Name: Human Skeletal Muscle biopsie procedures met behulp van de Modified Bergström Techniek (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 20 s
Description: Leer de gemodificeerde Bergström-techniek voor skeletspierbiopsie bij menselijke proefpersonen. Deze methode maakt histologische en biochemische analyses van spierweefsel mogelijk voor onderzoek naar spierfysiologie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Geen financiering te verklaren.

De skeletspieren beschreven procedure volgt de richtlijnen van de Appalachian State University Institutional Review Board. OPMERKING: Het team bestaat uit een operator (Ph.D. of MD opgeleid in de biopsie techniek), en ten minste een, maar idealiter, drie of meer technici. De exploitant is verantwoordelijk voor de uitvoering van en het toezicht op alle aspecten van de skeletspieren biopsie procedure. Een technicus (monteur # 1) is direct verantwoordelijk voor het bijstaan ​​van de operator met alle aspecten van het spier-extractie. Dit betekent onder meer dat de &quot;niet-steriel handen&quot; en af ​​te zuigen met een steriele injectiespuit. Een tweede technicus (monteur # 2) neemt in gesprek met onderwerp en massages andere been van de proefpersoon tijdens de procedure om de angst van het onderwerp te minimaliseren. De derde technicus (monteur 3 #) is verantwoordelijk voor de behandeling en de verwerking van de skeletspieren monster. Stroomafwaarts analytische maatregelen dicteren hoeveel additional technici nodig zijn voor de verwerking / voorbereiding van de skeletspieren monster. 1 Onderwerp Voorbereiding <ol><li> Verzamelen, te bereiden, te organiseren en de voor de spierbiopsie procedure (tabel 1) materialen. Ontsmet en steriliseer de Bergström naald (buitenste canule en innerlijke trocar) en de zuiger volgens de gangbare praktijk 16. </li><li> Beoordelen het toestemmingsformulier met het onderwerp. De skeletspieren biopsie deel van de Toestemming om vorm te gebruiken bij Appalachian State University Deelnemen is voorzien in online supplement 1. <ol><li> Praat met het onderwerp over de algemene aspecten van de spierbiopsie procedure met een focus op de mogelijke risico&#39;s van de procedure, voorbereiding van de huid, de toepassing van de verdoving, typische sensaties. Instrueer het onderwerp leest u de toestemming om vorm Activiteiten ondertekenen om te bevestigen dat de onderzoeksopzet en de procedures worden begrepen. </li></ol></li><li> Bevestigen dat de sOnder voorbehoud is niet allergisch voor &quot;___ Caine&quot; -type medicatie (bijvoorbeeld lidocaïne). </li><li> Instrueer het onderwerp te liggen in rugligging op een gewatteerde tafel met de dij bloot. Plaats twee wegwerp absorberende onderleggers met kunststof achterplaat onder het been van de proefpersoon. Plaats het been in een ontspannen wijze met een kleine opgerolde handdoek onder de hiel, zodat de knie volledig gestrekt is (verhoogd ~ 1 cm), die derhalve de vastus lateralis in een verkorte positie. </li><li> Heeft de exploitant opdragen de onder tijdelijk contract van de blootgestelde dijspier zodat de biopsie site kan worden gevisualiseerd. Opmerking: De vastus lateralis biopsie wordt anterieure de fascia lata (illiotibial band), ongeveer een derde van de afstand tussen de bovenzijde van de patella en de trochanter major 7. </li><li> Heeft de exploitant merk net onder (~ 0,5 cm) de incisie site met een fijne punt permanente marker. </li><li> Hebben de operator bepalen de geschatte dikte van de huidplooien bij PINChing de huidplooi. </li><li> Hebben de operator en technici hun handen wassen met warm water en zeep en trek wegwerphandschoenen. </li><li> Aandrijfsysteem verwijder het haar van een gebied ~ 15 cm x 15 cm rond de biopsie (via tondeuse). Let op: het knippen van het haar van de biopsie verhindert haar van het krijgen in de incisie tijdens de procedure en tijdens het sluiten, en ontharing zorgt voor een beter contact tussen de band sluitingen en de huid (zie 3.4). </li><li> Heeft de exploitant steriliseren het gebied met wattenstaafjes vooraf geweekt met een actueel antiseptische, (zoals povidonjood of chloorhexidinegluconaat voor onderwerpen die allergisch zijn voor jodium / schelpdieren). Begin in het midden en werk in concentrische cirkels naar de buitenkant van het uitgeknipte gebied. Bij minste tweemaal herhalen met een nieuw gedoopte wattenstaafje telkens. </li></ol> 2 biopsieprocedure <ol><li> Heeft de exploitant verwijderen disposable handschoenen, handen wassen met warm water en zeep, en don steriele chirurgische gloves behulp van aseptische techniek. </li><li> Heb technicus # 1 aanwezig de steriele doek met opening aan de exploitant. Hebben de exploitant, met behulp van aseptische techniek, plaatst het laken over de biopsie site naar een steriel veld te behouden. </li><li> Heeft technicus nr.1 aanwezig de operator een 5 ml injectiespuit voorzien van een 21 G naald behoud aseptische techniek. Reinig de bovenkant van de lidocaïne flacon met een alcoholdoekje. <ol><li> Heeft de exploitant onmiddellijk in te trekken 5 ml lidocaïne. Verwijder de 21 G-naald van de spuit en de naald weg te gooien in een naaldencontainer. </li><li> Heb technicus # 1 aanwezig de operator met een 1 ½-inch 25 G naald met behoud van aseptische techniek. Heeft de exploitant de plaats van de 1-½ inch naald op de spuit en evacueren de luchtbellen uit de spuit. </li></ol></li><li> Heeft technicus nr.1 spuiten ethylchloride op de incisie (~ 0,5 cm boven de onuitwisbare inkt markering op de huid) tot de huid lijkt te &quot;blancheren.&quot; <ol><li> Have de operator plaatst de naald ongeveer horizontale naar de huid in de dermis, zuig de naald en vervolgens infiltreren met -100 pl lidocaïne een &quot;bobbel&quot; diameter van 2-4 mm te produceren. <ol><li> Heeft de exploitant aspireren de naald (iets te trekken de zuiger van de spuit) om te bevestigen dat de naald niet in een bloedvat geplaatst. Als er bloed in de spuit, trekken de naald, gooi in een naaldencontainer, en opnieuw beginnen op 2,3. </li><li> Aandrijfsysteem vooraf de naald in het onderhuidse weefsel, zuig de naald, en infiltreren het weefsel met ~ 1 ml lidocaïne een bleb vormen. Zodra de blaar is verdwenen, steekt u de 1-½ inch naald op de-lidocaïne geladen spuit verticaal in de incisie, het stoppen van oppervlakkig naar de fascia. Opmerking: Het onderwerp kan een lichte tijdelijke prikkelend gevoel op de eerste injectie van lidocaïne (vergelijkbaar met een bijensteek) voelen. </li></ol></li><li> Zorg ervoor dat de operatof niet infiltreren de spier met lidocoine omdat het myotoxische 17-19. </li><li> Heeft de exploitant aspireren de naald en injecteer vervolgens langzaam de resterende 4 ml lidocaïne, terwijl de naald uit de dij. Plaats steriel gaasje op de injectieplaats en laat het onderwerp om te ontspannen, terwijl de plaatselijke verdoving van kracht wordt. </li></ol></li><li> Na 2-3 minuten, heb monteur # 1 aanwezig is de exploitant van een scalpel met behoud van aseptische techniek. <ol><li> Heeft de exploitant licht sonde de biopsie met de punt van de scalpel om te bevestigen dat het gebied wordt verdoofd. Indien nodig, te injecteren nog eens 3-4 ml lidocaïne in de incisie, zie 2.4.1.2. </li></ol></li><li> Heeft de exploitant te maken en in een gestrekte 1-cm incisie door de huid en de onderhuidse weefsels (~ 2-3 mm boven de inkt mark) parallel aan het dijbeen. <ol><li> Hebben de operator plaatst de scalpel diepere om een ​​incisie te maken door de fascia in de spier. Doe dit een keer in elke richting<html> . Opmerking: Het onderwerp kan een steek of de druk te voelen met de diepere snede als de scalpel snijdt in de spier. </li><li> Heb technicus # 2 gaan het onderwerp in gesprek en masseer het andere been. </li></ol></li><li> Heeft de exploitant plaats een liberale hoeveelheid steriel gaasje op de incisie en de plaats van de biopsie en de directe druk op de incisie om het bloeden te verminderen. <ol><li> Heb technicus # 1 sluit de 3-weg metalen kraan tot het beschikbare 60 ml spuit en de 30 cm extensie buis (figuur 1). </li><li> Heeft technicus nr.1 ene uiteinde van de conische plastic buis connector aan het vrije uiteinde van het verlengstuk en stop het andere uiteinde van de conische plastic buis connector in het grote einde van een 200 ul pipetpunt met ~ 15-18 mm de punt afgesneden. </li></ol></li></ol>jpg &quot;width =&quot; 500 &quot;/&gt; Figuur 1 De Bergström naald. (A) De Bergström naald (5 mm) bestaat uit de (a) buitenste canule en (b) inwendige trocar, de bijbehorende componenten omvatten (c) plunjer, (d) 200 ul pipetpunt met ~ 15-18 mm afgesneden , (e) conische plastic connector, (f) 3-weg kraan metaal, (g) 30 cm verlengstuk en (h) disposable 60 ml spuit. (B) Het Bergström naald (5 mm) en bijbehorende componenten geassembleerd. ( C) De binnenste trocar van de Bergström naald (5 mm) ingetrokken ongeveer 1 cm opent het venster van de buitenste canule. <ol start="9"><li> Nadat het bloeden is afgenomen, hebben technicus nr.1 open de autoclaaf gesteriliseerde zak en brengt het 5 mm biopsienaald en binnenste trocar (figuur 1) aan de machinist blijft aseptische techniek. <ol><li> Hebben de exploitant de montage van de naald (buitenste canule en innerlijke trocar), uitlijning controleren en glijdende actie. </li> &lt;/ Ol&gt; </li><li> Aandrijfsysteem stevig het naaldsamenstel (buitenste en binnenste canule trocar) met beide handen te voorkomen dat de binnenste trocar roteert. Hebben technicus nr.1 steek de cut pipetpunt in de bovenkant van het binnenste gedeelte van de trocar biopsienaald met een lichte neerwaartse draaiende beweging. Zorg ervoor dat technicus # 1 niet de exploitant of de biopsie naald, alleen de pipet tip raken. </li><li> Heeft de exploitant introduceren de biopsie naald in het weefsel door de incisie. Zoek de incisie in de fascia (verworven &quot;feel&quot;) met de punt van de biopsienaald. Voer de naald net voorbij de fascia en dan de hoek van de naald naar beneden in de richting van de vloer als de naald wordt gevorderd in de spier. Opmerking: Kunst kan wat licht ongemak (bijvoorbeeld, &quot;deep druk&quot; of milde krampen gevoel) als de incisie door de fascia zich met de punt van de biopsienaald en de naald wordt voortbewogen in de spier ervaren. <ol> &lt;li&gt; Heb technicus # 2 instrueren het onderwerp &quot;relaxed&quot; te blijven en hun dijspieren niet te contracteren, terwijl de operator is het bevorderen van de naald in de spier. </li></ol></li><li> Zodra de biopsie naald in positie, hebben de exploitant signaal monteur # 1 om de wegwerp 60 ml spuit te openen. <ol><li> Heb technicus # 1 Trek snel de wegwerp 60 ml spuit open voor de 40-50 cc merk zuigkracht te creëren binnen de biopsie naald. </li><li> Aandrijfsysteem trekt de binnenste trocar uit ongeveer 1 cm tot het raam van de buitenste canule geopend terwijl de positie van de buitenste trocar in de spier. Heeft de exploitant snel sluiten de binnenste trocar te snijden (clip) en het verzamelen van de spier monster. Heeft de exploitant signaal monteur # 1 tot zuigkracht los. </li><li> Heb technicus # 1 open de kraan naar de kamer om de zuigkracht te ontgrendelen. </li><li> Heeft de exploitant draai de biopsie naald 90 ° en herhaal het proces. Indien nodig, moet de exploitant REPEAt de rotatie procedure tot 3x (voor een totaal van 4 clips). </li></ol></li><li> Laat de operator direct te solliciteren tegendruk aan de incisie site met een steriel gaasje, terwijl het verwijderen van de biopsie naald uit de dij, en let niet te fascia of de huid te vangen. Indien significante weerstand voelt, opnieuw gemonteerd, terwijl de toepassing van een draaiende beweging aan de binnenste trocar. </li><li> Na verwijdering van de biopsienaald van de dij, de operator trekt de binnenste trocar terug 1 cm visueel inspecteren lumen van de buitenste canule in te schatten of een voldoende hoeveelheid weefsel werd verzameld. <ol><li> Heeft de exploitant de hand van de biopsie naald technicus # 1. Te onderhouden aseptische techniek ervoor zorgen dat monteur # 1 alleen raakt de naald, niet de exploitant. Heb technicus # 1 kant de biopsie naald technicus # 3. </li></ol></li><li> Heb technicus # 3 Verwijder het weefsel van de biopsie naald. <ol><li> Heb technicus # 3 gebruik de zuiger (figuur 1) en een paar fijne tip pincetzodat alle spierweefsel wordt uit de binnenste en buitenste trocart canule. </li><li> Heb technicus # 3 snel wegen van het monster om te bevestigen dat er een voldoende hoeveelheid spierweefsel werd verzameld en plaats de monsters op een ijskoude dissectie blok. </li></ol></li><li> Heb technicus # 3 zichtbare bindweefsel en vet zorgvuldig ontleden van de spier monsters. Hebben technicus # 3 bereidt de spieren monsters voor opslag volgens downstream analyses. Bijvoorbeeld, onmiddellijk plaatsen monsters in een cryovial en snap bevriezen in vloeibare stikstof, monteren en vries voor histologie, of plaats in een cryovial met RNase inhibitor, etc. </li><li> Indien nodig, herhaal dan de procedure met een tweede gesteriliseerde biopsie naald met behoud van aseptische techniek. </li></ol> 3 Sluiting <ol><li> Heeft de exploitant van toepassing directe druk op de biopsie site met een steriel gaasje en een ice pack voor 10-15 minuten. </li><li> Zodra hemostase is bereikt, moet de exploitant gebruik van alcohol prep pads om opgedroogd bloed uit het gebied rond de incisie te verwijderen. </li><li> Heeft technicus nr.1 onderhavige een buis actuele chirurgische lijm applicator en de operator. Heeft de exploitant assembleren de buis van chirurgische lijm en applicator zonder het aanraken van de applicator tip of de bovenkant van de buis. </li><li> Aandrijfsysteem trekt de incisie met een hand onder toepassing van een enkele laag van chirurgische kleefmiddel over de bovenkant van de droge incisie met anderzijds. Nadat de lijm uithardt (~ 90 sec) tape aanbrengen closuresperpendicular de incisie. Of sluit de incisie met twee steriele 4-0 hechtingen. </li><li> Heeft de exploitant van toepassing directe druk door het plaatsen van 03-04 februari &quot;x 2&quot; niet-steriele gaasjes op de incisie en bevestig met zelfklevende lijm wrap. </li><li> Laat de machinist het onderwerp mondelinge en schriftelijke instructies over de juiste wondverzorging, normale en abnormale reacties, en de activiteit van richtsnoeren voor de volgende 1 tot 4 dagen (zie online supplement 2). </li></ol>

<ol><li>Duchene, G. B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recherches+sur+la+paralysie+musculaire+pseudohypertrophique+ou+paralysie+myo-sclerosique%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Gen+Med%22%5BJournal%5D)">Recherches sur la paralysie musculaire pseudohypertrophique ou paralysie myo-sclerosique.</a> Arch Gen Med. 11 (30), (1868).</li>
<li>Bergstrom, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+electrolytes+in+man.+Determined+by+neutron+activation+analysis+on+needle+biopsy+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Scand+J+Clin+Lab+Invest+%28England%29%22%5BJournal%5D)">Muscle electrolytes in man. Determined by neutron activation analysis on needle biopsy specimens.</a> Scand J Clin Lab Invest (England). 14, (1962).</li>
<li>Bergstrom, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percutaneous+needle+biopsy+of+skeletal+muscle+in+physiological+and+clinical+research%29%5BTitle%5D)+AND+%22Scand+J+Clin+Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Percutaneous needle biopsy of skeletal muscle in physiological and clinical research).</a> Scand J Clin Lab Invest. 35, 609-616 (1975).</li>
<li>Bergstrom, J., Hultman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+study+of+the+glycogen+metabolism+during+exercise+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22Scand+J+Clin+Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">A study of the glycogen metabolism during exercise in man.</a> Scand J Clin Lab Invest. 19, 218-228 (1967).</li>
<li>Evans, W. J., Phinney, S. D., Young, V. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suction+applied+to+a+muscle+biopsy+maximizes+sample+size%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Sci+Sports+Exerc%22%5BJournal%5D)">Suction applied to a muscle biopsy maximizes sample size.</a> Med Sci Sports Exerc. 14, 101-102 (1982).</li>
<li>Hennessey, J. V., Chromiak, J. A., Della Ventura, S., Guertin, J., MacLean, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increase+in+percutaneous+muscle+biopsy+yield+with+a+suction-enhancement+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Phys%22%5BJournal%5D)">Increase in percutaneous muscle biopsy yield with a suction-enhancement technique.</a> J Appl Phys. 82, 1739-1742 (1997).</li>
<li>Tarnopolsky, M. A., Pearce, E., Smith, K., Lach, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suction-modified+Bergstrom+muscle+biopsy+technique%3A+experience+with+13%2C500+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22Muscl.%2C+%26+Nerve%22%5BJournal%5D)">Suction-modified Bergstrom muscle biopsy technique: experience with 13,500 procedures.</a> Muscl., & Nerve. 43, 717-725 (2011).</li>
<li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbohydrate+ingestion+influences+skeletal+muscle+cytokine+mRNA+and+plasma+cytokine+levels+after+a+3-h+run%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Carbohydrate ingestion influences skeletal muscle cytokine mRNA and plasma cytokine levels after a 3-h run.</a> J Appl Physiol. 94, 1917-1925 (2003).</li>
<li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+carbohydrate+ingestion+on+immune+changes+after+2+h+of+intensive+resistance+training%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Influence of carbohydrate ingestion on immune changes after 2 h of intensive resistance training.</a> J Appl Physiol. 96, 1292-1298 (2004).</li>
<li>Utter, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbohydrate+supplementation+and+perceived+exertion+during+prolonged+running%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Sci+Sports+Exerc%22%5BJournal%5D)">Carbohydrate supplementation and perceived exertion during prolonged running.</a> Med Sci Sports Exerc. 36, 1036-1041 (2004).</li>
<li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+cytokine+mRNA+changes+after+2.5+h+of+cycling%3A+influence+of+carbohydrate%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Sci+Sports+Exerc%22%5BJournal%5D)">Muscle cytokine mRNA changes after 2.5 h of cycling: influence of carbohydrate.</a> Med Sci Sports Exerc. 37, 1283-1290 (2005).</li>
<li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+quercetin+and+EGCG+on+mitochondrial+biogenesis+and+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Sci+Sports+Exerc%22%5BJournal%5D)">Effects of quercetin and EGCG on mitochondrial biogenesis and immunity.</a> Med Sci Sports Exerc. 41, 1467-1475 (2009).</li>
<li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quercetin%27s+Influence+on+Exercise+Performance+and+Muscle+Mitochondrial+Biogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Sci+Sports+Exerc%22%5BJournal%5D)">Quercetin's Influence on Exercise Performance and Muscle Mitochondrial Biogenesis.</a> Med Sci Sports Exerc. 42, 338-345 (2010).</li>
<li>Dumke, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quercetin%27s+effect+on+cycling+efficiency+and+substrate+utilization%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Physiol+Nut+Metab%22%5BJournal%5D)">Quercetin's effect on cycling efficiency and substrate utilization.</a> Appl Physiol Nut Metab. 34, 993-1000 (2009).</li>
<li>Nieman, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quercetin%27s+influence+on+exercise-induced+changes+in+plasma+cytokines+and+muscle+and+leukocyte+cytokine+mRNA%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Quercetin's influence on exercise-induced changes in plasma cytokines and muscle and leukocyte cytokine mRNA.</a> J Appl Physiol. 103, 1728-1735 (2007).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guideline+for+Disinfection+and+Sterilization+in+Healthcare+Facilities%5BTitle%5D)+AND+%22http%3A%2F%2Fwww.cdc.gov%2Fhicpac%2FDisinfection_Sterilization%2Ftoc.html%22%5BJournal%5D)">Guideline for Disinfection and Sterilization in Healthcare Facilities.</a> http://www.cdc.gov/hicpac/Disinfection_Sterilization/toc.html. , Centers for Disease Control and Prevention. (2008).</li>
<li>Faria, F. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+onset+and+duration+of+mobilization+affect+the+regeneration+in+the+rat+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Histol+Histopath%22%5BJournal%5D)">The onset and duration of mobilization affect the regeneration in the rat muscle.</a> Histol Histopath. 23, 565-571 (2008).</li>
<li>Carlson, B. M., Shepard, B., Komorowski, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+histological+study+of+local+anesthetic-induced+muscle+degeneration+and+regeneration+in+the+monkey%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ortho+Res%22%5BJournal%5D)">A histological study of local anesthetic-induced muscle degeneration and regeneration in the monkey.</a> J Ortho Res. 8, 485-494 (1990).</li>
<li>Yagiela, J. A., Benoit, P. W., Buoncristiani, R. D., Peters, M. P., Fort, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+myotoxic+effects+of+lidocaine+with+epinephrine+in+rats+and+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">Comparison of myotoxic effects of lidocaine with epinephrine in rats and humans.</a> Anesth Analg. 60, 471-480 (1981).</li>
<li>Coyle, E. F., Coggan, A. R., Hemmert, M. K., Ivy, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+glycogen+utilization+during+prolonged+strenuous+exercise+when+fed+carbohydrate%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Muscle glycogen utilization during prolonged strenuous exercise when fed carbohydrate.</a> J Appl Physiol. 61, 165-172 (1986).</li>
<li>Gibala, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brief+intense+interval+exercise+activates+AMPK+and+p38+MAPK+signaling+and+increases+the+expression+of+PGC-1alpha+in+human+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Brief intense interval exercise activates AMPK and p38 MAPK signaling and increases the expression of PGC-1alpha in human skeletal muscle.</a> J Appl Physiol. 106, 929-934 (1985).</li>
<li>Phillips, S. M., Tipton, K. D., Ferrando, A. A., Wolfe, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resistance+training+reduces+the+acute+exercise-induced+increase+in+muscle+protein+turnover%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Resistance training reduces the acute exercise-induced increase in muscle protein turnover.</a> Am J Physiol. 276, 118-124 (1999).</li>
<li>Davis, J. M., Murphy, E. A., Carmichael, M. D., Davis, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quercetin+increases+brain+and+muscle+mitochondrial+biogenesis+and+exercise+tolerance%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Quercetin increases brain and muscle mitochondrial biogenesis and exercise tolerance.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 296, 1071-1077 (2009).</li>
<li>Vissing, K., Andersen, J. L., Schjerling, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+exercise-induced+genes+induced+by+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Are exercise-induced genes induced by exercise.</a> FASEB J. 19, 94-96 (2005).</li>
<li>Lundby, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+expression+in+human+skeletal+muscle%3A+alternative+normalization+method+and+effect+of+repeated+biopsies%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Gene expression in human skeletal muscle: alternative normalization method and effect of repeated biopsies.</a> Eur J Appl Physiol. 95, 351-360 (2005).</li>
<li>Coyle, E. F., Coggan, A. R., Hemmert, M. K., Ivy, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+glycogen+utilization+during+prolonged+strenuous+exercise+when+fed+carbohydrate%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Muscle glycogen utilization during prolonged strenuous exercise when fed carbohydrate.</a> J Appl Physiol. 61, 165-172 (1985).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen belangenconflicten.

Deze video wordt stap voor stap overzicht van de skeletspier biopsie procedure gebruikt de ASU Human Performance Laboratory. Deze procedure, met kleine aanpassingen, werd gebruikt om ongeveer 1.600 spierbiopten verzamelen gedurende de afgelopen 13 jaar. De spier biopsie monsters zijn belangrijke gegevens verstrekt in sportvoeding gebaseerde onderzoeken, wat leidt tot belangrijke onderzoek ontdekkingen. Er zijn veel kritische technieken om bewust te zijn van bij het uitvoeren van de gewijzigd...

De percutane of &quot;semi-open&quot; biopsie gebruikte techniek skelet spierweefsel monsters uit menselijke patiënten en proefpersonen verkrijgen. Duchenne (1806-1875) wordt gecrediteerd als eerste een naald te construeren met een trocar naar skeletspieren van levende proefpersonen te verkrijgen via percutane biopsie 1. In de jaren 1960, Bergström introduceerde een percutane biopsie naald gelijk aan die beschreven door Duchenne 2-4. Twintig jaar later, Evans et al. 5 bewerkt de techniek door te zuigen door het snijden van de trocar Bergström naald. Deze wijziging kan de opbrengst van weefsel 3 te verbeteren tot 5-voudig 6,7 en wordt gebruikt in de klinische en biomedisch onderzoek instellingen. Deze techniek is en zal de diagnose van myopathieën en ons begrip van de structuur en functie van skeletspier stimuleren. De percutane spierbiopsie techniek straightforward. Wanneer correct gedaan, met strikte naleving van aseptische techniek, de bijbehorende risico&#39;s zijn minimaal. De spier biopsie procedure wordt beschouwd als een experimenteel instrument voor onderzoeksprojecten. Sommige academische instellingen maken het mogelijk opgeleide docenten onderzoekers met een Ph.D., met directe arts toezicht, om spier biopsieën en anderen vereisen een board-gecertificeerde arts om de techniek uit te voeren. De ASU biopsie team heeft met succes uitgevoerd dan 1.600 spierbiopten tijdens de afgelopen 13 jaar 8-15. Het doel van deze video is de gewijzigde Bergström naald percutane spierbiopsie techniek 5 beschrijven skeletspierweefsel monsters uit de vastus lateralis van proefpersonen.

<table><tbody><tr><td>Bergstr&ouml;m biopsienaald, 5 x 100 mm</td><td>Stille Surgical Inc.</td><td>119-29187-50</td><td>1 st</td></tr><tr><td>Durasorb blauw kussen</td><td>Fisher</td><td>22-031-340</td><td>doos van 300</td></tr><tr><td>Wegwerp Scheermes</td><td>Moore Medical</td><td>89760</td><td>1 st</td></tr><tr><td>Scheercrème</td><td>Moore Medical</td><td>92869</td><td>1 blik</td></tr><tr><td>Alcohol doekje</td><td>Moore Medical</td><td>98721</td><td>doos/200</td></tr><tr><td>Povidon-jood doekjes (3 pack)</td><td>Moore Medical</td><td>90691</td><td>pak van 50</td></tr><tr><td>Gezichtsmaskers</td><td>Fisher</td><td>19-039-690</td><td>doos van 50</td></tr><tr><td>Steriele handschoenen; maat 6.5</td><td>Moore Medical</td><td>68128</td><td>doos van 50 paar</td></tr><tr><td>Steriele handschoenen; maat 7.0</td><td>Moore Medical</td><td>68129</td><td>doos van 50 paar</td></tr><tr><td>Steriele handschoenen; maat 8.5</td><td>Moore Medical</td><td>68132</td><td>doos van 50 paar</td></tr><tr><td>Geventileerde tafeldoek</td><td>Moore Medical</td><td>92712</td><td>doos van 50</td></tr><tr><td>Lidocaine (1% HCl, zonder Epi)</td><td>Dealmed</td><td>427902</td><td>30 cc fles</td></tr><tr><td>Ethyl chloride spray</td><td>Dealmed</td><td>386020</td><td>3,5 fl. Oz. fles</td></tr><tr><td>5 ml spuit m/ 21 G naald</td><td>Fisher</td><td>14-827-48</td><td>doos van 100</td></tr><tr><td>25 G 5/8" naald</td><td>Fisher</td><td>14-826AA</td><td>doos van 100</td></tr><tr><td>25 G 1 1/2" naald</td><td>Fisher</td><td>14-826-49</td><td>doos van 100</td></tr><tr><td>Eenmalige scalpels m/ #11 mes</td><td>Fisher</td><td>0-8927-5B</td><td>doos van 20</td></tr><tr><td>60 ml Spuit</td><td>Fisher</td><td>13-689-8</td><td>doos van 40</td></tr><tr><td>~30 inch verlengslang</td><td>Fisher</td><td>14-169-7A</td><td>rol van 50 ft</td></tr><tr><td>Metalen stopkraan</td><td>Fisher</td><td>01-290-38</td><td>elke</td></tr><tr><td>Polypropyleen slang connector m/ taps toelopende uiteinden, 3,2 tot 5,5 mm</td><td>Fisher</td><td>15-315-28A</td><td>doos van 100</td></tr><tr><td>Gele pipetten tips (1-200 µl)</td><td>Fisher</td><td>02-681-2</td><td>snij ongeveer 15-18 mm van de punt af</td></tr><tr><td>Topische chirurgische lijm</td><td>Medline</td><td>MSC091076</td><td>doos van 36 buizen</td></tr><tr><td>Topische chirurgische lijm</td><td>Medline</td><td>MSC091076Z</td><td>doos van 6 buizen</td></tr><tr><td>Butterfly hechtingen (hechtstrips) 1/2" x 4" (6 per verpakking)</td><td>Moore Medical</td><td>93050</td><td>doos/300</td></tr><tr><td>Bandage, Strip, 3/4 x 3 inch</td><td>Fisher</td><td>19-027-202</td><td>pak van 100</td></tr><tr><td>Zelfklevende pleister (5 m rollen)</td><td>Fisher</td><td>19-027-768</td><td>doos van 36</td></tr><tr><td>1" papieren chirurgische tape</td><td>Fisher</td><td>19-027-761</td><td>doos van 12</td></tr><tr><td>Hechtdraad (4-0 omgekeerd snijdend, FS2)</td><td>Moore Medical</td><td>82926</td><td>doos van 36</td></tr><tr><td>4 x 4 Steriele gaas pads</td><td>Moore Medical</td><td>66949</td><td>pkg/50</td></tr><tr><td>2 x 2 Niet-steriele gaas pads</td><td>Moore Medical</td><td>37336</td><td>pkg/200</td></tr><tr><td>3 x 4 Niet-klevende pads</td><td>Moore Medical</td><td>74389</td><td>bx/100</td></tr><tr><td>Autoclaaf zakjes 3,5 x 9</td><td>Moore Medical</td><td>40390</td><td>doos van 200</td></tr><tr><td>Autoclaaf zakjes 5,25 x 10</td><td>Moore Medical</td><td>40391</td><td>doos van 200</td></tr><tr><td>Autoclaaf indicator tape</td><td>Moore Medical</td><td>31608</td><td>doos van 250</td></tr><tr><td>Labjassen&mdash;klein</td><td>Fisher</td><td>23-900-520A&nbsp;</td><td>10/pk</td></tr><tr><td>Labjassen&mdash;medium</td><td>Fisher</td><td>23-900-520B&nbsp;</td><td>10/pk</td></tr><tr><td>Labjassen&mdash;groot</td><td>Fisher</td><td>23-900-520C&nbsp;</td><td>10/pk</td></tr><tr><td>Germicide Wegwerpdoekjes</td><td>Moore Medical</td><td>62879</td><td>Can/160</td></tr></tbody></table>

human skeletal muscle biopsie procedures met behulp van de modified bergström techniek

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

De percutane biopsie techniek kunnen onderzoekers en clinici aan de skeletspieren weefsel monsters te verzamelen. De techniek is veilig en zeer effectief. Deze video beschrijft de percutane biopsie techniek met een aangepaste Bergström naald skeletspier weefselmonsters van de vastus lateralis van proefpersonen bekomen. Het Bergström naald bestaat uit een buitenste canule met een kleine opening (&quot;window&quot;) aan de zijde van de punt en een binnenste trocar met een snijblad aan het distale einde. Onder plaatselijke verdoving en aseptische omstandigheden wordt de naald voortbewogen in de skeletspieren via een incisie in de huid, onderhuids weefsel en fascia. Vervolgens wordt zuiging aangebracht op de binnenste trocar, wordt de buitenste trocar teruggetrokken, skeletspier weefsel getrokken in het raam van de buitenste canule door afzuigen en de binnenste trocar snel gesloten, waardoor het snijden of knippen van de skeletspier weefselmonster . De naald is 90 ° gedraaid60 en een snede gemaakt. Dit proces kan drie keer herhaald. Deze meervoudige snijtechniek geeft gewoonlijk een monster van 100-200 mg of meer bij gezonde proefpersonen en kan direct voor worden gedaan, tijdens en na een aanval van de uitoefening of andere interventie. Volgende post-biopsie dressing van de incisie, onderwerpen hervatten typisch hun activiteiten van het dagelijks leven meteen en volledig kunnen deelnemen aan krachtige fysieke activiteit binnen 48-72 uur. Kunst moet zware weerstandsoefening vermijden gedurende 48 uur om het risico van een hernia van de spier verminderen door de incisie in de fascia.

De spierbiopsie procedure als hierboven beschreven kan de onderzoeker snel en consistent verzamelen skeletspier weefselmonsters. De typische opbrengst bij gezonde, atletische proefpersonen is 200 mg of meer in een enkele doorgang met 3-4 clips. De procedure duurt 15-20 minuten, waarvan de meeste in voorbereiding op de incisie wordt besteed. In-oefening op basis van studies, zijn spier monsters vaak pre-en post-oefening gehouden, met een of twee monsters tijdens het herstel verzameld. Met dit ontwerp, het haar op de post...

Het doel van deze video is om de gemodificeerde Bergström skeletspier biopsietechniek bij menselijke proefpersonen te presenteren.

Human Skeletal Muscle biopsie procedures met behulp van de Modified Bergström Techniek

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

Het algemene doel van deze procedure is om de gemodificeerde Bergstrom-techniek te gebruiken om een biopsiemonster van de skeletspier te maken van de vastus lateralis van een menselijke vrijwilliger. Dit wordt bereikt door eerst de huid en het onderhuidse weefsel op de biopsieplek te verdoven. In de tweede stap wordt een incisie gemaakt door de huid en het onderhuidse weefsel en de fascia die de skeletspier bedekt.Vervolgens wordt de biopsienaad door de incisies in de skeletspier gebracht en wordt het biopsiemonster in de laatste stap verzameld. De biopsienaad wordt voorzichtig verwijderd en de incisie wordt gesloten met chirurgisch lijm. Uiteindelijk kunnen de biopsiemonsters van de skeletspier worden voorbereid voor histologische analyses en worden geanalyseerd op biochemische veranderingen en de expressie van specifieke eiwitten en genen onder verschillende oefencondities.Deze methode kan helpen om belangrijke vragen op het gebied van skeletspierfysiologie te beantwoorden, zoals wat de biochemische, moleculaire en cellulaire reacties zijn op intensieve oefening. De procedure zal worden gedemonstreerd door Dr. Gerald Ferris, de arts van ons lokale ziekenhuis, en Maschi Tanaka, ee

human-skeletal-muscle-biopsy-procedures-using-modified-bergstrm

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Myo-mechanische analyse van geïsoleerde Skeletal Muscle

De analyse van skeletspierweefsels om structurele, functionele en biochemische eigenschappen te bepalen, wordt enorm gefaciliteerd door een geschikte voorbereiding. Dit protocol beschrijft geschikte methoden om skeletspierweefsel voor te bereiden voor een breed scala aan fenotyperingsstudies.

Tissue Triage en Invriezen Modellen van Skeletal Muscle Disease

De belangrijkste aderente celtypen die zijn afgeleid van menselijk spierweefsel zijn myogene cellen en fibroblasten. Hier worden celpopulaties verrijkt met behulp van magnetisch geactiveerde celsortering op basis van het CD56-antigeen. Daaropvolgende immunolabeling met specifieke antilichamen en het gebruik van beeldanalysetechnieken maakt kwantificering van cytoplasmatische en nucleaire kenmerken in individuele cellen mogelijk.

Isolatie en Kwantitatieve Immunocytochemische karakterisering van primaire Myogene cellen en fibroblasten van Human Skeletal Muscle

Methoden voor biopsie van vastus lateralis, de voorbereiding van gezuiverde mitochondria, en respirometrische profilering worden beschreven. Het gebruik van kleine spiermassa maakt deze techniek geschikt voor onderzoekstoepassingen.

Voorbereiding en Respirometrische Beoordeling van Mitochondriën geïsoleerd van spierweefsel Verkregen door percutane naaldbiopsie

Deze video toont de techniek van percutane spierbiopsie van de menselijke vastus lateralis met behulp van de Weil-Blakesley conchotome.

menselijk<em&gt; Vastus lateralis</em&gt; Skeletal spierbiopsie Met behulp van de Weil-Blakesley Conchotome

We presenteren gedetailleerde protocollen voor het uitvoeren van Small-angle röntgendiffractie experimenten met behulp van intact muis skeletspieren. Met de brede beschikbaarheid van transgene muismodellen voor menselijke ziekten, kan dit experimentele platform een nuttig testbed vormen om de structurele basis van genetische spierziekten te...

Röntgendiffractie van intact Murine skeletspieren als een instrument voor het bestuderen van de structurele basis van spierziekte

We presenteren technieken voor het isoleren, kweken, karakteriseren en differentiëren van menselijke primaire spier voorlopercellen (Hmpc's) verkregen uit skeletspieren biopsie weefsel.  hmpc's verkregen en gekenmerkt door middel van deze methoden kunnen worden gebruikt om vervolgens onderzoek vragen met betrekking tot menselijke myogenese en skeletspier regeneratie aan te pakken.

Isolatie, cultuur, karakterisering, en differentiatie van menselijke spier voorlopercellen van de skeletspier biopsie procedure

Hier beschreven is een protocol voor directe immuunetikettering van necrotische myovezels in spier cryosecties. Necrotische cellen zijn permeabel voor serum proteïnen, waaronder immunoglobuline G (IgG). Het onthullen van de opname van IgG door myofibers maakt het mogelijk de identificatie en kwantificering van myovezels die necrose ondergaan ongeacht spieraandoening.

Immunolabeling Myofiber degeneratie in spier biopsies

Dit technische rapport beschrijft een variatie van de gewijzigde Bergström techniek voor de biopsie van de musculus tibialis voorste die vezelschade beperkt.

Verzameling skeletspierbiopten uit het superieure compartiment van human musculus Tibialis Anterior voor mechanische evaluatie

Een aangepaste postfixatieprocedure verhoogt het contrast van glycogeendeeltjes in weefsel. Dit artikel biedt een stapsgewijs protocol dat beschrijft hoe het weefsel moet worden behandeld, de beeldvorming moet worden uitgevoerd en stereologische methoden moeten worden gebruikt om onbevooroordeelde en kwantitatieve gegevens te verkrijgen over vezeltypespecifieke subcellulaire glycogeenverdeling in skeletspieren.

Kwantificering van subcellulaire glycogeenverdeling in skeletspiervezels met behulp van transmissie-elektronenmicroscopie

Dit protocol demonstreert isolatie van één vezel uit gevriesdroogde menselijke skeletspier- en vezeltypeclassificatie volgens Myosin heavy chain (MHC) isovorm met behulp van de dot blotting-techniek. Geïdentificeerde MHC I- en II-vezelmonsters kunnen vervolgens verder worden geanalyseerd op vezeltype-specifieke verschillen in eiwitexpressie met behulp van western blotting.

Vezeltype-identificatie van menselijke skeletspieren

Leer de gemodificeerde Bergström-techniek voor skeletspierbiopsie bij menselijke proefpersonen. Deze methode maakt histologische en biochemische analyses van spierweefsel mogelijk voor onderzoek naar spierfysiologie.

Human Skeletal Muscle biopsie procedures met behulp van de Modified Bergström Techniek

Meer video's verkennen