Name: Remote Limb Ischemische preconditionering: Een Neurobeschermende Technique in Knaagdieren (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-02T10:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 52 s
Description: Leer een minimaal invasieve methode voor remote ischemische preconditionering bij ratten om het netvlies te beschermen tegen lichtschade. Deze techniek activeert endogene neuroprotectieve mechanismen via gecontroleerde ischemie-reperfusiecycli.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteur is dankbaar voor de hulp van mevrouw Sharon Spana (University of Sydney) bij het monitoren, hanteren en experimenteren met knaagdieren. De auteur wil Prof. Jonathan Stone en Dr. Dan Johnstone bedanken voor hun hulp bij het voorbereiden van dit manuscript. Financiering voor het promotieonderzoek is verstrekt door de University of Sydney en het Australian Center for Excellence in Vision.

Ethiek statement: Het protocol volgt het dier zorg richtlijnen van de Universiteit van Sydney, AEC # 5657. Verdoving werd goedgekeurd door dier ethische commissie (Universiteit van Sydney, AEC # 5657). 1. apparatuur Voorbereiding <ol><li> Met real-time huidtemperatuur tracking. Schakel op de computer, en de data-acquisitie hardware. </li><li> Open temperatuur opname-software en de temperatuur instelling om tussen de 30-35 ° C en de frequentie van de bemonstering op elke 100 msec te passen. </li><li> Optioneel: Insert rectale thermometer om de kerntemperatuur te garanderen blijft stabiel op 37,5 ° C. </li></ol> 2. De kalibratie van de handleiding Sphygmomanometer <ol><li> Sluit neonatale manchet tot een grootte 2 manchet voor een 250-550 g rat sphygmomanometer.Use. Een adapter kan nodig zijn om de manchetslang sluiten op de sphygmomanometer. </li><li> Leeglopen van de manchet door een van beide het losdraaien van de ontluchtingsventiel of het loskoppelen van de manchet slang van de aan te passenof. Zorg ervoor dat er geen druk blijft in de slang en de manometer naald rust op nul in de ovale / rechthoek. </li><li> Controleer de druk tussen slangen, manometer en manchet. Blaas de manchet met zachte pompen van de inflatie lamp totdat het leest 100 mmHg op de manometer. Zorg ervoor dat de druk constant blijft. Leeglopen van de manchet door langzaam openen van de lucht vrijkomen waarde. </li></ol> 3. Animal Voorbereiding Let op: dieren die aan het licht letsel ondergaan vereisen donkere aanpassing van de avond voor remote ischemie. Dieren die een lichte schade nodig donker opfok (12 uur licht: donker cyclus (5 lux)) <ol><li> Voer remote ischemie in ofwel wakker of verdoofd knaagdieren. Zorg ervoor dat dieren een gezonde spierspanning. Zorg ervoor dat dit door het knijpen de bovenste achterste ledematen om te bevestigen dat er voldoende spier aanwezig. RIP-geïnduceerde bescherming tegen lichte verwondingen is getest in sedentaire ratten tot 6 maanden oud. </li><li> Verdoofd voorbereiding voor RIP <ol><li> Injecteer ratten een intraperitoneale injectie van 60 mg / kg ketamine en 5 mg / kg xylazine. Controleer de diepte van anesthesie door uitbreiding van het been en het afklemmen van de huid aan de onderzijde van de voet. Het dier heeft geen reflex als het diep is verdoofd. Pas kunstmatige tranen om hoornvlies droog terwijl onder narcose te voorkomen. </li><li> Plaats ratten op ofwel een warmte-pad of circulerende boiler slang aan op een constante lichaamstemperatuur van 37,5 ° C te houden. Plaats de rat in buikligging met de onderste ledematen &#39;voetzolen naar boven. Ofwel de rechter of linker ledematen kunnen remote ischemie ondergaan. </li></ol></li><li> Awake voorbereiding RIP Opmerking: Wakker dierproeven vereist twee personen. Een persoon weerhoudt het dier en de tweede persoon werkt de handmatige bloeddrukmeter. De onderzoekers moeten vertrouwen om de procedure uit te voeren als terughoudendheid verhoogt het risico op verwonding van de verzorgers zijn. De ratten ondergingen afstand ischemie worden geconditioneerd to handleiding terughoudendheid. Afhankelijk intuïtieve richtlijnenboek beperking zou voortgang van 30 sec tot maximaal 5 min gedurende een aantal weken. Timide dieren die niet om te acclimatiseren op handmatig terughoudendheid moeten van wakker experimenten worden uitgesloten. Tenslotte handmatige beperking waarschijnlijk stress (en mogelijk verwart de studie voeren) voor dieren en een sham cohort (plaatsing van manchet zonder ontsteking) veroorzaken worden gebruikt om RIP studieresultaten te interpreteren. <ol><li> Snijd een handdoek in een 15 cm x 30-50 cm stuk en plaats de korte zijde loodrecht op rug van de rat, die het hoofd naar de top van de achterpoten. </li><li> Plooi de korte zijde onder de romp van de rat stevig en beginnen om de rat wrap met de resterende lange zijde van handdoek. Bevestig de verpakte dier onder de arm in rugligging. Als de rat wordt gehouden onder de linkerarm, bevrijden van de rat juiste ledematen van de handdoek. </li></ol></li></ol> 4. Toepassing of huidtemperatuursonde <ol><li> Verleng de poot van de rat die ischemie ondergaan en plaats de huid sonde op de voetzool. Plaats de huid probe om contact tussen de temperatuur sonde en de huid te maximaliseren. Duw de sonde in de voetzool en brengen zij de sonde met papier tape. </li><li> Controleer de huid probe plaatsing door het bijhouden van de temperatuur van de temperatuur opname software. Zorg ervoor dat de temperatuur van de huid is tussen 30-34 ° C en blijft stabiel. Volg de temperatuur van de huid voor 1-2 min. Pas de huidsensor bij temperaturen onstabiel of beneden 30 ° C. </li></ol> 5. Remote ischemie <ol><li> Leeglopen van de manchet en zorgen voor de luchtdruk gesloten is. Verleng de been en losjes omringen de manchet op de bovenste achterste ledematen. Gebruik de wijsvinger en duim aan het been en de lagere cijfers uit te breiden tot de losgemaakte manchet in positie te houden. </li><li> Verhoog manchetdruk het verdoofd dier tot 160 mmHg, en in wakkere dieren Increase de manchetdruk naar 180 mmHg. Opmerking: De verdoofd bloeddruk van ratten varieert 120-140 mmHg en stijgt tot 160 mmHg bij bewustzijn. Begin van de timer en de voet temperatuur opnames zodra de juiste druk is bereikt. Opmerking: De voet temperatuur moet dalen met 2 ° C na 5 min van constante druk. </li><li> Handhaven positie van de manchet boven het dier &quot;knee&quot; gehele ischemie. Manchetdruk zal beginnen te dalen na enkele minuten, of als onderdeel van de rat beweegt. </li><li> Herhaaldelijk pomp de inflatie lamp in korte uitbarstingen tot de gewenste manchetdruk herhaalde korte uitbarsting van pompen te behouden </li><li> Remote ischemie kan continu tussen 5 en 15 min worden toegezonden. De ischemie-reperfusie protocol bevat 2 periodes van 5 min ischemie met een tussenliggende 5 min reperfusie. </li><li> Leeglopen van de manchet druk door de luchtdruk ventiel los te draaien. Controleer de temperatuurverandering in de loop van de ischemie proprotocol. Laat de manchet. </li><li> Ga verder met letsel experimenteren. Animals onder invloed van anesthesie dient een warmte pad worden geplaatst. Doorgaan met dieren controleren totdat ambulante. Dieren kunnen niet worden teruggestuurd naar behuizing tot wandelen. </li></ol> 6. Licht Schade - retinale degeneratie Model <ol><li> Dark passen de dieren &#39;s nachts (12-15 uur). Onmiddellijk na remote ischemie conditionering of sham remote ischemie (dier terughoudendheid) plaats dieren in perspex behuizing met voedsel en water. </li><li> Schakel de TL-verlichting (1000 lux) zich boven Perspex woningen tegen 09:00 gedurende 24 uur. Na blootstelling aan licht, de terugkeer van de dieren aan cyclische verlichting dimmen voor 7 dagen. </li></ol> 7. Post-remote Ischemia Procedures <ol><li> Vision assessment met electroretinogram (ERG): Opmerking: De ERG set-up en flash protocol gevolgd Brandli en Stone 26. <ol><li> Dark passen dieren &#39;s nachts (12-15 uur). Ondergedimd rode verlichting verdoven dieren door intraperitoneale injectie van ketamine en xylazine (60 mg / kg en 5 mg / kg, respectievelijk). Mydriatische (atropinesulfaat 1,0%), corneale anesthetische (proxymetacaïne 0,5%). </li><li> Breng corneale hydratatie (Carbomer polymeer) oogdruppels direct op de cornea. Breng ooggel op 20 min tussenpozen hoornvlies hydratatie te behouden. </li><li> Teken een losjes gebonden draad rond de oogbol om stabiele ERG opnames helpen. Monitor temperatuur met een rectale sonde en handhaven lichaamstemperatuur dier bij 37-37,5 ° C. </li><li> Plaats de kop in een Ganzfeld bolfotometer. Opmerking: De Ganzfeld is een volledig programmeerbaar lichte prikkel die uniform whit flitsen levert van LEDs voor het oog. </li><li> Noteer de electroretinogram behulp van een op maat gemaakte 4 mm platina positieve elektrode lichtjes het hoornvlies aan te raken en een 2 mm diameter Ag / AgCl pellet elektrode ingebracht in de mond. Referentie beide elektroden aan een roestvrij stalen naaldsubcutaan ingebracht in de romp. </li><li> Record signalen banddoorlaat- instelling van 0.3-1,000 Hz (-3 dB), met een 2 kHz overname tarief (AD Instruments). Na een stabiele ERG opname vastgesteld onder het dier aan een 10 min aanpassing aan het donker alvorens opnamen. </li><li> Volg het flash protocol zoals eerder beschreven door Brandli en Stone 26. <ol><li> Programmeer de duur van de flitser (we gebruikt knippert 1-2 msec duur), en stel de intensiteit -4,4 tot 2,0 log scot cd.sm -2. Gebruik heldere flitsen (2,0 log scot cd.sm -2, 1 ms) aan het netvlies functie te meten. In deze studie is de vergelijking tussen controle, licht letsel en licht letsel met RIP. </li></ol></li></ol></li></ol> 8. TUNEL Assay <ol><li> Euthanaseren dieren door intraperitoneale injectie van fenobarbital overdosis (100 mg / kg). Ophelderen van de ogen en lossen in 4% paraformaldehyde. </li><li> Was de ogen in PBS vóór cyroprotectingogen &#39;s nachts in sucrose 30% (w / v). Insluiten de ogen in OCT verbinding en gesneden in 20 urn sagittale secties met behulp van een cryostaat. </li><li> Voer de TUNEL test op het netvlies secties met DAPI kleuring volgens het protocol van Maslim et al. 27 </li><li> Gebruik fluorescentiemicroscopie voor TUNEL tellingen van het netvlies. TUNEL cellen werden geregistreerd van de buitenste nucleaire laag (ONL); de buitenste laag van het netvlies die fotoreceptorcellen kernen bevat. In deze studie werden TUNEL tellingen in drievoud voor elk oog, met 5 ogen voor elke behandelingsgroep. </li><li> Gebruik one-way ANOVA statistische vergelijking groep betekent controle, licht letsel en lichte verwondingen + RIP ratten. </li></ol>

<ol><li>Meller, R., Simon, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tolerance+to+Ischemia-an+Increasingly+Complex+Biology%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Stroke+Research%22%5BJournal%5D)">Tolerance to Ischemia-an Increasingly Complex Biology.</a> Translational Stroke Research. 4 (1), 40-50 (2013).</li>
<li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+delayed+remote+limb+ischemic+postconditioning%3A+role+of+mitochondrial+K-ATP+channels+in+a+rat+model+of+focal+cerebral+ischemic+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Protective effect of delayed remote limb ischemic postconditioning: role of mitochondrial K-ATP channels in a rat model of focal cerebral ischemic reperfusion injury.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 32 (5), 851-859 (2012).</li>
<li>Harkin, D. W., D'Sa, A., McCallion, K., Hoper, M., Campbell, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+preconditioning+before+lower+limb+ischemia-reperfusion+protects+against+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Ischemic preconditioning before lower limb ischemia-reperfusion protects against acute lung injury.</a> Journal of Vascular Surgery. 35 (6), 1264-1273 (2002).</li>
<li>Murry, C. E., Jennings, R. B., Reimer, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconditioning+with+ischemia+-A+delay+of+lethal+cell+injury+in+ischemic+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Preconditioning with ischemia -A delay of lethal cell injury in ischemic myocardium.</a> Circulation. 74 (5), 1124-1136 (1986).</li>
<li>Barone, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+preconditioning+and+brain+tolerance+-+Temporal+histological+and+functional+outcomes%2C+protein+synthesis+requirement%2C+and+interleukin-1+receptor+antagonist+and+early+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Ischemic preconditioning and brain tolerance - Temporal histological and functional outcomes, protein synthesis requirement, and interleukin-1 receptor antagonist and early gene expression.</a> Stroke. 29 (9), 1937-1950 (1998).</li>
<li>Roth, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconditioning+provides+complete+protection+against+retinal+ischemic+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Preconditioning provides complete protection against retinal ischemic injury in rats.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 39 (5), 777-785 (1998).</li>
<li>Wegener, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+ischemic+attacks+before+ischemic+stroke%3A+Preconditioning+the+human+brain%3F+A+multicenter+magnetic+resonance+imaging+study%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Transient ischemic attacks before ischemic stroke: Preconditioning the human brain? A multicenter magnetic resonance imaging study.</a> Stroke. 35 (3), 616-621 (2004).</li>
<li>Weih, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attenuated+stroke+severity+after+prodromal+TIA+-+A+role+for+ischemic+tolerance+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Attenuated stroke severity after prodromal TIA - A role for ischemic tolerance in the brain.</a> Stroke. 30 (9), 1851-1854 (1999).</li>
<li>Casson, R. J., Wood, J. P. M., Melena, J., Chidlow, G., Osborne, N. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+ischemic+preconditioning+on+light-induced+photoreceptor+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">The effect of ischemic preconditioning on light-induced photoreceptor injury.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 44 (3), 1348-1354 (2003).</li>
<li>Ettaiche, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ATP-sensitive+potassium+channels+%28K-ATP%29+in+retina%3A+a+key+role+for+delayed+ischemic+tolerance%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">ATP-sensitive potassium channels (K-ATP) in retina: a key role for delayed ischemic tolerance.</a> Brain Research. 890 (1), 118-129 (2001).</li>
<li>Gross, E. R., Gross, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligand+triggers+of+classical+preconditioning+and+postconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Ligand triggers of classical preconditioning and postconditioning.</a> Cardiovascular Research. 70 (2), 212-221 (2006).</li>
<li>Heurteaux, C., Lauritzen, I., Widmann, C., Lazdunski, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+role+of+adenosine%2C+adenosine-A1-receptors%2C+and+ATP-senstive+K%2B+channels+in+cerebral+ischemic+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Essential role of adenosine, adenosine-A1-receptors, and ATP-senstive K+ channels in cerebral ischemic preconditioning.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 92 (10), 4666-4670 (1995).</li>
<li>Dirnagl, U., Simon, R. P., Hallenbeck, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+tolerance+and+endogenous+neuroprotection%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Neurosciences%22%5BJournal%5D)">Ischemic tolerance and endogenous neuroprotection.</a> Trends in Neurosciences. 26 (5), 248-254 (2003).</li>
<li>Ren, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+ischemic+post-conditioning+reduced+brain+damage+in+experimental+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Res%22%5BJournal%5D)">Remote ischemic post-conditioning reduced brain damage in experimental ischemia/reperfusion injury.</a> Neurol Res. 33 (5), 514-519 (2011).</li>
<li>Ren, C., Gao, X., Steinberg, G. K., Zhao, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limb+remote-preconditioning+protects+against+focal+ischemia+in+rats+and+contradicts+the+dogma+of+therapeutic+time+windows+for+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Limb remote-preconditioning protects against focal ischemia in rats and contradicts the dogma of therapeutic time windows for preconditioning.</a> Neuroscience. 151 (4), 1099-1103 (2008).</li>
<li>Hu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+limb+remote+ischemic+preconditioning+contributes+neuroprotective+effects+via+activation+of+adenosine+A1+receptor+and+redox+status+after+transient+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Noninvasive limb remote ischemic preconditioning contributes neuroprotective effects via activation of adenosine A1 receptor and redox status after transient focal cerebral ischemia in rats.</a> Brain Research. 1459, 81-90 (2012).</li>
<li>Jensen, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+Ischemic+Preconditioning+Protects+the+Brain+Against+Injury+After+Hypothermic+Circulatory+Arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Remote Ischemic Preconditioning Protects the Brain Against Injury After Hypothermic Circulatory Arrest.</a> Circulation. 123 (7), 714-721 (2011).</li>
<li>Kuntscher, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+preconditioning+by+brief+extremity+ischemia+before+flap+ischemia+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Ischemic preconditioning by brief extremity ischemia before flap ischemia in a rat model.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 109 (7), 2398-2404 (2002).</li>
<li>Kharbanda, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+limb+ischemia+induces+remote+ischemic+preconditioning+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Transient limb ischemia induces remote ischemic preconditioning in vivo.</a> Circulation. 106 (23), 2881-2883 (2002).</li>
<li>Perl, W., Cucinell, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LOCAL+BLOOD+FLOW+IN+HUMAN+LEG+MUSCLE+MEASURED+BY+A+TRANSIENT+RESPONSE+THERMOELECTRIC+METHOD%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">LOCAL BLOOD FLOW IN HUMAN LEG MUSCLE MEASURED BY A TRANSIENT RESPONSE THERMOELECTRIC METHOD.</a> Biophysical Journal. 5 (2), 211-230 (1965).</li>
<li>Vuksanovic, V., Sheppard, L. W., Stefanovska, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonlinear+relationship+between+level+of+blood+flow+and+skin+temperature+for+different+dynamics+of+temperature+change%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">Nonlinear relationship between level of blood flow and skin temperature for different dynamics of temperature change.</a> Biophysical Journal. 94 (10), L78-L80 (2008).</li>
<li>Meng, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Upper+limb+ischemic+preconditioning+prevents+recurrent+stroke+in+intracranial+arterial+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Upper limb ischemic preconditioning prevents recurrent stroke in intracranial arterial stenosis.</a> Neurology. 79 (18), 1853-1861 (2012).</li>
<li>Souza, M. V. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hind+limb+ischemic+preconditioning+induces+an+anti-inflammatory+response+by+remote+organs+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Journal+of+Medical+and+Biological+Research%22%5BJournal%5D)">Hind limb ischemic preconditioning induces an anti-inflammatory response by remote organs in rats.</a> Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 42 (10), 921-929 (2009).</li>
<li>Hixson, F. P., Shafiroff, B. B., Werner, F. W., Palmer, A. K. DIGITAL TOURNIQUETS - A PRESSURE STUDY WITH CLINICAL RELEVANCE. Journal of Hand Surgery-American. 11A (6), 865-868 (1986).</li>
<li>Hamer, P. W., McGeachie, J. M., Davies, M. J., Grounds, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evans+Blue+Dye+as+an+in+vivo+marker+of+myofibre+damage%3A+optimising+parameters+for+detecting+initial+myofibre+membrane+permeability%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Evans Blue Dye as an in vivo marker of myofibre damage: optimising parameters for detecting initial myofibre membrane permeability.</a> Journal of Anatomy. 200 (1), 69-79 (2002).</li>
<li>Brandli, A., Stone, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+ischemia+influences+the+responsiveness+of+the+retina%3A+observations+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthal+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Remote ischemia influences the responsiveness of the retina: observations in the rat.</a> Invest Ophthal Vis Sci. 55 (4), (2014).</li>
<li>Maslim, J., Valter, K., Egensperger, R., Hollander, H., Stone, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+oxygen+during+a+critical+developmental+period+controls+the+death+and+survival+of+photoreceptors%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Tissue oxygen during a critical developmental period controls the death and survival of photoreceptors.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 38 (9), 1667-1677 (1997).</li>
<li>Grimm, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIF-1-induced+erythropoietin+in+the+hypoxic+retina+protects+against+light-induced+retinal+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">HIF-1-induced erythropoietin in the hypoxic retina protects against light-induced retinal degeneration.</a> Nature Medicine. 8 (7), 718-724 (2002).</li>
<li>Vander Heide, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinically+Useful+Cardioprotection%3A+Ischemic+Preconditioning+Then+and+Now%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Pharmacology+and+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Clinically Useful Cardioprotection: Ischemic Preconditioning Then and Now.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics. 16 (3-4), 251-254 (2011).</li>
<li>Zhou, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+Limb+Ischemic+Postconditioning+Protects+Against+Neonatal+Hypoxic-Ischemic+Brain+Injury+in+Rat+Pups+by+the+Opioid+Receptor%2FAkt+Pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Remote Limb Ischemic Postconditioning Protects Against Neonatal Hypoxic-Ischemic Brain Injury in Rat Pups by the Opioid Receptor/Akt Pathway.</a> Stroke. 42 (2), 439-444 (2011).</li>
<li>Hasegawa, J., Obara, T., Tanaka, K., Tachibana, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-density+presynaptic+transporters+are+required+for+glutamate+removal+from+the+first+visual+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">High-density presynaptic transporters are required for glutamate removal from the first visual synapse.</a> Neuron. 50 (1), 63-74 (2006).</li>
<li>Kanoria, S., Jalan, R., Seifalian, A. M., Williams, R., Davidson, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocols+and+mechanisms+for+remote+ischemic+preconditioning%3A+A+novel+method+for+reducing+ischemia+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Protocols and mechanisms for remote ischemic preconditioning: A novel method for reducing ischemia reperfusion injury.</a> Transplantation. 84 (4), 445-458 (2007).</li>
<li>Maier, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+depth+and+duration+of+mild+hypothermia+in+a+focal+model+of+transient+cerebral+ischemia+-+Effects+on+neurologic+outcome%2C+infarct+size%2C+apoptosis%2C+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Optimal depth and duration of mild hypothermia in a focal model of transient cerebral ischemia - Effects on neurologic outcome, infarct size, apoptosis, and inflammation.</a> Stroke. 29 (10), 2171-2180 (1998).</li>
<li>Reith, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+temperature+in+acute+stroke%3A+Relation+to+stroke+severity%2C+infarct+size%2C+mortality%2C+and+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Body temperature in acute stroke: Relation to stroke severity, infarct size, mortality, and outcome.</a> Lancet. 347 (8999), 422-425 (1996).</li>
<li>Barbe, M. F., Tytell, M., Gower, D. J., Welch, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HYPERTHERMIA+PROTECTS+AGAINST+LIGHT+DAMAGE+IN+THE+RAT+RETINA.+%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">HYPERTHERMIA PROTECTS AGAINST LIGHT DAMAGE IN THE RAT RETINA. </a> Science. 241 (4874), 1817-1820 (1988).</li>
<li>Wang, X. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+degradation+in+mouse+retina+after+a+transient+ischemia+and+protective+effect+of+hypothermia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+Research%22%5BJournal%5D)">Neuronal degradation in mouse retina after a transient ischemia and protective effect of hypothermia.</a> Neurological Research. 24 (7), 730-735 (2002).</li>
<li>Tonkovic-Capin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+cardioprotection+by+isoflurane%3A+role+of+K%28ATP%29+channels%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Delayed cardioprotection by isoflurane: role of K(ATP) channels.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 283 (1), H61-H68 (2002).</li>
<li>Pfenninger, E., Himmelseher, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effects+of+ketamine+on+a+cellular+level%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesist%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effects of ketamine on a cellular level.</a> Anaesthesist. 46, S47-S54 (1997).</li>
<li>Hirose, K., Chan, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BLOCKADE+OF+GLUTAMATE+EXCITOTOXICITY+AND+ITS+CLINICAL-APPLICATIONS%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochemical+Research%22%5BJournal%5D)">BLOCKADE OF GLUTAMATE EXCITOTOXICITY AND ITS CLINICAL-APPLICATIONS.</a> Neurochemical Research. 18 (4), 479-483 (1993).</li>
<li>Welberg, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychiatric+disorders%3A+Ketamine+modifies+mood+through+mTOR%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+reviews.+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Psychiatric disorders: Ketamine modifies mood through mTOR.</a> Nature reviews. Neuroscience. 11 (10), 666(2010).</li>
<li>Garcia, L. S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+administration+of+ketamine+induces+antidepressant-like+effects+in+the+forced+swimming+test+and+increases+BDNF+levels+in+the+rat+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuro-Psychopharmacology+%26+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Acute administration of ketamine induces antidepressant-like effects in the forced swimming test and increases BDNF levels in the rat hippocampus.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology & Biological Psychiatry. 32 (1), 140-144 (2008).</li>
<li>Wassle, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parallel+processing+in+the+mammalian+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Parallel processing in the mammalian retina.</a> Nature Reviews Neuroscience. 5 (10), 747-757 (2004).</li>
<li>Hertle, D. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+analgesics+and+sedatives+on+the+occurrence+of+spreading+depolarizations+accompanying+acute+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Effect of analgesics and sedatives on the occurrence of spreading depolarizations accompanying acute brain injury.</a> Brain. 135, 2390-2398 (2012).</li>
</ol>

De auteur heeft niets te onthullen.

Knaagdier achterpoot ischemie werd geïnduceerd met succes een manuele bloeddrukmeter en manchet levert neuroprotectie de fotoreceptoren van de retina. Een bevinding consistent met ischemische conditioning geïnduceerde bescherming van de fotoreceptoren van licht letsel 9,28. In wezen, remote ischemie veroorzaakt korte zuurstoftekort aan weefsels. Derhalve remote ischemische voorconditionering veel overeenkomsten ischemische conditioneren of als alternatief genoemd ischemische toler...

De overleving van de meeste, zo niet alle weefsels in aanwezigheid van metabole stress kan worden verbeterd door voorafgaande conditionering met een periode van subletale ischemie 1,2. Ischemische preconditionering (IP) in de praktijk is de blootstelling van weefsel subletale ischemie, voordat het weefsel ervaringen ernstiger stressoren, zoals een volgend ischemische schade. In diermodellen IP geeft opvallend bescherming aan de hersenen, retina, hart en longen 3-6. Dienovereenkomstig, waarnemingen bij patiënten met een beroerte toonde een verband tussen de eerdere TIA&#39;s en een betere klinische resultaten 7,8. IP beschermt ook retinale fotoreceptoren van niet-ischemische verwondingen 9. De effectiviteit van IP in diverse weefsels en letsels suggereert dat het activeren van een aangeboren mechanisme van celoverleving in alle weefsels. Ischemische preconditionering van het myocard is gesuggereerd om beschermende effecten door de upregulation hebbenhypoxie induceerbare factor (HIF), bij velen bekend metabole routes te reguleren door het vrijkomen van adenosine of door de opening van de mitochondriale ATP kaliumkanalen 10,11. Adenosine afgifte en ATP kaliumkanalen zijn betrokken bij cerebrale ischemie maar onderzoek naar de neuroprotectieve mechanismen van ischemische conditionering tot nu toe gericht op modificaties van anti-excitotoxiciteit, anti-apoptotische en anti-inflammatoire pathways 12,13. Algemeen begrip van het moleculaire proces van ischemische conditionering voor bescherming neuronen beperkt. Remote ischemische voorconditionering pogingen conditioneren verre kritisch belangrijke organen (hart, hersenen, long) door het opwekken van ischemie minder kritische weefsels. Remote ischemische preconditionering (RIP) met behulp van de achterste ledematen is aangetoond neuroprotectieve in knaagdiermodellen van een beroerte 14-17 te zijn. De werkwijze beschreven door ons een eenvoudige, betrouwbare en niet-invasieve protocol voor het induceren van TNO. De overgrote meerderheid van RIP protocollen omvatten het achterste lidmaat, waarschijnlijk omdat de femorale slagader in het bovenste achterste ledematen gemakkelijk herkenbaar en toegankelijk voor chirurgische klem- en tourniquet toepassing. In ischemische ledematen invasieve studies voor het onderzoek van de hersenen en huidbescherming, ischemie geïnduceerd door het scheiden van de femorale slagader van de lies ligamenten en klemmend de femorale arterie 2,15,18. De ischemie die uit een ledemaat cuffing of femorale slagader klemming is bevestigd door veranderingen op het onderdeel inclusief een verlies van puls afname oxygenatie en een daling van de huidtemperatuur. Remote ischemie kan worden bevestigd door het verlies van puls met laser Doppler of Doppler ultrasound 17-19. Huidtemperatuur kan worden gebruikt als alternatief voor Doppler hoewel de relatie niet lineair 20,21. Accurate temperatuur opnames zijn gemeengoed in laboratoria en blikgemakkelijk opgenomen in remote ischemische studies. Een alternatief voor femorale vastklemmen operatie is de inductie van ischemie met een tourniquet. Tourniquet toepassing produceert vergelijkbaar ischemie is aan dat van vaartuig klemmen; Kutchner et al. vergeleken invasieve femorale arterie klemmen met een niet-invasieve tourniquet en vonden werkwijzen onderbroken bloedtoevoer naar de ledematen en verminderde huidbeschadiging in een plastische chirurgie model van ischemie huidflap 18. Cuffing hetzij een been of arm en verhogen van de manchetdruk boven de systolische bloeddruk is gevonden beschermde tegen ischemische schade bij varkens en mensen 17,19,22 te zijn. Verschillende tourniquet zal remote-inducerende ischemische omvatten het gebruik van een bloeddrukmanchet of een elastische band 17,22,23. Het gebruik van een elastische band ischemie induceren een onveilige methode mogelijk die tot een ongereguleerde hoeveelheid druk in deledematen, met de druk stijgt boven de 500 mmHg wordt opgenomen bij de mens 24. Verder ischemie middels een elastische band leidt tot spierbeschadiging in ratten na verwijdering van de band 23, zoals beoordeeld door Evans Blue Dye, een in vivo marker van myofiber permeabiliteit 25. Daarentegen kan de afgifte van een geregelde druk aan de tourniquet worden bereikt met behulp van een bloeddrukmanchet verbonden met een sphygmomanometer 17,19,22,26. In deze studie werd een lichte letselmodel van fotoreceptor degeneratie werd gebruikt voor het neuroprotectieve effect van externe ischemische preconditionering tonen. Remote ischemie werd onmiddellijk opgewekt voor lichte verwondingen, zodat de daaropvolgende fotoreceptor degeneratie zoals bevestigd door retinale functie testen. De bijbehorende video zal de toepassing van niet-invasieve remote ischemie aangetoond.

<table><tbody><tr><td>Gold series DuraShock hand aneroid sphygmomanometer</td><td>Welch Allyn</td><td>DS56</td><td>Handmatig sphygmomanometer</td></tr><tr><td>Neonate [size 2] 1 tube, 10 pack</td><td>Welch Allyn</td><td>5082-102-1</td><td>Lijmblok</td></tr><tr><td>Luer lock adaptor</td><td>Welch Allyn</td><td>5082-178</td><td>Adapter voor neonatale blok</td></tr><tr><td>Thermistor pod</td><td>AD Instruments</td><td>ML 309</td><td>Huidtemperatuur unit</td></tr><tr><td>Skin temperture probe</td><td>AD Instruments</td><td>MLT 422/A</td><td></td></tr><tr><td>Powerlab, 4 channel acquistion hardware</td><td>AD Instruments</td><td>PL 35044</td><td></td></tr><tr><td>Homeothermic blanket system with flexible probe</td><td>Harvard Appartus</td><td>507222F</td><td></td></tr><tr><td>Towel</td><td></td><td></td><td>optioneel: ontwaken remote ischemie</td></tr><tr><td>Isoflo - 100% Isoflurane (250 ml)</td><td>Abbot Animal Health</td><td>05260-05</td><td>optioneel: inhalatieanesthesie remote ischemie</td></tr><tr><td>Ketamil - ketamine 100 mg/ml (50 ml)</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>optioneel: injecteerbaar anesthesie remote ischemie</td></tr><tr><td>Xylium - Xylazine 100 mg/ml (50 ml)</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>optioneel: injecteerbaar anesthesie remote ischemie</td></tr></tbody></table>

remote limb ischemische preconditionering: een neurobeschermende technique in knaagdieren

Remote Limb Ischemic Preconditioning:  A Neuroprotective Technique in Rodents

Subletale ischemie weefsels beschermt tegen latere, meer ernstige ischemie door opregulatie van endogene mechanismen in het aangetaste weefsel. Subletale ischemie is ook aangetoond dat beschermingsmechanismen upregulate afgelegen weefsels. Een korte periode van ischemie (5-10 min) in de achterste ledematen van zoogdieren induceert zelfbeschermende reacties in de hersenen, longen, hart en retina. Het effect is bekend als remote ischemische preconditionering (RIP). Het is een therapeutisch veelbelovende manier van bescherming van vitale organen, en is nu al onder de klinische proeven voor het hart en de hersenen verwondingen. Deze publicatie toont een gecontroleerde, minimaal invasieve werkwijze voor het maken van een ledemaat - speciaal de achterpoot van een rat - ischemische. Een bloeddrukmanchet ontwikkeld voor humane neonaten is verbonden met een handmatige sfygmomanometer en gebruikt om 160 mmHg druk uitoefent rond het bovenste gedeelte van de achterste ledematen. Een sonde ontworpen om huidtemperatuur sporen wordt gebruikt om te controleren ischemia, door registratie van de temperatuurdaling huid veroorzaakt door drukgeïnduceerde occlusie van de beenslagaders en de temperatuurstijging wat afgifte van de manchet volgt. Deze methode van TNO biedt bescherming aan de rat retina tegen fel licht veroorzaakte schade en degeneratie.

Een bloeddrukmanchet verhoogd tot boven 160 mmHg stopt de bloedstroom naar de achterste ledematen zoals duidelijk te zien in figuur 1B. Het ontbreken van weefseloxygenatie resulteerde in een reducerende temperatuur van de voeten van het dier voor ischemie-reperfusie protocol (Figuur 2). De voet temperatuur (33 ° C) lager dan de eigen temperatuur en betrouwbaar verlaagd gedurende manchetdruk elevatie (31 ° C) stijgt wanneer de manchet is leeggelopen (32 ° C). Een enkele 1.000 lux licht l...

Remote ischemische preconditionering (RIP) is een werkwijze voor het conditioneren weefsels tegen schadelijke stress. We hebben een methode van remote ischemie vastgesteld op de achterste ledematen, door het opblazen van een bloeddrukmeter manchet voor 5-10 min. De neurobeschermende capaciteiten van RIP zijn aangetoond in een model van retinale degeneratie in knaagdieren.

Remote Limb Ischemische preconditionering: Een Neurobeschermende Technique in Knaagdieren

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. ...

Het algemene doel van deze procedure is om ischemie in de achterpoot te veroorzaken die afgelegen weefsels voorbereidt op latere stress. Bijvoorbeeld, het netvlies tegen lichtbeschadiging. Dit wordt bereikt door eerst de handmatige Ingle mom manometer te kalibreren.Vervolgens wordt het dier geanesthetiseerd en op een verwarmingskussen geplaatst. Daarna wordt de achterpoot van het dier gestrekt en wordt de manchet op de juiste plaats gelegd. Ten slotte wordt afgelegen ischemie uitgevoerd door de manchet op te blazen met de pomp, de manchet te ontluchten en het proces een tweede keer te herhalen.Uiteindelijk, wanneer toegepast vóór lichtbeschadiging, wordt afgelegen ischemie gebruikt om een verbetering in de retinale functie en het aantal fotoreceptoren die apoptose ondergaan te laten zien. Deze methode kan belangrijke vragen in het neurologische veld beantwoorden, zoals hoe zelfbescherming wordt geïnduceerd met afgelegen ischemische preconditie. Voor het uitvoeren van real-time huidtemperatuurtracking. Open de temperatuurregistratiesoftware, pas de temperatuurinstelling aan tot tussen de 30 en 35 graden Celsius en de frequentie van bemonstering aan tot elke 100 milliseconden met beh

remote-limb-ischemic-preconditioning-neuroprotective-technique

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

De chirurgische procedure voor het induceren van eenzijdige achterbeen ischemie is aangetoond, met bevestiging van ischemie door een laser Doppler perfusie beeldvorming.

Muizenmodel van achterbeen ischemie

Er is een groeiend aantal aanwijzingen, dat ischemische preconditionering (PC) - een niet-schadelijk ischemische uitdaging voor de hersenen - verleent een tijdelijke bescherming aan een volgende schadelijke ischemische schade. Wij opgericht bilaterale gemeenschappelijke occlusie van de halsslagader (BCCAO) als voorbehandeling stimulans voor vroege ischemische tolerantie (IT) in C57Bl6 / J muizen aanzetten tot voorbijgaande focale cerebrale ischemie (geïnduceerd door midden cerebrale slagader...

Bilaterale Gemeenschappelijke occlusie van de halsslagader als een adequate Voorconditionering Stimulus naar Early ischemische tolerantie te induceren bij focale ischemie

Source: Zheng, Y., et al. Experimental Models to Study the Neuroprotection of Acidic Postconditioning Against Cerebral Ischemia. J. Vis. Exp. (2017)This video demonstrates the application of acidic postconditioning (APC) to evaluate its neuroprotective effects against ischemic injury in a mouse model of middle cerebral artery occlusion (MCAO). It outlines the steps involved in reperfusion in the MCAO model and the application of APC during reperfusion to mitigate excitotoxicity, oxidative...

 Assessing the Neuroprotective Effects of Acidic Postconditioning in a Mouse Model of Cerebral Ischemia

Source: Poinsatte, K., et al., Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice. J. Vis. Exp. (2015)This video demonstrates the method of repetitive hypoxic preconditioning (RHP) by exposing a mouse to controlled hypoxia cycles before inducing an ischemic stroke. The experiment evaluates its effects on blood-brain barrier stability, neuronal adaptation, and inflammation.

Neuronal Adaptation to Repetitive Hypoxic Preconditioning in Mice

Source: Brandli, A. Remote Limb Ischemic Preconditioning: A Neuroprotective Technique in Rodents. J. Vis. Exp. (2015)This video demonstrates a non-invasive limb ischemic preconditioning protocol in rats to induce systemic neuroprotection. The procedure involves controlled arterial occlusion and reperfusion, triggering cellular stress pathways that release protective factors. These factors enhance resistance to ischemic and metabolic injuries in distant organs such as the brain and retina.

Non-Invasive Limb Ischemic Preconditioning in a Rat Model for Neuroprotection

Het elektroretinogram (ERG) is een elektrisch potentiaal dat door de retina wordt gegenereerd als reactie op licht. Dit artikel beschrijft hoe de ERG kan worden gebruikt om de retinale functie te beoordelen, bij in het donker aangepaste ratten, en hoe het kan worden gebruikt om een neuroprotectieve interventie te evalueren, in dit geval afstandsischemisch preconditioning.

Met behulp van de electroretinogram om Function beoordelen in het knaagdier Retina en de beschermende effecten van Remote Limb Ischemische preconditionering

Dit protocol beschrijft repetitieve hypoxische preconditie, of korte blootstellingen aan systemische hypoxie die infarctvolumes en bloed-hersenbarrière-storingen verminderen na een voorbijgaande occlusie van de middelste hersenslagader bij muizen. Het beschrijft ook dubbele kwantificering van infarctvolume en bloed-hersenbarrière-storing na een beroerte om de werkzaamheid van neurovasculaire bescherming te beoordelen.

Kwantificering van Neurovasculaire Protection Na Repetitive Hypoxische Voorconditionering en Transient midden cerebrale slagader Occlusie in Muizen

Het geïsoleerde rattenhart is een duurzaam model voor ischemie-reperfusieletsel. Hier beschrijven we het proces van het oogsten van het kloppende hart van een rat via in situ aortacanuletie, Langendorff-perfusie van het hart, gesimuleerde ischemie-reperfusieletsel en infarctkleuring om de omvang van het ischemische letsel te bevestigen.

Inductie en beoordeling van ischemie-reperfusie schade in Langendorff-geperfuseerde Rat Hearts

Chirurgische inductie van hindlimbischemie bij muizen is nuttig om angiogenesis te onderzoeken, maar dit wordt bemoeilijkt bij bepaalde ingefokt muizenrassen die duidelijke ischemie-geïnduceerde weefsellethale schade vertonen. Er worden methoden beschreven om subacute ledemaatische ischemie te induceren met behulp van ameroïde constrictors om dit probleem te omzeilen door de inductie van geleidelijke arteriële occlusie.

Methoden voor acute en subacute muizen achterbeen ischemie

Zure postconditioning beschermt tegen cerebrale ischemie. Hier presenteren wij twee modellen om APC uit te voeren. Ze worden respectievelijk bereikt door corticostriatale plakjes over te brengen naar zure buffer na zuurstof-glucose-deprivatie in vitro en door inademing van 20% CO 2 na middelste cerebrale arterie-occlusie in vivo .

Experimentele modellen om de neuroprotectie van zure postconditioning te bestrijden tegen cerebrale ischemie

Dit protocol toont aan hoe een onderknie-amputatie bij ratten kan worden uitgevoerd en direct gerichte spierrenervatie (iTMR) kan worden uitgevoerd om strategieën te onderzoeken om amputatiegerelateerde pijn te behandelen en te voorkomen en om de pijnmechanismen die met amputatie samenhangen beter te begrijpen.

Rat achterpootamputatiemodel en directe gerichte spierrenervatie

Leer een minimaal invasieve methode voor remote ischemische preconditionering bij ratten om het netvlies te beschermen tegen lichtschade. Deze techniek activeert endogene neuroprotectieve mechanismen via gecontroleerde ischemie-reperfusiecycli.

Remote Limb Ischemische preconditionering: Een Neurobeschermende Technique in Knaagdieren

Meer video's verkennen