Een volledig geautomatiseerde Knaagdieren Conditioning Protocol voor Sensomotorische Integratie en cognitieve controle-experimenten

Het algemene doel van het volgende experiment is om een geautomatiseerd gedragsframework te introduceren voor operante conditionering van knaagdieren om complexe cognitieve taken te testen. De gedragstaak is een ontwerp met vijf gaten voor neussteken dat conventioneel wordt gebruikt voor studies met vijf opeenvolgende reactietijdtaken. De proefpersonen moeten hun snuit binnen een fixatiegat houden tot de presentatie van een go-wachtrij na een korte vertragingsperiode.

Een auditieve instructiewachtrij wordt gepresenteerd tijdens de fixatie-epoch om het onderwerp te begeleiden bij het kiezen van een toekomstige motorische doelwit om een beloning te ontvangen. Het gebruik van een auditieve wachtrij maakt goed gedefinieerde overgangen mogelijk tussen verschillende taak-epochen en maakt het mogelijk om meerdere aspecten van gedrag te bestuderen, evenals neuronale mechanismen van werkgeheugen, besluitvorming en motorische planning. Het belangrijkste voordeel van deze techniek boven bestaande methoden, zoals doolhofnavigatie-experimenten, is dat openlijk motorisch gedrag dat kan worden verward door systematische variaties in de traject van het onderwerp, wordt geminimaliseerd tijdens de kritieke epoch van de taak.

Hoewel deze methode inzicht kan geven in motorische controle, kunnen studies ook worden gebruikt om andere hoge cognitieve processen te onderzoeken, zoals perceptie, aandacht en geheugenvorming. Het demonstreren van de procedure zal Dylan Miller zijn, een bachelorstudent uit mijn lab. Het volgende onderzoek wordt uitgevoerd in een operatievoorwaardebox bestaande uit een muur met vijf neussteekgaten aan één kant en een voederbak aan de andere kant.

Het middelste neussteekgat wordt beschouwd als een fixatiegat en de vier andere gaten, twee aan elke kant van het fixatiegat, worden beschouwd als motordoelgaten. Elk gat is uitgerust met een driekleurig LED-licht en een infraroodstraalzenderdetectorsysteem dat detecteert wanneer het dier het fixatiegat binnenkomt en zich daaruit terugtrekt. Een programmeerbare toongenerator creëert een enkele frequentietoon met millisecondennauwkeurigheid en wordt losgekoppeld naar een luidspreker die in de operabox is gemonteerd.

De toongenerator en neussteekgaten worden bediend via het gedragsvolgsysteem. Gebruik tijdens de aanpassingsperiode gespecialiseerde software, behandel de dieren dagelijks en laat ze de operant conditioneringskamer en voederbak geleidelijk verkennen en beperk hun voedselinname gedurende een periode van drie dagen om 85 tot 90% van hun oorspronkelijke lichaamsgewicht te bereiken. De eerste stap is om de proefpersoon vertrouwd te maken met de neussteekgaten, voeruitgiftepoort en de associatie tussen de knipperende gaten en beloning.

Om dit te doen, selecteer een van de twee doelen op een willekeurig schema en speel de go-wachtrij, een witte auditieve ruis terwijl de LED binnenin het gat knippert. Stel de software in om het onderwerp te belonen bij bezoeken aan het gat. Tijd uit de proef na 30 seconden als het gat niet wordt bezocht en start een nieuwe proef om te helpen bij het selecteren van het doel.

Bestraf bezoeken aan onjuiste gaten door de proef te beëindigen gevolgd door vijf seconden zwartbeeld. Selecteer vervolgens een nieuw gat en start een nieuwe proef totdat het gewenste prestatieniveau is bereikt. Om het proefdier te trainen om in het fixatiegat te steken.

Om een proef te starten, knippert een gele LED binnenin het fixatiegat. Bij bezoek aan het fixatiegat speel onmiddellijk de go-wachtrij en start een nieuwe proef. Zodra het proefdier leert om het fixatiegat te bezoeken, leer het om hun neus gedurende een bepaalde periode in het gat te houden.

Om dit te doen, wacht tot het proefdier het fixatiegat bezoekt en beëindig de proef. Als het proefdier zich binnen 500 milliseconden terugtrekt, straf voortijdige terugtrekkingen door een zwartbeeldperiode van zeven seconden. Speel anders de go-wachtrij en beloon de juiste bezoeken door een voedselpellet te leveren.

De volgende stap is om de auditieve instructiewachtrij te introduceren als een auditieve toon met een enkele frequentie, gepulst en in drietallen met een pulsduur van 150 milliseconden en interpulsinterval van 100 milliseconden. Verhoog bovendien de lengte van de vertragingsperiode tot een gemiddelde van 1,5 seconden. Kies een willekeurige lengte van de vertragingsperiode bij elke proef op basis van een uniforme dichtheid tussen 1,3 tot 1,8 seconden.

Speel de instructiecue onmiddellijk nadat het proefdier het fixatiegat is binnengekomen. Wijs twee instructiecues toe aan elk van de doelen. Gebruik echter in dit stadium slechts één cue geassocieerd voor elk doel totdat de proefpersonen bekender worden met de taak.

Laat het proefdier zowel auditieve als visuele hints gebruiken om het doelgat te selecteren totdat het gewenste prestatieniveau is bereikt. Om het proefdier te trainen om alleen auditieve hints te gebruiken, zet de knipperende LED's binnenin het doelgat uit, zodat het proefdier alleen auditieve instructiecues kan gebruiken. Introduceer de twee andere cues in de reeks willekeurig gepresenteerde instructiecues wanneer de gewenste prestatie is bereikt en herhaal de trainingstappen.

Zorg ervoor dat aan het einde van elke stap het proefdier een gedragsprestatie van meer dan 75% behoudt gedurende ten minste drie opeenvolgende sessies voordat u naar de volgende fase overgaat. Zodra de laatste fase is bereikt, houd het proefdier een week lang vast aan het protocol om ervoor te zorgen dat de prestatie op het gewenste niveau wordt gehandhaafd. Definieer de slagingspercentage als het percentage correcte bezoeken aan de doelen gedeeld door het totale aantal proeven.

Het slagingspercentage moet bij elke trainingsfase worden gemeten. De verschillende fouttypen omvatten vroegtijdige terugtrekking, het percentage van de proeven dat is verlopen vanwege vroege terugtrekkingen uit het fixatiegat, commissiefout, het percentage van mislukte proeven wanneer het proefdier een ongeconstrueerd doel bezoekt en een missiefout. Het percentage fouten wanneer het proefdier geen van de doelen bezoekt na het begin van de proef.

Voor