Name: A Novel Procedure voor het evalueren van de versterkende eigenschappen van tastants in laboratoriumratten: Operante Intraoral Zelftoediening (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-02-06T13:15:00.000+00:00
Duration: 11 min 16 s
Description: Leer een nieuwe operante intraorale zelftoedieningsprocedure voor het evalueren van versterkende eigenschappen van zoete oplossingen bij laboratoriumratten. Deze methode meet hefboomdrukgedrag voor verschillende concentraties.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Deze studies werden ondersteund door toelagen van de Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada (NSERC) naar FL en een Canadese Graduate Scholarship (CGSD) van NSERC naar AM.L.

1. Animal Care en Huisvesting Alle experimenten zijn goedgekeurd door de Animal Care Comite van de Universiteit van Guelph, en worden uitgevoerd in overeenstemming met de aanbevelingen van de Canadese Raad over Animal Care uitgevoerd. De huidige studie omvat 22 volwassen mannelijke Sprague-Dawley ratten (Charles River, QC) gewicht 200-225 g aan het begin van het experiment. <ol><li> Enkel huis ratten en hen op een omgekeerde licht / donker-cyclus (07:00 OFF - 07:00 ON) met ad libitum toegang tot voedsel en water tenzij anders is vermeld, of tijdens gedragstesten die optreedt tijdens de actieve cyclus. </li><li> Wennen ratten de kolonie kamer en humane behandeling door dagelijkse weging gedurende een week voorafgaand aan de operatie. </li></ol> 2. Intraorale Canulatie Chirurgie: Materialen en Procedures De intraorale (IO) chirurgie en materialen worden beschreven in Limebeer et al.. 14 <ol><li> Om bouwt de IO canule, snijd een stuk van polyethyleen plastic buis tot ongeveer 130 mm (inwendige diameter van 0,86 mm en een buitendiameter van 1,27 mm). </li><li> De buis wordt vastgezet in de mondholte is een omgezette uiteinde (~ 5 mm diameter). Maak deze flens einde door verhitting van het uiteinde van de buis met een soldeerbout voor 2-5 seconden en vervolgens onmiddellijk plat de verwarmde rand van de buis tegen een vlak oppervlak. Snijd een chirurgisch gaas schijf (ongeveer 6-7 mm diameter passen rond de diameter van de flens einde van de canule) en haal op de lengte van de buis totdat de schijf rust tegen de achterkant van het omgezette einde van de canule IO. </li><li> Per IO canule, snij een extra chirurgische gaas schijf (8 mm diameter) en drie vierkanten een elastische band (6 mm x 6 mm, zie figuur 1). </li><li> Steriliseer de IO canule, chirurgisch gaas schijven en elastische vierkanten in een antibacteriële oplossing gedurende ten minste 24 uur voor de operatie. </li><li> Voorafgaand aan chirurgie, eenutoclave alle chirurgische instrumenten en desinfecteren het chirurgische veld. Tussen operaties, gebruik dan een glazen kraal sterilisator om instrumenten te steriliseren, en draag een haarnetje, nitril handschoenen en mondkapjes om aseptische omstandigheden te handhaven. </li></ol> Analgesie en anesthesie <ol start="6"><li> Ongeveer 30 minuten voorafgaand aan chirurgie dienen een subcutane (SC) injectie van het antibioticum Depocillin (0,33 mg / kg) en de analgetische Meloxicam (5 mg / kg SC). </li><li> Induceren algemene anesthesie met behulp van isofluraan (4% inductie en 3% onderhoud). </li><li> Zodra ratten niet reageren op teen knijpen en vóór elke insnijdingen, gebruik dan een wattenstaafje een plaatselijke verdoving toedienen aan de binnenste linker wang ratten waarbij de canule moet worden geïmplanteerd, en injecteer een lokaal anestheticum zoals lidocaïne HCl bij de incisie site voor de biopsie naald (basis van de nek) en hoofdkap (hoofdhuid). </li><li> Druppeltje oogzalf in beide ogen voor het begin van de surgery. </li></ol> Chirurgische procedures <ol start="10"><li> Scheren een 10 mm x 10 mm stukje haar aan de basis van de hals. Gebruik steriele gaasjes te zwabberen en reinigen van het geschoren gebied in de volgende volgorde: antibacteriële zeep, isopropyl alcohol 70%, en Betadine. </li><li> Plaats een 15 G roestvrijstalen naald aan de basis van de nek en verplaatsen subcutaan rond het oor naar links wang. Plaats de naald en haal hem door de wang achter de eerste molaar binnenkant van de mondholte. </li><li> Passeer de IO canule door de punt van de naald uitsteekt van de mondholte en verwijder de naald waardoor alleen de IO canule. </li><li> Discussie een chirurgisch gaas schijf gevolgd door drie vierkante elastische schijven op het buitengedeelte van de IO canule en hen blootgestelde huid aan de achterkant van de nek te stabiliseren. </li><li> Flush de IO cannula with an antibacterial oral rinse </li><li> Vóór het begin van de operatie, wijzigen van een Nylon bout(28 mm lengte, 4 mm punt, 8 mm kop) om de kop te verwijderen en snijden een 2 mm groef langs de lengte van de draad (zie figuur 2). </li><li> Scheer een 10 mm x 20 mm strook van haar over de middellijn van het hoofd. Gebruik steriele gaasjes te zwabberen en reinigen van het geschoren gebied in de volgende volgorde: antibacteriële zeep, isopropyl alcohol 70%, en Betadine. </li><li> Gebruik een chirurgische scalpel om een ​​20 mm lange incisie langs de pijlnaad maken. Gebruik een handboor tot 4 gaten (2 aan elke kant van de hechtdraad) en gebruik een draagbare schroevendraaier tot vier juweliers schroeven vast aan de schedel. </li><li> Plaats de bout in het midden van de vier juweliers schroeven met de groef gepositioneerd naar de achterkant van het dier. Monteer de bout aan de schedel van de rat door het bouwen van een headcap met tandheelkundige cement (gebruik voldoende tandheelkundige cement aan het oppervlak van de juweliers schroeven te dekken). Laat de tandheelkundige cement te drogen voordat u het dier uit het chirurgische veld en anesthesie te beëindigen. </li></ol><pclass = &quot;jove_content&quot;&gt; Post-operatieve monitoring en zorg <ol start="19"><li> Individueel huis ratten in bedden kooien onmiddellijk na de operatie en de voet volgen gedurende 24 uur. </li><li> Dien een tweede injectie van de pijnstillende Meloxicam 24 uur na de operatie en spoel de IO canule met een antibacteriële mondspoeling keer / dag gedurende drie dagen. </li></ol> Geef ratten 3-5 dagen om te herstellen van een operatie voor het begin van het experiment. 3. IO Zelftoediening Procedures Apparaat Voor zelf-toediening worden Plexiglas operante conditionering kamers gebruikt, en elke kamer is ingesloten in een grotere geluidremmende triplex doos. Elke operante conditioneringskamer een huis licht (28 V) en twee intrekbare hefbomen (actieve en inactieve) aan weerszijden van de kamer, 8 cm boven de vloer. De actieve hefboom is verbonden met een infusiepomp gepositioneerd outside de geluidsisolerende kamer en een wit licht (28 W) ligt 3 cm boven het om te dienen als een stimulans licht gecombineerd met de levering van IO infusies. De inactieve hefboom dient om te controleren voor aanvang, niet-bekrachtigde operant gedrag, het indrukken van deze knop heeft geen consequentie, maar alle persen zijn opgenomen. Voedsel <ol><li> Zorg voor ratten met een standaard rattenvoer (3,1 kcal / g) in hun eigen kooi. </li><li> Verdunnen high fructose corn syrup (55% formule) tot drie verschillende concentraties (8% = 0,026 kcal/80 ul infusie, 25% = 0,08 kcal/80 ul infusie, 50% = 0,17 kcal/80 ul infusie) met behulp van omgekeerde osmose water. Deze concentraties zijn geselecteerd omdat elke produceert een viscositeit die geschikt is om snel (2,5 sec) IO infusies gegeven het experimentele apparaat (dwz diameter van spuiten en leidingen) te leveren is. </li></ol> Voedselontbering Met het oog op de overname van vergemakkelijkenIO zelfbestuur, maar bevorderen een normale groei, worden de ratten gefietst door perioden van het onthouden van voedsel en ad libitum toegang tot standaard rattenvoer. <ol start="3"><li> Weeg ratten dagelijks om 07:00 en verwijder chow uit de voerbak van de kooi. </li><li> De volgende dag, wegen ratten bij 12:00 (ongeveer 18 uur later) en begin IO zelf toedienen 01:00. </li><li> Terug ratten naar hun kooien op 4:00 en bieden ad libitum toegang tot chow gedurende 3 opeenvolgende uur. Noteer tot het gewicht van de ratten en de totale hoeveelheid voer geconsumeerd over de drie uur. Hervat het onthouden van voedsel zoals beschreven. </li></ol> Algemeen IO zelfbestuur procedure Operante reageren voor IO infusies van HFCS wordt beoordeeld op PR en continu schema van wapening. Ratten worden getest IO zelftoediening tot inname stabiel gedefinieerd: 1) een significant verschil in reactie tussen actieve en inactief hefbomen voor ten minste 2 opeenvolgende sessies, en 2) minder dan 20% variatie in het aantal infusies verdiend per sessie voor 2 opeenvolgende sessies. Elke sessie begint 6 uur in het donker cyclus en duurt 3 uur. De acquisitie fase bestaat uit 10 opeenvolgende IO zelftoediening sessies op een continu schema van wapening, en ratten krijgen een PR-test 24 uur vóór het begin van de overname (PR-test I) en 24 uur na de laatste overname sessie (PR Test II). Voor PR tests is het breekpunt (BP) gedefinieerd als de laatste infusie vóór beëindiging reageren op de werkzame hefboom gedurende tenminste 1 uur 18 ontvangen. <ol start="6"><li> Vorkheftruck ratten op basis van gewichten die gedurende drie dagen voor het begin van het experiment en toewijzen ratten zelftoediening van een van drie concentraties van HFCS: 8%, 25% of 50%. </li><li> Weeg ratten bij 12:00 en breng ze uit de kolonie kamer naar de testkamer in hun kooien. Om voedsel of beddi verwijderenng die zich ophopen in de IO canule pomp lucht via de canule met een 12 ml spuit met een 16 G naald 50 mm polyethyleen buis (inwendige diameter 1,14 mm en buitendiameter van 1,57 mm) aan het uiteinde bevestigd. </li><li> In de operante kamer, sluit de IO canule naar Tygon slang (inwendige diameter van 0,02 mm en een buitendiameter van 1,53 mm) door een schacht gemaakt van een gemodificeerde 20 G-naald (verwijder het plastic hub en afgeschuinde tip). Plaats het onderste gedeelte van de buis (dat wil zeggen dichter bij het ​​dier) in het bosje van de bout. Het hogere gedeelte van de buis is verbonden met een draaibare en beschermd door een veer. Basisstation aansluiten van de bron naar de schroefdraad van de bout gemonteerd op de kop van de rat. </li><li> Geef ratten vijf minuten om te acclimatiseren aan de operante kamer en start de IO zelf toedienen sessie. De IO zelfbestuur sessie begint met de activatie van het huis licht, komst van de twee intrekbare hefbomen, en verlichting van delicht stimulus boven de actieve hefboom voor 30 sec. </li><li> Voor PR Test ik met de PR schema beschreven door Richardson en Roberts18 (response ratio escalatie = (5 e (injectie aantal x 0,2)) - 5). </li><li> Voor overname sessies 1-10, gebruik maken van een continu schema van wapening waarbij elke druk op de actieve hefboom resulteert in de levering van een 80 ul infusie van de testoplossing meer dan 2,5 sec. </li><li> Om voldoende tijd voor opname mogelijk te maken, leggen een time-out periode van 27.5 sec gedurende welke de actieve hefboom wordt teruggetrokken en de stimulus licht wordt geactiveerd (dwz ratten kan een IO infusie om de 30 sec te verkrijgen). Heeft een limiet op het aantal infusies verkrijgbaar in elke IO zelf toedienen sessie niet opleggen. </li><li> Als de rat een reactie niet te maken op de actieve hefboom voor 20 opeenvolgende minuten, prime de rat (open de operante kamer en de rat een keer op de actieve hefboom te vergemakkelijken). Prime de dieren elke 20 min tot 5x/session during de eerste drie dagen van slechts acquisitie. </li><li> Dien de tweede PR test met de in stap 3.10 beschreven parameters. </li><li> Na IO zelfbestuur sessies, verwijder ratten uit de operante kamers, spoel de IO canule met 2,0 ml water met dezelfde materialen in 3.7 omschreven, en ratten terug naar hun kooi in de kolonie kamer. </li><li> Na drie uur van ad libitum toegang tot rattenvoer, gewicht ratten bij 7:00, verwijder voedsel uit de voerbak, en hervat het onthouden van voedsel. </li></ol> Zelftoediening gegevens worden geanalyseerd met behulp van twee-factor herhaalde metingen Analyses of Variance (ANOVA). Meerdere vergelijkingen met behulp van de Student-Newman-Keuls werkwijze (α = 0.05) werden gebruikt om significante interacties of hoofdeffecten verkennen.

<ol><li>Avena, N. M., Bocarsly, M. E., Hoebel, B. G., Gold, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overlaps+in+the+nosology+of+substance+abuse+and+overeating%3A+the+translational+implications+of+%26%2334%3Bfood+addiction%26%2334%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Drug+Abuse+Rev%22%5BJournal%5D)">Overlaps in the nosology of substance abuse and overeating: the translational implications of &#34;food addiction&#34.</a> Curr. Drug Abuse Rev. 4 (3), 133-139 (2011).</li>
<li>Ifland, J. R., Preuss, H. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+food+addiction%3A+a+classic+substance+use+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Hyp%22%5BJournal%5D)">Refined food addiction: a classic substance use disorder.</a> Med. Hyp. 72, 518-526 (2009).</li>
<li>Volkow, N., Wise, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+can+drug+addiction+help+us+understand+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">How can drug addiction help us understand obesity.</a> Nat. Neurosci. 8 (5), 555-560 (2005).</li>
<li>Gearhardt, A. N., Davis, C., Kuschner, R., Brownell, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+addiction+potential+of+hyperpalatable+foods%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Drug+Abuse+Rev%22%5BJournal%5D)">The addiction potential of hyperpalatable foods.</a> Curr. Drug Abuse Rev. 4 (3), 140-145 (2011).</li>
<li>Gearhardt, A. N., Yokum, S., Orr, P. T., Stice, E., Corbin, W. R., Brownell, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+correlates+of+food+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Gen.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Neural correlates of food addiction.</a> Arch. Gen. Psychiatry. 68 (8), 808-816 (2011).</li>
<li>Volkow, N. D., Wang, G., Fowler, J. S., Telang, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overlapping+neuronal+circuits+in+addiction+and+obesity%3A+evidence+of+systems+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Philos.+Trans.+Royal+Soc%22%5BJournal%5D)">Overlapping neuronal circuits in addiction and obesity: evidence of systems pathology.</a> Philos. Trans. Royal Soc. 363, 3191-3200 (2008).</li>
<li>Alsiö, J., Olszewski, P. K., Levine, A. S., Schiöth, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feed-forward+mechanisms%3A+addiction-like+behavioral+and+molecular+adaptations+in+overeating%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Neuroendocrinol%22%5BJournal%5D)">Feed-forward mechanisms: addiction-like behavioral and molecular adaptations in overeating.</a> Front. Neuroendocrinol. 33 (2), 127-139 (2012).</li>
<li>Johnson, P. M., Kenny, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopamine+D2+receptors+in+addiction-like+reward+dysfunction+and+compulsive+eating+in+obese+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Dopamine D2 receptors in addiction-like reward dysfunction and compulsive eating in obese rats.</a> Nat. Neurosci. 13 (5), 635-644 (2010).</li>
<li>Bray, G. A., Nielsen, S. J., Popkin, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consumption+of+high-fructose+corn+syrup+in+beverages+may+play+a+role+in+the+epidemic+of+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Clin.+Nutr%22%5BJournal%5D)">Consumption of high-fructose corn syrup in beverages may play a role in the epidemic of obesity.</a> Am. J. Clin. Nutr. 79 (4), (2004).</li>
<li>Forshee, R. A., Storey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+examination+of+the+evidence+relating+high+fructose+corn+syrup+and+weight+gain%5BTitle%5D)+AND+%22Crit.+Rev.+Food+Sci.+Nutr%22%5BJournal%5D)">A critical examination of the evidence relating high fructose corn syrup and weight gain.</a> Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 47 (6), 561-582 (2007).</li>
<li>Moeller, S. M., Fryhofer, S. A., Osbahr, A. J., Robinowitz, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+high+fructose+corn+syrup%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Nutr%22%5BJournal%5D)">The effects of high fructose corn syrup.</a> J. Am. Coll. Nutr. 28 (6), 619-626 (2009).</li>
<li>White, J. S., Foreyt, J. P., Melanson, K. J., Angelopoulos, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+fructose+corn+syrup%3A+Controversies+and+common+sense%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Lifestyle+Med%22%5BJournal%5D)">High fructose corn syrup: Controversies and common sense.</a> Am. J. Lifestyle Med. 4 (6), 515-520 (2010).</li>
<li>Grill, H. J., Norgren, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+taste+reactivity+test.+I.+Mimetic+responses+to+gustatory+stimuli+in+neurologically+normal+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The taste reactivity test. I. Mimetic responses to gustatory stimuli in neurologically normal rats.</a> Brain Res. 143 (2), 263-279 (1978).</li>
<li>Limebeer, C. L., Vemuri, V. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inverse+agonism+of+cannabinoid+CB1+receptors+potentiates+LiCl-induced+nausea+in+the+conditioned+gaping+model+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Inverse agonism of cannabinoid CB1 receptors potentiates LiCl-induced nausea in the conditioned gaping model in rats.</a> Br. J. Pharmacol. 161 (2), 336-349 (2010).</li>
<li>DeBold, R. C., Miller, N. E., Jensen, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+strength+of+drive+determined+by+a+new+technique+for+appetitive+classical+conditioning+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.Psychol%22%5BJournal%5D)">Effect of strength of drive determined by a new technique for appetitive classical conditioning of rats.</a> J. Comp. Physiol.Psychol. 59 (1), 102-108 (1965).</li>
<li>Panksepp, J., Trowill, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraoral+self+injection%3A+I.+Effects+of+delay+of+reinforcement+on+resistance+to+extinction+and+implications+for+self-stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Psychonomic+Sci%22%5BJournal%5D)">Intraoral self injection: I. Effects of delay of reinforcement on resistance to extinction and implications for self-stimulation.</a> Psychonomic Sci. 9 (7), 405-406 (1967).</li>
<li>Panksepp, J., Trowill, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraoral+self+injection%3A+II.+The+simulation+of+self-stimulation+phenomena+with+a+conventional+reward%5BTitle%5D)+AND+%22Psychonomic+Sci%22%5BJournal%5D)">Intraoral self injection: II. The simulation of self-stimulation phenomena with a conventional reward.</a> Psychonomic Sci. 9 (7), 407-408 (1967).</li>
<li>Richardson, N. R., Roberts, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+ratio+schedules+in+drug+self-administration+studies+in+rats%3A+a+method+to+evaluate+reinforcing+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Progressive ratio schedules in drug self-administration studies in rats: a method to evaluate reinforcing efficacy.</a> J. Neurosci. Methods. 66, 1-11 (1996).</li>
<li>Berridge, K. C., Robinson, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parsing+reward%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Parsing reward.</a> Trends Neurosci. 26 (11), 507-501 (2003).</li>
<li>Sclafani, A., Ackroff, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reinforcement+value+of+sucrose+measured+by+progressive+ratio+operant+licking+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Reinforcement value of sucrose measured by progressive ratio operant licking in the rat.</a> Physiol. Behav. 79, 663-670 (2003).</li>
<li>Houpt, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gastrointestinal+factors+in+hunger+and+satiety%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Gastrointestinal factors in hunger and satiety.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 6 (2), 145-164 (1982).</li>
<li>Mazur, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+rate+of+reinforcement+and+rate+of+change+on+choice+behaviour+in+transition%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Psychol%22%5BJournal%5D)">Effects of rate of reinforcement and rate of change on choice behaviour in transition.</a> J. Exp. Psychol. 50 (2), 111-128 (1997).</li>
<li>Samaha, A. N., Robinson, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+does+the+rapid+delivery+of+drugs+to+the+brain+promote+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Pharmacol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Why does the rapid delivery of drugs to the brain promote addiction.</a> Trends Pharmacol. Sci. 26 (2), 82-87 (2005).</li>
<li>Berridge, K. C., Kringelbach, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affective+neuroscience+of+pleasure%3A+reward+in+humans+and+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Affective neuroscience of pleasure: reward in humans and animals.</a> Psychopharmacology. 199 (3), 457-480 (2008).</li>
<li>Kelley, A. E., Berridge, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neuroscience+of+natural+rewards%3A+relevance+to+addictive+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The neuroscience of natural rewards: relevance to addictive drugs.</a> J. Neurosci. 22 (9), 3306-3311 (2002).</li>
<li>Shaham, Y., Shalev, U., Lu, L., De Wit, H., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+reinstatement+model+of+drug+relapse%3A+history%2C+methodology+and+major+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings.</a> Psychopharmacology. 168 (1-2), 3-20 (2003).</li>
<li>de Wit, H., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+reinstatement+of+heroin-reinforced+responding+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Drug reinstatement of heroin-reinforced responding in the rat.</a> Psychopharmacology. 79 (1), 29-31 (1983).</li>
<li>Schmidt, H. D., Anderson, S. M., Famous, K. R., Kumaresan, V., Pierce, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomy+and+pharmacology+of+cocaine+priming-induced+reinstatement+of+drug+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Anatomy and pharmacology of cocaine priming-induced reinstatement of drug seeking.</a> Eur. J. Pharmacol. 526 (1-3), 65-76 (2005).</li>
<li>Dunnigan, M. G., Ford, J. S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+insulin+response+to+intravenous+fructose+in+relation+to+blood+glucose+levels%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">The insulin response to intravenous fructose in relation to blood glucose levels.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 40 (4), 629-635 (1975).</li>
<li>Crapo, P. A., Kolterman, O. G., Olefsky, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+oral+fructose+in+normal%2C+diabetic%2C+and+impaired+glucose+tolerance+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Effects of oral fructose in normal, diabetic, and impaired glucose tolerance subjects.</a> Diabetes Care. 3 (5), 575-582 (1980).</li>
<li>Lê, K. A., Tappy, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+effects+of+fructose%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Clin.+Nutr.+Metab.+Care%22%5BJournal%5D)">Metabolic effects of fructose.</a> Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab. Care. 9 (4), 469-475 (2006).</li>
<li>Scheggi, M. E., Secci, G., Marchese, M. G., De Montis, C., Gambarana, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+palatability+on+motivation+to+operate+for+caloric+and+non-caloric+food+in+non+food-deprived+and+food-deprived+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Influence of palatability on motivation to operate for caloric and non-caloric food in non food-deprived and food-deprived rats.</a> Neuroscience. 236, (2013).</li>
<li>Sclafani, A., Lucas, F., Ackroff, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+taste+and+palatability+in+carbohydrate-induced+overeating+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The importance of taste and palatability in carbohydrate-induced overeating in rats.</a> Am. J. Physiol. 270 (6), 1197-1202 (1996).</li>
<li>Roberts, D. C. S., Loh, E. A., Vickers, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-administration+of+cocaine+on+a+progressive+ratio+schedule+in+rats%3A+dose-response+relationship+and+effect+of+haloperidol+pretreatment%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Self-administration of cocaine on a progressive ratio schedule in rats: dose-response relationship and effect of haloperidol pretreatment.</a> Psychopharmacology. 97 (4), 535-538 (1989).</li>
<li>Reilly, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reinforcement+value+of+gustatory+stimuli+determined+by+progressive+ratio+Performance%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Biochem.+Behav%22%5BJournal%5D)">Reinforcement value of gustatory stimuli determined by progressive ratio Performance.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 63 (2), 301-311 (1999).</li>
<li>Zittel-Lazarini, A., Cador, M., Ahmed, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+transition+in+cocaine+self-administration%3A+Behavioral+and+neurobiological+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">A critical transition in cocaine self-administration: Behavioral and neurobiological implications.</a> Psychopharmacology. 192 (3), 337-146 (2007).</li>
<li>Stanhope, K. L., Havel, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocrine+and+metabolic+effects+of+consuming+beverages+sweetened+with+fructose%2C+glucose%2C+sucrose%2C+or+high+fructose+corn+syrup+Am%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Nutr%22%5BJournal%5D)">Endocrine and metabolic effects of consuming beverages sweetened with fructose, glucose, sucrose, or high fructose corn syrup Am.</a> J. Clin. Nutr. 88 (6), 17335-17375 (2008).</li>
<li>Deroche-Gamonet, V., Belin, B., Piazza, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+addiction-like+behaviour+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Evidence for addiction-like behaviour in the rat.</a> Science. 305, 1014-1017 (2004).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

De huidige studie toont een nieuwe benadering voor de evaluatie van de versterkende eigenschappen van zoete oplossingen door het combineren van methoden van oudsher gebruikt om gedrag ingegeven door drugs (intraveneuze operante zelf-beleid) te bestuderen en om de smaak van tastants (smaak reactiviteit door intraorale infusies) te beoordelen. Daartoe onder zeer korte-isofluraan geïnduceerde anesthesie, ratten geïmplanteerd met een IO canule dat zorgt voor de levering van testoplossingen direct in de mond. Na herstel van ...

Het onderzoek naar de neurobiologische en gedragsmatige basis van verslaving aan voedsel is gebaseerd op de waarnemingen die, net als bij drugs, overmatige consumptie van smakelijk voedsel bevordert gedrags afhankelijkheid 1-4 en induceert veranderingen in de hersenen beloning circuits in zowel mensen 5-6 en laboratorium dieren 7-8. Maar, terwijl er verschillende protocollen en procedures voor het bestuderen van de verslavende eigenschappen van drugs in laboratoriumratten, aanpassing van deze methoden om &quot;verslavend&quot; gedrag veroorzaakt door voedsel presenteert unieke uitdagingen te beoordelen. Het doel van de huidige studie was om principes van operante intraveneuze (IV) drug zelf toedienen van toepassing op het onderzoek van operante zelf toedienen van zoete oplossingen door intraorale (IO) infusie geleverd. De zoete werkzaam was high fructose corn syrup (HFCS), want hoewel controversieel, is er bewijs dat HFCS kan worden gekoppeld aan de moderne epidemie van zwaarlijvigheid 9-12. Traditioneel worden IO infusies geleverd aan de smakelijkheid van tastants studeren in smaak reactiviteit experimenten 13. Kort samengevat wordt een IO canule chirurgisch geïmplanteerd in de wang ratten en IO infusies van verschillende oplossingen worden passief afgeleverd 14. Doel is orofaciale reacties van de dieren naar de tastants studie. Echter, IO canules zijn ook chronisch geïmplanteerd in de mond van ratten te bepalen of zij leren om op een hendel zelf-infuus oplossingen direct in de mondholte, vandaar de term IO zelfinjectie 15-17. In de huidige studie, beschrijven we een procedure die kleine ingreep maakt gebruik van en dat op lange termijn operante zelf toedienen testen mogelijk maakt. Deze werkwijze heeft een aantal belangrijke voordelen ten opzichte van traditionele procedures die betrekking drinken van een oplossing van een tuit (a) of operante reageren voor vaste pellets (b) of operante reageren voor druppels fluïdum geleverd in een houder(C). In vergelijking met (a), IO zelf toedienen omvat een operant respons (bijvoorbeeld het indrukken van een hefboom) en daarom is het mogelijk om de planning die de verhouding tussen responsvereisten en levering van IO infusies wijzigen. Bijvoorbeeld door toepassing van een progressieve ratio (PR) schema, waarbij antwoorden is voor opeenvolgende infusies exponentieel in een sessie 18, is het mogelijk te bepalen hoeveel een dier &quot;wil&quot; de volgende infusie 19. Dit belangrijke aspect van &quot;op zoek naar&quot; gedrag kan niet worden beoordeeld wanneer de dieren drinken van een oplossing van een tuit, tenzij een speciaal apparaat dat de controles fluïdumafgifte en bewaakt reacties wordt gebruikt 20. Bovendien IO zelfbestuur biedt een middel om te vergelijken gedrag gemotiveerd door verschillende stimuli te versterken. Dat wil zeggen, is het mogelijk om te vergelijken operante reageren, onderhouden door snoep en andere bekrachtigers zoals drugs inzogenaamde &quot;substitutie studies.&quot; In vergelijking met (b), IO zelf toedienen maakt het testen van elke concentratie en elk volume van een additief in water oplosbaar. Dit is essentieel om gedraging die zoetigheden zoals HFCS studeren omdat, naar beste weten is er geen commercieel verkrijgbare vaste pellets van fructose, glucose of fructose-combinaties in verschillende verhoudingen, dat geschikt zou zijn voor operante kamers zijn. Ook het belang van het controleren en manipuleren concentratie / volumeverhoudingen verplicht in experimenten waarbij inname kan worden gemoduleerd door zowel de calorische waarde van een oplossing (leidend tot nutriënten-specifieke verzadiging) en hoeveel van deze oplossing kan worden geconsumeerd binnen een bepaalde tijd (dwz volheid) 21. IO zelfbestuur verkort ook de vertraging tussen de operante respons en de levering van de primaire bekrachtiger, een factor die een belangrijke rol in de acquisitie en onderhoud speeltnance van operant gedrag 16,22-23. Tenslotte, in vergelijking met (c), IO zelftoediening kan de levering van passieve IO infusies van gecontroleerde hoeveelheden van de testoplossing, en dit maakt het mogelijk orofaciale reacties van &quot;smaak&quot; meten (objectieve hedonische reactie zoals tong uitsteeksels 24 -25) en of deze reacties veranderen gedurende IO zelf toedienen. Bovendien is de mogelijkheid om passieve IO toedienen van een infuus heeft belangrijke toepassingen voor de studie van terugval naar voedsel zoekt. Dat wil zeggen, in studies van intraveneuze drugs zelf toedienen, na perioden van uitsterven, kan drug priemgetallen (dwz toediening van een kleine dosis van het geneesmiddel 26) &quot;herstellen&quot; reageert 27-28. Daarom kan de mogelijkheid IO infusies leveren zonder enige actie van de zijde van het dier worden gebruikt om &quot;food&quot; primer herstel, evenals potentiële kruising herplaatsing studies tussen voeding endrugs. IO zelftoediening van zoete oplossing verdient de voorkeur boven IV en intragastrische zelftoediening. In feite, hoewel IV infusies van fructose in zowel mensen en proefdieren produceren fysiologische gevolgen vergelijkbaar met die waargenomen na orale consumptie 29-31, dit is een slecht model van hoe snoepjes normaliter geconsumeerd (bijvoorbeeld oraal). Bovendien smaak signalen die door het kauwen verlenen belangrijke informatie over de smaak van voedsel, en wanneer dit stadium van het spijsverteringsproces wordt weggelaten, wordt de ontwikkeling van onaangepast gedrag zoals te veel eten verminderd 32-33.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Reagents</td></tr><tr><td>Meloxicam</td><td>Boehringer Ingelheim Canada Ltd.</td><td></td><td>Vanuit de apotheek van de Ontario Veterinary College</td></tr><tr><td>Procaine Penicillin G</td><td>Pen Aqueous, Wyeth Animal Health</td><td></td><td>Vanuit de apotheek van de Ontario Veterinary College</td></tr><tr><td>Lidocaine HCl 2%</td><td></td><td></td><td>Vanuit de apotheek van de Ontario Veterinary College</td></tr><tr><td>Marcaine 0.5 %</td><td></td><td></td><td>Vanuit de apotheek van de Ontario Veterinary College</td></tr><tr><td>Smerende oogzalf</td><td></td><td></td><td>Product kan worden gekocht bij elke apotheek</td></tr><tr><td>2% Lidocaine Viscous Oral (topisch verdovingsmiddel)</td><td>Pharmascience Inc.</td><td>CDMV # 14705</td><td>100 ml fles</td></tr><tr><td>Isoflurane USP</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada</td><td>CDMV # 108737</td><td>250 ml fles</td></tr><tr><td>Bacti-Stat</td><td>Merck Sante Animale</td><td>CDMV # 6449</td><td>3.785 L fles</td></tr><tr><td>Isopropyl alcohol (70%)</td><td>Perdu Pharma</td><td>Fisher # MPX18404</td><td>4 L fles</td></tr><tr><td>Betadine 10%</td><td>McKesson Canada</td><td>CDMV # 104826</td><td>500 ml fles</td></tr><tr><td>Super Germiphene</td><td>Ceva Animal Health</td><td>CDMV # 103629</td><td>454 ml fles</td></tr><tr><td>Chlorhexidene (Novadent)</td><td>Zoetis</td><td>CDMV # 8908</td><td>236 ml fles</td></tr><tr><td>High Fructose Corn Syrup</td><td>Natures Flavours</td><td>HFCS-55</td><td>1 gal fles</td></tr><tr><td colspan="4">Materials</td></tr><tr><td>PE90 tubing</td><td>Becton Dickinson and Company</td><td>VWR # CA-63019-080A</td><td>100 ft/rol</td></tr><tr><td>PE160 tubing</td><td>Becton Dickinson and Company</td><td>VWR # CA-63018-747</td><td>100 ft/rol</td></tr><tr><td>Polypropyleen gaas</td><td>Small Parts Inc.</td><td>CMP-0297-D</td><td></td></tr><tr><td>Loodbouter</td><td></td><td></td><td>Product kan worden gekocht bij elke ijzerwarenwinkel</td></tr><tr><td>#64 Elastische banden</td><td>Staples Office Supplies</td><td>Artikel # 13556</td><td>Product kan worden gekocht bij elke kantoorartikelenwinkel</td></tr><tr><td>15 G Dunwandige 3,5 inch naalden</td><td></td><td>VWR # CABD1108</td><td>12 naalden/verpakking</td></tr><tr><td>Elektrisch scheerapparaat (1/2 inch brede kling)</td><td></td><td></td><td>Product kan worden gekocht bij elke dierenwinkel</td></tr><tr><td>Precision Glide Needles 20 G naalden (1&frac12; inch)</td><td>Becton Dickinson and Company</td><td>Fisher # 14-826D</td><td></td></tr><tr><td>Precision Glide Needles 16 G naalden (1&frac12; inch)</td><td>Becton Dickinson and Company</td><td>Fisher # 14-826-5D</td><td></td></tr><tr><td>Operant conditioneringskamers</td><td>Med Associates Inc.</td><td>ENV-008-CTC</td><td></td></tr><tr><td>Gelluiddempende kamer</td><td>Med Associates Inc.</td><td>ENV-018M</td><td></td></tr><tr><td>MED PC IV software</td><td>Med Associates Inc.</td><td>SOF-735</td><td></td></tr><tr><td>Spuitpompen</td><td>Razel Scientific Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Wegwerp kunststof draaischarnier</td><td>Med Associates Inc.</td><td>PHM-115I</td><td></td></tr><tr><td>Tygone Microbore tubing</td><td>Saint Gobain Performance Plastics</td><td>Fisher # 1417015B</td><td>500 ft/rol</td></tr></tbody></table>

a novel procedure voor het evalueren van de versterkende eigenschappen van tastants in laboratoriumratten: operante intraoral zelftoediening

A Novel Procedure for Evaluating the Reinforcing Properties of Tastants in Laboratory Rats: Operant Intraoral Self-administration

Dit document beschrijft een nieuwe werkwijze voor het bestuderen van de bio-gedragsmatige basis van verslaving aan voedsel. Deze methode combineert de chirurgische component van smaak reactiviteit met de gedragsaspecten van operante zelf-toediening van geneesmiddelen. Onder zeer korte algemene anesthesie worden de ratten geïmplanteerd met een intraorale (IO) canule dat de levering van testoplossingen kan direct in de mondholte. Dieren worden vervolgens getest in operante zelf toedienen kamers waarbij ze kunnen een druk op de hendel om IO infusies van testoplossingen ontvangen. IO zelf-administratie heeft een aantal voordelen ten opzichte van experimentele procedures die gepaard gaan drinken van een oplossing van een tuit of operante reageren voor vaste pellets of geleverd in een bakje oplossingen. Hier laten we zien dat IO zelftoediening kan worden toegepast voor zelf-toediening van hoge fructose corn syrup (HFCS) te bestuderen. Ratten werden eerst getest voor het zelf toedienen op een progressieve ratio (PR) schema, waarin de maximale hoeveelheid op beoordeelterant gedrag dat wordt uitgestoten verschillende concentraties van HFCS (bijvoorbeeld 8%, 25% en 50%). Na deze test ratten eigen beheer deze concentraties een continu schema van wapening (dwz een infuus voor elke hefboom druk) gedurende 10 opeenvolgende dagen (1 sessie / dag, elk gedurende 3 uur), en vervolgens werden ze opnieuw getest op de PR schema . Op het continue versterking schema, ratten nam minder infusies van hogere concentraties, hoewel de laagste concentratie van HFCS (8%) gehandhaafd variabeler zelftoediening. Bovendien PR tests bleek dat 8% had lagere versterking waarde dan 25% en 50%. Deze resultaten geven aan dat IO zelftoediening kan worden gebruikt voor verwerving en onderhoud reageren voor zoete oplossingen te onderzoeken. De gevoeligheid van de operante respons op concentratieverschillen en schema van de wapening met IO zelftoediening ideale procedure om de neurobiologie van vrijwillige inname onderzoeken of snoepjes.

Overname van IO zelfbestuur Figuur 3 operante reageren op de actieve en inactieve hefbomen bij zelftoediening van 8%, 25% of 50% HFCS gedurende 10 opeenvolgende sessies. Ratten verwerven IO zelf toedienen van HFCS binnen de eerste drie sessies en onderhouden stabiele actieve hendel reageert (zoals hierboven beschreven) voor de rest van de overname. Concentratie-afhankelijke verschillen in actieve hefboom reacties zijn ook duidelijk: tegenover 25%, reageren aanzienlijk ...

De huidige studie evalueert een nieuwe procedure voor de beoordeling van de versterkende effecten van smakelijke oplossingen in laboratoriumratten: intraorale zelf toedienen. Daartoe operant reageert (dat wil zeggen hefboom drukken) voor intra-orale infusies van zoete oplossingen bij verschillende concentraties werd gemeten op een continue en progressieve ratio&#39;s van de wapening.

A Novel Procedure voor het evalueren van de versterkende eigenschappen van tastants in laboratoriumratten: Operante Intraoral Zelftoediening

This paper describes a novel method for studying the bio-behavioral basis of addiction to food. This method combines the surgical component of taste ...

Het algemene doel van deze procedure is om de principes van operante intraveneuze drugszelfadministratie toe te passen op het onderzoek naar operante zelfadministratie van zoete oplossingen via intra-orale infusie. Dit wordt bereikt door eerst ratten chirurgisch te voorzien van een IO-canule en een hoofdkap. De tweede stap van de procedure is het selecteren van de gewenste suiker en het bereiden van geschikte concentraties van de oplossing voor zelfadministratie in operante kamers.De derde stap van de procedure is om de ratten in de operante kamers te plaatsen, hun IO-cannules aan de juiste slang aan te sluiten en de dieren toe te staan om IO-infusen van de zoete oplossing zelf toe te dienen met verschillende concentraties en verschillende bekrachtigingsschema's. De laatste stap van de procedure is om de ratten uit de operante kamers te halen en hun cannules met water door te spoelen ter voorbereiding op de volgende zelfadministratiesessie. Uiteindelijk kunnen resultaten worden verkregen waaruit blijkt dat ratten de zelfadministratie van zoete oplossingen aanleren en in stand houden, en dat hun gedrag gevoelig is voor veranderingen in de concentratie van de oplossing en het gehanteerde bekrachtigingsschema via IO-zelfadministratie.Het belangrijkste voordeel van deze techniek ten opzichte van bestaande methoden, zoals het drinken van een oplossing uit een tuit of open respons voor vaste pellets, is dat dit metaal het mogelijk maakt om elke concentratie en elk volume van elke wateroplosbare voedseladditief te testen. Nog belangrijker is dat we passieve intervalinfusies van controlehoeveelheden van de oplossingen kunnen toedienen zonder dat er actie van het dier vereist is. Dit maakt het mogelijk om kunstmatige responsen van voorkeur te meten met behulp van activiteitstesten.Alle studies naar terugval in combinatie met intervalinfusies kunnen worden gebruikt om priming-geïnduceerd herstel (reinstatement) te bestuderen, evenals potentieel kruislings herstel tussen zoete oplossingen en drugs van misbruik. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen in de vakgebieden van voedselverslaving en obesitas, zoals het identificeren van de neurale substraten die verantwoordelijk zijn voor de acquisitie, het behoud en de terugval in compulsieve zoetbegeerte, alsook het identificeren van factoren die betrokken zijn bij dieet-geïnduceerde obesitas. Het zal daarnaast mogelijk zijn om de genetische en epigenetische factoren te bestuderen die betrokken zijn bij de ontwikkeling van compulsieve voedselbegeerte.Alle experimenten zijn goedgekeurd door de Commissie voor Dierverzorging van de Universiteit van Guelph en worden uitgevoerd in overeenstemming met de aanbevelingen van de Canadian Council on Animal Care. Om de IO-cannule te vervaardigen, snijdt u een stuk polyethyleen plastic buis van ongeveer 130 millimeter lengte om een geflanste zijde te creëren voor bevestiging in de mondholte. Gebruik een soldeerbout om het uiteinde van de buis twee tot vijf seconden te verhitten en druk vervolgens de verhitte rand van de buis onmiddellijk plat tegen een vlak oppervlak.Snijd een schijfje chirurgisch gaas van ongeveer zes tot zeven millimeter in diameter en schuif dit over de lengte van de buis totdat het tegen de achterkant van het geflanste uiteinde van de canule rust. Snijd voor elke IO-canule één extra schijfje chirurgisch gaas van ongeveer acht millimeter in diameter en drie vierkantjes van zes bij zes millimeter van een elastische band, ten minste 24 uur vóór de operatie. Steriliseer de IO-canule, de schijfjes chirurgisch gaas en de elastische vierkantjes in een antibacteriële oplossing ongeveer 30 minuten vóór de operatie.Dien een subcutane injectie toe van het antibioticum dein en het analgeticum meloxicam. Nadat isofluorine is gebruikt om algemene anesthesie op te wekken volgens het tekstprotocol en de sedatie is geverifieerd met een teenknijptest, wordt met een wattenstaafje een lokale verdoving aangebracht langs de binnenkant van de linkerwang waar de canule zal worden geïmplanteerd. Injecteer vervolgens een lokale verdovingsmiddel zoals lidocaïne HCL op de incisieplaats voor de biopsienaald en de schedelkap.Breng smerende oogzalf aan in beide ogen. Scheer vervolgens een haarplek van 10 bij 10 millimeter aan de basis van de nek. Gebruik steriel gaas om het gebied af te vegen en te reinigen met antibacteriële zeep, gevolgd door 70% alcohol.En tot slot Betadine. Voer vervolgens een roestvrijstalen naald van 15 gauge in bij de basis van de nek en beweeg deze subcutaan rond het oor naar de linkerwang. Positioneer de naaldpunt en voer deze door de wang, achter de eerste molaar, de mondholte in.Voer de IO-canule door de punt van de uitstekende naald en verwijder vervolgens de naald, zodat alleen de canule achterblijft. Rijg één chirurgische meshschijf gevolgd door drie vierkante elastische schijven aan het buitenste gedeelte van de canule en schuif deze naar de blootgestelde huid in de nek om deze te stabiliseren. Gebruik vervolgens een antibacterieel mondspoelmiddel om de IO-canule te spoelen vóór de operatie aan de bovenzijde van het hoofd. Pas een nylon bout aan door de kop te verwijderen en maak vervolgens een groef van 2 mm langs de lengte van de schroefdraad.Nadat een strook haar van 10 bij 20 millimeter langs de middellijn van de kop is afgeschoren, wordt het geschoren gebied met steriel gaas gewreven en gereinigd zoals eerder getoond voor de wang. Maak met een chirurgisch scalpel een incisie van 20 millimeter lang langs de sagitturale naad. Gebruik vervolgens een handboor om vier gaten te maken, twee aan weerszijden van de sutuur. Gebruik tot slot juweliersschroeven en tandheelkundig cement om de bout na de operatie op de schedel te bevestigen.Huis de rat in een individuele kooi en monitor deze gedurende 24 uur. Raadpleeg het tekstprotocol voor aanvullende zorg en reiniging van de IO-cannule voor experimenten die in de operante kamer worden uitgevoerd. Beschreven in het tekstprotocol.Maak met omgekeerd osmosewater verdunningen van 8%, 25% en 50% van 55% high fructose corn syrup (HFCS), nadat de rat is gewogen en in zijn thuiskooi naar de testruimte is overgebracht. Verwijder voedsel of nestmateriaal dat zich in de IO-canule kan ophopen door een spuit van 12 milliliter te gebruiken, voorzien van een naald van 16 gauge en 50 millimeters polyethyleenslang, om lucht door de canule in de operante kamer te pompen. Gebruik een naald van 20 gauge als as om de IO-canule aan de tigon-slang te verbinden.Bevestig het onderste gedeelte van de slang in de groef van de riem en verbind het bovenste gedeelte met een zwenkarm die is beschermd door een scharnier. Verbind vervolgens de basis van de veer met de schroefdraad van de bout die op de kop van de rat is gemonteerd. Laat de rat vijf minuten acclimatiseren in de kamer en begin daarna de zelfadministratie-sessie door het omgevingslicht te activeren.Introduceer de twee intrekbare hendels en activeer de lichtstimulus boven de actieve hendel gedurende 30 seconden. Voor de progressieve ratio- of PR-test één en alle daaropvolgende PR-testen wordt het PR-schema van Richardson en Roberts gebruikt, waarbij de escalatie van de responratio gelijk is aan vijf keer E tot de macht het injectienummer maal 0,2 minus vijf. Gebruik voor acquisitiesessies één tot en met 10 een continu bekrachtigingsschema waarbij elke druk op de actieve hendel resulteert in de toediening van een infusie van 80 µL van de testoplossing over 2,5 seconden om voldoende tijd voor inname te bieden; hanteer een time-outperiode van 27,5 seconden waarin de actieve hendel is ingetrokken en het stimuluslicht is geactiveerd.Stel geen limiet in voor het aantal beschikbare infusies per IO-zelfadministratiesessie. Indien de rat gedurende 20 opeenvolgende minuten niet reageert op de actieve hendel, dient de rat geprimed te worden door hem te faciliteren éénmaal op de actieve hendel te drukken. Verwijder de rat na afloop van de zelfadministratiesessies uit de operante kamer.Gebruik twee milliliters water om de IO-canule door te spoelen en plaats de rat terug in de thuiskooi in de koloniekamer. Volg het voerschema zoals beschreven in het tekstprotocol. Deze figuur toont de responsen op de actieve en inactieve hendels tijdens zelfadministratie van 8 25 of 50%HFCS gedurende 10 opeenvolgende sessies.Ratten verwerven IO-zelfadministratie van HFCS binnen de eerste drie sessies en behouden een stabiele respons op de actieve hendel gedurende de rest van de acquisitiefase. Concentratie-afhankelijke verschillen in responsen op de actieve hendel zijn eveneens duidelijk. Zo is de respons bij ratten die 50% HFCS zelfadministreren significant lager vergeleken met 25% HFCS.De ratten handhaven een gemiddeld niveau van operante respons bij toediening van 8%HFCS en vertonen een grotere individuele variabiliteit in de responsen op de actieve hendel en het breekpunt, gedefinieerd als de laatste infusie die is ontvangen vanwege een gebrek aan respons op de actieve hendel gedurende ten minste één uur; deze resultaten worden respectievelijk in deze grafieken weergegeven. In PR-test één is er een bescheiden responsfrequentie voor alle concentraties HFCS. Echter, in test twee treden groepsverschillen op, waarbij hogere concentraties leiden tot meer responsen en hogere breekpunten.Tijdens het uitvoeren van deze procedure is het belangrijk om de dieren regelmatig te controleren op vochtophoping bij de hoofdkap en op lekken tijdens de sessie van zelftoediening. Daarnaast zou het uitvalpercentage in deze experimenten minimaal moeten zijn, aangezien de IO-cannulatiechirurgie een tweede keer kan worden uitgevoerd als de dieren de canule tussen de sessies van zelftoediening zouden uitrekken of afbijten. Na het bekijken van deze video zou u een goed inzicht hebben in het aanpassen van chirurgische procedures en open kamers om intraorale zelftoedieningsexperimenten bij laboratoriumratten uit te voeren.

a-novel-procedure-for-evaluating-reinforcing-properties-tastants

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

Operante drug zelftoediening en geconditioneerd plaats voorkeur (CPP) procedures worden expansief gebruikt in onderzoek om verschillende onderdelen van drugs wapening, consumptie, en verslaving bij mensen model. In dit rapport, combineerden we de traditionele CPP en zelftoediening methoden als een nieuwe benadering voor het bestuderen van drugs wapening en verslaving bij ratten.

Nieuwe inrichting en werkwijze voor Drug Reinforcement

In dit protocol beschrijven we een methode voor het operant leren met behulp van zintuiglijke prikkels als een reinforcer in de muis. Het vereist geen voorafgaande opleiding of voedsel beperking, en het laat de studie van gemotiveerd gedrag zonder het gebruik van een farmacologische of natuurlijke bekrachtiger zoals voedsel.

Operante Sensation Seeking in de muis

Reageert voor voedsel of drug-gepaarde signalen toeneemt in de loop van een periode van onthouding en dit kan betrekking hebben op een verhoogde gevoeligheid voor terugval gedrag. Hier hebben we een detail procedure voor het beoordelen van deze "incubatie van craving" bij ratten die in eigen beheer sucrose hebben.

Een algemene methode voor het evalueren van Incubatie van sucrose Craving in ratten

Snelle schommelingen in extracellulair dopamine (DA) bemiddelen zowel beloningsverwerking als gemotiveerd gedrag bij zoogdieren. Dit manuscript beschrijft het gecombineerde gebruik van snelle scancyclische voltammetrie (FSCV) en intra-orale toediening van smaakstoffen om te bepalen hoe smaakstoffen de snelle dopamine-afgifte bij wakkere, vrij bewegende ratten veranderen.

Onderzoek van Rapid Dopamine Dynamics met Fast scan cyclische voltammetrie Tijdens intra-orale Tastant Administration in Awake Rats

Dit protocol beschrijft een nieuwe en efficiënte methode om snel te starten operante reageren voor ethanol in ratten die, in tegenstelling tot standaard methoden, geen water ontbering of saccharine / sucrose vervagen te initiëren reageren vereist.

Een methode voor het evalueren van de versterkende eigenschappen van ethanol in ratten zonder Water beroving, sacharine Fading of Extended Access Training

Het doel van deze studie is om op beloning van gedistribueerde hersenprocessen netwerken te identificeren door het afbakenen van een betrouwbare immunohistologische techniek met behulp van mobiele c-fos activering gelijktijdige veranderingen in de dopamine wegen en terminal plaatsen na roman inname van vet en suiker in ratten te meten.

Gelijktijdige detectie van c-Fos Activering van mesolimbic en mesocorticale Dopamine Beloning Sites Na Naive suiker en vet inname bij ratten

Dit protocol wordt een methode voor het onderzoeken van de mogelijkheid van metageheugen of geheugen bewustzijn, bij knaagdieren beschreven. Het vertraagd-matching-naar-sample geur gebaseerde paradigma is een roman, ecologisch relevante gedrags test nuttig voor het bepalen van de mate waarop knaagdieren adaptief gebaseerd op cognitief toezicht op de sterkte van hun geheugen kunnen reageren.

Match-naar-Sample Test bij ratten vertraagd testen voor metacognitieve reageert met behulp van een op geur gebaseerde

Wij presenteren drie protocollen die beoordelen van verschillende vormen van impulsiviteit bij ratten en andere kleine zoogdieren. Intertemporele keuze procedures evalueren de neiging om korting de waarde van vertraagde resultaten. Differentiële versterking van lage tarieven en functie-negatieve discriminatie evalueren remming reactievermogen met en zonder straf voor ongepaste reacties, respectievelijk.

Drie laboratorium Procedures voor de beoordeling van de verschillende manifestaties van impulsiviteit bij ratten

Hier gepresenteerd is een protocol om depressie-achtig en anhedonisch gedrag bij ratten te bestuderen. Het combineert twee gevestigde gedragsmethoden, de sacharose voorkeur en nieuwheid-geïnduceerde hypofagie tests, met een geautomatiseerd voedsel en vloeibare inname monitoring systeem, om indirect te onderzoeken knaagdier gedrag met behulp van surrogaat parameters.

Sucrose voorkeur en nieuwheid-geïnduceerde Hypophagia Tests bij ratten met behulp van een geautomatiseerde voedselinname monitoring systeem

Dit protocol beschrijft de beoordeling van mechanische overgevoeligheid in een rattenmodel van neuropathische orofaciale pijn met behulp van een op operant gebaseerd orofaciaal pijnbeoordelingsapparaat.

Beoordeling van door zenuwletsel geïnduceerde mechanische overgevoeligheid bij ratten met behulp van een orofaciale operante pijntest

Leer een nieuwe operante intraorale zelftoedieningsprocedure voor het evalueren van versterkende eigenschappen van zoete oplossingen bij laboratoriumratten. Deze methode meet hefboomdrukgedrag voor verschillende concentraties.

A Novel Procedure voor het evalueren van de versterkende eigenschappen van tastants in laboratoriumratten: Operante Intraoral Zelftoediening (Video) | JoVE Journal

A Novel Procedure voor het evalueren van de versterkende eigenschappen van tastants in laboratoriumratten: Operante Intraoral Zelftoediening

Meer video's verkennen