insectensensilla te observeren, werd in de studie het protocol voor de voorbereiding van de insectenensilla, scanning en transmissieelektronenmicroscopie (SEM en TEM) in de studie gepresenteerd. Tween 20 werd toegevoegd aan de fixatie om monstervervorming in SEM te voorkomen. Fluorescentiemicroscopie was nuttig voor het verbeteren van de snijnauwkeurigheid in TEM.

Monster voorbereiding methode van scannen en transmissie elektronenmicroscoop voor de aanhangsels van woodboring Kever

We beschrijven hoe de geleedpotigen van de Leaf-woning worden gekwantificeerde door de bladeren en het einde van de takken in een zak te verzegelen, het zakmateriaal op te knippen en te bevriezen en het eerder bevroren materiaal in water te spoelen om geleedpotigen van het substraat te scheiden voor kwantificering.

Een methode voor het kwantificeren van gebladerte geleedpotigen

We beschrijven een semi-kwantitatieve benadering van het meten van kenmerken van corticolous (schors-woning) geleedpotigen Gemeenschappen. We plaatsten in commercieel vervaardigde kleverige vallen op boom Bolen om de overvloed, totale lengte (een surrogaat naar biomassa), rijkdom en de diversiteit van Shannon te schatten voor de vergelijking tussen boomsoorten.

Het kwantificeren van Corticoleuze geleedpotigen met plak vallen

Micro-CT is een niet-destructief hulpmiddel dat plantstructuren in drie dimensies kan analyseren. Het huidige protocol beschrijft de monstervoorbereiding om micro-CT te gebruiken om de parasitaire plantstructuur en -functie te analyseren. Verschillende soorten worden gebruikt om de voordelen van deze methode te benadrukken in combinatie met specifieke preparaten.

Gebruik maken van micro-CT-scanning om parasitaire plant-gastheer interacties te analyseren

Dit protocol is bedoeld om gedetailleerde procedures te bieden voor het verzamelen, fixeren en onderhouden van mycoheterotrofe plantenmonsters, waarbij verschillende microscopietechnieken worden toegepast, zoals scanning- en transmissie-elektronenmicroscopie, licht-, confocale en fluorescentiemicroscopie om schimmelkolonisatie te bestuderen in plantenweefsels en zaden ontkiemd met mycorrhizaschimmels.

Microscopietechnieken voor het interpreteren van schimmelkolonisatie in mycoheterotrofe plantenweefsels en symbiotische kieming van zaden

Dit protocol biedt een betrouwbare en efficiënte workflow van monsterafname tot gegevensanalyse voor het profileren van de endofytische en epifytische bacteriële microbiomen die aanwezig zijn in de schors van Populus trichocarpa.

Een workflow voor de kwantitatieve beoordeling van de endofytische en epifytische bacteriële microbiomen van de schors van Populus trichocarpa

We stellen een geoptimaliseerd Scanning Electron Microscopie-protocol voor voor het visualiseren van zeer heterogene en delicate monsters die planten- en schimmelbiomassa bevatten, samen met microbiota en biofilm. Dit protocol maakt het mogelijk om de ruimtelijke dimensies van de microbiota-organisatie te beschrijven.

Microbiota van attine mierentuinen: visualisatie van een microbieel landschap door scanning elektronenmicroscopie

Leer een betrouwbare methode om organismen in boomfloëem te observeren met behulp van een floëemsandwich. Deze techniek maakt het mogelijk om schorskevers, mijten, nematoden en schimmels te bestuderen voor ecologisch onderzoek en educatieve doeleinden.

Techniek voor het bestuderen van geleedpotigen en microbiële gemeenschappen binnen Tree Tissues

Meer video's verkennen