Name: Heterotopische Auxiliary Rat Liver Transplantation Met Flow-gereguleerd poortader Arterialization in acuut leverfalen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 19 s
Description: Leer heterotopische auxiliaire levertransplantatie bij ratten met flow-gereguleerde poortaderarterialisatie. Deze innovatieve techniek onderzoekt de effecten van portale hyperperfusie op levermicrocirculatie en functie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Deze studie werd gefinancierd door de &quot;Deutsche Forschungsgemeinschaft&quot; (DFG). K. Schleimer werd gesteund door de Lise Meitner Fellowship van het ministerie van Wetenschap en Onderzoek van NRW. We willen graag mevrouw Mary-Joan Blümich bedanken voor haar uitstekende editing hulp. Dr Maria Kokozidou werd gefinancierd uit Fresenius 2011_A61.

1 Proefdieren <ol><li> Het verkrijgen van een goedkeuring Lokale Ethische Commissie voor alle experimenten die zal worden uitgevoerd in overeenstemming met de bescherming van dieren FELASA richtlijnen (K 40, 17/99). </li><li> Gebruik mannelijke Lewis ratten beschikbaar te kopen bij een commerciële kweker (bijvoorbeeld Charles River Wiga GmbH, Sulzfeld, Duitsland). Hier, 224 dieren (112 donors, ontvangers 112) werden gebruikt om 112 transplantaties uitgevoerd. De ontvangers werden opgeofferd op 6 weken na de operatie. Op het moment van de operatie, moeten de dieren 250-350 g wegen. </li><li> Houd de dieren in klimaatkamers met vrije toegang tot voedsel en water. </li></ol> 2 Anesthesie en Operative Voorbereiding <ol><li> Plaats de rat in een plexiglas doos verbonden met de anesthesie machine met een zuurstof stroomsnelheid van 1 l / min en een isofluorane vaporizer met 5% verdoving gas anesthesie. Onderhouden anesthesie op 1,5% isofluorane. </li><li> Plaats de ratten inrugligging op een warmhoudplaat. </li><li> Verwijder de vacht van het abdomen met een ontharing crème. </li><li> Bereid een steriele chirurgische veld als volgt: Gebruik een ontsmettingsmiddel om de stationaire reinigen. Voor het desinfecteren van de incisie gebruik Chloorhexidine eerste, tweede en alcohol tenslotte een scrub oplossing (bijvoorbeeld chloorhexidine en 70% isopropyl alcohol). Draag een disposable chirurgische toga en chirurgische handschoenen. </li><li> Gebruik steriele instrumenten voor microchirurgie. </li><li> Gebruik een operatie microscoop in 12-20-voudige vergroting. </li></ol> 3 chirurgische ingreep <ol><li> Donoroperatie Voorbereiding <ol><li> Voer een mediane laparotomie en resectie van de linker laterale lob en de mediaan kwab van het transplantaat zoals beschreven door Higgins. 14 </li><li> Maak vervolgens de hepatoduodenale ligament. Eerste afbinden de galwegen om congestie en verwijding van de kleine galwegen veroorzaken. Dan afbinden en doorsnijden de gastroduodenal ader en slagader. Daarna, isoleren van de coeliakie stam en de gemeenschappelijke leverslagader en doorsnijden de linker maag arterie en de milt slagader. Incise de overbelaste galwegen, en de invoering van een 20-G stent in. De positionering van de stent moet zorgen voor de afvoer van het gehele hilair galweg systeem. Doorsnijden de galwegen distaal van de stent. </li><li> Isoleer de infrahepatic segment van de vena cava recht boven de rechter nierader. Perfusie </li><li> Na ligatie van de aorta boven de coeliakie stam, klem de poortader en de incisie het. Introduceren de perfusie katheter (14 G) in de poortader, en het uitvoeren van de perfusie met 30 ml van histidine-tryptofaan-ketoglutarate (HTK)-oplossing (12 cm H2O, 4 ° C). </li><li> Knip het membraan en suprahepatic vena cava om het perfusaat te stromen. </li><li> Accijnzen de coeliakie stam samen met een aorta-patch en spoel het met histidine-tryptofaan-ketoglutarate oplossing. Explantatie </li><li> Doorsnijden de infrahepatic vena cava recht boven de rechter nierader. </li><li> Plaats dan een stent met een diameter van 0,3 mm in de poortader en zet deze vast met een ligatuur. Tijdens de volgende bewerking, wordt de poortader gearterialiseerde via de rechter nierslagader. Doorsnijden de poortader distaal aan de stent. </li><li> Na ligatie van de suprahepatic vena cava, doorsnijden het samen met een manchet van het middenrif. </li><li> Explanteer het transplantaat en opslaan in histidine-tryptofaan-ketoglutarate (HTK)-oplossing bij 4 ° C in een plastic zak op het ijs. Plaats hoek hechtingen (8-0 Ethilon) in de infrahepatic vena cava. </li></ol></li><li> Ontvanger operatie <ol><li> Voer een mediane laparotomie en bereiden de infrahepatic vena cava. Dan isoleer de juiste nierslagader en de urineleider, afbinden van de urineleider en doorsnijden het. Klem de rechter nierslagader bij zijn oorsprong, dan afbinden van de juiste nierader. Dan na doorsnijding van beide renal schepen, voer dan de nefrectomie. Vervolgens, verkorten de juiste nierslagader, spoel het met heparine zoutoplossing (40 UI heparine / ml zoutoplossing). </li><li> Doorsnijden rechts renale ader proximaal aan de ligatuur na proximale en distale klemming van de infrahepatic vena cava van een ovaal lumen creëren infrahepatic de vena cava. Spoel de vena cava met heparine zoutoplossing. Implanteer het implantaat in de juiste renale gebied van de buik van de ontvanger. </li><li> Anastomose van de donor infrahepatic vena cava end-to-side op de recipient`s vena cava met een 8-0 Ethilon loopt hechtdraad. </li><li> Na spoelen met heparine / zoutoplossing, voeren de stent in de poortader in de rechter nierslagader (figuur 3). Sluit de poortader en de nierslagader met 2 steken (8-0 Ethilon). Fix het koppelen van stent in de nierslagader met een ligatuur (gevlochten zijde zwart 7-0). </li><li> Reperfusie mogelijk eerst de arteriële klem te verwijderen, zowel toenveneuze klemmen (Figuur 4). </li><li> Bereid de infrarenale aorta, plaats dan een proximale en distale microclamp en incisie de aorta precies tussen beide klemmen. Voer een end-to-side anastomose tussen de aorta en truncus coeliacus de donor, met een aorta pleister, met een 10-0 Ethilon actief hechtdraad. </li><li> Steek de galwegen in de twaalfvingerige darm: Breng een pursestring hechtdraad in de twaalfvingerige darm wand, maakt een kleine incisie in de twaalfvingerige muur in het midden van de pursestring. Introduceer de stent galwegen in de twaalfvingerige darm, en draai de pursestring hechtdraad. Tenslotte houdt het duodenum en galwegen nauw samen met twee steken (Ethilon 8-0) (figuur 5). </li><li> Voer vervolgens een subtotale resectie van de inheemse lever, voor het eerst beschreven door Emond et al. acuut leverfalen nabootsen. 7 </li><li> Bevestig de suprahepatic vena cava van het transplantaat samen met een manchet van diafragma, de laterale buikwand van de regeadres- seerde met 4-0 Vicryl hechtdraad. Spoel de buik met zoutoplossing (figuur 6). </li><li> Voor de spierlaag gebruik een 4-0 Vicryl loopt hechtdraad en voor de cutane een 3-0 Vicryl loopt hechtdraad. </li></ol></li></ol> 4 Herstel en postoperatieve behandeling <ol><li> Laat de dieren herstellen van narcose onder een infrarode verwarmende lamp. </li><li> Injecteer buprenorfine in een dosis van 0,03-0,05 mg / kg sc elke 8-12 uur gedurende 2 dagen. </li><li> Onderzoekt de dieren over de algemene toestand en tekenen van ziekte of infecties. </li></ol> 5 Berekening van de Eerste Inheemse Lever Gewicht Bereken de oorspronkelijke natieve levergewicht op de volgende wijze: aftrekken van het gewicht van de gereseceerd leverlobben van een totale gewicht van de lever (2,66% van het lichaamsgewicht (deze waarde met een standaardafwijking van +/- 0,49% werd bepaald in eerdere experimenten met n = 80 dieren van dezelfde stam en eenge)). 15

<ol><li>Boudjema, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+for+fulminant+and+subfulminant+hepatic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation for fulminant and subfulminant hepatic failure.</a> Transplantation. 59, 218-223 (1995).</li>
<li>Boudjema, K., Jaeck, D., Siméoni, U., Bientz, J., Chenard, M. P., Brunot, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporary+auxiliary+liver+transplantation+for+subacute+liver+failure+in+a+child%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Temporary auxiliary liver transplantation for subacute liver failure in a child.</a> The Lancet. 342, 778-779 (1993).</li>
<li>Chenard-Neu, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation%3A+Regeneration+of+the+native+liver+and+outcome+in+30+patients+with+fulminant+hepatic+failure+-+a+multicenter+European+study%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation: Regeneration of the native liver and outcome in 30 patients with fulminant hepatic failure - a multicenter European study.</a> Hepatology. 23, 1119-1127 (1996).</li>
<li>Gubernatis, G., Pichlmayr, R., Kemnitz, J., Gratz, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+partial+orthotopic+liver%E2%80%93transplantation+%28APOLT%29+for+fulminant+hepatic+failure%3A+first+successful+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Auxiliary partial orthotopic liver–transplantation (APOLT) for fulminant hepatic failure: first successful case report.</a> World J Surg. 15, 660-666 (1991).</li>
<li>Erhard, J., Lange, R., Giebler, R., Rauen, U., de Groot, H., Eigler, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterialization+of+the+portal+vein+in+orthotopic+and+auxiliary+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Arterialization of the portal vein in orthotopic and auxiliary liver transplantation.</a> Transplantation. 60, 877-879 (1995).</li>
<li>Erhard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+with+arterialization+of+the+portal+vein+for+acute+hepatic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl+Int%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation with arterialization of the portal vein for acute hepatic failure.</a> Transpl Int. 11, 266-271 (1998).</li>
<li>Emond, J., Capron-Laudereau, M., Meriggi, F., Bernuau, J., Reynes, M., Houssin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extent+of+Hepatectomy+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Extent of Hepatectomy in the rat.</a> Eur Surg Res. 21, 251-259 (1989).</li>
<li>Mas, A., Rode`s, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fulminant+hepatic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Fulminant hepatic failure.</a> Lancet. 349, 1081-1085 (1997).</li>
<li>Terpstra, O. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+grafting%3A+a+new+concept+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver grafting: a new concept in liver transplantation.</a> The Lancet. 342, 758(1993).</li>
<li>Terpstra, O. T., Reuvers, C. B., Schalm, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+heterotopic+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Auxiliary heterotopic liver transplantation.</a> Transplantation. 45, 1003-1007 (1988).</li>
<li>Schleimer, K., Lange, R., Rauen, U., Erhard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+in+acute+liver+failure+in+the+rat+-+an+illustrated+description+of+a+new+surgical+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Langenbecks+Arch+Surg%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation in acute liver failure in the rat - an illustrated description of a new surgical approach.</a> Langenbecks Arch Surg. 384 (2), 204-208 (1999).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiologic+microcirculation+of+the+heterotopically+transplanted+rat+liver+with+portal+vein+arterialization+depending+on+optimal+stent+diameter%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Sci+Monit%22%5BJournal%5D)">Physiologic microcirculation of the heterotopically transplanted rat liver with portal vein arterialization depending on optimal stent diameter.</a> Med Sci Monit. 28 (BR140-145), (2006).</li>
<li>Hong, H. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+of+portal+arterialization+with+auxiliary+liver+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hiroshima+J.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Study of portal arterialization with auxiliary liver in rats.</a> Hiroshima J. Med. Sci. 40, 29-33 (1991).</li>
<li>Higgins, G. M., Anderson, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+pathology+of+the+liver.+I--Restoration+of+the+liver+of+the+white+rat+following+partial+surgical+removal%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Path%22%5BJournal%5D)">Experimental pathology of the liver. I--Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal.</a> Arch. Path. 12, 186-202 (1931).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+with+flow-regulated+portal+vein+arterialization+offers+a+successful+therapeutic+option+in+acute+hepatic+failure--investigations+in+heterotopic+auxiliary+rat+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl+Int%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation with flow-regulated portal vein arterialization offers a successful therapeutic option in acute hepatic failure--investigations in heterotopic auxiliary rat liver transplantation.</a> Transpl Int. 19 (7), 581-588 (2006).</li>
<li>Lee, S., Edgington, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Surg.+Forum%22%5BJournal%5D)">Liver transplantation in the rat.</a> Surg. Forum. 17, 220-222 (1966).</li>
<li>Hess, F., Willemen, A., Jerusalem, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+in+the+rat%2C+influence+of+the+condition+of+the+recipient%27s+liver+on+the+fate+of+the+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation in the rat, influence of the condition of the recipient's liver on the fate of the graft.</a> Eur. Surg. Res. 9, 270-279 (1977).</li>
<li>Aguirrezabalaga, J., Arnal, F., Marini, M., Centeno, A., Fernandez-Selles, C., Rey, I., Gomez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+with+portal+arterialization+in+the+rat%3A+description+of+a+new+model%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation with portal arterialization in the rat: description of a new model.</a> Microsurgery. 22, 21-26 (2002).</li>
<li>Palmes, D., Dietl, K. H., Drews, G., Holzen, J. P., Spiegel, H. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+partial+orthotopic+liver+transplantation%3A+treatment+of+acute+liver+failure+in+a+new+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Langenbecks+Arch+Surg%22%5BJournal%5D)">Auxiliary partial orthotopic liver transplantation: treatment of acute liver failure in a new rat model.</a> Langenbecks Arch Surg. (386), 534-541 (2002).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+microcirculation+of+a+liver+graft+by+controlled+portal+vein+arterialization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Improved microcirculation of a liver graft by controlled portal vein arterialization.</a> J Surg Res. 116 (2), 202-210 (2004).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+hyperperfusion+causes+disturbance+of+microcirculation+and+increased+rate+of+hepatocellular+apoptosis%3A+investigations+in+heterotopic+rat+liver+transplantation+with+portal+vein+arterialization%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Portal hyperperfusion causes disturbance of microcirculation and increased rate of hepatocellular apoptosis: investigations in heterotopic rat liver transplantation with portal vein arterialization.</a> Transplant Proc. 38 (3), 725-729 (2006).</li>
</ol>

Alle auteurs verklaard geen conflicterende belangen.

De eerste heterotope extra rat levertransplantatie beschreven door Lee et al., 16 in 1966 gevolgd door Hess. 17 de poortader van de transplantaat anastomose met de poortader van de ontvanger. Tijdens deze procedure wordt de portal veneuze bloedtoevoer naar de inheemse lever aangetast. In 1991 speelde Hong HALT met PVA via de iliacale slagader van de ontvanger. 13 Zonder bloedtoevoer regelgeving massale portal en sinusoïde congesties opgetreden. <...

Acuut leverfalen vormt een ernstig probleem in de klinische geneeskunde leidt tot een mortaliteit van 60-80%. 8 In acuut leverfalen, extra levertransplantatie is een veelbelovende alternatieve behandeling voor de acute fase overbruggen. De inheemse lever wordt overgelaten om te regenereren en volgende voor de regeneratie van de immunosuppressie drugs kan worden gestaakt. Bijgevolg het transplantaat atrofische wordt. Maar de operatietechniek voor extra levertransplantatie wordt nog besproken. 1-3 In deze context, Terpstra meldde het gebrek aan ruimte voor het transplantaat, het portaal bloed stelen fenomeen en het probleem van veneuze congestie en drainage. 9-10 poortader van de donor werd geanastomoseerd end-to-side op de poortader van de ontvanger. Dit resulteerde in het portaal stroom concurrentie tussen het transplantaat en de inheemse lever en in de poortader trombose. De meeste van deze technische problemen kunnen worden vermeden met behulp van de APOLT-methode (orthotopic inplanting van extra segmenten). 4 van deze methode vergt echter uitgebreide resecties van zowel de inheemse lever en de graft. 4 In 1998, Erhard en zijn team ontwikkelde de heterotopische extra levertransplantatie (HALT) gebruik te maken van de poortader arterialization (PVA) (Figuur 1 ). De navel en de poortader van de lever natieve worden genomen met behulp van deze methode. Dat spaart de ontvanger van ongewenste neveneffecten, zoals portal veneuze trombose en portaal bloed stelen fenomeen, dat inheemse lever herstel zouden kunnen verstoren. Bovendien, geen uitgebreide leverresecties van de natieve lever en geënte vereist voor deze methode, met dus minder bloeden en nog resterende leverparenchymcellen massa te overbruggen (graft) en regeneratie (native lever). Deze techniek toonde veelbelovende eerste klinische resultaten. 5-6 Het doel van dit experimentele werk was de ontwikkeling van een HALT-techniek met poortader arterialization inde rat voor onderzoeksdoeleinden (figuur 2). In de inleidende experimenten hebben we geen ader rekening houden met de bloedstroom regeling van de gearterialiseerde portal, waardoor verstopping van de getransplanteerde graft na reperfusie en massale bloeden uit de lever capsule. 11 Sindsdien is de bloedstroom in de gearterialiseerde poortader werd gereguleerd door een stent met een binnendiameter van 0,3 mm en een lengte van 8 mm. Pilot experimenten was gebleken dat een stent diameter van 0,3 mm levert een gemiddelde bloedstroom in de gearterialiseerde poortader dat binnen het bovenste fysiologisch bereik (1,7 +/- 0,4 ml / min / g levergewicht). 12 Onze resultaten zonder bloed debietregeling correleren met de resultaten van Hong, die HALT. 13 In zijn experimenten uitgevoerd met PVA via de iliacale slagader van de ontvanger zonder bloed debietregeling massieve goed en sinusoïde opstoppingen plaatsgevonden. Het doel van onze video is demonstrate stap voor stap deze ne.w experimentele operatietechniek bij de rat. Op de lange termijn kan de voorgestelde techniek gebruikt worden bij de studie van de lever regeneratie en inter-lever concurrentie en poortader arterialization, poortader hyperperfusie en portal bloedstroom regelgeving.

<table><tbody><tr><td>Braided Silk black 7-0&nbsp;</td><td>Ethicon Products</td><td>892100</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl 3-0</td><td>Ethicon Products</td><td>J285G</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl 4-0</td><td>Ethicon Products</td><td>J284G</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon 8-0</td><td>Ethicon Products</td><td>1714G</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon 10-0</td><td>Ethicon Products</td><td>7770G</td><td></td></tr><tr><td>Vasofix safety 14G</td><td>B Braun</td><td>2758853</td><td></td></tr><tr><td>Vasofix safety 20G</td><td>B Braun</td><td>2758818</td><td></td></tr><tr><td>2 French (0.012&rdquo;/0.3 mm ID x 0.025&rdquo;/0.6 mm OD) x 24&rdquo;/60 cm polyurethane catheter</td><td>Access technologies a division of Norfolk Medical, Inc., Illinois, USA</td><td>CNC-2P</td><td></td></tr><tr><td>HTK solution, Custodiol</td><td>Dr. Franz K&ouml;hler Chemie GmbH, Alsbach-H&auml;hnlein, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isofluoraan 5 %</td><td></td><td></td><td>Elk generiek</td></tr><tr><td>Heparine</td><td></td><td></td><td>Elk generiek</td></tr><tr><td>0,9% zoutoplossing</td><td></td><td></td><td>Elk generiek</td></tr><tr><td>Buprenorfine</td><td></td><td></td><td>Elk generiek</td></tr></tbody></table>

heterotopische auxiliary rat liver transplantation met flow-gereguleerd poortader arterialization in acuut leverfalen

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

In acuut leverfalen extra levertransplantatie is een interessante alternatieve benadering. Het doel is een tijdelijke steun, totdat de defecte natieve lever geregenereerd. 1-3 De APOLT-methode, de orthotope implantatie van hulpmiddelen segments- afwendt meeste technische problemen. Deze methode vereist echter uitgebreide resecties van zowel de natieve lever en de graft. 4 In 1998, Erhard ontwikkelde de heterotope extra levertransplantatie (HALT) gebruik poortader arterialization (PVA) (figuur 1). Deze techniek bleek veelbelovende eerste klinische resultaten. 5-6 We ontwikkelden een HALT-techniek fluxgeregelde PVA in de rat de invloed van fluxgeregelde PVA op graft morfologie en functie (figuur 2) te onderzoeken. Een lever transplantaat verminderd tot 30% van de oorspronkelijke grootte is heterotoop geïmplanteerd in de rechter nier gebied van de ontvanger na explantatie van de rechter nier.60; De infra-lever vena cava van het transplantaat werd geanastomoseerd met de infrahepatic vena cava van de ontvanger. De arterialization van poortader van de donor werd uitgevoerd via de ontvanger recht nierslagader met de stent techniek uitgevoerd. De bloedstroom regulatie van de gearterialiseerde poortader werd bereikt met het gebruik van een stent met een inwendige diameter van 0,3 mm. De coeliakie stam van het transplantaat was end-to-side anastomose met de aorta van de ontvanger en het galkanaal werd geïmplanteerd in het duodenum. Een subtotale resectie van de natieve lever uitgevoerd om acuut leverfalen veroorzaken. 7 Op deze wijze werden 112 transplantaties uitgevoerd. De perioperatieve overleving was 90% en de 6-weekse overleving was 80%. Zes weken na de operatie, de inheemse lever geregenereerd, tonen een toename in gewicht van 2,3 ± 0,8 g tot 9,8 ± 1 g. Op dit moment, het gewicht van de transplantaat daalde van 3,3 ± 0,8 g 2,3 ± 0,8 g. </p&gt; We waren in staat om veelbelovende resultaten op lange termijn te behalen in termen van graft morfologie en functie. HALT met de fluxgeregelde PVA betrouwbaar overbrugt acuut leverfalen tot de inheemse lever regenereert.

De gemiddelde duur van de transplantatie was ongeveer 150 minuten. De koude ischemie bedroeg 64 +/- 7 min, de warme ischemie tijd minder dan 25 minuten. De perioperatieve overleving was 90% en de 6-weekse overleving was 80%. Het verlies 20% het gevolg van peritonitis door dislocatie en biliaire stent lekkage (vier dieren) tijdens de eerste postoperatieve week en vanwege longontsteking, intra-abdominale abcessen, ileus (zeven dieren) gedurende de volgende vijf weken. De overlevende dieren war...

Auxiliary levertransplantatie biedt een tijdelijke ondersteuning in acuut leverfalen, tot de regeneratie van het falende lever. Heterotopisch extra levertransplantatie (HALT) met poortader arterialization (PVA) maakt voldoende leverfunctie. We ontwikkelden een analoge techniek in de rat, de invloed van de poortader arterialization de morfologie en functie van het transplantaat te onderzoeken.

Heterotopische Auxiliary Rat Liver Transplantation Met Flow-gereguleerd poortader Arterialization in acuut leverfalen

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Acuut leverfalen vormt een ernstig probleem in de klinische geneeskunde, met een mortaliteitspercentage van 60 tot 80% bij acuut leverfalen. Auxiliaire levertransplantatie is een veelbelovende alternatieve therapie. Na regeneratie van de eigen lever kan de immunosuppressie worden gestaakt en kan het levertransplantat worden geëxplanteerd of worden gelaten om te atrofiëren.De operatieve techniek voor eenstapsstaps levertransplantatie is echter controversieel. De APOL-methode, waarbij behulpzame segmenten orthotoop worden geïmplanteerd, voorkomt de meeste technische problemen die kunnen optreden. Deze methode vereist echter uitgebreide resecties van zowel de eigen lever als het transplantaat.In 1998 startten Erhart en zijn team de heterotope hulp-levertransplantatie, genaamd halt. Door gebruik te maken van een portaalveen-arterie (PVA) liet deze techniek veelbelovende initiële klinische resultaten zien. Wij hebben voor onderzoeksdoeleinden een halt-techniek ontwikkeld met een debietgereguleerde portaalveen-arterie in de rat. Deze video illustreert in detail deze nieuwe experimentele techniek. Er werden 24 syngene mannelijke Louis-ratten met een gewicht van 250 tot 350 gram geopereerd.De operaties bij de donor en de ontvanger werden uitgevoerd onder inhalatieanesthesie. De algemene anesthesie van de dieren werd geïnduceerd met isofluraan in een plexiglasbox die was aangesloten op het anesthesieapparaat bij een zuurstofdoorstroom van één liter per minuut. De vaporizer had een concentratie van 5% isofluraan.De anesthesie werd gehandhaafd op 1,5%. Goedkeuring van de lokale ethische commissie werd verkregen voor alle experimenten, die werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen voor dierbescherming. Tijdens de volgende operatie wordt de poortader gearterialiseerd via de rechter nierslagader.De bloedstroom in de gearterialiseerde poortader wordt gereguleerd door een stent met een binnendiameter van 0,3 millimeter en een lengte van acht millimeter. Voorlopige experimenten hebben aangetoond dat een stentdiameter van 0,3 millimeter een gemiddelde bloedstroom in de gearterialiseerde poortader oplevert die binnen het bovenste fysiologische bereik ligt.De hepatische microcirculatie wordt gevisualiseerd met OPS-imaging, een reflectiespectroscopietechniek die real-time observatie van de hepatische microcirculatie in vivo mogelijk maakt. Zonder gebruik van contrastmiddelen en onder immersie in fysiologische zoutoplossing wordt de probe voorzichtig op het oppervlak van de rechter leverkwab geplaatst. Het is hierbij belangrijk om het leverparenchym niet samen te drukken.De donoroperatie wordt eerst gedemonstreerd na een mediane laparotomie. De linkerlaterale lob en de mediane lob van het transplantaat worden geresecteerd zoals beschreven door Higgins. Hier ziet u de preparatie van het hepatoduodenale ligament.De galgang wordt eerst afgebonden om stuwing en dilatatie van de kleine galgang te induceren. De gastroduodenale vene en arterie worden afgebonden en doorgesneden. Vervolgens worden de truncus coeliacus, de arteria hepatica communis, de arteria gastrica sinistra en de arteria splenica geïsoleerd.De arteria gastrica sinistra en de arteria splenica worden doorgesneden. Hier ziet u de truncus coeliacus en hier de arteria hepatica communis. De gestuwde galgang wordt ingesneden en een 20 gauge stent wordt hierin ingebracht.De positionering van de stent moet de drainage van het gehele galgangsysteem van de lever waarborgen. De galgang wordt distaal van de stent doorgesneden. Het infrahepatische segment van de vena cava wordt geïsoleerd vlak boven de rechter niervene.Hier ziet u de TUS na preparatie, na ligatie van de aorta boven de truncus coeliacus. De vena portae is afgeklemd en ingesneden. De perfusiekatheter wordt nu ingebracht en de perfusie wordt uitgevoerd met 30 milliliters histidine-tryptofaan-glucose-oplossing.Het diafragma en de vena cava superior worden doorgesneden om het portaal bloed te laten uitvloeien. De vena cava inferior samen met een aortapatch wordt weggesneden en gespoeld met een histidine-tryptofaan-ketoglutaraatoplossing. De vena cava inferior wordt doorgesneden vlak boven de vena renalis dextra.Vervolgens wordt een stent met een diameter van 0,3 millimeter in de poortader geplaatst en met de ligatuur vastgezet. De poortader wordt distaal van de stent doorgesneden. Hier ziet u de galgang, de poortader, de truncus coeliacus en de vena cava infrahepatica.Na ligatie van de vena cava suprahepatisch wordt deze samen met een manchet van het diafragma doorgesneden. Het transplantaat wordt geëxplanteerd en bewaard in een histidine-tryptofaan-ketoglutaraatoplossing bij vier graden Celsius in een plastic zak op ijs. Vervolgens worden hechtingen geplaatst in de vena cava infrahepatisch. De operatie van de ontvanger wordt hierna gedemonstreerd.Na de laparotomie en preparatie worden eerst de vena cava infrahepatica en de rechter nierarterie geïsoleerd. Vervolgens wordt de ureter afgebonden en doorgesneden. Nadat de rechter nierarterie bij de oorsprong is afgeklemd, wordt de rechter niervene afgebonden.Na de transectie van beide nierbloedvaten wordt de nefrectomie uitgevoerd. Vervolgens wordt de rechter nierarterie verkort en gespoeld met een heparine-zoutoplossing, nadat de infrahepatische vena cava proximaal en distaal is afgeklemd. De rechter niervene wordt proximaal van de ligatuur getransecteerd.Op deze wijze wordt een ovaal lumen gecreëerd in de infrahepatische vena cava. Het transplantaat wordt onder de eigen lever geplaatst. De infrahepatische vena cava van de donor wordt end-to-side geanastomoseerd aan de vena cava van de ontvanger met een lopende hechting van 8-0 ethyleen.Na het spoelen met heparinesoutoplossing wordt de stent in de poortader in de rechter nierslagader ingebracht. De poortader en de nierslagader worden met twee hechtingen verbonden. Het gebruik van een stent met een binnendiameter van 0,3 millimeter en een lengte van acht millimeter maakt een arterioveneuze anastomose mogelijk met gestandaardiseerde, gereguleerde instroompercentages.De verbindingsstent wordt met een ligatuur in de nierslagader vastgezet om reperfusie mogelijk te maken. Eerst wordt de arteriële klem verwijderd, gevolgd door beide veneuze klemmen. Nu ziet u de microcirculatie op het moment van reperfusie, beginnend bij de interlobulaire vaten, doorlopend langs de sinusoïden en uitmondend in de centrale vene van het leverlobule.Hier ziet u nu het gereperfuseerde transplantaat, de gearterialiseerde poortader en de galgang. De infrarenale aorta wordt geprepareerd en vervolgens afgeklemd en ingesneden. Een end-to-side anastomose tussen de aorta en de truncus coeliacus wordt uitgevoerd met behulp van een aortapatch en een doorlopende hechting met 10 O ethyleenhechtdraad.Nadat een purse-stringhechting is aangebracht, wordt een kleine incisie in de wand van het duodenum gemaakt. De gestentte galgang wordt vervolgens in het duodenum ingevoerd en de purse-stringhechting wordt aangetrokken. Ten slotte worden het duodenum en de galgang stevig aan elkaar vastgezet met twee hechtingen.Hier ziet u het gereperfuseerde transplantaat en de eigen lever die sub-totaal was geresecteerd om acuut leverfalen na te bootsen. De dieren kregen postoperatief elke acht tot 12 uur een subcutane injectie buprenorfine, gedurende twee dagen.De perioperatieve overlevingskans was 90% en de overlevingskans na zes weken was 80%. Tijdens de eerste postoperatieve week stierven vier ratten aan peritonitis als gevolg van een dislocatie van de stent en galweglekkage. Bovendien stierven zeven ratten aan pneumonie, een intra-abdominale abces of ileus. De overlevende dieren verkeerden in een uitstekende algemene conditie.Zes weken na de operatie waren de parameters van de leversynthese binnen het normale bereik. Hier ziet u de wetenschappers zes weken na heterotopische hulplevertransplantatie bij ratten met een arterie voor de poortader. Zes weken na de operatie was de oorspronkelijke lever geregenereerd, waarbij een gewichtstoename zichtbaar was van 2,3 plus of min 0,8 gram naar 9,8 plus of min 1 gram.Op dit tijdstip was de GRAT atroof en nam het levergewicht af van 3,3 ± 0,8 gram naar 2,3 ± 0,8 gram. Het totale gewicht van beide levers lag binnen de fysiologische ratio van levergewicht ten opzichte van lichaamsgewicht in de histopathologische kleuring met hematoxyline en eosine zes weken na stopzetting. Er werden normale hepatocyten waargenomen, zonder oedeem of vette degeneratie.Alle grafieken vertoonden een lichte proliferatie van galgangepitheel en cholangitis als gevolg van slibvorming. Slechts in twee grafieken kon necrose van hepatocyten van lage graad worden waargenomen. Het gebruik van een stent met een binnendiameter van 0,3 millimeter en een lengte van acht millimeter resulteert in een gemiddelde poortaderbloedstroom na reperfusie van de gearterialiseerde poortader die binnen het bovenste fysiologische bereik ligt.De galafvoer is de achilleshiel van levertransplantaties. Bij levertransplantaties bij ratten overlijden de ontvangers vaak in de eerste postoperatieve dagen door galstroomlekkage en peritonitis. Wij voeren de colo-doho-ostomie uit met behulp van een stent, een perstring-hechting en twee aanvullende hechtingen die deze veiligstellen tegen lekkage en loskoppeling.Met deze techniek werden de galwegcomplicaties teruggebracht tot 4%. In deze huidige studie werd een subtotale resectie van de eigen lever uitgevoerd. We gebruiken deze methode, voor het eerst beschreven door amond, om acuut leverfalen op te wekken. In tegenstelling tot het gebruik van hepatotoxische middelen is deze methode gestandaardiseerd en vertoont deze geen bijwerkingen op andere orgaansystemen of op het transplantaat.In tegenstelling tot orthotope levertransplantatie is er geen terminale hepatische fase. Tijdens de heterotope levertransplantatie kan de Anas worden uitgevoerd zonder tijdsdruk. Bovendien is er in de heterotope positie geen hinder van het bewegende diafragma.Bovendien wordt de poortader van de ontvanger niet afgeklemd, waardoor veneuze congestie van de dunne darm, milt, pancreas en maag wordt voorkomen. Met deze techniek waren we in staat om veelbelovende resultaten op lange termijn te verkrijgen wat betreft graftmorfologie en -functie bij heterotopestroomgereguleerde auxiliary rattenlevertransplantatie met poortaderarterialisatie. Poortaderarterialisatie is een innovatieve techniek die weinig valkuilen biedt en eenvoudig aan te leren is.Deze techniek is geschikt om het effect van portalveneuze en arteriële hepatische hyperperfusie, en de regulatie van de bloedstroom op de functie en morfologie van de levermicrocirculatie te onderzoeken. Dit model maakt toekomstige studies naar leverregeneratie bij interhepatische competitie mogelijk.

heterotopic-auxiliary-rat-liver-transplantation-with-flow-regulated

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

We een gemakkelijk te stellen herziening van de klassieke twee manchet techniek orthotope levertransplantatie in rat.

Orthotope levertransplantatie bij ratten

Orthotope levertransplantatie bij ratten is een onmisbare experimenteel model voor biomedisch onderzoek. Hier presenteren we onze chirurgische procedures voor orthotope rat levertransplantatie met een lever-arteriële reconstructie met behulp van een 50% gedeeltelijke graft.

Chirurgische ingrepen voor een Rat Model van deelspoelen orthotope levertransplantatie met hepatische arteriële reconstructie

Experimenteel dieronderzoek speelt een cruciale rol in de ontwikkeling van klinische transplantatiepraktijk. Het orthotopische varkenslevertransplantatiemodel (OLTx) lijkt sterk op menselijke omstandigheden en wordt vaak gebruikt in klinisch georiënteerd onderzoek. Het volgende protocol bevat alle informatie voor een betrouwbaar varkens-OLTx-model met behulp van een actieve porto-cavale-jugulaire shunt.

Techniek van varkenslever Procurement en Orthotope transplantatie met behulp van een actieve Porto-Caval Shunt

We beschrijven een nieuwe techniek voor heterotope abdominale hart-longtransplantatie (HAHLT) bij ratten. De transplantaatconfiguratie resulteert in een gedeeltelijk belaste graftcirculatie, waardoor een directe functionele beoordeling mogelijk is. Dit model kan worden gebruikt voor acute of chronische studies van de functie en het immunologische status van het getransplanteerde graft.

Rat Heterotope Abdominale Hart / Single-longtransplantatie in een Volume geladen configuratie

Hier, wordt een protocol met betrekking tot de gedeeltelijke levertransplantatie opnieuw arterialized rat gepresenteerd. 70% lever was precies gereseceerd in vivo met behulp van een bijgewerkte techniek van het vaartuig georiënteerde hepatectomy. De hepatische slagader werd gereconstrueerd op een end-to-side wijze. De manchet techniek was aangepast zodat het verkorten van de infrahepatic vena cava anastomose.

Opnieuw Arterialized Rat gedeeltelijke lever transplantatie met een in vivo vaartuig georiënteerde 70% Hepatectomy

De wederopbouw van de suprahepatic vena cava (SHVC) blijft een moeilijke stap in rat orthotopic lever transplantatie. In dit artikel tonen we een stapsgewijze protocol voor SHVC wederopbouw in ratten met behulp van een roman magnetische wapendrager-techniek.

Een Rat Model van Orthotopic met behulp van een roman magnetische Anastomosis techniek voor Suprahepatic Vena Cava wederopbouw levertransplantatie

Het doel van deze studie is om de rat orthotopische levertransplantatie model te wijzigen om beter te vertegenwoordigen menselijke levertransplantatie en verbetering van de overleving van de ontvanger. De gepresenteerde methode hersteld leverslagaderlijke instroom door het aansluiten van de donor lever gemeenschappelijke lever slagader aan de juiste lever van de ontvanger slagaderslagader.

Verminderde complicaties na arteriële heraansluiting in een ratmodel van orthotopische levertransplantatie

Dit artikel geeft een gedetailleerde beschrijving van hoe een diermodel van de anhepatische fase (leverischemie) bij ratten kan worden gebouwd om fundamenteel onderzoek naar ischemie-reperfusieletsel na levertransplantatie te vergemakkelijken.

Orgaan Ischemia-Reperfusie Letsel door het simuleren van hemodynamische veranderingen in rat levertransplantatie model

Het hier beschreven heterotope hulplevertransplantatieprotocol bij ratten biedt een praktisch onderzoeksinstrument voor het onderzoeken van mechanismen van afstoting van het levertransplantaat. Dit model helpt bij het verlichten van de chirurgische hindernissen en dierlijke stress van orthotope levertransplantatie bij ratten.

Heterotopisch aanvullend transplantaatmodel voor ratten in de hele lever met behulp van een hepaticouretostomie voor onderzoeken naar afstoting van transplantaten

Het manuscript beschrijft de stappen die nodig zijn om de heterotopische harttransplantatie uit te voeren in de muis.

Muizen Heterotope Heart Transplant Techniek

Leer heterotopische auxiliaire levertransplantatie bij ratten met flow-gereguleerde poortaderarterialisatie. Deze innovatieve techniek onderzoekt de effecten van portale hyperperfusie op levermicrocirculatie en functie.

Heterotopische Auxiliary Rat Liver Transplantation Met Flow-gereguleerd poortader Arterialization in acuut leverfalen

Meer video's verkennen