Name: Matige Prenatale blootstelling aan alcohol en kwantificering van sociaal gedrag bij volwassen ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 1 s
Description: Leer hoe je matige prenatale alcoholblootstelling bij ratten kwantificeert en het sociaal gedrag in volwassenheid analyseert. Deze methode helpt onderzoekers de neurologische effecten van prenatale ontwikkeling te begrijpen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Ondersteuning verleend door subsidie AA019462 aan DAH en AA019884 aan DDS.

Alle procedures hier en in de bijgevoegde video beschreven zijn goedgekeurd door de Institutional Animal Care en gebruik Comités van de Health Sciences Center en de campus van de Universiteit van New Mexico. 1. Prenatale blootstelling aan ethanol <ol><li> Het verkrijgen van alle benodigde materialen en chemicaliën: Natriumsaccharine zouthydraat, 190 proof ethanol (95% alcohol), kralen glas drinken buizen, natuurlijk rubber wit # 4 stopper één gat, 1 &quot;bocht buizen-balpen, papier heersers afgedrukt via www .vendian.org / mncharity / map3 / paper_rulers /. </li><li> Verkrijgen bewezen volwassen fokker ratten van een leverancier of een alternatieve bron. Gebruik Long-Evans fokkers voor de methoden en representatieve gegevens die in dit protocol. Vrouwtjes wegen 125-150 g en 6-7 weken bij aankomst zodat zij ongeveer 9-10 weken oud ten tijde van de fokkerij (stap 1.5). Zorg ervoor dat alle aspirant dammen zijn de eerste keer moeder. Zorg ervoor dat de mannetjes zijn 12weken bij aankomst en 15 weken oud bij het begin van de kweek protocol. </li><li> Het huis van de dieren afzonderlijk in plastic kooien bij 22 ° C op een omgekeerde 12 uur licht / donker schema (brandt op 21:00-09:00 uur). Zorg voor toegang tot voedsel en kraanwater ad libitum gedurende het onderzoek, ook tijdens alle drinken sessies. Laat minstens 1 week voor acclimatisatie aan de faciliteit voordat u verder met stap 1.4. </li><li> Verkrijgen basislijn lichaamsgewicht voor elke vrouwelijke rat. </li><li> Evalueer pre-zwangerschap drinking niveaus bij vrouwelijke ratten gedurende 2 weken. Volg de stappen 1.5.1-1.5.6 in orde. <ol><li> Op dag 1 en 2 vullen een drink buis met 0,066% saccharine-oplossing (geen ethanol) in kraanwater. Te kwantificeren verbruik brengen een papieren liniaal met mm precisie aan de drinkslang voor het vullen. Gebruik deze methode als het vermindert fout in de meting in verband met een gewicht van buizen tot ethanol verbruik te kwantificeren. De buis wordt tot de 20 mm markering op de liniaal. Begin van vier uur drinking sessies (stappen 1.5.1-1.5.6 en 1.7) 1 uur na het begin van de donkere fase (10:00 uur) als activiteit en drinken het hoogst. </li><li> Aan het einde van elke sessie drinken kwantificeren van de hoeveelheid van de saccharine oplossing werd geconsumeerd. Vergelijkingen te vergemakkelijken, bepaalt het volume van de oplossing per mm op de liniaal te voren en zetten mm tot volumes. Voor de buizen hier aanbevolen elk mm komt overeen met 0,366 ml. </li><li> Op dag 3 en 4 vullen een buis met 2,5% ethanol (v / v) en 0,066% saccharine oplossing in leidingwater. Aan het einde van elke sessie kwantificeren de hoeveelheid ethanol oplossing (gewicht per kg lichaamsgewicht) die werd verbruikt. </li><li> Op dag 5 en daarna vullen een buis met 5% ethanol (v / v) en 0,066% saccharine oplossing in leidingwater. Aan het einde van elke sessie kwantificeren de hoeveelheid ethanol oplossing (gewicht per kg lichaamsgewicht) die werd verbruikt. </li><li> Na voltooiing van de pre-zwangerschap drinken fase wegen de ratten en berekent het gemiddelde ethanol consumptie en standaarddeviatie voor de gehele groep. Verwijder ratten waarvoor gemiddelde verbruik groter is dan 1 standaarddeviatie boven of onder het groepsgemiddelde van de studie om de variabiliteit in vrijwillige inname tijdens de zwangerschap. </li><li> Wijs de overblijvende ratten ofwel de sacharine control of PAE zodanige omstandigheden dat de pre-zwangerschap drinken niveaus nauw afgestemd mogelijk voor de twee groepen. </li></ol></li><li> Binnen 1-14 dagen paar elke vrouwelijke rat met een bewezen mannelijke fokker. Vrouwelijke ratten niet ethanol verbruikt tijdens de kweek fase. Zwangerschap te bevestigen door de aanwezigheid van een vaginale plug, wegen de vrouwelijke rat, en het huis van haar individueel. Dit wordt gedefinieerd als zwangerschapsduur van 1. Eventueel laat het vrouwelijke ratten met een mannelijke fokker tot 5 dagen, waarna verwijdert de vrouwtjes van de studie. OPMERKING: Omdat ethanol verbruik tijdens de zwangerschap begint om 10:00 uur op zwangerschapsdiabetes dag 1 controle op de aanwezigheid van een vaginale plug moet worden uitgevoerdvoorafgaand aan deze tijd. </li><li> Zorg ethanol of saccharine oplossing 4 uur per dag (1.000 tot 1.400 hr) voor de duur van de zwangerschap. <ol><li> Beginnend op zwangerschapsdiabetes dag 1 bieden de vrouwelijke rat met ofwel 0% of 5% ethanol en 0,066% saccharine oplossing in leidingwater op basis van de groepsopdracht. Zorg ervoor dat het volume van 0% ethanoloplossing die aan sacharine controleratten is afgestemd op het gemiddelde van 5% ethanoloplossing verbruikt door ethanol ratten. Aan het einde van elke sessie kwantificeren de hoeveelheid ethanol oplossing (gewicht per kg lichaamsgewicht) of saccharine die werd verbruikt. </li><li> Weeg dammen rat wekelijks om gewichtstoename van de moeder te beoordelen. </li><li> Zorgen voor voedsel en water uit de kraan te allen tijde inclusief het drinken sessies. </li><li> Staakt het ethanol procedures blootstelling toen de nakomelingen worden geboren. Noteer het aantal levende jongen en pup gewichten bij de geboorte. Wijzen de dag van de geboorte als postnatale dag 0. </li><li> Ruimen het zwerfafval tot 10 pups rond postnatale dag 2-3. Poging to onderhouden van een gelijke verhouding tussen mannelijke en vrouwelijke dieren in elk nest. Indien dit niet mogelijk is, ruiming 10 pups met verschillende aantallen mannen en vrouwen. </li><li> Record pup gewichten 2-3 dagen na de geboorte. </li><li> Spenen van de dieren op ongeveer postnatale dag 21-24 en huis in hetzelfde geslacht paren met een dier van dezelfde prenatale behandeling staat. Gebruik niet meer dan 1-2 ratten uit elk nest per experiment om potentiële nestje gevolgen te beperken. </li></ol></li></ol> 2. Social Behavior <ol><li> Verkrijgen en voor te bereiden alle benodigde materialen en apparatuur. <ol><li> Te verkrijgen in een inrichting voor sociale interactie. Gebruik een kamer met een open bovenkant uit materiaal dat is gemakkelijk te reinigen en te ontsmetten. De voorzijde van de inrichting moet worden bedekt met stijve transparante kunststof (~ 2 mm) voor filmen. Lijn de binnenmuren en de vloer met doorzichtige plastic (~ 2 mm dikte) om te helpen bij het schoonmaken en geurbestrijding. Plaats spiegels langs de achterkant interieur wall te helpen analyseren. OPMERKING: Voor hier de representatieve gegevens gerapporteerd een aangepaste kamer (95 cm lang x 47 cm breed x 43 cm hoog) met een open bovenkant en stijve doorzichtige plastic (2 mm dik) met betrekking tot het interieur zijkanten en de vloer van het apparaat werd gebruikt. Spiegels werden geplaatst langs de achterwand. De specifieke afmetingen en materialen zijn niet kritisch voor het meten van sociaal gedrag, maar het wordt aanbevolen dat de afmetingen voldoende groot om echte sociale interactie ervoor kan worden onderscheiden van andere gedragingen. Dat is, de inrichting moet voldoende groot zijn zodat dieren niet altijd dicht bij elkaar. </li><li> Verkrijgen videocamera&#39;s kan opnemen onder lage of geen licht alle filmen wordt uitgevoerd met weinig of geen omgevingslicht in het zichtbare spectrum. Zorg ervoor dat de camera heeft een hoge resolutie binnen het infrarode spectrum, evenwel elke camera geschikt voor het opnemen onder donkere omstandigheden in zijn nativenachtmodus of met extra infrarood verlichting moet voldoende zijn. </li><li> Positie infraroodstralers rond de inrichting verlichting van de inrichting in de video-opname te verbeteren. </li><li> Verkrijgen laboratorium kwaliteit houtsnippers (esp chip). </li><li> Verkrijg een borstel, blik, chloordioxide en isopropyl alcohol (70%) schoon inrichting tussen sessies geurbestrijding. </li></ol></li><li> Apparatuur acclimatisatie en sociaal gedrag <ol><li> Bij deze fase van het experiment, meten bij volwassen ratten die ten minste 90 dagen oud zijn. </li><li> Voorafgaand aan elke sessie verwijder alle bossen chips, veeg het apparaat schoon met isopropylalcohol om geuren tussen de sessies te controleren en voer verse houtsnippers. Controleer of de houtspaanders volledig bedekken de bodem van de inrichting. Schoonmaken en reinigen van de inrichting met een geschikt middel, zoals chloordioxide, indien nodig. </li><li> Gedurende drie opeenvolgende dagen plaats een dier en zijn kooi-mate in dekamer voor 30 minuten om de dieren wennen aan de inrichting. Tijdens de acclimatisering sessies alle ruimte lampjes gaan uit. </li><li> Aan het einde van het derde acclimatisering sessie huis van de dieren afzonderlijk in nieuwe kooien met verse beddengoed, voedsel en water voor 24 uur tot sociale interactie te motiveren. </li><li> Record sociale interactie op de volgende dag 24 uur nadat de dieren werden gescheiden. <ol><li> Verwijder houtsnippers uit het apparaat, schoon en ontsmetten met chloordioxide, veeg met isopropylalcohol om geuren te controleren, en vervang de houtsnippers voorafgaand aan de sessie. </li><li> Breng één of meer camera&#39;s om de interactie te nemen. Stand ten minste één camera voor de inrichting, zodat de spiegels op de achterwand van de inrichting kan een extra perspectief analyse. </li><li> Ophalen dieren één voor één en houdt het dier voor de camera, zodat de unieke eigenschappen van de vacht patroon kan worden opgemerkt. Deze identificatiekenmerken vande vacht kan worden gebruikt om ratten te onderscheiden tijdens de analyse plaats kunstmatig merken van de dieren. OPMERKING: Omdat veel aspecten van knaagdieren sociale interactie betrekken olfactorische signalen en het ruiken van de partner, waar mogelijk de invoering van vreemde geuren moeten worden vermeden. Long-Evans ratten typisch enige eigenschap van het bont patroon dat kan worden gebruikt om twee willekeurige dieren te onderscheiden. Voor andere stammen (bijvoorbeeld Sprague-Dawley ratten) alternatieve benaderingen zoals het markeren van de staart met een ongeparfumeerde kleurstof worden gebruikt. Het is belangrijk te beseffen dat vele gedragingen van belang zijn gericht op specifieke doelen (bijv., Anogenital snuiven gericht de buurt van de basis van de staart, speelse aanvallen gericht op de nek van de hals, of agressieve aanvallen gericht op de flanken of buik). Markering dieren dichter bij het uiteinde van de staart lang deze doelen plaats wordt aanbevolen. </li><li> Video opnemen van de sociale interactie gedurende ten minste 12 min.</li><li> Monitor dieren voor de hele sessie vechten. Indien mogelijk, kunnen kijken op een monitor of raam dieren zodat de experimentator niet in de kamer tijdens de sessie. OPMERKING: Vechten is slechts zelden waargenomen in studies met volwassen ratten, echter, moeten de dieren worden gecontroleerd tijdens de sessie. De sessie moet worden gestaakt als er teveel vechten of er tekenen van schade of letsel aan een dier. </li></ol></li></ol></li><li> Behavioral codering en analyse. <ol><li> Identificeer de volgende gedragingen van belang als per eerdere werk met PAE 1,18. Kwantificeren van de duur, frequentie en latentie tot het eerste optreden van de volgende problemen; wrestling (inclusief pinning), boksen, kruipen (kruising) over / onder de partner, anogenitale snuiven, andere snuiven van het lichaam van de partner (body snuiven), allogrooming (verzorging van de partner), het fokken, en snuiven / graven in de houtsnippers . Voorbeelden van elk gedrag illustrerend in de video-component van dit artikel. </li><li> Kwantificeren van de sociale gedrag van de belangstelling van de video. Verkrijgen van de frequentie, de totale duur en de latency naar eerste instantie voor elk gedrag van belang. LET OP: Het verkrijgen van deze maatregelen kan handmatig worden bereikt, echter, kwantificering van deze maatregelen met behulp van geautomatiseerde analyses van gedigitaliseerde video wordt aanbevolen. Een Matlab (www.mathworks.com) script voor het afspelen van de video en kwantificering van gedrag is bedoeld als een aanvulling op dit artikel. </li><li> Nadat codering is voltooid voor alle ratten de resulterende duur, frequentie en latency gegevens worden geanalyseerd met een statistisch pakket. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Hamilton, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prenatal+exposure+to+moderate+levels+of+ethanol+alters+social+behavior+in+adult+rats%3A+Relationship+to+structural+plasticity+and+immediate+early+gene+expression+in+frontal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Prenatal exposure to moderate levels of ethanol alters social behavior in adult rats: Relationship to structural plasticity and immediate early gene expression in frontal cortex.</a> Behav. Brain Res. 207 (2), 290-304 (2010).</li>
<li>May, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Approaching+the+prevalence+of+the+full+spectrum+of+Fetal+Alcohol+Spectrum+Disorders+in+a+South+African+population-based+study%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol.+Clin.+Exp.+Res%22%5BJournal%5D)">Approaching the prevalence of the full spectrum of Fetal Alcohol Spectrum Disorders in a South African population-based study.</a> Alcohol. Clin. Exp. Res. 37 (5), 818-830 (2013).</li>
<li>Chasnoff, I. J., Wells, A. M., Telford, E., Schmidt, C., Messer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurodevelopmental+functioning+in+children+with+FAS%2C+pFAS%2C+and+ARND%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Developmental+and+Behavioral+Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Neurodevelopmental functioning in children with FAS, pFAS, and ARND.</a> Journal of Developmental and Behavioral Pediatrics. 31 (3), 192-201 (2010).</li>
<li>Disney, E. R., Iacono, W., McGue, M., Tully, E., Legrand, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strengthening+the+case%3A+Prenatal+alcohol+exposure+is+associated+with+increased+risk+for+conduct+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Strengthening the case: Prenatal alcohol exposure is associated with increased risk for conduct disorder.</a> Pediatrics. 122 (6), E1225-E1230 (2008).</li>
<li>Kelly, S. J., Goodlett, C. R., Hannigan, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+fetal+alcohol+spectrum+disorders%3A+Impact+of+the+social+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Disabil+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Animal models of fetal alcohol spectrum disorders: Impact of the social environment.</a> Dev Disabil Res Rev. 15 (3), 200-208 (2009).</li>
<li>Kelly, S. J., Day, N., Streissguth, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+prenatal+alcohol+exposure+on+social+behavior+in+humans+and+other+species%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Effects of prenatal alcohol exposure on social behavior in humans and other species.</a> Neurotoxicol. Teratol. 22 (2), 143-149 (2000).</li>
<li>Thomas, S. E., Kelly, S. J., Mattson, S. N., Riley, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+social+abilities+of+children+with+fetal+alcohol+syndrome+to+those+of+children+with+similar+IQ+scores+and+normal+controls%5BTitle%5D)+AND+%22Alcoholism%3A+Clinical+and+Experimental+Research%22%5BJournal%5D)">Comparison of social abilities of children with fetal alcohol syndrome to those of children with similar IQ scores and normal controls.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 22 (2), 528-533 (1998).</li>
<li>Conry, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuropsychological+deficits+in+Fetal+Alcohol+Syndrome+and+fetal+alcohol+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol.+Clin.+Exp.+Res%22%5BJournal%5D)">Neuropsychological deficits in Fetal Alcohol Syndrome and fetal alcohol effects.</a> Alcohol. Clin. Exp. Res. 14 (5), 650-655 (1990).</li>
<li>Streissguth, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+Alcohol+Syndrome+in+adolescents+and+adults%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA-Journal+of+the+American+Medical+Association%22%5BJournal%5D)">Fetal Alcohol Syndrome in adolescents and adults.</a> JAMA-Journal of the American Medical Association. 265 (15), 1961-1967 (1991).</li>
<li>Streissguth, A. P., Barr, H. M., Sampson, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Moderate+prenatal+alcohol+exposure%3A+effects+on+child+IQ+and+learning+problems+at+age+7+1%2F2+years%5BTitle%5D)+AND+%22Alcoholism%3A+Clinical+and+Experimental+Research%22%5BJournal%5D)">Moderate prenatal alcohol exposure: effects on child IQ and learning problems at age 7 1/2 years.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 14 (5), 662-669 (1990).</li>
<li>Valenzuela, C. F., Morton, R. A., Diaz, M. R., Topper, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Does+moderate+drinking+harm+the+fetal+brain%3F+Insights+from+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Does moderate drinking harm the fetal brain? Insights from animal models.</a> Trends Neurosci. 35 (5), 284-292 (2012).</li>
<li>May, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+children+with+severe+Fetal+Alcohol+Spectrum+Disorders+in+communities+near+Rome%2C+Italy%3A+New+estimated+rates+are+higher+than+previous+estimates%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Env.+Res.+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Prevalence of children with severe Fetal Alcohol Spectrum Disorders in communities near Rome, Italy: New estimated rates are higher than previous estimates.</a> Int. J. Env. Res. Public Health. 8 (6), 2331-2351 (2011).</li>
<li>Tunc-Ozcan, E., Ullmann, T. M., Shukla, P. K., Redei, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-dose+thyroxine+attenuates+autism-associated+adverse+affects+of+fetal+alcohol+in+male+offspring%27s+social+behavior+and+hippocampal+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol.+Clin.+Exp.+Res%22%5BJournal%5D)">Low-dose thyroxine attenuates autism-associated adverse affects of fetal alcohol in male offspring's social behavior and hippocampal gene expression.</a> Alcohol. Clin. Exp. Res. 37 (11), 1986-1995 (2013).</li>
<li>Middleton, F. A., Varlinskaya, E. I., Mooney, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+substrates+of+social+avoidance+seen+following+prenatal+ethanol+exposure+and+its+reversal+by+social+enrichment%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Molecular substrates of social avoidance seen following prenatal ethanol exposure and its reversal by social enrichment.</a> Dev. Neurosci. 34 (2-3), 115-128 (2012).</li>
<li>Varlinskaya, E. I., Mooney, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+exposure+to+ethanol+on+gestational+day+15+affects+social+motivation+of+female+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Acute exposure to ethanol on gestational day 15 affects social motivation of female offspring.</a> Behav. Brain Res. 261, 106-109 (2014).</li>
<li>Meyer, L. S., Riley, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+play+in+juvenile+rats+prenatally+exposed+to+alcohol%5BTitle%5D)+AND+%22Teratology%22%5BJournal%5D)">Social play in juvenile rats prenatally exposed to alcohol.</a> Teratology. 34 (1), 1-7 (1986).</li>
<li>Royalty, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+prenatal+ethanol+exposure+on+juvenile+play-fighting+and+postpubertal+aggression+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychol+Rep%22%5BJournal%5D)">Effects of prenatal ethanol exposure on juvenile play-fighting and postpubertal aggression in rats.</a> Psychol Rep. 66 (2), 551-560 (1990).</li>
<li>Hamilton, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+moderate+prenatal+ethanol+exposure+and+age+on+social+behavior%2C+spatial+response+perseveration+errors+and+motor+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of moderate prenatal ethanol exposure and age on social behavior, spatial response perseveration errors and motor behavior.</a> Behav. Brain Res. 269, 44-54 (2014).</li>
<li>Kelly, S. J., Dillingham, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexually+dimorphic+effects+of+perinatal+alcohol+exposure+on+social+interactions+and+amygdala+DNA+and+DOPAC+concentrations%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Sexually dimorphic effects of perinatal alcohol exposure on social interactions and amygdala DNA and DOPAC concentrations.</a> Neurotoxicol. Teratol. 16 (4), 377-384 (1994).</li>
<li>Lugo, J. N., Marino, M. D., Cronise, K., Kelly, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+alcohol+exposure+during+development+on+social+behavior+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Effects of alcohol exposure during development on social behavior in rats.</a> Physiology and Behavior. 78 (2), 185-194 (2003).</li>
<li>Lugo, J. N., Marino, M. D., Gass, J. T., Wilson, M. A., Kelly, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethanol+exposure+during+development+reduces+resident+aggression+and+testosterone+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Ethanol exposure during development reduces resident aggression and testosterone in rats.</a> Physiology and Behavior. 87 (2), 330-337 (2006).</li>
<li>Kelly, S. J., Tran, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alcohol+exposure+during+development+alters+social+recognition+and+social+communication+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Alcohol exposure during development alters social recognition and social communication in rats.</a> Neurotoxicol. Teratol. 19 (5), 383-389 (1997).</li>
<li>Mooney, S. M., Varlinskaya, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+prenatal+exposure+to+ethanol+and+social+behavior%3A+Effects+of+age%2C+sex%2C+and+timing+of+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Acute prenatal exposure to ethanol and social behavior: Effects of age, sex, and timing of exposure.</a> Behav. Brain Res. 216 (1), 358-364 (2011).</li>
<li>Savage, D. D., Becher, M., de la Torre, A. J., Sutherland, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dose-dependent+effects+of+prenatal+ethanol+exposure+on+synaptic+plasticity+and+learning+in+mature+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol.+Clin.+Exp.+Res%22%5BJournal%5D)">Dose-dependent effects of prenatal ethanol exposure on synaptic plasticity and learning in mature offspring.</a> Alcohol. Clin. Exp. Res. 26 (11), 1752-1758 (2002).</li>
<li>Rasmussen, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+daily+ethanol+and+withdrawal%3A+1.+Long-term+changes+in+the+hypothalamo-pituitary-adrenal+axis%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol.+Clin.+Exp.+Res%22%5BJournal%5D)">Chronic daily ethanol and withdrawal: 1. Long-term changes in the hypothalamo-pituitary-adrenal axis.</a> Alcohol. Clin. Exp. Res. 24 (12), 1836-1849 (2000).</li>
<li>Savage, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+a+Novel+Cognition-Enhancing+Agent+on+Fetal+Ethanol-Induced+Learning+Deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol.+Clin.+Exp.+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of a Novel Cognition-Enhancing Agent on Fetal Ethanol-Induced Learning Deficits.</a> Alcohol. Clin. Exp. Res. 34 (10), 1793-1802 (2010).</li>
<li>Goodlett, C. R., Johnson, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+binge+ethanol+exposure+using+intubation%3A+Timing+and+dose+effects+on+place+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Neonatal binge ethanol exposure using intubation: Timing and dose effects on place learning.</a> Neurotoxicol. Teratol. 19 (6), 435-446 (1997).</li>
<li>Staples, M. C., Rosenberg, M. J., Allen, N. A., Porch, M. W., Savage, D. D. Impact of Combined Prenatal Ethanol and Prenatal Stress Exposure on Anxiety and Hippocampal-Sensitive Learning in Adult. 37 (12), 2039-2047 (2013).</li>
<li>Champagne, F. A., Francis, D. D., Mar, A., Meaney, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variations+in+maternal+care+in+the+rat+as+a+mediating+influence+for+the+effects+of+environment+on+development%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Variations in maternal care in the rat as a mediating influence for the effects of environment on development.</a> Physiol. Behav. 79 (3), 359-371 (2003).</li>
<li>Hamilton, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterns+of+social-experience-related+c-fos+and+Arc+expression+in+the+frontal+cortices+of+rats+exposed+to+saccharin+or+moderate+levels+of+ethanol+during+prenatal+brain+development%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Patterns of social-experience-related c-fos and Arc expression in the frontal cortices of rats exposed to saccharin or moderate levels of ethanol during prenatal brain development.</a> Behav. Brain Res. 214 (1), 66-74 (2010).</li>
<li>Barnett, S. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBarnett%2C+SA+%22A+study+in+behaviour%3A+Principles+of+ethology+and+behavioural+physiology+displayed+mainly+in+the+rat%22">A study in behaviour: Principles of ethology and behavioural physiology displayed mainly in the rat</a>. , (1963).</li>
<li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Play-fighting+differs+from+serious+fighting+in+both+target+of+attack+and+tactics+of+fighting+in+the+laboratory+rat+Rattus-Norvegicus%5BTitle%5D)+AND+%22Aggressive+Behav%22%5BJournal%5D)">Play-fighting differs from serious fighting in both target of attack and tactics of fighting in the laboratory rat Rattus-Norvegicus.</a> Aggressive Behav. 13 (4), 227-242 (1987).</li>
<li>Meaney, M. J., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+descriptive+study+of+social-development+in+the+rat+%28Rattus-Norvegicus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Anim.+Behav%22%5BJournal%5D)">A descriptive study of social-development in the rat (Rattus-Norvegicus).</a> Anim. Behav. 29 (1), 34-45 (1981).</li>
<li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prejuvenile+onset+of+play+fighting+in+laboratory+rats+%28Rattus+norvegicus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">The prejuvenile onset of play fighting in laboratory rats (Rattus norvegicus).</a> Dev. Psychobiol. 31 (3), 193-205 (1997).</li>
<li>Himmler, B. T., Pellis, V. C., Pellis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peering+into+the+dynamics+of+social+interactions%3A+measuring+play+fighting+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Peering into the dynamics of social interactions: measuring play fighting in rats.</a> J. Vis. Exp. (71), e4288-e4288 (2013).</li>
<li>Panksepp, J., Siviy, S., Normansell, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+psychobiology+of+play+%3A+Theoretical+and+methodological+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">The psychobiology of play : Theoretical and methodological perspectives.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 8 (4), 465-492 (1984).</li>
<li>Siviy, S. M., Panksepp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+modulation+of+juvenile+play+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Sensory modulation of juvenile play in rats.</a> Dev. Psychobiol. 20 (1), 39-55 (1987).</li>
<li>Pellis, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+orbital+frontal+cortex+damage+on+the+modulation+of+defensive+responses+by+rats+in+playful+and+nonplayful+social+contexts%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The effects of orbital frontal cortex damage on the modulation of defensive responses by rats in playful and nonplayful social contexts.</a> Behav. Neurosci. 120 (1), 72-84 (2006).</li>
<li>Blanchard, R. J., Blanchard, D. C., Takahashi, T., Kelley, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attack+and+defensive+behavior+in+albino-rat%5BTitle%5D)+AND+%22Anim.+Behav%22%5BJournal%5D)">Attack and defensive behavior in albino-rat.</a> Anim. Behav. 25 (3), 622-634 (1977).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen belangenconflicten te melden.

De prenatale blootstelling alcohol paradigma beschreven omvat vrijwillige gebruik van ethanol (5% v / v) door dammen rat tijdens de zwangerschap. Er zijn een aantal protocollen voor het blootstellen van niet-menselijke dieren ethanol tijdens hersenontwikkeling voorgesteld in de literatuur, die verschillen wat betreft de timing, dosering, duur en route van toediening ethanol alsmede de soort onderzochte. Hoewel een grondige behandeling van de voordelen van verschillende blootstelling protocollen hier niet wordt verstrekt...

Naar schatting 1-5% van de kinderen zijn gediagnosticeerd met Foetaal Alcohol Spectrum Stoornissen (FASDs) 2, die Foetaal Alcohol Syndroom (FAS), gedeeltelijke FAS (PFAS), en alcohol gerelateerde Neurodevelopmental Disorders (ARNDs) 3 bevatten. Tekorten in sociaal gedrag en cognitie behoren tot de meest voorkomende negatieve resultaten waargenomen bij kinderen met FASDs 4-7. Negatieve gevolgen zijn niet beperkt tot zware prenatale blootstelling aan alcohol (PAE), matige PAE die niet leidt tot de opvallende morfologische, gedrags- en cognitieve tekorten kenmerkend FAS kan relatief subtiel, maar toch hardnekkige veroorzaken tekorten bij mensen met FASDs 8-10 en niet-menselijke dieren blootgesteld aan alcohol tijdens hersenontwikkeling 11. Het belang van het begrijpen van de gedrags- en overeenkomstige neurobiologische gevolgen van matige PAE wordt onderstreept door de huidige schattingen geven dat het merendeel van de FASD zaken binnen minder s vallenEvere bereik van het spectrum 12. Verschillende onafhankelijke laboratoria hebben gemeld veranderingen in knaagdieren sociaal gedrag in verband met blootstelling ethanol tijdens de hersenontwikkeling, waaronder verminderde onderzoek en interactie 1,13-15, veranderd play 14,16,17, verhoogde agressieve interacties 17,18, wijzigingen in de gevoeligheid voor sociale stimuli 19-21, en ​​tekorten in sociaal verworven voedsel voorkeuren en geheugen maatschappelijke erkenning 22. Sociaal gedrag tekorten zijn waargenomen na blootstelling aan zware (bloed ethanol concentraties (Becs) ~ 300 mg / dl) 22,23 of meer gematigde niveaus van ethanol (Becs ~ 80 mg / dl) 1, en ​​in een breed scala van parameters voor andere belangrijke factoren, waaronder blootstelling timing, blootstellingsduur en de leeftijd bij gedrags- meting. Eerder onderzoek heeft aangetoond dat veranderingen in specifieke aspecten van sociale interaction op volwassen leeftijd discrimineren ratten blootgesteld aan gematigde niveaus van alcohol uit controle dieren blootgesteld aan sacharine 1,18. Vooral gematigd PAE consistent geassocieerd met robuuste toename worstelen, waarbij verhogingen van agressief gedrag, en lagere sociaal onderzoek (bijv snuiven van de partner) in volwassenheid suggereert. Omdat veranderingen in sociaal gedrag zijn betrouwbaar gevolgen van PAE, kan de kwantificering van sociaal gedrag volgende PAE belang houden voor vooruitgang in de richting van een meer volledig begrip van de neurale basis van PAE-gerelateerde veranderingen in sociaal gedrag en de ontwikkeling van interventionele benaderingen. Het doel van dit document en de bijbehorende video is het geven van instructie op de gematigde PAE-protocol en de methoden voor het kwantificeren van sociaal gedrag bij volwassen nakomelingen die moeten betrouwbaar onderscheiden prenatale alcohol blootstelling van niet-blootgestelde nakomelingen rat.

<table><tbody><tr><td>Saccharin natriumzouthydraat</td><td>Sigma</td><td>S1002</td><td></td></tr><tr><td>190 proof ethanol</td><td>Sigma</td><td>493538</td><td></td></tr><tr><td>Drinkbuizen met kralen van glas</td><td>Fisher</td><td>14-955K</td><td></td></tr><tr><td>Natuurlijke rubberen witte #4 stop met één gat</td><td>Plasticoid</td><td>LSG4M181</td><td></td></tr><tr><td>1" buis met ronde punt</td><td>Ancare</td><td>TD-199-3"</td><td></td></tr><tr><td>Papieren liniaal</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td><a href="http://www.vendian.org/mncharity/dir3/paper_rulers">www.vendian.org/mncharity/dir3/paper_rulers</a></td></tr><tr><td>Apparaat voor sociale interactie</td><td>Op maat gebouwd</td><td>N/A</td><td>95 cm X 47 cm X 43 cm</td></tr><tr><td>Videocamera's</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>In staat om opnames te maken in lage/geen lichtcondities</td></tr><tr><td>Infrarood verlichting</td><td>Vitek</td><td>VT-IR1-12</td><td></td></tr><tr><td>Teklad laboratoriumkwaliteit sani-chips</td><td>Harlan</td><td>7090A</td><td></td></tr><tr><td>Borstel en stofpan</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Isopropyl alcohol</td><td>Sigma</td><td>W292907</td><td></td></tr><tr><td>Chlorine Dioxide (1,5 mg tabletten)</td><td>Quiplabs</td><td>N/A</td><td>Bereid volgens de aanbeveling van de fabrikant</td></tr></tbody></table>

matige prenatale blootstelling aan alcohol en kwantificering van sociaal gedrag bij volwassen ratten

Moderate Prenatal Alcohol Exposure and Quantification of Social Behavior in Adult Rats

Veranderingen in sociaal gedrag behoren tot de belangrijkste negatieve gevolgen die worden waargenomen bij kinderen met Foetaal Alcohol Spectrum Stoornissen (FASD's). Verschillende onafhankelijke laboratoria hebben robuuste veranderingen aangetoond in het sociaal gedrag van knaagdieren die tijdens de ontwikkeling van de hersenen aan alcohol zijn blootgesteld, over een breed scala aan blootstellingsduur, timing, doses en leeftijden op het moment van gedragskwantificering. Eerder werk van dit laboratorium heeft betrouwbare veranderingen geïdentificeerd in specifieke vormen van sociale interactie na matige prenatale alcoholblootstelling (PAE) bij de rat die tot ver in de volwassenheid aanhouden, inclusief verhoogd worstelen en verminderd onderzoek. Deze gedragsveranderingen zijn nuttig gebleken bij het identificeren van neurale circuits die zijn gewijzigd door matige PAE1, en kunnen belangrijk zijn voor het vorderen naar een meer volledige begrip van de neurale basis van PAE-gerelateerde veranderingen in sociaal gedrag. Dit artikel beschrijft procedures voor het uitvoeren van matige PAE waarbij rattendoders vrijwillig ethanol of saccharine (controle) gedurende de zwangerschap consumeren, en meting van sociaal gedrag bij volwassen nakomelingen.

In de loop van vele fokken rondes vrouwelijke ratten in de ethanol voorwaarde consequent drinken een gemiddelde van ongeveer 2,1 g / kg ethanol per 4 uur drinken sessie. Rat dammen verbruiken ongeveer de helft van de totale vier uur gedurende de eerste 15 tot 30 minuten na de introductie van het drinkwater buizen, waardoor een piek maternale serum ethanol concentratie van ongeveer 60 mg / dl, gemeten bij 45 min tijdstip. Over de resterende 3,5 uur van het drinkwater periode te blijven tot 5% ethanol consumeren een lager...

Het doel van het hier gepresenteerde protocol is om procedures te beschrijven om ratten bloot te stellen aan matige niveaus van alcohol tijdens de prenatale hersenontwikkeling en om de resulterende veranderingen in sociaal gedrag tijdens de volwassenheid te kwantificeren.

Matige Prenatale blootstelling aan alcohol en kwantificering van sociaal gedrag bij volwassen ratten

Alterations in social behavior are among the major negative consequences observed in children with Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs). Several ...

Matige prenatale blootstelling aan alcohol en kwantificering van sociaal gedrag bij volwassen ratten. Deze video beschrijft een paradigma van prenatale blootstelling aan alcohol, gevolgd door de kwantificering van sociaal gedrag op volwassen leeftijd. Alle in deze video beschreven procedures zijn goedgekeurd door de Institutional Animal Care and Use Committee van het Health Sciences Center en de hoofdcampus van de University of New Mexico. Begin met het verkrijgen van volwassen vrouwelijke ratten van zes tot zeven weken oud met een gemiddeld gewicht van 125 tot 150 gram en bewezen mannelijke rattenfokkers.Meestal op 12 weken oude leeftijd; geef de dieren ten minste één week de tijd om te wennen aan hun nieuwe huisvestingsomgeving. In totaal omvat het tijdspad voor prenatale alcoholblootstelling een pre-blootstellingsperiode van twee weken, een fokperiode waarin de dieren geen toegang hebben tot alcohol, en de prenatale blootstellingsperiode, die gedurende de gehele dracht plaatsvindt. De details van elke fase zijn als volgt.Om de drinkniveaus vóór de zwangerschap te evalueren, consumeren de vrouwelijke ratten gedurende een periode van twee weken vrijwillig saccharinewater met staps

moderate-prenatal-alcohol-exposure-quantification-social-behavior

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

Om de moleculaire mechanismen van de ethanol-geïnduceerde ontwikkelingsschade begrijpen, hebben we een zebravis model van ethanol blootstelling en het verkennen van de fysieke, cellulaire en genetische veranderingen die optreden na blootstelling aan...

Het beoordelen van Teratogene Veranderingen in een zebravis model van foetale blootstelling aan alcohol

De experimentele ontwerpen voorgesteld hier richten op het bestuderen van de effecten van blootstelling aan alcohol in apoptose en de toepassing van neurotrophic peptide tijdens de zwangerschap in de foetale hersenen. Een gedetailleerde beschrijving van de kweek tot de verzameling van foetale hersenen beschreven. Technieken voor de bepaling van apoptose nader omschreven.

Experimentele methoden voor het testen van de effecten van Neurotrophic Peptide, ADNF-9, Tegen Alcohol-geïnduceerde apoptose tijdens de zwangerschap in C57BL / 6 muizen

We tonen de bouw van alcohol damp kamers met behulp van gemakkelijk beschikbare materialen die tegelijk huisvesten 6 muis kooien. We gebruik ervan verder te beschrijven in een muismodel van foetale blootstelling aan alcohol gelijk aan alle 3 trimesters van de zwangerschap bij de mens. Dit paradigma bloot dieren tijdens de dracht en postnatale dagen 1-12.

Bouw van Vapor Chambers gebruikt om muizen bloot te stellen aan alcohol tijdens het equivalent van alle drie trimesters van Menselijke Ontwikkeling

Cardiovasculaire oefening en het stimuleren van ervaringen in een complexe omgeving hebben positieve voordelen op meerdere maatregelen van neuroplasticiteit in de knaagdieren hersenen. Dit artikel zal de implementatie van deze interventies te bespreken als een "superintervention" die wiel draait en ecologische complexiteit combineert en zal de beperkingen van deze interventies aan te pakken.

Wiel Running and Environmental Complexiteit als een therapeutische interventie in een diermodel van FASD

Trace eyeblink klassieke conditionering (ECC) werd gebruikt om te beoordelen hippocampal-afhankelijke associative leren bij volwassen ratten die waren toegediend een hoge concentratie (11,9% v/v) van alcohol tijdens de vroege ontwikkeling van de neonatale hersenen. In het algemeen, zijn ECC procedures diagnostische hulpmiddelen voor het opsporen van hersenen dysfunctie over vele psychologische en biomedische instellingen voor geluid.

Het gebruik van Trace Eyeblink klassieke conditionering te beoordelen Hippocampal dysfunctie in een Rat Model van Fetal Alcohol Spectrum Disorders

Dit werk beschrijft een protocol om ethanolniveaus in een embryo van zebravissen te kwantificeren met behulp van hoofdruimtegaschromatografie van de juiste blootstellingsmethoden voor embryoverwerking en ethanolanalyse.

Kwantificering van ethanolniveaus in zebravisembryo's met behulp van head space gaschromatografie

Hier wordt een protocol gepresenteerd voor het 2BC/CIE-model van alcoholverslaving bij muizen om alcoholgebruiksstoornis te bestuderen.

Chronische intermitterende blootstelling aan ethanoldamp gekoppeld aan keuze uit twee flessen om alcoholgebruiksstoornis te modelleren

Het doel van het huidige protocol is om de stappen te schetsen die nodig zijn om een sociale voorkeurstest voor volwassen zebravissen op te zetten en te gebruiken en aan te tonen dat deze kan worden gebruikt om door ethanol geïnduceerde sociale defecten te karakteriseren.

Modellering van foetale alcoholspectrumstoornissen bij zebravissen om de impact van een ongunstige embryonale omgeving op het sociale gedrag van volwassenen te karakteriseren

Dit protocol beschrijft een standaard home cage drinkparadijs met twee flessen met intermitterende toegang om alcoholconsumptie bij ratten te modelleren. Daarnaast biedt het stapsgewijze instructies om het standaardprotocol aan te vullen met een doe-het-zelf likke-detectiesysteem dat microstructurele analyse van drinkgedrag mogelijk maakt.

Modellering van alcoholconsumptie bij knaagdieren met behulp van drinken in een thuiscamer met een keuze uit twee flessen en microstructurele analyse

Een procedure om de capaciteit van een alcohol geassocieerde context milieustudie leiden tot de verlenging van alcohol-zoekend gedrag bij ratten beschreven.

Een procedure om-Context geïnduceerde Vernieuwing Observeer van Pavlov-geconditioneerde Alcohol-zoekend gedrag bij ratten

Leer hoe je matige prenatale alcoholblootstelling bij ratten kwantificeert en het sociaal gedrag in volwassenheid analyseert. Deze methode helpt onderzoekers de neurologische effecten van prenatale ontwikkeling te begrijpen.

Matige Prenatale blootstelling aan alcohol en kwantificering van sociaal gedrag bij volwassen ratten

Meer video's verkennen