Name: Shock Wave Toepassing op celculturen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-04-08T18:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 39 s
Description: Leer een betrouwbaar in vitro model voor schokgolftoepassing op celculturen met behulp van een verwarmd waterbad en ultrasone gel. Deze methode minimaliseert fysische afleidingen en verbetert de reproduceerbaarheid van resultaten in regeneratief onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

De auteurs danken Reiner Schultheiss en Wolfgang Schaden voor hun inspiratie voor dit model. We danken ook Christian Dorfmüller voor zijn hele tijd enorme inspanningen om ons onderzoek te ondersteunen. Veel dank aan Robert Göschl en Hans Hohenegger voor een zorgvuldige technische realisatie van onze ideeën!

Ethische toestemming Na het verkrijgen van informed consent van de patiënten, werden navelstrengen verkregen van een keizersnede op de afdeling Gynaecologie voor isolatie van humane navelstreng endotheel cellen (HUVEC). Toestemming werd gegeven van de ethische commissie van de Medische Universiteit van Innsbruck (nr. UN4435). 1. Bereid de IVSWT Water Bath <ol><li> Bereid 3.5 L van leidingwater in een geschikte tank. Water moet worden verwarmd tot 37 ° C (zie Protocol nr. 6). </li><li> Vul het water in het waterbad totdat het waterpeil ongeveer 3 cm onder de rand. Erg om volledig te bedekken het membraan met water. Dit zal ongeveer de voorbereide 3,5 L. vereisen </li><li> Sluit de temperatuursensor op de voeding. </li><li> Plaats de sensor in de bedoelde bevestiging op de achterwand van het waterbad. </li><li> Sluit verwarming tot voeding van de temperatuursensor. Doe dit niet zonderwater in het bad als de verwarming zou het plexiglas smelten. </li><li> Wacht tot het water een stabiele temperatuur van 37 ° C heeft bereikt Roer het water regelmatig met een soort stok om een ​​constante temperatuur in het waterbad te garanderen. </li></ol> 2. Bereid Cellen en cultuur Kolven <ol><li> Zaadcellen overnacht op gewenste dichtheid in T25 kweekkolven of kweek van de cellen in de kolven direct tot zij de gewenste samenvloeiing bereikt. </li><li> Voor het experiment, lijnt de kolven verticaal. </li><li> Vul de cultuur kolven met kweekmedium tot vlak onder hun nek. Vul niet te veel medium in de kolven als medium in contact met de nek of de afsluitdop zou besmet raken. </li><li> Schroef de kolven met stevige kappen zonder filters om besmetting te voorkomen van water. Let erop dat het water in het bad en het bad zelf zijn niet steriel. </li><li> Sluit de doppen met Parafilm vóór het inbrengen in het waterbad. </li> &lt;li&gt; Fix verzegeld kweekflessen in de meegeleverde voet. </li><li> Steek vaste kolf in het waterbad. Zorg ervoor dat het midden van de celkweek kolf ligt op dezelfde hoogte als het centrum van het membraan schokgolf applicator. Een lijn aan de zijkant van het bad begeleidt u. </li></ol> 3. Definieer Behandeling Parameters <ol><li> Definieer afstand tussen schokgolf bron en voorbeeld. Identificeer perfecte behandeling parameters uitvoering van de parameter conclusie proefproject zoals beschreven in figuur 6. </li><li> Kies de juiste behandeling parameters (energie fluxdichtheid, frequentie) op de schokgolf apparaat. Nogmaals, zie figuur 6. </li></ol> 4. Shock Wave Toepassing <ol><li> Zet tal hoeveelheden commercieel verkrijgbare ultrasone transmissie gel op de schokgolf applicator en op het membraan van het waterbad. Dit is om koppeling te verzekeren. Geen lucht of luchtbellen moet tussen de applicator en het membraan alshet zou schokgolven absorberen. </li><li> Sluit applicator aan het membraan en houd het stabiel in het midden van het membraan. Zorg ervoor dat het horizontaal is uitgelijnd. </li><li> Zorg ervoor dat de juiste verticale positie van de sonde in het waterbad is in lijn met de aangegeven markering aan de zijkant van het bad. </li><li> Houd centra van de applicator en de kolf stabiel in een horizontale lijn. </li><li> Activeer de schokgolf apparaat en de impulsen passen terwijl de kolf en de applicator in een stabiele positie tijdens de hele procedure. </li></ol> 5. Na behandeling <ol><li> Neem de kolf uit het waterbad. </li><li> Droog het met gewone papieren handdoeken. </li><li> Veeg de kolf nauwkeurig met desinfecterende middelen. </li><li> Verwijder Parafilm afdichting en cap. </li><li> Pipetteer het medium in de kolven in centrifugale buizen. </li><li> Centrifugeren gepast. Centrifugeren parameters afhankelijk van het gebruikte celtype, <em&gt; Bijvoorbeeld. HUVEC voor gebruik 290 g bij kamertemperatuur. </li><li> 5 ml celcultuurmedium Voeg aan de kolf. Resuspendeer de celpellet gecentrifugeerd met 2 ml celkweekmedium. Pipetteer de suspensie in de kolf. Zo hoeft cel fragmenten of cellen die tijdens de behandeling kunnen zijn losgemaakt niet verdwalen. </li></ol> Valkuilen <ol><li> Bereiding en behandeling moet onder steriele omstandigheden in laminaire stroming geschieden dat verontreiniging van de celkweek te voorkomen. </li><li> Goede celkweek praktijk wordt aanbevolen om verontreiniging van de probes voorkomen. In het bijzonder desinfectie van de buitenkant van de kolven wordt sterk aanbevolen alvorens ze terug naar de incubator. Het waterbad, evenals het water in, is niet steriel! </li><li> Gebruik de kachel niet aan op de stroomvoorziening, tenzij het water bad wordt gevuld met water om schade aan het plexiglas gebouwd bad te voorkomen. </li><li> Gebruik royale hoeveelheden ultrasone gel op de schokgolf applicator om een ​​goede koppeling en golfvoortplanting garanderen in het bad. Lucht en zelfs kleine luchtbelletjes doen absorberen schokgolven! </li><li> Positie van de sondes in het waterbad met betrekking tot de applicator op de behandeling van het gehele groei te garanderen. </li><li> Niet probes dunk te diep in het water om besmetting te voorkomen. </li></ol>

<ol><li>Haupt, G., Haupt, A., Ekkernkamp, A., Gerety, B., Chvapil, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+shock+waves+on+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Influence of shock waves on fracture healing.</a> Urology. 39, 529-532 (1992).</li>
<li>Schaden, W., Fischer, A., Sailler, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+shock+wave+therapy+of+nonunion+or+delayed+osseous+union%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Orthop.+Relat.+Res%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal shock wave therapy of nonunion or delayed osseous union.</a> Clin. Orthop. Relat. Res. 387, 90-94 (2001).</li>
<li>Schaden, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shock+wave+therapy+for+acute+and+chronic+soft+tissue+wounds%3A+a+feasibility+study%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">Shock wave therapy for acute and chronic soft tissue wounds: a feasibility study.</a> J. Surg. Res. 143, 1-12 (2007).</li>
<li>Tepeköylü, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shock+wave+treatment+induces+angiogenesis+and+mobilizes+endogenous+CD31%2FCD34-positive+endothelial+cells+in+a+hindlimb+ischemia+model%3A+Implications+for+angiogenesis+and+vasculogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Thorac.+Cardiovasc.+Surg%22%5BJournal%5D)">Shock wave treatment induces angiogenesis and mobilizes endogenous CD31/CD34-positive endothelial cells in a hindlimb ischemia model: Implications for angiogenesis and vasculogenesis.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 146, 971-978 (2013).</li>
<li>Nishida, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+cardiac+shock+wave+therapy+markedly+ameliorates+ischemia-induced+myocardial+dysfunction+in+pigs+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal cardiac shock wave therapy markedly ameliorates ischemia-induced myocardial dysfunction in pigs in vivo.</a> Circulation. 110, 3055-3061 (2004).</li>
<li>Fukumoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+cardiac+shock+wave+therapy+ameliorates+myocardial+ischemia+in+patients+with+severe+coronary+artery+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Coron.+Artery+Dis%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal cardiac shock wave therapy ameliorates myocardial ischemia in patients with severe coronary artery disease.</a> Coron. Artery Dis. 17, 63-70 (2006).</li>
<li>Gotte, G., Amelio, E., Russo, S., Marlinghaus, E., Musci, G., Suzuki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-time+non-enzymatic+nitric+oxide+synthesis+from+L-arginine+and+hydrogen+peroxide+induced+by+shock+waves+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+Lett%22%5BJournal%5D)">Short-time non-enzymatic nitric oxide synthesis from L-arginine and hydrogen peroxide induced by shock waves treatment.</a> FEBS Lett. 520, 153-155 (2002).</li>
<li>Wang, F. S., Wang, C. J., Huang, H. J., Chung, H., Chen, R. F., Yang, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+shock+wave+mediates+membrane+hyperpolarization+and+Ras+activation+for+osteogenesis+in+human+bone+marrow+stromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem.+Biophys.+Res.+Commun%22%5BJournal%5D)">Physical shock wave mediates membrane hyperpolarization and Ras activation for osteogenesis in human bone marrow stromal cells.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 287, 648-655 (2001).</li>
<li>Mittermayr, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+shock+wave+therapy+%28ESWT%29+minimizes+ischemic+tissue+necrosis+irrespective+of+application+time+and+promotes+tissue+revascularization+by+stimulating+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Surg%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal shock wave therapy (ESWT) minimizes ischemic tissue necrosis irrespective of application time and promotes tissue revascularization by stimulating angiogenesis.</a> Ann. Surg. 253, 1024-1032 (2011).</li>
<li>Baker, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+mouse+aortic+ring+assay+to+study+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Use of the mouse aortic ring assay to study angiogenesis.</a> Nat. Protoc. 22, 89-104 (2011).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

De betekenis van het voorgestelde model voor in vitro drukgolfbehandeling is het feit dat golven kunnen voortplanten na het passeren van de celkweek in tegenstelling tot bestaande modellen. Daardoor kunnen storende fysische effecten zoals trekkrachten worden vermeden. Het model lijkt meer op in vivo omstandigheden dan die door anderen toepassen golven om hun celkweekkolven direct. Een bijkomend voordeel is de mogelijkheid van het variëren van de afstand tussen schokgolf bro...

Schokgolven zijn geluidsdrukgolven die voortvloeien uit een plotseling vrijkomen van energie, bijvoorbeeld. als donder bij bliksem. In de geneeskunde schokgolven worden al meer dan 30 jaar Lithotripsie de desintegratie van nierstenen. Aangezien de incidentele vaststelling van iliacale bot verdikking bij Lithotripsie patiënten in de vroege jaren 1980, werd eerste studies uitgevoerd om het effect van drukgolfbehandeling (SWT) op botgenezing 1 evalueren. Indrukwekkende resultaten van een betere genezing van de lange bot nonunions kon worden waargenomen 2. Vervolgens werden aanwijzingen uitgebreid zacht weefsel wonden 3. Fundamenteel onderzoek bevindingen bleek dat schokgolven veroorzaken een biologische prikkel om het te onderzoeken weefsel zonder eventuele gevolgschade. Vrijgave van angiogene groeifactoren (bijvoorbeeld VEGF, PlGF, FGF) wordt gevolgd door aanzienlijke angiogenese. Dit leidde tot een verdere uitbreiding van indicaties naar ischemische pathologieën. Onze groep en anderen toonden de positieve effect van SWT op ischemische hartziekte in diermodellen als in klinische studies 4-6. Echter, het exacte mechanisme van hoe de fysieke prikkel van SWT wordt vertaald in een biologisch signaal (mechanotransduction) blijft grotendeels onbekend. Omdat de belangstelling voor SWT uit verschillende gebieden van de geneeskunde neemt voortdurend toe, is de zoektocht naar het mechanisme steeds meer en intenser. Daarom worden in vitro schokgolf experimenten steeds belangrijker. Naast vermindering van dierproeven en kosteneffectiviteit, kan het grootste voordeel van in vitro schokgolf behandeling (IVSWT) de mogelijkheid van het bestuderen van de specifieke werking van een bepaald type cel. In schokgolf gemedieerde weefselregeneratie waarschijnlijk alle cellen van het behandelde weefsel betrokken zijn, zelfs systemische effecten besproken. Toch heeft elk type cel speelt een specifieke rol en heeft een eigen intrinsieke functie. IVSWT stelt ons in staat om deze specifieke functie een te detecterennd daardoor geeft ons een beter begrip van de complexe onderliggende processen. Kennis van vandaag over effecten schokgolf op celculturen omvat de toename van proliferatie, wijziging van celmembraanreceptoren, verhoging en versnelling van celdifferentiatie, afgifte van groeifactoren en chemo-lokstoffen evenals verhoogde cel migratie 7-9. Storende fysieke effecten meeste in vitro modellen Verschillende methoden voor het aanbrengen schokgolven op celkweken beschreven. Dit feit leidt tot het probleem dat het zeer moeilijk resultaten te vergelijken, zoals lichamelijke toestand van cel stimulatie heel verschillend tussen deze modellen. In het algemeen, alle bestaande modellen richten op hoe schokgolven beste toepassen op cellen. Echter, deze vraag blijft: Wat gebeurt er met de golven na het passeren van de celkweek? Het grootste probleem is dat het verschil in de akoestischeimpedantie van het celkweekmedium en de omgevingslucht is zo hoog, dat meer dan 99% van schokgolven gereflecteerd Figuur 1. Door het verschil in akoestische impedantie van de twee media de golven niet alleen terug, maar een faseverschuiving van 180 ° komt die een sterke trekkrachten aan de cellen Figuur 2. Akoestische impedantie wordt gedefinieerd als het product van de dichtheid van een materiaal en de geluidssnelheid Z = ρ x c. Voor water de akoestische impedantie is ZWater = 1440000 Ns / m 3, voor de lucht is het slechts 420 Ns / m 3. Het grote verschil tussen deze twee waarden resulteert in reflectie en faseverschuiving van schokgolven. De faseverschuiving blijkt een positieve druk puls in een trek-golf. Hoewel deze trekkracht niet schadelijk voor de cellen, het interfereert met het idee nabootsen in vivo schokgolf effecten in vitro. In vivo dezetrekkrachten nauwelijks optreden als gevolg van grote lichaamsstructuren. Bovendien kan de achterkant loopt golven zelfs verstoren de inkomende Ones. Dit kan storingen veroorzaken. Twee soorten storingen bekend. Constructieve interferentie betekent dat beide golven worden toegevoegd hetgeen resulteert in een verdubbeling amplitude Figuur 3. Destructieve interferentie treedt op als golven ontmoeten lijnrecht tegenover elkaar. Het veroorzaakt afschaffing van golven (Figuur 3). Daarom IVSWT moet een model dat schokgolven kunnen voortplanten na het passeren van de celkweek. IVSWT waterbad Overwegingen naar aanleiding van de bovengenoemde bezwaren leiden ons naar een waterbad voor het vermijden van het ontwerp van de beschreven problemen Figuur 4. Kortom, het bestaat uit een plexiglas gebouwde container met een membraan om elk soort schokgolf applicator verbinden. Voor koppeling tussen dit membraan en de applicator ultrageluidtransmissie geIk moet worden gebruikt. Het waterbad is gevuld met ontgast water cavitatie die zou optreden als gas werd soluted in het water te vermijden. Een kachel bij de bodem met een temperatuursensor verbonden met een regeleenheid stelt om gedurende imitatie van in vivo omstandigheden reguleren en celculturen vermijden tijdens de procedure afkoelen. De temperatuur kan stabiel worden gehouden op 37 graden Celsius als het wordt gedaan in een incubator. Een houder voor de cel monsters zorgt voor het onderdompelen van elke vorm van cultuur fles of buis. Daarbij moet het monster vaartuig volledig worden gevuld met kweekmedium, zoals luchtbellen schokgolven zouden blokkeren! Een wigvormige absorber aan de achterwand van het bad vernietigt golven om niet gereflecteerd en ren terug om interferentie te voorkomen. Een verder voordeel van andere IVSWT modellen is de mogelijkheid van het variëren van de afstand tussen de applicator en de cultuur kolven. Bevindingen van onze groep en anderen die gebruik maken van dit model duidelijk ishoe dat elk type cel reageert zeer specifiek naar verschillende behandeling parameters. Bovendien bepalen de afstand tussen de bron van de golven en het monster is belangrijk omdat hiermee de cellen te controleren om op een bepaalde positie ten opzichte van de focus van de schokgolf applicator.

<table><tbody><tr><td>Orthogold shock wave device</td><td>Tissue Regeneration Technologies, Woodstock, GA &ndash; gefabriceerd door MTS-Europe GmbH, Konstanz, Duitsland</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IVSWT Water Bath V2.0</td><td>Johann Hohenegger - Technical Products</td><td></td><td></td></tr><tr><td>EBM-2 Basal Medium 500 m +EGM-2 SingleQuot Suppl. &amp; Growth Factors</td><td>Lonza</td><td>CC-3156 &amp; CC-4176</td><td>Dit medium werd gebruikt voor de getoonde experimenten met HUVECs om de celcultuurflacon te vullen. Gebruik voor andere celtypen het aanbevolen medium.</td></tr><tr><td><a href="http://www.labplanet.com/pechiney-parafilm-m-pm996.html">Pechiney&nbsp;Parafilm M PM996</a></td><td>Pechiney Plastic Packaging</td><td>PH-LF-PM996-EA op labplanet.com</td><td>voor het afdichten van flacons</td></tr><tr><td>Falcon Serologische pipetten 25 ml</td><td>Becton Dickinson Labware</td><td>357525</td><td></td></tr><tr><td>CellMate II Serologische Pipet</td><td>Matrix Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Skintact Ultrasonic Gel</td><td>Skintact</td><td>UL-01 250 ml</td><td></td></tr><tr><td>T25 Celcultuur flacons</td><td>COSTAR</td><td>3056</td><td></td></tr><tr><td>Mikrozid ontsmettingsmiddel</td><td>Sch&uuml;lke</td><td></td><td></td></tr><tr><td>3.5 L Ontgast water</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Papieren handdoeken</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

shock wave toepassing op celculturen

Shock Wave Application to Cell Cultures

Schokgolven tegenwoordig bekend om hun regeneratieve effecten. Fundamenteel onderzoek bevindingen bleek dat schokgolven veroorzaken een biologische prikkel om cellen of weefsel te richten zonder eventuele gevolgschade. Daarom, in vitro experimenten van toenemend belang. Verschillende methoden voor het aanbrengen schokgolven op celkweken beschreven. In het algemeen, alle bestaande modellen richten op hoe schokgolven beste toepassen op cellen. Echter, deze vraag blijft: Wat gebeurt er met de golven na het passeren van de celkweek? Het verschil van de akoestische impedantie van het celkweekmedium en de lucht is zo hoog, dat meer dan 99% van schokgolven gereflecteerd! We hebben daarom een ​​model ontwikkeld dat voornamelijk bestaat uit een plexiglas gebouwde container die het mogelijk maakt de golven te verspreiden in het water na het passeren van de celkweek. Dit voorkomt cavitatie effecten evenals reflectie van de golven die anders nog te houden zou verstoren. With dit model zijn we in staat om in vivo omstandigheden na te bootsen en zo krijgen meer en meer kennis over hoe de fysieke prikkel van schokgolven wordt vertaald in een biologische cel-signaal (&quot;mechanotransduction&quot;).

Met de beschreven werkwijze pasten wij schokgolven op humane navelstreng endotheelcellen (HUVEC) die wij hiervoor geïsoleerd uit navelstrengen. Navelstrengen werden verkregen van electieve keizersneden. HUVECs werden behandeld op een samenloop van 90% in een T25 celkweekkolf met een elektrohydraulische schokgolf therapie systeem. Behandelingsparameters waren een energie fluxdichtheid van 0,1 mJ / mm 2 en een frequentie van 5 Hz. 300 impulsen toegepast op een afstand van 5 cm van d...

Schokgolven tegenwoordig bekend om hun regeneratieve effecten. Daarom in vitro experimenten zijn van toenemend belang. We hebben daarom een model ontwikkeld voor in vitro schokgolf trials (IVSWT) die ons in staat stelt om na te bootsen in vivo omstandigheden waardoor storende fysieke effecten te vermijden.

Shock Wave Toepassing op celculturen

Shock waves nowadays are well known for their regenerative effects. Basic research findings showed that shock waves do cause a biological stimulus to ...

Het algemene doel van deze procedure is om storende fysieke effecten tijdens in vitro shockwave-behandelingen te vermijden om reproduceerbare resultaten te verkrijgen. Dit wordt bereikt door eerst een kweekfles volledig te vullen met kweekmedium en de fles vervolgens in een verwarmd waterbad te plaatsen. De tweede stap is het gebruik van een royale hoeveelheid echogel bij het koppelen van de applicator aan het waterbad.Vervolgens wordt de applicator horizontaal tegen het membraan van het waterbad geplaatst. De laatste stap is om te controleren of de schokgolfbron is uitgelijnd met het centrum van de kweekfles, zodat de cellen zich binnen de focus van de golf bevinden. Ten slotte kan de analyse van de cellen worden uitgevoerd, bijvoorbeeld met real-time PCR en een cytokine-array om een verandering in de betreffende genen en cytokines aan te tonen.We kregen voor het eerst het idee voor dit model toen we zagen dat bestaande methoden om korte golven direct op celculturen toe te passen geen rekening houden met het effect van golfreflectie bij de overgang van het cultuurmedium naar de omgevingslucht. De procedure zal worden gedemonstreerd door Dr. Chante, promovendus uit mijn onderzoeksg

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bio-engineering

Een nieuwe impulsief cel onder druk experiment is ontwikkeld met behulp van een Kolsky bar apparaat op de moleculaire / cellulaire mechanismen van blast-geïnduceerde traumatisch hersenletsel te onderzoeken.

Impulsief druk zetten van neuronale cellen voor Traumatic Brain Injury Study

In this video, a shock tube device is used to generate a shockwave by rupturing a polymer diaphragm through controlled pressurization. The shockwave impacts brain slices contained in a secured bag, inducing traumatic injury to the brain slice.

Inducing Traumatic Injury in a Brain Slice Using a Shock Tube Device

Mechanische stimulatie geïnduceerde Calcium golfvoortplanting in celmonolagen: Het voorbeeld van Bovine corneale endotheelcellen

We hebben een geautomatiseerde celkweek en verhoor platform ontwikkeld voor micro-schaal cel stimulatie experimenten. Het platform biedt eenvoudige, veelzijdige en precieze controle in het cultiveren en stimuleren van kleine populaties van cellen en het terugwinnen van lysaten voor moleculaire analyses. Het platform is geschikt voor studies die kostbare cellen en / of reagentia.

Een veelzijdige Geautomatiseerde platform voor micro-schaal cel stimulatie Experimenten

We demonstreren een-microfluidics gebaseerde test om de termijn voor de cellen om de doorvoer te meten door middel van een opeenvolging van micron-schaal vernauwingen.

Een Microfluïdische Techniek om Cell Vervormbaarheid Probe

Hier presenteren we een protocol voor het isoleren en kweken van enkele cellen met een microfluïdische platform, dat een nieuw microwell-ontwerpconcept gebruikt om hoogwaardige isolatie van enkele cellen en langdurige klonale kweek mogelijk te maken.

Een microfluïdische platform voor High-throughput Single-cell Isolatie en Cultuur

Begrijpen hoe cellen gemoduleerd worden door blootstelling aan schokgolven kunt achterhalen de mechanismen achter verwondingen uit blast gebeurtenissen geactiveerd. Dit protocol maakt gebruik van op maat gemaakte schok buis apparatuur te passen schokgolven op allerlei druk op monolayers van de cel en de latere effecten op de levensvatbaarheid van de cellen te kunnen identificeren.

Beoordelende primaire Blast effecten In Vitro

Hier presenteren we een protocol voor het gebruik van O-vormige vaartuigen, gespecialiseerd schorsing culturen van cellulaire aggregaten, met orbitale schudden. De HEK293 cellen gekweekt in deze tas vormen meer homogene aggregaten dan die gekweekt in een conventionele kweekvat.

Een cultuur van zoogdiercellen schudden in O-vormige schepen tot uniforme aggregaten orbitaal

Dit document beschrijft een nieuwe model van traumatische hersenenverwonding primaire blast. Een drukluchtremmen gedreven schok buis wordt gebruikt voor het blootstellen van in vitro hippocampal segment culturen van de muis om een enkele schokgolf. Dit is een eenvoudige en snelle protocol voor het genereren van een reproduceerbare hersenletsel met weefsel met een hoog debiet.

Een roman In Vitro Model van traumatische hersenenverwonding Blast

Dit model systeem gaat uit van een myofibroblast-bevolkte fibrine gel die kan worden gebruikt om endogene collageen (her) inrichting real-time op een niet-destructieve manier te bestuderen. Het modelsysteem is zeer instelbaar, als het kan worden gebruikt met verschillende bronnen van cellen, medium additieven, en kan gemakkelijk worden aangepast aan specifieke behoeften.

Techniek Fibrine-based Tissue constructen van myofibroblasten en Application of Constraints en Zeef to Cell en collageen (Re) organisatie Induce

Leer een betrouwbaar in vitro model voor schokgolftoepassing op celculturen met behulp van een verwarmd waterbad en ultrasone gel. Deze methode minimaliseert fysische afleidingen en verbetert de reproduceerbaarheid van resultaten in regeneratief onderzoek.

Shock Wave Toepassing op celculturen

Meer video's verkennen