Name: Gelijktijdige Kwantificering van de T-cel receptor Excisie cirkels (TRECS) en K-verwijderen recombinatie Excisie cirkels (KRECs) van Real-time PCR (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 14 s
Description: Leer een real-time PCR-methode voor gelijktijdige kwantificering van TRECs en KRECs als markers voor thymus- en beenmergoutput. Deze techniek is waardevol voor immunologisch onderzoek en pediatrische studies.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

De auteurs hebben geen dankbetuigingen.

<ol><li>Douek, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+thymic+function+with+age+and+during+the+treatment+of+HIV+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Changes in thymic function with age and during the treatment of HIV infection.</a> Nature. 396 (6712), 690-695 (1998).</li>
<li>Zelm, M. C., Szczepanski, T., van der Burg, M., van Dongen, J. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Replication+history+of+B+lymphocytes+reveals+homeostatic+proliferation+and+extensive+antigen-induced+B+cell+expansion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">Replication history of B lymphocytes reveals homeostatic proliferation and extensive antigen-induced B cell expansion.</a> J. Exp. Med. 204 (3), 645-655 (2007).</li>
<li>Fronkova, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((B-cell+reconstitution+after+allogeneic+SCT+impairs+minimal+residual+disease+monitoring+in+children+with+ALL%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Marrow+Transplant%22%5BJournal%5D)">B-cell reconstitution after allogeneic SCT impairs minimal residual disease monitoring in children with ALL.</a> Bone Marrow Transplant. 42 (3), 187-196 (2008).</li>
<li>Sottini, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+quantification+of+recent+thymic+T-cell+and+bone+marrow+B-cell+emigrants+in+patients+with+primary+immunodeficiency+undergone+to+stem+cell+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Simultaneous quantification of recent thymic T-cell and bone marrow B-cell emigrants in patients with primary immunodeficiency undergone to stem cell transplantation.</a> Clin. Immunol. 136 (2), 217-227 (2010).</li>
<li>Serana, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thymic+and+bone+marrow+output+in+patients+with+common+variable+immunodeficiency%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Thymic and bone marrow output in patients with common variable immunodeficiency.</a> J. Clin. Immunol. 31 (4), 540-549 (2011).</li>
<li>Zanotti, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Opposite+effects+of+interferon-%CE%B2+on+new+B+and+T+cell+release+from+production+sites+in+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neuroimmunol%22%5BJournal%5D)">Opposite effects of interferon-β on new B and T cell release from production sites in sclerosis.</a> J. Neuroimmunol. 240-241, 147-150 (2011).</li>
<li>Zanotti, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+accumulation+of+newly+produced+T+and+B+lymphocytes+in+natalizumab-treated+multiple+sclerosis+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Peripheral accumulation of newly produced T and B lymphocytes in natalizumab-treated multiple sclerosis patients.</a> Clin. Immunol. 145 (1), 19-26 (2012).</li>
<li>Sottini, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-existing+T-+and+B-cell+defects+in+one+progressive+multifocal+leukoencephalopathy+patient%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Pre-existing T- and B-cell defects in one progressive multifocal leukoencephalopathy patient.</a> PLoS One. 7, e34493(2012).</li>
<li>Quiros-Roldan, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+combined+antiretroviral+therapy+on+B-+and+T-cell+release+from+production+sites+in+long-term+treated+HIV-1%2B+patients%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Transl.+Med%22%5BJournal%5D)">Effects of combined antiretroviral therapy on B- and T-cell release from production sites in long-term treated HIV-1+ patients.</a> J. Transl. Med. 10, 94(2012).</li>
<li>Mensen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utilization+of+TREC+and+KREC+quantification+for+the+monitoring+of+early+T-+and+B-cell+neogenesis+in+adult+patients+after+allogeneic+hematopoietic+stem+cell+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Transl.+Med%22%5BJournal%5D)">Utilization of TREC and KREC quantification for the monitoring of early T- and B-cell neogenesis in adult patients after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation.</a> J. Transl. Med. 11, 188(2013).</li>
<li>Serana, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+different+extent+of+B+and+T+cell+immune+reconstitution+after+hematopoietic+stem+cell+transplantation+and+enzyme+replacement+therapies+in+SCID+patients+with+adenosine+deaminase+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">The different extent of B and T cell immune reconstitution after hematopoietic stem cell transplantation and enzyme replacement therapies in SCID patients with adenosine deaminase deficiency.</a> J. Immunol. 185 (12), 7713-7722 (2010).</li>
<li>Borte, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+screening+for+severe+primary+immunodeficiency+diseases+using+high-throughput+triplex+real-time+PCR%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Neonatal screening for severe primary immunodeficiency diseases using high-throughput triplex real-time PCR.</a> Blood. 119 (11), 2552-2555 (2012).</li>
<li>Baker, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implementing+routine+testing+for+severe+combined+immunodeficiency+within+Wisconsin%27s+newborn+screening+program%5BTitle%5D)+AND+%22Public+Health+Rep%22%5BJournal%5D)">Implementing routine testing for severe combined immunodeficiency within Wisconsin's newborn screening program.</a> Public Health Rep. 125 (2), 88-95 (2010).</li>
<li>Lorenzi, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+thymic+function+directly+from+peripheral+blood%3A+a+validated+modification+to+an+established+method%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol.+Meth%22%5BJournal%5D)">Determination of thymic function directly from peripheral blood: a validated modification to an established method.</a> J. Immunol. Meth. 339 (2), 185-194 (2008).</li>
<li>De Boer, R. J., Perelson, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+T+lymphocyte+turnover%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Theor.+Biol%22%5BJournal%5D)">Quantifying T lymphocyte turnover.</a> J. Theor. Biol. 327, 45-87 (2013).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

TREC- en KREC-kwantificering kan worden beschouwd als een goede schatting van recente thymus- en beenmergproductie, mits er rekening wordt gehouden met enkele voorbehouden. Hoewel een absolute kwantificeringsmethode met een standaardcurve meer reagentia en meer ruimte op de real-time PCR-reactieplaat vereist, zorgt dit voor zeer nauwkeurige kwantitatieve resultaten omdat onbekende steekproefhoeveelheden worden geïnterpoleerd uit standaardcurves die zijn gebouwd op bekende hoeveelheden van uitgangsmateriaal. Bovendien is ...

T-cel receptor excisie cirkels (TRECS) en K verwijderen recombinatie excisie cirkels (KRECs) zijn kleine gecirculariseerde DNA-elementen die zijn uitgesneden in een verhouding van T- en B-cellen, respectievelijk, in een genomisch DNA recombinatie proces leidt tot de vorming van een zeer gediversifieerde repertoire van T- en B-celreceptoren. Zij hebben geen functie, maar omdat ze stabiel zijn en niet kunnen worden gerepliceerd, worden ze verdund na elke celdeling, waardoor aanhoudende slechts één van de twee dochtercellen. Daardoor kan het niveau in het perifere bloed worden aangenomen als een schatting van de thymus en beenmerg output. Terwijl de TREC-test is grotendeels gebruikt in de afgelopen 15 jaar in de mate van thymus uitgang te evalueren, 1 de Krec assay, die aanvankelijk werd ontwikkeld om B-cel proliferatie en de bijdrage ervan aan de B-cel homeostase in gezondheid en ziekte, 2 meten is pas recent voorgesteld als een marker van bot marrow uitgang. 3,4 Hier beschrijven we de methode die we ontwikkeld voor de gelijktijdige kwantificering van zowel TRECS en KRECs. 4 Met deze gecombineerde methode wordt de variabiliteit geassocieerd DNA kwantificatie door real-time PCR geëlimineerd door het gebruik van een unieke standaardcurve verkregen door verdunning van een triple-insertie plasmide bevattende fragmenten van TRECS, KRECs en T-celreceptor alfa constante (TCRAC) gen in een 1: 1: 1 verhouding. Dit maakt een meer nauwkeurige evaluatie van de TREC en Krec copy number. Verder is de gelijktijdige kwantificering van de twee doelen in dezelfde reactie laat reagens kostenreductie. De voorgestelde TREC / Krec test kan nuttig zijn om de omvang van T- en B-cellen neo-productie bij kinderen of volwassenen met ernstige gecombineerde immuundeficiëntie (SCID), 4 Hypogammaglobulinemie, 5 autoimmuunziekten, 6-8 en HIV-infectie meten Voorts. 9, kan het worden gebruikt ombewaken van het immuunsysteem herstel na hematopoietische stamceltransplantatie, 10 enzymvervanging, 11 en antivirale 9 of immunomodulerende therapieën. 6-8 slot omdat SCID patiënten worden opgenomen op basis van TREC test ondanks de onderliggende genetische defecten, en agammaglobulinemie patiënten kunnen worden geïdentificeerd met behulp van Krec kwantificering De TREC / Krec test kan ook worden gebruikt om immuundeficiënties detecteren bij pasgeboren screeningprogramma&#39;s. 12 In dit geval moet de test worden uitgevoerd op DNA geëxtraheerd uit kleine bloedvlekken geblot en gedroogd op filterpapier, moeten zeer gevoelig en specifiek zijn voor deze ziekten, evenals zeer reproduceerbare en kosteneffectief. De invoering van Krec kwantificering in de test prestaties van pasgeboren screening voor immuundeficiënties die routinematig werd uitgevoerd in sommige delen van de Verenigde Staten (WI, MA, CA) sinds 2008 verbeteren wanneer Wisconsin werd eerste Inleidinge de analyse van TRECS in haar postnatale screening programma. 13

<table><tbody><tr><td>Histopaque-1077</td><td>Sigma Aldrich SRL</td><td>10771-500 ML</td><td>density gradient separation method</td></tr><tr><td>QIAamp DNA Blood Mini Kit (250)</td><td>QIAGEN</td><td>51106</td><td>DNA-extractie</td></tr><tr><td>Unmodified DNA Oligonucleotides HPSF 0.01 mmol</td><td>Eurofins MWG Operon/Carlo Erba Reagents S.r.l&nbsp;</td><td></td><td>Resuspendeer het gelyofiliseerd product tot 100 pmol/μl</td></tr><tr><td>AmpliTaq DNA Polymerase: inclusief 10x Buffer II en 25 mM MgCl2</td><td>Applied Biosystems/Life-Technologies</td><td>N8080156</td><td></td></tr><tr><td>GeneAmp dNTP Blend (100 mM)</td><td>Applied Biosystems/Life-Technologies</td><td>N8080261</td><td></td></tr><tr><td>TOPO TA Cloning Kit voor Subcloning</td><td>Invitrogen/Life-Technologies</td><td>K4500-01</td><td></td></tr><tr><td>XL1-Blue Subcloning Grade Competent Cells</td><td>Stratagene</td><td>200130</td><td></td></tr><tr><td>PureYield Plasmid Miniprep System</td><td>Promega</td><td>A1223</td><td></td></tr><tr><td>SpeI 500U</td><td>New England Biolabs</td><td>R0133S</td><td></td></tr><tr><td>HindIII-HF 10.000 U</td><td>New England Biolabs</td><td>R3104S</td><td></td></tr><tr><td>PureYield Plasmid Midiprep System</td><td>Promega</td><td>A2492</td><td></td></tr><tr><td>XhoI 5.000 U</td><td>New England Biolabs</td><td>R0146S</td><td></td></tr><tr><td>TRIS Utrapure</td><td>Sigma Aldrich SRL</td><td>T1503</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Sigma Aldrich SRL</td><td>E5134</td><td></td></tr><tr><td>TE-buffer (1 mM TRIS en 0,1 mM EDTA)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>TaqMan Universal PCR Master Mix</td><td>Applied Biosystems/Life-Technologies</td><td>4364338</td><td></td></tr><tr><td>Dubbel gelabelde sondes HPLC 0,01 mmol</td><td>Eurofins MWG Operon/Carlo Erba Reagents S.r.l&nbsp;</td><td></td><td>Resuspendeer het gelyofiliseerd product tot 100 pmol/μl</td></tr><tr><td>NanoDrop 2000c spectrofotometer</td><td>ThermoFisher</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Applied Biosystems 2720 Thermal Cycler</td><td>Applied Biosystems/Life-Technologies</td><td>4359659</td><td></td></tr><tr><td>Fast 7500 Real-Time PCR systeem</td><td>Applied Biosystems/Life-Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SDS Sequence Detection Software 1.4</td><td>Applied Biosystems/Life-Technologies</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

gelijktijdige kwantificering van de t-cel receptor excisie cirkels (trecs) en k-verwijderen recombinatie excisie cirkels (krecs) van real-time pcr

Simultaneous Quantification of T-Cell Receptor Excision Circles (TRECs) and K-Deleting Recombination Excision Circles (KRECs) by Real-time PCR

T-celreceptor excisie cirkels (TRECs) en K-deleterende recombinatie excisie cirkels (KRECs) zijn gecirculeerde DNA-elementen die gevormd worden tijdens het recombinatieproces dat T- en B-celreceptoren creëert. Omdat TRECs en KRECs zich niet kunnen vermenigvuldigen, worden ze verdund na elke celdeling en blijven daarom in de cel aanwezig. Hun hoeveelheid in het perifere bloed kan worden beschouwd als een schatting van de output van de thymus en het beenmerg. Door een goed gevestigde en veel gebruikte TREC-assay te combineren met een aangepaste versie van de KREC-assay, hebben we een dubbele kwantitatieve real-time PCR ontwikkeld die de kwantificering van zowel nieuw geproduceerde T- en B-lymfocyten in een enkele assay mogelijk maakt. Het aantal TRECs en KRECs wordt verkregen met behulp van een standaardcurve die is bereid door opeenvolgende verdunning van TREC en KREC signaaljoints die in een bacterieel plasmide zijn gekloond, samen met een fragment van het T-celreceptor alfa constante gen dat dient als referentiegen. Resultaten worden gerapporteerd als aantal TRECs en KRECs/106 cellen of per ml bloed. De kwantificering van deze DNA-fragmenten is bewezen nuttig voor het monitoren van immuunreconstitutie na beenmergtransplantatie bij zowel kinderen als volwassenen, voor een betere karakterisering van immuundeficiënties, of voor een beter begrip van bepaalde immunomodulerende activiteit van geneesmiddelen.

De test werd uitgevoerd in een representatieve steekproef van 87 gezonde controles: 42 kinderen in de leeftijd 0-17 (man / vrouwtjes: 25/17) en 45 volwassenen in de leeftijd 24-60 (mannen / vrouwen: 29/16). De resultaten werden verkregen als TRECS en KRECs per 10 6 PBMC, en vervolgens de TRECS en KRECs per ml bloed werden berekend. Het aantal TRECS afneemt met de leeftijd toe te schrijven aan involutie van de thymus, 4 in het bijzonder in een zeer scherpe fashion 0-3 - ...

Hier beschrijven we een methode voor de gelijktijdige kwantificering van T-cel receptor excisie cirkels (TRECs) en K-deletrerende recombinatie excisie cirkels (KRECs). De TREC/KREC test kan worden gebruikt als marker voor de output van de thymus en het beenmerg.

Gelijktijdige Kwantificering van de T-cel receptor Excisie cirkels (TRECS) en K-verwijderen recombinatie Excisie cirkels (KRECs) van Real-time PCR

T-cell receptor excision circles (TRECs) and K-deleting recombination excision circles (KRECs) are circularized DNA elements formed during recombination ...

Het algemene doel van het volgende experiment is om de output van de thymus en het beenmerg te schatten door zowel T-cel receptor excisie cirkels of REX als K-deleting recombinatie excisie cirkels of corrects in een enkele assay te kwantificeren. Dit wordt bereikt door eerst een triple insert plasmid te construeren dat fragmenten van de DNA-sequentie van TRX corrects en van een enkelvoudig referentiegen bevat om een een-op-een-op-een verhouding tussen de drie doelwitten te behouden na DNA-amplificatie. Vervolgens wordt een standaardcurve gebouwd door seriële verdunningen van het triple insert plasmid uit te voeren, wat de absolute kwantificering van de drie doelsequenties mogelijk maakt door realtime PCR.Ten slotte wordt een realtime PCR-assay uitgevoerd, wat leidt tot de absolute kwantificering van tres en cracks. De gerapporteerde resultaten tonen de veranderingen in de output van de thymus en het beenmerg met leeftijd en geslacht bij gezonde kinderen en volwassenen. We hadden eerst het idee voor deze methode toen we zowel de beenmerg- als de thymusoutput bij pasgeborenen of zuigelingen moesten analyseren, gezien de hoeveelheid bloed die meestal wordt afgenomen schaars is in verg

simultaneous-quantification-t-cell-receptor-excision-circles-trecs-k

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

De compartimentering van eiwitten, hetzij binnen het plasma membraan of in de intracellulaire locaties is een regulerend mechanisme die sterk kunnen beïnvloeden signalering resultaten, vandaar dat te begrijpen signalering is het van belang het bestuderen van de ruimtelijke en temporele gedrag van de betrokken eiwitten. We beschrijven hier een TIRF microscopie gebaseerde systeem om signaaltransductie in T-cellen te bestuderen, maar is breed toepasbaar.

Een TIRF Microscopie Techniek voor Real-time, gelijktijdige beeldvorming van de TCR en de bijbehorende signaaleiwitten

We beschrijven een methode voor de kwantitatieve, real-time meting van DNA glycosylase en AP endonuclease activiteiten in cel nucleaire lysaten. De test levert de tarieven van de DNA-reparatie-activiteit vatbaar zijn voor kinetische analyse en is aanpasbaar voor de kwantificering van DNA Repair activiteit in weefsel en tumor lysaten of met gezuiverde eiwitten.

Kwantitatieve, real-time analyse van Base excisie reparatie Activiteit in Cellysaten gebruik te maken van laesie-specifieke moleculaire Beacons

Ontworpen chromosomen van het Synthetic Yeast Genome project, Sc2.0, kunnen worden onderscheiden van hun natuurlijke tegenhangers met behulp van een PCR-gebaseerde genotyperingstest genaamd PCRTagging, die een aanwezigheid/afwezigheid-endpoint heeft. Hier beschrijven we een high-throughput real-time PCR detectiemethode voor PCRTag genotypering.

qPCRTag Analyse - Een High Throughput, Real Time PCR test voor Sc2.0 genotypering

Dit manuscript beschrijft hoe (enkele molecuul) Förster Resonance Energy Transfer (FRET)-gebaseerde assays uit te voeren om de bindingsdynamiek tussen T-cel antigeen receptor (TCR) en antigeen peptide-geladen MHC-moleculen te meten zoals ze optreden binnen de immunologische synaps van een T-cel in contact met een gefunctionaliseerde planaire ondersteunde lipide bilayer.

Het meten van TCR-pMHC Binding<em&gt; In Situ</em&gt; Met een FRET-gebaseerde Microscopie Assay

De huidige protocol combineert eencellige gekoppeld menselijke TCR alpha en beta keten sequencing met gestroomlijnd generatie van retrovirale vectoren compatibel met in vitro en in vivo TCR expressie.

Gestroomlijnd eencellige TCR isolatie en generatie van retrovirale vectoren voor In Vitro en In Vivo expressie van menselijke TCRs

Dit manuscript beschrijft de experimentele procedure en software analyse voor een bidirectionele integratie site analyse die tegelijkertijd upstream en downstream vector-host junction DNA kan analyseren. Bidirectionele PCR producten kunnen worden gebruikt voor elk downstream sequencing platform. De resulterende gegevens zijn bruikbaar voor een high-throughput, kwantitatieve vergelijking van geïntegreerde DNA-doelen.

Tweerichtings retrovirale integratie site PCR methodologie en kwantitatieve data analyse werkstroom

Hier presenteren we een protocol voor de ex vivo kwalitatieve detectie van antigeen-specifieke CD8+ T cellen. Analyse is mogelijk met eencellige schorsingen van organen of van kleine hoeveelheden bloed. Een breed scala van studies vereisen de analyse van de reacties van de cytotoxische T-cel (vaccinatie en kanker immunotherapie studies).

Gelijktijdige kwantificering van anti-vector en Anti-transgenic-specifieke CD8+ T cellen Via MHC ik tetrameer kleuring na vaccinatie met een virale Vector

Hier presenteren we een protocol voor het genereren van kanker cel klonen met een MS2 sequence tag op een enkele subtelomere. Deze aanpak, afhankelijk van het MS2-GFP-systeem, maakt de visualisatie van de endogene transcripten van Telomere herhalen-bevattende RNA (TERRA) uitgedrukt uit een enkele telomeer in levende cellen.

Generatie van kanker cel klonen te visualiseren Telomere Repeat-bevattende RNA TERRA uitgedrukt uit een enkele Telomere in levende cellen

Hier beschrijven we een robuuste methode voor het bepalen van de identiteit en zuiverheid van de immuuncel door middel van epigenetische handtekeningen gedetecteerd met behulp van kwantitatieve PCR (qPCR). DNA-demethylatie op een specifieke locus dient als een unieke identificatie voor een bepaald celtype en maakt identificatie van CD8+, regulatory, of Th17 T cellen mogelijk.

Bepaling van immuuncelidentiteit en zuiverheid Met behulp van epigenetische kwantitatieve PCR

Het huidige protocol beschrijft een methode voor DNA-isolatie van bloedmonsters en darmbiopten, generatie van TCRβ- en IGH PCR-bibliotheken voor de volgende generatie sequencing, prestaties van een NGS-run en basisgegevensanalyse.

T- en B-celreceptor immuunrepertoireanalyse met behulp van next-generation sequencing

Leer een real-time PCR-methode voor gelijktijdige kwantificering van TRECs en KRECs als markers voor thymus- en beenmergoutput. Deze techniek is waardevol voor immunologisch onderzoek en pediatrische studies.

Gelijktijdige Kwantificering van de T-cel receptor Excisie cirkels (TRECS) en K-verwijderen recombinatie Excisie cirkels (KRECs) van Real-time PCR (Video) | JoVE Journal

Gelijktijdige Kwantificering van de T-cel receptor Excisie cirkels (TRECS) en K-verwijderen recombinatie Excisie cirkels (KRECs) van Real-time PCR

Meer video's verkennen