Name: Het beoordelen van Veranderingen in Volatile narcose gevoeligheid van muizen na lokale of systemische farmacologische interventie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-10-16T21:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 49 s
Description: Leer hoe je veranderingen in narcosegevoeligheid bij muizen evalueert na farmacologische interventies met behulp van het oprechtrekreflex. Deze methode biedt een betrouwbaar systeem voor gedragsbeoordeling in de neurowetenschap.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door R01 GM088156 en T32 HL007713-18. Wij willen Bill Pennie en Michael Carman bedanken van de Universiteit van Pennsylvania Onderzoek Instrumentatie Shop voor hun hulp bij het samenstellen van onze oprichtreflex apparaat.

Alle procedures waarbij dieren die hier worden genoemd zijn goedgekeurd door de Universiteit van Institutional Animal Care en gebruik Comite Pennsylvania. 1. Overzicht van de testapparatuur <ol><li> Het testapparaat bestaat uit 24 helder acryl cilindrische kamers 10 cm lang en 5 cm diameter (totaal volume van 200 ml). Deze maat is geschikt voor een typische 25 g volwassen muis. Chambers hebben havens waartussen voor gas-en uitlaat. Het eindstuk is afneembaar zodat dieren gemakkelijk in de kamer kan worden geladen. Gaspoort openingen zijn zorgvuldig afgedicht met teflon tape, terwijl de rubber O-ring pakkingen gebruikt om het verwijderbare uiteinde van de cilindrische kamers dichten. </li><li> Elke kamer is gemonteerd op een rek, dat zit in een waterbad. Het rek wordt aangebracht zodat alleen het onderste gedeelte van de kamers (onder de gasinlaten) is ondergedompeld. Voor de stabiliteit, de achterkant van de kamer rust op een steun zodat de hele chamber zit horizontaal. Dit zorgt voor een gelijkmatige contact van de hele kamer met het bad. </li><li> Polyethyleen buis verbindt een zuurstoftank een verdoving verdamper en vervolgens door een 10 L / min debiet meter. De buis splitst in 25 kleine diameter weerstanden van gelijke lengte een gelijke stroom wordt geleverd aan elk van de 24 kamers en een agent analysator. </li><li> Vacuümleidingen verlaten elke kamer aan de andere kant van de gasinlaat. Dit bevordert unidirectionele stroming die opnieuw inademen van uitgeademde kooldioxide elimineert. Het vacuüm lijnen te combineren op een spruitstuk te verbinden met een in-house zuigleiding. Een pop-off ventiel langs de belangrijkste vacuüm lijn zorgt voor atmosferische druk omstandigheden in elke kamer. </li><li> Het bad is gevuld met genoeg water om volledig contact met de bodem van elke kamer. Het water wordt gecirculeerd door het bad en op een constante 37 ° C door een pomp. </li></ol> 2. Controleer het systeem voorafgaand aan blootstelling <ol><li> CHeck dat de temperatuur van het waterbad 37 ° C in het bad. </li><li> Stroom zuurstof met een snelheid van 5 l / min (200 ml / min per kamer + middel analyzer). Dompel elke kamer onder water en kijk voor bellen of het binnendringen van water in de kamer, die beide zijn een indicatie van lekkage. Seal eventuele lekken voor het begin van het experiment. </li><li> Voor elke kamer, sluit u een 500 ml / min flow meter in de lijn na de kamer om ervoor te zorgen dat de stromen in evenwicht zijn over elk van de 25 gasleidingen. Dit zorgt ervoor dat de ingang 5 L / min stromen gelijkmatig verdeeld zodat elke kamer ontvangt 200 ml / min stroomsnelheid. Elke kamer niet ontvangen van de verwachte stroom moet haar in-en uitstroom buizen gecontroleerd op obstakels hebben. </li><li> Kalibreer de agent analyzer om een ​​meting van 0,00% isofluraan bij 100% zuurstof stroomt verzekeren. </li></ol> 3. Implantaat Temperatuur Transponder <ol><li> Een week voorafgaand aan gewenning, verdoven elke muis met 2% isofluraan. </li><li> Steriliseer de dorsale nek met betadine. </li><li> Injecteer een temperatuur transponder subcutaan tussen de schouderbladen met de steriele, voorverpakte injector naald. </li><li> Toezicht houden op de injectieplaats dagelijks voor infectie en migratie van de transponder. </li></ol> 4. Wennen dieren te testen Chambers <ol><li> Vier dagen voor de eerste meting plaats alle muizen in afzonderlijke kamers voor 2 uur met 100% zuurstof stroomt. </li><li> Herhaal stap 4.1 daags gedurende de vier dagen voor de meting aan de verstorende effecten van stress voorkomen door een nieuwe omgeving. </li></ol> 5. Voer de farmacologische interventie die u wilt testen voor effecten op het verdoving Gevoeligheid <ol><li> Deze ingreep kan een stereotaxische injectie in een specifiek deel van de hersenen 24, intraveneuze of intraperitoneale injectie 25 of afgifte van een geneesmiddel aan een bepaald hersengebied worden via een canule 26. </li><li> Omdat deze procedures zelf verdoving gevoeligheid kan veranderen ten opzichte van naïeve dieren, moet een goede controlegroep dezelfde procedure ondergaan met drager injecties. </li><li> Zorg ervoor dat de farmacologische interventie heeft een voldoende lange werkingsduur als u van plan bent om een ​​stapsgewijs verhogen en / of verlagen van de bepaling van verdoving gevoeligheid zoals in stap 6 hieronder doen, anders gaat u naar stap 7. </li></ol> 6. Beoordelen verdoving Gevoeligheid behulp van de stapsgewijze EC 50 Bepaling voor Inductie en Emergence <ol><li> Plaats elk dier in afzonderlijke kamers met 100% zuurstof stroomt. </li><li> Stel de isofluraan concentratie tot 0,4% * gedurende 15 minuten. Tijdens de laatste 2 minuten van deze periode, beoordeelt oprichtende reflex van elk dier door zacht glooiende de kamer totdat de muis op zijn rug wordt geplaatst. De oprichtende reflex wordt beschouwd als intact als en slechts als de muis in staat is om alle te herstellenhaar poten op de vloer van de kamer binnen 2 minuten. <ol><li> * Merk op dat 0,4% isofluraan is een subhypnotic dosis in C57BL/6J-muizen. Als een muizen verliezen hun oprichtende reflex bij de eerste stap, de eerste dosis was te groot en moet verlaagd worden op de volgende dagen. </li></ol></li><li> Noteer de stand van oprichtreflex voor elke muis en scan elke muis voor temperatuurgegevens. Een template record wordt getoond in tabel 1. </li><li> Verhoog de isofluraan concentratie door ~ 0,05% gedurende 15 minuten en herhaal stap 7.2. Blijf dit doen totdat alle dieren hun oprichtende reflex hebben verloren. </li><li> Optioneel: de procedure herhalen voor het verminderen van stapsgewijze isoflurane doses totdat alle dieren hun oprichtende reflex hebben herwonnen (zie stap 6.3). </li><li> Om het experiment te beëindigen, schakelt u de isofluraan en spoel het hele systeem met 100% zuurstof gedurende 15 minuten. Dit zal helpen om hypoxie te voorkomen als de muizen herstellen voordat ze terug naar hun kooien en zal de experime beschermennter van enige verdoving blootstelling. </li><li> Optioneel: indien het aantal dieren of het aantal verdoving concentraties worden beperkt als gevolg van resource of tijdsdruk, de curve-fit parameterschattingen-vooral de Hill helling kunnen ondergewaardeerd, valselijk lage foutschatting hebben. In dergelijke gevallen kan het nodig zijn om de anesthesie gevoeligheid meting stappen 6,1-6,6 op nog eens twee dagen experimentele parameter de werkelijke helling en de bijbehorende fout schatting volledig verkrijgen beschreven herhalen. </li></ol> 7. Beoordelen op korte termijn veranderingen in verdovende Gevoeligheid met Time to Emergence <ol><li> Plaats elk dier in afzonderlijke kamers met 100% zuurstof stroomt. </li><li> Stel de isofluraan concentratie 1,2%, wat overeenkomt met de inductie ED 99 voor wildtype C57BL/6J-muizen 20. Behouden gedurende 30-60 min, afhankelijk van de verwachte duur van de actie van de acute interventie. </li><li> Bevestigen LORR inalle dieren door zacht glooiende elke kamer tot muizen worden op hun rug gelegd. </li><li> Schakel isofluraan en flow 100% zuurstof. Meet de tijd totdat elk dier herwint haar oprichtende reflex. Dit wordt bepaald door de plaatsing van alle vier poten op de vloer van de kamer en bevestigd door de aanwezigheid van drie opeenvolgende metingen met een intacte oprichtreflex. </li></ol>

<ol><li>Meyer, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zur+theorie+der+alkoholnarkose.+I.+Mittheilung.+Welche+Eigenschaft+der+An%23228%3Bsthetica+bedingt+ihre+narkotische+Wirkung%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Naunyn+Schmiedebergs+Arch.+Exp.+Pathol.+Pharmakol%22%5BJournal%5D)">Zur theorie der alkoholnarkose. I. Mittheilung. Welche Eigenschaft der An#228;sthetica bedingt ihre narkotische Wirkung?</a> Naunyn Schmiedebergs Arch. Exp. Pathol. Pharmakol. 42, 109-137 Forthcoming.</li>
<li>Overton, C. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aOverton%2C+CE+%22Studien+%C3%BCber+die+Narkose%3A+Zugleich+ein+Beitrag+zur+allgemeinen+Pharmakologie%22">Studien über die Narkose: Zugleich ein Beitrag zur allgemeinen Pharmakologie</a>. , Fischer. Jena. (1901).</li>
<li>Bignall, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ontogeny+of+levels+of+neural+organization%3A+the+righting+reflex+as+a+model%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Ontogeny of levels of neural organization: the righting reflex as a model.</a> Exp. Neurol. 3 (3), 566-573 (1974).</li>
<li>Franks, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((General+anaesthesia%3A+from+molecular+targets+to+neuronal+pathways+of+sleep+and+arousal%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">General anaesthesia: from molecular targets to neuronal pathways of sleep and arousal.</a> Nat. Rev. Neurosci. 9 (5), 370-386 (2008).</li>
<li>Smith, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Responses+of+laboratory+animals+to+some+injectable+anaesthetics%5BTitle%5D)+AND+%22Lab.+Anim%22%5BJournal%5D)">Responses of laboratory animals to some injectable anaesthetics.</a> Lab. Anim. 27 (1), 30-39 (1993).</li>
<li>Schernthaner, A., Lendl, C., Busch, R., Henke, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+evaluation+of+three+medetomidine--midazolam--ketamine+combinations+for+neutering+of+ferrets+%28Mustela+putorius+furo%29%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Berliner+und+M%C3%BCnchener+tier%C3%A4rztliche+Wochenschrift%22%5BJournal%5D)">Clinical evaluation of three medetomidine--midazolam--ketamine combinations for neutering of ferrets (Mustela putorius furo)].</a> Berliner und Münchener tierärztliche Wochenschrift. 121 (1-2), 1-10 (2008).</li>
<li>Mohammad, F. K., Zangana, I. K., Abdul-Latif, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medetomidine+sedation+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Zentralblatt+f%C3%BCr+Veterin%C3%A4rmedizin.+Reihe+A%22%5BJournal%5D)">Medetomidine sedation in sheep.</a> Zentralblatt für Veterinärmedizin. Reihe A. 40 (5), 328-331 (1993).</li>
<li>Nicholls, E. A., Louie, G. L., Prokocimer, P. G., Maze, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Halothane+anesthetic+requirements+are+not+affected+by+aminophylline+treatment+in+rats+and+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Halothane anesthetic requirements are not affected by aminophylline treatment in rats and dogs.</a> Anesthesiology. 65 (6), 637-641 (1986).</li>
<li>Tung, A., Szafran, M. J., Bluhm, B., Mendelson, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+Deprivation+Potentiates+the+Onset+and+Duration+of+Loss+of+Righting+Reflex+Induced+by+Propofol+and+Isoflurane%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Sleep Deprivation Potentiates the Onset and Duration of Loss of Righting Reflex Induced by Propofol and Isoflurane.</a> Anesthesiology. 97 (4), 906-911 (2002).</li>
<li>Pal, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+Minimum+Alveolar+Concentration+for+Isoflurane+and+Sevoflurane+in+a+Rodent+Model+of+Human+Metabolic+Syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth%22%5BJournal%5D)">Determination of Minimum Alveolar Concentration for Isoflurane and Sevoflurane in a Rodent Model of Human Metabolic Syndrome.</a> Anesth. 2 (2), 297-302 (2012).</li>
<li>Eger, E. I., Saidman 2nd,, J, L., Brandstater, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature+dependence+of+halothane+and+cyclopropane+anesthesia+in+dogs%3A+correlation+with+some+theories+of+anesthetic+action%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Temperature dependence of halothane and cyclopropane anesthesia in dogs: correlation with some theories of anesthetic action.</a> Anesthesiology. 26 (6), 764-770 (1965).</li>
<li>Vitez, T. S., White, P. F., Eger, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2nd+Effects+of+hypothermia+on+halothane+MAC+and+isoflurane+MAC+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">2nd Effects of hypothermia on halothane MAC and isoflurane MAC in the rat.</a> Anesthesiology. 41 (1), 80-81 (1974).</li>
<li>Antognini, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermia+eliminates+isoflurane+requirements+at+20+degrees+C%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Hypothermia eliminates isoflurane requirements at 20 degrees C.</a> Anesthesiology. 78 (6), 1152-1156 (1993).</li>
<li>McKenzie, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+temperature+on+the+anaesthetic+potency+of+halothane%2C+enflurane+and+ethanol+in+Daphnia+magna+%28Cladocera%3A+Crustacea%29%5BTitle%5D)+AND+%22Comp.+Biochem.+Physiol.+C%22%5BJournal%5D)">Effects of temperature on the anaesthetic potency of halothane, enflurane and ethanol in Daphnia magna (Cladocera: Crustacea).</a> Comp. Biochem. Physiol. C. 101 (1), 15-19 (1992).</li>
<li>Icaza, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoflurane-Induced+Changes+in+Righting+Response+and+Breathing+are+Modulated+by+RGS+Proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth.+Analg%22%5BJournal%5D)">Isoflurane-Induced Changes in Righting Response and Breathing are Modulated by RGS Proteins.</a> Anesth. Analg. 109 (5), 1500-1505 (2009).</li>
<li>Drexler, B., Antkowiak, B., Engin, E., Rudolph, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+anesthetic+targets+by+mouse+molecular+genetics+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Can%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of anesthetic targets by mouse molecular genetics approaches.</a> Can. 2 (2), 178-190 (2011).</li>
<li>Wafford, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiating+the+role+of+gamma-aminobutyric+acid+type+A+%28GABAA%29+receptor+subtypes%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem%22%5BJournal%5D)">Differentiating the role of gamma-aminobutyric acid type A (GABAA) receptor subtypes.</a> Biochem. 32 (Pt3), 553-556 (2004).</li>
<li>Lakhlani, P. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substitution+of+a+mutant+%CE%B12a-adrenergic+receptor+via+%22hit+and+run%22+gene+targeting+reveals+the+role+of+this+subtype+in+sedative%2C+analgesic%2C+and+anesthetic-sparing+responses+in%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Substitution of a mutant α2a-adrenergic receptor via "hit and run" gene targeting reveals the role of this subtype in sedative, analgesic, and anesthetic-sparing responses in.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 94 (18), 9950-9955 (1997).</li>
<li>Sonner, J. M., Gong, D., Eger, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Naturally+Occurring+Variability+in+Anesthetic+Potency+Among+Inbred+Mouse+Strains%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth%22%5BJournal%5D)">Naturally Occurring Variability in Anesthetic Potency Among Inbred Mouse Strains.</a> Anesth. 91 (3), 720-726 (2000).</li>
<li>Sun, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+throughput+modular+chambers+for+rapid+evaluation+of+anesthetic+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Anesthesiol%22%5BJournal%5D)">High throughput modular chambers for rapid evaluation of anesthetic sensitivity.</a> BMC Anesthesiol. 6 (1), 13(2006).</li>
<li>Hu, F. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypnotic+Hypersensitivity+to+Volatile+Anesthetics+and+Dexmedetomidine+in+Dopamine+%CE%B2-Hydroxylase+Knockout+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Hypnotic Hypersensitivity to Volatile Anesthetics and Dexmedetomidine in Dopamine β-Hydroxylase Knockout Mice.</a> Anesthesiology. , (2012).</li>
<li>Kelz, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+essential+role+for+orexins+in+emergence+from+general+anesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">An essential role for orexins in emergence from general anesthesia.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105 (4), 1309-1314 (2008).</li>
<li>Moore, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+Activation+of+Sleep-Promoting+VLPO+Neurons+by+Volatile+Anesthetics+Contributes+to+Anesthetic+Hypnosis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr%22%5BJournal%5D)">Direct Activation of Sleep-Promoting VLPO Neurons by Volatile Anesthetics Contributes to Anesthetic Hypnosis.</a> Curr. 22 (21), 2008-2016 (2012).</li>
<li>Kirby, E. D., Jensen, K., Goosens, K. A., Kaufer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereotaxic+Surgery+for+Excitotoxic+Lesion+of+Specific+Brain+Areas+in+the+Adult+Rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Stereotaxic Surgery for Excitotoxic Lesion of Specific Brain Areas in the Adult Rat.</a> J. Vis. Exp. (65), e4079(2012).</li>
<li>Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manual+Restraint+and+Common+Compound+Administration+Routes+in+Mice+and+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats.</a> J. Vis. Exp. (67), e2771(2012).</li>
<li>Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survivable+Stereotaxic+Surgery+in+Rodents%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents.</a> J. Vis. Exp. (20), e880(2008).</li>
<li>Szymusiak, R., Alam, N., Steininger, T. L., McGinty, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep-waking+discharge+patterns+of+ventrolateral+preoptic%2Fanterior+hypothalamic+neurons+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Sleep-waking discharge patterns of ventrolateral preoptic/anterior hypothalamic neurons in rats.</a> Brain Res. (1-2), 178-188 (1998).</li>
<li>Nelson, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+sedative+component+of+anesthesia+is+mediated+by+GABAA+receptors+in+an+endogenous+sleep+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The sedative component of anesthesia is mediated by GABAA receptors in an endogenous sleep pathway.</a> Nat. Neurosci. 5 (10), 979-984 (2002).</li>
<li>Li, K. Y., Guan, Y., Krnjević, K., Ye, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propofol+Facilitates+Glutamatergic+Transmission+to+Neurons+of+the+Ventrolateral+Preoptic+Nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Propofol Facilitates Glutamatergic Transmission to Neurons of the Ventrolateral Preoptic Nucleus.</a> Anesthesiology. 111 (6), 1271-1278 (2009).</li>
<li>Friedman, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Conserved+Behavioral+State+Barrier+Impedes+Transitions+between+Anesthetic-Induced+Unconsciousness+and+Wakefulness%3A+Evidence+for+Neural+Inertia%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">A Conserved Behavioral State Barrier Impedes Transitions between Anesthetic-Induced Unconsciousness and Wakefulness: Evidence for Neural Inertia.</a> PLoS ONE. 5 (7), e11903(2010).</li>
<li>Lu, J., Greco, M. A., Shiromani, P., Saper, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+lesions+of+the+ventrolateral+preoptic+nucleus+on+NREM+and+REM+sleep%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Effect of lesions of the ventrolateral preoptic nucleus on NREM and REM sleep.</a> J. Neurosci. 20 (10), 3830-3842 (2000).</li>
<li>Sun, X., Whitefield, S., Rusak, B., Semba, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+analysis+of+suprachiasmatic+nucleus+projections+to+the+ventrolateral+preoptic+area+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological analysis of suprachiasmatic nucleus projections to the ventrolateral preoptic area in the rat.</a> Eur. J. Neurosci. 14 (8), 1257-1274 (2001).</li>
<li>Ma, J., Shen, B., Stewart, L. S., Herrick, I. A., Leung, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+septohippocampal+system+participates+in+general+anesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The septohippocampal system participates in general anesthesia.</a> J. Neurosci. 22 (2), RC200(2002).</li>
<li>Leung, L. S., Ma, J., Shen, B., Nachim, I., Luo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medial+septal+lesion+enhances+general+anesthesia+response%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Medial septal lesion enhances general anesthesia response.</a> Exp. Neurol. , (2013).</li>
<li>Solt, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methylphenidate+Actively+Induces+Emergence+from+General+Anesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Methylphenidate Actively Induces Emergence from General Anesthesia.</a> Anesthesiology. 115 (4), 791-803 (2011).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Hoewel de beoordeling van LORR in een enkele muis is een schijnbaar eenvoudige taak, het is niettemin essentieel om identieke fysiologische omstandigheden tussen onderwerpen handhaven om betrouwbare gegevens van een groep dieren te verzamelen. De strak gereguleerd, high-capacity LORR apparaat hier gepresenteerde biedt een manier om experimenten te standaardiseren en het maximaliseren van de efficiëntie. Door het volgen van de basisprincipes van de thermoregulatie en gelijke verdeling stroom, kan dit systeem eenvoudig wo...

Algemene anesthetica worden gedefinieerd door hun vermogen om een ​​omkeerbare staat van hypnose in een grote verscheidenheid van soorten, maar een uitleg over hoe zo&#39;n diverse klasse van geneesmiddelen kan alle ontlokken een bijzondere eindpunt blijft ongrijpbaar veroorzaken. Een aantal theorieën geponeerd door de jaren heen, te beginnen met de Meyer-Overton correlatie tussen verdoving potentie en lipide-oplosbaarheid, die algemene membraan verstoringen voorgesteld als basis voor hypnose 1,2. Meer recente gegevens blijkt dat eiwit targets die neuronale signalering bijdragen aan verdovende effecten. Muizen hebben bewezen een onmisbare model verkennen deze theorieën door de homologie tussen muis en mens verdoving responsiviteit zijn. Hoewel een muis niet kan worden gevraagd over de subjectieve bewustzijn onder narcose, bepaalde primitieve reflexen dienen als bruikbare alternatieve middelen van knaagdier hypnose. In de eerste paar dagen na de geboorte, muizen ontwikkelen een reflexieve oprichtende response dat verhindert dat deze passief geplaatst in een liggende positie 3. De dosis van anesthesie waarbij een muis verliest zijn oprichtreflex correleert goed met de menselijke hypnotische doses 4. Beoordeling van het verlies van oprichtreflex (LORR) is uitgegroeid tot een veel gebruikte laboratorium standaard voor het testen van narcose gevoeligheid in muizen, evenals een groot aantal andere soorten, waaronder ratten, cavia, konijn, fret, schapen en hond 5-8. De dosis van een gegeven verdoving waarbij Lorr optreedt voor leden van een soort is zeer consistent, maar kan aanzienlijk worden verschoven door omgevingsfactoren. Bijvoorbeeld, slaaptekort ratten zijn gevoelig voor zowel vluchtige en intraveneuze anesthetica 9 en ratten met een hoge aërobe capaciteit minder gevoelig voor isofluraan 10. Hypothermie is ook aangetoond dat de dosis van talrijke anesthetica ten behoeve hypnose in een breed spectrum van soorten 11-14 verminderen. In ordede verdoving dosis waarbij Lorr optreedt in een groep proefdieren betrouwbaar te identificeren, is het essentieel dat de testomgeving zorgvuldig gecontroleerd strakgetrokken, euthermia onderhouden en leveren gelijke hoeveelheden geneesmiddel voor alle vakken. Niet verrassend, zijn genetische factoren ook bekend om verdoving gevoeligheid 15-18 veranderen. Daarom moet een zorgvuldige afweging worden besteed aan het controleren voor genetische achtergrond 19. We hebben een apparaat dat identieke gasvormige verdoving levering aan elk van de 24 muizen zorgt voor behoud van een constante 37 ° C omgeving ontwikkeld. De transparante cilindrische ontwerp van onze expositiekamers maakt een snelle LORR beoordeling en eenvoudige integratie van telemetrische fysiologische metingen. Dit systeem is aangetoond dat isofluraan, halothaan en sevofluraan inductie EC50 en tijd ontstaan ​​in wild-type muizen 20 nauwkeurig te meten. We hebben ookdit systeem om veranderingen in anesthetische gevoeligheid in acht muizen met genetische mutaties en gerichte hypothalamus laesies 21-23. Hier beschrijven we twee manieren anesthetische gevoeligheid kan worden vastgesteld na een farmacologische interventie met onze gecontroleerde omgeving inrichting. Steady-state fenotypering van vluchtige verdoving inductie en de opkomst gevoeligheid vereist 8-10 uur en is daarmee het beste op maat gemaakt voor studies waarin experimentele omstandigheden niet veranderen, zoals bij chronische of langwerkende farmacologische interventies. Echter, voor kortwerkende behandelingen waarvan de gevolgen aanzienlijk verdwijnen na verloop van tijd presenteren we ook een eenvoudige procedure om veranderingen in oprichtreflex volgende stereotactisch-gerichte micro-injecties of intraveneuze behandeling met geneesmiddelen die een belangrijke invloed verdoving opkomst evalueren. Deze testen vormen een kleine subset van de mogelijke toepassingen van deze gecontroleerde omgeving, dat kan worden aangepast voor een aantal Subjects van een aantal soorten elk type van geïnhaleerde therapeutische ontvangen.

<table><tbody><tr><td>Naam van het reagens</td><td>Bedrijf</td><td>Catalogusnummer</td><td>Opmerkingen</td></tr><tr><td>Zuurstof</td><td>Airgas</td><td>OX300</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraan</td><td>Butler Schein</td><td></td><td>Elk vluchtig anestheticum van belang mag worden vervangen</td></tr><tr><td>Naam van het materiaal</td><td>Bedrijf</td><td>Catalogusnummer</td><td>Opmerkingen</td></tr><tr><td>Massastroommeter- 10 SLPM</td><td>Omega Engineering</td><td>FMA-A2309</td><td></td></tr><tr><td>Massastroommeter- 500 SCCM</td><td>Omega Engineering</td><td>FMA-A2305</td><td></td></tr><tr><td>Anesthetisch agens analyzator/gasindicator</td><td>AM Bickford</td><td>FI-21 Riken</td><td></td></tr><tr><td>Verwarmde waterpomp</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-874-175</td><td></td></tr><tr><td>Temperatuur transponders</td><td>BMDS</td><td>IPTT-300</td><td></td></tr><tr><td>RF temperatuurlezer</td><td>BMDS</td><td>DAS-6007</td><td></td></tr></tbody></table>

het beoordelen van veranderingen in volatile narcose gevoeligheid van muizen na lokale of systemische farmacologische interventie

Assessing Changes in Volatile General Anesthetic Sensitivity of Mice after Local or Systemic Pharmacological Intervention

Een wenselijk eindpunt van algehele anesthesie is de staat van bewusteloosheid, ook wel bekend als hypnose. Het definiëren van de hypnotische toestand bij dieren is minder eenvoudig dan het is in menselijke patiënten. Een veel gebruikt gedrags surrogaat voor hypnose bij knaagdieren is het verlies van oprichtreflex (LORR), of het punt waarop het dier niet meer reageert op hun aangeboren instinct om de kwetsbaarheid van dorsale decubitus te voorkomen. We hebben een systeem om LORR gelijktijdig beoordelen in 24 muizen, terwijl een zorgvuldige controle voor potentiële verwart, inclusief temperatuurschommelingen en wisselende gasstromen ontwikkeld. Deze kamers staan ​​betrouwbare beoordeling van verdoving gevoeligheid zoals gemeten door latentie om terug te keren van de oprichtende reflex (RORR) volgens een vast verdoving blootstelling. Als alternatief, het gebruik van een stapsgewijze toename (of afname) in verdoving concentratie, de kamers bepalen van de gevoeligheid van een bevolking aan inductie (of ontstaan) ook in staat stellen, zoals gemeten doorEC 50 en Hill helling. Tenslotte kan de gecontroleerde klimaatkamers hier beschreven worden aangepast voor verschillende alternatieve toepassingen, waaronder geïnhaleerde afgifte van andere geneesmiddelen, toxicologie studies en simultane real-time monitoring van de vitale functies.

Figuur 1 toont de bruikbaarheid van de stapsgewijze Lorr gekwantificeerd door langetermijneffecten van een farmacologische interventie. Iboteenzuur (IBA) een agonist van de glutamaterge N-methyl-D-aspartaat (NMDA) receptor die vaak wordt gebruikt als een excitotoxinen permanente neuronale letsels veroorzaken. Hier geïnjecteerd we 10 nl van 1% IBA bilateraal in de ventrolaterale preoptic gebied (VLPO) van C57BL/6J-muizen een week voorafgaand aan het testen. De meerderheid van de neuronen in deze kern ver...

Verlies van de oprichtende reflex heeft lang gediend als een standaard gedrags surrogaat voor bewusteloosheid, ook wel hypnose, bij proefdieren. Veranderingen in vluchtige anesthetische gevoeligheid door farmacologische middelen kunnen worden gedetecteerd met een zorgvuldig geregelde high-throughput beoordelingssysteem, dat kan worden aangepast voor levering van elke geïnhaleerde therapeutische.

Het beoordelen van Veranderingen in Volatile narcose gevoeligheid van muizen na lokale of systemische farmacologische interventie

One desirable endpoint of general anesthesia is  the state of unconsciousness, also known as hypnosis. Defining the hypnotic state in animals is  less ...

Het algemene doel van deze procedure is om veranderingen in de anesthesiegevoeligheid na een farmacologische interventie te evalueren. Dit wordt bereikt door eerst de blootstellingskamers zorgvuldig te controleren om een uniforme gasstroom en temperatuur te waarborgen. De tweede stap is het habitueren van de dieren aan de kamers.Vervolgens wordt de betreffende farmacologische interventie uitgevoerd. De laatste stap is het beoordelen van veranderingen in de anesthesiegevoeligheid door het schrijfreflex van het dier te evalueren als reactie op blootstelling aan het anestheticum. Uiteindelijk worden schrijfreflex-assays gebruikt om verschillen in anesthesiegevoeligheid aan te tonen die zijn veroorzaakt door lang- of kortwerkende farmacologische interventies.Hoewel dit systeem inzicht kan bieden in veranderingen in de anesthesiegevoeligheid bij muizen, kan het ook worden gebruikt bij verschillende soorten om de effecten van diverse geïnhaleerde therapeutica te bestuderen. De testapparatuur bestaat uit 24 doorzichtige cilindrische acrylkamers, 10 centimeter lang en vijf centimeter in diameter. Deze afmeting is geschikt voor een typische volwassen muis van 25 gram.Elke kamer heeft aan be

assessing-changes-volatile-general-anesthetic-sensitivity-mice-after

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Elektronische von Frey metingen zijn een effectieve en verbeterde alternatief voor klassieke von Frey filamenten, omdat ze snelle en nauwkeurige meting van veranderingen in mechanische onttrekkingsdrempels bij knaagdieren mogelijk maken naar continu toegepaste drukstimulering vóór en na een ontstekingsgebeurtenis.

Metingen van veranderingen in tactiele gevoeligheid in de achterpoot van muizen met behulp van een elektronisch von Frey-apparaat

We beschrijven een protocol bij de ontwikkeling van door opioïden veroorzaakte hyperalgesie en tolerantie in muizen te onderzoeken. Op basis van de meting van thermische en mechanische nociceptieve reacties van naïeve en morfine behandelde dieren, het mogelijk om de toename van gevoeligheid voor pijn (hyperalgesie) kwantificeren afname analgesie (tolerantie) geassocieerd met chronische opiaat toediening.

Beoordeling van de Morfine-geïnduceerde hyperalgesie en analgesietolerantie in Muizen middel van thermische en mechanische Nociceptieve modaliteiten

Allergische reacties, gekenmerkt door de activering van mestcellen en basofielen, worden door de verknoping van IgE en het vrijkomen van pro-inflammatoire mediatoren. Een kwantitatieve beoordeling van allergische reacties kunnen worden bereikt door Evans Blue kleurstof veranderingen in vasculaire permeabiliteit na provocatie met allergeen controleren.

Meten Lokaal Anafylaxie in Muizen

Dit protocol is bedoeld om onderzoekers in staat te stellen experimenten uit te voeren die zijn ontworpen om deze aspecten van verslaving te testen met behulp van de geconditioneerde plaatsvoorkeur en het gedragsmatige sensitisatie-assays van de locomotor.

Evaluatie van cocaïne geïnduceerde sensitisatie en geconditioneerd Place Preference in Muizen

Hier presenteren we een protocol om anesthetisch gas veiliger en efficiënter toe te dienen aan muizen met behulp van een digitaal, laag stroomverbruik anesthesiesysteem dat gebruikmaakt van een door een spuit aangedreven directe injectieverdamper.

Toepassing van een lage stroom digitale anesthesiesysteem voor muizen en ratten

Stimulatie van de nervus vagus heeft bewezen een sterke werkzaamheid te hebben bij het verminderen van perifere ontsteking. Hier presenteren we een gewijzigd protocol voor vagusnerfstimulatie dat verdere onderzoeken naar de cholinerge ontstekingsremmende mechanismen in beperkte ontstekingsreacties mogelijk maakt.

Verhoogde Recovery Time en verminderde LPS Administration aan de Nervus Vagus Stimulatie Mechanismen in Limited ontstekingsreacties Studie

We ontwikkelden een protocol om te beoordelen van welzijn in muizen tijdens procedures met behulp van de narcose. Een aantal gedrags parameters die aangeeft niveaus van welzijn evenals glucocorticoide metabolieten zijn geanalyseerd. Het protocol kan dienen als een algemene steun voor de schatting van de mate van ernst in een wetenschappelijke, dier-gecentreerde manier.

Systematische beoordeling van welzijn in muizen voor Procedures gebruik van algemene anesthesie

Ex vivo hersenplakken kunnen worden gebruikt om de effecten van vluchtige anesthetica op opgeroepen reacties op afferente inputs te bestuderen. Optogenetica wordt gebruikt om zelfstandig thalamocorticale en corticocorticale afferente stoffen te activeren voor niet-primaire neocortex, en synaptische en netwerkresponsen worden gemoduleerd met isofluraan.

Optogenetische activering van afferente paden in hersenplakken en modulatie van reacties door vluchtige anesthetica

Dit artikel beschrijft een methode voor het modelleren van totale intraveneuze anesthesie (TIVA) tijdens kankerresectiechirurgie bij muizen. Het doel is om de belangrijkste kenmerken van anesthesielevering aan patiënten met kanker te repliceren. De methode maakt het mogelijk om te onderzoeken hoe anesthesietechniek het recidief van kanker na resectiechirurgie beïnvloedt.

Een in vivo muismodel van totale intraveneuze anesthesie tijdens kankerresectiechirurgie

De fruitvlieg (Drosophila melanogaster) wordt veel gebruikt voor biologisch en toxicologisch onderzoek. Om het nut van vliegen uit te breiden, ontwikkelden we een instrument, de seriële anesthesie-array, die tegelijkertijd meerdere vliegenmonsters blootstelt aan vluchtige algemene anesthetica (VGA's), waardoor het mogelijk wordt om de neveneffecten (toxisch en beschermend) van VGA's te onderzoeken.

De seriële anesthesie-array voor het high-throughput onderzoek van vluchtige stoffen met behulp van Drosophila melanogaster

Leer hoe je veranderingen in narcosegevoeligheid bij muizen evalueert na farmacologische interventies met behulp van het oprechtrekreflex. Deze methode biedt een betrouwbaar systeem voor gedragsbeoordeling in de neurowetenschap.

Het beoordelen van Veranderingen in Volatile narcose gevoeligheid van muizen na lokale of systemische farmacologische interventie (Video) | JoVE Journal

Het beoordelen van Veranderingen in Volatile narcose gevoeligheid van muizen na lokale of systemische farmacologische interventie

Meer video's verkennen