Name: Beoordeling van Muriene Oefening Endurance zonder het gebruik van een Shock Grid: Een alternatief voor Forced Exercise (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-14T16:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 52 s
Description: Leer een humane methode om uithoudingsvermogen bij muizen te meten zonder schokrooster. Deze techniek vermindert stress en geeft betrouwbare resultaten voor gedrags- en fysiologisch onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ondersteund door Merit Review # BX001026 van het Department of Veterans Affairs (LSQ), en het gebruik van de middelen en faciliteiten VA Puget Sound Systeem van de Gezondheidszorg, de Transgene Resource Core aan de Universiteit van Washington Nathan Shock Center of Excellence in de fundamentele biologie van veroudering (NIA # 5P30AG-013280), en de Universiteit van Washington Diabetes Endocrinologie Research Center (NIH # P30 DK-17047). Wij danken Cynthia Pekow DVM en Kari L. Koszdin DVM, VA Puget Sound, mits nuttig commentaar op het manuscript.

De hier beschreven procedure is goedgekeurd door de VA Puget Sound Institutional Animal Care en gebruik Comite, en voldoet aan de ILAR gids voor de zorg en het gebruik van proefdieren. 1 Experimentele Voorbereiding <ol><li> Beslis vooraf of bloed of weefselverzameltoestel spoedig na inspanning noodzakelijk, en zo ja, bepalen de post-oefening interval voor geleiding van deze procedures. Voorbeelden hiervan zijn de bepaling van de oefening geïnduceerde hormoon of cytokine release in de circulatie (noodzakelijk bloedafname), bepaling van de oefening geïnduceerde expressie van mRNA-soorten van belang (noodzakelijk euthanasie gevolgd door weefsel collectie). Als direct na de training van bloed of weefsel collectie is aangegeven, een materiaal dat voor deze procedures bij de hand in de procedure voor de kamer. Ontvang Institutional Review Board goedkeuring en uitvoeren volgens de wettelijke bepalingen. Niet alle experimenten vereisen postexercise bloed of weefsel collectidoor; Een eenvoudige vergelijking van het runnen van het uithoudingsvermogen kan zijn alles wat nodig is. </li><li> Bepaal van tevoren op de experimentele groepen en postexercise procedures voor muizen (zie beschrijving hierboven). </li><li> Plaats de loopband op een stevige tafel in een rustige kamer gewijd tijdens de lopende onderzoeken naar deze procedure. </li><li> Plaats de loopband voor muis-en kleinbedrijf rijstroken en op een helling aangepast aan het protocol. De helling van 5 o wordt hier gebruikt om spierbeschadiging door excentrische beweging (verlenging van de spier tegelijk als contractie) die tijdens bergafwaarts voorkomen. </li><li> Plaats een absorberend kussen onder de loopband om de ontlasting op te vangen. </li></ol> 2 Acclimation van Muizen op de loopband Beslissen of een &quot;sedentaire&quot; (geen oefening) groep muizen is noodzakelijk, en sedentaire muizen om de loopband bloot zonder stromend zoals beschreven in stappen 2,1-2,5. Bepaal of 2 of 4 experimentele groepen vereist,. bijvoorbeeld sedentaire / Oefening (2 groepen); Uitgeoefend Controls / Uitoefening Behandeling (2 groepen, geen sedentaire dieren); of, sedentaire / Uitoefening x controle / behandeling (4 groepen). De &quot;behandeling&quot; kan een transgene of knock-out genotype, een farmacologische behandeling, speciaal dieet, of andere experimentele interventie. <ol><li> Laat de muis om te wennen aan de procedure kamer in zijn vervoerd kooi, met kooi mates, voor 1-2 uur. </li><li> Selecteer een enkele muis en opnemen tag nummer; wegen muis en opnemen gewicht. </li><li> Plaats de muis op de loopband zonder de motor ingeschakeld voor acclimatisatie, ongeveer 5 minuten. Schakel de stroom in, zonder dat de loopband lopen, en laat de muis wennen aan de machine lawaai voor nog eens 5 minuten. </li><li> Verwijder muizen in de &quot;sedentaire&quot; groepen (indien van toepassing, zie Nota 1) van de loopband op dit punt en ze terug naar hun kooi of het gedrag na de training procedures volgens de proefopzet (zie noot 2). </li></ol><ol><li> Na acclimatisatie, zet de band een lage snelheid (10 m / min) wanneer het dier is het verkennen van de gordel en niet op het platform. </li><li> Tik op of neem de achterhand van de muis met een tongspatel, 1-3 keer, om terughoudend dieren aan te moedigen om te blijven op de loopband en lopen voorzichtig. OPMERKING: De meeste muizen zal gemakkelijk lopen, maar ze soms stoppen voor een korte periode. Wanneer dit gebeurt, gebruikt u de tongspatel om voorzichtig te tikken of til de achterkant van het dier tot hervatting van de exploitatie aan te moedigen. Vaak hebben de muizen niet te worden aangeraakt met de tongspatel; merken van de hand met de tongdepressor afkomen zorgt ervoor dat de muizen om wat meer uit te voeren. </li><li> Start een laboratorium timer zodra de muis draait op de beginsnelheid van 10 m / min. </li><li> Zet de snelheid langzaam op wanneer de muis is aan de bovenkant (bergopwaarts einde) van de band, in stappen van 1 m / min, ongeveer om de 2 minuten. </li><li> Zet de snelheid naar devorige instelling als de muis herhaaldelijk loopt in korte uitbarstingen en niet in een gestaag tempo. </li><li> Bepaal de maximale aanhoudende loopsnelheid van elke muis (meestal 14-17 m / min voor C57BL / 6 muizen) door aanpassing van de snelheid en het kijken naar de muis. Noteer deze snelheid. OPMERKING: De locatie van het dier op de loopband keuen de onderzoeker de bereidheid van het dier op een hogere snelheid. Als de muis is aan het (bergop) einde en over te lopen in de muur, het is klaar om te draaien op een hogere snelheid. Als de muis draait met een constante snelheid in het midden van de loopband kan worden op zijn maximale snelheid, dan moeten worden bijgesteld, afhankelijk van de kwaliteit van de run. </li></ol> 4 eindpunten en Muizen die Stop <ol><li> Gebruik de tongspatel zachtjes tikken of neem de achterhand van de dieren die te stoppen, om de hervatting van de exploitatie aan te moedigen (zie toelichting 3.2). Gebruik de timer voor tijdelijke onderbrekingen niet stoppen in hardlopen. </li><li> Identificeren en remove muizen die weigeren op te starten. U dit op de data sheet. Afhankelijk van experimenteel ontwerp, kunnen muizen die weigeren worden getest op een andere dag OPMERKING: Sommige muizen zal volledig weigert te draaien. Dergelijke muizen zal lopen in korte uitbarstingen, dan stoppen te verzorgen of &quot;pedal&quot;, dat wil zeggen, zitten op het platform en gebruiken hun voorpoten op de band. De houding van deze muizen is gebogen, met de vier voetjes geplant onder het dier uit teruggedrongen op de loopband door de tongspatel te houden. Af en toe een muis wordt agressief naar de tongdepressor toen niet bereid om te draaien, bijten de tongspatel of het beklimmen van het als een manier om te ontsnappen. Het is duidelijk binnen de eerste 5 minuten van de proef of de muis, of zal niet in werking. Verwijder muizen die weigeren op te starten vanuit de analyse, maar ze niet tellen als &quot;sedentaire&quot; muizen. </li><li> Identificeer uitgeputte muizen en stoppen van de timer. OPMERKING: Uitputting wordt gedefinieerd door drie opeenvolgende stops en weigering omsume loopt ondanks zachte aanmoediging, plus lichamelijke tekenen van uitputting zoals ademhalingsmoeilijkheden en gespreide houding. Muizen herstellen van uitputting binnen 30 tot 60 minuten. </li><li> Noteer de totale hoeveelheid tijd die besteed draait op alle snelheden. </li><li> Afhankelijk van de experimentele opzet, ofwel de terugkeer van de muis is aan zijn kooi, of die onmiddellijke procedures postexercise zoals bloed of weefsel collectie als per institutionele richtlijnen. </li><li> Veeg de riem schoon met een kiemdodende doekje na het testen van elke individuele muis, zodat de geur van de vorige muis niet het gedrag van de latere muizen getest beïnvloeden. </li><li> Test de volgende muis. Gebruik een nieuw tongspatel voor elke muis. Muizen die in dezelfde kooi staan ​​kan worden getest achtereenvolgens op dezelfde dag zonder extra acclimatisering de behandelkamer. </li></ol>

<ol><li>Hill, J. A., Wyatt, H. R., Reed, G. W., Peters, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity+and+the+environment%3A+where+do+we+go+from+here%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Obesity and the environment: where do we go from here?</a> Science. 299 (5608), 853-855 (2003).</li>
<li>Kahn, S. E., Hull, R. L., Utzschneider, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+linking+obesity+to+insulin+resistance+and+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mechanisms linking obesity to insulin resistance and type 2 diabetes.</a> Nature. 444 (7121), 840-846 (2006).</li>
<li>Van Gaal, L. F., Mertens, I. L., De Block, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+linking+obesity+with+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mechanisms linking obesity with cardiovascular disease.</a> Nature. 444 (7121), 875-880 (2006).</li>
<li>Pischon, T., Nothlings, U., Boeing, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity+and+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Obesity and cancer.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 67 (2), 128-145 (2008).</li>
<li>Benton, C. R., Wright, D. C., Bonen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PGC-1%CE%B1-mediated+regulation+of+gene+expression+and+metabolism%3A+Implications+for+nutrition+and+exercise+prescriptions%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Physiol.+Nutr.+Metab%22%5BJournal%5D)">PGC-1α-mediated regulation of gene expression and metabolism: Implications for nutrition and exercise prescriptions.</a> Appl. Physiol. Nutr. Metab. 33 (5), 843-862 (2008).</li>
<li>Handschin, C., Spiegelman, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+exercise+and+PGC1alpha+in+inflammation+and+chronic+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The role of exercise and PGC1alpha in inflammation and chronic disease.</a> Nature. 454 (7203), 463-469 (2008).</li>
<li>Vasunilashorn, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+Short+Physical+Performance+Battery+score+to+predict+loss+of+ability+to+walk+400+meters%3A+analysis+from+the+InCHIANTI+study%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gerontol.+A+Biol.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Use of the Short Physical Performance Battery score to predict loss of ability to walk 400 meters: analysis from the InCHIANTI study.</a> J. Gerontol. A Biol. Med. Sci. 64 (2), 223-229 (2009).</li>
<li>Wang, Y. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+muscle+fiber+type+and+running+endurance+by+PPAR%CE%B4%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Bio%22%5BJournal%5D)">Regulation of muscle fiber type and running endurance by PPARδ.</a> PLoS Bio. 2 (10), e294(2004).</li>
<li>LeBrasseur, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myostatin+inhibition+enhances+the+effects+of+exercise+on+performance+and+metabolic+outcomes+in+aged+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gerontol.+A+Biol.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Myostatin inhibition enhances the effects of exercise on performance and metabolic outcomes in aged mice.</a> J. Gerontol. A Biol. Med. Sci. 64 (9), 940-948 (2009).</li>
<li>Burch, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electric+pulse+stimulation+of+cultured+murine+muscle+cells+reproduces+gene+expression+changes+of+trained+mouse+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Electric pulse stimulation of cultured murine muscle cells reproduces gene expression changes of trained mouse muscle.</a> PLoS ONE. 5 (6), e10970(2010).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+biogenesis+and+peroxisome+proliferator-activated+receptor-%CE%B3+coactivator-1%CE%B1+%28PGC-1%CE%B1%29+deacetylation+by+physical+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial biogenesis and peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator-1α (PGC-1α) deacetylation by physical activity.</a> Diabetes. 60 (1), 157-167 (2011).</li>
<li>Knab, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repeatability+of+exercise+behaviors+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Repeatability of exercise behaviors in mice.</a> Physiol. & Behavior. 98 (4), 433-440 (2009).</li>
<li>He, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-15+Receptor+deletion+results+in+circadian+changes+of+locomotor+and+metabolic+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Mol.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">IL-15 Receptor deletion results in circadian changes of locomotor and metabolic behavior.</a> J. Mol. Neurosci. 41 (2), 315-321 (2010).</li>
<li>Wu, X., Hsuchou, H., Kastin, A. J., Rood, J. C., Pan, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+role+of+interleukin-15+receptor+in+normal+anxiety+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Behav.+Immun%22%5BJournal%5D)">Essential role of interleukin-15 receptor in normal anxiety behavior.</a> Brain Behav. Immun. 24 (8), 1340-1346 (2010).</li>
<li>Pistilli, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+IL-15+receptor+%CE%B1+alters+the+endurance%2C+fatigability%2C+and+metabolic+characteristics+of+mouse+fast+skeletal+muscles%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Loss of IL-15 receptor α alters the endurance, fatigability, and metabolic characteristics of mouse fast skeletal muscles.</a> J. Clin. Invest. 121 (8), 3120-3132 (2011).</li>
<li>Quinn, L. S., Anderson, B. G., Conner, J. D., Wolden-Hanson, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-15+overexpression+promotes+endurance%2C+oxidative+energy+metabolism%2C+and+muscle+PPAR%CE%B4%2C+SIRT1%2C+PGC-1%CE%B1%2C+and+PGC-1%CE%B2+expression+in+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">IL-15 overexpression promotes endurance, oxidative energy metabolism, and muscle PPARδ, SIRT1, PGC-1α, and PGC-1β expression in male mice.</a> Endocrinology. 154 (1), 232-245 (2013).</li>
<li>Quinn, L. S., Anderson, B. G., Conner, J. D., Wolden-Hanson, T., Marcell, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-15+is+required+for+post-exercise+induction+of+the+pro-oxidative+mediators+PPARdelta+and+SIRT1%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">IL-15 is required for post-exercise induction of the pro-oxidative mediators PPARdelta and SIRT1.</a> Endocrinology. , (2013).</li>
<li>Ward, J. M., Anver, M. R., Mahler, J. F., Devor-Henneman, D. E. Chapter 13, Pathology of mice commonly used in genetic engineering (C57BL/6; 129; B6,129; and FVB/N). <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWard%2C+JM+%22The+Pathology+of+Genetically+Engineered+Mice%22">The Pathology of Genetically Engineered Mice</a>. Ward, J. M., Mahler, J. F., Maronpot, R. R., Sundberg, J. P. , Iowa State University Press. Ames, IA, Chapter. 161-179 (2000).</li>
<li>Lightfoot, J. T., Turner, M. J., Debate, K. A., Kleeberger, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstrain+variation+in+murine+aerobic+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Sci.+Sports+Exerc%22%5BJournal%5D)">Interstrain variation in murine aerobic capacity.</a> Med. Sci. Sports Exerc. 33 (12), 2053-2057 (2001).</li>
<li>Turner, M. J., Kleeberger, S. R., Lightfoot, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+genetic+background+on+daily+running-wheel+activity+differs+with+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Genomics%22%5BJournal%5D)">Influence of genetic background on daily running-wheel activity differs with aging.</a> Physiol. Genomics. 22 (1), 76-85 (2005).</li>
<li>Haight, T. J., van der Laan, M. J., Manini, T., Tager, I. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+effects+of+leisure-time+physical+activity+on+walking+speed%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Nutr.+Health+Aging%22%5BJournal%5D)">Direct effects of leisure-time physical activity on walking speed.</a> J. Nutr. Health Aging. 17 (8), 666-673 (2013).</li>
<li>Studenski, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gait+speed+and+survival+in+older+adults%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Gait speed and survival in older adults.</a> JAMA. 305 (1), 50-58 (2011).</li>
<li>Jacobsen, K. R., Kalliokoski, O., Teilmann, A. C., Hau, J., Abelson, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+isoflurane+anaesthesia+and+vasectomy+on+circulating+corticosterone+and+ACTH+in+BALB%2Fc+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gen.+Comp.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">The effect of isoflurane anaesthesia and vasectomy on circulating corticosterone and ACTH in BALB/c mice.</a> Gen. Comp. Endocrinol. 179 (3), 406-413 (2012).</li>
<li>Sellers, T. L., Jaussi, A. W., Yang, H. T., Heninger, R. W., Winder, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+the+exercise-induced+increase+in+glucocorticoids+on+endurance+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effect of the exercise-induced increase in glucocorticoids on endurance in the rat.</a> J. Appl. Physiol. 65 (1), 173-178 (1988).</li>
<li>Cook, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forced+treadmill+exercise+training+exacerbates+inflammation+and+causes+mortality+while+voluntary+wheel+training+is+protective+in+a+mouse+model+of+colitis%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Behav.+Immun%22%5BJournal%5D)">Forced treadmill exercise training exacerbates inflammation and causes mortality while voluntary wheel training is protective in a mouse model of colitis.</a> Brain Behav. Immun. 33, 46-56 (2013).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen belangenconflicten te onthullen.

Hier beschreven is een methode om vrijwillige running uithoudingsvermogen bij laboratoriummuizen evalueren middels een gemotoriseerde loopband zonder het gebruik van een shock raster. Deze werkwijze kan verschillen tussen sublijnen van C57BL / 6 muizen die verschillen in de expressie van het cytokine IL-15, waardoor weer verschillen in expressie van factoren die oefening uithoudingsvermogen 16,17 grondslag onthullen. In overeenstemming met de principes van de &quot;Three R&#39;s&quot; in proefdierkunde, kan d...

Obesitas, insulineresistentie en type 2 diabetes met elkaar verbonden zijn metabole aandoeningen die ingrijpende gevolgen voor de gezondheid van zowel de Amerikaanse en wereldwijde populatie 1-4 uit te oefenen. Duurzaamheid oefening kan voorkomen en behandelen deze omstandigheden 5,6. Bovendien beoordeling van loopsnelheid en uithoudingsvermogen worden gebruikt als klinisch diagnostische testen voor kwetsbaarheid, sarcopenie en de gevolgen van andere aandoeningen zoals chronische obstructieve longziekte, bij mensen 7. De biochemische pathways grondslag liggen aan de positieve effecten van duurtraining op de lichaamssamenstelling en insuline gevoeligheid beginnen te worden opgehelderd, met behulp van genetisch of farmacologisch gemodificeerde muizen die vertoning versterkte of verminderde inspanningscapaciteit 8-11. Toch hebben veel van dergelijke studies gemotoriseerde loopbanden uitgerust met shock roosters om muizen te forceren een 8-11 gebruikt. Dieren die lopen stoppen worden geduwd doorde bewegende loopband op een rooster dat een elektrische schok voet levert; de negatieve stimulus ontsnappen, de muizen weer lopen op de band. Deze procedures kunnen psychologische stress en vermijdingsgedrag te introduceren als verstorende factoren die van invloed experimentele parameters 12. Andere methoden voor het meten van het uithoudingsvermogen, zoals de kwantificering van ambulante activiteit met behulp van een straal-break apparaten of kwantificering van in-kooi wiel draait, kan worden verstoord door modulatie van het dagritme, angst, onbedoelde training, of voedsel zoekend gedrag 12-16. Bovendien vereisen deze procedures enkele behuizing, een bron van psychologische stress voor muizen. Daarom is een directe meting van lichaamsbeweging uithoudingsvermogen niet verstoord door spanning nodig. Om deze bezwaren te ondervangen, heeft ons laboratorium ontwikkeld en gevalideerd een methode om de maximale loopprestatie capaciteit te evalueren en aanhoudende loopsnelheid in ongetrainde, naïeve muizen met behulp van een gemotoriseerde loopband niet equipped met een schok net. De ruimte aan het einde van het loopvlak, waarbij de schok rooster gewoonlijk verblijft, wordt dan een platform voor muizen te rusten, en biedt plaats voor muizen die weigeren werking te zitten totdat uit de inrichting. Muizen ertoe geleid door een menselijke waarnemer met zachte tikken of aanraken met een tongspatel, gekoppeld aan gevoeligheid voor de vrijwillige bereidheid om op de van de muis. Deze werkwijze is gebruikt om verschillen in de uitoefening uithoudingsvermogen van genetisch gemodificeerde en controle C57BL / 6 muizen die verschillen in expressie van de spier afgeleide cytokine interleukine-15 (IL-15) 16,17 kwantificeren. Deze methode is een humane verfijning die de verstorende effecten van negatieve versterking veroorzaakt door het gebruik van een schok rooster af.

<table><tbody><tr><td>Open Rodent Treadmill Exer-3/6</td><td>Columbus Instruments, Columbus OH</td><td>1050RM</td><td>Dit catalogusnummer is voor modellen zonder schokraster. Schokrasters kunnen handmatig worden verwijderd van oudere modellen (Eco 3/6)</td></tr><tr><td>Sani Cloth Germicidal Towlettes</td><td>PDI- Professional Disposables, Inc., Orangeburg, NY</td><td>meestal besteld via lokale faciliteit</td><td>Bevat 10% isopropylalcohol; elk gelijkwaardig product kan worden gebruikt.</td></tr><tr><td>Tongetjes</td><td>Elke lokale leverancier</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Laboratoriumtimer</td><td>Elke leverancier</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IL-15 TG muizen*</td><td>JAX, Bar Harbor, ME</td><td>011002</td><td>Murine IL-15 transgen tot expressie gebracht door gemodificeerd humaan alfa-skeletspieractine promotor met gewijzigde signaalsequentie om secretie te vergemakkelijken.</td></tr><tr><td>C57BL/6J muizen (wild-type)*</td><td>JAX, Bar Harbor, ME</td><td>000664</td><td>Controlemuizen voor IL-15 TG</td></tr><tr><td>IL-15 KO muizen*</td><td>Taconic Farms, Germantown, NY</td><td>4269-M</td><td>Homozygote IL-15 "knockout" muizen op C57BL/6 achtergrond</td></tr><tr><td>C57BL/6NTac (wild-type)*</td><td>Taconic Farms, Germantown, NY</td><td>B6-M</td><td>Controlemuizen voor IL-15 KO</td></tr><tr><td>*Optioneel; muislijnen en behandelingen kunnen specifiek zijn voor het experimentele protocol.</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

beoordeling van muriene oefening endurance zonder het gebruik van een shock grid: een alternatief voor forced exercise

Assessment of Murine Exercise Endurance Without the Use of a Shock Grid: An Alternative to Forced Exercise

Met behulp van laboratorium muismodellen, worden de moleculaire routes die verantwoordelijk zijn voor de metabolische voordelen van uithoudingsvermogen te oefenen begint te worden gedefinieerd. De meest voorkomende methode voor het beoordelen van de uitoefening uithoudingsvermogen in muizen maakt gebruik van gedwongen lopen op een gemotoriseerde loopband uitgerust met een schok net. Dieren die lopen stoppen worden geduwd door de bewegende loopband op een rooster dat een elektrische schok voet levert; de negatieve stimulus ontsnappen, de muizen weer lopen op de band. Echter, vermijdingsgedrag en psychische belasting door gebruik van een schok inrichting verstoren kwantificering van actief uithoudingsvermogen, en verwarren metingen postexercise serum hormoon en cytokine niveaus. Hier, we demonstreren en valideren van een verfijnde methode om draait uithoudingsvermogen in naïeve C57BL / 6 laboratorium muizen op een gemotoriseerde loopband meten zonder gebruik te maken van een shock raster. Bij muizen zijn preacclimated om de loopband, dat ze vrijwillig lopen met gang snelheden specifiek voor elk mouse. Gebruik van de schok net wordt vervangen door zacht stimulering door een menselijke operator met een tongspatel, gekoppeld aan gevoeligheid voor de vrijwillige bereidheid om op de van de muis. Clear eindpunten voor het kwantificeren looptijd tot uitputting voor elke muis worden bepaald en weergegeven in gedragssignalen uitgeput zoals gespreide houding en zware ademhaling. Deze methode is een humane verfijning die ook vermindert de verstorende effecten van stress op experimentele parameters.

Deze procedure voor het meten uitoefening uithoudingsvermogen nauwkeurig de moleculaire en metabolische profiel van verschillende stammen van C57BL / 6 muizen die verschillen in de expressie van het cytokine IL-15 16,17. Transgene muizen die een overexpressie van IL-15 (IL-15 TG muizen) vertonen significante aanloop tot uitputting keer boven littermate controles toegenomen, terwijl muizen die IL-15 (IL-15 KO muizen) vertonen missen doorlooptijden aanzienlijk verminderd voorafgaand aan het bereiken uitputting ...

Een methode om de inspanningsduur bij laboratoriummuizen te beoordelen zonder gebruik van een schokgrill wordt gedemonstreerd. Deze methode is een humane verbetering die de verstorende effecten van stress op experimentele parameters kan verminderen.

Beoordeling van Muriene Oefening Endurance zonder het gebruik van een Shock Grid: Een alternatief voor Forced Exercise

Using laboratory mouse models, the molecular pathways responsible for the metabolic benefits of endurance exercise are beginning to be defined. The most ...

Het algemene doel van deze procedure is om de vrijwillige oefenuithoudingsvermogen te bepalen. Bij laboratoriummuizen wordt dit bereikt door de muis eerst een tot twee uur toe te laten acclimatiseren in de procedurekamer in zijn eigen kooi. De muis wordt vervolgens toegestaan om zich aan te passen aan de loopband en het geluid van de motor.Vervolgens wordt de snelheid van de loopband geleidelijk verhoogd totdat de muis comfortabel op zijn maximale duurzame snelheid loopt. De laatste stap is om te bepalen wanneer de muis uitputting heeft bereikt. Uiteindelijk onthult de hoeveelheid tijd die de muis tot uitputting heeft gelopen een maatstaf voor oefenuithoudingsvermogen zonder de verwarrende effecten van stress door het gebruik van een schokraster.Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het een verfijning is van bestaande methoden voor het bepalen van oefenuithoudingsvermogen en muizen, voornamelijk omdat het geen schotraster gebruikt om de muizen aan te moedigen te lopen, waardoor de verwarrende effecten van stress worden verminderd, zowel voor het dier als voor het experiment. Bepaal van tevoren experimentele groepen en post-oefening procedures voor muizen. Plaats de loopband op een stevige kar of tafel in een rustige ruimte die is gewijd aan deze procedure.Tijdens de loopproeven, stelt u de loopband in voor muizengrootte banen en op een helling die geschikt is voor het protocol. De helling van vijf graden wordt hier gebruikt om spierbeschadiging als gevolg van excentrische oefening die optreedt tijdens het dalingslopen te voorkomen. Plaats een absorberend kussen onder de loopbandbel om uitwerpselen op te vangen.Laat de muis zich één tot twee uur acclimatiseren in de procedurekamer in zijn getransporteerde eigen kooi met kooigenoten. Selecteer een enkele muis en noteer het tagnummer. Weeg ook de muis en noteer het gewicht.Plaats de muis in de loopband zonder de motor in te schakelen om zich ongeveer vijf minuten aan te passen. Schakel de stroom in zonder dat de loopbandband loopt en laat de muis zich nog eens vijf minuten aanpassen aan het machinegeluid. Verwijder muizen in de zittende groepen van de loopband op dit punt en breng ze terug naar hun kooi of voer post-oefening procedures uit volgens het experimentele ontwerp.Na acclimatisatie, draai de band naar een lage snelheid. Wanneer het dier de band aan het verkennen is en niet op het platform, tik of til voorzichtig de achterkant van de muis met een tongspatel één tot drie keer om onwillige dieren aan te moedigen op de loopband te blijven lopen. Start een laboratoriumtimer. Zodra de muis loopt op de initiële snelheid van 10 meter per minuut, verhoog dan langzaam de snelheid.Wanneer de muis op de bovenkant van de band staat met stappen van één meter per minuut ongeveer om de twee minuten, verlaag dan de snelheid naar de vorige instelling. Als de muis herhaaldelijk in korte stoten loopt en niet in een constante tempo, zullen de meeste muizen gemakkelijk lopen, maar ze stoppen soms voor korte periodes. Gebruik de tongspatel om voorzichtig te tikken of de achterkant van het dier op te tillen om het hervatten van het lopen aan te moedigen.Vaak veroorzaakt het feit dat de muizen de hand met de tongspatel naar zich toe zien komen dat ze wat verder gaan lopen. Stop de timer niet voor tijdelijke onderbrekingen in het lopen. Bepaal de maximale duurzame looptijd van elke muis door de snelheid aan te passen en de muis in de gaten te houden om deze snelheid te registreren.Sommige muizen weigeren volledig om te lopen. Dergelijke muizen zullen in korte stoten lopen. Vervolgens stoppen ze om zich te verzorgen of te peddelen, dat wil zeggen op het platform zitten en hun voorpoten op de band gebruiken.De klassieke houding van een weigerende muis is gebogen met alle vier de poten onder het dier om te voorkomen dat het door de tongspatel terug op de loopband wordt geduwd. Af en toe wordt een muis agressief tegen de tongspatel wanneer deze onwillig is om te lopen, door de tong te bijten, depressor of erop te klimmen als een manier van ontsnapping. Binnen de eerste vijf minuten van de proef is het duidelijk of de muis wel of niet zal lopen.Verwijder en identificeer muizen die weigeren te lopen van de analyse, maar tel ze niet als zittende muizen. Afhankelijk van uw experimenteel ontwerp, kunnen muizen die weigeren op een andere dag opnieuw worden getest. Uitputting wordt gedefinieerd door drie opeenvolgende stops en weigering om het lopen te hervatten ondanks zachte aanmoediging.Plus fysieke tekenen van uitputting zoals benauwd ademhalen en gespreide houding. Identificeer uitgeputte muizen en stop de timer. Noteer de totale hoeveelheid tijd die is besteed aan het lopen op alle snelheden.Afhankelijk van het experimenteel ontwerp, breng de muis terug naar zijn kooi of voer onmiddellijk post-oefening procedures uit, zoals het verzamelen van bloed of weefsel. Volgens institutionele richtlijnen, veeg de band schoon met een germicide doek na het testen van elke individuele muis, zodat de geur van de vorige muis het gedrag van de volgende geteste muis niet beïnvloedt. Gebruik een nieuwe tongspatel voor elke muis.Muizen die in dezelfde kooi verblijven, kunnen op dezelfde dag achter elkaar worden getest zonder aanvullende acclimatisatie aan de procedurekamer. Oefenuithoudingsvermogen weerspiegelt nauwkeurig het moleculaire en metabolische profiel van verschillende stammen van C 57 zwarte zes muizen die verschillen in expressie van spierafgeleide cytokine IL 15 transgene muizen die IL 15 overexpresseren, vertonen significant verhoogde tijden tot uitputting in vergelijking met ate-controles, terwijl muizen die IL 15 missen, significant verminderde looptijden vertonen voordat ze uitputting bereiken, wildtype-controles. Zie 57 zwarte zes muizen uit twee verschillende bronnen die geen significant verschillende looptijden vertonen.De maximale duurzame looptijd verschilde alleen bij IL 15 knockout-muizen. Een onvermijdelijke beperking van deze techniek is dat sommige muizen weigeren vrijwillig te lopen. Het percentage

assessment-murine-exercise-endurance-without-use-shock-grid-an

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

Hier beschreven worden protocollen die worden gebruikt om het dynamische proces van MG53-gemedieerde celmembraan te herstellen in zijn geheel dieren en op cellulair niveau te visualiseren. Deze methoden kunnen worden toegepast op de celbiologie van de plasma membraan opnieuw sluiten en regeneratieve geneeskunde te onderzoeken.

Visualisatie van MG53-gemedieerde celmembraan Reparatie gebruik In vivo En In vitro Systemen

Twee oefening paradigma's werden getest op een nieuw ontwikkelde chemisch geïnduceerde menopauze muismodel om de impact van de menopauze op de inspanningscapaciteit en cardiale aanpassing uit te oefenen onderzoeken.

Een methode om de impact van chemisch-geïnduceerde ovarieel falen op de inspanningscapaciteit en Cardiac Aanpassing studie bij muizen

De primaire uitkomstmaat in klinische trials voor neuromusculaire aandoeningen is over het algemeen verbeterd spierfunctie. Daarom beoordeling van het effect van mogelijke therapeutische verbindingen op spierprestaties klinisch vooraf in muismodellen van groot belang. We beschrijven hier een aantal functionele tests om dit aan te pakken.

Het beoordelen van functionele prestaties in de<em&gt; Mdx</em&gt; Muis Model

Lichaamsbeweging kan gedragsstoornissen verlichten die geassocieerd zijn met neurodegeneratieve ziekten. Onderzoek naar de mechanismen die ten grondslag liggen aan door lichaamsbeweging gemedieerde effecten is toegenomen in ziektemodellen, maar de neurobiologische achtergrond die gepaard gaat met deze ziekten, specifiek veroudering, wordt waarschijnlijk niet in overweging genomen. Hier illustreren we maatregelen om de kans op een succesvol lichaamsbewegingsparadigma bij oudere ratten te...

Kennismaking met Compliance in Gedwongen Oefening in Knaagdieren: een kritische Standard naar Oefening Impact Evalueer in-Aging gerelateerde aandoeningen en de ziekte van

Vermoeidheid is een veelvoorkomend, onvoldoende behandeld en vaak slecht begrepen symptoom bij vele ziekten en aandoeningen. Nieuwe preklinische tests op vermoeidheid kunnen helpen bij het verbeteren van het huidige begrip en de toekomstige behandeling van vermoeidheid. Met dat doel biedt het huidige protocol een nieuwe manier om vermoeidheidsachtig gedrag bij de muis te meten.

De loopband Vermoeidheid Test: Een eenvoudige, High-throughput assay van vermoeidheid-achtig gedrag van de muis

Dit protocol beschrijft een flexibele, voordelige systeem voor het meten van de muis ambulation in een open veld activiteit assay. We laten zien dat een bepaling van de 6 minuten durende ambulation op basis van dit systeem een afname van de vrijwillige beweging in mdx muizen detecteert en nauwkeurig verbetering in een spier-specifieke redding van deze dieren onderscheidt.

Een eenvoudige en goedkope Assay voor het meten van Ambulation in muismodellen van spierdystrofie

Hoge intensiteit opleiding in hypoxie is een protocol dat voor het opwekken van vasculaire aanpassingen mogelijk gunstig is bij sommige patiënten en ter verbetering van de atleten herhaald sprint vermogen heeft bewezen. Hier, testen wij de haalbaarheid van opleiding muizen met behulp van dat protocol en identificeren die vasculaire aanpassingen met ex vivo vasculaire functie beoordeling.

Supramaximal hypoxische intensiteitsoefening en vasculaire functie beoordeling in muizen

Hoge intensiteit intervaltraining (HIIT) is in opkomst als alternatief voor langere oefening modaliteiten, maar de kortere varianten zijn zelden gemodelleerd in dierstudies korte sessie (≤10 min). Hier beschrijven we een 10 min, 3 dagen per week, bergop loopband HIIT protocol dat verhoogt fysieke prestaties in mannelijke en vrouwelijke ouder muizen.

Korte sessie hoge intensiteit intervaltraining en loopband beoordeling in leeftijd muizen

Elektrocardiogram (ECG) is de belangrijkste variabele voor het begrijpen van cardiale elektrofysiologie. Lichaamsbeweging heeft gunstige effecten, maar kan ook schadelijk zijn in de context van hart- en vaatziekten. Dit manuscript biedt een methode voor het registreren van real-time ECG tijdens inspanning, die kan dienen om de effecten ervan op de cardiale elektrofysiologie bij muizen te onderzoeken.

Real-time elektrocardiogrammonitoring tijdens loopbandtraining bij muizen

Deze procedure beschrijft een vertaalbaar progressief belast loopwielweerstandstrainingsmodel bij muizen. Het belangrijkste voordeel van dit weerstandstrainingsmodel is dat het volledig vrijwillig is, waardoor stress voor de dieren en de belasting voor de onderzoeker wordt verminderd.

Een eenvoudig en goedkoop loopwielmodel voor progressieve weerstandstraining bij muizen

Dit protocol beschrijft een effectief vrijwillig wielloopmodel dat in verschillende onderzoekscontexten kan worden geïmplementeerd. In tegenstelling tot andere vrijwillige loopmodellen, vermijdt deze methode isolatiehuisvesting terwijl het loopmetingen bij individuele muizen bijhoudt.

Individuele hardloopstatistieken bij muizen volgen met behulp van een vrijwillig wielloopsprotocol dat sociale isolatie minimaliseert

Leer een humane methode om uithoudingsvermogen bij muizen te meten zonder schokrooster. Deze techniek vermindert stress en geeft betrouwbare resultaten voor gedrags- en fysiologisch onderzoek.

Beoordeling van Muriene Oefening Endurance zonder het gebruik van een Shock Grid: Een alternatief voor Forced Exercise

Meer video's verkennen