Name: De Helsinki Rat Microchirurgische Sidewall Aneurysma Model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-10-12T15:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 53 s
Description: Leer microchirurgische technieken voor het creëren van sidewall aneurysma's bij ratten met het Helsinki-model. Deze methode biedt gestandaardiseerde, reproduceerbare resultaten voor neurochirurgisch onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs zijn uitsluitend verantwoordelijk voor het ontwerp en de uitvoering van het gepresenteerde onderzoek. Dr. Marbacher werd ondersteund door een subsidie van de Swiss National Science Foundation (PBSKP3-123454). De auteurs verklaren geen belangenconflicten te hebben.
De bijdragen van de auteurs aan het onderzoek en de voorbereiding van het manuscript omvatten het volgende. Concept en ontwerp: SM, JM, JF. Verwerving van gegevens: SM, EA, JF. Analyse en interpretatie van gegevens: SM, JF, JM. Het schrijven van het artikel: SM, JF, JM. Kritisch herzien van het artikel: JH, MN. Statistische analyse: SM, JF. Toezicht op het onderzoek: JF, JH, MN.

OPMERKING: Man Wistarratten (gemiddelde lichaamsgewicht: 356 ± 44 g; 10-14 weken oud) werden gehuisvest in het dier kamer bij 22-24 ° C en twaalf uur licht / donker cyclus met gratis toegang tot pellet dieet, gewoon kraanwater en kreeg ook humane zorg conform institutionele richtlijnen. De experimenten werden beoordeeld en door het Comite voor Dierenwelzijn aan de Universiteit van Helsinki, Finland goedgekeurd. Opmerking: In de volgende demonstratie onze chirurgische methode is als volgt: Verdoven de rat door gewicht aangepaste subcutane injectie van medetomidine hydrochloride (0,5 mg / kg) en intraperitoneale injectie van ketamine hydrochloride (50 mg / kg). Test voor het ontbreken van een toe-pinch reflex te bevestigen dat de rat volledig verdoofd. Toepassing oogzalf, clip de operatiewond, en reinig de huid met een geschikt desinfectiemiddel, bijvoorbeeld chloorhexidine, hetzij in alcohol of water. Handen te wassen, op beschermende kleding, een hoofdbedekking en het gezichtmaskeren, en steriele chirurgische handschoenen. Hebben een chirurgisch assistent hulp bij het ​​handhaven van aseptische chirurgie voorwaarden en documenteren van de chirurgische kenmerken (zoals vermeld in tabel 1). Bewaken van de diepte van de anesthesie elke 15 minuten tijdens de operatie door het volgen van ademhaling, hartslag, en de reactie op schadelijke stimulatie (teen knijpen test). Subcutane injectie van buprenorfine (0,03 mg / kg) werd gegeven voor postoperatieve analgesie en herhaald als nodig om de 12 uur. 1 hardware, verbruiksartikelen, en positionering <ol><li> Houd de kleine dier operatie kamer rustig, aseptische en de kamertemperatuur bij 23 +/- 3 ° C te houden. Om de experimentele aneurysma operatie de volgende minimale uitrusting nodig is uit te voeren: <ol><li> Gebruik een tafelblad chirurgische microscoop ideaal uitgerust met een assistent reikwijdte en digitale microscoop camera. Gebruik niet-poreuze herbruikbare operationele oppervlak en reinigbare instrument oppervlak naar het laboratorium bank te beschermen. </li><li&gt; Bereid verbruiksartikelen zoals huiddesinfectiemiddelen, fysiologische zoutoplossing, kleinere en grotere gaas swabs en hechtmateriaal, waaronder 9-0 micro-hechtingen, een 5-0 niet-absorbeerbare en 3-0 absorbeerbare hechtdraad. </li><li> Gebruik de volgende standaard chirurgische instrumenten: Chirurgische schaar, pincet weefsel, zacht weefsel spreider of zelf-behoud oprolmechanisme, en twee Mosquito chirurgische klemmen. </li><li> Gebruik een basis microchirurgische instrument set die bestaat uit: Gebogen microneedle houder, een gebogen en twee rechte microforceps, en een rechte of gebogen microscissor. </li><li> Houd de microchirurgische instrumenten in een nier schaal gevuld met steriele zoutoplossing om het instrument niet klevend en schoon houden tijdens de operatie. De nier schotel is opgevuld met rubber mat of een chirurgische handschoen om schade aan de uiteinden van het micro-instrumenten te voorkomen. Zorg ervoor dat alle leveringen zijn steriel en de procedure wordt uitgevoerd met aseptische techniek volgens de huidige aanbevelingen om te overleven de operatie op proefdieren <sup&gt; 8-10. </li><li> Daarnaast gebruikt u een vasculaire clip applicator en drie atraumatische tijdelijke vasculaire klemmen. Het is belangrijk dat de klemmen gebruikt een lage sluitkracht tot letsel bij de zeer dunne wand van de aorta rat. Ook de voorbereiding van een liniaal met een halve millimeter schaal bars, een kleine gekleurde rubberen pad, en een korte stompe naald. </li><li> Plaats de ratten in een liggende positie, immobiliseren zowel voor-en achterpoten met chirurgische tape zonder toepassing van stretch of compressie op de huid, en buigen hun rug met een dikke marker of cauterisatie pen door het onder de lenden van de rug. Het is belangrijk om zoveel lumbale wervelkolom lordose mogelijk om retroperitoneale blootstelling en toegang tot de infrarenale aorta die microchirurgische anastomose vergemakkelijkt verbeteren verkrijgen. Deze positionering wordt aanbevolen voor abdominale aorta aneurysma creëren maar niet noodzakelijk thoracale graft oogsten. </li></ol></li></ol> 2 Graft Oogsten <ol><li> Under narcose, opent de borstholte (start graft ischemie tijd). Breng een schadelijke teen knijpen om te bevestigen dat de rat niet reageert voordat u doorgaat met de volgende stappen. Knip de midventral buikwand identificeer de membraan net boven de lever en snijd het bindweefsel onderaan membraan toegang tot de ribbenkast mogelijk. Met een grote schaar, stompe kant naar beneden, dwars door de ribben net een centimeter naar links en rechts van de ribbenkast middellijn en het openstellen van de borstholte. De longen worden gemobiliseerd naar de rechterkant van het hart. Offer de ratten door overdosering met intracardiale injectie van ketamine hydrochloride.Pulmonary kofferbak, links subclavia, links craniale vena cava, en de azygous ader interfereren met de oogst van de proximale thoracale aorta. </li><li> Caudaal van de prominente aderen is er een goede ingang tot de dissectie van de thoracale aorta met behulp van micro-schaar en microforceps beginnen. </li><li> Traceren van de thoracale aorta back van de dorsale wand van de thorax omhoog om de aortaboog door zachte stompe terugtrekken en dissectie met de Mosquito chirurgisch. </li><li> Klem en knip dan de aderen met een schaar. Handhaving van de klemmen op de aderen en te gebruiken als een oprolmechanisme aan de onderliggende aortaboog bloot. </li><li> Plaats een niet absorbeerbare 6-0 zijden ligatuur net boven de eerste intercostale arterie verlaten van de aorta. </li><li> Snijd de dalende aorta net onder de linker subclavia en vervolgens onder de ligatuur. Bekleding kan worden gedaan om een ​​loodrechte gestandaardiseerde aneurysma geometrie krijgen, of indien nodig, een bepaalde hoek tussen de as van het aneurysma en de aorta krijgen. Meet het transplantaat in de breedte en lengte. OPMERKING: De geoogste grafts kunnen onmiddellijk worden getransplanteerd in ontvanger ratten of verder verwerkt tot decellularisatie van het transplantaat muur te bereiken. Ontcelde grafts kunnen worden opgeslagen bij -4 graden Celsius tot hernieuwde implantatie later (figuur 1). The cellen ontdoen van het aneurysma wand is aangetoond dat het aneurysma te vergroten 11 vatbaar. </li></ol> 3 Graft Decellularisatie <ol style="margin-left: 40px;"><li> Freeze donor grafts in fosfaatgebufferde zoutoplossing bij -4 ° C. </li><li> De volgende dag ontdooien de enten, spoelen met gezuiverd en gedeïoniseerd water bij kamertemperatuur en incubeer gedurende 10 uur bij 37 ° C in 0,1% natriumdodecylsulfaat. </li><li> Tenslotte was de natrium dodecyl sulfaat behandelde transplantaten driemaal met zacht schudden, invriezen in fosfaatgebufferde zoutoplossing, en laten -4 ° C tot gebruik. </li></ol> 4 Aneurysma Creation <ol style="margin-left: 40px;"><li> Dissectie van de abdominale aorta <ol><li> Nadat het dier is verdoofd, knip de vacht uit het operatiegebied en het reinigen van de huid met een geschikt ontsmettingsmiddel. Test voor het ontbreken van een toe-pinch reactie vóór incisie. Start de incisie 1 cm proximaal van de genitaliën in midventral positie (start operatie tijd). Haal voorzichtig de huid van de onderliggende spieren. End dissectie 01:59 centimeter onder het borstbeen. </li><li> Voorzichtig maar stevig trek de onderliggende buikspieren om schade aan de onderliggende organen voorkomen. Verleng de langsdoorsnede langs de linea alba boven de processus xiphoideus en eind in caudale richting ter hoogte van de blaas. </li><li> Voorzichtig druk uitoefenen op de blaas te legen om de toegang tot de retroperitoneale ruimte vergemakkelijken. </li><li> Verplaats de dunne darm en de prominente blindedarm naar rechts of links. Identificeer de dikke darm namelijk de dalende dikke darm aan de linker onderkant van de buikholte. </li><li> Snijd het ligament tussen de dunne darm en colon descendens craniale richting grotere bekendheid van het dorsale lichaamswand mogelijk. Plaats een zelf-behoud oprolmechanisme om de darmen uit elkaar te houden. </li><li> De ideale ligging van end-to-side anastomose aneurysma is gevonden op het niveau tussen de nier en iliolumbar aderen. De abdominale aorta ligt retroperitoneale ingebed in vetweefsel. Tijdens de dissectie bijzondere aandacht besteden aan de gepaarde bijna transparant urineleiders en testiculaire vaten. </li><li> Als de verdere terugtrekking van darmen nodig is, gebruik groter gaas swaps. De lumbale wervelkolom lordose geïnduceerd tijdens de positionering door het plaatsen van een cauterisatie pen of soortgelijk voorwerp onder de onderrug van de rat, vermindert de noodzaak van de darm intrekken. </li><li> De ventrale oppervlak van de dorsale lichaamswand is bedekt met een dunne parietale peritoneum. Als dit eenmaal is geopend, visualiseer de aorta net onder. Bij zorgvuldige scherpe en stompe dissectie van de abdominale aorta van aangrenzende grote aderen grijpen alleen de adventitia om schade aan de vaatwand te voorkomen. </li><li> Zelden, kleine lumbale slagaders ontstaan ​​als segmentaal vaartuig uit het dorsale oppervlak van de abdominale aorta en interfereren met de voorbereiding. Ligatie en snijden van het schip is needed aan retrograde lekt tijdens aneurysma hechten voorkomen. Het gebruik van gebogen micro-tang kan ligatuur plaatsing in de diepte te vergemakkelijken. </li></ol></li><li> End-to-side anastomose <ol><li> Zet een gekleurde rubberen pad onder de abdominale aorta en stofferen het met een kleine gaas wattenstaafje. Losse bindweefsel en adventitia op het niveau van de geplande anastomosisplaats. </li><li> Klem de abdominale aorta distaal van de anastomose, daarna proximale (start aorta klemming tijd). Dit zorgt voor een stevige vulling van het vaartuig en vergemakkelijkt latere arteriotomie. </li><li> Voer de arteriotomie met behulp van rechte of gebogen micro-schaar. Een micro-pincet heeft een zeer klein stukje van de vaatwand een elliptische vorm te snijden. </li><li> Spoel de slagader grondig met een zoutoplossing in beide richtingen met een stomp getipt naald. </li><li> Plaats de eerste twee hechtingen van het end-to-side anastomose aan het proximale en distale uiteinde van de arteriotomie (start anastomose tijd). Vermijd het grijpen van de vaatwand met de micro-pincet waar mogelijk. Zorg ervoor dat elke hechtdraad wordt geplaatst door alle lagen van de vaatwand. </li><li> Voeren hechten hetzij als continu of onderbroken hechtingen. Als onderbroken hechtingen wordt gekozen plaats dan eerst de achterkant negen uur &#39;hechtdraad. Daaropvolgende hechtingen kunnen op afstand van elkaar beginnen naast de eerste hechting. Pak de adventitia zorgvuldig. Vermijd knijpen / grijpen van de intima. </li><li> Wanneer de achterwand is voltooid, controleert u de endoluminal deel van de anastomose voor misplaatste hechtingen. Voer dezelfde procedures in dezelfde volgorde aan de voorzijde. Zorg ervoor dat de eerste van in totaal drie knopen per hechtdraad is stevig, maar niet te strak. </li></ol></li><li> Hemostase en Sluiting <ol><li> Na het einde van kant anastomose is afgerond (eind anastomose tijd), spoel de site met zoutoplossing en verwijder de distale klem eerste om voor terugstroom (eind aorta klemmen en eindtijd graft ischemie time). </li><li> Als duidelijk bloeden plaatsvindt van terugstroming een extra steek nodig zijn (starttijd van hemostase). Bij kleine lekt, bereiken hemostase lichte druk via bloeden plaatse met een klein stukje van een gaas wattenstaafje. </li><li> Verwijder de proximale vasculaire klem, spoel de anastomosisplaats eens, en snijd de resterende uiteinden van de ligatuur aan het aneurysma koepel. </li><li> Bevestig doorgankelijkheid van het aneurysma door waarneming van volume toename van het aneurysma tijdens de piek arteriële puls golf. Beoordelen distale buikslagader doorgankelijkheid door de directe &quot;melken test&quot;. </li><li> Verwijder het plastic en de kleine gaas wattenstaafje eronder. De pulserende bloed werveling binnen de geschapen aneurysma is duidelijk zichtbaar. </li><li> Cover hechtdraad lijnen rond de anastomose met stukjes vetweefsel of Spongostan extra hemostase als kleine lekt nog aanwezig (eindtijd van hemostase). </li><li> Verwijder het zachte weefsel spreider en gaas swabs.Plaats de dunne darm, de blindedarm en de vetmassa opnieuw in de juiste positie. </li><li> Sluit de middellijn buikspieren met behulp van 5-0, 4-0 of 3-0 resorbeerbaar of niet-absorbeerbare hechtingen gevolgd door huid wondsluiting met behulp van continue hechtdraad techniek met 3-0 resorbeerbare polyfilament hechtdraad (einde bedrijfstijd). Opmerking: In getolereerd onze ervaring ratten resorbeerbare hechtingen huid beter dan niet-absorbeerbare monofilament hechtingen. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Bouzeghrane, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+experimental+intracranial+aneurysm+models%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22AJNR+Am+J+Neuroradiol%22%5BJournal%5D)">In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review.</a> AJNR Am J Neuroradiol. 31, 418-423 (2010).</li>
<li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+bilobular%2C+bisaccular%2C+and+broad-neck+microsurgical+aneurysm+formation+in+the+rabbit+bifurcation+model+for+the+study+of+upcoming+endovascular+techniques.+AJNR%5BTitle%5D)+AND+%22American+journal+of+neuroradiology%22%5BJournal%5D)">Complex bilobular, bisaccular, and broad-neck microsurgical aneurysm formation in the rabbit bifurcation model for the study of upcoming endovascular techniques. AJNR.</a> American journal of neuroradiology. 32, 772-777 (2011).</li>
<li>Frosen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+mural+and+bone+marrow-derived+neointimal+cells+to+thrombus+organization+and+wall+remodeling+in+a+microsurgical+murine+saccular+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Contribution of mural and bone marrow-derived neointimal cells to thrombus organization and wall remodeling in a microsurgical murine saccular aneurysm model.</a> Neurosurgery. 58, 936-944 (2006).</li>
<li>Marjamaa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+with+a+deletion+in+the+first+intron+of+the+Col1a1+gene+develop+dissection+and+rupture+of+aorta+in+the+absence+of+aneurysms%3A+high-resolution+magnetic+resonance+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22at+4.7+T%2C+of+the+aorta+and+cerebral+arteries.+Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">Mice with a deletion in the first intron of the Col1a1 gene develop dissection and rupture of aorta in the absence of aneurysms: high-resolution magnetic resonance imaging.</a> at 4.7 T, of the aorta and cerebral arteries. Magn Reson Med. 55, 592-597 (2006).</li>
<li>Oyamada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trans-iliac+rat+aorta+stenting%3A+a+novel+high+throughput+preclinical+stent+model+for+restenosis+and+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+surgical+research%22%5BJournal%5D)">Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis.</a> The Journal of surgical research. , 166-191 (2011).</li>
<li>Lowe, H. C., James, B., Khachigian, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+model+of+in-stent+restenosis%3A+rat+aortic+stenting%5BTitle%5D)+AND+%22Heart%22%5BJournal%5D)">A novel model of in-stent restenosis: rat aortic stenting.</a> Heart. 91, 393-395 (2005).</li>
<li>Marjamaa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occlusion+of+neck+remnant+in+experimental+rat+aneurysms+after+treatment+with+platinum-+or+polyglycolic-polylactic+acid-coated+coils%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Neurol%22%5BJournal%5D)">Occlusion of neck remnant in experimental rat aneurysms after treatment with platinum- or polyglycolic-polylactic acid-coated coils.</a> Surg Neurol. 71, 458-465 (2009).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((with+the+support+of+the+NC3Rs%5BTitle%5D)+AND+%22Aseptic+Technique+in+Rodent+Surgery%22%5BJournal%5D)">with the support of the NC3Rs.</a> Aseptic Technique in Rodent Surgery. , Newcastle University. cited 2014 Oct 3] Available from: http://www.procedureswithcare.org.uk/aseptic-technique-in-rodent-surgery (2014).</li>
<li>Bernal, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+rodent+survival+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+investigative+surgery+%3A+the+official+journal+of+the+Academy+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Guidelines for rodent survival surgery.</a> Journal of investigative surgery : the official journal of the Academy of Surgical Research. 22, 445-451 (2009).</li>
<li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+rodent+surgery+for+the+new%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Principles of rodent surgery for the new.</a> , (2011).</li>
<li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+mural+cells+leads+to+wall+degeneration%2C+aneurysm+growth%2C+and+eventual+rupture+in+a+rat+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model.</a> Stroke. 45, 248-254 (2014).</li>
<li>Frosen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remodeling+of+saccular+cerebral+artery+aneurysm+wall+is+associated+with+rupture%3A+histological+analysis+of+24+unruptured+and+42+ruptured+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Remodeling of saccular cerebral artery aneurysm wall is associated with rupture: histological analysis of 24 unruptured and 42 ruptured cases.</a> Stroke. 35, 2287-2293 (2004).</li>
<li>Frosen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saccular+intracranial+aneurysm%3A+pathology+and+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Saccular intracranial aneurysm: pathology and mechanisms.</a> Acta neuropathologica. , 123-773 (2012).</li>
<li>Ysuda, R., Strother, C. M., Aagaard-Kienitz, B., Pulfer, K., Consigny, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+large+and+giant+bifurcation+aneurysm+model+in+canines%3A+proof+of+feasibility%5BTitle%5D)+AND+%22AJNR+Am+J+Neuroradiol%22%5BJournal%5D)">A large and giant bifurcation aneurysm model in canines: proof of feasibility.</a> AJNR Am J Neuroradiol. 33, 507-512 (2012).</li>
<li>Sherif, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microsurgical+venous+pouch+arterial-bifurcation+aneurysms+in+the+rabbit+model%3A+technical+aspects%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments+%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Microsurgical venous pouch arterial-bifurcation aneurysms in the rabbit model: technical aspects.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2011).</li>
<li>Marjamaa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+TOF+MR+angiography+at+4.7+Tesla+for+volumetric+and+morphologic+evaluation+of+coiled+aneurysm+neck+remnants+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Radiol%22%5BJournal%5D)">High-resolution TOF MR angiography at 4.7 Tesla for volumetric and morphologic evaluation of coiled aneurysm neck remnants in a rat model.</a> Acta Radiol. 52, 340-348 (2011).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen financieel of commercieel belang in een van de drugs, de materialen, of de gebruikte apparatuur.

Vooruitgang in ons begrip van de complexe biologie van saccular cerebrale slagader aneurysma hangt af van de analyse van de epidemiologische en klinische gegevens, aangevuld met laboratoriumonderzoek op monsters van patiënten en experimenteel werk in diermodellen 3,12,13. Kleine dieren zoals ratten zijn inherent aan lagere kosten experimenten en huisvesting en verminderde behoefte aan gespecialiseerde apparatuur. Een gemiddelde totale bedrijfstijd van minder dan 60 minuten voor mi...

Breuk van een saccular cerebrale slagader aneurysma veroorzaakt levensbedreigende bloedingen leiden tot een beroerte, blijvende neurologische schade, of de dood. Breuk kan worden voorkomen door een microchirurgische knippen of endovasculaire aneurysma occlusie. Een medische behandeling groei aneurysma en breuk voorkomen is nog niet vastgesteld. Experimentele modellen voor zakvormige aneurysma nodig zijn biologie van arteriële aneurysma en het testen van nieuwe therapeutische hulpmiddelen en strategieën bestuderen. Voor deze doeleinden zijn verschillende modellen in verschillende soorten ontwikkeld en gepubliceerd 1. Grotere aneurysma modellen varkens, honden, konijnen en worden bij voorkeur gebruikt om endovasculaire innovaties testen in complexe aneurysma architectuur 1,2. Muizen aneurysma modellen, aan de andere kant, zodat het testen van onderzoeksvragen in genetisch gemodificeerde soorten 3,4 en faciliteren verduidelijking van aneurysma biologie op cellulair en moleculairniveau veel beter dan grotere soorten 1. Hoewel endovasculaire trans-carotide en trans-iliacale inrichting implementatie beperkt tot grotere ratten (&gt; 400-500 g) en stents kleiner dan 2,0 mm en 1,5 mm diameter 5,6, stents kunnen worden door directe insertie geplaatst in de abdominale aorta segment die het op experimentele aneurysma. Contract met ratten microchirurgische abdominale aorta aneurysma zijwand model toonde de haalbaarheid testen van nieuwe embolische inrichtingen en het gebruik ervan bij het ​​bestuderen van de moleculaire basis van aneurysma biologie 3,7. Veel van de momenteel gepubliceerde experimentele zakvormige aneurysma modellen vereisen dure apparatuur, speciale omgevingen (bijvoorbeeld steriele operatiekamers met fluoroscopie mogelijkheden), interventionele radiologie competentie of gebruik van dure species. Deze eisen beperken het wijdverbreide gebruik van deze modellen, en leiden tot het gebruik van verschillende modellen in verschillende laboratoria, die makes gegevensvergelijking en meta-analyse moeilijk, zo niet onmogelijk. Een eenvoudige, robuuste en goedkope diermodel is nodig als gestandaardiseerde instrument dat kan worden gebruikt op een gestandaardiseerde wijze verschillende laboratoria zodat de resultaten van verschillende instellingen krijgen. Voor dit doel hebben we de rat aorta zijwand saccular arteriële aneurysma model. Het doel van dit rapport is om stap voor stap de nodige instructies, gegevens presenteren over benodigde apparatuur, en om belangrijke anatomische en chirurgische kenmerken voor een succesvolle microchirurgische creatie van abdominale aorta-aneurysma zijwand bij de rat te bespreken.

<table><tbody><tr><td>Medetomidine</td><td></td><td></td><td>Elk generiek</td></tr><tr><td>Ketamin</td><td></td><td></td><td>Elk generiek</td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td></td><td></td><td>Elk generiek</td></tr><tr><td>Fosfaat gebufferde zoutoplossing</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Natriumdodecylsulfaat (0,1%)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>3-0 resorbeerbare hechtdraad</td><td>Ethicon Inc., USA</td><td><a name="RANGE!C7">VCP824G</a></td><td></td></tr><tr><td>5-0 niet-resorbeerbare hechtdraad</td><td>Ethicon Inc., USA</td><td>8618G</td><td></td></tr><tr><td>6-0 niet-resorbeerbare zijdehechtdraad</td><td>B. Braun, Duitsland</td><td>C0761060</td><td></td></tr><tr><td>9-0 nylon micro hechtdraad</td><td>B. Braun, Duitsland</td><td>G1118471</td><td></td></tr><tr><td>Spongostan</td><td>Ethicon Inc., USA</td><td>MS0002</td><td></td></tr><tr><td>Operatiemicroscoop</td><td>Leica, Duitsland</td><td>M651</td><td></td></tr><tr><td>Digitale microscoopcamera</td><td>Sony, Japan</td><td>SSC-DC58AP</td><td></td></tr><tr><td>Standaard chirurgische instrumenten</td><td>B. Braun, Duitsland</td><td>Meerdere</td><td>Zie protocol 1.4</td></tr><tr><td>Microchirurgische instrumenten</td><td>B. Braun, Duitsland</td><td>Meerdere</td><td>Zie protocol 1.5</td></tr><tr><td>Vasculair clipapparaat</td><td>B. Braun, Duitsland</td><td>FT495T</td><td></td></tr><tr><td>Tijdelijke vasculaire klemmen</td><td>B. Braun, Duitsland</td><td>FT250T</td><td></td></tr><tr><td>Graph Pad Prism statistische software&nbsp;</td><td>GraphPad Software, San Diego, Californië, VS</td><td></td><td>V 6.02 voor Windows</td></tr></tbody></table>

de helsinki rat microchirurgische sidewall aneurysma model

The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

Experimentele saccular aneurysma modellen zijn nodig voor het testen van nieuwe chirurgische en endovasculaire behandeling opties en apparaten voordat ze worden geïntroduceerd in de klinische praktijk. Bovendien zijn experimentele modellen nodig zijn complexe aneurysma biologie leiden tot scheuren van zakvormige aneurysma helderen. Verschillende soorten experimentele modellen voor zakvormige aneurysma&#39;s zijn in verschillende species vastgesteld. Velen van hen, echter, vereisen speciale vaardigheden, dure apparatuur, of speciale omgevingen, waarin de grootschalige toepassing ervan beperkt. Een eenvoudige, robuuste en goedkope diermodel is nodig als gestandaardiseerde instrument dat kan worden gebruikt op een gestandaardiseerde wijze verschillende instellingen. De microchirurgische rat abdominale aorta aneurysma zijwand model combineert de mogelijkheid om zowel nieuwe endovasculaire behandelingsstrategieën en de moleculaire basis van aneurysma biologie in een gestandaardiseerd en goedkoop te bestuderenwijze. Gestandaardiseerde transplantaten door vorm, afmeting en geometrie worden geoogst uit een donor ratten thoracale aorta en vervolgens getransplanteerd op een syngene ontvanger rat. De aneurysma worden gehecht end-to-side met doorlopende of onderbroken 9-0 nylon hechtingen de infrarenale abdominale aorta. We presenteren stap-voor-stap de nodige instructies, informatie over de benodigde apparatuur, en bespreken belangrijke anatomische en chirurgische informatie voor een succesvolle microchirurgische oprichting van een abdominaal aorta-aneurysma zijwand bij de rat.

Een pilot-serie bestaat uit 14 ratten. Vervolgens wordt een totaal van 84 dieren werden gebruikt volgens de gepresenteerde protocol voor verschillende onderzoeksprojecten tussen maart en september 2012 Extra 29 dieren dienden als donoren voor arteriële saccular enten. De overige experimenten werden uitgevoerd middels voorbehandeld grafts geoogst en opgeslagen uit eerdere experimenten met ratten van hetzelfde geslacht, soort, gewicht en leeftijd. Lichaamsgewicht, algehele bewerkingstijd aorta...

Microchirurgische zijwand-aneurysmata bij ratten worden gecreëerd door end-to-side anastomose van een aorta-transplantaat naar de abdominale aorta. We presenteren stapsgewijze instructies en bespreken anatomische en chirurgische details voor het succesvol creëren van experimentele zakvormige aneurysmata.

De Helsinki Rat Microchirurgische Sidewall Aneurysma Model

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced ...

Het Helsinki-model voor microsurgische zijwandaneurysma's bij ratten. De volgende video geeft gedetailleerde beschrijvingen van de belangrijkste kenmerken van het microsurgische zijwandaneurysmamodel voor ratten, ontwikkeld aan de Afdeling Neurochirurgie van het Universitair Ziekenhuis in Helsinki, Finland. Wij presenteren stapsgewijze procedurele instructies, informatie over de benodigde apparatuur en bespreken belangrijke anatomische en chirurgische details voor het succesvol microsurgisch creëren van een zijwandaneurysma bij de rat, inclusief hardware en verbruiksartikelen.De operatiekamer voor kleine dieren moet stil en aseptisch worden gehouden, en de kamertemperatuur moet worden gehandhaafd op 23 ± 3 °C. De volgende minimale apparatuur is nodig om de experimentele aneurysma-operatie uit te voeren. Een tafelmicrosurgische microscoop is bij voorkeur uitgerust met een assistentkijker en een digitale microscoopcamera.Een niet-poreus, herbruikbaar operatieoppervlak en een reinigbaar instrumentenoppervlak worden gebruikt om de laboratoriumbank te beschermen. Verbruiksartikelen zoals huiddesinfectantia, fysiologische cellijnen, zowel kleine als grote, worden klaargelegd. Er worden gaasjes en hechtmateriaal voorbereid, waaronder 9-0 microhechtdraden, 5-0 niet-absorbeerbare hechtdraden en 3-0 absorbeerbare hechtdraden.De volgende standaard chirurgische instrumenten zijn nodig: chirurgische scharen, weefselpincetten, een weefselspreider of een zelfhoudende retractor, en twee mosquito-chirurgische klemmen. De basisset voor microchirurgie omvat een gebogen micronaalhouder, één gebogen en twee rechte micropincetten en een rechte of gebogen microschaar. Bewaar de microchirurgische instrumenten in een nierbekken gevuld met steriele cellijn om de instrumenten schoon en vrij van aanbakking te houden.Tijdens de operatie. De nierschaal wordt belegd met een rubberen mat of een chirurgische handschoen om beschadiging van de punten van de micro-instrumenten te voorkomen. Daarnaast zijn een vasculair clipapplicator en drie tijdelijke vasculaire atraumatische klemmen nodig.Het is belangrijk dat de gebruikte klemmen een lage sluitkracht hebben om beschadiging van de zeer dunne wand van de aorta van de rat te voorkomen. We bereiden daarnaast een liniaal voor met schaalverdelingen van een halve millimeter, een klein gekleurd rubberen kussentje en een korte stompe naald. De rat wordt onder narcose gebracht op basis van het lichaamsgewicht via een subcutane injectie van mebeverine hydrochloride, 0,4 milligram per kilogram en een intraperitoneale injectie van ketamine hydrochloride, 60 milligram per kilogram. Test op de afwezigheid van de knijpreflex om te bevestigen dat de rat volledig genarcoseerd is vóór de huidincisie. Bewaak de diepte van de anesthesie elke 15 minuten tijdens de operatie door de ademhalingsfrequentie, hartslag en reactie op nociceptieve stimulatie te volgen.Voor postoperatieve analgesie wordt een subcutane injectie van buprenorfine 0,03 milligram per kilogram toegediend en indien nodig herhaald. Elke 12 uur vindt de oogst van het graft uit de aorta van de rat plaats. Plaats de rat in rugligging en immobiliseer zowel de voor- als achterpoten met chirurgische tape, zonder de huid uit te rekken of samen te persen.Pas een schadelijke stimulus toe door twee keer te knijpen om te bevestigen dat de rat volledig niet meer reageert voordat de borstholte wordt geopend. Direct na het openen van de borstholte wordt de rat geëuthanaseerd door een overdosis ketaminehydrochloride via een intracardiale injectie, en worden de longen naar de rechterkant van het hart verschoven. De truncus pulmonalis, de linker vena subclavia, de linker vena cranialis, de CVA en de ATU-ader hinderen de oogst van de proximale aortae thoracicae vanwege de prominente aderen.Er is een geschikt instappunt om de dissectie van de descenderende thoracische aorta te starten met behulp van microschaar en micro-pincet. Volg de thoracische aorta vanaf de dorsale wand van de thorax omhoog naar de aortaboog door middel van voorzichtig botte retractie en dissectie met de mosquito-chirurgische klem; de wandslierten worden afgeklemd en vervolgens met een schaar doorgesneden. De klemmen blijven op de wandslierten geplaatst en worden als retractor gebruikt om de onderliggende aortaboog bloot te leggen.Een ligatuur wordt geplaatst vlak boven de eerste intercostale arterie die de aorta verlaat. De aorta descendens wordt vervolgens doorgesneden net onder de arteria subclavia sinistra en daarna onder de ligatuur. Er kan worden gedraaid om de loodrechte gestandaardiseerde aneurysmageometrie te verkrijgen, of indien nodig om een specifieke hoek tussen de as van het aneurysma en de aorta te realiseren.De breedte en lengte van het transplantaat worden gemeten. Geoogste transplantaten kunnen direct worden getransplanteerd in recipienten-ratten of verder worden verwerkt om decellularisatie van de transplantaatwand te bereiken. Gedecellulariseerde transplantaten kunnen worden bewaard bij minus vier graden Celsius tot aan de reimplantatie.Op een latere datum. Er is aangetoond dat de decellularisatie van de aneurismawand het aneurisme vatbaar maakt voor vergroting bij de creatie van het aneurisme. Nadat het dier is geanestheseerd, wordt de vacht op de operatielocatie geschoren en de huid gereinigd met een geschikt desinfectiemiddel; plaats de rat vervolgens in rugligging. Immobiliseer zowel de voor- als achterpoten met chirurgische tape zonder rek of compressie op de huid uit te oefenen, en buig de rug door een dikke marker of viltstift onder de lumbale regio van de rug te plaatsen. Het is belangrijk om zoveel mogelijk lumbale lordose te verkrijgen om de retroperitoneale blootstelling en de toegang tot de infrarenale aorta te verbeteren, wat de microsurgische anastomose vergemakkelijkt. Test op de afwezigheid van de knijpreflex om te bevestigen dat de rat volledig geanestheseerd is vóór de huidincisie.Na een middenlijnincisie worden de dunne darm en het prominente omentum naar rechts of links verschoven. Het ligament tussen de dunne darm en het descenderende colon wordt in craniale richting doorgesneden. Om een bredere blootstelling van de dorsale lichaamswand mogelijk te maken, wordt een zelfhoudende retractor geplaatst om de darmen uit elkaar te houden.De ideale locatie voor de anastomose van het endovascularisatie-aneurysma bevindt zich op het niveau tussen de nier- en iliolumbale venen. De abdominale aorta bevindt zich tijdens de dissectie retroperitoneaal ingebed in vetweefsel. Bijzondere aandacht moet worden besteed aan de gepaarde, bijna transparante ureters en testiculaire vaten.Een verdere retractie van de darmen is noodzakelijk. Grotere ghost-wattenstokjes kunnen worden gebruikt. Het ventrale oppervlak van de dorsale lichaamswand is bedekt met een dun peritonaal peritoneum.Zodra dit is geopend, kan de aorta worden gevisualiseerd door middel van zorgvuldige scherpe en botte dissectie van de abdominale aorta. Om beschadiging van de vaatwand te voorkomen, mag alleen de adventitia worden gegrepen. Er ontspringen frequent kleine lumbale arteriën als segmentale vaten uit het dorsale oppervlak van de abdominale aorta, die de preparatie kunnen bemoeilijken.Het gebruik van gebogen micropincetten kan het ligeren vergemakkelijken. Plaatsing in de diepte bij het ligeren en doorsnijden van het vat is nodig om retrograde sijpelen te voorkomen. Tijdens het hechten van het aneurysma wordt een gekleurd rubberen kussentje onder de abdominale aorta geplaatst en opgevuld met een klein gaasje; het losse bindweefsel en de AIA worden verwijderd op het niveau van de geplande anastomoseplaats.De abdominale aorta wordt eerst distaal van de anastomose afgeklemd en daarna proximaal. Dit zorgt voor een stevige vulling van het vat en vergemakkelijkt de daaropvolgende arteriotomie. De arteriotomie wordt uitgevoerd met gebruik van rechte of gebogen microscharen.Een micropincet houdt een klein stukje van de vaatwand vast om een elliptische vorm uit te snijden. De arterie wordt grondig in beide richtingen gespoeld met de cellijn met behulp van een stompe naald. De eerste twee hechtingen van deze end-naar-zij-anastomose worden geplaatst aan het proximale en distale uiteinde van de arteriotomie.Op dat punt wordt het hechten uitgevoerd met behulp van doorlopende of onderbroken hechtingen. Indien er wordt gekozen voor onderbroken hechtingen, wordt eerst de hechting op de achterzijde op negen uur geplaatst. Het vastgrijpen van de vaatwand met de micro-pincet dient te worden vermeden.Zorg er, indien mogelijk, voor dat elke hechting door alle lagen van de wand wordt geplaatst. Vervolghechtingen kunnen met tussenpozen worden geplaatst, beginnend naast de allereerste hechtingen van de respectievelijke wanden. De AIA wordt voorzichtig vastgegrepen, waarbij wordt vermeden de intima samen te drukken of vast te grijpen.Wanneer de achterwand is voltooid, wordt het endoluminale gedeelte van de anastomose gecontroleerd. Bij verkeerd geplaatste hechtingen worden dezelfde procedures in dezelfde volgorde nu uitgevoerd aan de voorzijde van de anastomose, in het bijzonder de eerste van in totaal drie knopen. De procedure moet stevig worden uitgevoerd, maar niet te strak.Nadat de endocytose is voltooid, wordt de plek gespoeld met cellijn en wordt eerst de distale klem verwijderd om terugstroom mogelijk te maken. Indien er duidelijke bloedingen optreden door de terugstroom, kan een extra hechting nodig zijn. In geval van gering sijpelen kan hemostase worden bereikt door zachte druk uit te oefenen op de bloedende zijde.Gebruik een klein stukje ghost swap. De proximale vaatklem wordt vervolgens verwijderd. De anastomosezijde wordt nogmaals gespoeld en de resterende uiteinden van de ligatuur bij de aneurysmadome worden afgeknipt. De doorgankelijkheid van de distale abdominale arterie wordt beoordeeld via de directe milking-test.Het plastic vel en het kleine ghost-wattenstaafje eronder worden verwijderd. Het pulserende bloed binnen het gecreëerde aneurysma is duidelijk zichtbaar. Hechtlijnen rond de anastomose kunnen worden bedekt met kleine stukjes vetweefsel of pongo stand voor extra hemostase.Als er nog steeds sprake is van lichte nabloeding, worden de weke delen spreader en de gaasjes verwijderd. Concluderend is het Helsinki-rattenaneurysmamodel een snelle, betaalbare en consistente methode om experimentele aneurysma's te creëren die gestandaardiseerd zijn wat betreft grootte, vorm en geometrische configuratie van het aneurysma ten opzichte van de moederarterie.

the-helsinki-rat-microsurgical-sidewall-aneurysm-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Een geoptimaliseerde techniek voor de microchirurgische creatie van arteriële bifurcatie aneurysma's na te bootsen bifurcatie menselijke cerebrale aneurysma's is beschreven. Een veneuze zakje wordt gehecht in een kunstmatig gecreëerde echte splitsing van beide gemeenschappelijke halsslagaders. Vergemakkelijkte microchirurgische technieken en agressief postoperatieve antistolling en analgesie leiden tot een minimale morbiditeit en hoge aneurysma doorgankelijkheid tarieven.

Microchirurgische Veneuze Pouch Arteriële-splitsing Aneurysma&#39;s in het Rabbit Model: technische aspecten

Histologische en biochemische veranderingen na aneurysma endograft uitsluiting zijn nog onduidelijk. We beschrijven een nieuw model van endograft implantatie op een muizen aneurysma. Door trombus analyse met en zonder hardnekkig circulerende bloed-interface en nieuwe endovasculaire biomaterialen evaluatie, zal dit model helpen om beter te begrijpen endovasculaire aneurysma uitsluiting pathobiology.

Een nieuw muizenmodel van endovasculaire aortaaneurismareparatie

Het onderstaande beschreven rattenmodel voor carotidballetjebeschadiging stelt onderzoekers in staat om geneesmiddelen of therapieën te evalueren die door letsels veroorzaakte arteriële hyperplasie tegengaan. Gedetailleerde pre-operatieve voorbereiding, chirurgische procedure en postoperatieve zorg voor het dier worden beschreven.

Een Rat Carotis Balloon Injury Model te testen Anti-vasculaire remodeling Therapeutics

Polyurethaan katheter inbrengen in de aorta lumen en hechtdraad Afbinding van de aorta induceren chronische hypoxie als gevolg van hypoperfusie van de adventitial Wasa vasorum. Dit artikel beschrijft een roman diermodel van abdominale aorta aneurysma (AAA) met eigenschappen die vergelijkbaar zijn met die van AAA bij de mens.

Oprichting van een knaagdier Model van abdominale aorta aneurysma door het blokkeren van Adventitial Vasa Vasorum perfusie

Reproducable experimentele dierlijke modellen nodig zijn voor het testen van materialen van de roman embolisatie kan leiden, die zijn ontworpen voor de behandeling van de endovasculair occlusie van intracraniële aneurysmata (IA). De huidige studie is gericht op het ontwikkelen van een veilige en gestandaardiseerde chirurgische techniek voor stent bijgestaan embolisatie kan leiden van saccular aneurysma in een diermodel van de rat.

Biologisch afbreekbaar Magnesium Stent behandelingvan Saccular aneurysma in een Rat Model - introductie van de chirurgische techniek

Het ontwikkelen en testen van endovasculaire apparaten voor intracraniale aneurysmabehandeling is nog steeds van groot belang. De meeste aneurysmamodellen die tegenwoordig worden gebruikt, missen de belangrijke kenmerken van een arteriële gedegenereerde wand of de hemodynamiek van een echte bifurcatie. Daarom wilden we een nieuw arteriële buidelbifurcatiemodel bij konijnen ontwerpen.

Arteriële Pouch Microchirurgische Bifurcatie Aneurysma Model in het Konijn

Hier stellen we een nieuw Sprague-Dawley (SD) rattenmodel van superieure sagittale sinus (SSS) trombose vast via een draademboliemethode, en de stabiliteit en betrouwbaarheid van het model werden geverifieerd.<br...

Vaststelling van een rattenmodel van superieure sagittale-sinus occlusie via een draad-emboliemethode

We voerden een éénpunts, lipofiele cel-tracer-injectie uit om endotheelcellen te volgen, gevolgd door een arteriotomie en hechting van zijwandaneurysma's op de abdominale rataorta. Neointima-vorming leek afhankelijk van de bovenliggende slagader in gedecellulariseerde aneurysmata en werd bevorderd door de rekrutering uit aneurysmawandcellen in vitale celrijke wanden.

Een celtraceringsinjectie gebruiken om de oorsprong van neointimavormende cellen in een sacculair zijwandmodel van een rat te onderzoeken

Hier beschrijven we de techniek voor het microchirurgisch maken van gigantische bifurcatie-aneurysma's bij konijnen voor de evaluatie van endovasculaire apparaten.

Microchirurgische creatie van gigantische bifurcatie-aneurysma's bij konijnen voor de evaluatie van endovasculaire apparaten

Het huidige protocol beschrijft een gestandaardiseerde chirurgische methode voor de inductie van halsslagaderaneurysma's in een muizenmodel door middel van een enkele chirurgische ingreep.

Een muizenmodel van de vorming van een aneurysma van de halsslagader

Leer microchirurgische technieken voor het creëren van sidewall aneurysma's bij ratten met het Helsinki-model. Deze methode biedt gestandaardiseerde, reproduceerbare resultaten voor neurochirurgisch onderzoek.

De Helsinki Rat Microchirurgische Sidewall Aneurysma Model

Meer video's verkennen