Name: Een Proboscis Extension Response Protocol voor het onderzoeken van Behavioral Plasticiteit in Insecten: Toepassing op Basic, Biomedische en Landbouwkundig Onderzoek (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-08T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 31 s
Description: Leer de Proboscis Extension Response-methode voor gedragsbiologisch onderzoek bij honingbijen (Apis mellifera). Dit protocol helpt onderzoekers om leergedrag en de effecten van stressfactoren te bestuderen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dit onderzoek werd gesteund door de financiering van NIH NCRR (R01 RR014166 aan BHS), NIH NIDCD (R01 DC011422 BHS co-PI), het Amerikaanse ministerie van Landbouw (J trumble PI; BH Smith co-PI) en Arizona State University. De financiering voor de workshop aan studenten (data in figuur 4) te trainen werd verstrekt door de Stichting van de Wetenschap van Chili.

<ol><li>Rescorla, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+studies+of+Pavlovian+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Behavioral studies of Pavlovian conditioning.</a> Annu Rev Neurosci. 11, 329-352 (1988).</li>
<li>Martin, S. J., Grimwood, P. D., Morris, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+plasticity+and+memory%3A+an+evaluation+of+the+hypothesis%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Synaptic plasticity and memory: an evaluation of the hypothesis.</a> Annu Rev Neurosci. 23, 649-711 (2000).</li>
<li>Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schafer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classical+conditioning+of+proboscis+extension+in+honeybees+%28Apis+mellifera%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Psychology%22%5BJournal%5D)">Classical conditioning of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera).</a> Journal of Comparative Psychology. 97, 107-119 (1983).</li>
<li>Giurfa, M., Sandoz, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invertebrate+learning+and+memory%3A+Fifty+years+of+olfactory+conditioning+of+the+proboscis+extension+response+in+honeybees%5BTitle%5D)+AND+%22Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Invertebrate learning and memory: Fifty years of olfactory conditioning of the proboscis extension response in honeybees.</a> Learn Mem. 19, 54-66 (2012).</li>
<li>Smith, B. H., Wright, G. A., Daly, K. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSmith%2C+BH+%22The+Biology+of+Floral+Scents%22">The Biology of Floral Scents</a>. Dudareva, N., Pichersky, E. , CRC Press. 263-295 (2006).</li>
<li>Menzel, R., Giurfa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dimensions+of+cognition+in+an+insect%2C+the+honeybee%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Cogn+Neurosci+Rev%22%5BJournal%5D)">Dimensions of cognition in an insect, the honeybee.</a> Behav Cogn Neurosci Rev. 5, 24-40 (2006).</li>
<li>Kuwabara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bildung+des+bedingten+Reflexes+von+Pavlovs+Typus+bei+der+Honigbiene%2C+Apis+mellifera%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Faculty+of+Science%2C+Hokkaido+University%2C+Zoology%22%5BJournal%5D)">Bildung des bedingten Reflexes von Pavlovs Typus bei der Honigbiene, Apis mellifera.</a> Journal of the Faculty of Science, Hokkaido University, Zoology. 13, 458-464 (1957).</li>
<li>Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+honeybee+as+a+model+for+understanding+the+basis+of+cognition%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The honeybee as a model for understanding the basis of cognition.</a> Nat Rev Neurosci. 13, 758-768 (2012).</li>
<li>Menzel, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMenzel%2C+R+%22Neurobiology+of+comparative+cognition%22">Neurobiology of comparative cognition</a>. Kesner, R. P., Olton, D. S. , Lawrence Erlbaum. 237-292 (1990).</li>
<li>Hammer, M., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learning+and+memory+in+the+honeybee%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Learning and memory in the honeybee.</a> Journal of Neuroscience. 15, 1617-1630 (1995).</li>
<li>Strube-Bloss, M. F., Nawrot, M. P., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mushroom+body+output+neurons+encode+odor-reward+associations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mushroom body output neurons encode odor-reward associations.</a> J Neurosci. 31, 3129-3140 (2011).</li>
<li>Szyszka, P., Galkin, A., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associative+and+non-associative+plasticity+in+kenyon+cells+of+the+honeybee+mushroom+body%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Syst+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Associative and non-associative plasticity in kenyon cells of the honeybee mushroom body.</a> Front Syst Neurosci. 2, (2008).</li>
<li>Fernandez, P. C., Locatelli, F. F., Person-Rennell, N., Deleo, G., Smith, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associative+conditioning+tunes+transient+dynamics+of+early+olfactory+processing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Associative conditioning tunes transient dynamics of early olfactory processing.</a> J Neurosci. 29, 10191-10202 (2009).</li>
<li>Locatelli, F. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonassociative+plasticity+alters+competitive+interactions+among+mixture+components+in+early+olfactory+processing%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Nonassociative plasticity alters competitive interactions among mixture components in early olfactory processing.</a> Eur J Neurosci. 37, 63-79 (2013).</li>
<li>Farooqui, T., Robinson, K., Vaessin, H., Smith, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+early+olfactory+processing+by+an+octopaminergic+reinforcement+pathway+in+the+honeybee%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Modulation of early olfactory processing by an octopaminergic reinforcement pathway in the honeybee.</a> Journal of Neuroscience. 23, 5370-5380 (2003).</li>
<li>Mussig, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+disruption+of+the+NMDA+receptor+subunit+NR1+in+the+honeybee+brain+selectively+impairs+memory+formation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Acute disruption of the NMDA receptor subunit NR1 in the honeybee brain selectively impairs memory formation.</a> J Neurosci. 30, 7817-7825 (2010).</li>
<li>Hladun, K. R., Smith, B. H., Mustard, J. A., Morton, R. R., Trumble, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selenium+toxicity+to+honey+bee+%28Apis+mellifera+L.%29+pollinators%3A+effects+on+behaviors+and+survival%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Selenium toxicity to honey bee (Apis mellifera L.) pollinators: effects on behaviors and survival.</a> PLoS One. 7, e34137(2012).</li>
<li>Wiegmann, D. D., Smith, B. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWiegmann%2C+DD+%22International+Journal+of+Comparative+Psychology%22">International Journal of Comparative Psychology</a>. 22, 141-152 (2009).</li>
<li>Drezner-Levy, T., Shafir, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parameters+of+variable+reward+distributions+that+affect+risk+sensitivity+of+honey+bees%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol%22%5BJournal%5D)">Parameters of variable reward distributions that affect risk sensitivity of honey bees.</a> J Exp Biol. 210, 269-277 (2007).</li>
<li>Drezner-Levy, T., Smith, B. H., Shafir, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+foraging+specialization+on+various+learning+tasks+in+the+honey+bee+%28Apis+mellifera%29%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Ecology+%26+Sociobiology%22%5BJournal%5D)">The effect of foraging specialization on various learning tasks in the honey bee (Apis mellifera).</a> Behavioral Ecology & Sociobiology. 64, 135-148 (2009).</li>
<li>Shafir, S., Menda, G., Smith, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caste-specific+differences+in+risk+sensitivity+in+honeybees%2C+Apis+mellifera%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Behaviour%22%5BJournal%5D)">Caste-specific differences in risk sensitivity in honeybees, Apis mellifera.</a> Animal Behaviour. 69, 859-868 (2005).</li>
<li>Smith, B. H., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analysis+of+variability+in+the+feeding+motor+program+of+the+honey+bee%3B+the+role+of+learning+in+releasing+a+modal+action+pattern%5BTitle%5D)+AND+%22Ethology%22%5BJournal%5D)">An analysis of variability in the feeding motor program of the honey bee; the role of learning in releasing a modal action pattern.</a> Ethology. 82, 68-81 (1989).</li>
<li>Erber, J., Pribbenow, B., Kisch, J., Faensen, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Operant+conditioning+of+antennal+muscle+activity+in+the+honey+bee+%28Apis+mellifera+L%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology+A-Sensory+Neural+%26+Behavioral+Physiology%22%5BJournal%5D)">Operant conditioning of antennal muscle activity in the honey bee (Apis mellifera L).</a> Journal of Comparative Physiology A-Sensory Neural & Behavioral Physiology. 186, 557-565 (2000).</li>
<li>Smith, B. H., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+electromyogram+recordings+to+quantify+odorant+discrimination+in+the+honey+bee%2C+Apis+mellifera%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">The use of electromyogram recordings to quantify odorant discrimination in the honey bee, Apis mellifera.</a> Journal of Insect Physiology. 35, 369-375 (1989).</li>
<li>Stopfer, M., Bhagavan, S., Smith, B. H., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+odour+discrimination+on+desynchronization+of+odour-encoding+neural+assemblies%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Impaired odour discrimination on desynchronization of odour-encoding neural assemblies.</a> Nature. 390, 70-74 (1997).</li>
<li>Daly, K. C., Christensen, T. A., Lei, H., Smith, B. H., Hildebrand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learning+modulates+the+ensemble+representations+for+odors+in+primary+olfactory+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Learning modulates the ensemble representations for odors in primary olfactory networks.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101, 10476-10481 (2004).</li>
<li>Matsumoto, Y., Menzel, R., Sandoz, J. C., Giurfa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revisiting+olfactory+classical+conditioning+of+the+proboscis+extension+response+in+honey+bees%3A+a+step+toward+standardized+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Revisiting olfactory classical conditioning of the proboscis extension response in honey bees: a step toward standardized procedures.</a> J Neurosci Methods. 211, 159-167 (2012).</li>
<li>Chandra, S. B., Hosler, J. S., Smith, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heritable+variation+for+latent+inhibition+and+its+correlation+with+reversal+learning+in+honeybees+%28Apis+mellifera%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Psychology%22%5BJournal%5D)">Heritable variation for latent inhibition and its correlation with reversal learning in honeybees (Apis mellifera).</a> Journal of Comparative Psychology. 114, 86-97 (2000).</li>
<li>Chandra, S. B., Hunt, G. J., Cobey, S., Smith, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+trait+loci+associated+with+reversal+learning+and+latent+inhibition+in+honeybees+%28Apis+mellifera%29%5BTitle%5D)+AND+%22Behavior+Genetics%22%5BJournal%5D)">Quantitative trait loci associated with reversal learning and latent inhibition in honeybees (Apis mellifera).</a> Behavior Genetics. 31, 275-285 (2001).</li>
<li>Hammer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neural+basis+of+associative+reward+learning+in+honeybees%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Neurosciences%22%5BJournal%5D)">The neural basis of associative reward learning in honeybees.</a> Trends in Neurosciences. 20, 245-252 (1997).</li>
<li>Frisch, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFrisch%2C+K+%22The+Dance+Language+and+Orientation+of+Bees%22">The Dance Language and Orientation of Bees</a>. , Harvard University Press. (1965).</li>
<li>Daly, K. C., Smith, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associative+olfactory+learning+in+the+moth+Manduca+sexta%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol%22%5BJournal%5D)">Associative olfactory learning in the moth Manduca sexta.</a> J Exp Biol. 203, 2025-2038 (2000).</li>
<li>Fan, R. J., Anderson, P., Hansson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioural+analysis+of+olfactory+conditioning+in+the+moth+spodoptera+littoralis+%28Boisd.%29+%28Lepidoptera%3A+noctuidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol.+200%22%5BJournal%5D)">Behavioural analysis of olfactory conditioning in the moth spodoptera littoralis (Boisd.) (Lepidoptera: noctuidae).</a> J Exp Biol. 200. 23 (Pt 23), 2969-2976 (1997).</li>
<li>Paranjpe, P., Rodrigues, V., VijayRaghavan, K., Ramaswami, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gustatory+habituation+in+Drosophila+relies+on+rutabaga+%28adenylate+cyclase%29-dependent+plasticity+of+GABAergic+inhibitory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Gustatory habituation in Drosophila relies on rutabaga (adenylate cyclase)-dependent plasticity of GABAergic inhibitory neurons.</a> Learn Mem. 19, 627-635 (2012).</li>
<li>Vinauger, C., Lallement, H., Lazzari, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learning+and+memory+in+Rhodnius+prolixus%3A+habituation+and+aversive+operant+conditioning+of+the+proboscis+extension+response%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol%22%5BJournal%5D)">Learning and memory in Rhodnius prolixus: habituation and aversive operant conditioning of the proboscis extension response.</a> J Exp Biol. 216, 892-900 (2013).</li>
<li>Smith, B. H., Abramson, C. I., Tobin, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditional+withholding+of+proboscis+extension+in+honeybees+%28Apis+mellifera%29+during+discriminative+punishment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Psychology%22%5BJournal%5D)">Conditional withholding of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera) during discriminative punishment.</a> Journal of Comparative Psychology. 105, 345-356 (1991).</li>
<li>Smith, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analysis+of+blocking+in+odorant+mixtures%3A+an+increase+but+not+a+decrease+in+intensity+of+reinforcement+produces+unblocking%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">An analysis of blocking in odorant mixtures: an increase but not a decrease in intensity of reinforcement produces unblocking.</a> Behav Neurosci. 111, 57-69 (1997).</li>
<li>Gerber, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Honey+bees+transfer+olfactory+memories+established+during+flower+visits+to+a+proboscis+extension+paradigm+in+the+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Behaviour%22%5BJournal%5D)">Honey bees transfer olfactory memories established during flower visits to a proboscis extension paradigm in the laboratory.</a> Animal Behaviour. 52, 1079-1085 (1996).</li>
<li>Rueppell, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genetic+architecture+of+sucrose+responsiveness+in+the+honeybee+%28Apis+mellifera+L%29%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">The genetic architecture of sucrose responsiveness in the honeybee (Apis mellifera L).</a> Genetics. 172, 243-251 (2006).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen belangenconflicten te melden.

Dit protocol presenteerde twee betrouwbare methoden voor het conditioneren van het gebruik van de PER procedure. Dit zijn twee verschillende methoden die met succes zijn toegepast 27, 21. Wij gebruiken Methode 2 voor alle experimentele studies waarbij PER zoals het is altijd betrouwbaar, zelfs over verschillende onderzoekers. Dezelfde fundamentele procedure is aangepast aan veel verschillende soorten studies met honingbijen, waaronder het gebruik van de verschillende conditionering stimuli en andere gedrags-reflexen. Ook is gekoppeld aan onderzoek naar de genetische basis van verschillen in het leren 28,29, de fysiologische correlaten van olfactorische perceptie en geheugen in de hersenen 13,14,30, en de modulerende en moleculair genetische basis van gedrag 15,16,31 . Vanwege de geavanceerde kennis van de ecologische relevantie van olfactorische leren honingbijen, die meer dan 100 jaar geleden begon met de eerste studies van Karl von Frisch <sup&gt; 31, kunnen de resultaten van PER eenvoudig gekoppeld worden overlevingsbehoeften van een kolonie. Het meest recent, het is aangepast aan een agrarische studie naar de subletale effecten op het gedrag van bestrijdingsmiddelen en milieu-toxines 17 onderzoeken. De basisprocedure is krachtig omdat het kan worden toegepast om problemen in andere soorten, en onderzoeken. Twee soorten nachtvlinders, Manduca sexta en Spodoptera littoralis, zijn gebruikt in PER studies naar de neurale basis van identificatie en geur olfactorische leervermogen 32,33 per soort &#39;onderzoeken. PER experimenten met fruitvliegjes hebben veel inzichten in de moleculaire signaaltransductie cascades betrokken bij chemosensation en leren 34. En PER is onlangs gebruikt om gewenning bij de vlooien (Rhodnius prolixus) 35, een belangrijke ziekteoverbrenger bestuderen. In het algemeen is de procedure bestand tegen veranderingen in de; het gebruik van different methoden zullen waarschijnlijk tot dezelfde relatieve verschil tussen de behandelingsgroepen. Ondanks de relatief eenvoudige procedure kan meerdere problemen soms voorkomen dat de bijen uit het leren van de geur-sucrose vereniging. De volgende onderwerpen zijn mogelijk aanpassingen aan het protocol en een aantal van de meest voorkomende problemen die zich tijdens PER conditionering kunnen voordoen. Overwegingen op aantal en type van Trials in de Conditioning Protocol Elke leren protocol zal de blootstelling van de bijen nodig hebben om een ​​aantal proeven in de acquisitie fase. Dit aantal hangt grotendeels af van de moeilijkheid van de taak. Honingbijen kan een eenvoudige taak na een eenmalige proef te leren, maar ze moeten op zijn minst een drie proeven op lange termijn geheugen induceren. Zoals verwacht, zal de honingbijen vereisen aanzienlijk meer proeven om een ​​moeilijke taak adequaat te leren. Meestal is er een maximum aantal proeven waarna de bijen niet meer aanzienlijke verbetering van deir prestaties. Dit maximum is afhankelijk van de specifieke taak, de geur types en concentraties en de concentratie sucrose. Bij gebruik van meer dan een type van de proef met verschillende geuren, geven de verschillende proces in een pseudo-willekeurige sequentie van de bijen te houden van het onthouden van een eenvoudige reeks geur presentaties plaats van het leren van de verschillen tussen de geuren 36. In deze pseudo-willekeurige reeksen, moet er een gelijk aantal pogingen voor elk van de geur types. Ook de waarschijnlijkheid van een proef van een geur soort wordt voorafgegaan en gevolgd door dezelfde geur, of een van de andere geuren, moeten gelijk zijn voor alle geuren zijn. Voor twee geuren - A en B - gebruik de volgende volgorde: ABBABAAB. Meer dan acht proeven elke geur wordt vier keer gepresenteerd. Aaneenschakelen identieke sequenties om het gewenste aantal proeven voor elke geur te bereiken. Ongeacht proefopzet, zijn er een aantal parameters die moeten blijvenconstant om leren te optimaliseren. De overlap tussen de CS en de VS is van cruciaal belang voor een effectieve conditionering. De inter-trial interval (Figuur 1, Tabel 1) moet constant zijn en worden geoptimaliseerd omdat onregelmatigheid of een te korte of te lange inter-trial interval significant de effectiviteit van de conditionering protocol 1 kan beïnvloeden. Overwegingen over het belang en Ontwerp van Behavioral Testen Trials Reacties opgenomen tijdens de &#39;acquisitie fase&#39; van een experiment, wanneer de CS en de VS samen worden aangeboden, kan nuttig zijn. Echter, pas op dat de geur presentatie voorwaarden kunnen verschillen van het ene type van de proef naar de andere. Tijdens versterkte studies wordt de geur gevolgd door sucrose gepresenteerd in combinatie met een visuele stimulus (beweging van de inrichting voor het leveren van de sucrose druppel) dat de bij reactie kan beïnvloeden. En de bijen hebben slechts drie secondens om een reactie (Figuur 1 vier seconden van geur stimulatie minus de ene sec overlap met sucrose presentatie) tonen. Als het experiment betreft de bijen leren om twee geuren te onderscheiden (bijvoorbeeld, gewapend en ongewapend), de ongewapende geur gepresenteerd op alternatieve proeven gebeurt zonder de visuele prikkel van de beloning presentatie en de bijen hebben de volle vier seconden om te reageren. Daarom, de antwoorden op de twee geuren zijn niet volledig vergelijkbaar tijdens de overname. Met de conditionering protocol, niet alleen vertrouwen op overname bochten 1. Om beter te vernemen welke bijen geleerd, voeren een reeks versterkte testproeven, waarbij noch geur versterkt, die ervoor zorgt dat het testen van alle stimuli plaatsvindt onder identieke omstandigheden. Afhankelijk van het specifieke doel van het experiment, kan testen bestaan ​​uit enkele testproeven van de geconditioneerde geur of een reeks onderzoeken met de geconditioneerde odof of een combinatie van de geconditioneerde en nieuwe geuren. Een enkele test proces van de geconditioneerde geur zorgt voor een eenvoudige analyse van de vraag of de bijen &#39;Onthoud de geconditioneerde geur. Kan echter voor de eerste proef proef motivatieniveau de bijen en hun gevoeligheid van de geconditioneerde geur geven. Een serie proeven, ofwel een serie proeven uitsterven van de geconditioneerde geur of een reeks afzonderlijke onderzoeken van de geconditioneerde en een of meer nieuwe geuren, kunnen ook worden gebruikt om geheugen te beoordelen. De serie van uitsterven proeven kunnen beoordelen hoe sterk de bijen &#39;Onthoud de geconditioneerde vereniging. Hoe sterker de recall het groter aantal studies die nodig zijn om de geconditioneerde respons te blussen. Een reeks van enkele testen van geconditioneerde en nieuwe geuren kunnen ook de specificiteit geheugen van de geconditioneerde geur van de bijen te evalueren. Het is ook noodzakelijk te conditioneren en test zowel controle en behandelde groepen tegelijkertijd punten. Comparing van de prestaties van de bijen snel na conditionering voor bijen gehouden voor langere tijd is problematisch, omdat de blootstelling aan de sucrose VS door het voeren van de bijen tot verzadiging. Bijvoorbeeld, kan een afname van de prestaties na lange intervallen omdat het geheugen verval of het kan te wijten zijn aan veranderingen in motiverende toestand en / of leren geïnduceerd door versterkte blootstelling aan de VS, waardoor de resultaten ambigu. Derhalve prestaties van een behandelingsgroep altijd worden beoordeeld ten opzichte van een controlegroep geconditioneerd en getest op dezelfde tijdstippen. Geur Concentratie en Integriteit Er zijn verschillende manieren waarop de concentratie en integriteit van de geur (CS) kunnen worden aangetast. Het meest voorkomende probleem met geur levering de uitputting van geur cartridges overmatig (figuur 2). Vervang de cartridges 10-12 gebruik (om de 2 of 3 studies met groepen van 5 honingbijen) om deze valkuil te vermijden. Het is ook kritisch te gebruikenverse cartridges voor test-trials, omdat de gebruikte cartridges differentieel kan worden uitgeput en dus aanwezig ongelijke geur stimuli. Een ander bekend probleem geur cartridge vervuiling door met de cartridge voor meerdere geur zonder volledig reinigen. Een vuile of vervuilde luchtstroom kan ook onbedoeld introduceren extra olfactorische stimulus (actieve kool filters kan achtergrond besmetting te voorkomen). Dit is vooral problematisch wanneer het koppelen PER conditionering met metingen van de fysiologische reacties op de geur. Leaky geur cartridges een probleem vormen, omdat de bijen worden blootgesteld voordat het proces begint, waarin de saillantie van de geur prikkel vermindert om de geur. Loszittende op de luchttoevoer voor de geur levering kan leiden tot weinig of geen geur levering wanneer de klep wordt geopend, kunstmatig respons van de bijen aan het beoogde geur verminderen. Sucrose-oplossing en ongeconditioneerde stimulus (Beloning) De eenmount, concentratie, en de integriteit van de sucrose-oplossing gebruikt als de VS zijn van vitaal belang voor het succes van het experiment. Conditioning is een functie van de hoeveelheid en concentratie van sucrose-oplossing in water als de Amerikaanse 37. De micrometer spuiten van methode 2 toestaan ​​voor zeer nauwkeurige (tot 0,2 pl) zeggenschap over Amerikaanse levering, en wij raden ze met behulp van beide methoden beschreven. Gebruik van de tandenstokers (Methode 1) voldoende voor omstandigheden waarin de dure spuiten niet kan worden gebruikt, zoals in de opleiding van grote groepen studenten, werk in het veld, of met lagere budgetten. Zorgvuldige implementatie van methode 1 is prima, zolang de timing wordt onderhouden met regelmatige vervanging van tandenstokers om afzettingen van sucrose (en de concentratie geleverd) te vermijden. Het gebruik van tandenstokers is het moeilijker nauwkeurig te regelen en schat de hoeveelheid en grootte van de Amerikaanse geleverde, wat belangrijk is voor het conditioneren studies 1. De concentratie sucrose nodigeen voldoende beloning voor de bijen gemotiveerd aan het geconditioneerde vereniging kom kan afhangen van de moeilijkheid van de taak en interne toestand van de bijen of jaargetijde houden. De moeilijkere taken vereisen een hogere sucrose-oplossing voor de bijen &#39;om de taak met succes te leren. Schimmel kan opbouw in sacharose-oplossingen, zelfs bij 5 ° C, waarbij de integriteit van de oplossing in het gedrang brengt, die de gezondheid en de perceptie van de beloning van de bijen tijdens het experiment. Het beste is om de oplossing te vervangen om de paar dagen. Precisie, timing, en de consistentie van CS en de US, de levertijd Het meest kritieke punt over de juiste uitvoering van een PER procedure, of wat dat betreft elke conditionering procedure, houdt precisie, timing en consistentie van de CS en de US levering (figuur 1). Onderzoekers die nieuw zijn op de procedure vaak onnauwkeurig over de levering van een of beide stimuli. ISI&#39;sdie niet om voor overlap CS en Amerikaanse resulteren in slechte prestaties conditionering. De PLC automatiseert een akoestisch signaal voor de experimentator sucrose 3 sec leveren na het begin van geur levering. Onderzoekers moeten de sucrose / water druppel dicht bij de bijen voor een snelle levering na het signaal vast te houden. Deze procedures helpen meevoeren een consistente ISI. Het plaatsen van een stopwatch door de conditionering arena zorgt voor een gemakkelijke tijd plaatsing van de proef, alsmede de controle op de tijd van de bijen in de arena, zowel voor als na levering van stimuli. Zo ITI kan betrekkelijk consistent zijn en de gehele procedure kan met een geregelde snelheid worden uitgevoerd. ITI dat te kort zijn, bijvoorbeeld minder dan 1 min, of te lang kan leiden tot slechte conditionering rendement 1. Seizoensgebonden, milieu-, en contextuele effecten op Honey Bee Prestatie Prestaties van honingbijen &#39;kan aanzienlijk worden beïnvloed door zijn omgevingzowel voor als tijdens het conditioneren. Vaak zal de schommelingen in de temperatuur en de beschikbaarheid van voedsel die met de veranderende seizoenen motivatie van de bijen om te leren veranderen. Wanneer de bloemen in bloei staan, de motivatie van de bijen om te leren de geconditioneerde vereniging in het lab af 38. Wanneer de kolonie wordt benadrukt - van extreme temperaturen, voedseltekorten, of-ziekte stress - de bijen &#39;zal een vermindering van hun leerprestaties binnenkant laten zien. Honingbijen bewaard in een vlucht kamer kan goed leren voor een tijdje, maar er ook de stress van de ziekte en veroudering degraderen hun leerprestaties in de tijd. De context tijdens het conditioneren kunnen ook de prestaties van de bijen &#39;te verlagen. Vreemde geuren, beweging, en andere stimuli kunnen de bijen af ​​te leiden uit de experimentele stimuli. Om dit probleem te voorkomen, handhaven van een redelijk consistent, vereenvoudigde visuele context. Genotype en ervaring beïnvloedt per voorstelling &lt;p class = &quot;jove_content&quot;&gt; Honey bee werknemers kunnen aanzienlijk verschillen in prestaties op de conditionering procedure wegens taakspecialisatie, genotype, of andere omgevingsfactoren 20. Daarom is het belangrijk te standaardiseren, zoveel mogelijk, de soorten dieren gebruikt in een experiment om inter-individuele variatie te verminderen. In een kolonie geleid door een open-paarde koningin, wat betekent dat ze gepaard met veel verschillende drones, zullen de werknemers verschillen in vaderlijke genotype. Genetische achtergrond kan leiden tot dramatische verschillen in sensorische respons 39 en leerprestaties 29. Met behulp van kolonies geleid door koninginnen instrumentaal geïnsemineerd met sperma van enkele drones 28 vermindert dit inter-individuele variatie. De hierboven beschreven protocollen, inclusief een methode voor het verzamelen van honing bij werknemers uit het nest ingang. Echter, deze bijen verschillen van elkaar wat betreft leeftijd of gedragstaak. Ze is nog jong (inexperienCED) of ouder (meer ervaren) verzamelaars. Het kan gaan om jonge bijen die hun eerste oriëntatie vluchten. Of ze ook mogen zijn bewaker bijen. Om de variabiliteit te verminderen, markeer de bijen met een sneldrogende lakverf of markeerlabels hetzij als ze zich voordoen als volwassenen (om te controleren voor de leeftijd) en / of als ze beginnen foerageren (om te controleren voor de ervaring). Dan, een paar dagen later, het verzamelen van de gemarkeerde bijen voor het conditioneren. Werknemers die betrokken zijn bij de verpleging gedrag kan worden afgehaald bij de frames binnen de korf. Verpleegkundigen kunnen positief worden geïdentificeerd als ze voegen hun hoofd in een broedcel te voeden en de zorg voor de larve binnen. Met behulp van Virgin Queens of Drones voor PER Conditioning Naast werknemer honingbijen, kan maagd honingbij koninginnen en darren gemakkelijk worden geconditioneerd in een PER procedure voor studies die gericht zijn op het ontwikkelen van genetische lijnen van honingbijen die verschillen in leerprestaties 28. Maagdelijke koninginnen moet binnenkort worden afgehaald na they komen uit verpopping en direct in straatverbod harnassen geplaatst zonder verdoving. Jonge, onvolwassen drones verzameld uit het broed kam in de kolonie zijn over het algemeen niet gemotiveerd om te leren. Nadat ze zijn begonnen paring vluchten, drones gemakkelijk leren PER taken 28. Ze moeten worden verzameld als ze &#39;s nachts terug te keren van een paring vlucht en in een kleine kooi in een kolonie wordt gebruikt voor het opfokken van koninginnen. Probeer niet om ze te benutten de dag voor conditionering; ze niet goed overleven in harnassen overnachten. Een paar uur voor het conditioneren van de drones kunnen worden afgehaald bij de kooien en geplaatst in het straatverbod harnassen zonder verdoving. Conclusies Deze PER procedure, zoals methoden bedraagt ​​uitgangspunt voor het ontwerpen PER experimenten. De meeste PER protocollen vereisen dat de procedure van een gewijzigd worden om de specifieke doelen van het experiment en accomm implementerene verschillende behandelingsgroepen. Het is eenvoudig te implementeren. Echter, een goede uitvoering vereist aandacht voor detail en de praktijk. Eenmaal onder de knie kan een krachtige procedure om toe te voegen als een research tool voor meerdere fundamenteel en toegepast onderzoek programma&#39;s met verschillende soorten insecten zijn.

Veel insecten leren over ecologisch relevante stimuli, en ze dan veranderen hun gedragsreacties op die prikkels om aan te passen aan nieuwe voorspellende relaties in hun omgeving. Verschillende mechanismen kan deze gedrags plasticiteit ten grondslag liggen (bijvoorbeeld nonassociative, associatief / Pavlov, en operante / instrumentaal 1). Deze soorten plasticiteit verschillen hoe de stimuli of gedrag geassocieerd met belangrijke gebeurtenissen, zoals het optreden van voedsel, een partner, of gevaar. Inzicht in deze vormen van plasticiteit is erg belangrijk voor fundamenteel onderzoek naar hoe het zenuwstelsel verandert om nieuwe herinneringen 2 coderen. Het is ook belangrijk voor het begrijpen van het adaptief gedrag van insecten die belangrijke dragers van de ziekte (bijvoorbeeld tseetseevlieg en muggen) en insecten die de landbouw belangrijk zijn, zijn, hetzij in de productie van gewassen (honingbijen) of als ongedierte. Studeren gedragsmatige plasticiteit in een animal vereist een mate van experimentele controle over een aantal variabelen die niet haalbaar in het gebied 1. Het vereist de ontwikkeling van een robuust conditionering protocol dat kan worden ingezet onder meer gecontroleerde omstandigheden, maar die nog steeds het gedrag onder natuurlijke omstandigheden relevant. De honingbij (Apis mellifera) is een uitstekend model voor het maken van een protocol te ontwikkelen voor het uitvoeren van gecontroleerde onderzoek naar gedragsveranderingen plasticiteit 3,4. De Proboscis Extension Response (PER) in honing bijen is een natuurlijke gedrags reflex waarin de honingbij breidt zijn slurf in reactie op antennal stimulatie met een suikeroplossing. Tijdens normaal foerageergedrag, PER treedt op wanneer de honingbij vindt nectar in een bloem. Gelukkig zal bijen gemakkelijk vertonen deze eenvoudige en gemakkelijk kwantificeerbare gedrag in het laboratorium. Dit maakt het mogelijk om te bestuderen, in een gecontroleerde omgeving, de mechanismen die deze ecologisch relevante gedrag 5 beïnvloeden. PER can ook binnen een conditionering protocol gebruiken om stimulus perceptie en leren en geheugen onder verschillende behandelingsomstandigheden, die zijn ontworpen om de gedrags-en neurale mechanismen die ten grondslag liggen aan de plasticiteit 6 onthullen onderzoeken. Sinds de eerste studies van Kuwabara 7, is PER conditioning op grote schaal gebruikt om nonassociative, associatieve en operante mechanismen die ten grondslag liggen aan gedrags plasticiteit in honingbijen 8 onthullen. Deze mechanismen zijn identiek aan die geopenbaard in studies van vrij vliegen honingbijen 9. In tegenstelling tot de studies van vrij vliegende bijen, kunnen PER conditioning protocollen worden gekoppeld met de elektrofysiologie 10,11 of levende cellen fluorescentie beeldvorming 12-14 van de hersenen. Bovendien PER protocollen zorgen voor experimentele manipulatie van zenuwbanen via farmacologische en moleculair genetische behandelingen om hypotheses over de rol van specifieke onderdelen van het netwerk, zoals neur testenomodulators 15,16. PER protocollen hebben ook een belangrijke manier om de subletale effecten van milieu-omstandigheden, alsmede toxines op de gezondheid en foerageergebied efficiëntie van honingbijen 17 te evalueren. Deze procedure beschrijft twee geur levering methoden in parallel. Methode 1 is een versie van de geur en ongeconditioneerde stimulus (sucrose) levering die een goedkope en technisch eenvoudige werkwijze voor het presenteren van de geur en sucrose beloning verschaft. Deze methode is goed voor de basisopleiding en wanneer de automatisering niet mogelijk is. Het is een uitstekende manier om deze techniek om een ​​klaslokaal of onderwijs laboratorium te introduceren. Tijdens het conditioneren experimenten met meer moeilijke taken en gekoppelde fysiologische conditie van geurwaarneming, leren of geheugen, is het zeer belangrijk om nauwkeurig en precies regelen de aanvang, duur levering timing van stimuli. Voor de meest betrouwbare stimulans levering, gebruik dan een middel van het automatiseren van de geur levering eennd een nauwkeurige methode van beloning levering. Methode 2 wendt geautomatiseerde geur levering en nauwkeuriger sucrose levering. Het is technisch geavanceerder en vereist meer voor de initiële setup dan methode 1, maar het verhoogt de consistentie van de timing en de hoeveelheid stimuli gebruikt voor het conditioneren en mogelijk moet worden gebruikt wanneer.

<table><tbody><tr><td>Sucrose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9378-1KG</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;Geurstoffen (bijvoorbeeld)&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;1-hexanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>471402-100ML</td><td>Voor aanvullende voorbeelden</td></tr><tr><td>&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;2-octanon</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>W280208-800G-K</td><td>van geurstoffen, zie een van de</td></tr><tr><td>&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;heptanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>51778-5ML</td><td>de artikelen over olfactie</td></tr><tr><td>&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;geraniol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>163333-25G</td><td>verwerking vanuit de</td></tr><tr><td>&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;nonanaal</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>131210-100ML</td><td>Smith-lab.</td></tr><tr><td>Hexaan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>296090-1L</td><td></td></tr><tr><td>Zware minerale olie</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>330760-1L</td><td>Zorg ervoor dat het&amp;rsquo;is geurloos.</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>459836-1L</td><td></td></tr><tr><td>Scintillatiebuisjes</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z190535-1PAK</td><td>Gebruik een kleine boor om een klein gaatje in de dop van de vials te boren.</td></tr><tr><td>Bijenharnas</td><td></td><td></td><td>Zelfgemaakt van plastic frisdrankrietjes met een diameter van 0,9 cm of harde plastic/metalen buisjes.</td></tr><tr><td>Ducttape</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z188956-1PAK</td><td></td></tr><tr><td>Spoelflessen</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z560847-3EA</td><td>Voor de 70% ethanol.</td></tr><tr><td>Droogslang</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;ALLEEN VOOR METHODE 1&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>20 ml wegwerpspuiten van kunststof</td><td>Cole-Parmer</td><td>WU-07945-18</td><td></td></tr><tr><td>filterpapiercirkels van 15 mm</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z274844-1PAK</td><td></td></tr><tr><td>Punaise</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tandenstokers</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;ALLEEN VOOR METHODE 2&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>Gilmont Micrometer-spuit, 0,2 ml</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-07840-00</td><td></td></tr><tr><td>Gilmont micrometer spuitnaaldpunt</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-07841-00</td><td></td></tr><tr><td>26 G 3/8&amp;rdquo; Luer-lock hypodermische naalden</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-826-10</td><td></td></tr><tr><td>1 cc tuberculinespuiten (plastic/glas)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z181641-1EA OF Z192090-200EA</td><td>Glazen tuberculinespuiten zijn beschikbaar, maar plastic spuiten zijn veel goedkoper en zijn geschikt voor een beperkt aantal toepassingen.</td></tr><tr><td>Kleine rubberen/siliconen restrictoren</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-95702-02</td><td>Gemaakt van siliconen slang met een buitendiameter van 4,8 mm of de rubberen tips van de zuigers van 1 cc spuiten.</td></tr><tr><td colspan="4">[header]</td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7793-1EA</td><td></td></tr><tr><td>filterpapier van 75 x 100 mm</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z695106-500EA</td><td></td></tr><tr><td>Direct Logic 05 Programmeerbare Logische Controller</td><td><a href="http://www.koyoele.co.jp/english/product/plc/index.html" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Koyo Electronics Industries Co, Ltd</a></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1 mm, 4 mm, &amp;amp; PVC- of siliconenslang met een binnendiameter van 6 mm</td><td>Cole-Parmer</td><td>Diversen</td><td>Cole-Parmer heeft een breed assortiment aan geschikte slangjes.</td></tr><tr><td>Polypropyleenconnectoren &amp;amp; lekkagevrije koppelingen</td><td>Cole-Parmer</td><td>Diversen</td><td>Cole-Parmer beschikt over een breed assortiment connectoren en koppelingen voor vele slangmaten.</td></tr><tr><td>65 mm gecorreleerde debietmeter</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-03216-08</td><td>Aluminium met glazen vlotter; voor vloeistoffen en gassen, voorzien van ventiel.</td></tr><tr><td colspan="4">OF</td></tr><tr><td>Tetra Whisper 300 (Tetratek DW96-2) aquariumluchtpomp</td><td><a href="http://www.aquacave.com" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Aquacave</a></td><td>AE-TETRA-300</td><td></td></tr><tr><td>LIF-serie magneetventielen voor tubing met een binnendiameter van 0,042", configuratie "E"</td><td><a href="http://www.theleeco.com/LEEWEB2.NSF" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> The Lee Company</a></td><td>LFAA1200118H</td><td>Neopreen, 430 RVS, 302 RVS, 280 mW</td></tr><tr><td>PC-printplaat 12VDC 70dB piezozoemertje</td><td><a href="http://www.radioshack.com" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> RadioShack</a></td><td>273-074</td><td></td></tr></tbody></table>

een proboscis extension response protocol voor het onderzoeken van behavioral plasticiteit in insecten: toepassing op basic, biomedische en landbouwkundig onderzoek

A Proboscis Extension Response Protocol for Investigating Behavioral Plasticity in Insects: Application to Basic, Biomedical, and Agricultural Research

Insecten passen hun reacties op door prikkels ervaring associëren die stimuli met gebeurtenissen belangrijk voor de overleving (bijvoorbeeld voedsel, partners, bedreigingen). Er zijn verschillende gedrags-mechanismen waardoor een insect leert saillante verenigingen en ze aan bij deze gebeurtenissen. Het is belangrijk om deze gedragsproblemen plasticiteit voor programma&#39;s die gericht zijn naar het bijstaan ​​van insecten die nuttig zijn voor de landbouw zijn te begrijpen. Dit inzicht kan ook oplossingen ontdekken biomedische landbouwmachines problemen die insecten die fungeren als ziekte vectoren en plagen. De Proboscis Extension Response (PER) conditionering protocol is ontwikkeld voor honingbijen (Apis mellifera) meer dan 50 jaar geleden om te bestuderen hoe zij zien en te leren over bloemen geuren, die de nectar en stuifmeel middelen een kolonie nodig om te overleven signaleren. De PER procedure biedt een robuuste en eenvoudig te dienst kader voor het bestuderen van verschillende ecologisch relevante mechanismen van gedrags-plasticiteit. Het is eenvoudig aan te passen voor gebruik met verschillende andere soorten insecten en andere gedrags-reflexen. Deze protocollen kunnen gemakkelijk worden gebruikt in combinatie met verschillende middelen voor het toezicht neurale activiteit in het centrale zenuwstelsel via elektrofysiologie of Bio-imaging of voor het manipuleren gerichte neuromodulatory pathways. Het is een robuuste test voor het snel opsporen van sub-letale effecten op het gedrag veroorzaakt door milieu-invloeden, toxines of pesticiden. We zien hoe de per protocol is eenvoudig te implementeren met behulp van twee procedures. Een geschikt als laboratorium oefening voor studenten of snel testen van het effect van een experimentele behandeling. De andere biedt grondiger controle variabelen, die in studies van gedragsconditionering. We tonen hoe verschillende maatregelen voor de gedragsreactie variërend van binaire ja / nee meer continue variabele zoals latentie en duur van zuigorganen verlenging kan worden gebruikt om hypotheses te testens. En bespreken we een aantal valkuilen die onderzoekers vaak tegenkomen als ze gebruik maken van de procedure voor de eerste keer.

We presenteren twee voorbeelden van het gebruik van de protocollen PER hierboven beschreven. Het eerste voorbeeld gebruik gemaakt van methode 2 te onderzoeken hoe honingbijen zien verschillende geuren als functie van de moleculaire gelijkenis met geur als de CS 5,24,25. De tweede is een voorbeeld van het gebruik van methode 1 en enkele voorzorgsmaatregelen die moeten worden genomen bij het begin PER conditioneringsexperimenten gebruikt in het onderzoekslaboratorium. Studies zoals deze zijn gebruikt om de olfactorische &#39;perceptuele ruimte&#39; van bijen en motten beschrijven in combinatie met Bio-imaging 13 of elektrofysiologische analyse 26. Honingbijen (n = 20) werden geconditioneerd om de geurstof decanal met sucrose versterking associëren meer dan 12 forward koppelen conditioning trials (Figuur 3A). Ongeveer 10% van de bijen reageerden &#39;spontaan&#39; op de eerste proef, die is normaal. Daarna het percentage responded te verhogen in de komende beproevingen tot 100% van de honingbijen gereageerd op de vijfde proef en elke volgende proef. Verschillende studies hebben aangetoond dat deze toegenomen respons specifiek voor de voorwaartse koppeling toestand (figuur 1) ten opzichte van verscheidene belangrijke controleprocedures 3. Na de acquisitie fase werd elke honingbij onderworpen aan een reeks versterkte testproeven (figuur 3B), die betrokken blootstelling aan de geur CS en verscheidene andere geurstoffen die systematisch verschilde van de CS moleculaire structuren. Honingbijen reageerden het sterkst op de CS. De reacties op de andere geurstoffen af ​​als functie van de systematische veranderingen in structuur met de laagste reacties op de geurstoffen minst op het CS. In figuur 4 worden de resultaten van een recente workshop waarin studenten geleerd voor het eerst, hoe conditioneren honingbijen volgens methode 1 geïllustreerd. Studenten sparren<html> t geconditioneerd honingbijen door voorwaartse koppeling methycyclohexanone (MCH) of octanol (LGO) met sucrose wapening (Figuur 4A). Procent reacties waren lager op de eerste proef en verhoogde op de daaropvolgende proeven, wat aangeeft dat de bijen leerde de geur-sucrose vereniging. Er waren verschillen in de mate dat de bijen leerde de geconditioneerde associatie tussen de verschillende groepen studenten. In onze ervaring, kunnen deze soorten verschil als gevolg van de geur die werd gebruikt als CS, de onnauwkeurige elementen methode (methode 1) of het trainingsniveau van de onderzoekers. In het derde geval, de prestaties wordt al snel meer in overeenstemming met de toegenomen ervaring van de onderzoekers &#39;. Na conditionering werd elke honingbij twee keer getest met elke geur. In groepen van bijen die waren geconditioneerd met voorwaartse koppeling van oktober of MCH, het antwoord was, zoals verwacht, de sterkste op de geconditioneerde geur (Figuur 4B). <html> ent &quot;&gt; De tweede groep van de bijen die ervaren forward pairing LGO werd geconditioneerd in parallel aan een andere groep waarin de geur oktober achteruit was gepaard met sucrose. Backward pairing is een van de verschillende soorten van de controleprocedures aan te tonen dat de stijging van de respons is specifiek voor koppeling toekomen en niet aan een andere werkwijze, zoals niet-specifieke arousal van sensibilisatie. terugwaartse koppeling, de sucrose VS en geur CS worden in omgekeerde volgorde welke is getoond in figuur 1. Verwerving data van achterwaartse koppeling zijn niet getoond omdat de CR niet gescoord kan worden gegeven van de presentatie van de geur CS na de presentatie van sucrose. Zoals voorspeld zou worden voor associatieve conditionering, de respons niveaus LGO waren hoger in de voorwaartse gekoppelde groep ten opzichte van de achtergebleven groep (Figuur 4C). 7fig1highres.jpg &quot;width =&quot; 500 &quot;/&gt; Figuur 1 Schema van experimenteel ontwerp voor het conditioneren van het gebruik van voorwaartse koppeling. Zie tabel 1 voor de definities van de termen die in deze figuur. (A) De CS (geur) gaat vooraf aan en overlapt met de VS (sucrose / water-oplossing). De relatie tussen de CS en de US aangetoond is optimaal voor het conditioneren van de bijen en de motten. Maar de optimale ISI kan afhangen van de conditionering protocol en diersoorten 1. (B) Verdeling en relatieve timing van CS, CR, US, en UR. De CR dat hetzij vóór de VS presentatie of tijdens ongewapend &#39;test&#39; trials is de afhankelijke maat voor experimentele protocollen. <img alt="Figuur 2" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51057/51057fig2highres.jpg" width="500" /> Figuur 2 Geur uitputting met hergebruik van cartridges. Voor deze gegevens, geur cartridges warenopstelling met hexanol zoals beschreven in de tekst. Hexanol wordt vaak gebruikt als KS PER studies; echter, de werkelijke snelheid van uitputting afhangen van de geur en oplosmiddel. Cartridges werden vervolgens ooit gebruikt voor 4 sec elke minuut meer dan 8 trials (uitgaande 5 honingbijen / proces in een standaard experiment dat zou gelijk zijn 40 toepassingen). De verdunningen in de aangegeven oplosmiddel dat relatief standaard PER experimenten waren 2,0 M (A) en 0,2 M (B). (A, B) De geur werd bemonsterd na de eerste en de achtste proeven door adsorptie op een vaste fase micro-extractie (SPME) vezel die vervolgens werd gedesorbeerd op een gaschromatograaf. De relatieve gebieden onder de pieken waren hoger na de eerste proef opzichte van de achtste zowel oplosmiddelen en beide concentraties (Wilcoxon matched pairs signed rank test p &lt;0,05 [*] of hoger), waaruit blijkt dat minder geur uit de cartridge werd geleverd nadat de patroon was gebruikt een aantal malen. (C, D) Dezelfde gegevens toont alleen de achtste tr<html> IAL met de y-as uitgebreid. Het toont dat de vermindering was iets groter voor hexaan opzichte van minerale olie, maar alleen bij de lagere concentratie. <img alt="Figuur 3" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51057/51057fig3highres.jpg" width="500" /> Figuur 3 Verwerving en test met decanal als de CS en methode 2 te conditioneren. (A) Trial-by-trial respons (CR) op 12 forward pairing trials (figuur 1). De gegevens zijn afkomstig n = 20 honingbijen airconditioning in vier groepen van 5 honingbijen elk. De ISI is 3 sec en het ITI was 6 min. (B) Onversterkte tests met geuren die verschillen van decanal door koolstofketen en / of positie van de carbonyl koolstof. De geuren werden in een gerandomiseerd serie over vier groepen werden afgewisseld met versterkte onderzoeken met decanal (elke twee tot drie trials) teneinde uitsterven van de CR voorkomen. e_content &quot;fo: keep-together.within-page =&quot; always &quot;&gt; <img alt="Figuur 4" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51057/51057fig4highres.jpg" width="500" /> Figuur 4 Gegevens uit een workshop waarin studenten werden getraind om de conditie van de bijen met behulp van PER methode 1 (A) Overname van gegevens uit drie groepen van honingbijen geconditioneerd om octanol (n = 23 en 15 voor Gps 1 en 2, respectievelijk) en methylcyclohexanon (n = 10) (B) CR in onversterkte proeven met beide geuren.; vier studies gepresenteerd in willekeurige serie over groepen. (C) Onversterkte testen met beide geuren in twee groepen van bijen, een forward gekoppeld (Gp 1, n = 23) en een achterwaartse gepaarde (n = 25). <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> Term (afkorting) </td><td> Definitie </td><td> Relevante Voorbeeld </td></tr><tr><td> Geconditioneerde stimulus (CS) </td><td> Eenstimulus die weinig of geen respons opwekt in eerste en signalen US </td><td> GEUR </td></tr><tr><td> Geconditioneerde respons (CR) een </td><td> De respons op de CS na associatie met de VS </td><td> Proboscis UITBREIDING </td></tr><tr><td> Ongeconditioneerde stimulus (US) </td><td> Een biologisch belangrijke prikkel die een reactie uitlokt </td><td> SUCROSE / wateroplossing </td></tr><tr><td> Ongeconditioneerde respons (UR) een </td><td> De respons op de US </td><td> Proboscis UITBREIDING </td></tr><tr><td> Inter-Stimulus Interval (ISI) </td><td> De tijd tussen het begin van het CS en het begin van de US </td><td> GEUR te SUCROSE interval </td></tr><tr><td> Inter-Trial Interval (ITI) </td><td> De tijd tussen opeenvolgende CS-US paringen voor een enkel dier </td><td> GEUR (proef n) om de geur (proef n + 1)-interval </td></tr></tbody></table> Tabel 1 Imlangrijke Terminologie. Zie Figuur 1 voor een illustratie van deze voorwaarden. a Voor PER conditionering de CR en UR zijn hetzelfde, maar voor andere soorten verenigingen en reflexen van de CR en UR kunnen verschillen. <a href="/files/ftp_upload/51057/BEE_4.avi" target="_blank">Film 1.</a> Een video van een honingbij uitvoeren PER nadat was geconditioneerd om te reageren op een geur. Let op de PER respons van de bij ongeveer 1,5 sec na aanvang geur. Tracking software in kaart gebracht de antennaal bewegingen in reactie op de presentatie van de geur. De lijnen uitgezet in de rechterbovenhoek van de video weergave van de daadwerkelijke antennal bewegingen. De twee grafieken onder aan het scherm show antennaal bewegingen op x (links) en Y (rechts) coördinaten. De verticale lijnen in de grafiek getoond in de video aan te geven, van links naar rechts, licht aan, PER, licht uit en slurf intrekken.

Het Proboscis Extension Response (PER) conditioneringsprotocol, ontwikkeld voor de honingbij (Apis mellifera), biedt een ecologisch relevante en gemakkelijk kwantificeerbare manier om verschillende mechanismen van leren bij veel insectensoorten te bestuderen.

Een Proboscis Extension Response Protocol voor het onderzoeken van Behavioral Plasticiteit in Insecten: Toepassing op Basic, Biomedische en Landbouwkundig Onderzoek

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). ...

Het algemene doel van deze procedure is om aan te tonen hoe gedragsconditionering van een eenvoudige reflexmatige reactie op voedsel bij honingbijen kan worden geïmplementeerd. Dit wordt bereikt door eerst honingbijen te vangen, ze vast te zetten in tuigjes, ze een kleine hoeveelheid suikeroplossing te voeren en ze vervolgens te laten wennen aan de beperking. Vervolgens worden er bijen geselecteerd voor conditionering die voldoende motivatie tonen wanneer hun antennes worden aangeraakt met sucrose.Tijdens de conditionering wordt de presentatie van de geur gekoppeld aan een sucrosebeloning om de geconditioneerde respons op te wekken. Vervolgens wordt in niet-versterkte trials de aanwezigheid of afwezigheid van de respons, de latentietijd van de respons en de duur van de respons gemeten. De laatste stap bestaat uit de data-analyse en de grafische presentatie van de conditionerings- en testtrials.Deze techniek is met succes toegepast in studies naar de biologie en gezondheid van de honingbij; leergedrag is bijzonder gevoelig voor verstorende behandelingen zoals pesticiden, waardoor het mogelijk is om de impact van dit soort behandelingen op het gedrag van honingbijen op sublethale niveaus te beoordelen. Een visuele demonstratie van deze methode helpt bij het begrijpen van de timing van de stimulus die nodig is voor effectieve conditionering en de veelvoorkomende fouten die de effectiviteit verminderen. Iemand die nieuw is met deze methode zal moeite hebben met de aandacht voor detail die vereist is voor zowel het protocol als de omgevingsfactoren.Begin met het verzamelen van werksters bij de ingang van de kolonie, terwijl ze pauzeren voordat ze vertrekken of wanneer ze terugkeren van het foerageren. Vang slechts één bij per flacon. Houd de opening van de flacon horizontaal of naar beneden gericht tijdens het vastdraaien van de dop om ontsnapping te voorkomen.Nadat de bijen zijn verzameld, keert u terug naar het laboratorium en plaatst u telkens enkele vials in een ijs-watermengsel. Zodra een bij immobiel is, haalt u de vial onmiddellijk uit het ijs om overblootstelling te voorkomen en plaatst u de bij in een fixatieharnas. Fixeer de bij zodanig dat de dorsale thorax naar het uitgespaarde gedeelte van de houder is gericht en de kop net boven de bovenzijde uitsteekt.Druk de bij voorzichtig aan zodat de monddelen over de rand van de houder steken. Schuif een strip ducttape tussen de kop en het borststuk aan de dorsale zijde en bevestig het vrije uiteinde stevig aan de zijkant van de houder. Zorg ervoor dat de tape van het tuigje glad en strak gespannen is.Er mogen geen merkbare openingen zijn tussen de voorkant van de bijhouder en de tape. Als er openingen zijn, kan de bij mogelijk zijn per bois niet correct uitstrekken of kan hij ontsnappen. Geef de bijen ongeveer 30 minuten de tijd om te herstellen van het vastzetten voordat u begint met voeren.Voed vervolgens, op een plek ver verwijderd van het trainingsgebied, elke bij ongeveer drie tot vier µL 0,5 M sucrose tijdens het interval tussen het voeren en de conditionering. Plaats de bijen in een rustig gedeelte van het laboratorium in een plastic container met natte papieren handdoeken. Tijdens deze periode, enkele minuten voordat de conditionering begint, wordt de motivatie van de bijen om te voeren gestimuleerd door hun antennes aan te raken met een kleine druppel 0,5 M sucroseoplossing.Sta niet toe dat ze tijdens deze test voeden. Als ze reageren door hun psis uit te strekken, zijn ze waarschijnlijk voldoende gemotiveerd om te leren en kunnen ze voor het protocol worden gebruikt. Plaats, wanneer u klaar bent, de glazen geurspuit in een houder van boetseerklei en stel deze zo af dat de opening aan het brede uiteinde direct op de bijen is gericht en 10 E. Het uiteinde van de spuit moet zich één tot twee centimeter van de bij bevinden; plaats de koppeling die de cartridge met de Airstream-slangen en het kleppensysteem verbindt stevig over het smalle uiteinde van de spuit.Plaats aan het begin van elke proef de vastgezetten bij op de pen in de conditioneringsarena, waarbij de antennes direct naar de geurcartridge zijn gericht. Laat de bij 15 tot 25 seconden rusten in de arena voordat de geurstimulus begint, zodat deze kan wennen aan de nieuwe omgeving. Druk op de startknop om het timingsmechanisme voor de geurafgifte te activeren.Monitor de reactie van de bij op de geur na het begin van de stimulus en vóór de presentatie van de ongeconditioneerde stimulus. Laat de bij na elke trial nog 15 tot 25 seconden rusten in het conditioneringsgebied om de initiële geheugenvorming mogelijk te maken. Het te vroeg verplaatsen van de bij na de trial zal de effectiviteit van elke conditionerings-trial aanzienlijk verminderen.Houd de naaldpunt twee tot drie centimeter van de bij vandaan terwijl de geur wordt gepresenteerd om de sucrose toe te dienen. Gebruik de rand van de trainingsarena om te voorkomen dat de spuit schudt, aangezien deze beweging de bij kan afleiden. Tijdens de presentatie van de geurstimulus zal er een voedingssignaal klinken.Zodra het voersignaal klinkt, raak je de antennes lichtjes aan totdat de bij haar proboscis uitstrekt, en voer de bij vervolgens. De timing tussen de presentatie van de geur en de presentatie van de sucrose is kritisch. Idealiter moeten deze twee stimuli elkaar kort overlappen.Als er meer dan enkele seconden verstrijken tussen de presentatie van de geur en de presentatie van de sucrose, zal de prestatie bij de conditionering afnemen. Gebruik na de conditionering niet-versterkte testproeven om vast te stellen hoe goed de bijen de geconditioneerde associatie onthouden. Plaats eerst een videocamera op een statief boven het trainingsgebied en focus de camera op de voorkant van de kop van de bij, zodat de antennes en de proboscis scherp in beeld zijn.Zorg ervoor dat een klein LED-lampje, dat de presentatie van de geurstimulus aangeeft, zich in een gebied achter de bij bevindt waar het zichtbaar is op de video, maar niet voor de bij. Dit maakt het mogelijk om tijdens de analyse het tijdstip van het begin en het einde van de geur blootstelling vast te stellen. Gebruik voor de meest consistente resultaten vers bereide geurcartridges voor de tests zodra alles is opgezet.Begin de test door de geur aan te bieden zoals eerder beschreven. Start de opname 20 seconden voordat de geur wordt aangeboden en neem nog ten minste 20 seconden daarna door. Gebruik na de test videobewerkingssoftware om de respons van elke bij op de stimulusconditie te scoren.Gebruik een binair scoresysteem om de extensierespons van de psis te beoordelen door de responsen als positief of negatief te scoren. Score de respons van de B als positief. Wanneer de B de psis uitstrekt voorbij de lijn die wordt gevormd door de uiteinden van de geopende mandibels te verbinden, score dan alleen een positieve respons wanneer de B zijn prob bois uitstrekt na het begin van de geur, maar vóór het einde ervan. Score de respons van de B als negatief wanneer er tijdens de trial geen extensie van de prob bois plaatsvindt, of als de prob bois wordt uitgestrekt na het einde van de geurstof. Andere parameters kunnen worden verzameld, zoals de latentie tot extensie en het aantal en de totale duur van de extensieresponsen op de conditie.De stimulus werd in opeenvolgende conditioneringstests verhoogd. Reacties op nieuwe testgeuren, die verschilden van de stimulus in koolstofketenlengte en/of de positie van de koolstof-koolstofbinding, waren proportioneel verminderd aan de mate van verschil tussen de conditioneringsstimulus en de nieuwe testgeur. Deze gegevens illustreren de variabiliteit en de succesvolle conditionering tussen nieuwe onderzoekers.De reacties op octaal verschilden afhankelijk van de groep die de test uitvoerde. Tijdens de testproeven riep de geur die als geconditioneerde stimulus werd gebruikt de sterkste reactie op. Wanneer octaal als geconditioneerde stimulus werd gebruikt, was de reactie tijdens de test sterker in vergelijking met methylcycloon, een nieuwe geur.Op dezelfde manier produceerde methylcycloon sterkere reacties wanneer het als geconditioneerde stimulus werd gebruikt. Wanneer achterwaartse koppeling werd toegepast, werd de geconditioneerde respons gereduceerd tot bijna het niveau van de nieuwe geur, wat het belang van een precieze timing voor een succesvolle conditionering illustreert. Na de ontwikkeling van deze techniek werd de weg vrijgemaakt voor onderzoekers in het veld van de neurowetenschappen om de neurale basis van leren en geheugen te verkennen in insecten als modelorganismen, zoals de honingbij.Vergeet niet dat werken met insecten, en in het bijzonder met honingbijen, gevaarlijk kan zijn. Zorg ervoor dat u passende beschermende kleding draagt bij het werken met deze dieren.

a-proboscis-extension-response-protocol-for-investigating-behavioral

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Snuit uitbreiding reactie of PER is een smaak gedrag test die is gebruikt in vliegt als in honingbijen. Toen de snuit contact maakt met een mooie stof, de vlieg breidt zijn slurf om te consumeren van de stof. Oplossingen van verschillende suikers zijn zeer aantrekkelijk voor de vliegen.

Snuit Extension Response (PER) assay in Drosophila

We laten zien hoe je een gedrags-farmacologie methode te implementeren in een appetitief olfactorische conditionering paradigma in de honingbijen (Apis mellifera) door systemische toediening van drugs. Deze methode maakt het mogelijk onderzoek naar de mechanismen die ten grondslag liggen aan leren en geheugen vorming in een eenvoudige en betrouwbare manier.

Behavioural Farmacologie in klassieke conditionering van de Proboscis Extension Response in Honingbijen ( Apis mellifera)

Insect olfactorische systemen bieden unieke mogelijkheden voor het opnemen van geurstof-geïnduceerde responsen in de vorm van electroantennograms (EAG) en enkele sensillum opnames (SSR), die de antwoorden worden samengevat van alle geurstof receptor neuronen (ORNs) gelegen op de antenne en van die ondergebracht in afzonderlijke sensilla, respectievelijk.

Elektrofysiologische metingen van een Moth olfactorisch systeem

Gelijktijdig opnemen van Calcium Signalen van geïdentificeerde neuronen en eetgedrag van de Drosophila melanogaster</em

In dit protocol laten we zien hoe de conditie van de bijen aangewend om tactiele stimuli en de invoering van een 2D motion capture techniek voor het analyseren van de kinematica van gedetailleerde antennaal sampling patroon.

Tactiele Conditioning En Movement Analyse Van antennaal bemonsteringsstrategieën In Honey Bees (<em&gt; Apis mellifera</em&gt; L.)

Een verticale, T-doolhof olfactometer beschreven voor het testen van de gedragsreactie van geleedpotigen. De olfactometer kan de experimentator om keuzes te maken die door proefpersonen te meten wanneer het wordt blootgesteld aan twee potentiële geur velden. Zowel aantrekking tot en afstoting van geurstoffen kan worden gemeten met dit apparaat.

Verticale T-doolhof Keuze Test voor geleedpotigen Reactie op odoranten

Een nieuwe gedragstest wordt beschreven voor het onderzoeken van de kortetermijn smaakgevoelens van de monddelen van vrij bewegende hommels (Bombus terrestris) ten opzichte van voedingsstoffen en gifstoffen in oplossing.

A Novel Behavioral Assay om Smaak reacties van individuele, vrij bewegende Bumble Bees Onderzoek (<em&gt; Bombus terrestris</em&gt;)

Dit manuscript beschrijft meerdere protocollen voor het toedienen van farmacologische middelen aan de bijen, waaronder eenvoudige niet-invasieve methoden voor vrij vliegende bijen, evenals meer invasieve varianten die precies gelokaliseerde behandeling van ingehouden bijen mogelijk.

Neurofarmacologische Manipulatie van ingetogen en vrij vliegende Honingbijen,<em&gt; Apis mellifera</em

Dit protocol worden de stappen beschreven voor het gebruik van de nieuwe software, SwarmSight, voor het bijhouden van de frame-voor-frame van insecten antenne en proboscis posities van conventionele web camera video's met behulp van conventionele computers. De gratis, open-source software verwerkt frames ongeveer 120 keer sneller dan mensen en presteert op beter dan menselijke nauwkeurigheid.

SwarmSight: Real-time Tracking van insecten antenne bewegingen en Proboscis extensie Reflex met een gemeenschappelijke voorbereiding en conventionele Hardware

Dit protocol analyseert navigatie gedrag van Drosophila larve in reactie op de stimulatie van de gelijktijdige optogenetic van haar olfactorische neuronen. Licht van 630 nm golflengte wordt gebruikt voor het activeren van individuele olfactorische neuronen uitdrukken van een rood-verschoven kanaal rodopsine. Larvale verkeer gelijktijdig wordt bijgehouden, digitaal opgenomen en geanalyseerd met behulp van aangepaste-geschreven software.

Bijhouden van Drosophila larvale gedrag in reactie op de stimulatie van de Optogenetic van olfactorische neuronen

Dit artikel presenteert methoden voor optogenetische manipulatie in Drosophila melanogaster, waarbij CsChrimson en GtACR2 worden gebruikt om specifieke neuronen te activeren en tot zwijgen te brengen. Er worden vier experimenten beschreven om optogenetica te gebruiken om thermotactisch en smaakgedrag te onderzoeken, en inzicht te geven in de onderliggende neurale mechanismen die deze processen beheersen.

Gedragstesten voor optogenetische manipulatie van neurale circuits in Drosophila melanogaster

Leer de Proboscis Extension Response-methode voor gedragsbiologisch onderzoek bij honingbijen (Apis mellifera). Dit protocol helpt onderzoekers om leergedrag en de effecten van stressfactoren te bestuderen.

Een Proboscis Extension Response Protocol voor het onderzoeken van Behavioral Plasticiteit in Insecten: Toepassing op Basic, Biomedische en Landbouwkundig Onderzoek (Video) | JoVE Journal

Een Proboscis Extension Response Protocol voor het onderzoeken van Behavioral Plasticiteit in Insecten: Toepassing op Basic, Biomedische en Landbouwkundig Onderzoek

Meer video's verkennen