Gecontroleerde Corticale Impact Model voor traumatisch hersenletsel

Het algemene doel van deze procedure is om traumatische hersenletsels te veroorzaken met behulp van het gecontroleerde corticale impactmodel. Dit wordt bereikt door eerst een muis te anesthetiseren en voor te bereiden op een operatie. De tweede stap van de procedure is het uitvoeren van een C craniectomie.

De derde stap is om het impactsysteem in te stellen met de gewenste parameters. De laatste stap is om impact te geven op de blootgestelde hersenen. Uiteindelijk kunnen de resultaten de corticale letselkaviteit tonen door middel van beeldvorming van de gedissecteerde hersenen en immunohistochemie.

Over het algemeen zullen personen die nieuw zijn in deze methode worstelen omdat ze het moeilijk vinden om consistente hersenletsels te genereren. Het demonstreren van de procedure zal Dr. Shang Gao zijn, een onderzoeksmedewerker in ons laboratorium. Na anesthesie scheert een muis zijn hoofd tussen de oren, en reinigt de blootgestelde huid met afwisselende scrubs van 10% jodium en 70% ethanol.

Zorg er vervolgens voor dat de ogen worden gesmeerd zodat ze niet uitdrogen. Bevestig vervolgens de muis in het stereotactische frame, gebruikmakend van de oorbeugels en beetplaat. Het hoofd moet zeer stabiel zijn.

Begin de craniectomie met een longitudinale incisie in het midden van het hoofd met behulp van schaar. Gebruik vervolgens een hemostaat om de huid aan de zijkant vast te houden met een wattenstaafje. Veeg, reinig en leg de schedelbeenderen bloot. Laat het een minuut drogen voordat je verder gaat.

Eenmaal droog, gebruik pincetten om druk op de schedel uit te oefenen. Zorg ervoor dat de voorbereiding onbeweeglijk blijft. Identificeer de lambda en breg ma landmarks.

Teken vervolgens in het midden een cirkel met een diameter van vier millimeter die half een millimeter van de middenlijn is. Boor vervolgens langs de gemarkeerde cirkel om het bot gemakkelijk te breken, maar dring niet door tot de dura mater. Verwijder het stof zo nodig.

Gebruik vervolgens pincetten om het cirkelvormige bot af te breken en de dura mater bloot te leggen. De C craniectomie is de meest cruciale stap. Het produceren van consistente botvensterparameters zal een consistente letselernst mogelijk maken.

Zorg ervoor dat de juiste boorgrootte, snelheid en kracht goed worden gebruikt. Boor Het impactsysteem gebruikt een actuator om de impact in de schedel uit te voeren en heeft enkele parameters die moeten worden ingesteld. Stel de snelheid van de actuator in op drie meter per seconde.

Bevestig vervolgens de actuator aan het stereotactische frame. Gebruik de micro-manipulators om de actuator van drie millimeter breed op de open schedelgebied te positioneren. Pas vervolgens de punt van de actuator aan zodat deze parallel is aan het oppervlak van impact.

Om het nulpunt in te stellen, strekt u de actuator uit en laat het zakken tot de punt de locatie van de impact net raakt. Stel het overeenkomstige Z-kanaal op het frame op nul. Trek nu de punt in dit geval één millimeter terug.

Stel vervolgens de deformatiediepte in voor de geschikte traumatische hersenletsel, die de actuator zal verplaatsen. Druk vervolgens op de impactknop om het letsel na de impact te maken. Reinig eventueel bloed met een wattenstaafje, maar raak het letsel niet aan.

Verplaats de muis naar een warm kussen en bewaak het letsel Wanneer het bloeden is gestopt, naai dan het wondverband, en plaats de muis terug in een schone kooi op een warm kussen en laat hem daar overnacht herstellen. Na de impact onthullen de hoeveelheid zwelling, bloeding en cranale vervorming de ware ernst van het letsel. Een beperkte tot volledige doorbreking van de dura zal een groot verschil maken in de hoeveelheid bloeding en zorgt voor een lichte tot matige TBI.

Het fixeren van het weefsel en het bekijken ervan met microscopie onderscheidt gemakkelijk een matige en ernstige TBI. Hier wordt L-kleuring gebruikt om een controle te vergelijken met een muis die een matige TBI heeft ontvangen. Een letselkaviteit is zichtbaar die diep in de cortex doordringt.

Dit model kan worden gebruikt om dergelijke defamaties te onderzoeken, evenals neuronale dood en andere histopathologische veranderingen veroorzaakt door hersenletsels. Eenmaal beheerst, kan deze techniek in 15 minuten worden voltooid als deze correct wordt uitgevoerd.