Huisvesting en verzorging van zebravissen

Een juiste husbandery is essentieel voor het succes van experimenten die bij zebravissen worden uitgevoerd. Optimale waterkwaliteit bevordert de gezondheid van de vissen en de reproduceerbaarheid van experimenten. Daarnaast is de eiproductie van zebravissen sterk afhankelijk van een goede voeding. Deze video beschrijft hoe de vissen in het laboratorium worden gehuisvest en gevoed, geeft tips over het hanteren en beheren van stammen, en biedt een inkijkje in hoe de omgeving van de zebravissen wordt gemanipuleerd in biologische experimenten.

Laten we beginnen met het doornemen van de basisprincipes van de habitat van de vis.

Wilde zebravisen zijn afkomstig uit zoet water uit de Himalaya. In dit klimaat brengen de vissen het grootste deel van hun dag door in langzaam stromende zoetwatermassa's.

Hoe wordt dit paradijs in het laboratorium nagebootst? Laten we beginnen met het belangrijkste onderdeel: het water. Hoewel zoet water eenvoudig verkrijgbaar lijkt, is kraanwater giftig voor zebravisen vanwege chloor en mogelijke verontreinigingen. Daarom moet aquariumwater door een zuiveringssysteem worden geleid, zoals een omgekeerde osmose-eenheid. Vervolgens worden zouten en pH-buffers aan het gezuiverde water toegevoegd om de saliniteit en pH te optimaliseren.

Om de experimentele efficiëntie te maximaliseren, worden veel vissen gehouden in een beperkte hoeveelheid water. Afvalstoffen hopen zich snel op met al die vissen die rondzwemmen, waardoor waterverversing essentieel is. Deze behoefte zorgt voor een hoge watervraag, waardoor visfaciliteiten een recirculatiesysteem gebruiken om het waterverbruik te minimaliseren. Vuil water wordt gefilterd en gesteriliseerd door UV-behandeling voordat het terugstroomt in het systeem.

Zebravisen worden gehouden in gespecialiseerde tanks, die in meerdere formaten verkrijgbaar zijn. Tanks zijn afgedekt om verdamping te verminderen en te voorkomen dat vissen ontsnappen. Om de tank in het systeem te kunnen integreren, heeft het deksel gaten waardoor constant schoon water stroomt. Het waterniveau blijft stabiel dankzij een overloopopening aan de achterzijde van de tank, die is afgedekt met een schot met kleine gaatjes waardoor vuil water, maar geen vissen, naar buiten kan stromen.

Ondanks de wateruitwisseling kunnen algen en vast afval zich nog steeds ophopen in de tanks, waardoor ze regelmatig gereinigd moeten worden.

Omgevingscontrole in visfaciliteiten is ook uiterst belangrijk. De temperatuur wordt gehandhaafd rond de 28 °C, of 80 °F. Om het circadiane ritme van de dieren te behouden, worden de lichten geregeld volgens een cyclus van 14 uur licht en 10 uur donker.

Nu we de huisvestingsomstandigheden voor zebravissen hebben besproken, gaan we over naar hun dieet.

In hun natuurlijke habitat consumeren zebravissen voornamelijk zoöplankton en insecten. Dit dieet wordt in het laboratorium nagebootst door een combinatie van droogvoer en kleine organismen. Larvale en juveniele vissen gedijen op levende micro-organismen zoals paramecia, terwijl volwassen vissen vaak commercieel verkrijgbare poeders en kleine kreeftachtigen, bekend als artemia, krijgen.

Deze organismen zijn bijzonder geschikt voor laboratoriumvoorbereiding, omdat hun eitjes bij kamertemperatuur als slapende cysten kunnen worden bewaard. Om de artemia klaar te maken voor consumptie, worden de harde buitenmantels verwijderd door behandeling met bleekmiddel. Vervolgens worden de gedecapsuleerde eitjes grondig gewassen. De eitjes worden daarna overgebracht naar een beluchtingstoren om ongeveer één dag te kunnen groeien in zout water. Ten slotte worden de uitgebroede artemia verzameld, gespoeld in een zeef en vervolgens in flessen gedaan voor het voeren. Vissen worden over het algemeen 2 - 3 keer per dag gevoed, waarbij levend en droog voer worden afgewisseld, en de waterstroom wordt tijdens deze periode stopgezet zodat het voer niet wegstroomt voordat het is opgegeten.

Nu u weet hoe u vissen moet huisvesten en voeren, is het tijd om te leren hoe u met uw visbestanden moet werken en deze moet bijhouden.

Laboratoriumfaciliteiten voor vissen huisvesten veel verschillende typen zebravis, van wildtype-stammen tot vissen waarvan het genoom is aangepast met disruptieve puntmutaties en ingebrachte transgenen. Om al deze vissen bij te houden, worden dieren met vergelijkbare genetische achtergronden samen gehouden in gelabelde tanks. Tanklabels moeten volledige identificerende informatie bevatten, waaronder het genotype van de vis en de geboortedatum.

De fertiliteit van zebravis begint af te nemen na het eerste levensjaar, dus bestanden moeten jaarlijks worden aangevuld. Zebravissen overleven niet goed als volledig inteeltstammen, dus moet de genetische diversiteit worden behouden door nakomelingen te verzamelen uit kruisingen van niet-verwante vissen, of "outcrosses".

Bij het outcrossen van transgene of mutante lijnen moeten nakomelingen met de gewenste genetische modificatie worden geïdentificeerd via fluorofoor-expressie of genotypering. Voor de genotypering wordt de vis eerst verdoofd in tricaine. Snijd vervolgens een klein stukje van de staartvin af als DNA-bron.

Isoleer tot slot het DNA uit het staartmonster en gebruik dit voor PCR-analyse om specifieke sequenties te identificeren. Houd elke vis in een eigen kleine tank met een identificatielabel terwijl u wacht op de resultaten.

Nu we de standaardkweekcondities voor vissen hebben besproken, bekijken we enkele manieren waarop deze standaarden worden aangepast om biologische processen te bestuderen.

De temperatuur van het systeemwater kan de gezondheid van zebravissen sterk beïnvloeden. Om een model voor diabetes mellitus te creëren, behandelen deze onderzoekers de vissen met het pancreastoxine streptozocin en huisvesten ze deze in tanks met een verlaagde watertemperatuur. De diabetische vissen vertonen de verwachte fenotypes, zoals schade aan de nieren en ogen, evenals een verminderde regeneratie van de staartvin, en kunnen worden gebruikt om de biologie van diabetes te onderzoeken.

Tanksystemen kunnen ook worden aangepast voor specifieke experimentele doeleinden. Studies naar het zwemgedrag van vissen kunnen worden gebruikt als indicator voor angst, agressie of sociaal gedrag. Hier wordt videotracking gebruikt om het verschil in zwemgedrag te analyseren tussen onbehandelde vissen en vissen die zijn behandeld met een neuroactief geneesmiddel. Studies als deze helpen ons begrip van de neurowetenschappen te vergroten en kunnen een hulpmiddel zijn voor de ontdekking van nieuwe medicijnen.

Veranderde lichtomstandigheden kunnen zebravissen ook beïnvloeden. Intensieve lichtbehandeling kan zelfs worden gebruikt om de lichtgevoelige cellen van het netvlies te ablateren. Deze vissen hebben het vermogen om beschadigd netvliesweefsel te herstellen door celproliferatie, wat van groot belang is voor wetenschappers die onderzoek doen naar retinale degeneratie bij mensen.

U heeft zojuist de video van JoVE over de instandhouding en het beheer van zebravis bekeken. We hebben de essentiële aspecten behandeld van hoe vissen in het laboratorium worden gehuisvest, gevoed en beheerd. Bedankt voor het kijken!